Sunteți pe pagina 1din 74

G E N E T I C A ECOLOGIC

Suport de curs

Unitatea de invatare 1

INTRODUCERE

Genetica ramura cea mai dinamic a biologiei, nscut n secolul XIX prin magistrala
oper a lui Johan Gregor Mendel (Versuche ueber Pflanzen Hybriden publicat n 1865), a
aprut ca tiin la nceputul secolului trecut (a devenit domeniu de sine stttor n anul 1900) i n
doar cteva decenii a revoluionat ntreaga biologie, explicnd geneza ntregii diversiti a lumii
organice la nivel cromosomial i cu ajutorul biochimiei la nivel molecular, ajungnd punct de reper
n biologie, medicin, agronomie etc.
Genetica, termen provenit din grecescul gennao = "a nate", este perceput drept
disciplina biologic ce se preocup cu studiul ereditii, variabilitii i determinismului caracterelor.
Ereditatea, din latinescul hereditas = "motenire", reprezint o calitate intrinsec a
sistemelor biologice din nivelul individual de organizare i integrare a materiei vii, care asigur
transmiterea nealterat, n irul de generaii, a bagajului informaional specific.
Variabilitatea, din latinescul variare = "a se schimba", reprezint calitatea sistemelor
biologice individuale, care permite schimbarea coninutului informaiei ereditare, n irul de
generaii.
Prin urmare, ereditatea i variabilitatea vizeaz comportamentul organismelor (procariote i
eucariote, vegetale i animale) sub aspectul etalrii caracterelor specifice n succesiunea de
generaii, ntr-un echilibru dinamic al stabilitii i schimbrii, care s permit att meninerea
nealterat a speciilor pe o perioad nedeterminat de timp, ct i evoluia i adaptarea lor la scara
timpului geologic. Evident, caracterele respective au un substrat, un suport material. Etalarea
coninutului informaional specific al unui caracter, presupune o succesiune de procese de nalt
precizie i finee, procese ce se constituie n determinismul caracterelor.
Determinismul caracterelor presupune, n succesiune, procesele de transcripie i
translaie, n conexiune indisolubil cu factorii mediului intern i extern, procese care duc la
etalarea potenelor ereditare (morfo-anatomice, biochimice, fiziologice, comportamentale etc.),
ntre anumite limite, procese care asigur manifestarea unui anumit fenotip.
Cu mult nainte ca oamenii s nceap s fie preocupai de mecanismele genetice ale
transferului informaiei biologice de la celul la celul, de la prini la urmai sau de la generaie la
generaie, ei au realizat selecia empiric a caracterelor, intervenind n sensul acumulrii de
beneficii pentru societatea uman (creterea calitativ i cantitativ a produciei de lapte, ou,
carne, ln, orez, bumbac, fiind doar cteva exemple). Printre primele dovezi rmase de-a lungul
timpului, sunt cele aparinnd epocii cultivatorilor de plante, a trecerii de la cules i vnat la
cultivarea plantelor. Astfel, de la populaiile din Orientul Mijlociu, au rmas documente n piatr ce
au condus la concluzia c erau relativ comune lucrrile de selecie i ameliorare la animale, ct i
polenizarea artificial. Mrturii de o deosebit profunzime despre fenomenul ereditii ne parvin i
de la civilizaia Greciei Antice, India, China, Roma Antic. A urmat apoi n Evul Mediu o perioad
de stagnare a descoperirilor n biologie.
Dupa Evul Mediu, toate acumulrile de pn atunci, combinate cu noile date furnizate de
dezvoltarea fr precedent a agriculturii, a industriei au fundamentat noua concepie tiinific,
noua poziie a omului n cadrul naturii.
Figuri proeminente pentru avntul cercetrilor biologice au fost P. Belon (1517-1564),
Conrad Gesner (1516-1565), Ulise Aldrovandi (1522-1605), Gaspar Bauhin (1550-1625) etc.. n
anul 1651, W. Harwey, a descoperit i a descris circulaia sngelui, n 1665, n premier mondial,
R. Hooke (1635-1703) descrie celula. Simultan, Antony van Leeuwenhoeck (1632-1723)
descoper i descrie multe microorganisme i spermatozoizii de om, cine i iepure, iar n 1694
R.J. Cammerarius (Cammerer) descoper i descrie sexele la plante.
n 1735, apare opera suedezului Carol Linn (1707-1778), Systema nature, oper
fundamental pentru teoreticieni i practicieni ntruct, n numai 12 pagini, oferea criterii clare de
delimitare i caracterizare a speciilor, obiectul concret de lucru pentru cei ce investigau anatomia,
fiziologia, reproducerea i comportamentul organismelor vegetale i animale.
Un punct nodal n demersurile pentru o concepie biologic modern l reprezint descrierea
nucleului celular de ctre Schneider, Schwann, Schleiden, Virchow. Mai precizm c dac
diviziunea celulei animale fusese observat n 1827, iar cea a celulei vegetale (la o alg) n 1832,
meioza a fost descris abia n 1870.
Dar, pentru o istorie a geneticii, este obligatorie prezentarea descoperirilor efectuate de Ch.
Naudin care, n anul 1859, a publicat lucrarea Nouvelles recherches sur l'hibridit dans les
vegetaux. n respectiva lucrare, Naudin sublinia aspecte importante ale transmiterii caracterelor
ereditare, i anume: uniformitatea hibrizilor din prima generaie, diversitatea lor n generaiile
urmtoare, segregarea "esenelor" (aa numete Naudin factorii ereditari), revenirea la formele
parentale etc. Naudin a lucrat cu specii ale genurilor Papaver, Primula, Datura, Nicotiana. Din
pcate, el nu a reuit s surprind i s enune legitile transmiterii caracterelor, legitile
ereditii. Acest merit i va reveni lui Mendel.

1. LEGITILE EREDITII

1.1. Experimentele lui Mendel

Pregtit de o multitudine de descoperiri, observaii i experimente, momentul naterii
geneticii ca tiin este momentul Mendel, mai precis, anul 1865, an n care opera sa Versuche
ber Pflanzenhybriden (Experiene asupra hibrizilor la plante, tradus i la noi, abia n 1945, de
A. Piescu, n Buletinul Cultivrii i Fermentrii Tutunului) a primit bun de tipar i a fost publicat
ntr-o modest revist provincial - "Revista Naturalitilor din Brnn.
Gregor Mendel (1822-1884), a experimentat pe diverse specii de plante aparinnd
genurilor Hieracium, Phaseolus i n special Pisum, atenie deosebit acordnd mazrii (Pisum
sativum).
Mendel nu a fost primul care a efectuat experimente de ncruciare, dar a fost unul dintre
primii care a fcut observaii referitoare la cte un singur caracter. Predecesorii lui au urmrit
ntregul organism, cu trsturi complexe, putnd s observe apariia similaritilor i diferenelor
dintre prini i urmai. Pe baza interpretrii matematice a rezultatele obinute, Mendel a formulat
ipoteze, a prezis i verificat transmiterea caracterelor de-a lungul generaiilor, fr a cunoate ns
mecanismele biologice implicate n acest proces.
Se cuvin dou remarci eseniale pentru a nelege ce l-a detaat pe Mendel de predecesorii
si, ajutndu-l s precizeze fr echivoc legitile ereditii (Bra, 1999). n primul rnd a ales ca
obiect de studiu o specie autogam, Pisum sativum, putnd urmri n descenden comportarea
hibrizilor i n al doilea rnd a verificat puritatea genetic a plantelor luate n studiu, timp de 3-4
generaii. Alegerea mazrii drept obiect de studiu prezint i alte avantaje, printre care: perioada
de vegetaie scurt, trsturi fenotipice distincte i contrastante, existena a numeroase soiuri ce
dau natere la hibrizi fertili.
n 1900, lucrarea lui Mendel a fost descoperit (mai degrab citit i neleas) simultan de
3 botaniti Hugo de Vries n Olanda, Carl Correns din Germania i Eric von Tschermak din Austria.
ncrucirile au fost fcute cu mare atenie. Pentru a preveni autopolenizarea, n florile
test ale plantelor mam, anterele au fost ndeprtate naintea maturrii complete a gineceului,
castrarea relativ uar reprezentnd un alt avantaj. Polenizarea artificial s-a realizat cu polen
provenit de la planta tat. Deci plantele ce au fost supuse castrrii i polenizrii artificiale,
reprezint generaia parental, iar boabele aprute pe ele n urma dublei fecundri prin care a luat
natere embrionul (diploid) i endospermul (triploid), reprezint generaia filial, hibrid. n cazul
urmririi trsturilor precum culoarea tegumentului boabelor, clasificrile pot fi fcute imediat, n
timp ce caractere precum nlimea tulpinii pot fi analizate abia dup plantarea seminelor i
ajungerea la maturitate a indivizilor aparinnd generaiei filiale.
Au fost efectuate experimente de hibridare pe parcursul a mai multor generaii precum i
retroncruciri ntre hibrizi i plante de tip parental, pure din punct de vedere genetic. Oservaiile
lui Mendel arat clar c temperatura mediului nconjurtor, umiditatea solului i cea atmosferic
influeneaz creterea plantelor, dar c principalul factor determinator n exprimarea caracterelor
rmne ereditatea.

1.1.1. Monohibridarea

Monohibridarea reprezint procesul de ncruciare (hibridare) a doi indivizi aparinnd
aceleiai specii, puri din punct de vedere genotipic (homozigoi), deosebii ntre ei prin
manifestarea fenotipic a unui singur caracter.
J.Gr. Mendel a utilizat, pentru monohibridare, dou soiuri de mazre, pure din punct de
vedere genotipic, ce prezentau caractere stabile i care se deosebeau prin culoarea tegumentului
la boabe: unul cu boabe de culoare galben i altul cu boabe de culoare verde. n prima generaie
hibrid, notat cu F
1
(adic prima generaie filial - n latin filius, filia = fiu, fiic), a obinut numai
plante cu boabe de o singur culoare - galben, n experimentul de acest tip.
Plantele ce reprezint generaia parental (desemnat n tabele i grafice cu simbolul P),
sunt cele ce au fost supuse castrrii i polenizrii artificiale, iar boabele aprute pe ele reprezint
generaia filial, hibrid (desemnat prin F
1
).
O prim constatare a lui Mendel a fost c toi hibrizii din F
1
(prima generaie) aveau o
singur culoare a boabelor. Experimentnd pe aceeai specie cu alt caracter, de pild forma
boabelor (netede i zbrcite), a constatat c n F
1
toi indivizii aveau boabe netede. Pe baza
acestui experiment, Mendel a enunat principiul uniformitii hibrizilor n F
1
.
Perpetund respectivii hibrizi prin autofecundare, n de-a doua generaie, Mendel a
constatat reapariia fenotipurilor parentale (reapariia expresiilor fenotipice etalate de cei doi
prini), n raport de aproximativ 3:1. n consecin, a fost enunat cel de-al doilea principiu -
segregarea hibrizilor n F
2.
Mendel a precizat c n F
1
se manifest fenomenul de dominan i recesivitate, n sensul
c este etalat doar caracterul dominant, cel recesiv rmnnd ascuns.
Prin simboluri, experimentul efectuat de Mendel poate fi reprezentat astfel:

Prinii Galben() x Verde() Hibridare
Gameii () x ()
F
1
Galben() Autofecundare
Gameii () i ()
() i ()
F
2
1 galben ()+2 galben ()+1 verde()
Segregare
fenotipic
3:1
Segregare
genotipic
1:2:1
Tab. 1. Dinamica fenotipurilor i genotipurilor n monohibridare

Prin bulinele negre s-a redat factorul ereditar dominant (care determin culoarea galben a
bobului), iar prin bulinele albe s-a redat factorul ereditar recesiv (care determin culoarea verde a
boabelor)
Mendel a ncercat s interpreteze i s-i explice rezultatele obinute. ntruct, la acea
vreme, nu se cunotea nimic despre cromosomi i gene (substratul material al informaiei
ereditare), Mendel a folosit termenul de factori ereditari i a presupus, cu o extraordinar intuiie,
c n fiecare celul a organismului factorul ereditar determinant al unui caracter se afl n doz
dubl, n timp ce n celulele sexuale se afl n doz simpl.
Schematic:

Prinii AA X aa
Gameii A X a
F
1
Aa Autofecundare sau hibridare de tipul frate x
sor
Gamei
Produi n F
1
A i a
A i a
F
2
AA 2Aa aa
Segregare
genotipic
1 2 1
Segregare
fenotipic
3:1
Tab. 2. Dinamica factorilor ereditari n gamei i n hibrizi

Prin A se desemneaz factorul ereditar dominant i prin a factorul ereditar recesiv.

Apoi Mendel a precizat c, dup fecundare i formarea zigotului, factorii ereditari nu se
contopesc, ci doar se altur. n consecin, cnd se formeaz din nou gameii, ei se vor despri,
fiecare trecnd ntr-un gamet. Astfel, conchide Mendel, gameii sunt puri din punct de vedere
genetic. Aceasta este considerat prima lege elaborat de Mendel, supranumit: LEGEA
PURITII GAMEILOR.


1.1.2. Dihibridarea

Mendel a recurs i la ncruciarea de indivizi care se deosebeau prin expresia fenotipic a
dou caractere - culoarea i respectiv forma boabelor. El a ncruciat mazre cu boabe netede i
galbene cu mazre cu boabe zbrcite i verzi. n F
1
, ca i la monohibridare, toi indivizii au fost
uniformi, avnd boabe netede i galbene. S-au manifestat fenomenele de dominan i
recesivitate. n F
2
a avut loc segregarea independent a caracterelor, fiind posibil recombinarea
acestora i apariia de noi fenotipuri. Att forma ct i culoarea boabelor a segregat n raport de
3:1. n plus, au aprut i noi combinaii de caractere- boabe netede i verzi, pe de o parte, i boabe
zbrcite i galbene, pe de alt parte. Iat cum poate fi redat, schematic, procesul:
Prin A i B, s-au redat factorii ereditari dominani (determinani ai culorii galbene i ai
formei netede a bobului), iar prin a i b, s-au redat factorii ereditari recesivi (determinani ai culorii
verzi i ai formei zbrcite a bobului).
Examinnd tabelul, constatm c pe diagonala stnga sus - dreapta jos sunt plasai numai
indivizi homozigoi (dominani n ambele caractere, recesivi n ambele caractere sau dominani ntr-
un caracter i recesivi n cellalt).
Prinii AABB X aabb
Gameii AB X ab
F
1
AaBb Autofecundare sau hibridare de tipul frate x
sor
Gameii
hibrizilor din
F
1

AB Ab aB ab
AB AABB AABb AaBB AaBb
Ab AABb AAbb AaBb Aabb
aB AaBB AaBb aaBB aaBb
ab AaBb Aabb aaBb aabb
Hibrizii din F
2
care segreg, fenotipic, n raportul 9:3:3:1 i
genotipic n raportul 1:1:2:2:4:2:2:1:1
Tab. 3. Dinamica genotipurilor i fenotipurilor, n F1 i F2, n dihibridare
Pe diagonala stnga jos dreapta sus sunt plasai numai indivizi heterozigoi (n ambele
caractere), pe diagonalele mici avem heterozigoi ntr-un singur caracter (de fiecare dat altul fiind
homozigotul dominant i altul homozigotul recesiv) etc.. Prin urmare, din punct de vedere al
constituiei ereditare, n hibridare, prin autofecundarea hibrizilor din generaia F
1
, ntlnirea
probabilistic a celor patru categorii (tipuri) diferite de gamei, asigur formarea a 16 descendeni,
a cror constituie genetic este de 9 tipuri i anume: 1/16 dublu homozigot dominant, 1/16 dublu
homozigot recesiv, 2/16 homozigoi dominani pentru caracterul culoare i heterozigoi pentru
form, 2/16 cu acelai raport de homozigoie/heterozigoie dar pentru cellalt caracter, 4/16 indivizi
heterozigoi n ambele caractere, 1/16 homozigoi n ambele caractere dar unul recesiv, cellalt
dominant, 1/16 cu cellat caracter dominant (ambele homozigote), 2/16 indivizi heterozigoi pentru
culoare i homozigoi recesivi pentru form i 2/16 indivizi homozigoi recesivi pentru culoare i
heterozigoi pentru form. Sub aspect fenotipic, situaia se prezint astfel: 9/16 indivizi dominani
(cu boabe galbene i netede), 3/16 dominani ntr-un caracter (boabe galbene i zbrcite), 3/16
dominani n cellalt caracter (boabe netede i verzi) i 1/16 indivizi recesivi n ambele caractere
(boabe verzi i zbrcite), cum ester redat n tabelul urmtor:

Fenotipul Genotipul Rata genotipurilor Rata fenotipurilor
Galben i neted AABB
AABb
AaBB
AaBb
1
2
2
4
9
Galben i zbrcit Aabb
Aabb
1
2
3
Verde i neted aaBB
aaBb
1
2
3
Verde i zbrcit aabb 1 1
Tab. 4. Rata fenotipurilor i rata genotipurilor, n dihibridare, la mazre.
Se impune, deci, o concluzie: n dihibridare, caracterele segreg independent unul de altul.
Aceasta este, de fapt, cea de-a doua legitate stabilit de Mendel LEGEA SEGREGRII
INDEPENDENTE A CARACTERELOR..
Trebuie specificat c tipurile parentale de gamei sunt dependente de numrul de
factori ereditari implicai n hibridare. Vor aprea 2
n
tipuri de gamei,

n fiind din numrul de
factori ereditari aflai n stare heterozigot. Spre exemplu, dac avem un factor ereditar pentru
culoarea galben i unul pentru cea verde, n=2/2 =1. Deci, 2
1
=2, vom avea 2 tipuri de gamei.
Recurgnd la o simbolistic universal, n care notm determinantul unui caracter cu A pentru
expresia dominant i a pentru cea recesiv, cellalt determinant cu B i b etc., conform relaiei
matematice precizate situaia se va prezenta astfel:
- n cazul monohibridrii, prinii vor fi AA i aa, cu gameii A i respectiv, a. Hibridul va fi
Aa, cu gameii A i a.
- n cazul dihibridrii, prinii AABB i aabb vor avea gamei de tipul AB i ab, hibridul fiind
AaBb. De data aceasta ns, avnd n vedere legea segregrii independente a caracterelor,
gameii vor fi AB, ab, Ab i aB (deci, 2
n
=2
2
=4 tipuri de gamei).


1.2. Universalitatea legitilor descoperite de Mendel

Cercetri similare celor efectuate de Mendel au vizat i alte specii, inclusiv omul. Un
exemplu n acest sens l constituie ncrucirile dintre cobai de culoare diferit: tipul slbatic, de
culoare gri i tipul albinos (aprut prin mutaie).
n hibridarea dintre o femel de tip albinos (cu blana de culoare alb), cu un mascul slbatic
(cu blana de culoare gri), indivizii din generaia F
1
(puii din prima generaie) aveau n totalitate
blana de culoare gri. Indivizii din F
1
, ncruciai ntre ei, au dat generaia F
2
, n care s-a produs
segregarea celor dou fenotipuri n raportul de 3 gri: 1 alb, adic 3: 1.
n F
1
s-au manifestat dominana i recesivitatea. n consecin hibrizii erau uniformi (sub
aspect fenotipic). n F
2
s-a produs segregarea, fenotipic, n raportul de 3 dominant la 1 recesiv
Evident, ca i la mazre, fenomenul a fost explicat pe baza legii puritii gameilor.
n concluzie, legile descoperite de Mendel au caracter de universalitate, fiind
aplicabile i deci valabile, pentru plante i animale, inclusiv pentru om.

1.3. Interpretarea matematic a legilor descoperite de Mendel

Fiind i matematician, Mendel a aplicat teoria i calculul probabilistic pentru interpretarea
rezultatelor experimentelor sale, preocupat fiind de estimarea probabilitii obinerii de rezultate
similare n cazul repetrii experimentelor.
n cazul ncrucirii a dou soiuri diferite ntre ele prin expresia fenotipic a unui caracter, n
prima generaie hibrid se obin exclusiv heterozigoi: AA x aa = Aa. Dei fenotipic indivizii sunt
uniformi i manifest trstura dominant, genotipic ei conin ambii factori ereditari (de aici numele
de heterozigoi). n descenden, aceste organisme heterozigote produc dou categorii de gamei
(A i a), n proporie egal. ntlnirea probabilistic a celor dou tipuri de gamei duce la apariia a
dou categorii de fenotipuri (dominant si recesiv) i a trei categorii de genotipuri (25% AA
homozigot dominant, 25% aa homozigot recesiv i 50% Aa heterozigot cu manifestare
dominant). Genotipic deci, raportul este de 1: 2: 1. Fenotipic, innd cont de faptul c AA i Aa au
aceeai manifestare, raportul de segregare este de 3: 1, conform tabelului 5.

Gameii A=50% a=50%
A=50% AA=25% Aa=25%
A=50% Aa=25% aa=25%
Tab.5. . Probabilitatea apariiei genotipurilor i fenotipurilor n monohibridare.

n cazul dihibridrii, Mendel a constatat c n F
2
, pentru caracterul forma bobului, din
boabe erau fenotipic dominante (n experimental efectuat de el, 432 din 556 erau netede) i
erau fenotipic recesive (adic 133 din 556 erau zbrcite). Pentru caracterul culoare a obinut
aproximativ aceleai raporturi adic 416 din 556 erau galbene i 140 din 556 erau verzi.
Fenotipurile reprezentnd cele dou caractere(neted i zbrcit pentru form, galben i verde
pentru culoare) segreg independent. Pe baza rezultatelor obinute, conform modelului matematic
ce ia n calcul ansa combinrii a dou fenomene independente, egal cu produsul probabilitilor
lor separate (3/4+1/4)(3/4+1/4), Mendel a estimat c 9/16 din boabe vor fi netede i galbene (adic
x = 9/16), 3/16 vor fi netede i verzi (3/4 x = 3/16), 3/16 zbrcite i galbene (3/4 x = 3/16)
i 1/16 zbrcite i verzi (1/4 x = 1/16).
Prin urmare, segregarea n F
2
ar trebui s se produc n raportul 9:3:3:1. n realitate,
Mendel a constatat prezenta urmtoarelor proporii numerice (pe tipuri de boabe) n cadrul celor
556 de boabe recoltate: 315 netede i galbene, 108 netede i verzi, 101 zbrcite i galbene, 32
zbrcite i verzi.
Comparnd distribuia teoretic a fenomenelor cu cea obinut experimental, folosindu-ne
de testul
2
(hi ptrat), putem demostra c ipoteza de la care s-a plecat este just. Pe de alta
parte, se poate verifica dac segragarea are caracter ntmpltor sau reprezint o legitate.

Numr de boabe
Datele Netede i
Galbene
Netede i
verzi
Zbrcite i
Galbene
Zbrcite i
Verzi
Observate 315 108 101 32
Calculate (e) 312,75 104,75 104,75 34,75
Diferena (d) -2,25 -3,25 +3,75 +2,75
d
2
5,06 14,06 10,56 7,56
d
2
/ e 0,016 0,134 0,100 0,217
2
= d
2
/e)
2
=0,47
Tab.6. Aplicarea testului
2
la experimentele efectuate de Mendel.

Formula pentru estimarea valorii hi ptrat este urmtoarea:

2
= (d
2
/e)
d = diferena ntre valoarea calculat i cea observat;
e = valoarea estimat;
= semnul de nsumare.
Iat cum pot fi evaluate rezultatele experimentelor lui Mendel, cu ajutorul lui
2
.
Probabilitatea de repetare a unui fenomen poate fi estimat i pe baza tabelului elaborat de
R.A. Fisher.

Tabelul se utilizeaz in urmtorul mod:
Gradele de libertate reprezint numrul de clase independente, minus unu. n experimentul
lui Mendel, au aprut (prin segregare) patru clase de indivizi. Deci, numrul gradelor de libertate
este 3. Valoarea lui
2
, calculat de noi, este 0,47. Plasat n tabelul lui Fisher, ea se situeaz ntre
valorile de 0,35 i 0,58, ceea ce corespunde probabilitilor P = 0,95 i P = 0,90. Cu alte cuvinte,
putem afirma c dac se va repeta experimentul se vor obine rezultate similare (fenomenul se va
repeta) n 90-95% dintre cazuri.
Nu
mr grade
de
libertate
Valorile lui P
0,99 0,95 0,90 0,80 0,70 0,50 0,30 0,10 0,05 0,01
1. 0,002 0,00
4
0,01
6
0,06
4
0,15 0,46 1,1 2,7 3,8 6,6
2. 0,02 0,10 0,21 0,45 0,71 1,39 2,4 4,6 6,0 9,2
3. 0,12 0,35 0,58 1,01 1,42 2,37 3,7 6,3 7,8 11,3
4. 0,30 0,71 1,06 1,65 2,20 3,36 4,9 7,8 9,5 13,3
5. 0,55 1,14 1,61 2,34 3,00 4,35 6,1 9,2 11,1 15,1
6. 0,87 1,63 2,20 3,07 3,83 5,35 7,2 10,6 12,6 16,8
7. 1,24 2,17 2,83 3,82 4,67 6,35 8,4 12,0 14,1 18,5
8. 1,65 2,73 3,49 4,59 5,53 7,34 9,5 13,4 15,5 10,1
9. 2,09 3,32 4,17 5,38 6,39 8,34 10,6 14,7 16,9 21,7
10. 2,56 3,94 4,87 6,18 7,27 9,34 11,8 16,0 18,3 23,2
Tab. 7. Estimarea probabilitii de repetare a unui fenomen pe baza valorilor coeficientului
2

O alt problem ce-i poate gsi rezolvarea prin calcule matematice este aceea a noilor
combinaii de gene la hibrizi. Pentru facilitarea nelegerii celor ce vor fi prezentate n continuare,
relum unele precizri anterioare. n dihibridare, trihibridare etc., se produc recombinri de factori
ereditari, pe baza apariiei gameilor recombinai. Astfel, hibridarea dintre un individ AABB i unul
aabb determin (n F
1
) apariia heterozigoilor AaBb. Acetia vor da 4 tipuri de gamei, i anume:
AB i ab de tip parental i Ab, aB de tip recombinat. Dac se noteaz cu p procentul de
recombinare, nseamn c gameii Ab i aB au, fiecare n parte, frecvena de p/2. Implicit, fiecrui
tip de gamei nerecombinai i revine frecvena de (1-p)/2. n consecin, se poate calcula frecvena
celor patru tipuri de descendeni, adic frecvena recombinrilor.

Gameii AB
(1-p)/2
Ab
p/2
aB
p/2
ab
(1-p)/2
AB
(1 p)/2
(1-p)
2
/4 AABB p(1-p)/4 AABb p(1-p)/4 AaBB (1-p)
2
/4 AaBb
Ab
p/2
p(1-p)/4 AABb p
2
/4 AAbb p
2
/4 AaBb p(1-p)/4 Aabb
aB
p/2
p(1-p)/4 AaBB p
2
/4 AaBb p
2
/4 aaBB p(1-p)/4 aaBb
ab
(1-p)/2
(1-p)
2
/4 AaBb p(1-p)/4 Aabb p(1-p)/4 aaBb (1-p)
2
/4 aabb
Tab. 8. Calculul frecvenei recombinrii genice.
n continuare, se poate calcula frecvena fiecrui fenotip recombinat. Spre exemplu,
fenotipul Ab va avea frecvena: p
2
/4 + p(1-p)/4 + p(1-p)/4 = (2p-p
2)
/4 = p(2-p)/4.
Pe de alt parte, dac se cunoate frecvena recombinrii se poate calcula frecvena
fenotipurilor parentale. De pild, dac frecvena recombinrii este de 20%, adic p=0,2, fenotipul
Ab fiind p(2-p)/4, rezult 0,09 adic 9%.

1.4. Abateri de la principiul dominanei i recesivitii din F
1
i de la raportul de
segregare de tip mendelian din F
2

Aa cum am precizat i demonstrat n paginile anterioare, pe baza experimentelor de
hibridare ntre diferite soiuri ale speciei Pisum sativum L., Mendel a demonstrat existena
uniformitii hibrizilor n F
1
, segregarea caracterelor n descendena hibrizilor de F
1
i segregarea
independent a caracterelor (n cazul hibrizilor pentru mai mult dect un caracter).
Ulterior, prin experimente i observaii efectuate n hibridri la alte specii de plante sau
animale, s-a ajuns la concluzia c exist abateri de la principiul dominanei i recesivitii
fenotipurilor parentale n F
1
i de la raportul de segregare din F
2
sau, altfel spus, c exist alte
tipuri de segregare (fa de tipul mendelian).
Este evident c abaterile de la tipul mendelian de segregare se datoreaz manifestrii altor
tipuri i raporturi de dominan/recesivitate. n mod normal, determinismul profund al unui caracter
se datoreaz activitii unei gene. Dar, sub impactul factorilor de mediu, o gen se poate
transforma ntr-o alel (prin mutaie). De obicei, genele domin asupra alelelor, n sensul c la
heterozigoi se manifest fenotipul datorat genei, i numai la homozigoii recesivi, la haploizi i n
cazul hemizigoiei se manifest fenotipul determinat de alela recesiv. Abaterile de la aceste reguli
induc modificri ale fenomenului dominan/recesivitate i schimbri n raporturile de segregare.


