Resonancia Magntica Nuclear

5.6 Anlisis de espectros y RMN-Dinmica

El anlisis de un espectro de RMN pasa por la determinacin de los parmetros
espectrales y a partir de estos obtener la informacin estructural pertinente. Los
conceptos de equivalencia qumica y magntica, estrechamente ligados a la simetra
molecular, son esenciales al analizar cualquier espectro. El trabajo con espectros donde
las diferencias de desplazamientos qumicos son mucho mayores que las constantes de
acoplamiento respectivas (espectros de primer orden) permite la determinacin directa de
los parmetros espectrales. Cuando estas condiciones no se dan la complejidad del
anlisis espectral se hace evidente. Las dificultades que pueden presentarse se ilustrarn
en sistemas muy sencillos. Finalmente trataremos la influencia de la dinmica de los
procesos de intercambio sobre los espectros de RMN y la informacin que puede
obtenerse de las variaciones espectrales con los cambios en la dinmica de los procesos
de intercambio.
5.6.1 Equivalencia qumica
El concepto de equivalencia qumica entre dos ncleos juega un importante papel en la
interpretacin de espectros de RMN. Decimos que dos ncleos son qumicamente
equivalentes o iscronos en un medio o solvente aquiral cuando son intercambiables a
travs de una operacin de simetra o mediante un proceso dinmico rpido. La
equivalencia qumica implica igual desplazamiento qumico.
5.6.1.1 Equivalencia qumica debida a simetra molecular
Es importante distinguir las operaciones de simetra derivadas de la existencia de un eje
de simetra de aquellas asociadas a la existencia de un plano de simetra o un centro de
inversin pues estas definen el nivel de equivalencia. Dos ncleos intercambiables bajo la
accin de una operacin de rotacin respecto a un eje de simetra son qumicamente
equivalentes y reciben el nombre de homotpicos. Esta equivalencia qumica es
independiente de la naturaleza del medio o solvente. As, como vemos en la Figura 5.70
los dos protones del diclorometano (1) son homotpicos pues la accin de la operacin
CB
2
B los intercambia.
Dos ncleos intercambiables slo mediante operaciones de reflexin respecto a un plano
o de inversin respecto a un centro son tambin qumicamente equivalentes en medios no
129
Resonancia Magntica Nuclear
quirales y son denominados enantiotpicos (pro-quirales). Dos ncleos enantiotpicos
slo resultan no equivalentes, y por lo tanto distinguibles, en un entorno quiral.
Como se muestra en la Figura 5.72 los protones de los grupos CHB
2
B en el
clorofluormetano (2) y el cido propanoico (3) son enantiotpicos pues resultan
intercambiados por una operacin de reflexin, no existiendo operaciones de simetra
respecto a ejes de rotacin. Asimismo en el ciclobutano sustituido (4) los protones sobre
los carbonos unidos a cloros (y por su parte los protones sobre carbonos unidos a tomos
de flor) son enantiotpicos pues resultan intercambiados por la operacin de inversin.
Estos protones son qumicamente equivalentes pero, como se ha sealado con
anterioridad, pueden ser diferenciados si se encuentran en disolventes o medios quirales.
Dos ncleos con iguales conectividades (topologa) en la molcula pero no
intercambiables mediante operaciones de simetra resultan no equivalentes y se dice que
son diasterotpicos. Los ncleos diasterotpicos poseen en principio diferentes
desplazamientos qumicos aunque esta diferencia puede ser tan reducida que resulte no
observable. Los protones de grupos CHB
2
B en molculas con centros quirales son
disterotpicos. As los protones del grupo CHB
2
B del cido 3-butanoico (5) son
diasterotpicos pues no son intercambiados por ninguna operacin de simetra, lo que se
asocia en este caso a la presencia del carbono quiral. Estos protones tienen en principio
diferente desplazamiento qumico, muestran acoplamiento entre ellos y acoplan de forma
diferente con otros protones vecinos. Las posibilidades de detectar como diferentes a los
protones de un grupo CHB
2
B en una molcula con un centro quiral generalmente decrecen
con la distancia a dicho centro quiral. Con frecuencia dos protones diasterotpicos dan
lugar a una seal nica pues las diferencias de desplazamiento qumico son mnimas. Se
habla de equivalencia accidental, la que puede eliminarse registrando el espectro en un
equipo con un imn mas potente o cambiando el disolvente. Una situacin anloga
ocurre con dos grupos metilos unidos al mismo carbono, la presencia de quiralidad en la
molcula permite con frecuencia la deteccin de dos seales para estos grupos.
Debe destacarse que la presencia de quiralidad no es necesaria para la no equivalencia de
los protones de un grupo CHB
2
B, slo lo es la ausencia de operaciones de simetra que los
intercambien. As, en el cido 3-hidroxiglutrico (6), la glicerina (7), el cido ctrico (8)
y el dietilacetal (9), los protones a (y b) de ambos grupos CHB
2
B son intercambiados por
130
Resonancia Magntica Nuclear
una operacin de reflexin por lo que son enantiotpos (a-a, b-b). No existe sin embargo
ninguna operacin de simetra que intercambie a los protones del mismo grupo CHB
2
B (a-b)
por lo que estos son diastertopos y poseen diferente desplazamiento qumico, aun
careciendo estas estructuras de centro quiral.

