Sunteți pe pagina 1din 94

Clasa 2

TRANSFERAZE EC: 2
Transferazele sunt enzime care transfer un radical
sau o grupare funcional de pe un substrat donor
de grupare funcional pe un substrat acceptor.
SA + SB SB + SA
Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase
2. Transferaze
2.1. Enzime care transfer grupri cu un singur atom de carbon
2.1.1. Metiltransferaze
2.1.2. Hidroximetiltransferaze, formiltransferaze i transferazele similare
2.1.3. Carboxiltransferaze i carbamoiltransferaze
2.1.4. Amidinotransferaze
2.2. Enzime care transfer grupri aldehidice sau cetonice
2.3. Aciltransferaze
2.3.1. Acetiltransferaze
2.3.2. Aminoaciltransferaze
2.4. Glicoziltransferaze
2.4.1. Hexoziltransferaze
2.4.2. Pentoziltransferaze
2.4.99. Enzime care transfer alte grupri glicozil
2.5. Enzime care transfer grupri alchil sau aril
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot
2.6.1. Aminotransferaze (transaminaze)
2.6.2. Amidinotransferaze
2.6.3. Oximinotransferaze
2.6.99. Enzime care transfer alte grupri cu azot
2.7. Enzime care transfer grupri care conin fosfor
2.7.1. Fosfotransferaze cu o grupare alcool ca acceptor
2.7.2. Fosfotransferaze cu o grupare carboxil ca
acceptor
2.7.3. Fosfotransferaze cu o grupare cu azot ca
acceptor
2.7.4. Fosfotransferaze cu o grupare fosfat ca acceptor
2.7.5. Nucleotidiltransferaze
2.7.8. Transferaze pentru alte grupri cu fosfat
substituite
2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche
2.8. Enzime care transfer grupri care conin sulf
2.8.1. Sulfurtransferaze
2.8.2. Sulfotransferaze
2.8.3. CoA-transferaze
COFACTORII TRANSFERAZELOR
COFACTORII TRANSFERAZELOR CARE TRANSFER
GRUPRI CU UN SINGUR ATOM DE CARBON
(EC 2.1)
Cofactorii metiltransferazelor (EC 2.1.1)
Cofactorii metiltransferazelor (EC 2.1.1)
Acidul tetrahidrofolic (FH
4
)
Cobalamina (vitamina B
12
)
Acidul tetrahidrofolic cofactor enzimatic
CH
2
COOH
CH
COOH
NH C C
H
2
9
NH
10
N
3
N
1
4
N
8
N
5
OH
N H
2
O
CH
2
Acid folic (F)
Pterina
2-amino-4-hidroxi-6-metil-pterid
Acid para-
aminobenzoic
Acid glutamic
A
B
Pterina
2-amino-4-hidroxi-6-metil-pterid
C
H
2
9
N
3
N
1
4
N
8
N
5
OH
N H
2
A
B
C NH
2
10
O
Acid para-
aminobenzoic
Acid glutamic
CH
2
CH
COOH
NH
2
CH
2
COOH
Acid pteroic
Acid folic (F)
2 NADPH+H
+
2 NADP
+
dihidrofolat reductaza
NH CH
CH
2
CH
2
COOH
COOH
CH
2
9
NH
10
N
3
N
1
4
N
8 CH
2
N
5
OH
N H
2
H
O
C
Acid 5, 6, 7, 8 - tetrahidrofolic (FH
4
)
H
H
Forma redus a
acidului folic
Acidul tetrahidrofolic particulariti structurale i
funcionale
Acidul folic este format dintr-un nucleu pteridinic substituit (pterina), unit
printr-o punte metilenic de acidul para-aminobenzoic, legat la rndul su
printr-o legtur peptidic de acidul glutamic.
Pteridina este rezultatul asocierii a dou nuclee condensate:
pirimidinic (nucleul A) i pirazinic (nucleul B).
Biosinteza acidului tetrahidrofolic are loc cu participarea enzimei
tetrafolat: NADP
+
oxidoreductaza (EC 1.5.1.3, cunoscut i sub numele de
dihidrofolat-reductaz, tetrahidrofolat dehidrogenaza, sau folic-
reductaza) care realizeaz, n dou etape, conversia acidului folic la acid
5,6,7,8 tetrahidrofolic(FH
4
)
Formele active ale acidului tetrahidrofolic
FH
4
poate participa la transferul gruprilor cu un atom de carbon
pe care le leag la N
5
i/sau N
10
FH
4
poate lega resturi metil, metilen, formil sau formimino.
Acceptorii acestor grupri sunt o gam variat de biomolecule.
N
5
N H
10
C H
3
N
5
-metil-FH
4
N
5
N H
10
O
H
N
5
-formil-FH
4
N
H
5
N
10
O
H
N
10
-formil-FH
4
N
5
N
10
C H
2
N
5
-N
10
-metilen-FH
4
N
5
N H
10
CH
NH
N
5
-formimino-FH
4
Dei acidul tetrahidrofolic (FH
4
) este transportor pentru gruparea metil sub
form de N
5
-metil-FH
4
, aceasta nu are totui capacitatea de a transfera
gruparea metil direct unui substrat acceptor de metil, ci folosete i
gruparea metil activat, sub form de sulf-adenozil metionin (SAM).
Deci, procesele de metilare sunt dependente att de SAM, ct i de FH
4
, ele
fiind procese importante n biosinteza a numeroase biomolecule eseniale
din organismul uman : colin, fosfatidilcoline, adrenalin, tocoferoli,
timin (din structura ADN) etc.
Formele active ale acidului tetrahidrofolic
Mecanismul de aciune al metiltransferazelor
1. Activarea metioninei donorul principal de grupri metil
2. Transferul gruprilor metil pe acidul tetrahidrofolic (FH
4
)
3. Metilarea diferitelor substrate
Presupune existena:
Unui donor de grupri metil METIONINA
Unor substane acceptoare de grupri metil: etanolamin,
noradrenalin, uracil, etc
3 ETAPE:
1. Activarea metioninei
CH
2
CH
2
S
CH N H
2
C H
3
COOH
CH
2
O
OH OH
N
N
N
N
NH
2
CH
2
CH
2
S
CH N H
2
CH
3
COOH
+
Sulf-adenozil-metionina (SAM)
("CH
3
" metil activat)
+
+ ATP
fosfat (P
i
)
pirofosfat (PP
i
)
L-metionina
Sulf-adenozil metionina (SAM) = forma activat a metilului CH
3

metionin
adenozil
transferaza
2. Transferul gruprilor metil pe acidul tetrahidrofolic (FH
4
)
SAM reacioneaz cu FH
4
i rezult acid N
5
-metil sau N
10
-metil-tetrahidofolic,
adevratul transportor al gruprii CH
3
.
Din reacie rezult i sulf-adenozil-homocisteina, care se va scinda ulterior n
L-homocistein i adenozin
CH
2
CH
2
S
CH N H
2
C H
3
COOH
CH
2
O
OH OH
N
N
N
N
NH
2
CH
2
CH
2
S
CH N H
2
COOH
CH
2
O
OH OH
N
N
N
N
NH
2
+
Sulf-adenozil-metionin (SAM)
+ FH
4
Sulf-adenozil-homocistein
acid N
5
-metil-tetrahidrofolic
sau
acid N
10
-metil-tetrahidrofolic
3. Metilarea diferitelor substrate
Acizii N
5
-metil-tetrahidrofolic sau N
10
-metil-tetrahidrofolic transfer
grupri CH
3
pe substratul acceptor, cu refacerea moleculei de FH
4
.
