BIOTECNOLOGÍA

Seccin II
Biotecnologa
65
XXI RC ICBAR, Agosto 2012
Resmenes - Biotecnologa
AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS PROTEOLTICOS CON POTENCIAL DE BIOCONVERSIN A PARTIR
DE FLUENTES DE CURTIEMBRE
M. Alcarraz
1
, A. Flores, A. Segundo
2
, O. Bracamonte, R. Valderrama, C. Figueroa, A. Patio, M. Torres y C. Bernal
1
Laboratorio de Bioprocesos Industriales. Facultad de Ciencias Biolgicas. UNMSM
2
Centro de Innovacin Tecnolgica del Cuero CITEcal. Ministerio de Produccin
biomac_20@hotmail.com
Los efluentes de curtiembre representan un gran problema de contaminacin por la alta carga orgnica que posee
adems de contaminantes inorgnicos como sulfuros y cromo. La carga orgnica se manifiesta en la elevada DBO
del efluente muy por encima de los lmites permitidos por la legislacin peruana. Este grave problema no solamente
afecta al medio ambiente sino tambin a los empresarios de este rubro, dado que las sanciones por contaminar el
ambiente son cada vez ms fuertes con riesgo del cierre de planta.Reducir la materia orgnica, por consiguiente la
DBO, mediante la degradacin de la materia orgnica como las protenas del efluente, es una posibilidad de tratamien-
to; por lo que la investigacin tuvo como objetivo aislar microorganismos proteolticos con dicha finalidad. Para lo cual
se ensayaron nuevos medios de cultivo utilizando como nica fuente de carbono protenas tales colgeno y
queratina, principales componentes orgnicos de la materia prima usada en las curtiembres. Se aislaron 64 cepas
con potencial proteoltico de las cuales 35 resultaron positivas para actividad proteoltica, se sometieron a ensayos
cualitativos para actividad enzimtica resultando seis cepas con halos de hidrlisis por encima de 4 mm de dimetro
en 24 horas, requisito mnimo exigido para su posterior aplicacin. Se concluye que los efluentes de curtiembre
poseen microorganismos con buena capacidad proteoltica, potencialmente utilizables en el tratamiento biolgico y la
revalorizacin de los residuos orgnicos, conducentes a la disminucin de la DBO y el cumplimiento de la Norma
Peruana respecto a efluentes industriales.
Palabras clave: Efluente, contaminacin, proteoltico, demanda bioqumica, curtiembre
Financiamiento: Vice Rectorado de InvestigaciN
EVALUACIN DE TOLERANCIA A MEDIOS ALCALINOS DE CEPAS AISLADAS DE EFLUENTES DE
CURTIEMBRE
M. Alcarraz
1
, A. Flores, A. Segundo
2
, O. Bracamonte, R. Valderrama, C. Figueroa, A. Patio, M. Torres y C. Bernal
1
Laboratorio de Bioprocesos Industriales. Facultad de Ciencias Biolgicas. UNMSM
2
Centro de Innovacin Tecnolgica del Cuero CITEcal. Ministerio de Produccin
biomac_20@hotmail.com
El tratamiento biolgico de efluentes industriales ha cobrado tanta importancia que se ha hecho imprescindible en la
gestin de efluentes; sin embargo requiere de microorganismos entrenados y adaptados a las condiciones
fisicoqumicas del efluente, por ello es necesario caracterizar previamente los efluentes para disear el tipo y las
condiciones de tratamiento. Los efluentes de curtiembre de la planta donde se realiz la investigacin poseen un pH
variable dentro del rango alcalino y una elevada DBO que indica abundancia de materia orgnica. Estas caracters-
ticas motivaron la bsqueda de microorganismos tolerantes a condiciones alcalinas para un potencial tratamiento de
dichos efluentes. Se disearon medios de cultivo tomando como base los efluentes de curtiembre acondicionados
a a diferentes pH: 9, 10, 11 y 12. De las 39 cepas aisladas el 100% crecieron en pH 9 y 10, el 79.5% en pH 11 y el
77% en pH 12. Cabe resaltar que del total de cepas ensayadas dos de ellas (N3D y S1E) desarrollaron en todas las
condiciones alcalinas experimentadas y resultaron positivas a las pruebas de protelisis. Concluyendo que en los
efluentes de curtiembre existen microorganismos con capacidad adaptativa a las condiciones del medio y con un alto
potencial de bioconversin de la materia orgnica, caractersticas que deben tener los microorganismos para el
tratamiento de efluentes. La capacidad de estos microorganismos para produccin de proteasas alcalinas es otra
caracterstica que se debe considerar por sus mltiples aplicaciones.