1.4.1. Dominana incomplet (semidominana)

Recurgnd la o simbolistic general i unificatoare, putem nota o gen oarecare cu A i
alela ei, rezultat prin mutaie, cu a. n cazul hibridrii AA x aa va rezulta individul Aa, heterozigot.
Aa cum precizam, de obicei A domin pe a, fenotipul heterozigotului Aa fiind identic celui al
homozigotului AA. Sunt ns i cazuri n care AA Aa. Un exemplu, devenit clasic de acum, este
cel al hibrizilor dintre varieti de Mirabilis jalapa, observat n experimentele efectuate de C.
Correns (n 1912). ncrucind varietatea cu floare de culoare roie, cu varietatea avnd flori de
culoare alb, n F
1
s-au obinut indivizi uniformi dar toi cu flori roz. ncrucind aceti indivizi ntre
ei, n F
2
s-au obinut indivizi cu flori roii (25%), cu flori roz (50%) i cu flori albe (25%) (deci un
raport de segregare de 1:2:1, heterozigoii fiind fenotipic diferii de ambii homozigoi). n F
3
indivizii
din F
2
care aveau flori roii, interncruciai, au dat doar descendeni cu flori roii, cei cu flori albe,
doar descendeni cu flori albe, iar descendena celor cu florile roz a segregat n continuare, n
raportul de 1:2:1.
R x A

R x r

R + r + A
25% 50% 25%

R 100% R 25% A
r 50% 100%
A 25%

R = rou
r = roz
A = alb

n acest caz (al motenirii culorii florii), absena dominanei este explicat prin
mecanismele metabolice ale formrii pigmentului rou. Pigmentul se formeaz printr-o succesiune
de reacii enzimatice.
Exemple de manifestare a semidominanei pot fi date pentru multe alte specii de plante sau
animale. De pild, n ncruciri ntre soiuri de Zea mays cu bob albastru i cu bob galben, n F
1

rezult indivizi cu bob violaceu. n F
2
segregarea este de 1 albastru: 2 violet: 1 galben. n literatura
de specialitate, pentru segregarea de acest fel se folosete expresia "segregare de tip Zea"
(1:2:1), tocmai spre a o deosebi de segregarea tipic (tip Pisum, 3:1).
n lumea animal, un exemplu bine cunoscut de semidominan este cel referitor la
rezultatul hibridrii ntre o ras de gini cu penajul negru i o ras cu penajul alb, hibridare n urma
creia rezult tipul Andaluzia, cu penajul de culoare albstruie. n F
2
, din ncruciarea ntre indivizi
ai tipului Andaluzia, iau natere indivizi cu penaj negru (25%), indivizi tip Andaluzia (50%) i indivizi
cu penaj alb (25%). Evident, tipul Andaluzia nefiind constant, nu se poate vorbi de rasa Andaluzia
(rasele la animale i soiurile la plante trebuie s fie stabile ereditar).

1.4.2. Codominana

Codominana reprezint un fenomen genetic complex datorat n esen, polialeliei. Cel mai
elocvent exemplu este furnizat de situaia grupelor sanguine umane, mai ales cele din sistemele
AB0 i MN. n codominan se constat un comportament difereniat al alelelor, n sensul c unele
dintre ele se afl n raport de dominan i recesivitate, n timp ce altele sunt codominante, n
sensul c au "trie" egal i contribuie n mod egal la fenotipizarea unui nou caracter.
Cunoaterea grupei sanguine a unui individ este extrem de important, din dou
considerente - medical i juridic. Sub aspect medical, cunoaterea grupelor sanguine este
obligatorie n cazul transfuziilor.
Dac ne referim la sistemul AB0, oamenii aparin la patru grupe sanguine, notate cu A, B,
AB i 0 (zero).
Grupele de snge din sistemul AB0 pot fi redate schematic, astfel:

Fenotip Genotip Antigen
(polizaharid de
pe globulele
roii)
Anticorp
(proteina din
serul sanguin)
A I
A
I
A
i I
A
I
0
sau
L
A
L
A
i L
A
l
A Anti B ()
B I
B
I
B
i I
B
I
0
sau
L
B
L
B
i L
B
l
B Anti A ()
AB I
A
I
B
sau L
A
L
B
A + B -
0 I
0
I
0
sau ll - anti A()+anti
B()
Tab.9. Grupele de snge din sistemul ABO

n situaia n care antigenul A vine n contact cu anticorpul (adic, globulele roii de la un
individ din grupa A cu serul sanguin al unui individ din grupa B), anticorpul (proteina) se leag la
antigen (polizaharid) i l inactiveaz. Concomitent, se produce agregarea (aglutinarea) globulelor
roii. n consecin, transfuziile de snge pot fi efectuate doar n sensul:

0 0
/ \
A A B B
\ /
AB AB

Grupa 0 este donator universal, iar grupa AB este primitor universal. Grupa A poate dona
grupei A i AB i poate primi de la A i 0. Grupa B poate primi de la B i 0 i poate dona grupei B
i AB. Fiind genic determinate, evident, grupele sanguine sunt ereditare. Cele trei alele L
A
, L
B
i l
ocup acelai locus pe cromosomii omologi. Alela L
A
prezint mai multe mutaii, dou dintre ele
fiind mai frecvente - L
A1
i L
A2
, ntre ele fiind un raport de dominan (L
A1
domin pe L
A2
). n
consecin, fenotipic, grupele sanguine din sistemul AB0 sunt A
1
, A
2
, B, A
1
B, A
2
B i 0, conform
tabelului:

Fenotip Genotip
A
1
L
A1
L
A1
, L
A1
L
A2
, L
A1
l
A
2
L
A2
L
A2
, L
A2
l
B L
B
L
B
, L
B
l
A
1
B
A
2
B
L
A1
L
B
L
A2
L
B

0 Ll
Tab.10. Raportul de dominan/recesivitate ntre alelele determinante ale grupelor sanguine

Tot n cazul speciei umane mai exist un sistem de grupe sanguine i anume sistemul M N,
cu grupele M, N i MN.
Fr ndoial, innd cont de raportul de dominan, codominan i recesivitate dintre
alelele precizate, este simplu s se prevad grupele de snge posibile ale descendenilor. n cazul
n care se cunosc grupele sanguine ale prinilor (i invers), se pot stabili relaiile de paternitate i
filiaie, cu repercusiuni pentru demersuri medico-legale i juridice. De pild, doi prini cu fenotipul
0 nu vor putea da natere dect la copii cu acelai fenotip (ll x ll = ll). Doi prini din grupa B, dac
vor fi heterozigoi, vor putea da natere la copii din grupele B sau 0 (L
B
l x L
B
l = L
B
L
B
, L
B
l i ll) etc..

1.4.3. Supradominana

Reprezint fenomenul datorit cruia heterozigoii depesc ambii prini n fenotipizarea
unor caractere (mai ales cantitative, cum ar fi habitusul, productivitatea etc., inclusiv viabilitatea),
ca o component a capacitii de a da rspunsuri adecvate la presiunea seleciei. Schematic,
supradominana poate fi redat astfel:

AA < Aa > aa


Fig.1. Fenotipizarea hibridului Aa intermediar comparativ cu prinii

Se apreciaz c n supradominan sunt implicate mai multe gene cu caliti aditive. n mod
frecvent, supradominana reprezint rezultanta interaciunii a dou alele, rezultant ce face ca
heterozigoii s se situeze n afara amplitudinii de variabilitate a fiecruia dintre cei doi homozigoi.
n condiii normale de dominan i recesivitate, cel mai bun genotip este homozigotul dominant,
toi indivizii unei populaii putnd fi adui, prin selecie, n stare homozigot.

Fig.2. Fenotipizarea hibridului Aa n supradominan



1.4.4. Gene letale

O alt cauz a modificrii raportului mendelian de segregare n descendena hibrizilor din
F
1
o constituie prezena genelor letale.
Noiunea de de gen letal a fost introdus de L. Cunot (1911). El a observat c
ncrucind oareci de culoare galben, ntotdeauna n descenden rezult un amestec de indivizi
de culoare galben i de alt culoare, n raport de 2: 1. Rezultatele au impus dou concluzii. n
primul rnd, faptul c descendena segreg nseamn c oarecii galbeni sunt heterozigoi. n al
doilea rnd, segregarea fiind continuu n raport de 2: 1 i descendena indivizilor de culoare
galben segregnd mereu, nseamn c o parte dintre descendenii indivizilor de culoare galben
i anume cei homozigoi (a cror descenden ar trebui s nu segrege), nu iau natere. Prin
urmare, gena dominant n stare homozigot este letal. Aceasta a fost presupunerea lui Cunot.
Sacrificarea femelelor gestante a confirmat aceast presupunere, deoarece s-au identificat
embrioni mori care corespundeau ca numr procentului indivizilor necesari pentru asigurarea
raportului de segregare 3: 1.
Dac notm gena pentru culoarea normal a blnii cu a i mutanta care determin apariia
culorii galbene cu A
y
(Y de la cuvntul englezesc yellow = galben), situaia se va prezenta astfel:
- indivizi galbeni heterozigoi au genotipul A
y
a. Prin ncruciarea lor rezult:

A
y
a x A
y
a = A
y
A
y
(25%) + 2A
y
a (50%) + aa (25%)
0
2
4
6
8
10
AA Aa aa
0
5
10
15
AA Aa aa

nseamn c, n mod continuu, indivizii A
y
A
y
mor n stare embrionar.
Genele letale pot fi identificate dup gradul manifestrii lor (n genetic se folosete
termenul de penetran) i anume:
a. gene letale propriu-zise, cu penetran de 100%, care produc moartea tuturor
descendenilor;
b. gene semiletale, cu penetran de 50%, avnd ca rezultat moartea a circa 50% dintre
indivizi;
c. gene subvitale, cu penetran de 30% i procent similar de inducere a letalitii.
O alt clasificare a acestor gene se face pe criteriul stadiului ontogenetic n care i
instaleaz efectul. Din acest punct de vedere, ele pot fi:
a. gene letale gametice sau haplofazice, care determin moartea gameilor;
b. gene letale zigotice sau diplofazice, care determin dispariia zigotului (deci fecundarea
are loc, dar zigotul nu este viabil);
n funcie de cromosomii pe care sunt plasate, genele letale pot fi:
a. autosomale (plasate pe autosomi);
b. heterosomale (plasate pe heterosomi, adic pe cromosomii sexului).
Fenomenul letalitii genice nu este caracteristic doar animalelor, ci a fost descris i la
plante. Spre exemplu, la Zea mays (porumb) s-au identificat 15 gene diferite care, n stare
homozigot, blocheaz formarea clorofilei i, n final, fotosinteza. Plantele de acest tip ajung
albinotice i, fiind incapabile de asimilaie, pier. Evident, dac am dori s ncadrm aceste gene n
una din clasificrile anterioare, le-am plasa n categoria genelor subletale, deoarece provoac
dispariia organismului purttor abia anterior atingerii stadiului de maturitate sexual.



1.4.5. Interaciunea genelor

Este un alt fenomen care determin modificarea raportului de segregare i chiar apariia de
noi fenotipuri n descendena hibrizilor din F
1
.
Interaciunea genelor a fost constatat la ncruciarea dintre dou rase de gini, ambele
albe: Leghorn i Wyandotte. Prin experimente i observaii multiple s-a demonstrat c la rasa
Leghorn culoarea alb este dominant, n timp ce la rasa Wyandotte este recesiv. n consecin,
dac rasa Leghorn este ncruciat cu o ras de culoare nchis, F
1
va fi de culoare alb. Dac se
ncrucieaz indivizi ai rasei Wyandotte cu indivizii unei rase colorate, indivizii din F
1
vor fi, n
totalitate, colorai. Prin urmare, la cele dou rase, Leghorn i Wyandotte, culoarea alb a penajului
este determinat de gene diferite, nealele.
Se consider c Leghorn la origine avea penajul colorat (CC; C = simbolul pentru gena
determinant a culorii, de la cuvntul englezesc colour = culoare). Exprimarea genelor
determinante ale culorii este blocat ns de alt gen inhibitoare (II; I = simbolul pentru respectiva
gen, de la cuvntul englezesc inhibitory = inhibitor). Deci, genotipic, rasa Leghorn este CCII.
Rasa Wyandotte de culoare alb (ca i rasele White, Plymonth etc.) dar recesiv, are
genotipul ccii.
Prin ncruciarea dintre cele dou rase CCII x ccii, rezult hibrizii din F
1
, de culoare alb,
cu genotipul CcIi. Acetia formeaz gameii CI, cI, Ci, ci i prin ncruciare dau hibrizii din F
2
,
conform tabelului.
Prin urmare, raportul de apariie a indivizilor cu penaj colorat este de 3/16. Genotipul lor
conine gena inhibitoare n stare recesiv homozigot, iar gena pentru culoare, n stare dominant,
homozigot sau heterozigot.
Fenomenul se numete epistazie, iar gena inhibitoare, a crei aciune mpiedic
manifestarea aciunii genei pentru culoare, se numete epistatic. Gena inhibat se numete
hipostatic.


.
Gam
e-ii
CI Ci cI ci
CI CCII
Alb
CCIi
Alb
CcII
Alb
CcIi
Alb
Ci CCIi
Alb
CCii
Colorat
CcIi
Alb
Ccii
Colorat
cI CcII
Alb
CcIi
Alb
CcII
Alb
ccIi
Alb
ci CcIi
Alb
Ccii
Colorat
CcIi
Alb
ccii
Alb
Tab.11. Segregarea culorii, n F2, la hibrizii obinui ntre rasele de gini Leghorn i Wyandotte

x =
Ras neagr Rasa Leghorn F
1

x =
Ras neagr Rasa Wyandotte F
1

x =
Rasa Leghorn Rasa Wyandotte F
1

+

F
2
Fig.3. . Rezultatele ncrucirilor dintre o ras cu penaj de culoare neagr i rasele Leghorn i Wyandotte, precum i ale
ncrucirii dintre Leghorn i Wyandotte
1.4.6. Polialelia sau alelia multipl

Gena, care este responsabil de determinarea unui caracter, ocup o poziie bine definit
pe un cromosom (ocup un locus). Orice gen, pe parcursul existenei ei, a putut suferi una sau
mai multe mutaii. n consecin, pentru o gen au putut aprea una sau mai multe alele (n limba
greac, alelon = altul). Rezult deci, cu claritate, c o alel sau o serie de alele ale unei gene
sunt implicate n determinismul aceluiai caracter (evident, asigurndu-i fenotipizri diferite) i
ocup acelai locus n cromosomul omolog (adic, n poziia din cromosomul n care se gsete
gena). Evident, din acest punct de vedere, o gen poate avea o alel sau mai multe (A poate avea
alelele a
1
,a
2
,..,a
n
), dar un individ nu poate avea dect 3 stri posibile (AA, Aa sau aa, sau alte
combinaii care s desemneze statutul de homozigot recesiv sau heterozigot). ntr-o populaie
ns, genotipic i, bineneles, fenotipic, poate exista o multitudine de indivizi,cu o multitudine de
combinaii,att ntre gena slbatic i alelele ei, ct i ntre alele.
Noiunea (termenul) de alel a fost introdus n tiin de W. Johannsen n anul 1909. Prin
experiene de hibridare de tip mendelian se pot identifica alelele, se poate stabili raportul de
segregare i se poate stabili tipul de relaii ntre o gen i alelele ei, adic, dac este dominan
complet, semidominan etc..
Prin urmare, relund i analiznd n detaliu problema, rezult c ntr-o populaie, pentru o
anumit gen, pot exista mai multe alele. Aa cum am precizat, acestea provin prin mutaii
succesive, fie ale genei normale, fie ale uneia sau unora dintre alele. ntruct notaia alelelor poate
duce la confuzii, este bine s redm cteva dintre modalitile de desemnare (notare) a lor. La
modul general, gena slbatic se noteaz cu A, iar alelele cu a
1
, a
2
, a
3
...a
n
. Dar gena normal
(slbatic) se mai poate nota i cu prima, primele sau un grup de litere din denumirea n englez a
primei mutante (care a fost descoperit i descris) pentru caracterul respectiv, nsoit de indicele
+, alelele fiind notate cu aceleai indicative, dar fr indicele +. O alt notaie prevede folosirea
unei singure abrevieri, rezultat de la denumirea primei mutante, cu indicele + pentru gena
slbatic i a aceleiai abrevieri, avnd mereu alt indice format din literele ce desemneaz
mutantele decelate ulterior, pentru restul alelelor. S exemplificm. Culoarea normal a ochiului la
Drosophila melanogaster este roie. Mutanta cu ochi albi se noteaz cu w (de la cuvntul
englezesc white = alb). Gena salbatic, n acest caz, se noteaz cu w
+
. Alelele mutante, altele
dect white, se noteaz cu w
e
(eosin), w
a
(apricot), w
ch
(cherry), w
co
(corai).
Prin urmare, culoarea ochilor la drosofila cuprinde o gam larg de mutante ntre alb i
rou. Fiecare nuan se datoreaz unei alele, fapt pentru care se consider c, la aceast
musculi, exist un sistem polialelic, o serie alelomorf. n aceast serie alelomorf fenotipul
slbatic este dominant, toate fenotipurile mutante fiind recesive. i ntre alelele mutante exist
raporturi de dominan i recesivitate.
Ordinea dominanei este determinat de intensitatea culorii ochilor, pe care o confer o
alel. Prin urmare, alela w, care determin culoarea alb a ochilor (deci, lipsa complet a
pigmentului) este recesiv, n raport cu toate celelalte alele. n final, referitor la polialelie
putem sublinia cteva particulariti, i anume:
- polialelele ocup acelai locus n cadrul unui cromosom (grup de linkage);
- polialelele fiind, de fapt, mutante ale unei singure gene, afecteaz ntotdeauna acelai
caracter.
n ncruciare ntotdeauna domin gena slbatic. Concomitent, unele alele sunt dominante
fa de altele. De aceea, cnd se ncrucieaz doi indivizi alelici, n F
1
nu apare tipul slbatic, ci
domin unul dintre genitori.
Sunt i situaii n care una dintre alele domin asupra tipului slbatic. Este cazul animalelor
agouti i al unor culori sau forme de ochi la Drosophila melanogaster.

1.4.7. Poligenia sau polimeria

Vizeaz mai ales expresia fenotipic a caracterelor cantitative (nlime, greutate, producie
de fructe sau semine, producie de alcaloizi, vitamine, uleiuri etc.). nc din secolul XVIII, prin
experimentele sale de hibridare, J. Klreuter a constatat c hibrizii din F
1
rezultai din ncruciarea
ntre Nicotiana tabacum pitic i Nicotiana tabacum nalt, aveau nlimea intermediar. n F
2

aprea o segregare gradual, n sensul c se identific o adevrat scar a indivizilor, de la cel
pitic, pn la cel nalt.
Cercetrile efectuate de suedezul H. Nilson Ehle pe gru i americanul E. M. East pe
porumb, ntre anii 1910-1913, au permis descoperirea fenomenului poligeniei. n urma acestor
cercetri s-a conchis c determinismul caracterelor cantitative este poligenic, n sensul c ele sunt
determinate de mai multe gene nealele. Segregarea genelor nealele este independent (ca i
caracterele independente), doar efectul lor fiind cumulativ.
Un exemplu tipic de efect cumulativ ni-l furnizeaz manifestarea culorii pielii la om.
Culoarea pielii n cazul omului este determinat de coninutul de melanin, care variaz ntre 0 -
11% pentru rasa alb, 12 - 25% la mulatrii deschii, 25 - 40% la mulatrii adevrai, 41 - 55% la
mulatrii de culoare nchis, 56 - 78% la rasa negroid.
Prin cstoria ntre un individ din rasa alb (europoid) i unul din rasa neagr (african), n
F
1
rezult indivizi de tip mulatru (relativ uniformitate). Prin cstoria ntre mulatri, n F
2
se obine o
segregare de 1 alb: 4 mulatri deschis: 6 mulatri propriu-zis: 4 mulatri nchis: 1 negru.
Pentru a explica acest raport, C.B. Davenport, care a studiat problema (mai ales, n
Jamaica i insulele Bermude), a considerat c n apariia culorii pielii sunt implicate dou perechi
de gene cu alelele lor - P
1
p
1
i P
2
p
2
. Negrii au genotipul P
1
P
1
P
2
P
2
, iar albii p
1
p
1
p
2
p
2
. Din cstoria
alb x negru, rezult:

P
1
P
1
P
2
P
2
x p
1
p
1
p
2
p
2


F
1
P
1
p
1
P
2
p
2


Cstoria ntre mulatri induce apariia a mai multe tipuri de indivizi n F
2
, i anume:

Gameii P
1
P
2
P
1
p
2
p
1
P
2
p
1
p
2

P
1
P
2


P
1
P
1
P
2
P
2

Negru
P
1
P
1
P
2
p
2

Mulatru
nchis
P
1
p
1
P
2
P
2

Mulatru
nchis
P
1
p
1
P
2
p
2

Mulatru
P
1
p
2


P
1
P
1
P
2
p
2

Mulatru
nchis
P
1
P
1
p
2
p
2

Mulatru
P
1
p
1
P
2
p
2

Mulatru
P
1
p
1
p
2
p
2

Mulatru
deschis
p
1
P
2


P
1
p
1
P
2
P
2

Mulatru
nchis
P
1
p
1
P
2
p
2

Mulatru
p
1
p
1
P
2
P
2

Mulatru
p
1
p
1
P
2
p
2

Mulatru
deschis
p
1
p
2


P
1
p
1
P
2
p
2

Mulatru
P
1
p
1
p
2
p
2

Mulatru
deschis
p
1
p
1
P
2
p
2

Mulatru
deschis
p
1
p
1
p
2
p
2

Alb
Tab.12. Fenotipurile i genotipurile aprute prin cstoria ntre mulatri.

Dac se face un back-cross ntre un alb p
1
p
1
p
2
p
2
i un mulatru P
1
p
1
P
2
p
2
, descendenii vor
fi: 25% P
1
p
1
P
2
p
2
; 25% p
1
p
1
p
2
p
2
i 50% mulatri, intermediari ntre prini (adic P
1
p
1
p
2
p
2
i
p
1
p
1
P
2
p
2
). Retroncruciarea unui negru P
1
P
1
P
2
P
2
cu un mulatru P
1
p
1
P
2
p
2
induce apariia a 25%
negri, 50% mulatri nchii, intermediari ntre cei doi prini i 25% mulatri.
Davenport a conchis c acumularea cantitativ a pigmentului n piele este determinat de
efectul cumulat al genelor P
1
i P
2
i al alelelor. Astfel, negrii au genele n stare homozigot,
mulatrii nchii au o gen homozigot i celelalte n stare heterozigot (P
1
p
1
P
2
P
2
, P
1
P
1
p
2
P
2
),
mulatrii propriu-zii sunt heterozigoi pentru ambele gene sau homozogoi pentru ambele, dar una
n stare dominant i cealalt n stare recesiv (P
1
p
1
P
2
p
2
; P
1
P
1
p
2
p
2
; p
1
p
1
P
2
P
2
), mulatrii deschii au
o singur gen dominant n stare heterozigot (P
1
p
1
p
2
p
2
sau p
1
p
1
p
2
P
2
).
INTREBRI DE VERIFICARE
1. Definiti termenii: hibridare, fenotip, genotip
2. Enuntati legea puritii gameilor
3. Intocmiti schema monohibridarii
4. Intocmiti schema dihibridarii
5. Care sunt cauzele aparitiei abaterilor de la raporturile de segregare stabilite de Mendel
6. Definii semidominanta si supradominanta
7. Care este determinismul genetic al grupelor de snge la om
8. Cum se defineste fenomenul de poligenie
9. Ce reprezinta epistazia
10. Intocmiti schema unei hibridari intre doua persoane apartinand tipului mulatru propriu-zis


Unitatea de invare 2

2 Structura i functiile suportului material al ereditii, variabilitii i
determinismului caracterelor
2.1. CROMOSOMII SEIFUL INFORMAIEI EREDITARE
2.1.1. Materialul genetic al virusurilor, viroizilor si plasmidelor
Primele forme de via aprute pe Terra erau, probabil, de tip acelular fiind reprezentate de
macromolecule de ARN si apoi de ADN i aveau capacitatea de autoreplicare, autoreglare i
autodezvoltare. Apariia primelor gene, alctuitela nceput din ARN i apoi din ADN, a insemnat
trecerea de la evoluia chimic la cea biologic. Desigur c primele forme de via cuprindeau in
programul lor genetic un numr foarte redus de gene. n care era codificat informaia necesar
realizrii structurilor i funciilor caracteristice acestor organisme primitive.
Studiul organismelor procariote acelulare actuale, cum sunt virusurile, viroizii i plasmidele
a facut posibil cunoaterea mai aprofundat a proceselor care au dus la apariia vieii, deoarece
ele sunt extrem de simple ca organizare structural si ca funcii, fiind oarecum similare cu
protobionii aprui in negura timpurilor.
Materialul genetic al virusurilor este reprezentat de un singur molecul de acid nucleic n
care sunt dispuse, in ordine liniar, un numr variabil de gene. Virusurile cu genom ADN, numite si
dezoxiribovirusuri, prezint apte tipuri principale de structur i anume:
- cu genom ADN mono-catenar. liniar
- cu genom ADN mono-catenar circular
- cu genom ADN dublu-catenar liniar repetitiv
- cu genom ADN dublu-catenar liniar repetitiv terminal
- cu genom ADN dublu-catenar liniar redundant terminal, permutat circular
- cu genom ADN dublu-catenar liniar, cu extremiti monocatenare complementare
- cu genom ADN dublu-catenar circular inchis covalent

Virusurile ARN, care au genomul reprezentat de o macromolecul de ARN, sunt numite
ribovirusuri i prezint patru tipuri principale de structuri:
- cu genom ARN mono-catenar liniar
-
cu genom ARN mono-catenar intens pliat

- cu genom ARN mono-catenar circular
- cu genom ARN dublu-catenar divizat
-
Cromosomul viral, constituit din ADN sau ARN, conine toat informaia ereditar necesar
pentru formarea particulei virale. Dar, informaia ereditar a virusurilor devine activ numai atunci
cnd ADN-ul sau ARN-ul lor se afl in sistemul celulei gazd.
Teoretic, acizii nucleici virali, dac nu sunt degradai de nucleaze se pot replica in
orice celul n care au ptruns.

O form acelular de organizare, mai simpl dect virusurile i de dimensiuni incomparabil
mai mici, este reprezentat de viroizi. Denumirea lor le arat inrudirea cu virusurile, ei fiind in
esen molecule mici de acid nucleic neprotejat de inveli proteic (de capsid) i nici de inveliul
exterior ce conine lipide i proteine, asa cum este cazul la unele virusuri.
S-a constatat c viroizii sunt localizai n nucleul celulelor, unde se replic cu ajutorul unei
enzime de tipul replicazelor din celula-gazd. La plante s-au identificat secvene de nucleotide din
ADN-ul nuclear complementare cu ARN-ul viroizilor, dar se pare c replicaia viroizilor nu se
realizeaz prin intermediul ADN. Date experimentale de ultim or arat c n celulele vegetale
exist o multitudine de enzime care pot asigura replicarea moleculelor de ARN, folosind ca matri
chiar moleculele de ARN ale viroidului.
Originea viroizilor nu este prea bine cunoscut. Pornindu-se de la observaia c genele
plantelor si animalelor sunt alctuite din regiuni informaionale, denumite exoni si regiuni non-
informaionale, denumite introni, care sunt eliminai in procesul de activare a genelor, s-a emis
ipoteza c viroizii ar fi introni nedegradai.
Caracterul patogen al viroizilor se datoreaz interreaciei lor cu genomul celulei-gazd,
probabil prin perturbarea mecanismelor de reglaj genetic al acesteia. Ca urmare, se consider c
viroizii sunt la limita inferioar a vieii, fiind sisteme autoreplicative, care posed un program
genetic puternic redus.
In anul 1952, J. Lederberg, laureat al premiului Nobel, a descoperit plasmidele din celulele
bacteriene. Acestea sunt nite minicromosomi de form circular sau linear, alcatuii din ADN
bicatenar care se replic independent de cromosomul bacteriei gazd i posed un mic numr de
gene. In celula bacterian se gsesc ntre 10 i 200 de copii ale unei anumite plasmide, regula
fiind urmtoarea: plasmidele de dimensiuni mici se pot gsi intr-un numr mai mare de copii, iar
cele mari intr-un numr mic de copii. Ulterior s-au descoperit plasmide i in celulele eucariote,
asociate cu nucleul sau cu organitele celulare (mitocondrii i cloroplaste).
Plasmidele sunt mai simple ca organizare dect virusurile, fiind alctuite dintr-o molecul
de ADN cu capacitate autoreplicativ. Ele se gsesc la toate speciile de bacterii dar prezena lor
nu este obligatorie. Pn n prezent au fost identificate peste 1000 de tipuri , dintre care 269 numai
la bacteria Escherichia coli. De regul, ADN-ul plasmidial reprezint 1-3% din cantitatea total de
material genetic vbacterian.
Plasmidele au un rol foarte important n celula bacterian. Unele dintre ele sunt capabile s
determine conjugarea bacteriilor. Astfel plasmidul denumit factor de fertilitate (F), se poate gsi
n celula bacterian sub form liber i atunci celula este notat F
+
, sau poate fi integrat n
cromosomul bacterian, celula respectiv fiind notat Hfr (high frequency of recombination), sau
poate fi absent, situaie n care celula se noteaz F
-
. Bacteriile de tip Hfr sunt capabile s realizeze
recombinarea genetic, adic transferul unui segment cromosomial de la celula mascul (F
+
) la
cea femel (F
-
), cu o mare frecven. Exist i plasmide F care au inclus un segment din
cromosomul bacterian, fapt pentru care acest tip de factor de fertilitate este considerat recombinat
genetic. Plasmida F este reprezentat de o macromolecul de ADN alcatuit din cca. 100.000
perechi de nucleotide.
Un alt tip de plasmide bacteriene este constituit de plasmidele pentru rezisten (R). Ele
sunt alctuite dintr-o macromolecul circular de ADN, pe care se gsesc gene ce determin
rezistena la compuii toxici ai unor metale grele (mercurul, cadmiul, bismutul, antimoniul etc.),
rezistena la unele insecticide i la unele produse petroliere etc. Plasmidele R pot trece de la o
bacterie la alta, cu ajutorul virusurilor bacteriene, printr-un fenomen denumit transducie.
Plasmidele F si R fac parte din grupa plasmidelor conjugative: favorizeaz transferul de
material genetic, posednd capacitatea de a induce n celulele bacteriene formarea de structuri
necesare conjugrii (pili de sex).
Plasmidele Col (factorii colicinogenici) sunt un alt tip de plasmide, care posed gene ce
determin sinteza unei clase de proteine ce se numesc colinice sau bacteriocine. Acestea,
secretate n mediu, au aciune bactericid asupra altor bacterii, care sunt lipsite de astfel de
plasmide. Astfel, bacteria Escherichia coli produce colicine, Bacillus subtilis produce subtilizine,
Pseudomonas aeruginosa produce pyocine. Fiecare tip de bacteriocin este codificat intr-un
anumit segment de ADN din plasmidul respectiv.
Plasmidele sunt cromosomi in miniatur, alctuii din ADN dublu-catenar, circular nchis.
Circularitatea este o condiie esenial pentru supravieuirea plasmidei in celula gazd deoarece
altfel ADN-ul plasmidial ar fi cu usurin atacat de nucleaze. Plasmidele au cteva proprieti
distincte:
- dimensiunea mic a moleculei: reprezinta 1-2% din mrimea cromosomului bacterian;
- secvena de baze azotate difer de cea a ADN-ului cromosomului bacterian;
- prezint proprieti structurale aparte;
- reprezint informaie ereditar accesorie, fr importan vital pentru bacterie; bacteriile
pot s piard plasmidele;
- reprezint repliconi - structuri capabile de replicare independent dar, in general,
corelat i controlat de cromosomul bacterian.
ADN-ul plasmidial poate exista sub mai multe forme:
a. covalent nchis, circular i superrsucit. Aceast stare faciliteaz izolarea plasmidelor
prin centrifugare in gradient de densitate;
b. circular deschis;
c. ADN multimer.