C H
2
C H
2
OH
NH
2
N
CH
3
CH
3
CH
3
C H
2
C H
2
OH
Etanolamin
3 SAM
3 S-adenozil
homocistein
Colin
Metiltransferaza
3 N
5
-metil-FH
4
+
Fosfatidil coline (lecitine)
Transformarea
noradrenalinei n
adrenalin
OH
OH
C H
C H
2
NH
2
OH
OH
OH
C H
C H
2
NH
OH
CH
3
Noradrenalin
N
5
-metil
-FH
4
Adrenalin
"CH
3
"
SAM
Noradrenalin-N-metil transferaza
EC: 2.1.1.28
S-adenozil
homocisteina
FH
4
+ FH
4
Fosfatidiletanolamine
N
H
N H
O
O
N
H
N H
O
O
CH
3
+ N
5,
N
10
-metilen-FH
4
ribotimidil-sintaza
folat dependent
EC 2.1.1.74
Uracil
(ARNt)
Timin
FADH
2 FAD
Formarea timinei.
N
5
-N
10
-metilen-tetrahidrofolatul realizeaz metilarea uracilului din structura
ARN cu formarea timinei, care intr n structura acizilor deoxiribonucleici (ADN).
CH
COOH
CH
2
OH
CH
2
COOH
NH
2
L-Serina
+
FH
4 +
Glicocol
PLP
N
5
-N
10
-metilen-
tetrahidrofolat
+ H
2
O
H
2
N
hidroximetiltransferaza
Interconversia glicocol serin, deci transferul gruprilor hidroximetil se
realizeaz cu intervenia N
5
-N
10
-metilentetrahidrofolatului, proces catalizat de
glicin-hidroximetil transferaza (EC 2.1.2.1.)
+ FH
4
(ARN)
(ADN)
Cobalamina (vitamina B
12
)
Nucleu corinic - conine n
centrul su un atom de
cobalt (Co) trivalent i
hexacoordinat. Acesta se
leag de 5-deoxiadenozin
(cu formarea unei legturi
speciale carbon-cobalt) sau
de o grupare metil (-CH
3
).
Cofactorii enzimatici -
derivai de cobalamine:
5-deoxiadenozil
cobalamina i
metilcobalamina.
Formele biologic
active ale
vitaminei B
12
X
Metilcobalamina cofactor pentru metil-transferaze
intervine ca metil transferaz n refacerea metioninei i a acidului
tetrahidrofolic (FH
4
)
Interconversia homocistein-metionin se realizeaz prin cooperarea
acidului N
5
-metil-tetrahidrofolic cu coenzima cobalaminic.
CH
2
CH
2
SH
CH N H
2
COOH
CH
2
CH
2
S
CH N H
2
COOH
C H
3
N
5
-metil-FH
4
+
L-Homocisteina
FH
4
+
L-Metionina
Metionin-sintaza
EC 2.1.1.13
Cobalamina
metilcobalamina
Cobalamina - cofactor i pentru unele izomeraze (EC 5)
HOOC CH
2
4
CH
2
3
C
2
H
COOH
1
NH
2
HOOC CH
CH
3
C
H
COOH
NH
2
metil-aspartat-mutaza
EC: 4.4.99.1
Acid glutamic
Acid metil-aspartic
metil-cobalamina
HOOC CH
CH
3
O
SCoA
HOOC CH
2
CH
2
O
SCoA
5'-deoxiadenozil
cobalamin
Succinil ~SCoA
Metilmalonil -
CoA mutaza
Metilmalonil~SCoA
1 2
3
1
2 3
C
~
C
~
EC: 5.4.99.1
EC: 5.4.99.2
Gluconeogenez
Biosinteza hem-ului
Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase
2. Transferaze
2.1. Enzime care transfer grupri cu un singur atom de carbon
2.1.1. Metiltransferaze
2.1.2. Hidroximetiltransferaze, formiltransferaze i transferazele similare
2.1.3. Carboxiltransferaze i carbamoiltransferaze
2.1.4. Amidinotransferaze
2.2. Enzime care transfer grupri aldehidice sau cetonice
2.3. Aciltransferaze
2.3.1. Acetiltransferaze
2.3.2. Aminoaciltransferaze
2.4. Glicoziltransferaze
2.4.1. Hexoziltransferaze
2.4.2. Pentoziltransferaze
2.4.99. Enzime care transfer alte grupri glicozil
2.5. Enzime care transfer grupri alchil sau aril
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot
2.6.1. Aminotransferaze (transaminaze)
2.6.2. Amidinotransferaze
2.6.3. Oximinotransferaze
2.6.99. Enzime care transfer alte grupri cu azot
2.7. Enzime care transfer grupri care conin fosfor
2.7.1. Fosfotransferaze cu o grupare alcool ca acceptor
2.7.2. Fosfotransferaze cu o grupare carboxil ca
acceptor
2.7.3. Fosfotransferaze cu o grupare cu azot ca
acceptor
2.7.4. Fosfotransferaze cu o grupare fosfat ca acceptor
2.7.5. Nucleotidiltransferaze
2.7.8. Transferaze pentru alte grupri cu fosfat
substituite
2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche
2.8. Enzime care transfer grupri care conin sulf
2.8.1. Sulfurtransferaze
2.8.2. Sulfotransferaze
2.8.3. CoA-transferaze
COFACTORII TRANSFERAZELOR CARE TRANSFER
GRUPRI CU UN SINGUR ATOM DE CARBON
(EC 2.1)
Cofactorii carboxitransferazelor
Biotin-protein enzime (EC 2.1.3)
Biotin-protein enzime (EC 2.1.3)
Biotin enzimele sunt proteine enzimatice care au n structur biotina, o
vitamin din complexul B.
Aceasta ndeplinete rolul de coenzim transportoare de CO
2
n cursul
proceselor de carboxilare, fiind i factor de cretere pentru
microorganisme i levuri.
Enzimele cu biotin sunt inhibate de unele glicoproteine din albuul de
ou, cum este cazul avidinei.
C H
2
C H CH
C
H
S
N H NH
O
C
H
2
C
H
2
C
H
2
C
H
2
COOH
nucleu
imidazolic
nucleu
tiofen
acid valerianic
Mecanismul de aciune al biotin-protein enzimelor
N
H
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
CH
C O
N H
C H
2
C H CH
C
H
S
N NH
C
O
C
H
2
C
H
2
C
H
2
C
H
2
C
O
C
O H
O
N
H
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
CH
C O
N H
C H
2
C H CH
C
H
S
N H NH
C
O
C
H
2
C
H
2
C
H
2
C
H
2
C
O
CO
2
Rest de lizin din
proteina enzimatic
c
Carboxibiotin-enzima
Apoenzima
("CO
2
" activ)
Biotin-carboxilaza
Rest de lizin din
proteina enzimatic
c
Biotin-enzima
Apoenzima
ATP
ADP+Pi
biotin carboxyl carrier protein
Biotina cofactor pentru transferaze
(carboxitransferaze)
CH
3
C O
COOH
CH C
O
HOOC
CH
3
CH
2
C
O
C H
3
CH
2
C O
COOH
COOH
+
Acid piruvic
~SCoA
Metilmalonil~SCoA
Metilmalonil
carboxi transferaza
(EC 2.1.3.1)
ATP
~SCoA
Propionil~SCoA
+
Acid oxalil acetic
AMP + PPi
- Acizi grasi cu numr
impar de atomi de carbon
- Aminoacizi cu caten
ramificat
Interrelaii ntre metabolismului lipidic, proteic i glucidic !
