PRACTICADE LABORATORIO N 3 DE MICROBIOLOGIA

RECONOCIMIENTO DE LAS CELULAS SANGUINEAS DE

DEFENSA

I.- INTRODUCCION
LA SANGRE

DEFINICION

La sangre (humor circulatorio) es un tejido fluido que tienen un color rojo
caracterstico, debido a la presencia del pigmento hemoglobnico contenido en
los eritrocitos.
Es un tipo de tejido conjuntivo especializado, con una matriz coloidal lquida y
una constitucin compleja. Tiene una fase slida (elementos formes, que
incluye a los glbulos blancos, los glbulos rojos y las plaquetas) y una fase
lquida, representada por el plasma sanguneo.
Su principal funcin es la logstica de distribucin e integracin sistmica, cuya
contencin en los vasos sanguneos (espacio vascular) admite su distribucin
(circulacin sangunea) hacia casi todo el cuerpo.













FISIOLOGIA DE LA SANGRE
Una de las funciones de la sangre es proveer nutrientes (oxgeno, glucosa),
elementos constituyentes del tejido y conducir productos de la actividad
metablica (como dixido de carbono).
La sangre tambin permite que clulas y distintas sustancias (aminocidos,
lpidos, hormonas) sean transportadas entre tejidos y rganos.
La fisiologa de la sangre est relacionada con los elementos que la componen
y por los vasos que la transportan, de tal manera que:
Transporta el oxgeno desde los pulmones al resto del organismo,
vehiculizado por la hemoglobina contenida en los glbulos rojos.
Transporta el anhdrido carbnico desde todas las clulas del cuerpo
hasta los pulmones.
Transporta los nutrientes contenidos en el plasma sanguneo, como
glucosa, aminocidos, lpidos y sales minerales desde el hgado,
procedentes del aparato digestivo a todas las clulas del cuerpo.
Transporta mensajeros qumicos, como las hormonas.
Defiende el cuerpo de las infecciones, gracias a las clulas de defensa o
glbulo blanco.
Responde a las lesiones que producen inflamacin, por medio de tipos
especiales de leucocitos y otras clulas.
Coagulacin de la sangre y hemostasia: Gracias a las plaquetas y a los
factores de coagulacin.
Rechaza el trasplante de rganos ajenos y alergias, como respuesta del
sistema inmunitario.
Homeostasis en el transporte del lquido extracelular, es decir en el
lquido intravascular.













COMPOSICION DE LA SANGRE
Como todo tejido, la sangre se compone de clulas y componentes
extracelulares (su matriz extracelular). Estas dos fracciones tisulares vienen
representadas por:
Los elementos formes tambin llamados elementos figurados: son
elementos semislidos (es decir, mitad lquidos y mitad slidos) y
particulados (corpsculos) representados por clulas y componentes
derivados de clulas.
El plasma sanguneo: un fluido traslcido y amarillento que representa
la matriz extracelular lquida en la que estn suspendidos los elementos
formes.
Los elementos formes constituyen alrededor del 45 por ciento de la sangre. Tal
magnitud porcentual se conoce con el nombre de hematocrito (fraccin
"celular"), adscribible casi en totalidad a la masa eritrocitaria. El otro 55 por
ciento est representado por el plasma sanguneo (fraccin acelular).
Los elementos formes de la sangre son variados en tamao, estructura y
funcin, y se agrupan en:
las clulas sanguneas, que son los glbulos blancos o leucocitos,
clulas que "estn de paso" por la sangre para cumplir su funcin en
otros tejidos; y
los derivados celulares, que no son clulas estrictamente sino
fragmentos celulares; estn representados por los eritrocitos y las
plaquetas; son los nicos componentes sanguneos que cumplen sus
funciones estrictamente dentro del espacio vascular.