In ultima vreme au fost identificate plasmide i n celulele eucariotelor, unele asociate cu
nucleul i altele cu mitocondriile i cloroplastele.
Plasmidele din celula eucariot, asociate cu nucleul sau mitocondriile i cloroplastele, sunt
componente normale ale genomului celular i sunt foarte variate ca structur i greutate
molecular. Ele contribuie la mrirea variabilitaii genotipice i flexibilitii acestor sisteme genetice.
Se sper c va fi posibil utilizarea lor ca vectori n programele de ameliorare a plantelor, prin
transfer de gene.
2.1.2. Structura cromosomului bacterian
Celula bacterian, spre deosebire de celulele organismelor eucariote, nu are un nucleu
adevrat ci un nucleu cu o organizare primitiv, fiind lipsit de membran i inclus direct in
citoplasm, n partea central a celulei. Genomul bacterian este alctuit din dou categorii de
gene: gene eseniale eucromosomale, localizate n cromosomul bacterian si gene accesorii,
prezente in plasmide, elemente genetice transpozabile (SI si TN) si n unii fagi (Campbell, 1981)
Cromosomul bacterian are form circular i este alctuit dintr-o singur molecula de ADN
bicatenar, cu o lungime de 1400 m i un diametru de 2,5 nanometri (nm), corespunznd
diametrului moleculei de ADN dublu catenar, o lungime de cca. 1360 m si o mas molecular de
cca. 2,5 0,3x10
9
Daltoni
A.Worcel i E.Burgi, n 1972 i Pettijohn in 1974, au reuit s studieze structura
cromosomului la Escherichia coli. S-a demonstrat c el const din 40-50 bucle care i pstreaz
structura cu ajutorul ARN. Fiecare bucl este bogat n ARN i poate funciona relativ independent
de altele. Cele 40-50 de bucle mari au superrsuciri secundare alctuite din cca. 400 perechi de
nucleotide. Meninerea acestor bucle de mrimi diferite, se pare c se face nu numai cu ajutorul
ARN, ci i cu ajutorul unor proteine i enzime de tipul endonucleazelor. Aceste enzime sunt
capabile s determine rupturi n una dintre catenele ADN-ului, fapt care impiedic (blocheaz)
dersucirea buclelor superrsucite. In acest fel structura cromosomial este stabil, iar
cromosomul bacterian si pstreaz continuitatea. Enzimele de tipul ribonucleazelor pot hidroliza
unele molecule de ARN, fapt care duce la ruperea legturilor dintre dou bucle succesive.
Una dintre enzimele care joac un rol esenial n replicarea ADN bacterian i este
responsabil de suprarsucirea sa, este aa-numita ADN-giraza. Dac ntr-o cultur de E. coli se
adaug, n mediu, coumeromicina, un antibiotic cu rol de inhibitor al funciei ADN-girazei,
cromosomul celulei respective i va pierde constituia superhelical.
n mod normal, bacteriile aflate n faza de repaus, n culturi staionare i vechi, au un singur
cromosom, fiind uninucleate. n faza de cretere activ, n culturi tinere meninute pe medii optime,
ele apar ca multinucleate, avnd 2-4 cromosomi, care sunt ns identici, deoarece provin prin
replicare dintr-un singur cromosom parental.
Deci, cromosomul bacterian poart n structura sa toat informaia ereditar
necesar pentru existena unei celule, adic poart toate genele (genomul) necesare pentru
desfurarea metabolismului i pentru reglarea activitii celulare. Cromosomul bacterian
determin i arhitectura celulei care-l conine, ereditatea i capacitatea ei de evoluie.

n prezent nu se cunoaste exact mecanismul molecular prin care cromosomul bacterian,
mai lung de 100-400 de ori dect lungimea celulei bacteriene, este mpachetat ntr-un volum att
de mic, cum este cel al nucleoidului n care se afl. Dac mpachetarea s-ar face la ntmplare,
s-ar produce inevitabil ncurcarea moleculei de ADN, o parte din informaia ereditar ar fi prins
n zonele mai ascunse i ar deveni inaccesibil pentru transcripie.
Fong (1967) a propus un mecanism de mpachetare prin suprarsucire. Ulterior,
Pettijhon i Hecht (1974) au elaborat un model de mpachetare a ADN cromosomial, bazat pe un
proces dublu de pliere i formare de superelice, n care structura condensat a ADN ar fi
meninut prin aciunea asociat a ARN i a proteinelor din nucleoid.

2.1.3. Cromosomii la eucariote
2.1.3.1. Morfologia cromosomilor eucariotelor
Morfologia cromosomilor este variabil, att n funcie de faza din ciclul diviziunii celulare,
ct i n funcie de specia la care aparin indivizii (plante sau animale) analizai. Cromosomii
reprezint un caracter de diagnoz, de delimitare a speciei asemenea oricrui alt caracter de
natur morfo-anatomic, fiziologo-biochimic, fenologic sau reproductiv. n acest sens, trebuie
precizat c cromosomii fiecrei specii eucariote, de plante sau de animale, au particulariti
morfologice i numerice caracteristice speciei.
nc o precizare, extrem de important, este aceea n conformitate cu care cromosomii
eucariotelor sunt cu totul altfel structurai n comparaie cu cei ai procariotelor.
Centromerul nu se coloreaz cu colorani bazici. Poziia acestuia n cromosom este
variabil, mprind cromosomul n dou brae. n funcie de lungimea real a braelor i, apoi, a
raportului dintre ele, se stabilete tipul cromosomului.
Dac centromerul este situat exact n centrul cromosomului, delimitnd dou brae perfect
egale (raportul dintre brae - r - fiind 1), cromosomul este metacentric (prescurtat se noteaz cu
M). Cnd centromerul mparte cromosomul n dou brae inegale, cu r avnd valori cuprinse ntre
1 i 1,7 , cromosomul este median (m), iar cnd r are valori cuprinse ntre 1,7 i 3, cromosomul
este submedian (sm). Cnd raportul braelor este cuprins ntre 3 i 7 cromosomul este
subtelocentric (st), iar cnd raportul este mai mare dect 7 (r > 7) cromosomul este telocentric (T)
(Fig.3). n ceea ce privete poziia terminal a centromerului (adic n ceea ce privete
posibilitatea existenei cromosomilor telocentrici) prerile sunt contradictorii. Unii autori afirm c
centromerul nu se poate gsi niciodat n poziie terminal, n timp ce ali autori admit aceast
posibilitate.
Pe lng constricia primar, determinant a poziiei centromerului, cromosomii au i
constricii secundare, cu rol n formarea nucleolului, fapt pentru care au primit i denumirea de
organizatori nucleolari. Uneori, cromosomii au la unul din capete o constricie secundar prin
care se delimiteaz un segment numit satelit (trabant). Asemenea cromosomi se ntlnesc la
speciile Secale cereale (2n=14 - cromosomii perechii a VII-a), i Zea mays (cromosomii perechii a
VI-a).
Numrul nucleolilor dintr-un nucleu este egal cu numrul cromosomilor cu satelit. Cele
dou specii menionate mai sus au, deci, cte doi nucleoli n nucleu.
Centromerul are rolul de a fixa cromosomul pe fibra fusului acromatic, n timpul diviziunii
celulare. Prin diviziunea sa, care precede diviziunea cromosomului i separarea cromatidelor, n
mitoz sau n cea de-a doua diviziune meiotic, se asigur partiia cromosomului n cele dou
cromatide surori. n cazurile n care, din diverse motive, cromosomul se rupe, fragmentele fr
centromer (numite acentrice) nu se pot reface i se resorb.



Un fragment acentric se pstreaz doar atunci cnd se ataeaz de un cromosom cu
Luzula) n care unii cromosomi,
extrem de scuri, ndeplinesc funcii centromerice n totalitate sau pe mare parte din lungimea lor.
De fapt aceti cromosomi au centromerul difuz i poart denumirea de cromosomi policentrici. Ei
sunt api, ns, de a se fixa pe toat lungimea lor de fibrele fusului acromatic.
La capetele cromosomilor exist o zon (o poriune) care le mpiedic unirea. Respectiva
poriune poart numele de telomer (telomere). Dincolo de rolul de a mpiedica unirea
cromosomilor prin capetele lor, telomerele au i un rol, din ce n ce mai bine definit, n
determinismul longevitii organismelor. Fiind zone heterocromatice ale cromosomilor, telomerele
au acidul dezoxiribonucleic super condensat (super rsucit). S-a constatat c, la diverse specii,
lungimea telomerelor este foarte diferit i c numrul de diviziuni succesive ale unei celule este n
relaie de direct proporionalitate cu lungimea telomerelor. Cnd, n succesiunea de diviziuni,
telomerul dispare, cromosomul se autolizeaz iar celulele se distrug.
Schematic (Fig.4), deci, un cromosom apare astfel: telomer, satelit, constricie secundar,
bra scurt, centromer (constricie primar), bra lung, telomer (vezi schema anterioar). Fiecare
bra este alctuit din dou cromatide, fiecare cromatid coninnd dou cromoneme. Regiunea
cromosomial din vecintatea centromerului poart numele de regiune proximal, iar cea de la
capetele braelor poart numele de regiune distal. Aa cum am precizat anterior, cromomerele
sunt, de fapt, nite artefacte. n ultimul timp (detaliile vor fi date n paginile urmtoare) este
contestat i realitatea cromonemei.
Precizam anterior c tipul cromosomilor reprezint un caracter de diagnoz, o
caracteristic a speciei. Fr a contrazice aceast afirmaie, se cuvine precizat c tipul (forma)
cromosomilor poate varia ntre anumite limite, n funcie de specializarea i starea fiziologic a
Fig. 4. Tipurile de cromosomi. 1 - cromosom M (metacentric); 2 - cromosom m (median); 3 - cromosom sm
(submedian); 4 - cromosom st (subterminal = subtelocentric); 5 - cromosom T (telocentric). Prin culoarea gri a
coloanei se red zona n care se poate gsi centromerul. Desigur, braul de sus se scurteaz cu poriunea cu care se
alungete cel de jos, n aa fel nct raportul dintre ele s se situeze ntre limitele precizate anterior (dup Bra,
1999)
celulei. Uneori, n cadrul aceluiai individ, se constat i o variabilitate numeric a cromosomilor,
tot n corelaie cu structura i funciile anumitor esuturi.
De regul, cel mai propice stadiu pentru investigarea numrului i tipului cromosomilor l
reprezint metafaza diviziunii mitotice. Puternic spiralizai, ataai de fibrele fusului n zona
ecuatorial, n aceast faz cromosomii etaleaz conformaia lor specific, form caracteristic
speciei creia i aparine individul (pot avea form de bastona sau forma literelor V, J ,I ,O etc.)



2.1..3.2. Mrimea cromosomilor eucariotelor
Este o caracteristic de specie, dei poate varia destul de mult n cadrul unei populaii, n
cadrul unui individ i chiar n aceeai celul, n funcie de faza de diviziune n care se afl aceasta
din urm. Lungimea cromosomilor variaz i n funcie de biotopul pe care-l ocup o populaie n
cadrul arealului speciei, fiind influenat de temperatur, anumite substane chimice etc.. n
general, mrimea cromosomilor variaz ntre 1 i 50 microni pentru lungime i ntre 0,1 i 2 microni
pentru diametru.
n principiu se admite c lungimea cromosomilor este direct proporional cu
numrul de gene pe care le conin. Realitatea este, ns, mult mai complicat.
2.1.3.3. Numrul cromosomilor la eucariote
Este un alt caracter de diagnoz, dei cunoate i el o amplitudine de variabilitate suficient
de larg. n lumea vie numrul de cromosomi variaz ntre 2, la Ascaris megalocephala i cteva
sute, la Amoeba proteus. Pentru caracterizarea unei specii, sub aspectul numrului de cromosomi,
se folosesc simbolurile: x, n, 2n i NF.
Fig. 5. Reprezentarea schematic a morfologiei i organizriii cromosomului la eucariote (prelucrare dup Tudose,
1992)
- 2n reprezint numrul de cromosomi din celulele somatice ale indivizilor oricrei specii
eucariote;
- prin n se desemneaz numrul haploid de cromosomi, caracteristic celulelor gametice
(sexuale) ale indivizilor speciilor eucariote;
De regul, n cadrul unui gen, totalitatea speciilor provine dintr-o specie ancestral, prin
evoluie divergent. Procesul a implicat, printre altele i modificarea numrului de cromosomi, prin
autopoliploidizare, pseudopoliploidizare, aneuploidizare, amfipoliploidizare etc.. Numrul
cromosomial de la care s-a plecat, n cazul unei serii poliploide de pild, reprezint numrul
cromosomial de baz, notat cu x. La diploidul de origine, numrul de baz coincide cu numrul
haploid (x = n). Evident, x rmne acelai pentru triploid, tetraploid etc., n modificndu-se n
concordan cu 2n. Spre exemplu, n genul Papaver, secia Oxytona exist speciile Papaver
bracteatum (2n = 14, n = 7, x = 7), Papaver orientale (2n = 28, n = 14, x = 7) i Papaver pseodo-
orientale (2n = 42, n = 21, x = 7). Este clar c n variaz n funcie de 2n, n timp ce x (numrul
fundamental de cromosomi) rmne acelai, cele trei specii fiind 2x, 4x i 6x.
Alteori, o serie poliploid nu provine printr-o poliploidizare real, ci prin pseudopoliploidie.
De exemplu, dac o specie are 2n = 8 cromosomi metacentrici, mediani, submediani sau
subterminali, prin fisionarea cromosomilor dintr-o pereche, dou, trei sau toate perechile, vor
rezulta 2n = 10, 2n = 12, 2n = 14, sau 2n = 16 cromosomi. Dac, ns, se va determina cantitatea
de ADN per nucleu, se va constata c rmne constant, la toate aceste numere de cromosomi.
Pe de alt parte, dac se vor numra braele cromosomiale, din cariotipurile efectuate pe baza
numerelor menionate, se va constata c cifra este aceeai 16. Prin urmare NF (numrul
fundamental de brae) a rmas constant, sugernd c speciile din respectiva serie nu sunt
aneuploizi sau poliploizi adevrai ci pseudoaneuploizi sau pseudopoliploizi.
2.1.3.4. Structura intern a cromosomilor la eucariote
Realizri remarcabile n descifrarea infrastructurii cromosomilor se datoresc cercetrilor
efectuate de Hewish & Brugoyne (1973) care au constatat c prin tratarea cromatinei cu
endonucleaze activate cu Ca
++
i prin supunerea produselor rezultate la electroforez, se obineau
repetiii de fragmente de ADN de aproximativ 200 pb (perechi de baze), repetiii ce s-au dovedit a fi
un constituient permanent i ubiquitar al cromosomilor, cunoscut sub numele de nucleosom.
Pe de alt parte, prin microscopie electronic s-au identificat bobie elipsoidale de
aproximativ 11 nm n diametru i 6 nm n nlime, legate ntre ele prin fire subiri de acid
dezoxiribonucleic. Aceste bobie nu sunt altceva dect nucleosomii. Pe de alt parte, digestia
cromatinei cu nucleaze a evideniat existena unor formaiuni de aproximativ 146 pb care nu sunt
disociate prin digestie. Mai mult dect att, uneori, un set de asemenea formaiuni rmne intact.
Conform datelor de microscopie electronic, aceste seturi sunt asociaii de nucleosomi.
Nucleosomul este considerat, deocamdat, structura de baz a cromosomului. Analizele cu
raze X au dovedit c nucleosomii sunt legai ntre ei prin ADN neasociat cu histone (n unele
manuale de specialitate sunt i alt tip de afirmaii), fiind sub forma unei fibrile de cca 10 nm
grosime. Aceast fibril se continu de la un capt la altul al cromosomului, pliat (mpachetat)
foarte compact. Cromosomii sunt, deci, cromatin suprastructurat.
Cromatina este numele conferit substanei totale din care sunt alctuii cromosomii. n
ciclul mitotic sau meiotic, cromatina se coloreaz rapid i este uor vizualizat. n interfaz este
vizibil doar heterocromatina, partea vizibil n timpul diviziunii primind numele de eucromatin
(ambele noiuni vor fi analizate, pe larg, ulterior). Regiunile heterocromatice ale cromosomilor sunt
considerate ca fiind heteropicnotice (n limba greac pycnosis =dens). Intensitatea colorrii lor
poate varia de la o etap a ciclului celular la alta.
Fiecare cromosom dintr-o celul eucariot, conine o macromolecul lung de ADN, care
se ntinde de la un capt al cromosomului la cellalt, prin centromer. Aceast macromolecul
gigantic este supermpachetat, n cromosom, n numai civa microni. La om de exemplu, cel
mai mare cromosom conine o macromolecul de ADN de aproximativ 85 mm (85.000 m sau 8,5 x
10
7
nm). Aceast macromolecul gigantic este mpachetat ntr-un spaiu care atinge, n
metafaz, 0,5 m n diametru i 10 m n lungime, adic o mpachetare de aproxomativ 10
4
ori.
Nucleosomii reprezint peste 95% din greutatea cromatinei i sunt considerai a fi unitile
structurale de baz ale cromatinei. Structura lor poate fi redat schematic (Fig.5).
n celulele eucariotelor cu organizare superioar, nucleosomii conin aproximativ 195 - 200
pb de ADN, un octamer histonic alctuit din cte dou molecule de H
2A
, H
2B
, H
3
i H
4
i o
molecul de H
1
. Acesta nu este ns un nucleosom complet deoarece n figur nu este precizat i
un fragment de 27 pb, fragment care nu este direct asociat cu octamerul histonic. Acest fragment
conecteaz, ntre ei, doi nucleosomi consecutivi. n majoritatea cazurilor ns, octamerul histonic
are n jurul lui aproximativ 1,7 ture de ADN (adic 146 pb). Octamerul histonic mpreun cu cele
146 perechi de nucleotide alctuiesc miezul, smburele, particula central a nucleosomului,
cunoscut sub numele de nucleosomal sau histone core particle (Richmond et al., 1984). Acesta
este modelul nucleosomal propus pe baza determinrilor efectuate n soluie cu dispersie de
neutroni, dar i pe baza analizelor efectuate prin difracia razelor X (Bradbury & Baldwin, 1966;
Klug et al., 1985; Burlingame et al,1985). (Fig.7).

Rezumnd, putem preciza c exist trei etape n structurarea unui nucleosom i anume:
1. inima nucleosomului, alctuit din 146 pb i octamerul histonic (cte 2 molecule de H
2A,
H
2B
, H
3
i H
4
);
2. inima plus nc 22 pb, dnd un total de 168 pb, plus histona H
1
, alctuiete
cromatosomul;
3. cromatosomul plus nc aproximativ 32 pb (ajungndu-se la un total de aproximativ 200
pb.), formeaz nucleosomul.


Fig.6 Diagrama unui nucleosom n jurul cruia se nfoar ADN pe aproximativ dou ture (model propus de
Brandbury, 1992)






Fig.7 Modelul structurii miezului octameric, cu aranjarea probabil a histonelor. a - ADN-ul reacioneaz cu
tetramerii H3, H4 i formeaz smburele discului nucleosomal, b - discul cu histonele H2A i H2B, asociate n exteriorul
discului nucleosomal (dup Wagner, Maguire & Stallings, 1993)
Fig.8. Diagrama solenoidului. Sunt 6 nucleosomi per tur. Nucleosomii au o nlime de 5,7 nm i un diametru de 11
nm. ADN-ul se continu de la un nucleosom la altul (linia ntrerupt) (dup Widom & Klug, 1985)
Nucleosomii mpreun cu acidul dezoxiribonucleic linker alctuiesc o fibr cromatic de 11
nm grosime care se spiralizeaz, la rndul ei, dnd un solenoid de 30 nm grosime. Cercetrile nu
au dat nc un rspuns clar i definitiv relativ la structurarea solenoidului de 30 nm grosime (Fig.8).

ADN-ul din componena solenoidului este, la rndul lui, constituit din dou pri - o parte
ataat la miezul histonic i o alt parte cu rol spaiator (ali autori consider, dimpotriv, c are rol
de linker), care asambleaz nucleosomii n solenoid. Aa cum precizam mai sus, segmentele
spaiatoare (sau linkeri) sunt de lungimi variabile.
Structurarea ulterioar a cromatinei (organizarea solenoidului), pentru a forma cromosomii
vizibili n metafaz (sau regiunile cromosomiale heteropicnotice vizibile i n interfaz) (Fig.8), este
suficient de bine cunoscut i explicat. Prerile, ca i argumentele, celor mai muli cercettori
converg ctre concluzia n conformitate cu care fibra cromatic de 30 nm grosime se pliaz i
formeaz bucle (lauri), asigurnd astrfel structurarea cromosomilor.
Prin urmare, ntrebarea care se pune este urmtoarea: cum se ajunge de la o lungime de 3,7 x
10
4
m la una de 23 m? Cele mai multe imagini, obinute la microscopul electronic cu scanare,
relev situaia compactrii fibrei de ADN. Se observ plieri i contorsionri ale fibrei de cromatin,
care explic acceptabil scurtarea cromosomilor.
Cromosomii metafazici reprezint condensarea cromatic maxim (observat la
cromosomii eucariotelor). Rolul acestor formaiuni este acela de a organiza i mpacheta
macromolecula gigantic de ADN, permind segregarea ctre nuclei celulelor fiice.
2.1.3.5. Eucromatina i heterocromatina
Examinnd cu atenie cromosomii, pe lungimea lor, constatm c nu sunt uniformi sub
aspectele chimice, fizice i genetice. n primul rnd, difer reacia lor la tratamentul cu colorani
bazici, n sensul c unele segmente se coloreaz slab, cunoscute fiind sub numele de
eucromatice, iar altele se coloreaz mult mai intens i au fost desemnate cu numele de
heterocromatice.
Interesant i important de consemnat este faptul c zonele heterocromatice nu conin gene
n stare funcional, fiind considerate genetic inerte.
Eucromatina reprezint materialul normal, izopicnotic, deintorul informaiei genetice, cu
comportament tipic n cazul diviziunii celulare (se spiralizeaz, se condenseaz, se
decondenseaz i se coloreaz). La rndul ei, eucromatina este de dou tipuri: eucromatina
activ i eucromatina permisiv.
Eucromatina activ conine genele ce vor fi transcrise n ARNm.
Eucromatina permisiv este reprezentat de acea poriune din eucromatin care devine
activ doar dup ce accept (permite) semnale declanatoare (din categoria hormonilor, enzimelor
etc.). Procesul autoreplicrii semiconservative a ADN-ului, n faza S din ciclul diviziunii celulare,
ncepe la nivelul eucromatinei. n consecin, replicarea eucromatinei este mult mai timpurie, n
comparaie cu cea a heterocromatinei.
Heterocromatina reprezint materialul unor regiuni (uneori al unor ntregi cromosomi)
heteropicnotice, caracterizate prin structur dens i compact, inclusiv n telofaz, interfaz i
profaza timpurie. Din aceste cauze, heterocromatina se coloreaz intens i este vizibil i n
interfaza ciclului celular (n nucleii celulelor n interfaz).
Zonele heterocromatice sunt rspndite pe ntreaga lungime a cromosomului, dar mai ales
n jurul centromerului, unde formeaz heterocromatina centromeric. Destul de frecvent este
localizat i n apropierea organizatorilor nucleolari i spre capetele cromosomilor. Cu aceast
ocazie se poate meniona faptul c n aceste zone cromosomiale (heterocromatice) au loc cele mai
frecvente ruperi ale cromosomilor.
Heterocromatina este componenta preferenial a cromosomilor sexuali i a celor
suplimentari (cromosomii B). Sunt unele specii (broatele estoase, unii viermi) la care
ntregul set cromosomial este heterocromatic.
Replicarea ADN-ului, n zonele eucromatice i heterocromatice, se desfoar asincron.
n ceea ce privete heterocromatina, ns, apar i unele aspecte deosebit de interesante.
De pild, n stadiile timpurii de dezvoltare embrionar, heterocromatina lipsete. Deci, ca o
concluzie fireasc, se poate accepta c ea nu se transmite de la o generaie la alta, ci se formeaz
ntr-un anumit stadiu al ontogeniei. Dup ultimele observaii i experimente, se pare c orice

