Fabian Poma Yenny

Moreno Cisneros Karen

Paredes Narvez Tefilo
Polo Cabrera Estefani
201
Prod!""in
re"ombinante del
"om#!esto
anti"an"er$%eno
&anma"ant'al en E(
"oli

I. )nte"edentes*
En el cncer la primera fase comienza cuando estos agentes actan sobre la clula alterando su material
gentico (mutacin). La fase de promocin se da cuando las clulas iniciadas actan de nuevo y de
forma repetida los agentes carcingenos, la multiplicacin celular comienza a ser ms rpida y la
probabilidad de ue se produzcan nuevas mutaciones aumenta. !or ltimo, las clulas iniciadas y
promocionadas sufren nuevas mutaciones. "ada vez se #acen ms anmalas en su crecimiento y
comportamiento. El noni es consumido en pa$ses asiticos y polinesios, se #an e%aminado los enfoues
sistemticos sobre la capacidad supresora del cncer de damnacant#al en la tumorignesis colorrectal.
Los productos naturales y #erbarios #an sido utilizados por siglos, a travs del mundo, en todas las
culturas. La comunidad cient$fica #a comenzado a mostrar cada vez ms inters en estos productos, en
cuanto los beneficios se #acen ms conocidos. &oni comenz a captar el inters de los investigadores
alrededor del mundo en el siglo actual, y uno por uno, los estudios #an revelado las maravillosas
cualidades de la fruta &oni.
El 'r. (alp# )einic*e y +la !alu estn traba,ando en la e%traccin y la estructura de la !ro%eronina y la
-eronina. La 'ra. +nne )irazuni .im esta continuando un traba,o en el &oni y los efectos en las
llamadas clulas cancerosas y pulmonares Le/is.
El 'ra. 0ian 1in 2ong esta traba,ando en la primera cl$nica de prueba #umana ue utiliza el ,ugo &oni
desde la 3niversidad de (ocaford en 4llinois. 5e estn #aciendo estudios en los efectos uimo6
preventivos del ,ugo &oni en fumadores.
El 'r. 7ugisa/a en la 3niversidad de )a/ai #a investigado los efectos del ,ugo &oni y de
medicamentos para uimioterapia en las clulas cancerosas del sarcoma l$nea 89:.
La 3niversidad de ;rig#am 1oung esta investigando espec$ficamente las enzimas restrictivas "<-644.
"omo resultado de esta investigacin, estos individuos #an descubierto la #abilidad del &oni de
restringir las enzimas "<-644 sin interrumpir el funcionamiento de las enzimas "<-64.
Los cient$ficos tambin estn investigando las propiedades del =ugo de &oni contra bacterias, #ongos y
parsitos. El 'r. )o en la 3niversidad de (utgers esta #aciendo estudios en los novedosos componentes
descubiertos en el &oni. 5e estn #aciendo investigaciones en las potentes propiedades antio%idantes del
&oni. Los investigadores cient$ficos estn estudiando las propiedades to%icolgicas, allerginicitas y
genot%icas del &oni.
&r( +al#' ,eini"-e Keronina y re%enera"in de las ".l!las
"omo investigador en )a/ai, el 'r. (alp# )einic*e descubri los maravillosos beneficios de la fruta
&oni y se propuso encontrar el ingrediente farmacutico activo del &oni. El 'r. )einic*e #ab$a
estudiado por >? a@os los efectos del alcaloide ue l descubri y #ab$a llamado %eronina. La %eronina
#%( 2
es un alcaloide relativamente peue@o ue fisiolgicamente es muy activo e importante para la funcin
adecuada de todas las clulas del cuerpo.