GLOBULOS ROJOS
Los glbulos rojos (eritrocitos) estn
presentes en la sangre y transportan el
oxgeno hacia el resto de las clulas del
cuerpo.
Los glbulos rojos, hemates o eritrocitos
constituyen aproximadamente el 96 por
ciento de los elementos figurados. Su valor
normal (conteo) en la mujer promedio es de
alrededor de 4.800.000, y en el varn, de
aproximadamente 5.400.000 hemates por
mm ( micro litro).
Estos corpsculos carecen de ncleo y orgnulos, por lo cual no pueden ser
considerados estrictamente clulas. Contienen algunas vas enzimticas y su
citoplasma est ocupado casi en su totalidad por la hemoglobina, una protena
encargada de transportar oxgeno y dixido de carbono. En la membrana
plasmtica de los eritrocitos estn las glucoprotenas (CDs) que definen a los
distintos grupos sanguneos y otros identificadores celulares.
Los eritrocitos tienen forma de disco bicncavo, deprimido en el centro; esta
forma aumenta la superficie efectiva de la membrana. Los glbulos rojos
maduros carecen de ncleo, porque lo expulsan en la mdula sea antes de
entrar en el torrente sanguneo (esto no ocurre en aves, anfibios y ciertos
animales). Los eritrocitos en humanos adultos se forman en la mdula sea.

GLOBULOS BLANCOS

Sangre circulando con posible glbulo
blanco arriba a la derecha. Aumento de
X1024. M. ptico.
Los glbulos blancos o leucocitos forman
parte de los efectores celulares del
sistema inmunolgico, y son clulas con
capacidad migratoria que utilizan la sangre
como vehculo para tener acceso a
diferentes partes de la anatoma. Los
leucocitos son los encargados de destruir
los agentes infecciosos y las clulas
infectadas, y tambin secretan sustancias protectoras como los anticuerpos,
que combaten a las infecciones.
El conteo normal de leucocitos est dentro de un rango de 4.500 y 11.500
clulas por mm (o microlitro) de sangre, variable segn las condiciones
fisiolgicas (embarazo, estrs, deporte, edad, etc.) y patolgicas (infeccin,




cncer, inmunosupresin, aplasia, etc.). El recuento porcentual de los
diferentes tipos de leucocitos se conoce como "frmula leucocitaria" (ver
Hemograma, ms adelante).
Segn las caractersticas microscpicas de su citoplasma (tintoriales) y su
ncleo (morfologa), se dividen en:
Los granulocitos o clulas polimorfonucleares: son los neutrfilos,
basfilos y eosinfilos; poseen un ncleo polimorfo y numerosos
grnulos en su citoplasma, con tincin diferencial segn los tipos
celulares, y
Los agranulocitos o clulas monomorfonucleares: son los linfocitos y
los monocitos; carecen de grnulos en el citoplasma y tienen un ncleo
redondeado.
Granulocitos o clulas polimorfonucleares
Neutrfilos, presentes en sangre entre 2.500 y 7.500 clulas por mm.
Son los ms numerosos, ocupando entre un 55% y un 70% de los
leucocitos. Se tien plidamente, de ah su nombre. Se encargan de
fagocitar sustancias extraas (bacterias, agentes externos, etc.) que
entran en el organismo. En situaciones de infeccin o inflamacin su
nmero aumenta en la sangre. Su ncleo caracterstico posee de 3 a 5
lbulos separados por finas hebras de cromatina, por lo cual antes se los
denominaba "polimorfonucleares" o simplemente "polinucleares",
denominacin errnea.











Basfilos: se cuentan de 0.1




a 1.5 clulas por mm en sangre, comprendiendo un 0.2-1.2% de los
glbulos blancos. Presentan una tincin basfila, lo que los define.
Segregan sustancias como la heparina, de propiedades anticoagulantes,
y la histamina que contribuyen con el proceso de la inflamacin. Poseen
un ncleo a menudo cubierto por los grnulos de secrecin.