Ciclul
Krebs
sau transcarboxilaz
Biotina cofactor i pentru ligaze (EC 6)
CH
3
C O
COOH
CH
2
C O
COOH
COOH
+ "CO
2
"
Piruvat
carboxilaza
Grupare carboxilica
activata cu biotina
ATP
Acid oxalil acetic
Carboxi biotina
EC: 6.4.1.1.
C H
3
C
O
C
H
2
C
O
HOOC
~SCoA
Acetil-CoA
+
"CO
2
"
Grupare carboxilica
activata cu biotina
~SCoA
Malonil-CoA
Carboxi biotina
+ ADP + Pi
Ci de biosintez celulare
Biosinteza acizilor grai
(molecul starter)
Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase
2. Transferaze
2.1. Enzime care transfer grupri cu un singur atom de carbon
2.1.1. Metiltransferaze
2.1.2. Hidroximetiltransferaze, formiltransferaze i transferazele similare
2.1.3. Carboxiltransferaze i carbamoiltransferaze
2.1.4. Amidinotransferaze
2.2. Enzime care transfer grupri aldehidice sau cetonice
2.3. Aciltransferaze
2.3.1. Acetiltransferaze
2.3.2. Aminoaciltransferaze
2.4. Glicoziltransferaze
2.4.1. Hexoziltransferaze
2.4.2. Pentoziltransferaze
2.4.99. Enzime care transfer alte grupri glicozil
2.5. Enzime care transfer grupri alchil sau aril
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot
2.6.1. Aminotransferaze (transaminaze)
2.6.2. Amidinotransferaze
2.6.3. Oximinotransferaze
2.6.99. Enzime care transfer alte grupri cu azot
2.7. Enzime care transfer grupri care conin fosfor
2.7.1. Fosfotransferaze cu o grupare alcool ca acceptor
2.7.2. Fosfotransferaze cu o grupare carboxil ca
acceptor
2.7.3. Fosfotransferaze cu o grupare cu azot ca
acceptor
2.7.4. Fosfotransferaze cu o grupare fosfat ca acceptor
2.7.5. Nucleotidiltransferaze
2.7.8. Transferaze pentru alte grupri cu fosfat
substituite
2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche
2.8. Enzime care transfer grupri care conin sulf
2.8.1. Sulfurtransferaze
2.8.2. Sulfotransferaze
2.8.3. CoA-transferaze
Cofactorii enzimelor care transfer grupri
aldehidice sau cetonice (EC 2.2.)
Tiamin pirofosfatul (TPP) cofactor enzimatic
Tiamin pirofosfatul (TPP)
forma activ a vitaminei B1
C H
3
CH
2
NH
2
N
N
2
'
N
C H
S
CH
3
CH
2
CH
2
O P
O
O P
OH
O
O
OH
+
Enzima
1
2
3
4
5
6
1'
3'
4'
5'
TPP - cofactor enzimatic pentru enzime din clasa:
transferaze, subclasa transferaze ale gruprilor aldehidice i cetonice (EC 2.2)
liaze, subclasa liaze carbon-carbon (EC 4.1), care catalizeaz reacii de
decarboxilare ale -cetoacizilor, eseniale pentru metabolismului intermediar.
C H
3
NH
2
N
N
1
2
3
4
5
6
CH
2
2
'
N
C H
S
+
1'
4'
5'
CH
3
CH
2
CH
2
O P
O
O P
OH
O
O
OH
Enzima
atom de carbon reactiv
proton disociabil
TPP cofactor pentru TRANSFERAZE
1. TRANSCETOLAZE (EC 2.2)
CH
2
C=O
CH
C H
C H
2
O H
OH
OH
O PO
3
H
2
CH
2
-OH
C=O
CH
2
O
PO
3
H
2
C H OH
C H OH
C H OH
CH O H
CH
2
O
PO
3
H
2
C H
C
O
H
C H OH
C H OH
OH
C H
2
O PO
3
H
2
C H
C
O
H
OH
+ +
Transcetolaza
TPP
Mg
2+
Xilulozo-5-fosfat Ribozo-5-fosfat
Sedoheptulozo-7-fosfat
Gliceraldehid-
3-fosfat
(5C) (5C)
(7C) (3C)
EC 2.2.1.1
Reacii din ciclul pentozo-fosfat de degradare a glucozei:
CH
2
-OH
C=O
CH
2
O
PO
3
H
2
C H OH
C H OH
C H OH
CH O H
C H
2
O PO
3
H
2
C H
C
O
H
OH
C H
2
O PO
3
H
2
C
O
H
C H OH
C H
OH
C H
2
O PO
3
H
2
CH
2
-OH
C=O
C H OH
C H OH
CH O H
+
Sedoheptulozo-7-fosfat
Gliceraldehid-
3-fosfat
(7C)
(3C)
Eritrozo-4-fosfat
(4C)
+
Fructozo-6- fosfat
(6C)
TPP
Mg
2+
Transaldolaza
EC 2.2.1.2
Calea pentozo-fosfailor este o cale alternativ de degradare a glucozei
n celul, dependent de tiamin.
TPP cofactor pentru LIAZE
Subclasa liaze carbon-carbon (EC 4.1)
decarboxilarea anaerob (simpl) a acidului piruvic;
decarboxilarea oxidativ a acidului piruvic ;
decarboxilarea oxidativ a acidului o-cetoglutaric.
CH
3
C=O
COOH
CH
3
CHO
CO
2
acid piruvic
acetaldehida
alcool etilic
piruvat decarboxilaza
acid acetic
TPP;
Mg
2+
NADH + H
+
NAD
+
Decarboxilarea simpl a acidului piruvic (microorganisme)
CH
3
C=O
COOH
CH
2
CH
2
O PP
CO
2
CH
3
CHO
N
C
S
H
N
C
S
N
C
S
O H
COOH
C H
3
C H
3
O H
Acid piruvic
(substrat)
+
+
-
Acid piruvic activat
Complex [ES]
Acetaldehid
C
C
Enzim
C
C
+
Enzim
C
C
+
derivat o- Hidroxietil - TPP
Enzim
TPP - Enzim
TPP - Enzim
2'
C CH
carbanion
Mecanismul decarboxilrii simple a acidului piruvic
(lactilderivat)
Decarboxilarea oxidativ a o-cetoacizilor
(piruvic i o-cetoglutaric)
E
1
E
2
E
3
Acid piruvic Acetil~SCoA + NADH + H
+
+ CO
2
TPP
acid
lipoic
FAD
NAD
+
AG
o'
= - 33,44 kJ/mol (- 8,0 kcal/mol)
CH
2
CH
2
COOH
C
COOH
O
CH
2
CH
2
COOH
C O
SCoA
~
E
1
E
2

NAD
+
FADH
2
Acid o-cetoglutaric
Succinil~SCoA
TPP
Acid lipoic; HS-CoA
+ NADH + H
+
+ CO
2

E
3
AG
o'
= -7,2 kcal/mol
complex multienzimatic !
Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase
2. Transferaze
2.1. Enzime care transfer grupri cu un singur atom de carbon
2.1.1. Metiltransferaze
2.1.2. Hidroximetiltransferaze, formiltransferaze i transferazele similare
2.1.3. Carboxiltransferaze i carbamoiltransferaze
2.1.4. Amidinotransferaze
2.2. Enzime care transfer grupri aldehidice sau cetonice
2.3. Aciltransferaze
2.3.1. Acetiltransferaze
2.3.2. Aminoaciltransferaze
2.4. Glicoziltransferaze
2.4.1. Hexoziltransferaze
2.4.2. Pentoziltransferaze
2.4.99. Enzime care transfer alte grupri glicozil
2.5. Enzime care transfer grupri alchil sau aril
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot
2.6.1. Aminotransferaze (transaminaze)
2.6.2. Amidinotransferaze
2.6.3. Oximinotransferaze
2.6.99. Enzime care transfer alte grupri cu azot
2.7. Enzime care transfer grupri care conin fosfor
2.7.1. Fosfotransferaze cu o grupare alcool ca acceptor
2.7.2. Fosfotransferaze cu o grupare carboxil ca
acceptor
2.7.3. Fosfotransferaze cu o grupare cu azot ca
acceptor
2.7.4. Fosfotransferaze cu o grupare fosfat ca acceptor
2.7.5. Nucleotidiltransferaze
2.7.8. Transferaze pentru alte grupri cu fosfat
substituite
2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche
2.8. Enzime care transfer grupri care conin sulf
2.8.1. Sulfurtransferaze
2.8.2. Sulfotransferaze
2.8.3. CoA-transferaze
35
2.3 ACIL TRANSFERAZE
36
2.3 ACIL TRANSFERAZE
Catalizeaz transferul radicalilor acil
de la substrate donoare (acizi organici)
la diferii acceptori, substane cu structuri diferite
Cofactorii pentru aciltransferaze sunt:
coenzima A
acidul lipoic
ACP (acyl carrier protein) enzim din complexul multienzimatic
ce intervine n biosinteza acizilor grai.
CH
3
SCoA
SCoA R
HS-CoA
Coenzima A
C
O
~
Acetil~SCoA
C
O
~
Acil~SCoA
R C
O
37
Coenzima A (HS-CoA) = coenzima acilant sau acetilant
CH
2
4
C
3
CH
3
CH
3
O CH
2
OH
C
1
O
NH
CH
2
CH
2
C O NH CH
2
CH
2
SH
P O
OH
O
P
O
OH
O
CH
2
O
N
N
N
N
NH
2
OH O
P OH O
OH
ac. 2,4-dihidroxi
3,3-dimetil butiric
cisteamin
adenin
Ribozo-3-fosfat
Pirofosfat
rest de
|-alanin
3fosfo-ADP-pantoil -alanil-cisteamina
38
NH CH
2
CH
2
SH
NH
CH
2
CH
2
C O
CH
2
C
CH
3
CH
3
O CH
OH
C
O
P O
OH
O
P O
OH
O
CH
2
O
N
N
N
N
NH
2
OH O
P OH O
OH
Acid pantotenic (vitamina B
5
)
Coenzima A (HS-CoA)
1
2 3
4
5
39
CH
3
~ C
O
sau
~
C
O
R
C H
3
~
C
O
SCoA
~
C
O
R CoA S
CH
2
CH
3
CH
3
O CH
OH
O
NH
CH
2
CH
2
O NH CH
2
CH
2
P O
OH
O
P O
OH
O
CH
2
O
N
N
N
N
NH
2
OH O
P OH O
OH
C C
C
SH
Coenzima A (HS-CoA)
coenzima acilant sau acetilant
40
Coenzima A este implicat n activarea acizilor grai
Dou ETAPE:
OH
O P O H
2
C
O
OH
acid gras
R
O
SCoA
Acil ~SCoA
R
O
SCoA
Acil ~SCoA
O
N
N
N
N
NH
2
OH OH
R C
+
ATP
PP
i
R C
acil adenilat (acil activat)
1.
2.
acil-adenilat + HS-CoA
+
AMP
R
C
+ ATP + HS-CoA
+ AMP + PP
i
O
O
OH
O
C ~
C ~
Reacia global
EC: 6.2.1.3 acid organic: HS-CoA ligaza (AMP forming) (tiokinaze)
41
O
OH
CH
2
O P OH
OH
O
HS-CoA
CH
2
CH
2
O P
CH
2
O
O
O
CH
2
O P
CH
2
O
O
O
R
1
C ~SCoA +
acid gras activat
L-glicerol 3-fosfat
1-monoacil glicerol 3-fosfat
CH
CH
C
R
1
+ R
2
C ~SCoA
CH
C
R
1
1,2 diacil glicerol 3-fosfat
C
R
2
HO
HO
O
triacilgliceroli
Acil
~
SCoA particip la biosinteza triacilglicerolilor
(EC:2.3.1.15) Acil~SCoA : L-glicerol 3-fosfat 1-O-aciltransferaza
42
CH
3
~ C
O
CH
2
CH
3
CH
3
O CH
OH
O
NH
CH
2
CH
2
O NH CH
2
CH
2
P O
OH
O
P
O
OH
O
CH
2
O
N
N
N
N
NH
2
OH O
P OH O
OH
C C
C
S
C H
3
~
C
O
SCoA
Acetil coenzima A intermediar metabolic bogat n energie
Acetil
~
SCoA
Legtur tioesteric macroergic
(G
o
= - 7,5 kcal/mol)
43
Exemple de ACETIL-TRANSFERAZE
HO CH
2
CH
2
CH
3
CH
3
CH
3
CH
3
O
SCoA
CH
2
CH
2
CH
3
CH
3
CH
3
O
O
H
3
C
HS-CoA
N
+
Colin
Acetilcolin
Colinacetilaz
C
~
N
+
C
(EC:2.3.1.6) Acetil~SCoA: colin O-acetil transferaz
(EC:2.3.1.1) Acetil~SCoA : L-glutamat N-acetiltransferaza
CH
3
O
SCoA
COOH
CH
2
CH
2
CH N H
2
COOH
COOH
CH
2
CH
2
CH
COOH
NH
O
C H
3
HSCoA
acid N-acetil glutamic
+
C
~
+
acid L-glutamic
C
44
EC : 2.3.1.3 Acetil~SCoA : D-glucozamin N-acetiltransferaza
n Dizaharidul din structura acidului hialuronic
O
COOH
OH
OH
O
O
CH
2
-OH
NH
OH
O
O C H
3
O
COOH
OH
OH
O
O
CH
2
-OH
NH
OH
O
O C H
3
1
2 3
4
5
6
4
1
3
C
|
4
1
3
C
|
D-glucuronat
N-acetil-D-glucozamina
CH
3
O
SCoA
O
CH
2
OH
OH
NH
2
OH
OH
O
CH
2
OH
OH
NH
OH
OH
CH
3
O
HSCoA
D-glucozamina
N-acetil D-glucozamina
C
~
+
2
C
2
+
45
Acid hialuronic
Keratan sulfai
Dermatan sulfai
Acetil coenzima A particip n calitate de cofactor
la numeroase procese metabolice:
biosinteza colesterolului;
biosinteza hormonilor sexuali;
biosinteza hormonilor corticosteroizi;
biosinteza hemoglobinei;
biosinteza melatoninei;
biosinteza acidului hipuric;
sinteza sfingolipidelor.