En este estudio, el 'r. )einic*e descubri ue el ,ugo del &oni contiene cantidades apreciables del
precursor de la %eronina, el cual l nombr Apro6%eroninaA. La pro6%eronina libera pura %eronina en los
intestinos al ponerse en contacto con una enzima particular tambin encontrada en el ,ugo de &oni. La
teor$a del 'r. )einic*e es ue, cuando la %eronina es liberada, acta al nivel molecular para reparar
clulas da@adas. El 'r. )einic*e establece ue la funcin primaria de la %eronina es la de regular la
rigidez y forma de prote$nas espec$ficas. 'ebido a ue estas prote$nas tiene diferentes funciones en las
clulas, esto e%plica como la administracin del ,ugo del &oni causa un incre$ble amplio alcance de
respuestas fisiolgicas.
A+lgunos de los problemas ue el tomar ,ugo de &oni puede ayudar favorablemente sonB presin alta,
clicos menstruales, artritis, lceras gstricas, torceduras, depresin mental, mala digestin, #eridas,
arterioesclerosis, problemas con vlvulas sangu$neas, senectud, adiccin a las drogas, alivio de dolores y
muc#os ms. +unue esta lista pareciera #aber salido de una #o,a arrancada de un manual de un #ombre
via,ero de medicina, es probablemente conservadora.A 'r. )einic*e
)"tividad anti"an"er$%ena del Noni /Morinda "itrifolia0 en el "ar"inoma intra#eritoneal 1e2is
1!n% im#lantado en ratones sin%.ni"os( )(,iraz!mi3 E( F!r!sa2a3 4(C( C'o! 5 Y( ,o-ama3
Pro"( 6est(
!#armacol. 5oc. CDB 8>?68>E (8FF>).
Este es un estudio muy significativo #ec#o por un euipo de investigadores de la 3niversidad de )a/ai,
liderizado por +nnie )irazumi. La 5ra. )irazumi se interes en el estudio de la fruta &oni por sus
e%periencias anteriores con sus incre$bles cualidades. 5u padre ayud a un buen amigo con el ,ugo de
&oni y ms tarde, +nnie administr el ,ugo puro de &oni a un perrito ue se estaba muriendo. El
perrrito se recuper milagrosamente y +nnie decidi averiguar ms sobre esta incre$ble fruta. El estudio
#ec#o por la 5ra. )irazumi y sus colegas fue llevado a cabo en ratones de laboratorio (espec$ficamente
ratones "?D;LE), identificados como bien receptivos a las clulas inyectadas del carcinoma Le/is
Lung. Los ratones fueron inyectados con las clulas activas del carcinoma Le/is Lung ("LL). 5in
tratamiento, los ratones murieron entre F y 8G d$as despus de la inyeccin del crecimiento del tumor.
3na porcin de los ratones inyectados fueron tratados con el ,ugo de &oni en ? tratamientos diarios
separados. El ,ugo de &oni demostr un aumento significativo en la duracin de vida de los ratones en
el e%perimento (de 8:?H68GCH), con un total de F de los GG ratones sobreviviendo por ms de ?: d$as.
El e%perimento se repiti en un lote diferente de ratones, obteniendo resultados similares. El euipo de
investigacin concluy ue el ,ugo de &oniB Aparece actuar indirectamente al aumentar el s istme@a
inmune involucrando macrofages yIo linfocitos.A
7nd!""in de fenoti#os normales en ".l!las transformadas +)4 #or &amna"ant'al Morinda
Citrifolia(
J. )iramaysu, 0. 4moto, J..oyano, ..3meza/a cartas sobre el "ancer DC (8FFC) 8E868EE
En este estudio, un euipo de ,aponeses estudi los efectos de ms de ?:: e%tractos de plantas tropicales
#%( 8
en la clula .6(+56&( (un precursor de ciertas clases de cancer). El compuesto damnacant#al,
encontrado en la 0orinda "itrifolia (&oni) result ser un in#ibidor de la funcin (+5. El estudioB las
clulas (+5 fueron plantadas en FE platos e incubadas a CC grados cent$grados por G> #oras.
5e le agreg el e%tracto de la planta &oni y se e%amin la morfolog$a de la clula cada d$a por ? d$as. La
funcin (+5 fue in#ibida por el e%tracto de la planta inyectado. 5e #a encontrado ue este mismo
compuesto #a in#ibido la activacin del temprano6ant$geno del virus de Epstein6;arr. El e%tracto de la
0orinda "itrifolia result ser el ms efectivo in#ibidor de la funcin (+5 entre los ?:: e%tractos
probados.