Palabras clave: Alcalino, curtiembre, efluente, bioconversin, tratamiento
Financiamiento: Vice Rectorado de Investigacin
66
XXI RC ICBAR, Agosto 2012 Resmenes - Biotecnologa
CDIGO DE BARRAS DE ADN DE CUATRO ESPECIES DE IMPORTANCIA ECONMICA DEL MAR PERUANO:
JUREL, (Trachurus murphyi), PEJERREY (Odonthestes regia), CABALLA (Scomber japonicus)Y BONITO
(Sarda chilensis)
S. Barahona
1
, R. Quiroz
1
, D. Or
1,2
y G. Snchez
1
1
Laboratorio de Artes y Mtodos de Pesca, UNMSM
2
Laboratorio de Gentica y Biologa Molecular, USMP
srgbarahona89@gmail.com
El cdigo de barras de ADN es un mtodo de identificacin gentica que utiliza una secuencia de 655 pb del gen
Citocromo oxidasa I, que permite discriminar especies animales en base a su secuencia caracterstica. Una de sus
ventajas es la identificacin de especies a partir de fragmentos corporales o en cualquier etapa de desarrollo. El
objetivo fue desarrollar perfiles de cdigo de barras de ADN de cuatro especies de peces de importancia econmica
en base al gen mitocondrial Citocromo Oxidasa I (COI), que puedan ser de utilidad para la identificacin a nivel
gentico. Se muestrearon 10 ejemplares de cada especie, extrayendo ADN genmico de tejido muscular utilizando
el mtodo TNES-urea (Asahida et al. 1996), y se amplific por PCR la regin barcode de 655pb del gen Citocromo
oxidasa I con el par de primers FishF1-FishR1 (Ward, 2005). Los amplificados COI fueron secuenciados con
ABI3500. Para el anlisis in silico, se adquirieron secuencias del gen COI de especies congenricas disponibles en
la base de datos del NCBI. Se calcularon las distancias genticas intraespecficas e interespecficas, y se construy
un rbol Neighbor-joining usando el modelo Kimura 2-parmetros (k2p). Las distancias genticas intraespecficas
para jurel, caballa, bonito y pejerrey fueron respectivamente de 0.2%, 0.5%, 0.3% y 0.2%. Las distancias genticas
interespecficas estuvieron en el rango de 2-5%. Los rboles NJ fueron robustos y agruparon a las secuencias
claramente por especie. Concluyendo, el marcador gentico Citocromo oxidasa I result til para discriminar las
cuatro especies analizndolas dentro de su gnero. La identificacin gentica es una forma rpida y eficiente para
evaluar la biodiversidad marina a nivel de especie.
Palabras clave: cdigo de barras de ADN, mar peruano, COI, jurel, caballa, bonito, pejerrey
Financiamiento: CONVENIO FINCYT
GENOTOXICIDAD E INESTABILIDAD GENTICA PRODUCIDA POR LA EXPOSICIN DE Allium cepa A
BIOCIDAS
A. Berrocal, M. Siles, J. Flores y R. Blas
Universidad Nacional Agraria la Molina, Instituto de Biotecnologa (IBT)
alfredo.bh17@gmail.com
El uso de biocidas es una constante en el campo agronmico, el dao ocasionado a los cultivos y por consiguiente
el gran potencial de dao para los consumidores es conocido, sin embargo su uso sigue en marcha. Por ello se
realizaron pruebas citogenticas para la observacin de aberraciones cromosmicas y caracterizacin molecular
en Allium cepa usando muestras de races de plantas expuestas y no expuestas a biocidas. Los tratamientos se
realizaron con el objetivo de comparar el grado de afectacin de los biocidas sobre la mitosis y la ocurrencia de
mutaciones a nivel cromosmico y molecular. El ANOVA para los datos de desarrollo radicular al finalizar la experi-
mentacin, mostraron un CV de 9.88, se observo diferencias significativas entre el control y los tratamientos, los
porcentajes de inhibicin ((longitud de raz control- longitud de raz tratamiento)/longitud de raz control)100%)
llegaron a tener valores mximos de 84.2% para vertimec V8 y 76.5% para pentacloro P8, y valores mnimos de
38.2% para vertimec V0.5 y 43.8% para pentacloro P0.5. El ndice mittico fue mayor para el control (0.193) y
menores para el tratamiento con menor desarrollo radicular, vertimec V8 (0.0214) y pentacloro P8 (0.0284). Las
pruebas citogenticas mostraron la ocurrencia de anomalas en el ciclo celular siendo la ms frecuente la C-mitosis.