Eosinfilos: presentes en la sangre de 50 a 500 clulas por mm (1-4%
de los leucocitos) Aumentan en enfermedades producidas por parsitos,
en las alergias y en el asma. Su ncleo, caracterstico, posee dos
lbulos unidos por una fina hebra de cromatina, y por ello tambin se las
llama "clulas en forma de antifaz".







Agranulocitos o clulas monomorfonucleares
Monocitos: Conteo normal entre 150 y 900 clulas por mm (2% a 8%
del total de glbulos blancos). Esta cifra se eleva casi siempre por
infecciones originadas por virus o parsitos. Tambin en algunos
tumores o leucemias. Son clulas con ncleo definido y con forma de
rin. En los tejidos se diferencian
hacia macrfagos o histiocitos.











Linfocitos: valor normal entre 1.300 y 4000 por mm (24% a 32% del
total de glbulos blancos). Su nmero aumenta sobre todo en
infecciones virales, aunque tambin en enfermedades Neoplasicas
(cncer) y pueden disminuir en inmunodeficiencias. Los linfocitos son los
efectores especficos del sistema inmunolgico, ejerciendo la inmunidad
adquirida celular y humoral. Hay dos tipos de linfocitos, los linfocitos B y
los linfocitos T.
Los linfocitos B estn encargados de la inmunidad humoral, esto es, la
secrecin de anticuerpos (sustancias que reconocen las bacterias y se
unen a ellas y permiten su fagocitosis y destruccin). Los granulocitos y
los monocitos pueden reconocer mejor y destruir a las bacterias cuando
los anticuerpos estn unidos a stas (opsonizacin). Son tambin las
clulas responsables de la produccin de unos componentes del suero
de la sangre, denominados inmunoglobulinas.
Los linfocitos T reconocen a las clulas infectadas por los virus y las
destruyen con ayuda de los macrfagos. Estos linfocitos amplifican o
suprimen la respuesta inmunolgica global, regulando a los otros
componentes del sistema inmunolgico, y segregan gran variedad de
citoquinas. Constituyen el 70% de todos los linfocitos.
Tanto los linfocitos T como los B tienen la capacidad de "recordar" una
exposicin previa a un antgeno especfico, as cuando haya una nueva
exposicin a l, la accin del sistema inmunolgico ser ms eficaz.












PLAQUETAS
Las plaquetas (trombocitos) son fragmentos celulares pequeos (2-3m de
dimetro), ovales y sin ncleo. Se producen en la mdula sea a partir de la
fragmentacin del citoplasma de los megacariocitos quedando libres en la
circulacin sangunea. Su valor cuantitativo normal se encuentra entre 150.000
y 450.000 plaquetas por mm (en Espaa, por ejemplo, el valor medio es de
226 000 por microlitro con una desviacin estndar de 46 000
2
).
Las plaquetas sirven para taponar las lesiones que pudieran afectar a los vasos
sanguneos. En el proceso de coagulacin (hemostasia), las plaquetas
contribuyen a la formacin de los cogulos (trombos), as son las responsables
del cierre de las heridas vasculares. Ver trombosis. una gota de sangre
contiene alrededor de 250.000 plaquetas









II.- OBJETIVOS:
Comprender, describir e identificar la estructura a nivel microscpico de
los diferentes elementos que constituyen la sangre y el sistema inmune.

III.- MATERIALES:
Individual

- Toalla






- Jabn










- Guantes







- Lamina porta objetos








- Goteros






- Lancetas







Grupal





- Algodn


l


- Alcohol







- Aceite de inmersin








- Agua destilada




- Colorante Wright
- Colorante de solucin amortiguadora tamponada
IV.- PROCEDIMIENTO:
1.- Lavado de manos


2.- Preparacin de material
3.- Identificar el dedo anular de la mano




izquierda












4.- Desinfectar la zona de puncin con alcohol y algodn

5.- Coger el dedo y en posicin hacia abajo en el extremo externo punzarlo
con la lanceta.


6.- Limpiar la primera gota de sangre con algodn seco.