&atos y "ifras del "n"er*
El cncer es una de las principales causas de muerte en todo el mundoK en G::9 caus D,E millones
de defunciones (apro%imadamente un 8CH del total).
8
Los ue ms muertes causan cada a@o son los cnceres de pulmn, estmago, #$gado, colon y mama.
Los tipos de cncer ms frecuentes son diferentes en el #ombre y en la mu,er.
5e prev ue las muertes por cncer sigan aumentando en todo el mundo y alcancen la cifra de 8C,8
millones en G:C:.
'amnacant#al, un compuesto de antrauinona, es aislado de las ra$ces de 0orinda citrifolia L. (noni),
ue se #a utilizado para la terapia tradicional en varias enfermedades crnicas, incluyendo el
cncer. 'amnacant#al e%#ibe la detencin del crecimiento celular, as$ como la caspasa induccin de
actividad en clulas de cncer colorrectal.
7nforma"in 4obre Prod!"to /&asatinib0
Forma 5lido naran,a6amarillo
9b:etivo #rin"i#al p?E
lc*
autofosforilacin
9b:etivo #rin"i#al 7C;0 8D n0
9b:etivo se"!ndario p?E
lc*
fosforilacin de pptido e%geno
Masa molar G9G.C
Prote%er de la l!z 5i
Envasado en atmsfera de %as inerte 5i
+eversible 5i
P!reza L F?H por )!L"
4ol!bilidad en a%!a '05<
Frm!la <!$mi"o " 8 E ) 8 : < ?
#%(
N=mero del C)4 >DD69>6F
II. Problema*
M"mo combatir el cncer colorrectal con damnacant#al recombinanteN
5acar al mercado un medicamento ue contrarreste las clulas cancer$genas ubicadas en el
colorrectal, debido a ue la incidencia del cncer colorrectal cada vez es mayor y los diversos
tratamientos ue e%isten no solo da@an las clulas cancer$genas sino tambin las clulas normales
por lo ue se uiere dar un tratamiento espec$fico para combatir este tipo de cncer. 5e comprob el
damnacant#al en ratas por el consumo directo del fruto y del e%tracto de ra$z del noni (morinda
citrifolia) y se pudo observar un descenso en la mortalidad de la poblacin, el noni tiene el
compuesto llamado 'amnacat#al en mayor concentracin en la ra$z comparndolo con el producto
'asatinib ambos contienen el p*?E tirosina cinasa in#ibidor aunue en mayor concentracin y se #a
determinado ue la efectividad del compuesto e%traido de 0orinda citrifolia es mayor.
III. >!stifi"a"in e im#ortan"ia*
Se ha aislado a partir del jugo natural del noni en la Universidad de Keio, en Tokio - Gijuku,
y el Instituto de Ciencias Bio!dicas en "ap#n. $os resultados indican %ue, de&ido a las
edidas del 'anacanthal, las c!lulas %ue se est(n epe)ando a trans*orarse en
c!lulas cancerosas y tienen un eta&oliso di*erente son estiuladas por las
interacciones &io%u+icas del 'anacanthal a nivel gen!tico en su interior y provoc# a
ralenti)ar la reproducci#n por divisi#n. Coo resultado, tienen la oportunidad de regresar a
proceso eta&#lico noral y prevenir la degeneraci#n ca&ios gen!ticos.

'anacanthal supervisa el proceso de di*erenciaci#n celular y no perite las divisiones
anorales. Ta&i!n apoya el tra&ajo del sistea inunol#gico, %ue producen una
cantidad adecuada de lin*ocitos B y T. ,sto es de&ido a la presencia 'anacanthal.