Coenzima A are un rol central n metabolismul glucidic, lipidic i
proteic, precum i n integrarea hormonal a proceselor metabolice
Acetil coenzima A intermediar metabolic bogat n energie
46
C H
2
8 C
H
2
CH
6 C
H
2
C
H
2
C
H
2
C
H
2
C N
H
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
S S
O
CH
C
O
N H
C H
2
8 C
H
2
CH
6 C N
H
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
SH S
O
CH
C
O
N H
Acil
C H
2
8 C
H
2
CH
6 C N
H
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
SH SH
O
CH
N H
C
O
OH
c
Rest de lizin din proteina
enzimatic
Acid lipoic legat de proteina enzimatic
(forma oxidat)
c
HSCoA
Acil~SCoA
c
Acid lipoic legat de proteina enzimatic
(forma redus)
R C
O
Acid gras
o
1
Prin ruperea punii
disulfurice, acidul lipoic are
capacitatea de a transporta
i o grupare acil
ACIDUL LIPOIC-
transportor de
grupri acil
transportul concomitent
de hidrogen i de
grupri acil
47
CH
2
C
CH
3
CH
3
O CH
OH
C
O
NH
CH
2
CH
2
C O NH CH
2
CH
2
SH
P O
OH
O
CH
2
CH
C
NH
O
Rest de serin (poziia 36)
Lan polipeptidic al ACP (77 aminoacizi)
Acyl-carrier-protein HS-ACP
(protein transportoare de grupri acil)
Rol specific n transferul gruprii acil, n biosinteza acizilor grai
ACP are o structur similar coenzimei A
HS-ACP reprezint proteina central a complexului enzimatic denumit
acid gras sintetaza
48
Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase
2. Transferaze
2.1. Enzime care transfer grupri cu un singur atom de carbon
2.1.1. Metiltransferaze
2.1.2. Hidroximetiltransferaze, formiltransferaze i transferazele similare
2.1.3. Carboxiltransferaze i carbamoiltransferaze
2.1.4. Amidinotransferaze
2.2. Enzime care transfer grupri aldehidice sau cetonice
2.3. Aciltransferaze
2.3.1. Acetiltransferaze
2.3.2. Aminoaciltransferaze
2.4. Glicoziltransferaze
2.4.1. Hexoziltransferaze
2.4.2. Pentoziltransferaze
2.4.99. Enzime care transfer alte grupri glicozil
2.5. Enzime care transfer grupri alchil sau aril
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot
2.6.1. Aminotransferaze (transaminaze)
2.6.2. Amidinotransferaze
2.6.3. Oximinotransferaze
2.6.99. Enzime care transfer alte grupri cu azot
2.7. Enzime care transfer grupri care conin fosfor
2.7.1. Fosfotransferaze cu o grupare alcool ca acceptor
2.7.2. Fosfotransferaze cu o grupare carboxil ca
acceptor
2.7.3. Fosfotransferaze cu o grupare cu azot ca
acceptor
2.7.4. Fosfotransferaze cu o grupare fosfat ca acceptor
2.7.5. Nucleotidiltransferaze
2.7.8. Transferaze pentru alte grupri cu fosfat
substituite
2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche
2.8. Enzime care transfer grupri care conin sulf
2.8.1. Sulfurtransferaze
2.8.2. Sulfotransferaze
2.8.3. CoA-transferaze
49
Glicoziltransferazele (EC 2.4)
- catalizeaz transferul unui rest de monoglucid
(hexoze, pentoze) de pe un donor pe un acceptor
DONORI
esteri fosforici ai glucidelor, oligo, polizaharidele
ACCEPTORI
H
3
PO
4
monozaharidele
oligozaharidele
diferii agliconi
50
Denumire Rol
UTP uridin trifosfat
Activarea i transportul glucozei i galactozei
GTP guanozin trifosfat
Activarea i transportul manozei i a manozaminei
ATP adenozin trifosfat
Activarea i transportul diferitelor hexoze, pentoze
CTP citidin trifosfat
Activarea colinei
CDP-colina este implicat n biosinteza lecitinelor
Retinil-fosfat
Este vitamina A activat
Coenzim pentru enzimele care transfer manoz i
manozamin
Dolicol-monofosfat
Dolicol-difosfat
Transportul monozaharidelor i oligozaharidelor sub
form aminat: glucozamina, galactozamina i
manozamina
Ageni de glicozilare cu rol de transportori de
monozaharide n form activat
51
N H
N
O
O
O
OH OH
CH
2
O P O P O P O H
O
O
OH OH
OH
O
~ ~
uracil
riboz
UTP (uridin trifosfat)
Ageni de glicozilare - derivai ai nucleotidelor purinice i
pirimidinice ce conin n molecula lor legturi fosfat macroergice
Rol n activarea i transportul glucozei i galactozei
52
Ageni de glicozilare - derivai ai nucleotidelor purinice i
pirimidinice ce conin n molecula lor legturi fosfat macroergice
O
OH OH
CH
2
O P O P O P O H
O
O
OH OH
OH
O
N
N
N
N
OH
N H
2
~ ~
riboz
guanin
GTP (guanozin trifosfat)
Rol n activarea i transportul manozei i a manozaminei
53
Ageni de glicozilare - derivai ai nucleotidelor purinice i
pirimidinice ce conin n molecula lor legturi fosfat macroergice
O
OH OH
CH
2
O P O P O P O H
O
O
OH OH OH
O
N
N
N
N
NH
2
adenin
ATP (adenozin trifosfat)
~ ~
riboz
Rol n activarea i transportul diferitelor hexoze, pentoze
54
Ageni de glicozilare - derivai ai nucleotidelor purinice i
pirimidinice ce conin n molecula lor legturi fosfat macroergice
N
N
O
NH
2
O
OH OH
CH
2
O P O P O P O H
O
O
OH OH OH
O
~ ~
citozin
riboz
CTP (citidin trifosfat)
Rol n activarea colinei
CDP-colina este implicat n biosinteza lecitinelor
55
CH
2
O P OH
OH
O
Retinil-fosfat
CH
3
CH CH CH
2
CH CH
2
CH
2
O OH
CH
3
P
OH
O
CH
3
CH CH CH
2
CH CH
2
CH
2
O
CH
3
P
OH
O
O OH P
OH
O
CH H
CH H
C
[
]
n
Dolicol-monofosfat
C
[ ]
n
Dolicol-difosfat
Rol de coenzim pentru
enzimele care transfer
manoz i manozamin
Este vitamina A activat !
Rol n
transportul
monozaharidelor
i
oligozaharidelor
sub form
aminat:
glucozamina,
galactozamina i
manozamina
Ageni de glicozilare
56
Exemple de glucozil transferaze (EC:2.4)
FOSFORILAZA EC : 2.4.1.1
1-4 -D glucan : ortofosfat -D glicozil transferaza
are loc deci scindarea glicogenului n molecule de glucoz componente + transferul
unui rest de glucoz pe molecula de H
3
PO
4
. Procesul se numete FOSFOROLIZ !
H
3
PO
4
Glicogen
1 - 4
o
o
-D-glucoz ( )
( 1 - 6 )
n
+
- D glucoz - 1 - fosfat
1 - 4
o
-D-glucoz ( )
( 1 - 6 )
n-1
+
fosforilaz
57
n MUCHI
FICAT
Exemple de glucozil transferaze
Sucroz fosforilaza EC : 2.4.1.7 sau Sucroz glucozil transferaza
Denumirea sistematic :
sucrozo : ortofosfat -D-glucoziltransferaza
H
3
PO
4
o
+
- D glucoz - 1 - fosfat |-D-fructoz
+
Sucroz
(zaharoz)
sucroz glucoziltransferaza
O
CH
2
-OH
OH
OH
OH
O
O
CH
2
-OH
OH
OH
HO-H
2
C
o
|
- D glucoz
-D fructoz
1
2
3
4
5
6
1
2
3
4
5
6
58
La plante !
Glicogen- sintaza EC : 2.4.1.11
Denumirea sistematic
UDP glucoza : glicogen 4 -D glucozil transferaza
o
o
UDP-glucoz + n-1
+
1 - 4
o
-D-glucoz ( )
( 1 - 6 )
UDP n
1 - 4
o
-D-glucoz ( )
( 1 - 6 )
glicogen sintaza
+
+
+ UDP-glucoz
glucoz
ATP
glucoz - 6- fosfat
glucoz - 6- fosfat
glucoz - 1- fosfat
glucoz - 1- fosfat UTP
+ P
i
ADP
Reacii preliminare:
Exemple de glucozil transferaze
59
Lactoz sintaza (sintetaza) EC : 2.4.1.22
Denumirea sistematic
UDP galactoza : D-glucoza 4 -D galactotransferaza
UDP
+
+
o-D-glucoz
Lactoz
UDP | galactoz
lactoz sintaza
+
+
UDP-galactoz
| galactoz
ATP
galactoz - 6- fosfat |
galactoz - 6- fosfat |
galactoz - 1- fosfat |
galactoz - 1- fosfat | UTP
+ Pirofosfat
hexokinaz
+ ADP
izomeraz
galactoziltransferaza
Etape preliminare de activare
Exemple de glucozil transferaze
60
Agent de glicozilare Acceptor
n glandele
mamare !
Retinil fosfatul cofactor pentru glicozil transferaze i
transportor de manoz
CH
2
O P OH
OH
O
O
CH
2
OH
OH
OH
OH
OH
Manoza + GTP GDP - manoza
Retinil-fosfat
GDP
PROTEINE
Retinil-fosfat-manoza
GLICOPROTEINE (cu manoz)
o Manoz
1
2 3
4
5
6
+ GDP - manoza
+ Pi
n biosinteza
glicoproteinelor (care au
n structur manoza)
61
Dolicol fosfaii cofactori pentru glicozil transferaze
O
CH
2
OH
OH
OH
OH
NH
2
o 2 Glucozamin
1
2
3
4
5
6
1. MONOZAHARID
(aminat)
(GLUCOZAMIN N-ACETILAT)
+
UTP
UDP - MONOZAHARID
(aminat)
(MONOZAHARID ACTIVAT)
+ Pi (fosfat)
2. UDP - MONOZAHARID + DOLICOL FOSFAT DOLICOL - DIFOSFAT - MONOZAHARID + UMP
(aminat)
3. DOLICOL - DIFOSFAT - MONOZAHARID + UDP- MONOZAHARID
(aminat)
DOLICOL - DIFOSFAT - DIZAHARID + UDP

+ n (UDP - MONOZAHARID AMINAT)
DOLICOL - DIFOSFAT - OLIGOZAHARID
GLICOPROTEINE
DOLICOL DIFOSFAT
PROTEINE
62
N-glicozilarea
proteinelor din
reticulul
endoplasmatic
Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase
2. Transferaze
2.1. Enzime care transfer grupri cu un singur atom de carbon
2.1.1. Metiltransferaze
2.1.2. Hidroximetiltransferaze, formiltransferaze i transferazele similare
2.1.3. Carboxiltransferaze i carbamoiltransferaze
2.1.4. Amidinotransferaze
2.2. Enzime care transfer grupri aldehidice sau cetonice
2.3. Aciltransferaze
2.3.1. Acetiltransferaze
2.3.2. Aminoaciltransferaze
2.4. Glicoziltransferaze
2.4.1. Hexoziltransferaze
2.4.2. Pentoziltransferaze
2.4.99. Enzime care transfer alte grupri glicozil
2.5. Enzime care transfer grupri alchil sau aril
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot
2.6.1. Aminotransferaze (transaminaze)
2.6.2. Amidinotransferaze
2.6.3. Oximinotransferaze
2.6.99. Enzime care transfer alte grupri cu azot
2.7. Enzime care transfer grupri care conin fosfor
2.7.1. Fosfotransferaze cu o grupare alcool ca acceptor
2.7.2. Fosfotransferaze cu o grupare carboxil ca
acceptor
2.7.3. Fosfotransferaze cu o grupare cu azot ca
acceptor
2.7.4. Fosfotransferaze cu o grupare fosfat ca acceptor
2.7.5. Nucleotidiltransferaze
2.7.8. Transferaze pentru alte grupri cu fosfat
substituite
2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche
2.8. Enzime care transfer grupri care conin sulf
2.8.1. Sulfurtransferaze
2.8.2. Sulfotransferaze
2.8.3. CoA-transferaze
63
Enzime care transfer grupri cu azot EC: 2.6
Aminotransferaze EC: 2.6.1
64
Aminotransferaze EC: 2.6.1
(sau transaminaze)
Enzime care transfer grupri amino NH
2
de la un substrat donor
(de regul un aminoacid) la un acceptor (un cetoacid) cu formarea
unui nou aminoacid i unui cetoacid nou.
Cofactorii transaminazelor sunt formele biologic active ale vitaminei
B
6
reprezentate de piridoxal-5-fosfat (PLP) i piridoxamin-5-fosfat ce
rezult prin fosforilarea piridoxalului i a piridoxaminei cu ATP
3
2
N
1
6
5 4
CH
2
O H
C H
3
CHO
O P
O
O
O
N
CH
2
O H
C H
3
CH
2
-NH
2
O P
O
O
O
Piridoxamin- 5-fosfat
Piridoxal -5-fosfat
(PLP)
65
Mecanismul de aciune
N
O H
C H
3
CH
2
CH
O P
H
5
O
O
O
N
CH NH
O
+
(CH
2
)
4
C
apoenzima
proteinic
4
4'
5'
o
Piridoxal fosfatul (PLP) i legtura de tip aldiminic cu restul de lizin al
proteinei enzimatice (apoenzim)
66
Mecanismul de aciune
N
O H
C H
3
CH
2
C
H N
O P
H
H
O
O
5
O
O
O
+
C C
b
a
c
5'
4
4'
o
R
1
Natura apoenzimei imprim
specificitatea de substrat
Apoenzima va antrena specific
ruperea uneia din legturile atomului
de carbon din poziia o => reacii de:
transaminare (a)
decarboxilare (b)
eliminare de radicali ( c)
Formarea complexului de tip baz Schiff
ntre aminoacid (substrat) i cofactorul
piridoxal-fosfat (PLP).
67
PLP funcie de cofactor enzimatic
1. Transaminarea aminoacizilor
1. Decarboxilarea aminoacizilor (liaze)
1. Izomerizarea aminoacizilor (D-aminoacizi L-aminoacizi)
Piridoxal-fosfatul intervine n toate transformrile neoxidative ale aminoacizilor :
transaminri, decarboxilri, racemizri, scindri ale legturilor o i |
68
Reacia general a transaminrii
Gruparea NH
2
nu se gsete liber ci este n permanen legat
de un substrat !!
CH
HN
2
COOH
COOH
CH
HN
2
COOH
COOH
Aminoacid 1
o-Cetoacid 2
Piridoxal
fosfat
Piridoxamin
fosfat
Aminoacid 2
o-Cetoacid 1
R
1
+ R
2
C
O
R
2 +
R
1
C
O
PLP
NH
2
NH
2
69
Mecanismul transaminrii ETAPA I
C H
N
C COOH
H
CH
2
COOH
N
C
O P
H
N
O H
C H
3
CH
2
O P
H
N
O H
C H
3
CH
2
Baz Schiff I
(ALDIMIN)
+
R
1
R
1
Baz Schiff II
+
izomerizare
o
C COOH
O
CH
2
NH
2
O P
H
N
O H
C H
3
CH
2
+
Enzim - piridoxamin fosfat Cetoacid 1
+ H
2
O
R
1
+
NH
2
C COOH
H
C H
O
N
O H
C H
3
CH
2
O P
H
+
H
2
O
Aminoacid 1
+
R
1
Enzim - piridoxal fosfat
70
Transiminare
Tautomerizare
Hidroliz
Mecanismul transaminrii - ETAPA a-II-a
C
COOH
O
CH
2
NH
2
O P
H
N
O H
C H
3
CH
2
Cetoacid 2
+
Enzim - piridoxamin fosfat
H
2
O
R
2
+
NH
2
C COOH
H
C H O
O P
H
N
O H
C H
3
CH
2
+ H
2
O
Aminoacid 2
+
Enzim - piridoxal fosfat
R
2
+
CH
2
COOH
N
C
C
H
N
C COOH
H
O P
H
N
O H
C H
3
CH
2
O P
H
N
O H
C H
3
CH
2
Baz Schiff II
Baz Schiff I
R
2
R
2
+
+
izomerizare
71
Exemple de reacii de transaminare
COOH
CH
CH
2
COOH
CH
2
CH
2
COOH
C
COOH
O
CH
2
COOH
C
COOH
O
CH
2
CH
2
COOH
COOH
C
N H
2 N H
2
+
AST (GOT)
+
Acid L-aspartic
Acid o-cetoglutaric Acid L-glutamic
H
Acid oxalilacetic
PLP
CH
2
CH
2
COOH
COOH
C O
CH
3
C
COOH
O
CH
2
CH
2
COOH
COOH
CH
CH N H
2
CH
3
COOH
N H
2
+
ALT (GPT)
+
L-Alanina Acid o-cetoglutaric Acid piruvic Acid L-glutamic
PLP
72
Transaminazele markeri biochimici de lezare
celular
Enzime intracelulare (mitocondrii i citosol), n
mod normal se gsesc n cantiti mici n
snge
Afeciunile care lezeaz celulele unor organe
determmin eliberarea lor n snge
Se determin mpreun dar au semnificaie
biochimic diferit:
AST marker de lezare miocardic
ALT marker de lezare hepatic
73
PLP cofactor al unor LIAZE (EC 4).
Decarboxilarea aminoacizilor
CH COOH
NH
2
CO
2
CH
2
NH
2
R
R
aminoacid decarboxilaz
PLP
Aminoacid
Amin
"biologic activ"
Aminoacidul Produsul de decarboxilare Funcia biologic
Acid glutamic
Dihidroxifenilalanina
(DOPA)
Triptofanul
5-Hidroxitriptofanul
Tirozina
Histidina
Serina
Arginina
Lizina
Ornitina
Treonina
Acid aspartic
Cisteina
-Aminobutiric (GABA)
Dopamina
Triptamina
Serotonina
Tiramina
Histamina
Etanolamina
Agmatina
Cadaverina
Putresceina
Propanolamina
|-Alanina
Cisteamina
Neuromediator
Neuromediator
Neuromediator
Neuromediator
Neuromediator
Hormon tisular
Constituent al fosfolipidelor *
Produs de putrefacie
Produs de putrefacie
Produs de putrefacie
Constituent al vitaminei B12
Constituent al coenzimei A i al ACP
Constituent al coenzimei A i al ACP
74
PLP-cofactor al unor liaze
Decarboxilarea aminoacizilor
Aminoacid amin biogen + CO
2
COOH
4
CH N H
2
CH
2
COOH
1
C H
2
NH
2
CH
2
COOH
C H
3
CH COOH
NH
2
Acid L-aspartic
C
1
O
2
C
4
O
2
|-alanin
o-alanin
PLP
CH
COOH
N H
2
CH
2
COOH
CH
2
CO
2
CH
2
NH
2
CH
2
COOH
CH
2
Acid L-glutamic
glutamat decarboxilaza
Acid -aminobutiric
(GABA)
PLP
EC 4.1.1.15
75
CH N H
2
COOH
CH
2
NH N
NH N
CH
2
CH
2
NH
2
CO
2
L-Histidin
histidin decarboxilaza
Histamin
PLP
EC 4.1.1.22
PLP-cofactor al unor liaze
Decarboxilarea aminoacizilor
CH N H
2
C H
2
OH
COOH
CO
2
C H
2
NH
2
C H
2
OH
L-Serin
serin decarboxilaza
Etanolamin
PLP
Fosfatidilserine
Fosfatidiletanolamine
PLP
EC 4.1.1.65
+ CO
2
76
PLP cofactor n reaciile de deshidratare i desulfurare ale
aminoacizilor (tot LIAZE)
CH
COOH
C H
2
OH
N H
2 CH
3
C
O
COOH
Serin dehidrataza
NH
3

L-Serina
Acid piruvic
PLP
H
2
O
H
2
O
o
|
CH
COOH
C H
2
SH
N H
2
C H
3
C COOH
O
L-cistein hidrogen
sulfid liaza (EC 4.4.1.15)
PLP
H
2
O
NH
3
Acid piruvic
L-Cisteina
H
2
S
o
|
77
PLP n reaciile de izomerizare ale aminoacizilor
(racemizare i epimerizare)
COOH
CH
3
CH N H
2 C H
COOH
CH
3
NH
2
alanin racemaza
(EC 5.1.1.1)
PLP
L-o-alanin D-o-alanin
C H NH
2
C H OH
CH
3
COOH
CH N H
2
C H OH
CH
3
COOH
treonin racemaza
(EC 5.1.1.1.6)
PLP
L-treonin D-treonin
78
Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase
2. Transferaze
2.1. Enzime care transfer grupri cu un singur atom de carbon
2.1.1. Metiltransferaze
2.1.2. Hidroximetiltransferaze, formiltransferaze i transferazele similare
2.1.3. Carboxiltransferaze i carbamoiltransferaze
2.1.4. Amidinotransferaze
2.2. Enzime care transfer grupri aldehidice sau cetonice
2.3. Aciltransferaze
2.3.1. Acetiltransferaze
2.3.2. Aminoaciltransferaze
2.4. Glicoziltransferaze
2.4.1. Hexoziltransferaze
2.4.2. Pentoziltransferaze
2.4.99. Enzime care transfer alte grupri glicozil
2.5. Enzime care transfer grupri alchil sau aril
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot
2.6.1. Aminotransferaze (transaminaze)
2.6.2. Amidinotransferaze
2.6.3. Oximinotransferaze
2.6.99. Enzime care transfer alte grupri cu azot
2.7. Enzime care transfer grupri care conin fosfor
2.7.1. Fosfotransferaze cu o grupare alcool ca acceptor
2.7.2. Fosfotransferaze cu o grupare carboxil ca
acceptor
2.7.3. Fosfotransferaze cu o grupare cu azot ca
acceptor
2.7.4. Fosfotransferaze cu o grupare fosfat ca acceptor
2.7.5. Nucleotidiltransferaze
2.7.8. Transferaze pentru alte grupri cu fosfat
substituite
2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche
2.8. Enzime care transfer grupri care conin sulf
2.8.1. Sulfurtransferaze
2.8.2. Sulfotransferaze
2.8.3. CoA-transferaze
79
EC: 2.7. FOSFOTRANSFERAZE
Trifosfaii nucleozidelor purinice sau pirimidinice, precum i ali derivai
fosforilai ndeplinesc un rol de cofactori, pe lng enzimele denumite kinaze.
Aceti ageni de fosforilare pot fi considerai cosubstrate.
80
CARACTERISTICI:
- compui macroergici: prin hidroliza legturilor macroergice se
elibereaz energia biochimic necesar biosintezei diferiilor
compui organici endogeni
- rezervoare energetice celulare
- se formeaz, se consum, i se regenereaz n cursul
proceselor metabolice
- rol de cofactori ai enzimelor denumite kinaze
- pot fi considerai cosubstrate = donori de grupri fosfat
- fosfotransferazele se clasific n funcie de molecula
acceptoare de grupri fosfat
81
N
N
N
N
NH
2
OH OH
CH
2
O P O P
O P O H
O O O
OH OH OH
O
Adenin
~ ~
Riboz
legturi fosfat anhidridice,
macroergice
legtur fosfat esteric
legtur N-glicozidic
ADP
AMP (acid adenilic)
ATP COFACTOR ENZIMATIC
82
ATP - Intervine n 4 tipuri de reacii de transfer
1. Transfer de grupri ortofosforice (P
i
)
2. Transfer de grupri pirofosforice (PP
i
) DIFOSFOTRANSFERAZE
3. Transfer de AMP pe un acceptor
4. Transfer de adenozil pe un acceptor
N
N
N
N
NH
2
OH OH
CH
2
O P O P
O P O H
O O O
OH OH OH
O
Adenin
~ ~
Riboz
legturi fosfat anhidridice,
macroergice
legtur fosfat esteric
legtur N-glicozidic
ADP
AMP (acid adenilic)
83
ATP
1. Transfer de grupri ortofosforice (P
i
)
HEXOKINAZA (EC: 2.7.1.1)
GLUCOKINAZA (EC: 2.7.1.1)
O
CH
2
OH
OH
OH
OH
OH
O
OH
OH
OH
OH
CH
2
O P OH
OH
O
ATP +
Mg
2+
ADP
o - D-Glucoz
Glucoz 6-fosfat
+
1
2
3
4
5
6
84
RIBOKINAZA (EC: 2.7.1.15)
ATP: riboza 5 fosfotransferaza
PIRIDOXAL-KINAZA (EC: 2.7.1.35)
ATP: piridoxal 5-fosfotransferaza
FLAVINKINAZA (EC: 2.7.2.6)
Riboflavinkinaza
FLAVIN + ATP FMN + ADP
GLICEROLKINAZA
ATP: glicerol 3-fosfotransferaza
OH OH
O
P OH
CH
2
CH
CH
2
+
ATP
glicerolkinaza
CH
CH
2
O
OH
+ ADP
EC : 2.7.1.30
OH
OH
CH
2
OH
Glicerol
Glicerol 3-fosfat
85
CREATINKINAZA
ATP: creatin N- fosfotransferaz
CH
2
COOH
N
C H
3
C
NH
NH
2
ATP +
creatinkinaza
ADP
CH
2
COOH
N
C
NH
N
H
3
C
~P - OH
OH
O
Creatina
+
EC : 2.7.3.2
Fosfocreatina
2. Transfer de grupri pirofosforice (PP
i
) - DIFOSFOTRANSFERAZE
TIAMIN PIROFOSFOKINAZA
ATP: tiamin pirofosfotransferaza
Tiamin + ATP Tiaminpirofosfat (TPP) + AMP
tiamin pirofosfokinaz
(EC: 2.7.6.2)
Mg
2+
86
2. Transfer de grupri pirofosforice (PP
i
) - DIFOSFOTRANSFERAZE
RIBOZO-FOSFAT PIROFOSFOKINAZA (EC: 2.7.6.1)
ATP:riboz 5-fosfat 1-pirofosfotransferaz
O
O
O P
O
OH
O H O P
O
OH
O H
P O P OH
H
2
C
OH
OH
HO
H
2
C
OH
HO
ATP
O
OH OH
O
O
5-fosfo-ribozil-1-pirofosfat
AMP
(PRPP)
(precursor n biosinteza purinelor, NAD
+
, NADP
+
)
87
3. Transfer de AMP pe un acceptor
O
O
R
O P O R
NH
2
R
COOH
O
O P O HC
O
O
NH
2
R
C
OH
+ ATP CH
2
O
OH
OH OH
adenina
acil-adenilat
C
CH
Acid gras
Aminoacid
+ ATP CH
2
O
OH
OH OH
adenina
aminoacil-adenilat
C
PP
i
PP
i
88
4. Transfer de adenozil pe un acceptor
Metionin adenoziltransferaza (EC:2.5.1.6)
ATP:L-metionin S-adenozil transferaza
S
O
N
N
N
N
N H
2
S-CH
3
(CH
2
)
2
CH
COOH
+
ATP
CH
3
(CH
2
)
2
CH
COOH
H
2
N
H
2
C
OH OH
NH
2
Sulfadenozil metionin
(SAM)
"CH
3
" metil activat
H
2
O
+
L-metionin
89
+ P
i
+ PP
i
Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase
2. Transferaze
2.1. Enzime care transfer grupri cu un singur atom de carbon
2.1.1. Metiltransferaze
2.1.2. Hidroximetiltransferaze, formiltransferaze i transferazele similare
2.1.3. Carboxiltransferaze i carbamoiltransferaze
2.1.4. Amidinotransferaze
2.2. Enzime care transfer grupri aldehidice sau cetonice
2.3. Aciltransferaze
2.3.1. Acetiltransferaze
2.3.2. Aminoaciltransferaze
2.4. Glicoziltransferaze
2.4.1. Hexoziltransferaze
2.4.2. Pentoziltransferaze
2.4.99. Enzime care transfer alte grupri glicozil
2.5. Enzime care transfer grupri alchil sau aril
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot
2.6.1. Aminotransferaze (transaminaze)
2.6.2. Amidinotransferaze
2.6.3. Oximinotransferaze
2.6.99. Enzime care transfer alte grupri cu azot
2.7. Enzime care transfer grupri care conin fosfor
2.7.1. Fosfotransferaze cu o grupare alcool ca acceptor
2.7.2. Fosfotransferaze cu o grupare carboxil ca
acceptor
2.7.3. Fosfotransferaze cu o grupare cu azot ca
acceptor
2.7.4. Fosfotransferaze cu o grupare fosfat ca acceptor
2.7.5. Nucleotidiltransferaze
2.7.8. Transferaze pentru alte grupri cu fosfat
substituite
2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche
2.8. Enzime care transfer grupri care conin sulf
2.8.1. Sulfurtransferaze
2.8.2. Sulfotransferaze
2.8.3. CoA-transferaze
90
2.8. ENZIME CARE TRANSFER GRUPRI SULFAT
COFACTORII SULFOTRANSFERAZELOR (EC: 2.8.2)
Coenzima: PAPS 3-fosfoadenozin 5-fosfosulfat
O
OH
CH
2
O
O O S O H
O O
OH
N
N
N
N
NH
2
P O H
OH
O
P
O
adenin
PAPS (3'-fosfo adenozin 5'-fosfosulfat)
("sulfat activ")
riboz
1'
3'
5'
91
a.) ATP + Sulfat anorganic
Sulfotransferaz
Adenozin 5'-fosfat (APS) + Pirofosfat
b.) Pirofosfat
2 Fosfat anorganic
Pirofosfataz
c.) APS + ATP
ATP- kinaz
3'-Fosfoadenozin 5'-fosfosulfat (PAPS) + ADP
Sulfatare
n biosinteza esterilor sulfurici a compuilor organici (reacia de sulfatare
reacie de eliminare)
n biosinteza unor compui endogeni biologic activi N- sulfatai i O- sulfatai:
heparin, keratan sulfat, dermatan sulfat i condroitin sulfat
Formarea sulfatului activ-(PAPS) are loc cu ajutorul energiei furnizat de
ATP, n mai multe etape:
92
Adenozin 5-fosfosulfat
(APS)
Exemple de biocompui N-sulfatai i O-sulfatai:
Dizaharide cu esteri sulfurici
din structura proteoglicanilor
Structura keratansulfatului
Structura heparinei
93
Structura dizaharidului component al heparinei
94