7.- Presionar y colocar gota de sangre en porta objeto (colocar en un
extremo).







8.- Realizar el extendido de la gota de sangre con otra lmina portaobjeto
en un ngulo de 45 por toda la lmina hasta llegar al extremo opuesto
del porta objeto. Secar al medio ambiente por 3 a 4 minutos


9.- secar la extensin con rapidos movimientos de vaivn


10.- Agregar la coloracin Wright y contar el nmero de gotas que se le
aplica. Dejar en reposo 1-2 minutos.




11.- Luego aplicar la coloracin de solucin amortiguadora tamponada y
dejar reposar 10 minutos.






12.-Observar al microscopio (100x)


















14.- Al finalizar la practica eliminar todos los materiales contaminados con
sangre y lavarse las manos.




V.- RESULTADOS:

1.- Al teir la muestra con la coloracin Wright tomo un color violeta.

2.- Al aplicarle la coloracin de solucin amortiguadora tamponada encima de la coloracin
Wright tomo un color plateado.

3.- Se reconoci diferentes tipos de clulas sanguneas defensoras de nuestro organismo



VI.- CUESTIONARIO:





1: Cualquier herida de la piel debe ser desinfectada rpidamente?
La piel es nuestra primera lnea de defensa en contra de las enfermedades. Cuando
nuestra piel est daada por algn raspn, cortada o quemadura somos vulnerables a
una infeccin. El cuidado correcto de la herida es esencial para minimizar el tiempo en
el que se cura la herida, evitar infecciones y empeorar el rea daada. Por ello hay
que saber los aspectos bsicos de cmo cuidar heridas menores y de esta manera
acelerar el procesos de sanado. La buena curacin reduce el dolor asociado con las
heridas de la piel y reduce el tamao de la cicatrices que salen despus.
2: Cules son las clulas sanguneas defensoras de nuestro organismo?
Las clulas que actan en la defensa de nuestro cuerpo son las clulas sanguneas,
hblese de glbulos rojos o tambin llamados eritrocitos, glbulos blancos o leucocitos
y las llamadas plaquetas o tambin conocidas como trombocitos.
En cuanto a los eritrocitos, estos poseen molculas en su membrana que protegen, las
plaquetas forman los cogulos y las costras por medio del fibringeno (por eso no te
desangras cuando te cortas)
Los leucocitos: son los ms importantes de las clulas, durante su maduracin, existe
un proceso de diferenciacin por lo que has de cuenta que toda la familia se llama
leucocitos pero como en toda familia cada uno tiene un nombre; estn los:
Neutrfilos, estos son importantes porque defienden al organismo de las
bacterias y otros microorganismos.
Eosinofilos, estos poseen la actividad fagocitica de los agentes extraos al
microrganismo; adems regulan las reacciones de alergia, como un
mecanismo de defensa.
basofilos, estos poseen una molculas llamadas heparina e histamina, estas
sustancias ayudan a modular la inflamacin y tienen una gran funcin en los
estados de alergia, as como en la hipersensibilidad retardada... es decir,
cuando tienes una alergia va creciendo de forma graduada gracias a estas
clulas, por eso uno se da cuenta que es alrgica a alguna cosa.
monocitos, estos tambin fagocitan (se comen sustancias y clulas extraas).
pero si quedan atrapados en algunos rganos del cuerpo, se les llama
macrfagos tisulares, por ejemplo, supongamos que un monocito se qued en
el hgado, entonces ahora se llama macrfago tisular heptico. y as estos
nuevos macrfagos tisulares se enfocan en defender nicamente al rgano en
donde estn.
linfocitos, aqui existe una divisin los linfocitos T y los linfocitos B.
Los linfocitos T estan relacionados con la inmunidad celular (defensa de las
clulas), sintetizan a los anticuerpos, que son molculas que destruyen clulas
extraas, es decir poseen una actividad citoltica.
Por otro lado los linfocitos B, producen inmunoglobulinas, es decir anticuerpos o
inmunoglobulina y as ayudan en la inmunidad humoral, es decir qumica.