regiune a cromosomului poate deveni, la un moment dat, heterocromatic. n consecin,
heterocromatina i eucromatina trebuiesc privite nu ca uniti distincte i discontinue ale
cromosomilor, ci stri ale cromatinei, dinamice att n timp ct i n spaiu.
O alt clasificare a tipurilor de heterocromatin a fost propus de Brown, n 1965. n
conformitate cu aceast clasificare, heterocromatina poate fi constitutiv i facultativ.
Heterocromatina constitutiv este identificat n cromosomul Y de la Drosophila
melanogaster sau de la alte specii i are ca trstur definitorie faptul c se constituie nc de la
nceputul vieii individului i rmne n aceast stare (genetic inactiv) pe tot parcursul dezvoltrii
individuale. Heterocromatina constitutiv poate fi prezent i n ali cromosomi, fiind localizat (de
obicei) de ambele pri ale centromerului.
Heterocromatina facultativ este considerat cea din unul dintre cei doi cromosomi X, de la
femelele de mamifere de pild, care devine genetic inactiv i se evideniaz n nucleul interfazic
sub forma unui corpuscul intens colorat, cunoscut sub numele de cromatin sexual sau corpuscul
Bar, bastonaul de tob (drum-stick) etc. n acest context, unul dintre cromosomii X devine
nefuncional, asigurndu-se astfel egalitatea ntre cele dou sexe. Fenomenul este cunoscut sub
numele de compensaie de doz. Important este faptul c heterocromatina facultativ are
capaciti reversibile, astfel nct, n momentul n care cromosomul X inactivat de la femel ajunge
s fie unicul cromosom X de la mascul, el devine funcional. Dar el devine activ i n ovulul n care,
din ntmplare, nimerete. Apoi, dac prin fecundarea respectivului ovul se ajunge din nou la un
zigot femel, iniial, acesta va avea ambii cromosomi X funcionali. n stadiul de blastocist, unul
dintre ei devine nefuncional - capt statutul de cromatin sexual pentru ntreg ciclul ontogenetic.
Iniial se considera c zonele heterocromatice nu conin gene funcionale. Dar, prin studii
efectuate pe tomate, n 1961, s-a demonstrat c n heterocromatin exist gene funcionale - n
heterocromatina centromeric.
Heterocromatina poate aprea supercondensat, n unele regiuni cromosomiale, cum este
cazul la Zea mays. Aici apar un fel de noduli, denumii knobi, n care activitatea genic este
complet blocat. Numrul i topografia knobilor sunt constante pentru anumii cromosomi.
Deocamdat nu se cunoate rolul concret al knobilor i nici dac au sau nu gene cantonate pe ei.
Sunt doar, presupuneri cu privire la rolul lor n procesele de gametogenez.
2.1.3.6. Categorii de cromosomi
a. Cromosomii principali. Sunt cromosomii cu cea mai larg rspndire, altfel spus,
cromosomii a cror prezen este considerat normal pentru celulele somatice i pentru cele
sexuale normale i sunt grupai n dou clase: cromosomii A i cromosomii B.
I. Cromosomii A sunt cromosomii tipici, normali ai complementului cromosomial ce
definete o specie. Ei se comport constant (de obicei) att sub aspect tipologic (M, m, sm, st i
T), ct i sub aspect numeric.
II. Cromosomii B, supranumii i cromosomi accesorii sau suplimentari, sunt cromosomii
aflai n exces, putnd fi n numr variabil, att la plante, ct i la animale. Un exemplu tipic de
plant cu cromosomi B este Zea mays.
Numrul cromosomilor B este extrem de variabil, nu numai de la individ la individ, ci i ntre
esuturile aceluiai individ. Cromosomii B nu manifest fenomenul de omologie, nici ntre ei i nici
cu cromosomii A. Sunt, de obicei, heterocromatici, mici i ineri din punct de vedere informaional.
n diviziunea celular, distribuia lor nu este egal ctre celulele fiice.Nu li se cunoate originea, ci
se presupune doar c au aprut din regiunile centrale ale unor cromosomi A, prin pierderea de
ctre acetia a extremitilor (extremiti ce s-au putut ataa la ali cromosomi A,
modificndu-le constituia i, deci, coninutul informaional). n context, trebuie menionat c nu li se
cunoate nici rolul, deoarece lipsa lor (parial sau total) nu perturb existena individului purttor.
Dimpotriv, uneori, prezena lor este duntoare.
b. Cromosomii secundari, adic acei cromosomi care coexist cu cromosomii A i B,
numai n anumite celule.
n aceast categorie intr cromosomii uriai sau politenici din glandele salivare de la
Drosophila melanogaster, Chironomidae i alte insecte, cromosomii lampbrush (perie de sticl de
lamp) prezeni n oocitele vertebratelor, n profaza meiozei etc.
1. Politenicii sau cromosomii uriai au fost descoperii de ctre E. Balbiani (citolog
italian), n 1881, n glandele salivare de Chironomus. Ca dimensiune, ei depesc de 100-200 ori
lungimea cromosomilor normali, coninnd de peste 1000 de ori mai multe cromoneme.
Cromosomii politenici au fost depistai i n unele celule somatice ale larvelor de diptere - cum ar fi
tubul digestiv, tubulii lui Malpighi etc., fiind prezeni chiar i la unele plante (n sinergide) i la alte
specii de nevertebrate. Evident, din considerente didactice, cromosomii politenici tipici sunt
exemplificai prin cei din glandele salivare de Drosophilla melanogaster.
Cauza apariiei acestor cromosomi este relativ simpl - celula n care ei se gsesc, nu se
divide, ci doar i mrete dimensiunile. Nucleul respectivelor celule se gsete ntr-o perpetu
stare de interfaz (pe ntreaga durat a stadiului larvar). Pe de alt parte, fenomenul are i o alt
cauz. Cromosomii perechi se apropie i se unesc. Este fenomenul cunoscut sub numele de
conjugare somatic. Concomitent cu creterea larvei, fiecare cromosom se mrete, prin
replicarea cromatidelor i, implicit, a cromonemelor, fr migrarea lor la polii celulari. n final,
fiecare cromosom ia aspectul unui fascicul de filamente (filamentele reprezentnd cromonemele),
de unde i numele lor de politenici.
n esen, avem un fenomen tipic de endomitoz - adic reduplicarea cromosomilor fr
separarea i migrarea lor.
Cromosomii uriai de la Drosophila melanogaster formeaz o figur tipic, fiind constituii
din cinci brae lungi i unul mai scurt. La punctul de ntretiere formeaz cromocentrul. Unul
dintre braele lungi se noteaz cu X i reprezint cromosomii X, altele dou sunt notate cu 2S i
2D, celelalte cu 3S i 3D, iar braul scurt cu 4.
2. Cromosomii lampbrush sunt tot cromosomi uriai. Forma lor se datoreaz conjugrii
cromosomilor omologi ntr-un singur complex. n plus, cromosomii sunt puternic despiralizai i
formeaz bucle simetrice cu orientare perpendicular pe axul complexului. Cromosomii de tip
lampbrush sunt prezeni n oocitele amfibienilor, molutelor, echimodermelor, petilor, reptilelor, la
unele mamifere i chiar la ceap. O asemenea conformaie se gsete i la cromosomul Y de la
Drosophila melanogaster.
La unele specii, aceti cromosomi ating lungimea de peste 1000, fiind considerai cei mai
lungi cromosomi. Diametrul lor ns este foarte mic, uneori fiind att de subiri nct se situeaz la
limita de rezoluie a microscopului optic.
2.1.3.7. Cariotipul i idiograma
Cnd am prezentat categoriile de cromosomi, am precizat c se are n vedere existena
unei categorii de cromosomi principali, grupai n clasa A, reprezentnd cromosomii cu cea mai
frecvent i normal prezen n celulele somatice i sexuale ale tuturor speciilor.
Detaliind, precizm c la speciile care posed un determinism cromosomial al sexelor,
cromosomii pot fi sbmprii n dou grupe - autosomi i heterosomi (sau alosomi, gonosomi,
cromosomi ai sexului etc.). Evident, majoritatea membrilor complementului cromosomial sunt
autosomi. De obicei exist doi heterosomi, excepie fcnd speciile al cror determinism
cromosomial al sexelor este asigurat de heterosomi multipli i cele cu determinism sexual numeric
cromosomial.
Cariotipul, n concordan cu raportul Conferinei Internaionale de la Denver (din 1960),
ntrunit pentru standardizarea cromosomilor umani, poate fi definit astfel: ordonarea perechilor
de cromosomi omologi, provenind dintr-o singur metafaz mitotic, n ordinea
descrescnd a lungimii lor, cu centromerul plasat pe o linie imaginar (Fig.9, 10).
Idiograma reprezint redarea grafic a lungimilor medii ale cromosomilor fiecrei
perechi de omologi, obinute pe baza a cel puin 10 metafaze, din celule diferite provenite de
la indivizi diferii (Fig.11). Se nelege c idiograma este mult mai reprezentativ pentru
caracterizarea cromosomologic a unei specii.
n stabilirea corect a perechilor de cromosomi omologi, constriciile secundare pot juca un
rol definitoriu. De obicei, constriciile secundare nu afecteaz aceleai regiuni la diverii
cromosomi. n plus, s-a constatat c aceste constricii secundare sunt mult mai uor observabile
dac se administreaz cromosomilor unele tratamente speciale (cu ageni chimici, fizici sau
biologici, cum ar fi: hidrazida maleic, 5-bromdezoxiuridina, virusul SV40sau al herpesului, dac se
cultiv celulele pe mediu fr calciu, dac se asigur temperaturi sczute etc.).
Mai recent s-au elaborat i alte metode de identificare exact a cromosomilor. Una dintre
acestea este cea a bandrii. Prin bandare, fiecare regiune a unui anumit cromosom etaleaz un
model caracteristic de benzi transversale, ceea ce permite identificarea cu mare siguran a
cromosomilor, facilitnd observarea i cuantificarea diferitelor aberaii structurale sau numerice.
O alt tehnic, extrem de modern, presupune determinarea coninutului de ADN n lungul
unui cromosom. n acest sens, se recurge la microspectrofotometrie.










Fig. 9. Metafaz la Salmo gairdneri Rich (dup Minciu i Bra, 1986)

Fig.10. Cariotipul speciei Salmo gairdneri Rich., efectuat pe baza metafazei anterioare (dup
Minciu i Bra, 1986)





INTREBARI DE VERIFICARE
1. Definii cromosomul
2. Precizarea caracteristicilor materialului genetic al virusurilor si viroizilor
3. Caracterizarea cromosomului bacterian si a modului sau de impachetare
4. Cromosomul la eucariote structura
5. Nucleosomul
6. Tipuri de cromosomi
7. Cariotipul si idiograma

TEME PENTRU EXAMINAREA FINALA
1. Intelegerea notiunii de cromosom
2. Prezentarea diferentelor in privinta materialului genetic intre procariote si eucariote
3. Aprofundarea aspectelor legate de structura, ultrastructura si functiile cromosomilor la eucariote
4. Nucleosomii, eucromatina si heterocromatina
5. Tipuri de cromosomi, cariotipul si idiograma






Fig.11. Idiograma speciei Salmo gairdneri Rich (dup Minciu i Bra, 1986)


Unitatea de invatare 3

3. Teoria cromosomiala a ereditatii (morganismul)

Profesor la Universitatea Columbia, din New York, Thomas Hunt Morgan (1866-1945) a
sintetizat ntr-o teorie unitar multitudinea cercetrilor din domeniul geneticii, elabornd ceea ce a
rmas n tiin sub denumirea de "TEORIA CROMOSOMIAL A EREDITII".
Morgan a fost primul care a introdus Drosophila melanogaster ca model experimental n
genetic, fapt ce s-a dovedit a fi o alegere deosebit de inspirat. Ea crete uor n condiii de
laborator, pe medii ieftine, n recipiente de mici dimensiuni, iar timpul necesar pentru o nou
generaie este de circa 10 zile, la temperatura de 25
o
C i, n plus, este extrem de prolific. La
nivelul multor esuturi ale larvelor de D. melanogaster exist un tip special de cromosomi, numii
cromosomi uriai sau cromosomi politeni, care pot fi observai cu uurin la microscopul optic.
3.1. Obiectul studiului
Fr a intra n prea multe detalii, unele dintre ele fiind pe larg analizate n cadrul lucrrilor
de laborator, reamintim cteva trsturi ale musculiei de oet, care au "recomandat-o" ca material
optim pentru investigaiile de citogenetic.
Aceast specie a fost descris la mijlocul secolului al XIX-lea sub numele de Drosophila
ampelophila, ceea ce nseamn iubitoare de vi de vie (grecescul ampelos = vi de vie, philos =
iubitor). Ulterior i s-a dat numele de Drosophila melanogaster, adic iubitoare de rou, cu
abdomenul negru (grecescul drosos = rou, ap, lichid; philos = iubitor; melas = negru; gastris =
stomac).
Conform lucrrii An introduction to the Study of Insects ediia din 1964 revizuit de D. J.
Borror i de D. M. De Long, specia Drosophila melanogaster aparine genului Drosophila din
Familia Drosophilidae, Grupul Acalyptratae, Seciunea Schizophora, Subordinul Cyclorrhapha;
Ordinul Diptera, Diviziunea Endopterigota (Holometabola), Subclasa Pterygota, Clasa Insecta
(Hexapoda), ncrengtura Artropoda.
Drosophila melanogaster are aproximativ 2 mm lungime, corpul de culoare gri-glbuie i doi
ochi compui mari, de culoare roie-crmizie (la tipul slbatic). n regiunea capului mai prezint
trei ochi simpli numii oceli i dou antene mici, aristate, formate din cte trei segmente; pe cel de-
al treilea segment antenal aflndu-se arista. Aparatul bucal este adaptat pentru lins i supt,
Drosophila consum hran lichid sau lichefiat, n prealabil, cu ajutorul secreie glandelor
salivare.
Ca toate Dipterele, musculia de oet prezint dou aripi mari, mezotoracice, aripile de pe
metatorace fiind transformate n haltere (organe de echilibru). Pe fiecare segment toracic se afl
cte o pereche de picioare adaptate la mers.
Numrul segmentelor abdominale vizibile este diferit la cele dou sexe apte la femel i
cinci-ase la mascul. Acest numr mic de segmente la masculi este consecina fenomenului de
telescopare a ultimelor segmente abdominale.
Adulii de Drosophila melanogaster prezint dimorfism sexual, manifestat att prin diferene
dimensionale, ct i morfologice. Femelele sunt mai mari dect masculii. Au abdomenul oval cu
extremitatea posterioar puin ascuit. La masculi vrful abdomenului este rotunjit i colorat n
maron-negru.
Numrul de omatidii ce intr n alctuirea ochiului complex este diferit le cele dou sexe, i
anume: 780 la femel, respectiv, 740 la mascul. Masculii prezint aa numitul pieptene sexual
care servete la imobilizarea femelei n timpul acuplrii. Acesta este format din zece periori negri,
rigizi, ce se gsesc pe primul articol tarsal al picioarelor anterioare (perechea I), mai precis n
apropierea articulaiei dintre tibie i tars. Evident c diferenele cele mai nsemnate dintre mascul i
femel in de organizarea intern, mai ales de anatomia sistemului reproductor.
Sexul larvelor se determin innd cont de poziia i mrimea gonadelor. Acestea sunt
localizate n partea postero-lateral a larvei, n corpii grai. Testiculele sunt mult mai mari dect
ovarele (de trei ori mai mari) i au o form oval. Ele pot fi observate cu ochiul liber datorit
transparenei tegumentului larvei.
Ca toate dipterele, Drosophila melanogaster prezint metamorfoz complet (este o
insect holometabolic), ciclul su vital parcurgnd stadiile de ou, larv, pup i adult. Durata
ontogeniei variaz n funcie de temperatur, umiditate, compoziia mediului nutritiv etc.
Stadiul de ou. Este cuprins ntre momentul depunerii oului de ctre femela adult i cel al
apariiei larvei corespunztoare. n partea anterioar, dorsal, oul prezint o pereche de filamente
(apofize) cu rolul de a mpiedica scufundarea sa n mediul lichid.
Stadiile larvare la Drosophila melanogaster sunt n numr de trei, fiind separate ntre ele
prin dou nprliri.
Larva de stadiul I prsete oul prin micropil, este mic, foarte mobil i se hrnete cu
mare repeziciune. Este o larv de tip apod (fr apendici), acefal (capsula cefalic este nfundat
complet n torace). Aparatul bucal de tip primitiv (adaptat pentru rupt i mestecat) prezint
mandibule puternice, ca nite crlige, cu ajutorul crora larva ptrunde n materialul nutitiv. Acest
prim stadiu larval dureaz aproximativ 24 ore. Pe msur ce larva crete, cuticula sa chitinoas
devine nencptoare, astfel, c larva o prsete i i sintetizeaz o nou cuticul (nprlete).
Larva de stadiul II apare n urma primei nprliri. Aceasta este mai mare i continu s se
hrneasc timp de aproximativ 24 ore, dup care sufer nc o nprlire.
Larva de stadiul III apare dup cea de-a doua nprlire (dup aproximativ ase zile de la
fertilizare). Aceasta pote atinge 4,5 5 mm lungime i se dezvolt pe parcursul a 48 ore.
Stadiul de pup are o durat variabil, fiind profund influenat de temperatur. La
Drosophila melanogaster pupa este de tip coarctat pup butoia, o variant a pupei adectice (cu
mandibule nesclerificate) de tip liber, caracterizat prin aceea c larva din stadiul III mpupeaz n
interiorul ultimei exuvii larvare. La nceput nveliul pupal chitinos este alb i moale. Odat cu
scurtarea corpului larvei el se ntrete i se nchide la culoare, fiind numit i puparium. Are form
oval, msoar 2,5 3 mm i prezint n partea anterioar dou prelungiri ce corespund
spiraculelor evaginate ale fostei larve.
Stadiul de imago. n urma transformrilor ce au loc n interiorul nveliului pupal, se
formeaz adultul care eclozeaz printr-o deschidere circular din regiunea anterioar a
pupariumului. La nceput insecta este foarte lung, cu aripile nedesfcute, lipite de corp i are o
culoare deschis. Aceste caracteristici ale adulilor nou eclozai constituie criteriile care i
deosebesc de insectele btrne.
Indivizii speciei Drosophila melanogaster sun frecvent ntlnii n natur, pe fructe care au
nceput s fermenteze (mere, pere, prune, struguri etc.). n laborator, musculia de oet poate fi
cultivat pe medii artificiale care conin zahr i drojdie componente ce mijlocesc procesul de
fermentaie. Compoziia mediului are influene asupra ciclulului vital, viabilitii i prolificitii
insectei.
Musculia de oet prezint o prolificitate ridicat. n cursul vieii, o femel depune cteva sute
de ou. In majoritatea cazurilor numrul oulor depuse este de 200-300. Bridges precizeaz c
ameliorarea condiiilor de via determin o cretere a numrului de ou depuse, uneori acesta
ajungnd pn la 2000. In medie o pereche de insecte d natere la aproximativ la 170
descendeni.
Adulii de Drosophila melanogaster, n condiii de laborator, triesc aproximativ 3-4
saptamni. Longevitatea depinde de condiiile n care sunt crescute insectele i anume:
temperatura, umiditatea, compoziia mediului nutritiv, densitatea populaiei, prezena n mediu a
paraziilor etc.
n condiii optime indivizii de Drosophila pot supravieui chiar 22 de sptmni (153 de zile).
Exista unele mutante care au o viabilitate mult mai mare dect a tipului slbatic ns, de obicei,
mutantele sunt mai puin viabile.
n concluzie, putem afirma c sunt argumente care recomand aceast specie pentru studii
de genetic i anume:
a. Rapiditatea succesiunii generaiilor (circa 10-15 zile pentru un ciclu ontogenetic complet,
la 24
o
C).
b. Prolificitate crescut (circa 200 ou/femel).
c. Pretenii sczute fa de condiiile de cretere (se dezvolt bine n condiii artificiale).
d. Numr mic de cromosomi (2n=8) uor identificabili. Astfel, perechea I este alctuit din
cromosomi n form de bastonae drepte la femel i unul n form de bastona drept i altul ndoit
la un capt, n cazul masculului. A se reine acest aspect, ca argument pentru fundamentarea
ipotezei plasrii genelor pe cromosomi i pentru considerarea respectivei perechi ca reprezentnd
cromosomii sexului (pentru femel, sunt notai cu XX, iar pentru mascul, cu XY).
Cromosomii din perechile II i III sunt de forma literei "V". iar cei ai perechii IV sunt
punctiformi. Dac cromosomii sexului mai poart i numele de heterosomi, restul sunt denumii
autosomi.
Principala caracteristic a drosofilei care, pe lng calitile amintite anterior, o recomand
drept un material extrem de adecvat pentru investigaii genetice, o constituie mutabilitatea ei
ridicat (rata relativ nalt de apariie a mutaiilor, att n mod spontan, ct i sub impactul anumitor
tratamente). Practic, pentru fiecare dintre caracterele morfo-anatomice s-au identificat i descris
mutaii. Sunt stabilite i caracterizate, pn n prezent, peste 500 mutaii, viznd culoarea ochilor,
forma ochilor i a aripilor, culoarea corpului, pilozitatea i forma periorilor etc. Pentru Morgan,
mutaiile au constituit un excelent mijloc de a studia legitile transmiterii ereditare a caracterelor i
de a stabili mecanismele cromosomiale ale procesului.
n principiu, s-a pstrat metodologia mendelian a notrii genelor (factorii ereditari, n
concepia lui Mendel), dar s-a introdus o inovaie. n loc s se foloseasc, n mod aleatoriu, literele
alfabetului latin pentru desemnarea fiecrei gene, se folosete prima liter, primele litere sau un
grup de litere din cuvntul englezesc ce denumete prima mutant descoperit pentru caracterul
respectiv. Cel mai utilizat exemplu este acela referitor la culoarea ochilor.
n mod normal, drosofila are ochii de culoare roie. Prima mutant identificat, pentru acest
caracter a fost cea cu ochi albi. n consecin, ea a primit numele white, notarea ei convenional
fiind w. Evident, pentru forma cu ochi normali, dominant n ncrucirile cu mutantele, se putea
recurge la desemnarea prin W. S-a preferat, ns, utilizarea simbolului w
+
, ntruct exist i cazuri
de mutante dominante, a cror desemnare se face prin liter mare. Dar, a aprut o nou
complicaie. n cazul unor gene (vezi tabelul 4.2) exist o serie alelic (polialelia). Referindu-ne tot
la culoarea ochilor, menionm mutantele: sepia, eosin, ivory, vermillon, apricot etc. Desemnarea
lor ar putea fi fcut prin litere de la respectivele cuvinte (sp, e, i, v, a), dar, n acest caz,
desemnarea tipului slbatic ar avea mai multe simboluri (sp
+
, e
+
, i
+
, v
+
, a
+
etc.) i ar putea duce la
confuzii. n consecin, s-a recurs la un alt sistem, n care la prima mutaie se adaug indicativele
celor ulterior descoperite (w
sp
, w
e
, w
i
, w
v
, w
a
), situaie n care, pentru desemnarea tipului slbatic,
se recurge constant la o singur notaie - w
+
(Fig.12).
Cromosomii din perechea I
y, yellow (0,0) mutant ce prezint corp de culoare galben intens,
perii fiind cafenii cu vrful galben;
pn, prune (0,8) mutant cu ochi de culoarea prunei;
w, white (1-1,5) mutant cu ochi de culoare alb, ocelii fiind incolori, ca
i tuburile lui Malpighi. A fost prima mutant descoperit (n 1910, de
Lilian Morgan). Prezint numeroase alele;
w
a
, apricot (1-1,5) prezint ochi de culoare trandafirie-glbuie la
masculi i ceva mai galbeni la femele. Combinaia w
a
/w
a
;bw/bw are ochii
mai deschii la culoare dect mutanta apricot (w
a
/w
a
;bw
+
/bw
+
);
N, Notch (3,1) mutant cu aripile zimate;
cx, curlex (13,6) mutant cu aripile ndoite n sus;
ct, cut (20,0) mutant cu aripile reduse (tiate);
ras, raspberry (32,8) mutant cu ochi de culoarea zmeurei;
v, vermilion (33,0) mutant ce prezint ochi de culoare roie foarte vie,
ocelii fiind incolori. Combinaia v/v;bw/bw prezint ochi albi. Viabilitatea
este satisfctoare;
m, miniature (36,1) aripile sunt mici, depind cu puin abdomenul;
f, forked (56,6) prezint peri scuri i ndoii, bifurcai la vrf;
B, Bar (57,0) mutant dominant, ce prezint ochi redui la un
segment;
Bx, Beadex (59,4) mutant cu aripi zimate;
car, carnation (62,5) mutant cu ochi de culoare rubinie-nchis.
Cromosomii din perechea II-a
al, aristaless (0,0) mutant fr ariste;
S, Star (1,3) mutant cu ochi n form de stea;
Cy, Curly (8,5) prezint aripile ndoite n sus. n stare homozigot
(Cy/Cy), aceast gen este letal;
dp, dumpy (13,0) mutant cu aripile tiate i reduse la aproximativ 3 2
din lungimea aripilor de latipulul slbatic;
b, black (48,5) prezint corp de culoare neagr;
pr, purple (54,5) mutant cu ochi purpurii;
ap, apterous (55,4) nu prezint aripi;
cn, cinnabar (57,5) mutant cu ochi de culoare roie aprins, ce se
nchide odat cu vrsta;
vg, vestigial (67) prezint aripile sub forma unor rudimente (vestigii), de
unde a primit i denumirea;
sf, safranin (71,5) prezint ochi de culoarea ciocolatei;
L, Lobe (72,0) prezint ochi redui ca mrime. n stare homozigot
(L/L) determin o reducere accentuat a ochilor i scderea viabilitii,
poate fi letal;
c, curved (75,5) mutant cu aripi subiri, deprtate i rsucite;
bw, brown (104,5) culoarea ochilor este cafenie deschis la natere i
se nchide dup mai multe zile. Este afectat i culoarea organelor
interne. Vasele i testiculele sunt incolore, iar tuburile lui Malpighi sunt
mai deschise la culoare dect la tipul slbatic;
Cromosomii din perechea III-a
dv, divergent (20,0) mutant cu aripile ndeprtate;
se, sepia (26,0) prezint ochi de culoare roie-cafenie, transpareni la
natere, nchizndu-se, cu timpul, pn la sepia (pot deveni chiar negri);
rs, rose (35,0) mutant cu ochi de culoare roz;
D, Dichaete (40,4) prezint cte doi periori mpreun;
p, pink (48,0) mutant cu ochi de culoare rubinie;
ma, maroon (49,7) prezint ochi de culoare castanie;
dw, dwarf (50,0) mutant pitic;
ss, scinelles (58,0) mutant caracterizat prin absena periorilor;
bx, bithorax (58,5) mutant cu mezotoracele dublat;
e, ebony (70,7) prezint corp de culoare neagr strlucitoare, mult mai
nchis dect la Wild type. Viabilitatea acestei mutante este 80% din cea
a tipului slbatic;
det, detachet (72,5) mutant cu ochi sticloi;
ro, rough (91,1) prezint ochi micorai, cu suprafa neregulat.
Cromosomii din perechea IV-a
M4, Minute 4 (0,0) mutant cu periori subiri;
bt, bent (0,0) mutant cu aripile ndoite n jos;
sv, shaven (0,1) prezint peri abdominali rari, mai puini dect la tipul
slbatic;
ey, eyeless (0,2) mutant cu ochi redui la jumtate sau la un sfert din
mrimea celor de la tipul salbatic. Uneori ochii lipsesc complet;
Cat, Cataract (6,7) prezint ochi cu suprafaa neregulat;
spa, sparkling (93,0) mutant cu ochi proemineni, ce au suprafaa
neregulat.
Fig. 12. Mutante de Drosophila melanogaster


3.2. ARGUMENTE PENTRU PLASAREA GENELOR (FACTORILOR EREDITARI) PE
CROMOSOMI

Comportamentul cromosomilor s-a demonstrat a fi similar cu dinamica factorilor ereditari
descris de Mendel. Argumentul imbatabil pentru considerarea cromosomului drept suport
material al factorilor ereditari (pentru plasarea genelor pe cromosomi) l-au furnizat experimentele
efectuate cu drosofila. S prezentm doar unul dintre ele.
n experimentele efectuate de Mendel, utiliznd mazrea cu bobul galben i cea cu bobul
verde, segregarea n F
2
era aceeai, indiferent de culoarea printelui ales ca mascul i a celui ales
ca femel. Nu acelai lucru se constat, ns, cnd se fac ncruciri reciproce ntre indivizii w
+
i
w de drosofila. Situaia a condus la concluzia c gena responsabil de manifestarea respectivului
caracter este cantonat pe unul dintre cromosomii sexuali.
Iat care sunt rezultatele n cele dou tipuri de ncruciare:

P w
+
w
+
X wy
F
1

w
+
w
50%
X
w
+
y
50%
+ cu ochi de culoare roie
F
2

w
+
w
+
25%
w
+
y
25%
w
+
w
25%
wy
25%
100% cu ochi roii; 50% ochi roii;50% ochi albi
Tab. 13. Dinamica genotipurilor i fenotipurilor n ncruciri reciproce.

n ncruciarea reciproc:

P ww x w
+
y
F
1

ww
+
50%
x
wy
50%
cu ochi roii; cu ochi albi
F
2

ww
25%
w
+
w
25%
wy
25%
w
+
y
25%
50% cu ochi roii;50% cu ochi albi
50% cu ochi roii;50% cu ochi albi
Tab. 14. Dinamica genotipurilor i fenotipurilor n ncruciri reciproce

ntruct att masculii ct i femelele au trei perechi identice de autosomi, diferenele
constnd n prezena heterosomilor pereche (XX) la femele sau nepereche (XY) la masculi, rezult
c respectiva gen este plasat pe unul dintre cromosomii sexului i anume pe cromosomul X,
deoarece femelele heterozigote se comport (fenotipic) asemenea celor homozigote dominante, n
timp ce masculii (fiind hemizigoi) se manifest recesiv sau dominant, n funcie de tipul
cromosomului X pe care l-au primit (cu gena slbatic sau cu alela mutant plasat pe el).
Fenomenul, cunoscut i sub numele de sex linkage, se constituie n cauz pentru abaterea de la
tipul mendelian de segregare.
Un alt exemplu, care confirm ipoteza plasrii genelor pe cromosomi, l constituie
asocierea dintre lipsa unui cromosom din perechea IV i lipsa ochilor, la aceeai insect.
Prin urmare, pe un cromosom, ntr-un anumit loc, numit locus, se afl plasat o gen. Pe
cromosomul omolog, n aceeai poziie, adic n acelai locus, se afl plasat aceeai gen sau
una dintre alelele ei.
3.3. PLASAREA LINIAR A GENELOR PE CROMOSOMI
n paginile anterioare am demonstrat, fr dubii, c genele sunt plasate pe cromosomi. Dar,
un calcul extrem de simplu ne arat c numrul de cromosomi este mult mai mic, fa de numrul
caracterelor etalate de un individ. La Drosophila melanogaster de pild, s-au identificat mai multe
sute de caractere i numai 8 cromosomi. innd cont de omologia cromosomilor, n fapt exist
patru perechi i, avnd n vedere raportul de alelism al genelor, putem vorbi doar de 4 grupe de
linkage ca entiti diferite. Deci, genele responsabile pentru cele cteva sute de caractere sunt
cantonate n patru cromosomi, ntr-un cromosom existnd mai multe gene. Dar cum sunt ele
plasate, n mod concret, ntr-un cromosom? i ce dovezi avem, totui, c mai multe gene sunt
plasate n acelai cromosom?
Argumentele pentru plasarea mai multor gene pe acelai cromosom aparin tot colii lui
T.H. Morgan i au fost susinute de experimente extrem de simple i clare, totodat.

ncruciarea s-a derulat dup urmtoarea schem:

P
pr
+
vg
+
pr
+
vg
+

X
pr vg
pr vg
G pr
+
vg
+
X pr vg
F
1

pr
+
vg
+
pr

vg
X
pr
+
vg
+
pr vg
G pr
+
vg
+
prvg X pr
+
vg
+
prvg
F
2

pr
+
vg
+
pr
+
vg
+

pr
+
vg
+

pr vg
pr
+
vg
+
pr vg
pr vg
pr vg
Tab. 15. Dihibridare, implicnd gene linkate, la Drosophila melanogaster

Segregare genotipic: 25% homozigot dominant + 50% heterozigot, + 25% homozigot, recesiv
Segregare fenotipic: 75% dominant + 25% recesiv

S-a efectuat o experien de hibridare (tip dihibridare), ntre indivizi de D. melanogaster ce
difereau ntre ei prin culoarea ochilor i forma aripilor. Femela era fenotipic normal
(pr
+
pr
+
vg
+
vg
+
), iar masculul dublu mutant - avea ochii purpurii (prpr) i aripile vestigiale (vgvg). n
F
1
s-au obinut doar indivizi fenotipic normali. Prin ncruciarea lor, n F
2
, n loc s se obin
segregarea de tip mendelian, de 9:3:3:1, s-au obinut doar dou categorii de fenotipuri - 75% de
tip parental dominant i 25% de tip parental recesiv. Deci, un raport tipic monohibridrii (adic
3 : 1). Prin urmare, se impune o prim concluzie. Cele dou caractere nu segreg independent. De
aici supoziia c ele sunt plasate (genele ce le determin) pe acelai cromosom. Adic, pentru
individul normal vom avea pr
+
vg
+
, i pr wg pentru cel mutant.
pr
+
vg
+
pr wg
Pentru a elimina confuziile, precizm c cele dou gene sunt cantonate pe cromosomii
perechii a II-a. Indicativul "pr" red mutanta purple (purpuriu, n englez).
Prin urmare cele dou gene sunt localizate pe acelai cromosom i se transmit mpreun.
Fenomenul este cunoscut, n genetic, sub numele de linkage (nlnuire, legare). Este, n fond,
nu numai o abatere, ci o completare a legii segregrii independente a caracterelor, demonstrat de
Mendel.