Figura 5.72 Protones homtopicos, enatiotpicos y diasterotpicos en grupos CHB
2
B

Una va alternativa para identificar si dos ncleos son homotpicos, enantiotpicos o
diasterotpicos consiste en definir dos estructuras donde se marquen alternativamente los
ncleos de inters, tal como se muestra en la Figura 5.73. Si las estructuras resultantes se
pueden superponer se trata de hommeros, si las estructuras son imgenes especulares
superponibles se trata de enantimeros y si las imgenes especulares no son
superponibles son diastermeros. Los ncleos se clasifican entonces de acuerdo a las
relaciones entre las estructuras. Resulta evidente que los espectros de RMN de
compuestos enantimeros son idnticos, slo son diferenciables en medios pticamente
activos. As el espectro de un D-aminocido, del L-aminocido enantimero y de la
mezcla racmica son idnticos.
131
Resonancia Magntica Nuclear

Figura 5.73 Clasificacin por marcaje

5.6.1.2 Equivalencia qumica debida a proceso dinmico rpido
La equivalencia qumica puede resultar de rpida nterconversin de especies en
equilibrio. Si la diferencia de desplazamientos qumicos (/ Hz) entre las especies en
intercambio es apreciablemente menor que los inversos de los tiempos de vida de dichas
especies (/ Hz) observaremos seales nicas a desplazamientos qumicos promedio. La
rpida nterconversin entre las especies genera un entorno electrnico promedio para los
ncleos observados en RMN. La dependencia de los espectros con la velocidad de los
procesos de nterconversin es objeto de la RMN-Dinmica que se tratar ms adelante.
Analizaremos varias situaciones donde la presencia de intercambio puede producir
equivalencia qumica.
Interconversin entre confrmeros en cadenas alifticas.
La interconversin de confrmeros (rotmeros) a travs de la rotacin sobre enlaces
simples es un proceso muy rpido en la escala de tiempo de RMN a la temperatura
ambiente. Los tiempos de vida de cada confrmero son del orden de 10P
-6
P s, lo que
conduce en todos los casos prcticos a seales nicas.
Un grupo metilo presenta siempre sus protones como equivalentes aun en ausencia de
simetra. En efecto, tal como se muestra en la Figura 5.74-1 la rpida rotacin alrededor
del simple enlace C-C que une al carbono metlico con el resto de la molcula (aunque
sta presente un centro quiral) interconvierte rpidamente los tres confrmeros
escalonados. Estos se encuentran igualmente poblados por lo que los tres protones del
grupo metilo se encuentran efectivamente en el mismo entorno promedio.
132
Resonancia Magntica Nuclear
En una cadena aliftica XCHB
2
BCHB
2
BY, los tres confrmeros escalonados en rpida
interconversin (a, g-, g+, Figura 5.74-2) son los nicos apreciablemente poblados. Si
analizamos los protones a y b vemos que en el confrmero anti estos protones son
enantimeros. Por otra parte en los confrmeros gauche, que carecen de simetra, los
protones a y b tienen un entorno tambin equivalente por rpido intercambio entre estos
dos confrmeros enantiomricos igualmente poblados. Ahora los protones a y b tienen un
entorno idntico en el confrmero anti y otro tambin idntico pero diferente al anterior
en la mezcla de confrmeros gauche. La rpida interconversin entre confrmeros hace a
los protones a y b qumicamente equivalentes (enantitopos) con un entorno promedio
entre los correspondientes a los confrmeros a y g. Igual razonamiento conduce a que los
protones c y d son a su vez enantitopos.
En general si dos protones son intercambiados en uno de los rotmeros por la presencia
de una operacin de reflexin, ellos son qumicamente equivalentes (enantitopos) por
interconversin rotacional rpida.


Figura 5.74 Interconversin rpida de rotmeros en cadenas lineales

133
Resonancia Magntica Nuclear
Una situacin diferente se presenta cuando el grupo metileno tiene en su vecindad a un
centro quiral, como se ilustra en la Figura 5.74-3. Los protones a y b no son
qumicamente equivalentes dado que no pueden ser intercambiados por operacin de
simetra alguna al carecer la molcula de elementos de simetra. Aunque exista una rpida
inteconversin entre confrmeros por rotacin alrededor del enlace simple C-C, los
protones del grupo CHB
2
B no son intercambiables por dicha rotacin. Los desplazamientos
qumicos promedios de a y b son diferentes, estos protones son diastertopos. Tendremos
2 seales independientes para a y b que se desdoblarn por el acoplamiento entre dichos
protones y por acoplamientos, en principio diferentes, con el protn c.
Interconversin alrededor de los simples enlaces en sistemas cclicos.
El ciclohexano a temperatura ambiente existe predominantemente como dos formas silla
en rpida interconversin. Como resultado de este proceso se observa una seal nica
promedio entre los entornos axiales y ecuatoriales:
H
1
H
1
H
2
H
2


A bajas temperaturas la interconversin entre las formas silla se ralentiza y el espectro
muestra entonces protones diasterotpicos en cada grupo CHB
2
B que corresponden a los
dos entornos electrnicos diferentes. En anillos de 6 miembros condensados, presentes
por ejemplo en los esteroides, la interconversin se ve impedida y los protones axiales y
ecuatoriales de los grupos metilenos presentan usualmente diferentes desplazamientos
qumicos.
Interconversin por rotacin a travs de enlace doble parcial
Aunque las rotaciones alrededor de simples enlaces son rpidas en la escala de tiempo de
la RMN, en algunos enlaces con carcter doble parcial pueden presentarse
interconversiones lentas. A temperatura ambiente las amidas muestran una velocidad de
interconversin entre rotmeros reducida por el carcter doble parcial del enlace (O=)C-
N. En la dimetilformamida se observan a temperatura ambiente 2 seales para los grupos
metilo debidas a la no equivalencia por la lenta interconversin. A temperaturas
superiores a 120P
0
PC las 2 seales coalescen a una sola.
134
Resonancia Magntica Nuclear
O
C
N
H
3
C
H
CH
3
2.85
2.94

La rotacin alrededor de dobles enlaces es generalmente muy lenta en la escala de tiempo
de la RMN y se observan seales independientes asociadas a la isomera geomtrica. Slo
en enlaces dobles dbiles es posible observar a altas temperaturas los efectos de la
interconversin rpida.
5.6.2 Equivalencia magntica
Junto al concepto de equivalencia qumica, la especificacin de equivalencia magntica
entre dos ncleos resulta esencial al definir los parmetros que determinan un espectro de
RMN. La equivalencia magntica entre dos ncleos presupone la equivalencia qumica
de dichos ncleos y exige adems que los acoplamientos escalares de los mismos con
cualquier otro ncleo magntico del sistema de espines (no qumicamente equivalente
con ellos) tengan igual magnitud. En la nomenclatura estndar para sistemas de
espines, dos ncleos qumicamente equivalentes se denotan con la misma letra del
alfabeto. La no equivalencia magntica entre ncleos se indica mediante comillas.
Ilustremos estos conceptos mediante ejemplos sencillos.
Difluormetano (Figura 5.75, izquierda)
En esta molcula estamos en presencia de 4 ncleos magnticos: los dos protones y los
dos ncleos de flor. Estos pares de ncleos son qumicamente equivalentes
(homtopos), pues son intercambiables mediante rotaciones asociadas a ejes CB
2
B. Los
protones son magnticamente equivalentes pues sus acoplamientos geminales con
cualquiera de los dos flor son iguales por la simetra de la molcula. De igual forma los
flor son magnticamente equivalentes. El sistema de espines se denomina AB
2
BXB
2
B y los
parmetros que definen al espectro son: B
A
B, B
X
B y JB
AX.
1,1-difluoretileno (Figura 5.75, derecha)
En esta molcula los dos protones y los dos ncleos de flor son tambin qumicamente
equivalentes (homtopos), pero a diferencia del caso anterior, no resultan
magnticamente equivalentes. Los acoplamientos vecinales de los dos protones con
cualquier flor son diferentes: se trata de acoplamientos vecinales cis y trans de diferente
135
Resonancia Magntica Nuclear
magnitud. El sistema de espines denominado AAXX, es de naturaleza mucho ms
compleja que el anterior: la apariencia del espectro depende tambin de los
acoplamientos entre los ncleos no magnticamente equivalentes. Los parmetros que
definen a este sistema son: B
A
B, B
X
B, JB
AX
B, JB
AX
B, JB
AA
B, JB
XX
B
H
C
H
F
F
C
2
A
A
X
X
A
2
X
2
H
Jgem
Jgem
H
C
C
F
F
A
A
X
X
Jtrans
Jcis
C
2
AAXX