3. QUE SON LOS MACROFAGOS ? Dnde SE ENCUENTRAN EN NUESTRO
ORGANISMO Y QUE NOMBRES TOMAN?
Los macrfagos son clulas del sistema inmunitario que se localizan en los tejidos.
Proceden de clulas precursoras de la mdula sea que se dividen dando monocitos
que tras atravesar las paredes de los capilares y penetrar en el tejido conjuntivo se
convierten en macrfagos.
Los macrfagos reciben diferentes nombres segn el lugar donde se encuentren, debido a
que histricamente no se reconocan como el mismo tipo celular. As los macrfagos se
llaman:
Osteoclasto: son los macrfagos del hueso, se
encuentran principalmente en las travculas del hueso
esponjoso
Microgla: son los macrfagos del sistema nervioso
central.
Clulas de Kupffer: son los macrfagos del hgado.
Clulas espumosas: son las clulas dominantes de
la ateroesclerosis, los macrfagos al fagocitar
el colesterol cambian su estructura y se convierten en
stas.
Clula gigante de Langhans: macrfago formado por la fusin de clulas
epitelioides, presente en las enfermedades de tipo granulomatoso.
Histiocito: son los macrfagos del tejido conjuntivo.
Clulas mesangiales intraglomerulares: son los macrfagos del rin.
Macrfagos alveolares (Clulas de Polvo): son los macrfagos de los alveolos
pulmonares.

4. QUE SON LAS INMUNOGLOBULINAS? TIPOS Y FUNCIONES DE CADA UNA
DE ELLAS ?
Las inmunoglobulinas, tambin conocidas como anticuerpos, son protenas que se
encuentran en los fluidos corporales y en la sangre de los vertebrados que regulan el
sistema inmunolgico. Estas inmunoglobulinas ayudan a determinar qu objetos
extraos hay y los neutralizan. Algunos ejemplos de objetos extraos en el torrente
sanguneo son los virus y las bacterias. Las inmunoglobulinas son creadas por un
glbulo blanco llamado clula plasmtica y se pueden clasificar en cinco clases
diferentes en funcin de sus propiedades antignicas.
Los cinco tipos de anticuerpos son los siguientes:
IgA:




La inmunoglobulina A es el anticuerpo principal encontrado en las
membranas del tracto respiratorio y gastrointestinal. La segunda
inmunoglobulina ms comn en el cuerpo humano, IgA tambin se puede
encontrar en las lgrimas, la saliva, moco, y el calostro. IgA es una de las
inmunoglobulinas ms importantes en la inmunidad local. Los dos
subclases de IgA son IgA1 e IgA2.
IgD:
Esta clase de inmunoglobulina est presente en el suero sanguneo en
pequeas cantidades. La inmunoglobulina D se puede encontrar en las
superficies de clulas B y se utiliza como un receptor para el antgeno.
Ayuda a anclar a las membranas celulares con su abundancia de
aminocidos. No est completamente determinado por qu la IgD se
encuentra en el suero, haciendo que sea el anticuerpo menos
comprendido.

IgE:
La inmunoglobulina E se puede encontrar protegiendo al cuerpo en las
membranas mucosas y en la piel. La IgE es el anticuerpo menos comn
que se encuentra en el torrente sanguneo. Es el anticuerpo que
desencadena reacciones alrgicas, que se producen cuando la IgE se une
a las clulas a las que el cuerpo es alrgica. La IgE tambin funciona
durante problemas con parsitos y la cantidad de IgE a veces se mide
para determinar si el cuerpo tiene una infeccin parasitaria.

IgG:
Esta clase importante de inmunoglobulinas es la principal defensa del
cuerpo contra las bacterias. La IgG constituye alrededor del 75 por ciento
de todas las inmunoglobulinas humanas y esta es la nica clase que
puede atravesar la placenta para proteger a los recin nacidos contra las
infecciones. La inmunoglobulina G es la ms verstil de todos los
anticuerpos, porque puede llevar a cabo funciones de otros tipos de
anticuerpos tambin. Los cuatro subclases de IgG son IgG1, IgG2, IgG3,
IgG4.