3.4. TRANSMITEREA NLNUIT A TUTUROR GENELOR PLASATE PE UN CROMOSOM
(LINKAGE)

Autenticitatea linkage-ului a fost confirmat i prin retroncruciarea de tipul Test-cross
(F
T
). Adic, un individ din F
1
(un mascul) se ncrucieaz cu unul dublu mutant (o femel). Se obin
dou clase fenotipice i anume: 50% indivizi normali i 50% indivizi dublu mutani. Precizm c
este obligatorie respectarea sexelor indicate, deoarece masculul nu prezint fenomenul de
crossing-over i, n consecin, rezultatele experimentului sunt constante.

P(F
1
)
pr
+
vg
+
pr

vg
x
pr vg
pr vg
G pr
+
vg
+
, pr vg x pr vg
F
T

pr
+
vg
+
pr vg
50%
pr vg
pr vg
50%

Heterozigoi cu fenotip normal
(dominant)
Homozigoi cu fenotip
recesiv(dublu mutant)
Tab. 16. Rezultatele retroncrucirii

Deci, att genotipic (Sg), ct i fenotipic (Sf), segregarea este de 1:1.
n consecin, cele 500 de gene identificate la Drosophila melanogaster au fost repartizate
n patru grupe de linkage, corespunztoare celor patru perechi de cromosomi omologi. Se cuvine
menionat faptul c mrimea unei grupe de linkage sau, altfel spus, numrul genelor plasate ntr-o
grup este n concordan cu mrimea cromosomului. Astfel, grupa a IV-a de linkage, fiind plasat
pe cromosomii perechii a IV-a (punctiformi), conine doar 12 gene.
Ca o concluzie, general, menionm c la fiecare specie, numrul grupelor de linkage este
identic cu numrul cromosomilor unui set haploid (genom).
In conformitate cu teoria linkage-ului, atunci cnd dou gene segreg mpreun, nseamn
c fac parte din aceeasi grup de linkage, iar cnd segreg independent (dup modelul
mendelian) nseamn c fac parte din grupe diferite de linkage - adic sunt plasate pe cromosomi
diferii.
La Drosophila melanogaster a fost posibil i localizarea concret a fiecrei gene ntr-un
anumit cromosom. Evident, au fost necesare nenumrate experimente de hibridare, n care se
luau, succesiv, tot alte perechi de caractere (gene) i se nota cu meticulozitate comportamentul lor
(dac segregau independent sau nu).

3.5. SEX-LINKAGE (TRANSMITEREA NLNUIT A GENELOR PLASATE PE HETEROSOMI)
Aa cum am precizat deja, specia Drosophila melanogaster are patru grupe de linkage,
adic are patru perechi de cromosomi. Mai exact drosofila are trei perechi de autosomi i doi
heterosomi identici la femele (notai XX) i diferii la masculi (notai XY). Prin experimente
proiectate i efectuate cu deosebit grij, T.H.Morgan i grupul su de cercettori au reuit s
demonstreze c una dintre genele responsabile pentru determinismul culorii ochilor este plasat
pe heterosomul X (vezi harta genetic), rezultatele ncrucirilor ntre indivizi normali i indivizi
mutani depinznd, ntotdeauna, de sexul mutantului.

3.6. CROSSING-OVER (SCHIMBUL RECIPROC DE GENE)
Aa cum precizam n rndurile anterioare, nu ntotdeauna genele aparinnd aceluiai grup
de linkage, se transmit mpreun. S-au constatat nenumrate excepii. n tentativa de a da
explicaii adecvate abaterilor de la regul, Morgan i echipa sa au constatat c ntre cromosomii
omologi poate avea loc un schimb reciproc de gene. Fenomenul a primit numele de crossing-
over.
Pentru genetic, au rmas clasice experimentele efectuate de Morgan i coala sa, n
demonstrarea realitii i autenticitii schimbului reciproc de gene.

3.6.1. Crossing-over ntre cromosomii sexului
Prin ncruciarea unei femele de Drosophila melanogaster, dublu mutant (cu dou mutaii
recesive, ale genelor localizate pe cromosomul X, determinnd culoarea galben a corpului i
culoarea alb a ochilor), cu un mascul normal, n F
1
s-au obinut doar indivizi de dou tipuri - deci,
o segregare de 1:1. Femelele erau cu fenotip normal, dar heterozigote i masculii cu fenotipizare
mutant, dar hemizigoi genotipic. Fenomenul a primit denumirea de ereditate n cruci (criss-
cross), deoarece fenotipul mamei se manifest la fii, iar cel al tatlui la fiice.
Prin ncruciarea indivizilor femeli i masculi din F
1
, s-a constatat apariia, n F
2
, a patru
clase de indivizi - dou clase conforme rezultatelor determinate de linkage i alte dou clase cu
recombinare de caractere. Proporia era de 49,25% pentru fiecare dintre primele dou clase i de
0,75% pentru fiecare din clasele cu recombinare.
Precizm c w reprezint mutanta pentru culoarea ochilor (ochi albi) i y reprezint
mutanta pentru corp galben (de la cuvntul englezesc yellow), w
+
i, respectiv, y
+
reprezentnd
genele normale.
Deci, plecndu-se de la femele dublu mutante i masculi normali, n F
1
s-a obinut o
segregare fenotipic (Sf) de 1:1 i una genotipic (Sg) tot de 1:1, femelele fiind heterozigote, cu
fenotip normal (dominant) i masculii hemizigoi, cu fenotip recesiv (mutant).
Schematic, ncruciarea este redat astfel:

Prini
X
yw

X
yw
x
X
y+w+
Y
Gamei X
yw
x X
y+w+
, Y

F
1

X
yw

X
y+w+

X
yw
Y

Ga-
mei
ne-
recombinai
X
yw
, X
y+w+
x X
yw
, Y
recombinai X
y+w
, X
yw+

F
2

X
yw
X
yw
X
yw
Y
X
y+w+
X
yw
X
yw+
Y
X
y+w
X
yw
X
y+w

Y
X
yw+

X
yw+
X
yw+
Y
49,75% 49,75% 0,75% 0,75%
Tab. 17. Crossing-ower ntre cromosomii sexului

Teoretic, gameii indivizilor de F
1
trebuiau s fie doar de dou tipuri: la femele X
yw
i X
y+w+
,
iar la masculi X
yw
i Y. Dar rezultatele ncrucirii indivizilor din F
1
, dnd un cu totul alt raport de
segregare n F
2
i, mai ales, dnd o categorie de indivizi cu recombinri de caractere, s-a ajuns la
concluzia c a avut loc crossing-overul ntre cromosomii omologi i apariia a dou noi tipuri de
gamei n cazul femelelor: X
y+w
i X
yw+
. Prezena acestor gamei explic apariia indivizilor cu
fenotipuri recombinate, n F
2
. Acetia sunt att masculi, ct i femele, cu corp gri i ochi albi sau cu
ochi roii i corp galben.
Deci, ntre genele y
+
i w
+
i alelele lor, situate pe cromosomii X omologi, au avut loc
schimburi, rezultnd noi grupe de linkage. Adic, din y
+
w
+
i yw, au rezultat y
+
w i yw
+
, alturi de
tipurile parentale care s-au meninut.

3.6.2. Crossing-over ntre autosomi

Un alt experiment, efectuat de Morgan i colaboratorii si, a demonstrat existena crossing-
overului i ntre autosomi.
ncrucind o femel de Drosophila melanogaster cu corpul negru (b - de la black) i aripi
normale (vg
+
) cu un mascul cu corpul gri (b
+
) i aripi vestigiale (vg), n F
1
s-au obinut indivizi
heterozigoi b
+
bvg
+
vg, cu fenotipul normal.
ncrucindu-se indivizii din F
1
cu indivizi dublu mutani (ncruciare de analiz genetic), s-
a constatat c n F
T
, fenotipul indivizilor difer n funcie de sexul lor.
Astfel, dac se efectueaz o retroncruciare ntre un mascul din F
1
, heterozigot (b
+
bvg
+
vg)
cu o femel mutant (bbvgvg), n F
T
se obine segregarea de 1:1, ca n experimentele pentru
demonstrarea fenomenului linkage (adic reapar indivizii cu fenotip parental - corp negru i aripi
normale i corp gri cu aripi vestigiale). Deci, linkage-ul este total.

P
b vg
+
b vg
+

x
b
+
vg
b
+
vg
G b vg
+
x b
+
vg
F
1

b vg
+
b
+
vg
x
b vg
b vg
G b vg
+
, b
+
vg x b vg
F
T

b vg
+
b vg

b
+
vg
b vg
Sf 1 1
Sg 1(bbvg
+
vg) 1(b
+
bvgvg)
Tab. 18. Retroncruciarea unui mascul heterozigot , cu o femela dublu mutant
Precizam anterior c, n acest caz, este vorba de autosomi - mai concret, de perechea a II-
a de omologi. Atunci, cum se explic diferena de comportament dintre masculi i femele? S-a
ajuns la concluzia c, n cazul masculilor de Drosophila melanogaster, cromosomii din perechea a
II-a nu prezint fenomenul de crossing-over. Lipsa crossing-overului este valabil i pentru
cromosomii sexului (la mascul), n sensul c ntre cromosomii X i Y nu se cunoate existena
acestui fenomen.
n ncruciarea reciproc (retroncruciare) dintre o femel hibrid de F
1
(b
+
bvg
+
vg) i un
mascul dublu mutant (bbvgvg), n F
T
, pe lng tipurile parentale (corp negru i aripi normale; corp
gri i aripi vestigiale), mai apar nc dou clase fenotipice (care, n mod normal, nu trebuiau s
apar: corp gri i aripi normale; corp negru i aripi vestigiale). ntr-o populaie suficient de mare,
proporia indivizilor este de 41,5% pentru fiecare dintre tipurile parentale i cte 8,5% pentru
fiecare dintre tipurile recombinante. Deci, linkage-ul genelor b
+
i vg
+
se deregleaz i respectivele
gene "segreg", datorit schimbului reciproc de material cromatic ntre cromosomii omologi.
Rezult c femelele din F
1
pot forma patru tipuri de gamei - dou normale i dou
recombinate, primii fiind numii gamei crossing-overi, ceilali fiind gamei necrossing-overi.
P
b vg
+
b vg
+

x
b
+
vg
b
+
vg
G b vg
+
x b
+
vg
F
1

b vg
+
b
+
vg
x
b vg
b vg
GF
1

b vg
+
, b
+
vg
i b
+
vg
+
, b vg
x b vg
F
T

b vg
+
b vg
b
+
vg
b vg
b
+
vg
+
b vg
b vg
b vg
segregare
41,5% 41,5% 8,5% 8,5%
83,0 %
indivizi necrossing-overi
17,0%
indivizi crossing-overi
Tab. 19. Tipurile de indivizi aparui, cu i fr crossing-over, n ncruciarea reciproc.
3.6.3. Redarea schematic a crossing-overului
Rezumnd cele relatate pn aici, constatm c ntre doi cromosomi omologi, mai precis
ntre cte una dintre cromatidele cromosomilor omologi, poate avea loc schimb de material, prin
crossing-over simplu, dublu, triplu sau multiplu.
Atunci cnd se produce o singur ruptur are loc un singur schimb de gene, in sensul c un
segment cromatidic de lungimea uneia sau a mai multor gene i schimb poziia de pe un
cromosom pe cellalt. Evident, teoretic, crossing-overul simplu, n functie de zona n care se
produce, poate facilita schimbul a dou blocuri de gene, nu numai a unei gene.Dar, ntruct s-a
produs doar o singur ruptur, evident este vorba de un crossing-over simplu.
Crossing-overul dublu presupune dou rupturi care faciliteaz schimbul a dou gene, a
dou blocuri de gene etc.
Schematic, situaia poate fi redat astfel:
ABCDEF
abcdef
aBCDEF
Abcdef
AbCDEF
aBcdef
AbCdef
aBcDEF
AbCdEF
aBcDef
Cromosomii
omologi
iniiali, redai
printr-o
singur
cromatid
Crossing-over
simplu
Crossing-over
dublu
Crossing-over
triplu
Crossing-over
quadruplu
Tab. 20. Tipuri de crossing-over

3.6.4. Mecanismele crossing-overului

Pentru explicarea modalitilor concrete prin care se realizeaz crossing-overul s-au emis
mai multe ipoteze, care pot fi grupate n dou mari categorii, i anume:
I. Cele ce consider c fenomenul se datoreaz ruperii cromatidelor i schimbului
reciproc de segmente (breakage theory).
II. Cele ce consider drept cauz a fenomenului replicaia selectiv a cromatidelor n
timpul dublrii materialului cromosomial (copy-choise theory).

Schematic, situaia se red astfel:

I


II




Fig.13..Schimb reciproc de segmente prin ruperea cromatidelor
Fig. 14. Schimb reciproc de segmente cromatidice prin copiere selectiv
INTREBARI DE VERIFICARE
1. Care au fost avantajele folosirii Drosophilei melanogaster in cercetarile de genetica
2. Ce reprezinta linkage-ul
3. Ce reprezinta si cand are loc crossing-overul
4. Intocmiti schemele hibridarilor care sa ilustreze fenomenele de linkage si crossing-over
5. Care sunt mecanismele moleculare care conduc la aparitia crossing-overului

TEME PENTRU EXAMINAREA FINALA
1. Definirea si explicarea fenomenului de linkage.
2. Intelegerea si aprofundarea aspectelor citologice si moleculare in cadrul fenomenului de
crossing-over

Unitatea de invatare 4

4.. Mutatiile
4.1. DEFINIRE, CLASIFICAIE, GENERALITI
Noiunea de mutaie a fost introdus n tiin de ctre Hugo de Vries (unul dintre
descoperitorii legitilor elaborate de Mendel) n anul 1901.
Mutaia (de la latinescul mutatio = schimbare, modificare) reprezint o modificare a
coninutului informaiei ereditare a unui individ, prin alterri produse la nivel molecular,
cromosomial, genomic sau celular, sub impactul unor factori de natur fizic, chimic i biologic
sau, pur i simplu, prin hazard.
Mutaiile, alturi de recombinrile intra- i intercromosomiale, constituie principala surs de
asigurare a variabilitii individuale - cmpul de aciune al seleciei naturale. Dar, n funcie de
transmiterea sau nontransmiterea lor n descenden, variaiile produse n coninutul informaiei
individuale, mai corect spus, variaiile fenotipizate de individul purttor, sunt de dou categorii:
- modificaii;
- mutaii propriu-zise.
Ca orice alt fenomen sau proces biologic i mutaiile sunt clasificate n funcie de diverse
criterii sau interese.
Fr a intra n detalii (care pot fi gsite n orice tratat de genetic), reamintim cteva dintre
clasificaii:
a. Mutaii:
- naturale;
- artificiale.
b. Mutaii produse de factori:
- fizici;
- chimici;
- biologici.
Apreciem c cea mai adecvat clasificare, din punctul de vedere al biologului, este cea n
care se ine cont de mrimea substratului ereditar afectat, de cantitatea informaiei afectat n
surs.
n conformitate cu acest criteriu putem vorbi despre mutaii:
- genice;
- cromosomiale;
- genomice.
4.2. MECANISMELE PRODUCERII MUTAIILOR
4.2.1. Mecanismele mutaiilor genice
a) Deleia reprezint pierderea uneia sau mai multor perechi de nucleotide.
b) Adiia (adugarea sau inseria) uneia sau mai multor perechi de nucleotide.
c) Substituia uneia sau mai multor perechi de nucleotide.
d) Inversia unui fragment de ADN cuprinznd cel puin dou perechi de nucleotide.
Pentru exemplificarea celor patru mecanisme menionate, imaginm o situaie ipotetic n
care redm o succesiune aleatorie de perechi de nucleotide (din catena unei macromolecule de
ADN), perechi pe care le numerotm cu cifre arabe. n funcie de tipul mutaiei (n funcie de
mecanismul prin care se produce mutaia), vom dubla, vom anula sau vom nlocui cifrele
respective.

numrul nucleotidelor 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
nucleotidele unei catene A G C G T A G T C G
puni de hidrogen II III III III II II III II III III
nucleotidele complementare T C G C A T C A G C
Caten (secven) normal

numrul nucleotidelor 1 3 4 5 6 7 8 9 10
nucleotidele unei catene A C G T A G T C G
puni de hidrogen II III III II II III II III III
nucleotidele complementare T G C A T C A G C
Deleia perechii a II-a de nucleotide

numrul nucleotidelor 1 2 2 3 4 5 6 7 8 9 10
nucleotidele unei catene A C G C G T A G T C G
puni de hidrogen II III III III III II II III II III III
nucleotidele complementare T G C G C A T C A G C

Adiia unei perechi (2) de nucleotide

numrul nucleotidelor 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
nucleotidele unei catene A C C G T A G T C G
puni de hidrogen II III III III II II III II III III
nucleotidele complementare T G G C A T C A G C
Substituia perechii a 2-a de nucleotide

numrul nucleotidelor 1 2 3 6 5 4 7 8 9 10
nucleotidele unei catene A G C A T G G T C G
puni de hidrogen II III III II II III III II III III
nucleotidele complementare T C G T A C C A G C

Inversia secvenei 4 5 6

Deci, se schimb fie numrul, fie ordinea perechilor de nucleotide. n consecin se
schimb numrul i tipul (sau ordinea) codonilor, ceea ce nseamn, n fapt, o schimbare a
coninutului informaiei ereditare. Transcripia se efectuiaz dup o informaie modificat, translaia
avnd ca rezultat sinteza unei biomolecule schimbate (alt numr i alt succesiune a
aminoacizilor).
e) Mutaiile moleculare (genice) mai pot avea drept cauz i unele erori n procesul de
autoreplicare semiconservativ a moleculei de ADN.
Respectivele erori se pot datora fenomenelor:
e.1. Tranziie - nlocuirea unei baze purinice sau pirimidinice cu o alt baz, tot purinic
sau pirimidinic.
A G i T C
e.2. Transversie - nlocuirea unei baze purinice cu una pirimidinic i invers.

A T i A C
G T i G C
Schematic, transversiile i tranziiile se pot reda astfel:
Tranziie
A G Purinice


Transversie Transversie


T C Pirimidinice
Tranziie
Judecate prin prisma schimbrilor ce le produc n final (la sfritul procesului de translaie),
mutaiile genice pot fi considerate:
Nonsens, acele care duc la degenerarea codului genetic i nu se reflect n schimbarea
succesiunii aminoacizilor n molecula proteic. Spre exemplu, codonii UAU i UAC codific acelai
aminoacid - tirozina. Pe de alt parte, mutaiile survenite n codonii stop (terminatori ai sintezei
unei catene proteice) - UAA, UAG i UGA, nu au nici o semnificaie.
Mutaii cu sens greit, care transform un codon funcional (din cei 61) ntr-un codon
terminator. n acest caz, molecula polipeptidic sintetizat va fi mai scurt.
4.2.2. Mecanismele mutaiilor structural cromosomiale
Mutaiile cromosomiale sunt, n fapt, de dou mari categorii - structurale i numerice.
Mutaiile structural cromosomiale presupun alterri ale materialului cromosomial,
determinate de rupturi i pierderi sau realipiri (n alt ordine i n alte poziii) de segmente cu
lungimi variabile. n funcie de localizarea restructurrii, mutaia structural cromosomial poate fi:
- intracromosomial;
- intercromosomial.
Cele intracromosomiale pot fi, la rndul lor, intraradiale i interradiale (adic n cadrul
aceluiai bra sau ntre cele dou brae ale cromosomului. Indiferent dac afecteaz un singur bra
sau ambele brae cromosomiale, mutaiile intracromosomiale sunt: deleii, duplicaii, inversii,
translocaii.
Deleiile reprezint o pierdere de material cromosomial.
n funcie de zona cromosomial pe care o afecteaz, ele sunt: terminale i intercalare,
acestea din urm fiind paracentrice i pericentrice.
Deleiile terminale afecteaz captul cromosomului i presupun producerea unei singure
rupturi. ntruct producerea unei deleii terminale presupune pierderea regiunii telomerice,
repercusiunile ei sunt destul de grave. Deleia terminal determin scurtarea cromosomului i
formarea unui segment acentric, care, de obicei, se pierde:
A B C D E F G H I A B C D E F G H I
segment acentric
Deleiile intercalare paracentrice presupun producerea a dou rupturi, urmate de
eliminarea unui segment cromosomial acentric (din braul scurt sau lung) i scurtarea
cromosomului:
A B C D E F G H I G H ABC D E F I
Deleiile intercalare pericentrice sunt datorate formrii unui segment cromosomial centric
prin producerea a dou rupturi n imediata vecintate a centromerului i a dou (sau unul, n cazul
reunirii lor) fragmente acentrice.
A B C D E F G H I A B C D E F G H I

Deci, ca rezultat direct al producerii deleiilor, putem avea:
- fragmente acentrice;
- inele acentrice;
- cromosomi inelari;
- discontinuiti cromatice pe lungimea cromosomului;
- isocromosomi;
- micronuclee.
Duplicaiile reprezint adugarea (dublarea) uneia sau mai multor gene, la cele existente
deja n locusul (locii) respectiv. n funcie de modul concret n care are loc dublarea, duplicaiile pot
fi: n tandem direct sau n tandem invers. i unele i celelalte, n funcie de zona cromosomial
n care se produc, sunt: terminale i intercalare, acestea din urm fiind: paracentrice i
pericentrice.
Duplicaiile n tandem direct pot fi reprezentate schematic astfel:
A B C D E F G H I cromosomul iniial
A B A B C D E F G H I terminal
A B C B C D E F G H I intercalar paracentric
A B C D D E E F G H I intercalar pericentric
Duplicaiile n tandem invers pot fi redate schematic astfel
A B C D E F G H I cromosomul iniial
A B B A C D E F G H I terminal
A B C C B D E F G H I intercalar paracentric
A B C E E D D F G H I intercalar pericentric
De obicei, frecvena duplicaiilor este mai mare dect cea a deleiilor i pentru motivul c
duplicaiile nu au efecte nocive.
Inversiile se datoresc ruperii unui fragment cromosomial, paracentric sau pericentric, rotirii
sale cu 180
o
n planul longitudinal i resudrii capetelor n noua poziie. Evident, avnd n vedere
existena telomerului la fiecare capt cromosomial, inversiile terminale sunt imposibile.
Pe de alt parte, dac inversiile paracentrice nu produc modificri n morfologia (adic n
tipul) cromosomului, inversiile pericentrice pot determina schimbri consistente n lungimea
braelor, dac cele dou poriuni, rupte de o parte i de alta a centromerului, nu sunt egale. De
aceea, inversiile pericentrice pot fi egale sau inegale.
Schematic, situaiile menionate pot fi redate astfel:
A B C D E F G H I cromosomul iniial
A C B D E F G H I paracentric
A B C E D F G H I pericentric egal
A E DCB F G H I pericentric inegal
Translocatiile reprezint fenomenul prin care o poriune (un fragment), dintr-un cromosom
se rupe i se realipete, fie n acelai cromosom (n acelai bra sau n braul cellalt), fie n
cromosomul omolog, fie ntr-un cromosom neomolog. Translocaiile (cunoscute i sub numele de
transpoziii) pot fi, deci i intracromosomiale (intraradiale i interradiale) i intercromosomiale.
Evident i la translocaii se pun aceleai probleme vis vis de captul cromosomului - prezena
telomerilor mpiedic producerea de translocaii terminale.
Translocaiile intracromosomiale pot fi schematizate dup cum urmeaz:
A B C D E F G H I cromosom iniial
A B C D E G H F I intraradial
A B F C D E G H I interradial
n ceea ce privete translocaiile intercromosomiale se cuvin menionate cteva aspecte
deosebite implicate de producerea lor. Aa cum aminteam anterior, ele pot viza cromosomii
omologi sau neomologi. Evident, dac modalitile concrete de producere (rupere i apoi alipire)
sunt identice, rezultatele lor sunt diferite.
n cazul n care cei doi cromosomi omologi sunt izogenici (adic nu se afl n raport de
alelism), translocaia presupune o duplicaie (dac vizeaz izolocii de pe cei doi cromosomi):
A B C D E F G H I A D E F G H I
A B C D E F G H I A B C B C D E F G H I
Dac cei doi cromosomi sunt n raport de alelism, situaia se prezint astfel:
A B C D E F G H I A D E F G H I
a b c d e f g h i a B C b c d e f g h i
Dac translocaia va viza schimbul ntre cele dou brae neomoloage ale cromosomilor
omologi, evident c nu vom mai avea duplicaie. n esen (ca mecanism vorbind), fenomenul este
similar cu cel al translocaiei ntre doi cromosomi neomologi, cnd vom avea:
A B C D E F G H I A D E F G H I
M N O P R S T U V M N B C O P R S T U V
n cazul translocaiilor intercromosomiale, dac poriunile translocate vor fi intercalare
(acetrice), unul dintre cromosomi se scurteaz (donatorul) i cellalt se alungete (primitorul).
n situaia n care poriunea translocat este pericentric (adic segmentul translocat
conine i centromerul), rezultatul va fi apariia unui cromosom dicentric i a unor fragmente
acentrice care se vor resorbi.
A B C D E F G H I A B C E G H I
M N O P R S T U V M N D E O P R S T U V
Procesul se complic i mai mult n cazul n care schimburile de segmente cromosomiale
sunt bidirecionale (reciproce). De aceast dat, putem vorbi i despre translocaii terminale.
Evident, translocaiile reciproce, fie c sunt terminale sau intercalare (paracentrice sau
pericentrice), pot fi simetrice sau asimetrice (adic vizeaz un schimb de segmente egale sau
inegale):
A B C D E F G H I A B C D E F G U V
M N O P R S T U V M N O P R S T H I