Figura 5.75 Sistemas de espines del difluormetano y el 1,1-difluoretileno

Los sistemas de espines pueden clasificarse sobre la base de los conceptos anteriores,
encontrando las equivalencias qumicas y magnticas presentes.
Si analizamos el sistema protnico del paracloro-nitrobenceno, mostrado en la Figura
5.76, encontramos 2 entornos qumicos diferentes para los protones aromticos (eje de
simetra CB
2
B). Cada par de protones qumicamente equivalentes no lo son magnticamente
por lo que el sistema de espines es AAXX. En el espectro encontramos dos grupos de
seales en la zona aromtica, correspondientes a los dos entornos electrnicos. Cada una
de ellas presenta estructura de multiplete y de forma aproximada, obviando las lneas ms
dbiles, se interpretan como dos dobletes resultantes del acoplamiento de un protn A
con el protn vecinal X. Los espectros de sistemas AAXX tienen una apariencia
simtrica, cada una de las seales aparece como la imagen especular de la otra.

136
Resonancia Magntica Nuclear

Figura 5.76 Espectro de RMN-P
1
PH del paracloro-
nitrobenceno en CDClB
3
B a 300 MHz.

Los protones aromticos de bencenos orto di-sustituidos simtricamente tambin generan
sistemas de espines AAXX, como se muestra en la Figura 5.77 para el ortodicloro-
benceno. Los espectros correspondientes muestran tambin simetra especular, pero la
presencia de muchas ms componentes intensas en cada seal los hace claramente
distinguibles de los bencenos para-sustituidos por dos grupos diferentes.

Figura 5.77 Espectro de RMN-P
1
PH del orto-diclorobenceno
en CDClB
3
B a 300 MHz. Tpico espectro AAXX de benceno
orto-disustituido simtrico.

137
Resonancia Magntica Nuclear
El anlisis de los sistemas de espines en derivados bencnicos puede ser complicada. No
obstante el patrn de acoplamientos puede reconocerse si los desplazamientos qumicos
muestran diferencias apreciables. En la Figura 5.78 se muestran los espectros de los tres
clorofenoles ismeros.