IgM:
Estas inmunoglobulinas luchan contra las infecciones de la sangre y
ayudan a desencadenar la produccin adicional de la inmunoglobulina G.
Al igual que IgD, estos anticuerpos estn presentes en los linfocitos. De
todas las inmunoglobulinas el 10
por ciento son IgM. La
inmunoglobulina M es el primer
anticuerpo producido por el feto.
Estas inmunoglobulinas estn
bien adaptadas para acumular
microorganismos y ayudarles a
ser eliminados del cuerpo.

5.-Que es un hemograma, importancia?




El hemograma es un anlisis de sangre en el que se mide en global y en
porcentajes los tres tipos bsicos de clulas que contiene la sangre, las
denominadas tres series celulares sanguneas:
Serie eritrocitaria o serie roja
Serie leucocitaria o serie blanca
Serie plaquetaria
Cada una de estas series tiene unas funciones determinadas, y estas funciones se
vern perturbadas si existe alguna alteracin en la cantidad o caractersticas de las
clulas que las componen.

-La serie roja est compuesta por los hemates o glbulos rojos. Su funcin primordial
es transportar el oxgeno desde los pulmones (a donde llega a travs de la respiracin)
a todas las clulas y tejidos del organismo.
-La serie blanca est formada por los leucocitos o glbulos blancos. Sus funciones
principales son la defensa del organismo ante las infecciones y la reaccin frente a
sustancias extraas.
El recuento de leucocitos tiene dos componentes. Uno es la cifra total de leucocitos en
1 mm3 de sangre venosa; el otro, la frmula leucocitaria, mide el porcentaje de cada
tipo de leucocitos, que son: segmentados o neutrfilos, monocitos, linfocitos,
eosinfilos y basfilos. El aumento del porcentaje de un tipo de leucocitos conlleva
disminucin en el porcentaje de otros.
Estos valores varan dentro de la normalidad segn la edad.
-La serie plaquetaria compuesta por plaquetas o trombocitos, se relaciona con los
procesos de coagulacin sangunea.
En el hemograma se cuantifica el nmero de plaquetas y el volumen plaquetario medio
(VPM). El VPM proporciona informacin sobre el tamao de las plaquetas.
El recuento de plaquetas tambin vara con la edad.

Cmo se realiza?
Esta prueba no precisa ayuno previo. Previa desinfeccin se extraen en torno a
5 cc de sangre venosa, generalmente de una vena de la flexura del codo. Tras
terminar la extraccin y retirar la aguja, se aplica presin en el punto de
puncin durante unos minutos. Posteriormente se comprueba que no haya
hemorragia en dicho punto.

Para qu sirve?
El hemograma es una prueba que sirve para orientar hacia el diagnstico de
diversas enfermedades que se han sospechado por la historia clnica y la
exploracin fsica.
A veces, los datos que nos da son suficientes para confirmar o descartar la
enfermedad sospechada, pero con frecuencia se necesita utilizar otras pruebas
diagnsticas que aporten ms informacin.



Valores normales de un hemograma:





6.- Cual e sla formula leucocitaria porcentual en un ser humano ,valores
normales y por grupo de edad?
-La frmula de leucocitos o leucocitaria mide el porcentaje presente de cada tipo de
leucocitos en el total de glbulos blancos. Al ser un porcentaje al aumentar un grupo
de leucocitos disminuye otro, aunque en ocasiones solo existe un aumento o
disminucin de un tipo concreto y por ello solo el porcentaje ofrece una valoracin
orientativa pero se debe contar el nmero total de cada grupo para saber cul es la
variable a tomar en cuenta y estudiar.
VALORES NORMALES Y POR GRUPO DE EDAD: