UNIVERSIDAD AUTNOMA

METROPOLITANA
PLANTEL IZTAPALAPA





PROFESORA:
GLORIA TREJO AGULAR




MATERIA:

QUMICA ANALTICA AVANZADA





ALUMNOS:

ALTAMIRANO VVEROS ADRIANA LIZETTE
BLANCO ARMENTA STEPHANY
DOMNGUEZ GUTIERREZ GLORIA ANGELICA
FUENTES ACA JAZMIN NATHALI
LPEZ AGUILERA ALONSO
PORRAS CRUZ CSAR ALEJANDRO
RAMREZ PEA YAEL





PRCTICA 3

DETERMI NACI N DE LA CONCENTRACI N DE CAFE NA EN UNA
BEBI DA ENERGTI CA POR CROMATOGRAF A DE LI QUI DOS (HPLC) A
PARTI R DE UNA CURVA DE CALI BRACI N.





11 DE J UNI O 2014
INTRODUCCIN
La cafena es un compuesto alcaloide del grupo de las xantinas
presente en varias plantas como en los granos de caf y cacao, las
hojas de t, las bayas de guaran y la nuez de cola, y que se aade a
refrescos y a diversas medicinas. Acta como pesticida natural,
protegiendo las plantas de los insectos que se alimentan de ellas. El
contenido medio de cafena por 150 ml (1 taza) del caf tostado
molido es de alrededor de 85 mg; del caf instantneo, es de 60 mg;
del caf descafeinado, de 3 mg; del t en hojas o en bolsa, de 30
mg; del t instantneo, de 20 mg, y del cacao o chocolate caliente,
es de 4 mg. Un vaso (200 ml) de refresco con cafena tiene entre
2060 mg de cafena.
FUZE Tea con Jugo , un t listo para beber que fusiona las bondades del t con sabores
frutales, no contiene conservadores, ni colorantes artificiales. FUZE Tea con Jugo es la
primera marca global de t de Coca-Cola, naciendo en 20 pases simultneamente.
Sabores, limn, durazno, mandarina.
Todos los tipos de t contienen cafena, pero en diferentes proporciones. El t verde tiene
menos que el Oolong y ste menos que el negro. Cabe notar que el cuerpo absorbe
rpidamente la cafena del caf, lo que provoca un inmediato incremento de la actividad
cardiovascular. En cambio se cree que los polifenoles del t ralentizan el ritmo de
absorcin. Los efectos de la cafena se notan ms lentamente, pero son ms duraderos, por
lo que el t es mucho ms revitalizante que el caf.
OBEJETIVO
Que el alumno se familiarize con el uso del equipo de HPLC
Que el alumno sea capaz de generar una curva patrn cuya ecuacin que describa el
comportamiento de la concentracin de cafena con respecto a su respuesta elctrica
en un detector UV/VIS
Que el alumno gracias a la ecuacin propuesta determine la concentracin
cualitativa y cuantitativamente, de cafena de una muestra problema
MATERIAL Y EQUIPO
Muestra problema (FUZE Tea con Jugo de durazno )
Cafena grado HPLC
Cromatografo de lquidos de alta resolucin (CONSTAMETRIC 3200) con detector
de UV/VIS (SPECTROMONITOR 3200)
Fase mvil:45% Metanol 55% Solucin Bufer
Columna analtica C18, 150mm de longitud por 4.6mm de dimetro interno


MTODO
















Cromatograma y tabla de resultados de solucin patrn de cafena a 20 ppm (ANEXO 1/5)
Cromatograma y tabla de resultados de solucin patrn de cafena a 60 ppm (ANEXO 2/5)
Cromatograma y tabla de resultados de solucin patrn de cafena a 80 ppm (ANEXO 3/5)
Cromatograma y tabla de resultados de solucin patrn de cafena a 100 ppm (ANEXO 4/5)
Cromatograma y tabla de resultados de muestra problema (ANEXO 5/5) (FUZE Tea con
Jugo de durazno )
Informacin nutrimental de la muestra problema FUZE TEA Durazno (ANEXO A)







Comprobar que el cromatografo se
encuentre correctamente ensamblado,
el flujo de la columna superior a 1.0
ml/min y presin constante
Preparar diluciones de solucin
madre de cafena, 100, 200, 300,
400 y 500 ppm.
Inyectar 20L de cada
solucin patrn.
Determinar, rea bajo la curva, y
tiempo de retencin para la cafena
Inyectar muestra problema, e imprimir
todos los resultados.
RESULTADOS
Discusin
Curva Patrn
Con las reas obtenidas de cafena en un tiempos de retencin 2.85, 3.13, 3.25 y 3.22 de los
anexos 1, 2, 3 y 4 los cuales corresponden a los tiempos de retencin de la cafena en las
concentraciones 20, 60, 80, y 100 ppm respectivamente, se obtiene la tabla 1, utilizando
esta misma tabla se grafica para obtener la curva patrn de cafena (Ilustracin 1).