$os investigadores sa&en %ue 'anacanthal, antra%uinona vinculante, %ue ha sido
aislado de -oni por cient+*icos japoneses es pro&a&leente responsa&le de una gran
capacidad de -oni en la lucha contra el c(ncer. ,n .olinesia el -oni puede lidiar no s#lo
con el c(ncer, sino ta&i!n con la reducci#n de a)/car en la sangre en los dia&!ticos, en
la lucha contra las &acterias y los virus. ,l noni es capa) de neutrali)ar los venenos
ortales y to0inas, detenga todo tipo de in*ecciones y uchos (s.
#%( ;
I1. 9b:etivos*
'ar una nueva opcin de tratamiento contra el cncer, con el la produccin de 'anmacant#al
recombinante.
;uscar un me,or tratamiento ue solo afecte a las clulas cancer$genasy no a las normales.
1. ,i#tesis*
'amnacant#al, un compuesto de antrauinona, es aislado de las ra$ces de 0orinda citrifolia L.
(noni), ue se #a utilizado para la terapia tradicional en varias enfermedades crnicas, incluyendo
el cncer. En este proyecto, #emos e%aminado los enfoues sistemticos sobre la capacidad
supresor del cncer de damnacant#al en la tumorignesis colorrectal. 'amnacant#al e%#ibe la
detencin del crecimiento celular, as$ como la caspasa induccin de actividad en clulas de cncer
colorrectal. Jambin se e%aminaron varias prote$nas diana potenciales y se encontr ue la prote$na
proapopttico esteroideo gen68 anti6inflamatoria activa (&+O68) se induce. !osteriormente, #emos
encontrado ue damnacant#al tambin me,ora el factor de transcripcin ""++J I potenciador de la
prote$na de unin a (" I E;!b), ue controla la actividad &+O68 transcripcional. El bloueo de
" I E;!b por s#(&+ resultados en la reduccin de la &+O68 de e%presin, as$ como la actividad
de la caspasa en presencia de damnacant#al. Jomados en con,unto, estos resultados indican ue
damnacant#al aumenta la actividad antitumoral en clulas de cncer colorrectal #umano y ue " I
E;!b ,uega un papel en damnacant#al inducida por &+O68 de e%presin. 3n potente in#ibidor
permeable a las clulas, y reversible, y selectivo de la tirosina uinasa p?E
lck.
4n#ibe
p?E
lck
autofosforilacin (4" ?: P 8D n0) y la fosforilacin de un pptido e%geno por
p?E
lck
(4" ?: P EG: n0).
1I. Metodolo%$a de traba:o*
2. 4e"!en"ia"in del %enoma del Morinda "itrifolia
3. C!ltivar ".l!las de la ra$z de la Morinda "itrifolia en #la"as
4. )islar el %en del &anma"ant'al
5. +om#er las ".l!las ve%etales de M( "itrifolia /4oni"a"in0
6. ?tiliza las enzimas de restri""in
7. 4e manda al PC+ am#lifi"ando las se"!en"ias "ortadas
8. +e"ombina"in en #lsmido de E( "oli
#%( @
+ctividadB "onstruccin de una molcula de +'& recombinante a partir de un plsmido y un +'& e%tra@o
#%( A
#%( B
1II. +e"!rsos y #res!#!esto*
5ecuenciamiento del genoma de morinda citrifolia Q 8::: dolares en la empresa 454 Life Sciences,
1III. +eferen"ia biblio%rfi"a*
&anma"ant'al*
#%( C
7nforma"in 4obre Prod!"to /&asatinib0
Forma 5lido naran,a6amarillo
9b:etivo #rin"i#al p?E
lc*
autofosforilacin
9b:etivo #rin"i#al 7C;0 8D n0
9b:etivo se"!ndario p?E
lc*
fosforilacin de pptido e%geno
Masa molar G9G.C
Prote%er de la l!z 5i
Envasado en atmsfera de %as inerte 5i
+eversible 5i
P!reza L F?H por )!L"
4ol!bilidad en a%!a '05<
Frm!la <!$mi"o " 8 E ) 8 : < ?
N=mero del C)4 >DD69>6F
I9. Form!la"in del #roblema*
9. 9b:etivo*
'ar una nueva opcin de tratamiento contra el cncer, buscar un me,or tratamiento ue solo afecte a las
clulas con problemas y no a las normales.
9I. ,i#tesis*
5egn la pgina /eb Ralimentacin S sanaT menciona ue algunas de las investigaciones ms recientes
realizadas usando noni #an sido con la sustancia 'amnacant#al. +l buscar sustancias ue indu,eran una
estructura normal en clulas .6ras 6 &(. anormales o clulas precancerosas, cuatro cient$ficos
,aponeses encontraron el 'amnacant#al ue contiene el noni. 5us e%perimentos se centraron en el
aislamiento de clulas (+5, ue son precursoras de muc#os crecimientos malignos, luego inyectaron en
#%( 10
las clulas 'amnacant#al. Los investigadores observaron ue la inyeccin de 'amnacant#al in#ibi
considerablemente la reproduccin de las clulas ras. 'e entre ?:: e%tractos vegetales, el de 0.
citrofolia conten$a los compuestos ms eficaces contra las clulas (+5. Los investigadores llegaron a la
conclusin de ue el 'amnacant#al es un nuevo in#ibidor de la funcin ras. 3n estudio posterior
realizado en la 3niversidad de )a/i demostr resultados positivos similares relacionados con el noni y
su uso como agente anticarcingeno.
9II. >!stifi"a"in*
'amnacant#al, un compuesto de antrauinona, es aislado de las ra$ces de 0orinda citrifolia L. (noni),
ue se #a utilizado para la terapia tradicional en varias enfermedades crnicas, incluyendo el cncer. +
pesar de noni #a sido consumido durante muc#o tiempo en los pa$ses asiticos y polinesios, los
mecanismos moleculares por los cuales e,erce varios beneficios estn empezando a surgir. En este
informe, #emos e%aminado los enfoues sistemticos sobre la capacidad supresor del cncer de
damnacant#al en la tumor gnesis colorrectal. 'amnacant#al e%#ibe la detencin del crecimiento
celular, as$ como la caspasa induccin de actividad en clulas de cncer colorrectal. Jambin se
e%aminaron varias prote$nas diana potenciales y se encontr ue la prote$na proapopttico esteroideo
gen 6 8 anti6 inflamatoria activa ( &+O6 8 ) se induce . !osteriormente, #emos encontrado ue
damnacant#al tambin me,ora el factor de transcripcin ""++J I potenciador de la prote$na de unin a
(" I E;!b), ue controla la actividad &+O 6 8 transcripcional. El bloueo de " I E;!b por s#(&+
resultados en la reduccin de la &+O 6 8 de e%presin, as$ como la actividad de la caspasa en presencia
de damnacant#al. Jomados en con,unto, estos resultados indican ue damnacant#al aumenta la actividad
antitumoral en clulas de cncer colorrectal #umano y ue " I E;!b ,uega un papel en damnacant#al
inducida por &+O 6 8 de e%presin.
#%( 11
'amnacant#al in#ibe la proliferacin celular e induce la actividad de la caspasa en clulas de cncer
colorrectal. (+) )"J 688E (izuierda) y el 52>9: (panel derec#), las clulas fueron tratadas con '05<
o varias concentraciones de la presa durante > d$as. El crecimiento celular se midi utilizando el
"ellJiter FE 3na solucin acuosa Ensayo de proliferacin celular.
Los valores se e%presan como media U 5.'. de cuatro repeticiones. ! V :,:?, ! V :,:8, p V :,::8 frente
a las clulas tratadas con '05<. (;) +nlisis de citometr$a de flu,o de clulas '05< 6 presa o tratados
con )"J 6 88E. "elulares fueron tratados con '05< o 8, 8: y ?: 0 de la presa por DG # y se analiz
para la progresin del ciclo celular como se describe en 0ateriales y 0todos. 5IO8 y OGIO8 relaciones
se e%presan como media U 5.'. de tres repeticiones. ! V :,:?, ! V :,:8 vs clulas tratadas con '05<.
(") la actividad de caspasa CID enzimtica se midi como se describe en 0ateriales y 0todos. "lulas
)"J 6 88E se trataron con '05< o 8: 0 de la presa durante G> #. El e,e y representa veces de
induccin sobre las clulas tratadas con '05<. Los valores se e%presan como media U 5.'. de tres
repeticiones. ! V :,:? vs clulas tratadas con '05<.
La actividad antitumoral de la presa. (+) ensayo de clonacin. "lulas )"J 6 88E se trataron con
'05< o 8, 8: y ?: m0 de presa durante G semanas, y las colonias celulares se ti@eron y se contaron.
Los datos representan la media U 5.'. de tres repeticiones. ! V :,:?, ! V :,:8 vs clulas tratadas con
'05<. (;) Ensayo de clonacin agar suave. "lulas )"J 6 88E se cultivaron en :,> H de agar blando
en presencia de '05< o 8 , 8: o ?: 0 de la presa por G semanas , y luego las colonias de clulas se
ti@eron y se contaron . Los valores se e%presan como media U 5.'. de tres repeticiones. ! V :,:8, !
V :,::8 frente a las clulas tratadas con '05<. (") ensayo de migracin celular. "lulas )"J 6 88E se
sembraron, rasgu@ados y tratados con '05< o 8, 8: y ?: 0 de la presa. Jama@o de la #erida se
monitoriz a : y >9 # por la observacin ba,o un microscopio ptico (panel de la izuierda) a 8:: W
magnificacin. El grado de migracin celular se cuantific por la relacin de la distancia de separacin a
las >9 # para ue a las : # (panel derec#o) . Los valores se e%presan como media U 5.'. de tres
repeticiones. ! V :,:8, ! V :,::8 frente a las clulas tratadas con '05<.
#%( 12
4dentificacin de la regin promotora responsable de !resa inducida &+O6 8 transactivacin. (+) "ada
constructo indicado de la &+O 6 8 promotor y el vector p(L 6 nula fue transfectadas transitoriamente en
clulas )"J 6 88E y luego se trat con '05< o 8: 0 de la presa por G> #. El promotor de la actividad
se midi como una relacin de luciferasa de lucirnaga se@al de se@al de luciferasa I renilla. Xeces de
induccin se refiere a la proporcin de la luciferasa (L3") la actividad de las clulas de la presa tratados
en comparacin con las clulas tratadas con '05< de cada construccin. Los resultados son la media U
5.'. de tres repeticiones. ! V :,:?, ! V :,:8, p V :,::8 frente a las clulas tratadas con '05<. (;)
clulas )"J 6 88E se transfectarn con cada una deleccin interna de la construccin de la &+O 6 8
promotor (!&+O 686 8CCI >8) y despus se trataron con 8: m0 de la presa por G> #. El e,e % muestra la
unidad de luciferasa relativa de cada construccin. (L3, la unidad relativa de luciferasa. (") La &+O 6
8 promotor (!&+O 686 8CCI >8) fue co 6transfectadas con el vector de e%presin indicado como se
describe en 0ateriales y 0todos y despus se trat con 8: 0 de la presa por G> #. El e,e % muestra la
induccin veces ms de vector vac$o. ! V :,:?, ! V :,:8, ! V :,::8 frente a control las clulas tratados
con el vector. (') ensayo de inmunoprecipitacin de cromatina se realiz usando un comple,o de +'& 6
prote$na tratada con G: 0 de la presa por G> # como se describe en 0ateriales y 0todos. La secuencia
de la regin &+O 6 8 promotor ( 68C8 I 8CD ) fue amplificado por los pares de cebadores de !"( como
se describe anteriormente Y 8F Z . La entrada representa los productos de !"( obtenidos a partir de 8 H
al$cuotas de los precipitados ue escapan inmunoprecipitacin de cromatina
'amnacant#al induce &+O68 en las clulas )"J688E. (+) )"J688E (izuierda) y el 52>9: (panel
derec#o), las clulas fueron tratadas con '05< o :,8, 8 y 8: 0 de la presa durante G> #, y 2estern blot
se realiz de &+O68, ciclina '8, pG8, p?C, !+(! y actina. (;) Las clulas )"J688E fueron tratados con
8: m0 de presa. + los tiempos indicados, los lisados de clulas fueron cosec#adas para llevar a cabo
anlisis de transferencia 2estern para &+O68 y actina. (") las clulas LoXo se trataron con '05< o 8:
0 de la presa por >9 #, y de 2estern blot se llev a cabo para &+O68 y actina.
#%( 18
E(. y !." mediato " I E;!b y damnacant#al inducida por la e%presin &+O6 8. (+ ) Las clulas
)"J 6 88E se trataron con '05< , :,8, 8 , 8: y G: 0 de la presa durante G> # , y 2estern blot se realiz
para " I E;!b actina y como se describe en 0ateriales y mtodos. ( ; ) clulas )"J 6 88E se trataron
previamente con diferentes in#ibidores de la uinasa ( 3:8GE , ? micrasK (<C89GG: , G,? micrasK
+O>F: , ?: micrasK 5;G:C?9: , 8? micrasK 5! E::8G? , C: mu 0 ) durante C: min y se trataron con G:
m0 de presa durante G> # . 2estern blot se realiz para " I E;!b, &+O 6 8 y actina.
(") La &+O 6 8 promotor (!&+O 686 8CCI >8 ) y el vector p(L 6 nula se transfectaron durante G> # ,
como se describe en 0ateriales y mtodos, pretratados con 3:8GE ( 8 o ? m0 ) y despus se trataron
con '05< o G: 0 de la presa durante G> # . El e,e y muestra la induccin veces sobre clulas tratadas
con '05<. [ ! V :,:? frente a la presa G: m0 clulas tratadas. (') las clulas )"J 6 88E se
transfectaron con el vector vac$o pc'&+ C.8 , E(.G tipo salva,e o un E(.G dominante negativo tal
como se describe en 0ateriales y mtodos , y se trat con '05< o 8: 0 de la presa por G> # . 2estern
blot se realiz para la bandera, " I E;!b , &+O 6 8 y actina .
'erribo de " I E;!b altera damnacant#al inducida &+O68 de e%presin y la apoptosis. (+) las clulas
)"J688E se transfectaron con el control o " I s#(&+ E;!b durante >9 # y despus se trataron con
'05< o G: 0 de la presa por G> #. 5e realiz un anlisis 2estern para " I E;!b, &+O68, y la actina.
(;) clulas )"J688E se transfectaron con el control o " I s#(&+ E;!b durante >9 # y despus se
trataron con '05< o G: 0 de la presa por G> #. La actividad de caspasa CID enzimtica se midi como
#%( 1
se describe en 0ateriales y mtodos. Los valores se e%presan como media U desviacin estndar de tres
rplicas. [[[ ! V:.::8 clulas de tratamiento 'am s#(&+ transfeccin de control frente. (")
0ecanismo propuesto por el cual la presa de &+O68 induce la transcripcin en clulas de cncer
colorrectal #umano. !resa activa " I E;!b travs de la v$a E(. uinasa. +umento de e%presin de " I
E;!b aumenta la afinidad de unin de " I E;!b en la &+O68 promotor y activa la transcripcin de la
&+O68 gen. 5obre regulacin de los resultados &+O68 de genes en un aumento de la apoptosis en
clulas de cncer colorrectal.
9III. Metodolo%$a de traba:o*
9I1. +eferen"ias biblio%rfi"as*
#ttpsBII///.aecc.esI5<;(EEL"+&"E(IEL"+&"E(I!aginasI<rigendelaenfermedad.asp%
#ttpBII///.seom.orgIenIprensaIel6cancer6en6espanyacomI8:>:896el6cancer6en6espana6G:8C
#ttpBII///.cancer.orgIacsIgroupsIcontentI\epidemiologysurveilanceIdocumentsIdocumentIacspc6
:CEDFG.pdf
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