Figura 5.78 Espectros RMN-P
1
PH de clorofenoles. Zona de los protones aromticos

5.6.3 Orden de un espectro. Espectros de primer y segundo orden.
La mayora de los espectros mostrados hasta ahora, cuyo anlisis es sencillo, son de los
llamados de primer orden. Para que un espectro pueda ser considerado de primer orden
debe cumplirse que:
138
Resonancia Magntica Nuclear
- las diferencias (en unidades de frecuencia ) entre los desplazamientos qumicos
de cualquier par de ncleos debe ser mucho mayor que la constante de
acoplamiento entre ellos. Como criterio aproximado para espectros
monodimensionales pude tomarse /J > 6.
- Los grupos de ncleos con equivalencia qumica deben ser tambin
magnticamente equivalentes. sto puede considerarse como una condicin
derivada de la anterior, pues para ncleos qumicamente equivalentes = 0, pero
si no hay equivalencia magntica el espectro depender de la correspondiente
constante de acoplamiento J (/J = 0).
Los espectros de primer orden presentan una serie de propiedades de importancia
prctica:
- Las multiplicidades e intensidades dentro de los multipletes cumplen con las
reglas de multiplicidad.
- Los ncleos con igual desplazamiento qumico no muestran desdoblamiento
mutuo de las seales aunque exista acoplamiento entre ellos.
Cuando las diferencias de desplazamientos qumicos son del orden de las constantes de
acoplamiento (/J < 6) aparecen pronunciados efectos de no primer orden en el
espectro, incluyendo desviaciones de las intensidades dentro del multiplete respecto a la
distribucin binomial. De acuerdo a la notacin propuesta por Pople, los ncleos en
espectros de primer orden se denotan con letras bien separadas en el alfabeto (A, M,
X), en caso contrario se denotan con letras contiguas (A, B, C).
Sistema AB
Los efectos de no primer orden se ilustran en la Figura 5.79 para un sistema de 2 espines
que evoluciona desde condiciones de primer orden (AX), no primer orden (AB) hasta
equivalencia qumica AB
2
B.
La distorsin de intensidades se manifiesta con el incremento de las lneas internas y el
decremento de las lneas externas, fenmeno denominado efecto techo. La constante de
acoplamiento JB
AB
B puede evaluarse en cualquier condicin como la separacin entre las
dos lneas de cada doblete (B
1
B- B
2
B, B
3
B B
4
B). Sin embargo los desplazamientos qumicos
no pueden evaluarse a partir de las frecuencias medias de cada doblete (B
1
B + B
2
B/2, B
3
B +
139
Resonancia Magntica Nuclear
B
4
B/2). Los desplazamientos qumicos correctos deben estimarse a partir del centro del
sistema AB (B
0
B) y (media geomtrica entre las separaciones de picos):
2 2
3 2 4 1
0

+
=
+
= ) )( (
3 2 4 1
= ) 2 / (
0 ,
=
B A
[5.79]

Figura 5.79 Sistema AB

El espectro correspondiente a AB
2
B muestra una nica lnea central por coalescencia de las
lneas interiores y desaparicin de las exteriores. Aun con /J = 15 se siguen observando
ligeras deformaciones del patrn de intensidades, aunque los errores asociados al clculo
de los parmetros espectrales como sistema de primer orden son despreciables. La
utilizacin de equipos con campos magnticos intensos incrementa la probabilidad de
140
Resonancia Magntica Nuclear
encontrar sistemas de primer orden, toda vez que al incrementarse BB
0
Ben el cociente /J,
el numerador crece y el denominador permanece constante.
Sistemas con ms de dos espines
El sistema a tres espines ms sencillo, AB
2
BX, genera un espectro con dos seales: un
doblete y un triplete. Si el espectro no es de primer orden (AB
2
BB) van a aparecer lneas
adicionales y los valores de la constante de acoplamiento, a diferencia del caso AB, no
puede evaluarse directamente como distancias entre picos en cada multiplete.
La dificultad del anlisis de un sistema de espines crece muy rpidamente con el nmero
de ncleos no equivalentes y la determinacin de los parmetros espectrales requiere del
uso de programas de cmputo especiales. Estos programas simulan un espectro a partir
de un conjunto de parmetros iniciales aproximados ( y J) y considerndolos como
variables los optimizan minimizando en forma iterativa las diferencias entre el espectro
calculado y el experimental.
5.6.4 Resonancia Magntica Nuclear Dinmica
5.6.4.1 RMN y procesos dinmicos.
La RMN no es slo un mtodo espectroscpico para determinar estructuras de
compuestos qumicos sino tambin una poderosa herramienta para la observacin y
determinacin de los parmetros de los procesos dinmicos que pueden estar ocurriendo
dentro de o entre las molculas que componen una sustancia. El intercambio de protones
entre sitios bsicos, el intercambio entre confrmeros por rotaciones alrededor de
enlaces, la inversin de anillos, el intercambio entre tautmeros, los complicados
equilibrios conformacionales a diferentes escalas de tiempo en las biomolculas y otros
procesos dinmicos que resultan en la variacin del entorno qumico de los ncleos
pueden ser estudiados por RMN. Estos cambios pueden reflejarse en el espectro de
RMN como variaciones en los desplazamientos qumicos, constantes de acoplamiento y
los parmetros de relajacin.
A diferencia de otras tcnicas espectroscpicas en RMN los estados entre los cuales
ocurren las transiciones se encuentran muy cercanos en energa. Si recordamos la
relacin de incertidumbre de Heisenberg para la energa-tiempo ( h t E . [1.37]) y su
aplicacin a las transiciones espectroscpicas ( h E E = = y = t ):
141
Resonancia Magntica Nuclear

2
1
. [5.80]
Vemos que la capacidad para diferenciar 2 entornos ( ) depender de los tiempos de
vida de los estados asociados a dichos entornos. Si existen procesos dinmicos que
interconvierten rpidamente un entorno en el otro (), la diferencia de frecuencias de
resonancia entre los mismos () deber ser apreciablemente mayor que la dada por la
relacin [5.80] para que puedan ser detectados como diferentes.
La forma ms sencilla de estudiar la velocidad de los procesos dinmicos es mediante la
variacin de la temperatura del sistema. La mayora de los espectrmetros de RMN estn
dotados de sondas que permiten variar y controlar la temperatura de las muestras en el
rango de +200 a -150P
0
PC haciendo posible el estudio de equilibrios dinmicos en un rango
amplio de energas de activacin (20-100 kJ/mol).
La apariencia del espectro de RMN de un sistema en equilibrio dinmico es funcin de
las velocidades de interconversin y por lo tanto de la temperatura. Analizando las
variaciones del espectro con la temperatura pueden determinarse parmetros cinticos (k,
EB
act
B, GP

P, HP

P, SP

P) de los equilibrios dinmicos presentes.

Para determinar la existencia de un proceso dinmico entre dos molculas A y B, se
registran los espectros de RMN a diferentes temperaturas. Al disminuir la temperatura los
procesos dinmicos internos se ralentizan. Lo contrario ocurre si elevamos la
temperatura. Asumamos que la energa de activacin del proceso de interconversin es de
100 kJ/mol. Los componentes A y B pueden ser observados separadamente en el
espectro de RMN a temperatura ambiente (energa promedio del movimiento trmico a
temperatura ambiente RT = 2.5 kJ/mol) pues la interconversin es muy lenta. Elevando la
temperatura se puede superar ms frecuentemente la barrera de activacin. Si la
velocidad de interconversin es lo suficientemente rpida, A y B no sern ya
distinguibles en el espectro y se observarn seales nicas correspondientes a entornos
promedios entre A y B. Muchos procesos dinmicos tienen energas de activacin
menores que la anteriormente asumida. Las barreras de rotacin alrededor de simples
enlaces C-C toman valores entre 20 y 60 kJ/mol. A temperatura ambiente estas
interconversiones por rotacin son rpidas y slo se observan seales nicas que resultan
del promediado de los parmetros espectrales. Para observar las seales independientes
142
Resonancia Magntica Nuclear
de los confrmeros se requiere en estos casos disminuir la temperatura por debajo de la
ambiente. La apariencia de un espectro de RMN depende de los procesos dinmicos que
estn ocurriendo en la muestra. Para el caso podemos asumir dos entornos
diferentes para un ncleo en las especies A y B (B
A
By B
B
B) y constantes de velocidad para
los procesos directos e inversos kB
1
B y kB
-1
B respectivamente:
) ( B A

Las fracciones molares en el equilibrio de ambas especies (xB
A
B y xB
B
B) reflejan el
desplazamiento del equilibrio del sistema, que depende de la energa libre de reaccin
G:

RT
G
A
B
x
e
x
x
K

= = [5.81]
Las constantes de velocidad kB
i
B (y los tiempos de vida B
i
B) dependen de la energa libre de
activacin GP

P y la temperatura (ecuacin de Eyring):

RT
G
e
Nh
RT
k

= [5.82] N- nmero de Avogrado
En la Figura 5.80 se muestran las variaciones del espectro con la velocidad del
intercambio entre dos entornos igualmente poblados (k = kB
-1
B) separados unos 50 Hz.

Figura 5.80 Efecto del intercambio sobre un espectro

5.6.4.2 Velocidad de intercambio y espectro
Consideraremos 3 regmenes de intercambio:
143
Resonancia Magntica Nuclear
-Intercambio lento: La velocidad de interconversin de A y B es lenta en la escala de
tiempo de la RMN. Los tiempos de vida medios de las especies A y B son muy superiores
al inverso de la diferencia de frecuencias entre los sitios A y B. Se observan seales
independientes a las frecuencias B
A
By B
B
Bcuyas intensidades relativas permiten
determinar las fracciones molares xB
A
B y xB
B
B y por ende G.
-Intercambio rpido: La velocidad de interconversin es rpida. Los tiempos de vida
medios de las especies A y B son muy inferiores al inverso de la diferencia de frecuencias
entre los sitios A y B. Observaremos un espectro RMN que resulta de promediar los
parmetros espectrales de A y B. Las seales colapsadas en el espectro aparecern a
posiciones intermedias entre las de A y B:

B A A A B B A A obs
x x x x ) 1 ( + = + = [5.83]
Con la ayuda de esta ecuacin si conocemos los desplazamientos qumicos de los
confrmeros (medidos en rgimen de intercambio lento) podemos evaluar sus fracciones
molares en el rgimen de intercambio rpido.
Si hay acoplamiento con un segundo ncleo X, se observar igualmente una constante de
acoplamiento promedio:

BX B AX A obs
J x J x J + = [5.84]
Intercambio intermedio: Entre estos casos extremos tenemos la regin, mas interesante,
de intercambios de velocidad intermedia donde el sistema evoluciona desde seales
independientes para A y B a baja temperatura a seales promediadas a alta temperatura.
Cuando elevamos la temperatura observamos un proceso de ensanchamiento de las
seales, su posterior colapso a una seal nica promediada, inicialmente muy ancha, que
al continuar elevando la temperatura se convierte en una seal con reducido ancho de
lnea. La temperatura a la cual las seales individuales colapsan a una seal nica muy
ancha se denomina temperatura de coalescencia TB
C
B, a partir de la cual puede evaluarse la
constante de velocidad del proceso de interconversin:

= 2 . 2 ) (
2
B A T
C
k [5.85]
Vemos que la velocidad de interconversin a la temperatura de coalescencia depende slo
de la diferencia de desplazamientos qumicos. Dado que esta diferencia vara con BB
0
B, la
temperatura de coalescencia depende tambin de la intensidad del campo magntico.
144
Resonancia Magntica Nuclear
Sustituyendo a k en la ecuacin de Eyring podemos llegar a una expresin que nos
permite evaluar de forma aproximada la energa libre de activacin a la temperatura de
coalescencia:

) (
2
ln
B A
C
C
Nh
RT
RT G

=

[5.86]
mol kJ
k
T
T G
C
C
T
C
C T
/ 10 ) log 32 . 10 ( 1 . 19
3
+ = [5.87]
Una evaluacin ms exacta de los parmetros cinticos se logra mediante la
optimizacin de dichos parmetros por minimizacin de las diferencias entre los
espectros experimentales y los calculados (anlisis de forma de lneas, line shape
analysis). En particular las determinaciones de HP

P y SP

P son siempre menos exactas y

requieren el conocimiento de las variaciones de la energa libre de activacin en un
amplio rango de temperaturas:

T
G
S

[5.88]
Las GP

P para la rotacin alrededor de simples enlaces son comnmente de unos 20

kJ/mol, la interconversin entre los confrmeros a temperatura ambiente es muy rpida
comparada con la escala de tiempo de RMN. Los GP

P para las rotaciones alrededor de

dobles enlaces son superiores a 200 kJ/mol. Estas barreras son prcticamente
infranqueables por va trmica por lo que observaremos siempre las seales
independientes correspondientes a los 2 ismeros. Una situacin intermedia se presenta
en las rotaciones alrededor de enlaces con carcter doble parcial. En la Figura 5.81 se
muestran los espectros de RMN-P
1
PH a 80 MHz de la dimetilacetamida a diferentes
temperaturas. La rotacin alrededor del enlace (O=)C-N es muy lenta a temperatura
ambiente, por lo que se observan dos seales independiente para los grupos N-metilo en
2.9 y 3.0 ppm. La elevacin de temperatura produce la coalescencia con formacin de
una seal nica con forma de meseta hacia los 80P
0
PC. Una elevacin ulterior de la
temperatura reduce la anchura de la seal resultante de la coalescencia. Para este proceso
GP

P = 78.5 kJ/mol, y k = 17.8 sP

-1
P a la temperatura de coalescencia.