A B C D E F G H I A B C D E S T I
M N O P R S T U V M N O P R F G H U V

A B C D E F G H I A B C P R F G H I
M N O P R S T U V M N O D E S T U V
Rezumnd, putem conchide c translocaiile sunt:
A. Intracromosomiale:
- intraradiale;
- interradiale.
B. Intercromosomiale:
- ntre cromosomii omologi:
- ntre braele omoloage (duplicaii);
- ntre brae neomoloage.
- ntre cromosomi neomologi:
- extraradiale directe (unidirecionale):
- paracentrice;
- pericentrice.
- extraradiale reciproce (bidirecionale):
- terminale simetrice sau asimetrice;
- intercalare paracentrice simetrice sau asimetrice;
- intercalare pericentrice simetrice sau asimetrice.
Fenomenul de fuzionare a cromosomilor telocentrici presupune existena a cel puin doi
cromosomi telocentrici. Acetia pot fuziona (prin fuzionarea centromerilor) dnd, astfel, natere
unui cromosom cu centromer median (metacentric sau submetacentric, n funcie de lungimea
celor doi cromosomi).
4.2.3. Mecanismele mutaiilor genomice
Mutaiile genomice presupun o modificare a numrului seturilor cromosomiale
fundamentale (de baz), notate n mod convenional cu x. Reamintim ceea ce am descris i
elucidat pe deplin n capitolul dedicat structurii i funciilor cromosomilor i anume: x = n numai n
cazul speciilor diploide i, mai mult dect att, ntr-un anumit gen, unde avem mai multe numere
cromosomiale de baz (adic mai multe valori pentru x), unul a provenit din altul, concomitent cu
diversificarea speciilor. Deci, nu ntotdeauna exist echivalen ntre genom (notat cu n) i numrul
fundamental de cromosomi (x). Altfel spus, ntre evoluia pe orizontal (diversificarea specific) i
variabilitatea numrului fundamental de cromosomi din cadrul unui gen, se pot stabili interrelaii
precise.
Muli autori plaseaz aneuploidia n cadrul mutaiilor genomice. Din punctul nostru de
vedere, aneuploidia reprezint o mutaie cromosomial i anume, o mutaie numeric
cromosomial, ntruct ea afecteaz unul sau doi cromosomi (rareori trei sau patru, aa cum vom
preciza la momentul potrivit) dintr-un genom i nu multiplicarea numrului genomurilor sau a
numrului fundamental de cromosomi.
n consecin, mutaiile genomice includ: haplodia, poliploidiile i pseudopoliploidiile.
Haploidia starea fireasc n care se gsete un individ eucariot este starea diploid.
Aceast stare se reconstituie n urma fiecrui act de fecundare, act n urma cruia, din fuziunea a
doi gamei de sex opus, ia natere un zigot ce ntrunete suma cromosomilor existeni n fiecare
din cei doi gamei. Tot prin definiie, gameii sunt haploizi, adic au jumtate din numrul de
cromosomi caracteristic prinilor. Deci, n + n = 2n sau .
Rezult, cu claritate, c dac (din anumite motive), un viitor individ se va dezvolta avnd ca
surs un singur gamet (androgenez sau ginogenez, pseudogamie, embrionie adventiv etc.), n
celulele sale se vor gsi n cromosomi i nu 2n. Fenomenul poart numele de haploidie.
Prin fuziunea unui gamet cu unul rezult un zigot (punctul de start al noului organism)
care poate fi homozigot dominant, recesiv sau heterozigot (AA, aa sau Aa). Fenomenul este
imposibil la haploizi, ntruct acetia au un singur set din cromosomii omologi (un singur
genom), deci au toate genele ntr-o singur doz (A sau a). Prin urmare, fiind exclus
fenomenul de alelism, implicit dominana i recesivitatea, un haploid fenotipizeaz totalitatea
genelor pe care le conine. Evident, lipsind dominana i recesivitatea, alelele profund
duntoare, mai ales alelele letale, induc moartea indivizilor haploizi. De aceea, la acest nivel,
selecia este mult mai dur i mult mai eficient.
n acest context, se cuvin menionate i unele avantaje, din punctul de vedere al practicii,
oferite de haploidie. Prin dublarea setului haploid de cromosomi (diploidizarea unui haploid) se
obin indivizi izogenici (izocromosomici), sau aa zisele linii pure (genetic pure), a cror
producere necesit multe eforturi i mult timp pe cile convenionale.
Fiind parial sterili, haploizii au o mic inciden n mod natural. Se ntlnesc, pe anumite
perioade i n anumite condiii, la grupe de insecte (albine, viespi, afide), reprezint o stare
quasinormal la ciupercile cu spori, algele unicelulare, briofite i sunt starea normal a
procariotelor.
Pe de alt parte, diploidia poate reprezenta o stare normal a unui individ sau poate fi
rezultanta unei autopoliplodizri sau alopoliploidizri. Evident, haploizii provenii din cele trei
categorii de "diploizi" nu vor avea comportamente similare. De aici i posibilitatea clasificrii
haploizilor n:
a. monoploizi;
b. polihaploizi.
a. Monoploizii provin prin dezvoltarea autonom a unei celule sexuale (androgenez sau
ginogenez) de la indivizi aflai ntr-o stare de diploidie adevrat. n cazul plantelor, un monoploid
se poate obine i n urma dezvoltrii unei alte celule dect cea gametic, dar aparinnd tot fazei
haploide (gametofitului), cum ar fi antipodele i sinergidele.
Printre modalitile practice de obinere a haploizilor (indiferent de sorgintea i tipul lor)
putem meniona: ndeprtarea staminelor (la florile hermafrodite) anterior maturizrii lor,
polenizarea cu polen distrus prin iradiere, polenizarea cu polen strin etc.
La animale, pentru inducerea partenogenezei ovulelor nefecundate, se utilizeaz
spermatozoizi iradiai, tratamente cu ocuri termice, soluii hipotonice i hipertonice etc.
b. Polihaploizii provin. prin mecanisme identice celor ce determin apariia
monohaploizilor, din poliploizi.
Poliploidia, evideniat pentru prima dat de ctre G. Winkler (1916), reprezint mutaia
genomic datorat multiplicrii numrului de genomuri (numrului fundamental de cromosomi).
Poliploidia reprezint un fenomen cu o inciden destul de mare n natur - 47% dintre
angiosperme i 4,6% dintre gimnosperme sunt poliploide.
Poliploizii se dovedesc a fi competitori redutabili n condiii aspre de mediu, proporia lor
crescnd n biocenoze concomitent cu latitudinea i altitudinea, precum i n paralel cu
deteriorarea drastic a condiiilor de habitat (deerturi, soluri srturate etc.).
n funcie de numrul par sau impar al genomurilor ntrunite n noul organism, poliploizii pot
fi clasificai n:
A. Artioploizi - cu numr par de genomuri (2x, 4x, 6x, 8x, 10x).
B. Perisoploizi - cu numr impar de genomuri (3x, 5x, 7x, 9x).
n ceea ce privete poliploizii, se cuvin menionate cteva aspecte. Crescnd numrul de
seturi cromosomiale per nucleu, evident c va crete i cantitatea de AND per nucleu. Poliploidia
este un fenomen larg rspndit la plante, animalele etalnd cu o frecven mult mai mic aceast
stare. n acest regn poliploidia este mai frecvent la nevertebrate (protozoare, crustacei,
lepidoptere, ortoptere), dar i la unele vertebrate, din clasele petilor i amfibienilor. Menionm n
acest sens iparul (Misgurnus fossilis), care este tetraploid n apele noastre (2n=100), n timp ce n
apele din Extremul Orient triete o specie diploid (Misgurnus anquillicaudatus)(2n=50).
Prezena poliploizilor a fost semnalat i la reptile, psri i chiar mamifere. Desigur
poliploizii sunt prezeni i la om dar, n mod firesc, nu sunt viabili.
Conform originii lor (modului n care au aprut), poliplozii au fost grupai n:
I Autopoliploizi i
II Alopoliploizi.
I. Autopoliploidia reprezint fenomenul multiplicrii numrului de genomuri (numere
cromosomiale de baz) proprii.
Autotetraploizii se ntlnesc frecvent la Solanusm tuberosum, Medicago sativa, Arachis
hypogea, Coffea arabica, Vitis vinifera etc. n practic sunt deosebit de frecvent utilizai triploizii
care, pe lng faptul c manifest heterozis, prezint i avantajul de a nu produce semine. Cei
mai des ntlnii i mai frecvent utilizai sunt triploizii bananului, viei de vie, mrului, pepenelui
verde, ananasului, plopului etc.
II. Alopoliploizii (amfiploizii) reprezint poliploizii a cror apariie presupune, cu necesitate,
prezena unui proces anterior de hibridare interspecific. n consecin, la un amfiploid nu putem
vorbi de o multiplicare a numrului de genomuri proprii, ci de o multiplicare a unui numr de
genomuri aditive. Spre exemplu, dac avem specia A, la care notm genomul cu x
1
i specia B, la
care notm genomul cu x
2
, hibridul interspecific AB va vea genotipul x
1
+x
2
. Dar acest hibrid nu se
va putea reproduce, meioza nefiind posibil. Prin poliploidizarea sa la faza de tetraploid vom avea
hibridul AABB, cu genotipul 2x
1
+2x
2
, ceea ce nu este tot una cu 4x.
Se apreciaz c n natur incidena amfiploizilor este destul de mare. Dintre acetia,
menionm: Triticum aestivum (2n=42), Gossipium hirsutum (2n=52), Nicotiana tabacum (2n=48),
Medicago sativa (2n=32), Prunus domestica (2n=48), Spartina townsendii (2n=126), Brassica
napus (2n=38) etc.
Unul din cele mai bine studiate cazuri este acela al speciei Triticum aestivum. Aici avem, n
esen, rezultanta a dou hibridri interspecifice, urmate de poliploidizare. Astfel, Triticum
monococcum (2n=14) s-a hibridat cu Aegilops speltoides (2n=14). A rezultat Triticum dicoccoides
(2n=28). Acesta, ncruciat cu Aegilops squarrosa (2n=14), a dat specia Triticum aestivum
(2n=42).
Evident, Triticum aestivum este o specie nou, sintetic, fertil i foarte productiv.
Se mai cuvine de menionat faptul c, tot la gru, japonezul H. Kihara a reuit s
resintetizeze unele specii existente n natur, refcnd astfel drumuri parcurse de procesul
speciaiei n genul Triticum.
Pe de alt parte, s-a reuit sinteza de novo a unor specii complet necunoscute n natur.
Astfel, G.D. Karpecenko, n 1927, a reuit s hibrideze Raphanus sativus (2n=18) cu Brassica
oleracea (2n=18) i s obin Raphanobrassica (2n=36). Iniial, hibridul era steril. Dar, dup un
timp de vegetaie, pe una din ramuri s-au format cteva semine. Se admite deci c, n mod
natural, s-au produs gamei diploizi care au asigurat fertilitatea i perpetuarea hibridului. Noua
specie (sintetic) are caractere intermediare celor dou specii genitoare - forma pstilor, de pild,
este cea de la ridiche la partea superioar i cea de la varz la partea inferioar.
Pseudopoliploidia sau poliploidia fals reprezint fenomenul n care multiplicarea
numrului de genomuri se datoreaz unei fisionri a cromosomilor (perpendicular, la nivelul
centromerilor) i nu unor dereglri n procesul diviziunii celulare. n consecin, la un
pseudopoliploid, mrirea numrului de genomuri nu se regsete n mrirea adecvat a cantitii
de ADN. n alt ordine de idei, precizm faptul c, n cadrul cariotipului unei specii, pe lng
numrul i tipul cromosomilor, o caracteristic specific o constituie numrul fundamental
de brae (NF). De pild, la o specie cu 2n=10, toi cromosomii fiind metacebtrici, NF=20. n cazul
n care o pereche de cromosomi din cei 10 (una din cele cinci perechi) sunt telocentrici, restul fiind
metacentrici, NF=18 etc.
Evident, n cazurile de pseudopoliploidie, indiferent de numrul de genomuri, NF rmne
constant (ca i cantitatea de ADN per celul). De pild, n cazul menionat, diploidul are 2n=10,
adic 2x, deci NF=20 (toi cromosomii sunt metacentrici), Prin fisionare la nivelul centromerului, toi
cromosomii devin telocentrici. Prin urmare 2n=20, ceea ce ar reprezenta 4x. Dar NF=20, deci este
vorba de un 4x fals.
Endopoliploidia reprezint fenomenul aa-zisei poliploidii somatice, adic o poliploidizare
prin cicluri endomitotice repetate (replicarea cromosomilor n interiorul membranei nucleare).
Endopoliploidia nu afecteaz ntregul organism ci, de obicei, anumite celule sau esuturi ale
acestuia.
Fenomenul a fost constatat i descris, pentru prima oar, de ctre citologul austriac L.
Geitler, la insectele acvatice Gerris lateralis i Gerris lacustris, la care s-au identificat celule 512-,
1024- i chiar 2048 ploide, n esutul ovarian.
Sunt date n conformitate cu care la specia Chironomus tentans, n glandele salivare,
celulele conin 32.768 n. Fenomenul de endopoliploidie a fost observat i la organisme mult mai
evoluate, cum ar fi obolanul (Rattus rattus).
La angiosperme, endopoliploidia este un fenomen comun. La sfecla de zahr spre
exemplu, n endospermul seminelor se ntlnesc celule cu 24.756 n.
Aneuploidia (heteropoliploidia) reprezint fenomenul datorat prezenei n plus a 1-2
cromosomi sau lipsei a 1-2 cromosomi dintr-un genotip. Evident, prezena unor cromosomi
supranumerari sau lipsa lor, se regsete n augmentarea sau diminuarea coninutului de ADN i
n modificarea corespunztoare a numrului fundamental de brae.
Dac un individ diploid normal mai poart i numele de disomic (n sensul c fiecare
pereche de cromosomi conine doi omologi - unul de origine matern i altul de origine patern),
heteroploizii pot fi de dou categorii: hipoploizi i hiperploizi.
Hipoploidia se caracterizeaz prin lipsa unuia sau a doi cromosomi din setul diploid.
a. Nulisomia (2n 2). n acest caz lipsete una dintre perechile de cromosomi. De
exemplu, dac o specie are 2n=10, nulisomicii vor avea 2n=8. n consecin, vom avea o serie de
5 nulisomici diferii (cte unul pentru fiecare pereche: I, II, III, IV i V).
b. Monosomia (2n 1). n acest caz, dintr-o pereche de cromosomi lipsete unul. Deci,
rmnnd la acelai exemplu, vom avea 10 monosomici diferii (n ideea c cei doi cromosomi ai
unei perechi, unul provenit de la mam i unul de la tat, nu sunt identici - unul poate avea genele
dominante i cellalt, alelele recesive).
c. Dublumonosomia [2n (1+1)]. Semnific lipsa a 2 cromosomi aparinnd la dou
perechi diferite. n exemplul nostru, vom avea 40 de dublumonosomici diferii.
Hiperploidia reprezint fenomenul datorat unui proces oarecum invers, adic prezena a
unul sau doi cromosomi n plus.
a. Trisomia (2n+1). La una (n fiecare caz alta) dintre perechile de omologi, n loc de 2
cromosomi vor fi 3. n consecin, vom putea identifica 10 trisomici diferii n cazul n care
meninem exemplul speciei cu 2n=10 cromosomi.
b. Tetrasomia (2n+2). Presupune dublarea unei perechi de cromosomi (figurat vorbind,
reprezint un caz de tetraploidie pentru o pereche de cromosomi). Prin urmare, la 2n=10 vom avea
5 tetrasomici diferii.
c. Dublutrisomia [2n+(1+1)]. Reprezint fenomenul invers dublumonosomiei, rezultnd 40
de dublutrisomici diferii, posibili.
n contextul acestei problematici precizm faptul c geneticianul E.R. Sears, n anul 1959, a
efectuat studii complete i complexe asupra tetrasomiei n cazul speciei Triticum aestivum
(2n=42), ocazie cu care a identificat i a descris seria complet de 21 tetrasomici (2n=44).
Hipo-hiperploidia (2n ? + ?) reprezint fenomenul rezultat prin combinarea aleatorie a
procesului de hipoploidie cu cel de hiperploidie. Adic simultan, la acelai individ, pentru aceeai
pereche putem sesiza prezena unui cromosom n plus, n timp ce la o alt pereche un cromosom
lipsete etc.
Se apreciaz c principala cauz a apariiei aneuploizilor o constituie perturbarea meiozei.
n consecin iau natere gamei cu 1-2 cromosomi n plus sau n minus, fenomen ce duce la
apariia de indivizi modificai (cu 1-2 cromosomi n plus sau cu 1-2 cromosomi n minus).
Dac la multe vieuitoare, n special la plante, aneuploidia se constituie ntr-o surs
important de variabilitate, fiind i unul dintre mecanismele asigurrii apariiei de noi numere
cromosomiale de baz (x), la animalele superior organizate, mai precis la om, aneuploidia
reprezint o aberaie incompatibil cu viaa normal a individului. Indiferent dac afecteaz
autosomii sau heterosomii, aneuploidia reprezint sindroame (boli genetice) deosebit de grave.
Spre exemplu, trisomia 21 reprezint sindromul (maladia) Down (cunoscut i sub numele de
idioie), indivizii monosomici pentru heterosomi (X0=viabili i Y0=letali) ca i trisomicii (XXX sau
XXY) reprezintnd, de asemenea, boli grave (sindromul Turner i, respectiv, Klinefelter).
n acest caz, aneuploidia este destul de rspndit n lumea plantelor. Este cunoscut cazul
zambilei (Hyacinthus orientalis, 2n=16), introdus n cultur n anul 1560 n Olanda. Pe parcursul
timpului, n urma seleciei empirice s-au obinut forme triploide, tetraploide i aneuploide foarte
diferite ntre ele din punct de vedere estetic. Cele din urm (cele aneuploide) se multiplic mai ales
pe cale vegetativ.
4.2.4. Pseudoaneuploidia
Dac la poliploidie sau aneuploidie variabilitatea numeric a genomurilor sau a
cromosomilor se regsea ntr-o variabilitate a cantitii de ADN, n pseudoaneuploidie (ca i n
pseudopoliploidie) nu se regsete. n consecin, pseudoaneuploidia reprezint un fenomen de
fals aneuploidie, datorat fuzionrii sau fisionrii cromosomilor.
Spre exemplu, un "monosomic" poate reprezenta, n realitate, rezultanta fuzionrii
cromosomilor unei perechi, iar un "nulisomic" poate reflecta rezultanta fuzionrii cromosomilor din
dou perechi. n replic, un "trisomic" poate reprezenta, n fond, rezultanta fisionrii unui
cromosom, iar un "tetrasomic" poate reflecta rezultanta fisionrii ambilor cromosomi dintr-o
pereche sau a 2 cromosomi din dou perechi diferite etc. Desigur, pentru ca cele dou procese
antagonice (fisiune i fuziune) s aib o inciden crescut, este important prezena cromosomilor
telocentrici (pentru fuziune) sau metacentrici, submediani i subtelocentrici (pentru fisiune).
Un element important n stabilirea existenei unei aneuploidii veridice sau a
pseudoaneuploidiei, l constituie NF (numrul fundamental de brae). Evident, dac dou specii
nrudite au numere diferite de cromosomi dar totalizeaz, n fiecare dintre celule, acelai numr de
brae cromosomiale, rezult c ele au luat natere printr-o fals aneuploidie (pseudoaneuploidie).
Un exemplu de aneuploidie natural, n cadrul regnului animal, ni-l ofer genul Drosophila.
Specia iniial, D. virilis, avea 2n=12. Prin fuziuni cromosomiale succesive, din ea au luat natere
speciile: D. pseudoobscura (2n=10), D. melanogaster (2n=8) i D. willistoni (2n=6).


INTREBARI DE VERIFICARE
1. Ce reprezinta mutatiile si care este rolul acestora
2. Care este mecanismul molecular de aparitie al mutatiilor
3. Ce reprezinta mutatiile cromosomiale
4. Care sunt mecanismele de producere a mutatiilor genomice

TEME PENTRU EXAMINAREA FINALA
1. Precizarea rolului si mecanismelor de producere a mutatiilor
2. Clasificarea mutatiilor in functie de cantitatea de material genetic afectata


Unitatea de invatare 5

1. ACIZII NUCLEICI - DETALII STRUCTURALE I FUNCIONALE


1.1. Acizii dezoxiribonucleici.

Acizii nucleici reprezint punctul nodal n procesul complex al stocrii i perpeturii
informaiei ereditare, n succesiunea de generaii, precum i n cascada de procese ce implic
exprimarea (fenotipizarea) informaiei genotipice, n fenotipul unui anumit individ.
Acizii nucleici sunt macromolecule polinucleotidice. Asamblarea macromoleculelor se
efectueaz prin repetiii multiple ale ctorva monomeri care nu sunt altceva dect nucleotizii
(mononucleotizii). n funcie de tipurile mononucleotizilor pe seama crora se constituie
macromoleculele de acizi nucleici, acetia aparin la una dintre cele dou mari categorii acizii
ribonucleici sau acizii dezoxiribonucleici. Dac n privina primei categorii lucrurile sunt clare, n
sensul c exist mai multe tipuri de acizi ribonucleici (ARNm, ARNt, ARNr etc), diferite ntre
ele att ca structur ct i ca funcii, pentru cea de a doua categorie sunt posibile interpretri i
discuii. i iat n ce constau acestea.
Macromolecula de acid dezoxiribonucleic, indiferent de origine, are aceeai structur
primar i secundar, n sensul c att monocatena ct i dubla elice sunt, mereu, de acelai tip.
Difer doar compoziia nucleotidic (ordinea i numrul nucleotidelor), de la o macromolecul la
alta. innd cont, ns, de faptul c, chiar n cadrul aceluiai individ, sub raportul lungimii (dat de
numrul total de nucleotide) ct i sub aspectul compoziiei nucleotidice concrete (raportul purine:
pirimidine, de exemplu), exist diferene de la o macromolecul la alta, se poate folosi i expresia
acizi dezoxiribonucleici.

1.1.1. Compoziia acizilor dezoxiribonucleici

Indiferent dac este vorba de acizii ribonucleici sau de cei dezoxiribonucleici, la baza
constituirii lor stau trei componente (trei molecule) i anume:

- un radical al acidului ortofosforic (H
3
PO
4
)
- o pentoz (riboza pentru ARN, dezoxiriboza pentru ADN)
- repetiii variabile (numeric) a patru baze azotate: dou purinice i dou pirimidinice
(A, G, T i C pentru ADN, A, G, U i C pentru ARN)

Evident, cele trei categorii de componente se asambleaz, n succesiuni diferite, pentru
diverse molecule, i formeaz monocatena. n cazul acidului dezoxiribonucleic, dou catene,
complementare, se asambleaz n dubla elice, formnd macromolecula definitiv. Succesiunea
(ordinea) de asamblare se deruleaz n urmtoarele etape:

PENTOZ + BAZ AZOTAT = NUCLEOSID
nucleosid + radicalul acidului ortofosforic = nucleotid
nucleotid + nucleotid + ......+ nucleotid = caten polinucleotidic

Pentoza

n componena acidului dezoxiribonucleic intr dezoxiriboza, mai exact D-2 dezoxiriboza.
Dezoxiriboza ca i riboza, de altfel, face parte din grupa monozaharidelor cu 5 atomi de
carbon n molecul, de unde i numele de pentoze.
n constituia acizilor nucleici pentozele se gsesc sub forma furanozic. Inelul furanozic
are atomii situai ntr-un singur plan.
Numerotarea atomilor de carbon se face de la 1 la 5, spre a se deosebi de numerele 1, 2,
3, 4 etc., utilizate n cazul bazelor azotate purinice i/sau pirimidinice, cu care se asociaz pentoza
pentrua forma nucleosidele. Atomul C
2

este singurul asimetric i confer posibilitatea apariiei


izomerilor levogiri i dextrogiri. Merit subliniat faptul c n acizii nucleici sunt prezeni doar
izomerii dextrogiri. Pe de alt parte, n funcie de poziia gruprii OH de la C
1
fa de planul
molecular, pentozele sunt de dou tipuri i
Diferenele dintre cele dou constau n aceea c gruparea OH se afl deasupra planului
molecular (tipul ) sau sub acesta (tipul ).Diferenele dintre cele dou tipuri mai provin i din
faptul c intensitatea devierii luminii polarizate este alta la fiecare dintre ele forma are o putere
rotatorie mai mare. Precizm, din nou, c n acizii nucleici sunt prezente doar pentozele de tip
.



D riboza - 2 deoxi riboza
Fig.15.. Structura a pentozelor din acizii ribonucleici i dezoxiribonucleici



Fig.16. Forma a pentozei

Bazele azotate

Att ADN-ul ct i ARN-ul conin, n componena lor, patru baze azotate dou purinice i
dou pirimidinice.


Purina Pirimidina

Fig.17. Nucleul purinic i nucleul pirimidinic.

Bazele azotate purinice care intr n componena acidului dezoxiribonucleic sunt adenina,
notat prescurtat prin A (6-aminopurina) i guanina, notat prescurtat prin G (2-amino-6-
oxipurina)
Dintre bazele azotate pirimidinice, n compoziia acidului dezoxiribonucleic intr timina, notat
prescurtat prin T (5-metil-dioxipirimidina) i citozina, notat prescurtat prin C (2-oxi-4-
aminopirimidina).

Adenina Guanina
Fig.18. Bazele azotate purinice

O
OH
OH
H
OH
H
H
H
CH
2
HO
O
H
OH
1
5
N
N
N
N
H
N
N
N
N
NH
N
NH
2
N
NH
NH
N
NH
2
O
O
OH
OH
H
H
H
H
H
CH
2
HO
Citozin


Uracil

Timin

Fig.19. Bazele azotate pirimidinice
Practic, n componena oricrei macromolecule de acid dezoxiribonucleic intr, obligatoriu,
toate cele patru baze azotate menionate, dar n ordine i cantitate dependente de specia creia i
aparine individul din celulele s-a extras acidul supus analizei. Alturi de aceste baze, n
dezoxiribonucleotizi, se pot gsi (n calitate de agliconi) i alte baze purinice i/sau pirimidinice
(aproximativ 50 de tipuri diferite), denumite baze rare (anormale sau minore).

Radicalul acidului ortofosforic.

Cea de a treia component, prezent att n acizii ribonucleici ct i n cei dezoxiribonucleici, o
reprezint radicalul acidului ortofosforic - H
3
PO
4
. Acidul ortofosforic are trei radicali i anume :
H
2
PO
4
-
, HPO
4
- -
i PO
4
- - -
i urmtoarea formul structural, care-i confer calitatea de a uni dou
molecule adiacente de nucleoside, cu eliberare de molecule de ap (H
2
O). Acidul fosforic, prezent
n catena acizilor nucleici sub form de ortofosfat, i asigur macromoleculei un puternic caracter
acid precum i prezena a numeroase sarcini negative.
H

O

O P O H Figura 2.8. Formula structural a acidului ortofosforic

O

H

Nucleosidele

Structurarea unei catene de acid dezoxiribonucleic are loc n etape succesive, etape n
care componentele primare (bazele azotate, pentoza i radicalul acidului ortofosforic) se unesc
ntre ele i dau natere la compui din ce n ce mai compleci. Nucleosidele nu sunt altceva dect
rezultanta combinrii unei baze azotate cu pentoza, printr-o legtur N-glucidic. Cu foarte rare
excepii, nucleosidele sunt -D-2-dezoxiribofuranozide (-D-ribofuranozide n cazul ARN-ului).
Numele nucleosidului deriv din numele bazei azotate. Tot n funcie de baza azotat, nucleosidele
pot fi purinice sau pirimidinice.
N
NH
NH
2
O
NH
NH
O
O
NH
NH
O
O
C H
3
Legtura de tipul N-glucid, din cadrul nucleosidelor pirimidinice, se formeaz ntre N
3
al
nucleului pirimidinic i C
1
,
al -pentozei. Este, deci, o legtur N
3
- C
1
,
(vezi figura). n cazul
nucleosidelor purinice legtura N-glucidic se formeaz ntre N
9
al heterociclului purinic i C
1
,
din
pentoz. Pe aceast cale iau natere toate dezoxiribonucleosidele: dezoxiadenozina,
dezoxiguanozina, dezoxicitidina i dezoxitimidina.
Nucleosidele libere, asemenea purinelor sau pirimidinelor libere, se gsesc n cantiti
infime n celule, ca produi ai hidrolizei enzimatice sau chimice a compuilor imediat superiori -
nucleotidele.
Nucleosidele sunt mult mai solubile n ap dect bazele azotate pe care le conin. Ele se
pot separa i identifica uor, prin metode cromatografice. Asemenea glicozidelor, nucleosidele sunt
relativ stabile n soluii alcaline. Nucleosidele purinice sunt destul de uor hidrolizate de acizi,
formnd baze libere i pentoze. Nucleosidele pirimidinice sunt rezistente la hidroliza cu acizi.
Ambele tipuri de nucleoside sunt, ns, hidrolizate specific de ctre nucleosidaze.


Fig. 20. Legturile N-glucidice din nucleotide. Citidina (citidin-N3-C1-ribofuranozid) n stnga i Adenozina (adenin-N9-
C1--ribozilfuranozid) la mijloc i n dreapta Dezoxiadenozina (dezoxiribozilfuranozid).

Nucleotidele

Nucleotidele (nucleotizii - dup ali autori), a doua etap n asamblarea componentelor
acizilor nucleici, sunt esteri ai acidului ortofosforic cu nucleosidele, aa cum reiese din figura
urmtoare. n funcie de nucleosidul care este esterificat, nucleotidele pot fi ribonucleotide sau
dezoxiribonucleotide. De asemenea, pe aceleai considerente, ele pot fi clasificate n purinice
sau pirimidinice. Nucleotidele pot fi obinute prin hidroliza chimic sau enzimatic a acizilor
nucleici, cu condiia ca s nu fie afectat gruparea fosfomonoester.
Nucleotizii pirofosforici sunt de prim importan n metabolismul organismelor animale
i/sau vegetale. Rolul lor este esenial n respiraie deoarece au calitatea de acumulatori de
energie i donatori de resturi fosforice, fiind nelipsii i n procesele de fosforosintez precum i n
cel de fosforoliz. Dar principalul lor rol este n constituirea acizilor nucleici, acizi pentru care
reprezint unitile primordiale, pietrele de construcie.

Fig. 21. . Nucleosid 5 fosfat


Fig.22. Nucleosid 3, 5 difosfat
OH OH
O
N
N
NH
2
O
CH
2
H
H H
H
HO
1`
2`
3`
4`
5`
1
2
3
4
5
6

NH
2
CH
N
N
C
C
C
N
HC
N
HOCH
2 O
C
C C
C
H
H H
H
OH OH
HOCH
2 O
C
C C
C
H
H H
H
H
NH
2
CH
N
N
C
C
C
N
HC
N
OH
2`
O
CH
2
H
H H
OH OH
H
baz
O
O
OH
HO P P HO
OH
O
O
baz
H
H H
H
CH
2
O
O O
P O
OH
HO
Tab. 21. Componentele acizilor nucleici n ordinea complicrii compoziiei lor
Acidul
nucleic
Bazele azotate Pentozele Nucleosidele Nucleotidele





AND
Purinice
Adenina (A)

Guanina (G)

Pirimidinice
Timina (T)

Citozina (C)





Dezoxiriboza

Dezoxiadenozina

Dezoxiguanozina


Dezoxitimidina

Dezoxicitidina
Acidul
dezoxi-
adenilic
(dAMP)
Acidul
dezoxi-
guanilic
(d GMP)
Acidul
dezoxi-
citidilic
(dCMP)
Acidul
dezoxi-
timidilic
(dTMP)




ARN
Purinice
Adenina (A)

Guanina (G)

Pirimidinice
Uracilul (U)


Citozina (C)






Riboza

Adenozina

Guanozina


Uridina


Citidina

Acidul
adenilic
(AMP)
Acidul
guanilic
(GMP)
Acidul uridilic
(UMP)
Acidul citidilic
(CMP)


In condiii naturale, sunt prezente doar nucleotidele de tipul 5, fapt pentru care, spre
deosebire de ali autori, am menionat continuu c asamblarea nucleotidelor n monocatena
acidului nucleic are loc, ntotdeauna, n direcia 5 3 .
Ribonucleotidele i dezoxiribonucleotidele, libere, se gsesc n celulele eucariote n
cantiti destul de nsemnate.


Structurarea monocatenei (structura primar a ADN-ului).

Acizii nucleici sunt polinucleotide rezultate prin stabilirea de legturi covalente ntre
nucleotidele ce se succed n lan. Gruparea 5
,
- hidroxi a unui nucleotid se leag la gruparea 3
,

- hidroxi a nucleotidului urmtor, prin legtur fosfat diesteric, aa cum este redat n figura
urmtoare
Trebuie remarcat i menionat faptul c orice caten polinucleotidic are o polaritate (o
direcie) specific, n sensul c toate legturile internucleotidice au aceeai orientare n lungul
catenei. n consecin, fiecare caten polinucleotidic va avea dou capete : captul 5
,
, la
care gruparea -OH de la C
5
,
este liber i captul 3
,
la care gruparea -OH de la C
3
,
nu este
angajat ntr-o legtur internucleotidic.

Fig. 23. Reprezentarea schematic a unui fragment din monocatena de ADN

n mod pur convenional, structura unei catene polinucleotidice este redat, ntotdeauna, cu
captul 5
,
n stnga i cu cel 3
,
n dreapta. De exemplu, succesiunea ACGAC semnific faptul c
adenina are grupa 5
,
- OH neangajat n legtura cu alt nucleotid, n timp ce citozina are liber
gruparea 3
,
- OH. Dou lanuri polinucleotidice sunt antiparalele (poziia normal a catenelor n
ADN) atunci cnd unul are nucleotidele orientate n direcia 5
,
3
,
, iar cellalt n direcia 3
,
5
,



Structura secundar (bicatenar) a ADN-ului.

Aa cum am anticipat n rndurile anterioare, explicnd ce nseamn catene antiparalele,
precizm c, cu rare excepii, ADN-ul are structur bicatenar. La definirea acestui mod de
organizare, propus i argumentat de ctre Watson i Crick, nu s-a ajuns instantaneu ci pe baza
acumulrii i elucidrii unui lung ir de fapte. Reamintim, n primul rnd, regula lui Chargraff, regul
n conformitate cu care n macromolecula acidului dezoxiribonucleic rata purine/pirimidine este
ntotdeauna egal cu 1. Apoi, n cadrul aceluiai tip de baze, purinice sau pirimidinice, rata
bazelor poate varia deosebit de puternic (n cazul bazelor purinice, de pild, coninutul de adenin
poate s fie foarte diferit de cel de guanin, iar n cazul bazelor pirimidinice, coninutul n timin
poate fi foarte diferit de cel n citozin).
S-a constatat existena unei echivalene reale ntre bazele ce au gruparea amino n poziia
C
6
i cele ce au gruparea ceto n poziia C
6
. Pe de alt parte, analizndu-se ADN-ul extras din
aceeai surs, s-a constatat c raportul AT/GC rmne mereu acelai, suferind variaii mari n
cazul acizilor dezoxiribonucleici extrai din surse diferite. Toate aceste fapte au fost exploatate i
interpretate, ca atare, de Watson i Crick, atunci cnd au elaborat conceptul structurrii
secundare dublu-elicoidale a ADN-ului (double strand structure). n conformitate cu aceast
concepie, macromolecula de ADN este alctuit din dou catene, cu structur primar,
unite ntr-o molecul unic, dublucatenar, prin legturi de hidrogen (vezi figura anterioar)
ntre o baz purinic dintr-o caten i una pirimidinic din cealalt caten.
n esen, structura secundar a ADN-ului se nate prin asamblarea a dou catene
polinucleotidice, cu rsucire spre dreapta, orientate antiparalel
Conceptul dublei elice, fundamentat de Watson i Crick, se bazeaz pe dou caracteristici
fundamentale i anume:
- complementaritatea celor dou catene i
- orientarea n sens opus a legturilor 5
,
- 3
,
n cele dou catene.
Prin urmare, n spaiu, cele dou catene sunt dispuse astfel nct legturile chimice ale
uneia sunt n direcie opus fa de cele ale celeilalte. Spre exemplu, dac lanul din stnga are
grupele fosfat esterificate la C
5
,
din nucleotidul inferior i la C
3
,
din nucleotidul adiacent superior,
lanul din dreapta va fi orientat complet invers.

Fig. 24 Punile de H ntre monocatenele din cadrul ADN bicatenar
Dup Anfinsen, 1959 (citat de Moraru i Antohi, 1966)

Complementaritatea celor dou catene sugereaz faptul c nu exist restricii pentru
ordinea (succesiunea) i numrul nucleotidelor pe una dintre catene dar c, pe cealalt, att
ordinea ct i numrul nucleotidelor sunt determinate, strict, de cele ale primei catene. n
consecin, cele dou catene au, n mod obligatoriu, acelai numr de nucleotide complementare.
Este evident c cele dou catene sunt meninute mpreun prin fora punilor de hidrogen - cte
dou ntre adenin i timin i cte trei ntre guanin i citozin (aa cum este specificat n figura
precedent). Pe de alt parte, datorit "constrngerilor" stereochimice, purinelor de pe o caten le
corespund, n mod obligatoriu, pirimidine pe catena complementar. Astfel, coninutul n A al
unei catene este egal cu coninutul n T al catenei complementare, coninutul n G al celei
dinti fiind, la rndul su, egal cu coninutul n C al celei de a doua. De aici rezult c
numrul bazelor purinice (A+G) este egal cu numrul bazelor pirimidnice (C+T). Rezult c
suma A+C este egal cu suma G+T i c rapoartele A/T i G/C sunt egale cu 1, raportul
A+G/T+C fiind, de asemenea, egal cu 1.
Catenele complementare nu sunt, deci, identice din punctul de vedere al bazelor pe care le
conin. De exemplu, dac o caten are secvena de baze GCTGCCAAT, cealalt caten va
avea, n mod obligatoriu, secvena CGACGGTTA .
Fiind triple, legturile dintre guanin i citozin sunt mult mai stabile conferind, totodat, o
mai mare stabilitate dublului helix i influeneaz proprietile fizice, chimice i biologice ale
macromoleculei. n situaia normal (A-T i G-C) distanele interatomice i unghiurile de nclinare
ale bazelor sunt aproximativ aceleai, dei n perechea GC bazele sunt puin mai apropiate dect
cele din perechea A=T, apropiere care nu influeneaz ansamblul macromoleculei.




Figura 25. Dispunerea antiparalel a catenelor i formarea punilor de hidrogen ntre catenele complementare de ADN



Figura 26. Structura paranemial (stnga) i plectonemial (dreapta). A i B = catenele complementare
Dup Moraru i Antohi, 1966

Structura dublu helicoidal mai este cunoscut i sub numele de structur plectonemial
(n grecete plecto = "mpletire" i nema = "fir").
Relund i sintetiznd datele prezentate pn aici, rezult c "scheletul" ("coloana
vertebral", backbone n limba englez) este alctuit din dou catene polinucleotidice, care se
rsucesc spre dreapta (right handed), n jurul unui ax comun (imaginar). Prin urmare dublul helix
este dextru. Cele dou catene, denumite catena Watson i catena Crick sunt rsucite n mod
plectonemial (adic sunt mpletite, sunt inseparabile) i formeaz dubla elice regulat, cu un
diametru de 2,0 nm, care prezint dou tipuri de adncituri - unele mari (deep grove sau major
grove) i altele mici, adic mai puin adnci (minor grove sau shallow grove). O adncitur mare
are 2,2 nm , iar una mic are 1,2 nm. n cadrul fiecrei catene, planul suprafeei bazelor azotate
este perpendicular pe axul macromoleculei. Distana dintre planurile a dou baze adiacente este
de 0,34 nm.ntr-o tur a helixului se ncadreaz 10 perechi de baze, fapt pentru care pasul helixului
este de 3,4 nm..Deoarece fiecare pereche de baze este rotit cu 36
0
(o tur de helix are 360
0
) n
raport cu perechile adiacente, n redarea schematic perechile succesive apar sub forma unor linii
de lungimi diferite.
Macromolecula de ADN se caracterizeaz printr-o nalt stabilitate. Specialitii sunt de
prere c aceast stabilitate este datorat la cel puin trei categorii de cauze i anume: legturile
de hidrogen dintre nucleotidele complementare, legturile van der Waals i atracia dipol-dipol
dintre planurile bazelor adiacente (suprapuse, n cadrul aceleiai catene) i orientarea
componentelor hidrofile ale catenei (scheletul glucido-fosforic) ctre exterior i a celor hidrofobe
ctre interiorul helixului.

Orientarea scheletului glucido-fosforic spre exterior (spre ap) i orientarea bazelor
spre interiorul dublului helix, confer un maximum de stabilitate pentru macromoleculele de
acid dezoxiribonucleic.
Greutatea molecular a ADN-ului

Analize detaliate, efectuate pe ADN-ul provenit din diverse surse, au demonstrat c
greutatea molecular a acestui acid variaz n funcie de :
- specia creia i aparin indivizii de la care s-au prelevat probele,
- metoda de extracie utilizat,
- metoda prin care s-a determinat greutatea molecular.
Prin urmare, n funcie de origine, macromoleculele de ADN sunt diferite, adic ADN-ul este
heterogen sub aspectul greutii moleculare.



Caracteristici chimice ale ADN-ului

Avnd n vedere imensitatea macromoleculei, faptul c n ap toate gruprile fosfat din
scheletul glucidofosforic ionizeaz i dau o ncrctur electronegativ ridicat, n mod practic
ADN-ul este insolubil n apa pur. Adugarea de NaCl determin saturarea rapid a sarcinilor
electrice ale ADN-ului i interaciunile intermoleculare dispar. Din aceast cauz dizolvarea ADN-
ului este posibil numai n soluiile apoase saline. Pe de alt parte ns, creterea concentraiei
saline peste anumite valori determin o scdere a solubilitii ADN-ului.
n UV soluia de ADN prezint o band de absorbie de 2600 .
Structura dublu helical a ADN-ului manifest un grad destul de ridicat de instabilitate n
soluii acide diluate sau n soluii alcaline i este uor distrus prin nclzire, la pH neutru.

Denaturarea i renaturarea ADN-ului

Denaturarea ADN-ului

Temperaturile nalte (cuprinse ntre 63 i 100
0
C), scderea constantei dielectrice a
mediului, modificarea pH-ului, prezena acizilor, alcoolilor sau cetonelor n soluie etc., determin
ruperi ale legturilor de hidrogen dintre nucleotidele complementare (ceea ce duce la separarea
celor dou catene), precum i la fragmentri ale macromoleculei. Denaturarea prin ruperea
legturilor de hidrogen dintre cele dou catene este consemnt n literatura de specialitate prin
termenul englezesc melting, ceea ce (n traducere) nseamn "topire".
Procesul denaturrii decurge astfel. La nceput, cele dou catene care alctuiesc dublul
helix se deruleaz pe anumite poriuni i rmn reunite pe altele. Poriunile derulate iau conformaii
ntmpltoare care se modific permanent. Apoi se produce ruperea legturilor (punilor) de
hidrogen dintre cele dou catene derulate. Temperatura la care cel puin jumtate dintre
moleculele de ADN sunt denaturate poart numele de temperatur medie de topire (n englez
melting midpoint), temperatur de tranziie (T
t
) sau temperatur de echilibru ntre ADN-ul dublu
catenar i ADN-ul monocatenar. Convenional i universal este, ns, notaia T
m
. Valoarea
temperaturii medii de topire este dependent de numrul perechilor GC, n sensul c majorarea
numrului acestor perechi de nucleotide induce o cretere a stabilitii macromoleculei i, implicit,
o cretere a temperaturii medii de topire.
Dinamica procesului denaturrii termice poate fi pus n eviden i prin capacitatea de
absorbie a radiaiilor UV, capacitate care se msoar la lungimea de und de 260 nm i care
crete corelativ cu coninutul macromoleculei de ADN n perechi de baze de tipul A=T, putnd
ajunge pn la valoarea de 40%. Creterea capacitii de absorbie poart numele de efect
hipercromic i se poate ajunge la punctul n care se constat un echilibru ntre absorbia datorat
moleculelor de ADN complet denaturat i absorbia datorat unui numr echivalent de nucleotide
libere. Efectul hipercromic presupune i alte modificri ale ADN-ului, dintre care reamintim:
diminuarea vscozitii, diminuarea masei moleculare cu aproximativ 50% etc.


Figura 27.. Curba de topire a ADN-ului n funcie de temperatur ( Tm ) i sugerarea formelor i mrimilor
posibile ale fragmentelor moleculare aprute prin denaturare
Dup Hartl, Freifelder & Snyder, 1988
Renaturarea ADN-ului.

Comportarea ADN-ului denaturat, n continuare, depinde aproape n totalitate de
tratamentele la care va fi supus soluia n care se afl. Astfel, dac se procedeaz la o rcire
brusc, catenele separate prin nclzirea anterioar rmn separate - adic denaturarea devine
ireversibil. Dimpotriv, dac se procedeaz la o rcire lent, scznd temperatura cu cca 20
0
C
fa de cea la care a avut loc "topirea", se constat refacerea unor conexiuni ntre cele dou
catene, adic se refac legturile ntre bazele complementere i., n consecin, se reface structura
dublu catenar. Acest proces este cunoscut sub numele de renaturare (reannealing n limba
englez)
Procesul renaturrii se deruleaz n dou etape:
- asamblarea n perechi a unui numr mic de nucleotide, avnd ca rezultat formarea
unor secvene dublu catenare scurte i
- accelerarea asamblrii dublu helixului, prin legarea succesiv a nucleotidelor
complementare n perechi. Ne putem imagina procesul, n ntregul su, ca pe cel al
nchiderii unui fermoar.
Un fenomen deosebit de interesant i cu profunde conotaii teoretice i practice, legat de
procesele denaturrii i renaturrii, este acela al hibridrii ADN-ADN (de proveniene diferite),
precum i acela al hibridrii ADN-ARN (probleme asupra crora vom reveni). n primul caz se
pot stabili gradele de nrudire ntre dou specii, n cel de al doilea se poate evidenia
corespondena ADN-ARN
m
, coresponden cu implicaii deosebite pentru descifrarea secvenei
genice, pentru estimarea procesului reverstranscripiei etc.
Pentru ca procesul renaturrii s aib loc (s se declaneze), sunt necesare cteva condiii
i anume:
- salinitatea soluiei s fie suficient de mare (> 0,25 M), pentru a neutraliza
ncrcturile negative ale gruprilor fosfat care pot provoca reacii de respingere
ntre catenele complementare i
- temperatura trebuie s rmn suficient de ridicat pentru a rupe legturile de
hidrogen care pot aprea, ntmpltor, ntre secvene scurte de baze, n interiorul
aceleiai catene, dar nu prea mare pentru a nu destabiliza legturile dintre bazele
situate pe catenele complementare. De aceea, temperatura optim pentru
renaturare este socotit a fi aceea care este mai sczut cu cca. 20
0
C fa de T
m
.
Viteza de renaturare a unei macromolecule de ADN depinde, ntr-o mare msur, de
corectitudinea refacerii primelor perechi de nucleotide complementare. Aceasta este influenat, la
rndul ei, de concentraia ADN-ului n soluie.
Prin testele de renaturare se poate stabili, cu destul exactitate, o hart a deleiilor,
duplicaiilor, translocaiilor, substituiilor sau inversiilor - toate avnd ca rezultant un fenotip
mutant. n mod concret se procedeaz astfel. Se denatureaz i apoi se renatureaz un amestec
de ADN de la fenotipurile slbatic i mutant. Prin renaturare se formeaz un heteroduplex. Adic,
reasocirea catenelor complementare este perfect n cazul zonelor "slbatice", dar lipsete n
zonele n care, pe una dintre catene exist mutaii. n acest caz, heteroduplexul prezint una sau
mai multe bucle (n limba englez loop).



Replicarea ADN

Macromolecula de ADN conine, codificat (aa cum vom vedea i vom demonstra ulterior),
informaia ereditar caracteristic indivizilor unei anumite specii. Prin urmare, pentru ca aceast
informaie ereditar s poat fi etalat, trebuie s aib posibilitatea de a circula, de a fi transmis -
att n succesiunea de generaii celulare n cadrul unui individ, ct i n succesiunea de generaii
de indivizi, n cadrul populaiei unei specii. Procesul circulaiei informaiei ereditare, pe canalul
genetic, este dependent de procesul autoreplicrii ADN-ului, suportul material al mesajului
informaional. Autoreplicarea semiconservativ presupune c fiecare caten, din cadrul dublului
helix, servete drept matri pentru asamblarea unei noi catene. n consecin, dintr-o
macromolecul ADN i din nucleotidele libere (neasamblate) existente n celul, rezult dou
macromolecule noi, identice ntre ele i cu macromolecula de origine, macromolecule n care una
dintre catene este veche (adic provine de la ADN-ul parental i una este nou, adic
asamblat de novo, din nucleotidele libere existente n celul, pe principiul
complementaritii bazelor, utiliznd ca matri catena veche). Procesul autoreplicrii este
destul de complex, pe parcursul lui aprnd o multitudine de aspecte privitoare la geometria
macromoleculei, la enzimele implicate etc. Dar, prima condiie pe care trebuie s o respecte un
model propus pentru replicarea ADN-ului, este aceea a asigurrii duplicrii (dublrii) secvenei de
nucleotide din fiecare caten parental. n respectiva duplicare se impune respectarea specificitii
mperecherilor: A=T i GC
O alt condiie, de care trebuie s se in seama, este aceea a prezenei ADN-polimerazei,
enzima care asigur creterea catenei prin adiia (la captul crescnd al catenei) monomerilor.
Producerea de molecule "fiice", pe baza unei molecule "parentale" genereaz probleme
de topologie, care decurg din organizarea helicoidal, circularizarea (uneori) i mrimea
considerabil a macromoleculei de ADN.
Modalitatea semiconservativ de autoreplicare presupune, ca o condiie sine qua non,
funcionarea catenelor vechi drept matrie (template n limba englez) pentru catenele
complementare ce se vor forma de novo. Fiecare nou caten este "legat", la catena veche, prin
puni de hidrogen. Mai exact, fiecare nou nucleotid, adugat la noua caten, este legat prin
puni de hidrogen la nucleotida complementar (de pe catena complementar), care-i "dicteaz"
poziia n care va fi inserat, i prin legturi fosfo-esterice la nucleotida adiacent de pe catena n
formare.



Figura 28. Redarea schematic a autoreplicrii macromoleculei de ADN. Partea de jos, cu rsucirea spre dreapta =
macromolecula parental. Prile de sus ( stnga + dreapta ) = macromoleculele fiice, n formare, cu o caten veche i o
caten nou, n cretere.



1.2. Acizii ribonucleici

La nceputul capitolului dedicat noiunilor de genetic molecular, precizam c acizii
nucleici sunt de dou mari categorii i anume: acizi dezoxiribonucleici i acizi ribonucleiici.
Reamintim c, sub aspectele compoziiei i structurii, deosebirile dintre cele dou categorii sunt
clare - acizii dezoxiribonucleici au dezoxiriboz i bazele azotate A,G,T i C n nucleotidele lor,
avnd, totodat, structurare bicatenar (uneori monocatenar); acizii ribonucleici sunt, de obicei,
monocatenari i au, n componena nucleotidelor lor, riboza i bazele azotate A,G,C i U. Aceste
diferene, de compoziie, structur i conformaie, determin diferene funcionale marcante ntre
cele dou categorii de acizi nucleici, diferene ce le asigur roluri complementare n procesele
vitale. Pentru a surprinde i a explica rolul acestor dou categorii de acizi nucleici, n fluxul de
procese prin care se asigur manifestarea informaiei ereditare profunde la nivelul individului ce o
deine, ntre graniele de variabilitate caracteristice speciei din care face parte individul, este
necesar detalierea unor aspecte ale structurrii i funcionalitii acizilor ribonucleici, precum i o
detaliere a mecanismelor implicrii lor n procesul complex al sintezei proteice etc.


Acidul ribonucleic mesager (ARNm)

Acidul ribonucleic mesager deine unul dintre rolurile cheie n procesul circulaiei informaiei
ereditare, pe canalul genetic (mai exact spus n circulaia informaiei ereditare, n frocesul
fenotipizrii genotipului, n contextul dezvoltrii ontogenetice). ARNm este ubiquitar (n lumea
vie) i are, oriunde s-ar gsi, acelai rol, aceleai caliti funcionale.


Compoziia i organizarea macromoleculei de ARNm

Cnd vorbim despre organizarea acidului ribonucleic mesager ne referim la conformaia
catenei, compoziia ei n nucleotide (secvena bazic) fiind cea precizat anterior - copie
complementar a catenei de ADN pe care s-a asamblat. ARNm mai este cunoscut i sub
numele de ARN informaional sau ARN translocator deoarece, aa cum vom vedea n continuare,
are rolul de a prelua i a transfera informaia ereditar, de la ADN ctre proteine.
Compoziia nucleotidic (secvena bazelor azotate n macromolecul) a macromoleculelor
de acid ribonucleic mesager, ca a oricrui alt tip de acid ribonucleic de altfel (vezi tabelul 25) este
deosebit de variabil, nu numai n funcie de sursa din care este extras i purificat, ci i n cadrul
aceleiai surse, n funcie de secvena nucleotidic din ADN, pe care o copie (pe principiul
complementaritii) la un moment dat. Singura certitudine, relativ la componena nucleotidic a
acestui tip de acid ribonucleic, este aceea c nucleotidele din care se asambleaz catena sunt: A,
G, C i U. Mai exact spus, n procesul asamblrii, pe matria constituit dintr-o caten de ADN, pe
principiul complementaritii bazelor, n dreptul A se va cupla U, n dreptul T se va cupla A, n
dreptul G se va cupla C i n dreptul C se va cupla G. Prin urmare, dac secvena nucleotidic a
catenei ADN va fi ..AAATCGTTGGACAGCA.., secvena nucleotidic complementar a ARN
mesager va fiUUUAGCAACCUGUCGU.., procesul concret al transcripiei fiind sugerat n
figura care urmeaz.
ARN, asemenea ADN, este alctuit din nucleotide. Macromolecula sa este lung (de
dimensiuni variabile), ne ramificat i se formeaz prin legturi fosfodiesterice de tipul 3
5
Se mai impune nc o precizare. Nucleotidele din care se constituie ARN-ul, indiferent de
tip (mesager, transportor sau ribosomal), sunt ribonucleotide, adic au pentoza sub form de
riboz, n componena lor. n rest, radicalul fosforic este acelai ca la ADN (radicalul acidului
ortofosforic), bazele azotate fiind cele precizate anterior.




Figura 29. Asamblarea macromoleculei de ARNm pe principiul complementaritii bazelor, pe catena de ADN,
care servete ca matri

ARNm reprezint, sub aspect cantitativ, cca 3% (ntre 2,5% i 5%) din totalul ARN-ului
celular. Locul sintezei sale, spre deosebire de ali acizi ribonucleici, este n nucleul celular (n
nucleu se afl cromosomii, principalii deintori de ADN i este normal ca ARNm, a crui sintez
este dependent de matria ADN, s fie sintetizat n nucleu).
n catena de ARN, ribonucleotidele se leag, una de alta, prin puni fosfat Bineneles,
legarea ribonucleotidelor ntre ele, prin puni fosfodiesterice, se realizeaz sub aciunea
catalizatoare a enzimei specifice (polimeraza ARN dependent de ADN care catalizeaz sinteza
de ARN n prezena ADN), aa cum este redat n figur.
Monocatena care s-a format, n condiiile precizate, reprezint structura primar a ARN
m
.
Studiul i caracterizarea acestei structuri sunt relativ dificile, deoarece, pe de o parte, sinteza
propriu-zis se desfoar cu o vitez destul de mare i, pe de alt parte, durata existenei
(perioada de njumtire) a macromoleculei este deosebit de scurt (ntre 2,5 minute, la
microorganisme i cel mult cteva zile, la reticulocitele anucleate). Ambii parametri (viteza de
sintez i timpul de existen) sunt dependeni (sau corelai cu) de durata ciclului celular i de rata
diferenierii celulare, n ontogenie. Dei are o existen destul de efemer, acidul ribonucleic
mesager este, de obicei, asociat cu o protein protectoare, numit informozom (care-l protejeaz
mpotriva degradrii enzimatice).
ARNm este produs (sintetizat) n celul, n timpul interfazei (din ciclul celular), sub form
monocatenar. Existena sa temporal este scurt. Exist, ns, corelaii clare ntre prezena
ARNm

i procesul sintezei proteice, att n sisteme acelulare ct i (mai ales) n celula vie.
ARNm reprezint matria pe care se asambleaz lanul polipeptidic.


Figura 30. Un fragment dintr-o macromolecul de ARN. Punile fosforice sunt n zona haurat.
Dup Watson & co, 1987

Dac am ncerca s rezumm principalele caracteristic ale macromoleculei de ARNm, ar
trebui s menionm, obligatoriu, urmtoarele:
- metabolizarea sa extrem de rapid, n cadrul celulei;
- compoziia nucleotidic identic uneia dintre catenele de ADN (dar complementar
celeilalte) care provine (a fost extras) din aceeai surs (din celulele aceluiai individ);
- greutate molecular extrem de heterogen (cuprins ntre 10
5
i 4 x 10
6
);
- capacitate a de a stimula sinteza de proteine, proces n care ndeplinete rolul de
matri pe care se ataeaz uniti ribosomale (formndu-se polisomi).
Ulterior, prin cercetri adecvate, s-a demonstrat c ARNm ndeplinete rolul de matri
numai atunci cnd este ataat de ribosomi. De obicei (vezi concluziile anterioare) ARNm

se
ataeaz la cel puin doi ribosomi (de obicei la mai muli) simultan i formeaz un complex care
rezist la dezintegrarea datorat scderii concentraiei ionilor de magneziu. Acest complex
N
N
N
N
NH
2
O
OH O
H H
H H
P O
O
-
O
P O
O
-
O
N
NH
2
O N
O
OH O
H H
H H
P O
O
-
O
O
NH
N
N
O
NH
2
N
O
OH
H H
H H
O
P O
O
-
O
NH
O
O N
O
OH O
H H
H H
P O
O
-
O
-
Adenin
Citozin
Guanin
Uracil
poliribosomic sedimenteaz, la ultracentrifugare, mai rapid dect ribosomii singulari. S-a mai
constatat c, sub aspectul sintezei proteice, agregatele poliribosomice (polisomice) sunt mai active
dect agregatele de ARNm

cu unul sau doi ribosomi.

Figura 31. Redarea schematic a unui complex polisom - ARNs.
Dup Moraru i Antohi, 1966



Compoziia i organizarea moleculei de ARNs

Acidul ribonucleic solubil, cunoscut i sub numele de acid ribonucleic transportor (ARNt),
este mai puin variabil, ca greutate molecular i ca numr de nucleotide, dect ARNm
.
n genere,
moleculele de ARNs sunt alctuite din 67 de nucleotide. n plus, acidul ribonucleic solubil
(transportor) are o structurare secundar, nu rmne monocatenar liniar, cum este acidul
ribonucleic mesager. Prin urmare, dei n principiu sunt monocatenare, moleculele de acizi
ribonucleici au configuraie tipic macromolecular, ceea ce presupune i existena unei structuri
secundare
Acidul ribonucleic solubil, sau de transport (transfer), are rolul de a transporta acizii aminici
(aminoacizii) la locul sintezei proteice (la complexul polisomic), de aici provenindu-i numele.
ARNt reprezint 10-15% din totalul ARN-ului dintr-o celul. Pentru fiecare dintre cei 20 de
aminoacizi existeni n lumea vie exist o molecul de ARNs, diferenele dintre moleculele
reprezentnd diferii aminoacizi fiind date de o triplet nucleotidic, plasat mereu n acelai situs,
cunoscut sub numele de anticodon sau nodoc. Toate cele peste 20 de tipuri de ARNt, indiferent
de proveniena lor, au gruprile terminale, ale lanului polinucleotidic, identice.
Aminoacizii sunt ataai la ARNt prin legturi nalt energetice stabilite ntre gruparea
carboxil a aminoacidului i hidroxilul terminal 3' al acidului ribonucleic transportor. ARNt

este
activat i legat cu aminoacidul n dou etape succesive, ambele catalizate de aceeai enzim -
aminoacil-ARNt-sintetaza (pentru fiecare dintre cei 20 de aminoacizi). n prima etap a
procesului este activat aminoacidul, utilizndu-se energia furnizat de ATP.



Fig 32. Redarea schematic a secvenei nucleotidice i a configuraiei sub form de frunz de
trifoi,pentru ARNt de la Saccharomyces cerevisiae, care transport alanina, la locul sintezei proteice. n caset
sunt menionate nucleosidele modificate
Dup Snustad, Simmons & Jenkins, 1997


Aminoacil sintetaza

Aminoacid + ATP Aminoacid AMP + PP

Complexul AA AMP nu este eliberat de ctre enzim nainte de a se derula i cea de a
doua etap, aceea a legrii ARNt

.

Aminoacil sintetaza

AA AMP + ARNt AAARNt + AMP

Complexul AAARNt

reprezint substratul pentru sinteza polipeptidic, n polisomi. Fiecare
ARN
t
activat este capabil s fie recunoscut la nivelul ribosomului.

Compoziia i organizarea ARNr

Aa cum am artat, ADN-ul care codific ordinea i numrul nucleotidelor din ARNr, reprezint
acea parte din genom care este format din secvene moderat repetate. Celulele eucariote
conin milioane de ribosomi, fiecare dintre acetia posednd cteva molecule de ARNr, alturi
de zeci de proteine ribosomale. Pentru a putea furniza, celulelor, o att de mare cantitate de
transcripte, ADN-ul care deine informaia pentru ARNr se gsete n genom n sute de copii.
Acest ADN, denumit i ADNr, este plasat n regiuni specifice din genom.
n celulele aflate n interfaz, de exemplu, clusterii ADNr formeaz mpreun o structur
nuclear cu form neregulat, numit nucleol (plural, nucleoli), care are drept funcie producerea de
ribosomi.
Nucleolii dispar pe parcursul mitozei i reapar n nucleii celulelor fiice rezultate n urma
diviziunii. Regiunea din cromosom care conine ADNr a primit denumirea de organizator nucleolar.
Studii multiple i diverse au artat c ribosomii eucariotelor conin patru tipuri diferite de ARNr,
trei dintre acestea fiind plasate la nivelul subunitii mari, iar una n subunitatea mic.
Nucleolul nu este doar situsul sintezei ARNr, ci i locul de asamblare a celor dou subuniti
ribosomale. Pe parcursul producerii moleculelor ARN, exist dou tipuri de proteine care se asociaz
cu acestea: un tip de proteine care vor rmne ataate de moleculele ARNr, intrnd, astfel n
structura subunitilor ribosomale i un tip de proteine aparinnd de fapt nucleolului i care vor avea
relaii temporare cu intermediarii ARNr, proteine necesare doar pe parcursul procesrii ARNr.

INTREBARI DE VERIFICARE
1. Care sunt componentele chimice ale acizilor nucleici
2. Structura si functiile genei
3. ARN-ul structura si functii
4. Exprimarea informatiei genetice transcriptia si translatia (sinteza) proteinelor

TEME PENTRU EXAMINAREA FINALA
1. Structura si functiile acizilor nucleici
2. Notiunea de gena
2. Exprimarea informariei genetice transcriptia si translatia
Unitatea de invatare 6


2. ELEMENTE DE GENETICA POPULAIILOR

2.1. LEGEA (PRINCIPIUL) HARDY-WEINBERG (AL ECHILIBRULUI )

n anul 1908, matematicianul englez G.H. Hardy i medicul german W. Weinberg, studiind
n mod independent frecvena genelor i a genotipurilor ntr-o populaie panmictic, au ncercat s
dea un rspuns la ntrebarea ce se ntmpl cu frecvena acestora n generaia descendent, n
absena forelor evolutive, punnd astfel bazele geneticii populaiilor. Conform Legii Hardy
Weinberg, ntr-o populaie panmictic aflat n echilibru i avnd un efectiv numeros,
frecvena genelor i a genotipurilor se menine constant de-a lungul generaiilor. Cu alte
cuvinte, frecvena alelelor dintr-o populaie se menine constant n diferite generaii, n absena
influenei factorilor evolutivi externi sau interni. O populaie poate crete sau se poate micora prin
migraia indivizilor sau prin modificarea natalitii i a mortalitii. Legea Hardy-Weinberg face
abstracie de efectele mutaiei, migraiei i seleciei la nivelul unei populaii, referindu-se la un caz
ipotetic, practic inexistent n natur, deoarece nu exist populaii n echilibru perfect.
Se consider o populaie panmictic mare i nchis (fr migraii), n cadrul creia nu au
loc mutaii i nu opereaz selecia, care cuprinde indivizi homozigoi dominani (AA) i recesivi
(aa), aflai n procent egal. Se pot realiza pe baz de probabilitate urmtoarele tipuri de ncruciri
(Tab.20):

AA
50%
aa
50%
AA
50%
AA
25%
Aa
25%
aa
50%
Aa
25%
aa
25%
Tab. 20Repartiia indivizilor n F1 la ncruciarea ntre organisme homozigote avnd aceeai frecven.

n urma panmixiei, n generaia F
1
, din punct de vedere genotipic vor exista indivizi
heterozigoi Aa pe lng cei homozigoi dominani AA i recesivi aa. Din punct de vedere fenotipic,
n F
1
, 75% dintre indivizi prezint caracterul dominant A, iar 25% pe cel recesiv a, segregarea fiind
n raport de 3:1. Dac se consider c organismele din F
1
vor da natere la un numr egal de
gamei n urma diviziunii meiotice, pentru fiecare printe Aa, jumtate dintre gamei vor conine
doar gena A, iar cealalt jumtate doar gena a, atunci frecvena genelor va fi i ea egal, fiecare
dintre cele dou gene A i a, fiind prezent n procentaj egal (50% A sau 0.5A si 50% a sau 0.5a),
indivizii de tip AA dnd natere doar la gamei purttori ai genei A, n timp ce homozigoii recesivi
aa vor forma doar gamei ce conin gena a.

INDIVIZI GAMEI
AA 25% A 25%
Aa 50% A 25% a 25%
aa 25% a 25%
Total A 50% ; a 50%
Tab. 21.Frecvena genotipurilor i genelor n F1

Prin combinarea acestor gamei, se obine n F
2
o segregare mendelian de:
25% indivizi homozigoi AA, 50% indivizi heterozigoi Aa i 25% indivizi homozigoi aa.
adic o frecven a genotipurilor identic cu cea din F
1
.

0.5 A 0.5 a
0.5 A 0.25 AA 0.25 Aa
0.5 a 0.25 Aa 0.25 aa
Tab. 22. Frecvena genotipurilor n F2

n ceea ce privete fenotipurile, ele sunt de asemenea identice cu cele din F
1
, adic:
75%A i 25%a.


Frecvena celor dou gene nu este ntotdeauna n procentaj egal n populaie. Cazul n
care ntr-o populaie frecvena genelor alele este egal, se ntlnete foarte rar. Astfel, dac se
consider cazul unei populaii n care 80%dintre indivizi sunt AA (80% din totalul gameilor poart
alela A) iar restul de 20% dintre indivizi sunt aa (20% din totalul gameilor poart alela recesiv a),
n urma mperecherii ntmpltoare a gameilor, pe baz de probabilitate se obine repartiia
indivizilor n F
1
:
64% homozigoi dominani (AA)
32%heterozigoi Aa
4%homozigoi recesivi aa
Adic 96% dintre indivizi vor avea fenotipul A, caracterul recesiv a fiind ntlnit doar la 4%
dintre indivizi.

0.8 A 0.2 a
0.8 A 0.64 AA 0.16 Aa
0.2 a 0.16 Aa 0.04 aa
Tab. 23.
Dac se urmrete repartizarea genelor n aceast generaie se constat c frecvena
genei A este de 80%, iar a genei a, de 20%.

INDIVIZI GAMEI
AA 64% A 64%
Aa 32% A 16% a 16%
aa 4% a 4%
Total A 80% ; a 20%
Tab. 24. Frecvena genotipurilor i genelor n F1
Matematic, rezultatele studiului populaiilor efectuate de G.Hardy i W.Weinberg,
pot fi generalizate astfel: dac frecvena gameilor A este p i a gameilor a este q.

Distribuia binomial a genotipurilor conform legii Hardy-Weinberg

A
p
a
q

A
p
AA
p
2

Aa
pq

a
q
Aa
pq
Aa
q
2


Distribuia fenotipurilor n descenden este de p
2
AA+2pq Aa + q
2
aa , reprezentnd o
distribuie binomial, adic (p+q)
2
= p
2
+ 2pq+q
2
=constant
Dar p+q =1 ceea ce nseamn c q = 1-p , putnd fi nlocuit i rezultnd :
p
2
AA+ 2 p(1-p) Aa + (1-p)
2
aa
Frecvena genotipurilor AA, Aa, aa se pstreaz constant de-a lungul generaiilor, la fel i
frecvena genelor. De exemplu gena A va avea frecvena: p
2
+ p(1-p) = p
2
+ p p
2
= p
Iar a are frecvena p(1-p) + (1-p)
2
= p-p
2
+ 1-2p +p
2
= 1-p

Cunoscnd frecvena genei A (q = 80% = 0,8) i a alelei a (p = 20% = 0,2) se poate
determina frecvena genotipurilor i fenotipurilor descendenei :

AA= q
2
= 64%
aa = (1-q)
2
= 4%
2Aa = 32%
Fenotipic , 96% dintre indivizi manifest caracterul dominant i 4% caracterul recesiv.
Invers, dac se tie c ntr-o populaie frecvena fenotipului A este de 96% i cea a lui a de
4%, se poate calcula frecvena genei dominante A i a alelei recesive a, astfel:

aa = 4% = 0,04

a = 0,04 = 0,2 = 20%

A = 100 - 20 = 80%

De asemenea se poate calcula ci dintre indivizii cu fenotipul dominant sunt homozigii
(AA) sau heterozigoi (Aa):

AA = q
2
= 64%

Aa = 2(1-q) = 2x 0,8x0,2 = 32%


2.2. FRECVENELE GENOTIPURILOR N POPULAII

n studiul oricrei populaii, un prim pas l reprezint examinarea fenotipurilor indivizilor ce o
alctuiesc, urmnd determinarea naturii genetice a anumitor caractere, stabilirea modului de
transmitere a acestora (descrierea populaiei n termeni genetici).
Populaia poate fi caracterizat prin numrul de genotipuri (faza diploid) sau prin numrul
de alele (faza haploid).
De exemplu, n cazul unui locus autosomal unic, pentru o gen autosomal A i alela ei a,
n lipsa fenomenului de dominan, n descenden, indivizii, avnd genotipuri aparinnd uneia
din cele trei clase : AA, Aa, aa, sunt i fenotipic distinci. Numrul indivizilor cu unul din cele trei
genotipuri, este echivalent cu numrul indivizilor din cele trei clase fenotipice, adic, fiecare
genotip este fenotipic distinct.
Dac N este numrul total de indivizi din populaie, iar n
1
, n
2
i n
3
numrul indivizilor avnd
genotipurile AA, Aa i respectiv aa, atunci n
1
+ n
2
+ n
3
= N
Proporiile sau procentele genotipurilor AA, Aa i aa pot fi notate simbolic prin x,y,z i sunt
denumite frecvene genotipice.

n
1
/ N= frecvena genotipului AA =x
n
2
/ N= frecvena genotipului Aa =y
n
3
/N = frecvena genotipului aa =z

x+y +z = 100% (sau unitatea, 1).



2.3. FRECVENELE GENELOR N POPULAII

N - Numrul total de indivizi diploizi (2n) din populaie, s-a format dintr-un numr de 2N
gamei produi n generaia precedent, dintre care o parte conin gena A, iar cealalt parte alela
a.
Numrul de indivizi homozigoi cu genotip AA (n
1
), s-a format prin unirea unui numr dublu, 2n
1
de
gamei ce aveau cte o singur gen de tipul A.
Heterozigoii Aa, n numr de n
2
s-au format din 2 n
2
gamei, jumtate dintre acetia
coninnd gena A i cealalt jumtate alela a. Deci, numrul total de gamei purttori ai alelei A
implicai n formarea indivizilor diploizi, este tocmai suma 2n
1
+ n
2
.
Proporia acestor gamei din totalul celor din populaie, notat cu p, este :

N
n n
N
n n
p
)
2
1
(
2
) 2 (
2 1
2 1



Numrul de indivizi homozigoi cu genotip aa (n
3
) s-au format din 2 n
3
gamei, fiecare avnd o
singur alel : a
n mod similar, proporia q a gameilor purttori ai alelei a poate fi determinat din numrul
de gamei care au participat la constituirea genotipului heterozigot Aa precum i a celor care au
participat la constituirea celuilalt genotip homozigot aa.

N
n n
N
n n
p
)
2
1
(
2
) 2 (
3 2
3 2



Aceste proporii , p i q sunt denumite frecvene genice.
Deoarece A i a sunt considerate singurele gene alele posibile n locusul A, avem:

1
) (
)
2
1
( )
2
1
(
3 2 1
3 2 2 1


N
n n n
N
n n
N
n n
q p

p = frecvena genic a alelei A
q = frecvena genic a alelei a

Frecvenele pot fi determinate i pe baza frecvenei genotipice.



y x
N
n
N
n
N
n n
p
2
1
2
1
)
2
1
(
2
1
2 1



Similar,
.
2
1
2
1
)
2
1
(
3
2 3 2
z y
N
n
N
n
N
n n
q



x= frecvena genotipic a genotipului AA
y= frecvena genotipic a genotipului Aa
z= frecvena genotipic a genotipului aa

ntr-o formulare mai simpl: frecvena genic a alelei A se afl adugnd jumtate din
procentajul heterozigoilor la procentajul homozigoilor AA iar frecvena genic a alelei a se afl
adugnd jumtate din procentajul heterozigoilor la procentajul homozigoilor aa.
Pentru a ilustra calculul frecvenelor genice se folosete exemplul grupelor de snge M-N la
om.
Grupele de snge M-N la om sunt determinate de o pereche de alele L
M
i L
N
, plasate ntr-
un locus autosomal unic. Cele 3 tipuri sangvine M; MN; N se disting net i corespund genotipurilor
L
M
L
M
, L
M
L
N
, L
N
L
N
Cu alte cuvinte se disting 3 fenotipuri (M, MN, N) i 3 genotipuri (L
M
L
M
, L
M
L
N
, L
N
L
N
).
De exemplu, frecvenele genice ale alelelor L
M
i

L
N
ntr-o prob de 730 btinai din
Australia, unde 22 aparin grupei M, 216 aparin grupei MN i 492 aparin grupei N, sunt:
p- frecvena genei L
M

q-frecvena genei L
N


Calculnd : p= (22+ 216/2)/ 730 = 0,178
q = (216/2 + 492)/ 730 = 0,822

Exprimat n procente:

22 din 730= 3,01% = 0,0301 aparin grupei M
216 din 730= 29,59% = 0,2959 aparin grupei MN
492 din 730= 67,40% = 0,6740 aparin grupei N


Cu alte cuvinte: p
2
= 0,0301
2pq= 0,2959
q
2
= 0,6740
Calculnd, se obine p= 0,178
q= 0,822

INTREBARI DE VERIFICARE
1. S se enune Principiul Hardy-weinberg
2. Care sunt condiiile pe care trebuie s le ndeplineasc o populaie pentru a putea fi considerat ca
fiind n echilibru.
3. Definii noiunea de populaie panmictic

TEME PENTRU EXAMINAREA FINALA
1. Calculai frecvena genotipurilor dintr-o populaie n echilibru, cunoscnd frecvena
genelor n populaie respectiv.

BIBLIOGRAFIE

Alberts, B., Bray, D., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., Watson, J.D., 1994. Molecular Biology of
the Cell. Garland Publishing Inc., New York, London.
Bra, I.I., 1996. Vademecum in genetic. Editura CORSON, Iai.
Bra, I.I., 1999. Genetica. Editura CORSON, Iai.
Brown, D.D., David, I., 1968. Specific gene amplification in oocytes. Science, 160, 272.
Buctaru, N., 1993. Genetic. Editura Universitas, Chiinu.
Butnaru, G., Nicolae, I., Tma, E., 1999. Genetic molecular. Editura MIRTON, Timioara
Callan, H.G., 1955. Recent work on the structure of cell nuclei. Symposium on the Fine Structure
of Cells.IUBS Publ. Series B., 21, 89.
Gavril, L., 1986. Genetica. I. Principii de ereditate. Editura Universitii Bucureti.
Ghiorghi, G., 1999. Bazele geneticii. Editura Alma Mater Bacu.
Klug, W.S., Cummings, M.R., 1986. Concepts of Genetics. Merill Publishing Company. A Bell &
Howell Company, Columbus-Toronto-London-Sydney.
Knippers, R., 1997. Molekulare Genetik. Georg Thieme Verlag, Stuttgart, New York.
Latchman, D.S., 1998.Eukaryotic Transcription Factors. Third Edition. Academic Press, San
Diego, London, Boston, New York, Sydney, Tokyo, Toronto.
Lewin, B., 1997. Genes, VI. Oxford University Press, Inc., New York, USA.
Miller, O.L., Hamkalo, B.A., 1972. Visualization of RNA synthesis on chromosomes. Int. Rev
.Cytol., 33,1.
Moraru, I., Antohi, t., 1966. Introducere n genetica molecular. Ediia II-a. Editura Medical,
Bucureti.
Raicu, P., 1997. Genetic general i uman. Editura Humanitas, Bucureti.
Snustad, D.P., Simmons, M.J., Jenkins, J.B., 1997. Principles of Genetics. John Wiley & Sons,
Inc., New York, Chichester, Brisbane, Toronto, Singapore, Weinheim.
Tamarin, R., 1991. Principles of Genetics. WCB (Wm. C. Brown) Publishers.
Toma, O., Bra, I.I., 1996. La sorgintea vieii aminoacizi, proteine si acizi nucleici, Vol.1.
Editura Corson, Iai.
Tudose, I., 1992-1993. Genetic. Editura Universitii Al.I.Cuza, Iai.
Voicule, N., Puiu, L., 1997. Biologia molecular a celulei. Grupul editorial ALL.
Watson, J.D., Hopkins, N.H., Roberts, J.W., Steitz, J.A., Weiner, A.W., 1987. Molecular Biology
of the Gene. The Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc. Menlo Park, California.
Reading, Massachusetts. DonMills, Ontario Wokingham, U.K. Amsterdam. Sydney. Singapore.
Tokyo. Madrid. Bogota. Santiago. San Juan.
Bra, i.i., 1973. Studiu asupra biologiei populaiilor unor specii apomictice i sexuate
nrudite.Tez de doctorat, Facultatea de Biologie, Universitatea Bucureti.
Bra, I.I., Ghiorghi, g., 1980. Din enigmele evoluiei (Apomixia i rolul ei n evoluie). Editura
tiinific i Enciclopedic, Bucureti.
Bra I., Corneanu G.(sub redacia), Fraley l., Gottschalk W., Imreh St., Lazanyi A., Nedelcu C.,
Whicker W., 1989. Elemente de radiobiologie vegetal. Ed. Ceres, Bucureti.
Bra, I.I., 1989. Reproducerea, factor al evoluiei plantelor. Editura Academiei, Bucureti
Bra, I.I., 1999. Genetica. Editura Corson, Iai
Beggs C., Schneider-Ziebert U., Wellmann E., 1986. UV-B Radiation and Adaptativ Mechanisms
in Plants. Stratospheric Ozone Reduction, Solar Ultraviolet Radiation and Plant Life (Edited by
R. C. Worrest and M..M. Caldwell), NATO ASI Series, Vol. G.8, Springer-Verlag Berlin
Heidelberg, 235-251.
Brookes P., Lawley P., 1961. The reaction of mono- and difunctional alchilating agents with
nucleic acids. Biochem J, . 80, 496-502.
Buican, D., 1997. Mendel i genetica de ieri i de astzi. Editura ALL, Bucureti.
Butnaru, Gallia, Nicolae,I., Tma, Elena, 1999. Genetic molecular. Editura Mirton, Timioara.
Cavalli-Sforza, l.l., Bodmer, W.F.,1971. The Genetics of Human Populations. Freeman, San
Francisco.
Charlesworth, B., 1996. The evolution of chromosomal sex determination and dosage
compensation. Curr. Biol., 6, 149-162.
Ciobotari, Ghe. V., Bra, I.I., 2000. Frecvena crossing-overului ntre cromosomii X, la femelele
hibride de Drosophila melanogaster obinute prin ncruciarea ntre mutanta Muller 5 i indivizi
din trei populaii naturale. Genetic i Evoluionism (sub redacia Ion I. Bra, Csilla Iuliana
Surugiu, Mirela Cmpeanu, Marilena Maniu), Editura Corson, Iai, 53-78
Ciobotari, G.V., Bra, I.I., 2000. Efecte ale tratamentului cu nicotin, n diferite concentraii,
aplicate indivizilor de Drosophila melanogaster dintr-o populaie reversmutant. Genetic i
Evoluionism (sub redacia Ion I. Bra, Csilla Iuliana Surugiu, Mirela Cmpeanu, Marilena Maniu),
Editura Corson, Iai, 79-84.
Ciupercescu d. , 1986. Curs de Genetic si Eredopatologie, Tipo Agronomia, Cluj-Napoca.
Ciupercescu, D.D., Vereskens, J., Mouras, A., Y, D., Briquet, M., Negruiu, I., 1990. Karyotyping
Melandrium album, a dioecious plant with heteromorphic sex chromosomes. Genome, 33, 556-
562.
Cmpeanu, M.M., Cmpeanu, C.S., Bra,I.I., 2000. ADN recombinant. Editura Corson, Iai.
Cmpeanu, Mirela M., Maniu, Marilena, Surugiu, Iuliana C., 2002. Genetica metode de studiu.
Editura Corson, Iai.
Coohill Th ., 1989. Ultraviolet Action Spectra (280 to 380 nm) and Solar Effectiveness Spectra
for Higher Plants. Photochem. Photobiol., 50 ,4 , Printed in Great Britain, 451-457.
Cook, l.M., 1976. Population Genetics. Chapman and Hall, A Halsted Press Book London, John
Wiley & Sons, Inc., New York
Corneanu, Mihaela, 2001. Genetica. Editura Sitech, Craiova.
Creed, E.R., 1971. Ecological Genetics and Evolution. Essays in Honour of E.B. Ford.Blackwell,
Oxford.
Crow, J.F., Kimura, M., 1970. An Introduction to Population Genetic Theory. Harper and Row,
New York.
Crow, J.F., 1972. The dilemma of nearly neutral mutations :How important are they for evolution
and human welfare ? J. Heredity, 63, 306-316
Darwin, Ch., Wallace, A.R., 1958. Evolution by natural selection. Cambridge University Press
Deering R., 1962. Ultraviolet radiation and nucleic acid, in Organic chemistry of life. Editors:
Calvin M., Pryor A., Freeman and Company, San Francisco, 377-382.
Dellaporta, S.L., Calderon-Urrea, A, 1993. Sex determination in flowering plants. Planta Cell, 5,
1241-1251.
Dobzhansky, T., 1970. Genetics of the evolutionary process. Columbia University Press, New
York.
Drake J., 1970. The molecular basis of Mutation, Holden Day, San Francisco,
Dumitru, I.F., 2001. Nouti n biotehnologie. Editura ILEX, Bucureti
Dumitru, I.F., Toma, N. (coordonatori volum), 2001. Progrese n Biotehnologie. Universitatea
Bucureti, Centrul de Cercetri n Enzimologie, Biotehnologii i Bioanaliz.
Fairbanks, D.J., Andersen, R.W., 1999. Genetics. The continuity of life. Brooks/Cole Publishing
Company. Wadsworth Publishing company. ITPR an International Thomson Publishing
Company. New York, Scottsdale AZ, Singapore, Tokyo, Toronto
Falconer, D.S., 1960. Introduction to quantitative Genetics. Oliver and Boyd, Edinburgh.
Fernandez, J.M., Hoeffler, J.P., 1999. Gene expression Systems. Using Nature for the Art of
Expression. Academic Press, San Diego, London, Boston, New York, Sydney, Tokyo, Toronto.
Floria F., 1979. Studiu comparativ asupra comportrii unor specii de plante superioare in
tratamentul cu ageni mutagenici chimici alchilani, Teza de doctorat, Univ. Al.I.Cuza, Iai,
1974.
Floria F., Gille E., Popescu T., 1984. Influence of the treatmens with alchilating agents and
gamma rays on the cardenolides content of Digitalis lanata, Ehrn. Rev. Roum. Biochim. 21,3,
177-180.
Flondor, P., Ionescu, C. (ediie ngrijit de), 1998. Introducere n algoritmi genetici. Editura ALL,
Bucureti.
Ford, E. B., 1964. Ecological Genetics. New York, John Wiley & Sons.
Ford, E.B., 1975. Ecological Genetics, 4th Edition. Chapman and Hall, London.
Friedberg, E.C.,Walker, G.C., Siede, W., 1995. DNA Repair and Mutagenesis. ASM Press,
Washington D.C.
Fristrom, J.W., Clegg, M.T., 1988. Principles of Genetics (Second edition). Freeman & co., New
York.
Gardner, E., Simmons, M., Snustad, D., 1991. Principles of Genetics. John Wiley & Sons, Inc.,
288-308.
Gavril, L., 1986. Genetica principii de ereditate, vol. I. Tipografia Universitii, Bucureti.
Ghiorghi, G., Toth, E., Gille, E., 1984. Some cytogenetic physiological, and biochemical effect
induced by single and combined treatments with gamma rays and ethylmethansulfonate in two-
row barley and wheat. Rev. Rum. Biol., Biol. Veget., v. 29,2, 137-145.
Ghiorghi, G.I., 1999. Bazele geneticii.Editura Alma Mater, Bacu.
Ghiorghi, G.I., Corneanu, G., 2002. Radiobiologie. Editura ALMA MATER, Bacu.
Glick, B.R., Pasternak, J.J., 1994. Molecular Biotechnology. Principles and Applications of
Recombinant DNA. ASM Press, Washington D.C.
Hartl, D., Freifelder, D., Snyder, L., 1988. Basic genetics. Johns and Bartlett Publishers, Boston.
Jiang, J., Gill, B.S., 1994. Different species-specific chromosome translocations in Triticum
timopheevii and T. turgidum support the diphyletic origin of polyploid wheats. Chromosome
research, Oxford & New York, vol. 2, nr. 1, 59-64.
Kihara, H., Ono, T., 1923. Cytological studies on Rumex L. Bot. Mag., 37, 84-90.
Kimura, M., 1968. Evolutionary rate at the molecular level. Nature, 217, 624-626.
Kimura, M., 1968. Genetic variability maintained in a finite population due to mutational
production of neutral and nearly neutral isoalleles. Genet. Res., 247, 11.
Klug, W., Cummings, M., 1986. Concepts of genetics, Second edition. Merrill Publishing
Company, 177, 197-2000, 306-312.
Lewin, B., 2001. Genes VII. Oxford University Press, Oxford
Malling, H., de Serres, F., 1970. Genetic effects of N-methyl N-nitrosoguanidine in Neurospora
Crassa.- Molec. Gen. Genetics, v. 106, 165
Manna, G., 1971. Chromosome aberrations induced by living mutagens. Natl. Acad. Sci. Sect.
Biol. Sci., 1-15.
Morton, N.E., 1991. Parameters of the human genome. Proc. Natl. Acad. Sci. Usa, 88, 7474-
7476
Pelling, C., Allen, T.D., 1993. Scanning electron microscopy of polytene chromosomes (I).
Chromosome research, Oxford & New York, vol. 1, nr. 4, 221-237.
Raicu, P., Stoian, V., Nicolaescu, M., 1974. Mutaiile si evoluia. Editura Enciclopedic,
Bucuresti.
Raicu, P., Gorenflot, R., 1980. Cytogntique et volution. Editura Academiei Romne,
Bucureti.
Snustad, P.D., Simmons, M.J., Jenkins, J.B., 1997. Principles of Genetics.John Wiley & Sons,
Inc., New York, Chichester, Brisbane, Toronto,Singapor,Weinheim.
Socaciu, C., 1996. Mutageneza chimic. Editura Genesis, Cluj-Napoca, p. 76-84.
Soll, D., Rajbhandary, U.L.(edited by), 1995. tRNA Structure, Biosynthesis and Function. ASM
Press, Washington D.C.
Toma, N., Gavril, L., 2000. Ereditatea extranuclear. Editura Universitii din Bucureti.
Trachsel, H. (edited by), 1991. Translation in Eukaryotes. CRC Press, Boca Raton, Ann. Arbor,
Boston, London
Tudose, I., 1992-1993. Genetica vol. I, II, Ed. Univ. Al. I. Cuza, Iai.