Los AFLPs no mostraron diferencias a nivel de patrn de bandas entre el control y los tratamientos. Los biocidas
ocasionan cambios en la estructura genmica de un cultivo, estos cambios podran acumularse y ocasionar daos
en regiones de expresin de un cultivo.
Palabras clave: test Allium, anomala mittica, estabilidad, genotoxicidad, AFLPs.
Financiamiento: Instituto de Biotecnologa de la Universidad Nacional Agraria la Molina.
67
EFECTO GENOTXICO DE EFLUENTES DE CURTIEMBRES SOBRE EL CRECIMIENTO DE RACES DE CEBOLLA
(Allium cepa)
O. Bracamonte
1
, M. Guevara
1
, M. Alcarraz
2
, J. Manosalva, J.Pino
3
, N. Oliveros, G. Sanabria
1
, Y. Romero
1
y M.
Mendoza.
1
Laboratorio de Citogentica Facultad de Ciencias Biolgicas. UNMSM
2
Laboratorio de Bioprocesos Industriales. Facultad de Ciencias Biolgicas. UNMSM.
3
Laboratorio de Reproduccin y Biologa del desarrollo. Facultad de Ciencias Biolgicas. UNMSM.
En el pas el curtido del cuero es una importante industria sin embargo, es generadora de efluentes lquidos con
altos contenidos de materia orgnica, sulfuros y cromo trivalente, que como hexavalente se constituye en un
elemento de alta toxicidad, ms aun si llegan a los desages. Es por esta razn, que nos propusimos, utilizando
como modelo biolgico Allium cepa en condiciones de laboratorio, evidenciar el efecto genotxico de los efluentes
procedentes de una curtiembre de Lima. Se compar el efecto en la elongacin de las races expuestas al efluente,
contrastadas con las que crecan en agua pura y controlada a diferentes rangos de tiempo. El tamao de la muestra
fue de 12 races por cebolla, escogidas al azar. Se us el estadistico t Students para dos muestras independientes,
nivel de significacin del 0.05.Se midieron las races expuestas a efluente a diferentes concentraciones
(0%,6%,12%18%,24%,30%), en 24horas, 48horas y 72 horas. En los resultados obtenidos en 24 horas y a
concentracin de 6% de efluente , el crecimiento se inhibe en un 7%; entre 12 %y 24% de concentracin de efluente
el crecimiento se inhibe en un 7% y 13% y a mayor concentracin de efluente la inhibicin de la raz es mayor a un
22%. Se concluye que el efluente a diferentes concentraciones afecta el crecimiento de la raz de Allium cepa y
directamente proporcional al incremento del tiempo de exposicin.
Palabras clave: efluente, Allium cepa, efluente, cromo hexavalente.
Financiamiento: Vice Rectorado de Investigacin UNMSM
EFECTO GENOTXICO DEL LIXIVIADO DE RELLENO SANITARIO MANUAL EN Eisenia foetida LOMBRIZ
ROJA
M. Cobos
1,2
, M. Costa
2
, J. Castro
2
y P. Adrianzn
2
1
Facultad de Ciencias e Ingeniera, Universidad Cientfica del Per, Iquitos, Per. marianela_cobosr@yahoo.es
2
Centro de Investigaciones de Recursos Naturales (CIRNA). Universidad Nacional de la Amazona Peruana (UNAP).
Iquitos-Per.