145
Resonancia Magntica Nuclear

Figura 5.81 RMN-P
1
PH Dinmica de NN-dimetilacetamida en DMSO-dB
6
B

Rotaciones restringidas que se encuentran en rgimen de intercambio lento a
temperaturas accesibles experimentalmente se presentan en carbamatos, tioamidas,
enaminas, nitrosoaminas, nitritos de alquilo y aldehdos aromticos. Rotaciones
restringidas alrededor de simples enlaces con impedimentos estricos, como en los
bifenilos ortosustituidos, o en residuos aminoacdicos aromticos (fenilalanina y tirosina)
sumergidos en la zona hidrfoba de las protenas tambin pueden detectarse por RMN.
La interconversin entre las conformaciones silla del ciclohexano es un proceso con baja
energa de activacin a temperatura ambiente. La diferenciacin entre hidrgenos axiales
y ecuatoriales puede lograrse a bajas temperaturas, aunque el espectro resulta muy
complejo en estas condiciones. Una gran simplificacin se logra con la deuteracin de
todas las posiciones excepto una (dB
11
B-ciclohexano) y desacoplamiento H-D por
irradiacin no-selectiva de este ltimo. El espectro de RMN-P
1
PH[D] a altas temperaturas
del dB
11
B-ciclohexano muestra slo un singlete en una posicin intermedia entre las de
HB
axial
B y HB
ecuat
B tal como se muestra en la Figura 5.82. Al enfriar el sistema a -60P
0
PC se
logra la decoalescencia. A temperaturas ms bajas aparecen dos seales independientes
(B
ecuat
B> B
axial
B),. El anlisis de los resultados conduce a: GP

P = 25 kJ/mol.

146
Resonancia Magntica Nuclear

Figura 5.82 RMN-P
1
PH Dinmica del ciclohexano-dB
11
B

5.6.4.3 Dinmica de procesos por otros mtodos
Los procesos dinmicos pueden estudiarse por RMN, aun cuando no pueda lograrse
llevar al sistema a la zona de intercambio intermedios y sea imposible detectar la
coalescencia/decoalescencia de las seales.
Intercambios muy lentos.- La tcnica de transferencia de saturacin puede utilizarse en
los casos de intercambio lento donde no es posible alcanzar la temperatura de
coalescencia. La irradiacin selectiva y continua de una de las seales la satura y puede
tambin saturar parcialmente cualquier otra seal en intercambio con la primera. En
efecto algunos de los ncleos del primer sitio pueden transferir la saturacin a ncleos del
segundo sitio por intercambio y reducir la intensidad de este ltimo. Esta reduccin de
intensidad depende de las velocidades de intercambio y de los tiempos de relajacin.
Mediante esta tcnica pueden estudiarse procesos con constantes de velocidad de 10P
-3
P a
147
Resonancia Magntica Nuclear
10P
1
P sP
-1
P( ~ 0.1s -10P
3
Ps), lo que extiende el rango de procesos dinmicos detectables
mediante el mtodo de observacin de coalescencia (k ~10P
0
P 10P
4
P sP
-1
P, ~ s - ms).
Intercambios muy rpidos.- La relajacin, y por ende los parmetros asociados con la
misma (TB
1
B, TB
2
B, NOE), dependen de la presencia en la red de movimientos con
frecuencias cercanas a las de resonancia y por lo tanto permiten la determinacin de
dinmicas en la escala de los ns. Para estudiar movimientos ms lentos pero no al alcance
de las tcnicas de decoalescencia, puede aplicarse la tcnica del bloqueo de espines (spin-
locking). Como ya conocemos, la aplicacin de un pulso de radiofrecuencias de 90P
0
P
BB
1
B(x) a un sistema en equilibrio lleva la magnetizacin al eje y. La posterior evolucin
libre de la magnetizacin da lugar al FID y por transformada de Fourier al espectro. Sin
embargo si, inmediatamente despus de la aplicacin del pulso de radiofrecuencias, se
aplica de forma continua un campo BB
1
B a lo largo del eje y, forzaremos a la
magnetizacin macroscpica a permanecer alrededor del eje y, mientras que los espines
individuales precesarn alrededor de este eje. Este procedimiento se denomina bloqueo
de espines y es aplicado y tratado ms en detalle al estudiar algunos experimentos
bidimensionales. En esta situacin los espines precesan a baja frecuencia (BB
1
Ben lugar
de BB
0
B) y su relajacin (relajacin en el sistema con bloqueo de espines o en el sistema
rotatorio (TB
1
B)), depender de la existencia de movimientos de baja frecuencia (ms-s),
permitiendo el estudio de dinmicas en este rango.








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