Sunteți pe pagina 1din 1

Spectroscopia UV-Vis SB 4

Toate solutiile macromoleculare absorb radiatiile electromagnetice din diferite domenii spectrale,
intr-o masura mai mare sau mai mica. In unele situatii absorbtia este mai intense la anumite lungimi de
unda, devenind selectiva.
Legea Lambert Beer exprima relatia cantitativa dintre:
- intensitatea S a lungimii emergente;
- intensitatea S
0
a lungimii incidente;
- drumul x parcurs prin substanta absorbanta;
- concentratia a substantei;
- coeficientul molar de extinctie Log


= ()cx

Spectrul de absorbtie curba care arata dependent lui A (absorb) in functie de lungimea de unda x
Forma lui depinde de:
- natura substantei absorbante;
- temperature;
-pH;
- natura solventului;

Spectrul UV-Vis
Absorbtia lungimii din domeniul vizibil si ultraviolet poate fi studiata folosind un aranjament
experimental simplu.

(desen)

In general se foloseste un spectroscop dublu fascicule, care scade automat contributia solventului
folosit la prepararea solutiei si alte artefacte experimentale.

Solutia de hemoglobina este un exemplu de spectru de absorbtie UV-Vis
Spectroscopia UV-Vis aplicata moleculelor biologice
Spectrele de absorbtie ale macromoleculelor permit identificarea si dozarea lor. De asemenea, ele
permit sa se traga concluzii importante referitoare la natura legaturilor dintre atomi in macromoleculele
si a gruparilor organice libere
- legaturile peptidice O=C-NH constituie cromoforii proteinelor absorband undele
electromagnetice din domeniul ultraviolet, benzile de absorbtie au maxime situate in regiunea spectral;
- rezidurile aromatice ale aminoacizilor poseda benzi de absorbtie in domeniul ultraviolet, cu maxime
in jurul lungimii de unda =280 mm, ceea ce explica absorbtia marcata a proteinelor la aceasta lungime
de unda.