CONTENIDO DE CIDOS GRASOS, FENOLES Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE EN
CULTIVO DE CALLOS DE Thevetia peruviana (Pers.) K. Schum
Rincn-Prez, Jack Andrs 1* , Gutirrez-Miceli, Federico A. 2
1 Estudiante de la Maestra en Ciencias en Ingeniera Bioqumica. 2 Profesor-Investigador en el Instituto Tecnolgico de Tuxtla Gutirrez. Instituto Tecnolgico de Tuxtla Gutirrez, Carretera Panamericana, km. 1080. C.P. 29050, Tuxtla Gutirrez, Chiapas, Mxico. * Autor de correspondencia: jack.andres.rincon@gmail.com Resumen: El incremento en el consumo de productos industrializados est relacionado con el incremento en la contaminacin, esto ha llevado a generar investigaciones sobre nuevas fuentes renovables y sostenibles, el cultivo in vitro surge como una alternativa de obtener productos de inters (en farmacia, medicina, cosmtica, antimicrobial, bioinsecticida y biocombustible) que son difciles de obtener por sntesis qumica. Se propagaran callos de Thevetia peruviana en medio Schenk & Hildebrandt (SH) suplementado con 2 mg/L de cido 2,4- diclorofenoxiactico (2,4-D) y 0.5 mg/L de cinetina (KIN). Se pretende inducir el contenido de cidos grasos y fenoles para lo cual se utilizar un diseo de superficie de respuesta 3 niveles: 3^2 por triplicado el cual estudiar los efectos de 2 factores cido jasmnico (AJ) y cido abscsico (ABA) en 27 corridas. Palabras clave: Elicitacin, cido jasmnico, cultivo in vitro, cido abscsico Introduccin: La industrializacin de productos como medicamentos, cosmticos, combustibles y agroqumicos ha conllevado a que por su elaboracin se est contaminando el planeta ya que estos son producidos a partir de derivados del petrleo. Las plantas son una buena fuente de compuestos sostenibles capaces de igualar o superar a los productos derivados del petrleo. La planta T. peruviana puede producir ciertos compuestos que pueden ser utilizados para fabricar medicamentos para controlar enfermedades cardiacas e inhibicin contra virus de la inmuno deficiencia humana tipo 1 (HIV-1) (Tewtrakul et al., 2002). Esta planta tiene principios activos pueden ser utilizados como alternativa para la fabricacin de jabones y lociones para el cuidado de la piel. A partir de la semilla de T. peruviana se extrae aceite el cual puede ser utilizado como biocombustible (Betiku & Ajala, 2014) y tambin puede ser utilizado como aceite de cocina (Ibiyemi et al., 1995) Los compuestos fenlicos representan un grupo importante de metabolitos secundarios en plantas estos compuestos estn recibiendo gran atencin ya que se cree que por su actividad antioxidante pueden ayudar a prevenir enfermedades como el cncer y de problemas. Las propiedades antioxidantes de compuestos naturales como compuestos fenlicos de plantas son muy importantes porque pueden ser usados en medicina, alimentos y cosmticos (Mishra et al., 2012). El presente trabajo tiene por objetivo analizar el metabolismo de cidos grasos, fenoles y determinar actividad antioxidante en cultivo de callos de Thevetia peruviana con el propsito de comprobar la capacidad de elicitacin del cido jasmnico (AJ) y cido abscsico (ABA) y adems aportar bases de conocimiento para futuras investigaciones. Materiales y Mtodos: Extraccin de cidos grasos y fenoles Se tomaran muestras de callos friables de 30 das y sern deshidratados en un liofilizador a una temperatura constante de - 40C durante 48 h. Para la extraccin se usaran 100 mg de biomasa seca y se colocara con 50 mL de solvente en ebullicin durante 1 h y luego ser filtrado y concentrado a 10 mL, utilizando como solventes metanol para la extraccin de fenoles y hexano para la extraccin de cidos grasos (Estrada-Zuiga et al., 2010). Cuantificacin de cidos grasos Extractos concentrados de hexano sern derivatizados para producir metil esteres de cidos grasos, cada muestra de concentrado (0.5 mL) ser esterificada con H 2 SO 4 -MeOH en ebullicin (1:2; 3mL) durante 3 horas y luego se dejara enfriar y se transferir a un embudo de separacin. Luego cada muestra se enjuagara con agua destilada y por ltimo se le adicionara 2 mL de hexano. Los anlisis cuantitativos sern llevados a cabo por cromatografa de gases con detector de espectrometra de masas (Shehata et al., 1979). Determinacin de fenoles totales Diferentes concentraciones de cido glico y extractos metanlicos (100 L c/u) sern pipeteados en tubos de ensayo. Luego 2 mL de agua destilada se agregaran a cada tubo seguido por 200 L de reactivo de Folin-Ciocalteu. Despus de 3 min se adicionara 1 mL de Na 2 CO 3 al 15 % y se incubara en agitacin por 2 h a 24-26 C. La determinacin de cada reaccin se realizara con absorbancia 760 nm (Slinkard & Singleton, 1977). Ensayo DPPH actividad antirradical Se tomaran muestras 250, 125, 50, 25, 10 y 5 mg/mL. Luego 1 mL de 0.3 mM de solucin de metanol y DPPH se adicionara a 2.5 mL de las diferentes concentraciones de muestras. La reaccin se llevara a cabo a temperatura ambiente. Despus de 30 min la absorbancia se medir a 517 nm (Mensor et al., 2001). Resultados esperados Se espera obtener ms del 63 % de lpidos que es lo que sea reportado hasta el momento en semilla, adems dar el perfil de cidos grasos, fenoles y su actividad antioxidante, concluyendo cul es el elicitor ms eficiente para la induccin/acumulacin de cidos grasos y compuestos fenlicos. Referencias Betiku, E., & Ajala, S. O. (2014). Modeling and optimization of Thevetia peruviana (yellow oleander) oil biodiesel synthesis via Musa paradisiacal (plantain) peels as heterogeneous base catalyst: A case of artificial neural network vs. response surface methodology. Industrial Crops and Products, 53(0), 314322. Estrada-Ziga, M. E., Arano-Varela, H., Buenda-Gonzlez, L., & Orozco-Villafuerte, J. (2012). Fatty acids, phenols content, and antioxidant activity in Ibervillea sonorae. Revista de Ingeniera Qumica, 11(1), 89-96. Mensor, L. L., Menezes, F. S., Leito, G. G., Reis, a S., dos Santos, T. C., Coube, C. S., & Leito, S. G. (2001). Screening of Brazilian plant extracts for antioxidant activity by the use of DPPH free radical method. Phytotherapy Research 15(2), 12730. Mishra, K., Ojha, H., & Chaudhury, N. K. (2012). Estimation of antiradical properties of antioxidants using DPPH assay: A critical review and results. Food Chemistry, 130(4), 1036 1043. Shehata, A.Y., De Man, J.M. and Alexander, J.C. (1979). A single and rapid method for the preparation of methyl esters of fats in milligram amounts for gas chromatography. Canadian Institute of Food Technology Journal, 3, 85-89. Slinkard, K., & Singleton, V. L. (1977). Total phenol analysis: automation and comparison with manual methods. American Journal of Enology and Viticulture, 28(1), 49-55. Tewtrakul, S., Nakamura, N., Hattori, M., Fujiwara, T., & Supavita, T. (2002). Flavanone and flavonol glycosides from the leaves of Thevetia peruviana and their HIV-1 reverse transcriptase and HIV-1 integrase inhibitory activities. Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 50(5), 6305.
FORMULACION Y EVALUAICON DEL PROYECTO “RECUPERACIÓN DEL SERVICIO ECOSISTEMICO DE CONSERVACION DEL AMBIENTE EN LA ZONA SELVA DE LA COMUNIDAD DE ANCHIHUAY-DISTRITO DE ANCHIHUAY- PROVINCIA DE LA MAR - AYACUCHO”