TABLA 1
T. retencin
(min)
Concentracin
(ppm)
Area
(mV.s)
2.85 20 747.618
3.13 60 2423.664
3.25 80 3127.871
3.22 100 4057.981


Esta curva descrita por la ecuacin
(

[] ) la cual tiene un rango de validez de 20ppm a

100ppm al tener un coeficiente de reparto de 0.9985.

Muestra Problema
En el anexo 5 se puede observar en el cromatograma y en la tabla de resultados, 4 tipos
picos de compuestos a diferentes tiempos de retencin, para evaluar la cafena en la
muestra, se toma el pico con un % de diferencia menor al 10% comparndola con el
tiempo de retencin de cafena de la ltima muestra conocida que se midi (100ppm T.
retencin 3.22min)
# Pico Area
T.
retencin
%
Diferencia
1 869.63 1.65 157.0%
2 1146.625 1.85 137.0%
3 2836.125 2.08 114.0%
4 1876.642 3.29 7.0%

El pico 4 al tener un % de diferencia menor al 10% se acepta como el pico de cafena en la
muestra problema.
Utilizando la ecuacin obtenida para la cafena en el grafico 1 se trabaja para obtener la
concentracin de cafena de la muestra problema.
y = 40.91x - 69.89
R = 0.9985
0
1000
2000
3000
4000
5000
0 20 40 60 80 100 120
A
r
e
a

(
m
V
.
s
)


Concentracin (ppm)
Curva Patrn de Cafena
ILUSTRACIN 1

[] , arreglando la ecuacin
[]

, sustituyendo el valor del rea, []

[]

Utilizando estos criterios se aprueba la presencia de cafena en la muestra de FUZE Tea con
Jugo de durazno con concentracin de 44.16 ppm.
De acuerdo con la informacin nutrimental de la muestra FUZE TEA Durazno
proporcionada por Coca-Cola Company (ANEXO A) esta bebida no cuenta con
cafena, contradicindose en estos resultados.
De acuerdo con la Norma Oficial Mexicana PROY-NOM-218-SSA1-2009, la cual
establece las disposiciones y especificaciones sanitarias que deben cumplir las
bebidas saborizadas no alcohlicas,sus congelados, los productos concentrados para
prepararlas y las bebidas adicionadas con cafena, en el apartado 11.2.1 se establece lo
siguiente:
11.2.1 En los productos con cafena debe declararse en la lista de ingredientes la cafena,
el o los ingredientes base o la mezcla de stos, seguido del contenido exacto de cafena
expresado en mg/100 mL, que debe corresponder al total ya sea por el saborizante, el o los
ingredientes base o la mezcla de stos.
Sin embargo en aos posteriores a esta norma, se establece la NORMA Oficial Mexicana
NOM-218-SSA1-2011 en la cual Coca-Cola Company participa en la elaboracin de la
misma, en el apartado 3.8 se establece:
3.8 Bebida adicionada con cafena, a los productos elaborados por la disolucin en
agua para uso y consumo humano, de azcares, ingredientes opcionales, adicionados o
no de aditivos que pueden estar o no carbonatadas y con un contenido mayor de 20
mg de cafena por 100 ml de producto.
Obteniendo as una bebida libre de etiquetado de presencia de cafena.

CONCLUSIONES
Se obtuvo la ecuacin

[] la cual describe el
comportamiento de la concentracin de cafena con respecto al estmulo respuesta de un
detector UV/Vis en un rango de validez de 20ppm a 100ppm al tener un coeficiente de
reparto de 0.9985
Se determin cualitativamente y cuantitativamente la presencia de cafena en la muestra de
FUZE Tea con Jugo de durazno en un tiempo de retencin de 3.3min con concentracin
de 44.16 ppm.
REFERENCIAS.
[1]. NORMA Oficial Mexicana NOM-218-SSA1-2011, Productos y servicios. Bebidas
saborizadas no alcohlicas, sus congelados, productos concentrados para prepararlas
y bebidas adicionadas con cafena. Especificaciones y disposiciones sanitarias.
Mtodos de prueba. Viernes 10 de febrero de 2012 DIARIO OFICIAL
[2]. Norma Oficial Mexicana PROY-NOM-218-SSA1-2009, Productos y servicios.
Bebidas saborizadas no alcohlicas, sus congelados, productos concentrados para
prepararlas y bebidas adicionadas con cafena. Especificaciones y disposiciones
sanitarias. 22/12/2010
[3]. FUZE TEA Durazno, Coca-Cola Company, visitada junio 10, 2014:
http://cocacoladeargentina.com.ar/producto/fuze-tea-durazno/
[4]. La casa del T, LA ELABORACIN DEL T, visitada junio 10, 2014:
http://www.casadelte.com/laelaboracion.htm
[5]. Consejo Europeo de Informacin sobre la Alimentacin (EUFIC), La cafena y la
salud, visitada junio 10, 2014: http://www.eufic.org/article/es/nutricion/alimentos-
funcionales/artid/cafeina-salud/
































ANEXO


ILUSTRACIN 2 HTTP://COCACOLADEARGENTINA.COM.AR/PRODUCTO/FUZE-TEA-
DURAZNO/