INTRODUO:

O chumbo um dos metais mais abundantes encontrados na natureza, obtido

principalmente a partir da galena (sulfato de chumbo - PbS). O saturnismo ou
plumbemia a intoxicao produzida por excesso de chumbo no organismo.
As propriedades de dureza e maleabilidade do chumbo tm determinado um
aumento progressivo em sua utilizao industrial. As fontes tradicionais de risco so:
montagem de veculos, montagem e recuperao de baterias, soldagem, minerao,
manufatura de plsticos, vidros, cermicas e indstrias de tintas, lacas, vernizes, oficinas
de artesanato, fundio, acumuladores, estaleiros, indstria qumica, fabricao de
munies, cermica, leos pesados, inseticidas. Outros riscos que apareceram
recentemente so os derivados da proteo contra as radiaes ionizantes, a manuteno
de tneis, em rodovias e o uso de estearatos de chumbo na indstria de plsticos,
conferindo maior dureza e elasticidade ao produto.
Este metal pode ser introduzido no organismo atravs da inalao (ar
atmosfrico), ingesto (gua, alimentos e solo contaminados) e por via drmica. Os
compostos de chumbo lipossolveis e projteis de chumbo quando alojados na pele e
nos msculos permitem a absoro do metal. Aps absorvido, o chumbo no
distribudo de forma homognea no organismo. No sangue o chumbo circulante est
quase sempre associado aos eritrcitos, sendo em seguida distribudo aos tecidos moles
(maiores concentraes no fgado e rins) e aos minerais (ossos e dentes). O osso o
principal compartimento onde se armazena o metal, cerca de 90% do chumbo
encontrado no organismo est depositado nos ossos. A meia vida do chumbo no sangue
e nos tecidos moles similar, da ordem de 30 a 35 dias e nos ossos de cerca de 30
anos.
No ambiente de trabalho, a principal via de absoro o aparelho respiratrio.
A deposio, reteno e absoro de partculas de chumbo no trato respiratrio depende
de fatores tais como: tamanho da partcula inalada; densidade; forma qumica;
solubilidade; ritmo respiratrio; durao da exposio; concentrao de chumbo na
atmosfera; susceptibilidade pulmonar do trabalhador, sendo mais importante durante o
esforo.
Dentro do eritrcito liga-se ao cido delta-aminolevulnico desidratase (ALA-D),
enzima polimrfica que catalisa a formao do porfobilinognio, um precursor da heme
e de outras hemoprotenas.

FINALIDADE DA ANLISE:
Determinao de ALA-D em urina atravs de espectrofotometria.


FUNDAMENTOS DO MTODO:
Para determinao de ALA-U na urina utiliza-se uma tcnica em que este
condensado com uma molcula de acetoacetato de etila formando o ALA-pirrol, que
ento extrado e colocado a reagir com o p-dimetilaminobenzaldedo, formando o ALA-
pirrol-PABA que um complexo colorido, quantificado por espectrofotometria visvel
em 553 nm.

SINTOMALOGIA:
O cido delta aminolevulnico (ALA) encontra-se elevado em duas situaes
principais, nas porfirias e na exposio e/ou intoxicao pelo chumbo. Nas porfirias
eleva-se por deficincia da porfobilinognio sintetase, durante a fase aguda da porfiria
aguda intermitente, na coproporfiria hereditria e na porfiria variegata. Nas intoxicaes
por chumbo ocorre inibio da ALA desidratase, assim como na tirosinemia hereditria,
em algumas malignidades e na intoxicao por etanol.
As principais manifestaes clnicas decorrente da intoxicao de chumbo nos
adultos so: mudana de personalidade, presena de dores de cabea, sabor metlico na
boca, perda de apetite e incmodos abdominais que culminam em vmitos e priso de
vente. Nessa faixa etria, a leso cerebral pouco comum.

FLUXOGRAMA:

2 Tubos de ensaios
contendo: 1mL de urina +
1mL de tampo acetato
pH 4,6
(Amostra e Padro)
Tubo da Amostra:
Adicionar 0,2mL de
acetoacetato de etila e
agitar durante 5
segundos
Manter ambos os tubos
(amostra e padro) em
banho de gua fervente,
durante 10 minutos
Esfriar e adicionar 3mL
de acetato de etila em
ambos os tubos. Agit-los
manualmente por 50
vezes
(ou no Vrtex)
Centrifugar a 2000 rpm
por 3 minutos
Transferir 2mL da
camada orgnica
(superior) para outros 2
tubos de ensaio
Adicionar 2mL de reativo
de Ehrlich modificado a
cada tubo e misturar
Aps 10 minutos,
determinar a absorbncia
do produto colorido
formado em 553 nm
(Referncia: tubo sem
acetoacetato de etila)
Calcular a concentrao
de delta-ALA com auxlio
de uma curva de
calibrao*
Curva de calibrao (construda a partir da diluio da soluo estoque e tratadas da
mesma maneira que a AMOSTRA DA URINA):
[g/mL]=[mg/L] mL Padro mL gua
Branco 0 1
2 g/mL 0,04 0,96
5 g/mL 0,1 0,90
10 g/mL 0,2 0,80
20 g/mL 0,4 0,60
30 g/mL 0,6 0,40

RESULTADOS:
Com a anlise de cinco padres (2, 5, 10, 20 e 30 mg/L) obteve-se a curva de
calibrao que apresentou coeficiente linear de 0,9952 e a seguinte equao linear:
Abs= 0,0503 [concentrao] + 0,12.


As amostras foram lidas em triplicata e obtiveram-se as seguintes absorbncias:
0,415; 0,383 e 0,339. Com a equao da reta foi possvel determinar a concentrao de
ALA-U presente na urina, ou seja, 8,13; 7,49 e 6,62 mg ALA/L. No entanto, a ALA-U
sofre considervel variao durante o dia, por isso este valor deve ser corrigido de
acordo com a concentrao de creatinina. Como valor de creatinina, usa-se 1,2g/L,
encontrando-se, portanto, os valores 6,77; 6,24 e 5,52 mg ALA/g creatinina.

INTERPRETAO DOS RESULTADOS:
A norma brasileira adota o ALA-U como indicador biolgico para a vigilncia
de trabalhadores expostos ao chumbo e estabelece at 4,5 mg/g de creatinina como valor
Abs = 0,0503[conc.] + 0,12
R = 0,9952
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
1,6
1,8
0 5 10 15 20 25 30 35
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

[ mg/L]
Curva de calibrao
de referncia da normalidade e estabelece at 10mg/g de creatinina como ndice
biolgico mximo permitido (IBMP), portanto, com o resultado da anlise (6,18 mg/g
creatinina) possvel perceber que a amostra apresenta quantidade de ALA-U maior
que o valor de referncia, ou seja no est dentro do normal, portanto deve-se ter um
controle maior dos nveis de exposio ao chumbo, apesar de o valor encontrado ainda
no ultrapassar o IBMP.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS:
MOREAU, R. L. M.; SIQUEIRA, M. E. P. B. Toxicologia Analtica. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan, 2010.





















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