El objetivo del estudio fue evaluar el efecto genotxico que produce un suelo contaminado con diferentes concen-
traciones de lixiviados generados en un relleno sanitario manual, sobre Eisenia foetida, especie que se us como
modelo y que ayudara a determinar el dao genotxico en otros organismos expuestos a contaminantes ambienta-
les. El mtodo de estudio consisti en bioensayos realizados bajo un diseo completamente al azar, con tres
repeticiones, en condiciones semicontroladas para evaluar la genotoxicidad en lombrices adultas de E. foetida
expuestas a diferentes concentraciones del lixiviado (1:1v/v, 1:2v/v, 1:10v/v, 1:100v/v y 1:1000v/v) durante 7, 14 y
21 das. El lixiviado fue colectado en el relleno sanitario del distrito de Nauta. Los resultados muestran que el nivel de
dao genotxico inducido por el lixiviado en celomocitos de E. foetida dependi de la concentracin de este
contaminante, de tal modo que una alta concentracin de lixiviado (dilucin 1:1 v/v) provoc mayor dao en el ADN
que la dilucin 1:1000 v/v (p < 0,05). Adicionalmente, el nivel de dao genotxico dependi del tiempo de exposicin
de las lombrices al lixiviado, encontrndose mayor fragmentacin del ADN a los 21 das en comparacin a los siete
das de iniciada la exposicin (p < 0,05). En conclusin, el lixiviado caus dao genotxico en celomocitos de E.
foetida, el cual estuvo en funcin de la concentracin del contaminante y del tiempo de exposicin al lixiviado. El
efecto genotxico encontrado se podra atribuir a la presencia de iones metlicos (Fe
2+
, Zn
2+
y Mn
2+
) en el lixiviado.
Palabras clave: lixiviado, efecto genotxico, Eisenia foetida, relleno sanitario manual
Financiamiento: Centro de Capacitacin en Conservacin Interdisciplinaria en Amazonia Occidental CCCIAMAZ-
UNAP y Universidad Cientfica del Per-UCP
68
EFECTO DE LOS CAMPOS MAGNTICOS DE FRECUENCIAS EXTREMADAMENTE BAJAS SOBRE LA
FERTILIDAD EN RATONES MACHOS, DOMINANCIA LETAL Y DESARROLLO EMBRIONARIO
V. Cruz
2
, M. Valdivia
1,
J. Vsquez
1
, J. Gonzales
1
,J. Tafur
2
y A. Varela
3
1
Laboratorio de Fisiologa de la Reproduccin Animal. Facultad de Ciencias Biolgicas- ICBAR. UNMSM.
2
Facultad de Ingeniera Elctrica y Electrnica FIEE-UNMSM. vcruzor@gmail.com
3
Instituto Nacional de investigacin y Capacitacin de Telecomunicaciones- INICTEL-UNI
marthavaldiviacuya@gmail.com
Campos electromagnticos de frecuencia extremadamente baja (ELF-EMF), estn asociados con produccin, trans-
misin y uso de electricidad; actualmente sus efectos sobre fertilidad masculina son controversiales. Nuestro
objetivo fue evaluar el efecto de ELF-EMF sobre fertilidad de ratones, dominancia letal y presencia de repercusiones
en el desarrollo post-embrionario. El estudio considero un sistema basado en bobinas de Helmoltz exponindose a
ratones machos de la cepa Balb C de 10 semanas de edad, divididos en dos grupos: Control GC (n=7) no expuesto
a ELF-EMF y grupo GE (n=8) expuesto a frecuencia de 50Hz y 500uT de intensidad, 22 horas diarias durante 35 das
(ciclo espermatognico). Posteriormente, los machos se cruzaron con hembras vrgenes de 6-7 semanas de edad,
que fueron sacrificadas al tercer da de gestacin para evaluar migracin, desarrollo y calidad embrionaria. En GC,
el 100% (8/8) prearon hembras y en GE el 87.5% (7/8), produciendo 13 y 14 camadas respectivamente. El
transporte embrionario no fue alterado, el porcentaje de embriones en oviducto en GC (91.15 4.47) no vari
significativamente respecto a GE (92.36 5.89) (p0.05), no hubo diferencias en el porcentaje de embriones en
estados de mrula y ocho clulas en GC (82.00 5.25) con GE (67.79 7.55) (p0.05), tampoco en embriones de
buena calidad en GC (87.54 3.64) con GE (88.29 3.88) (p0.05).Concluyendo, la exposicin a ELF-EMF de 50Hz
y 500uT no disminuye la fertilidad en ratones machos, ni afecta el desarrollo post embrionario. Se emplearon
analizadores electromagnticos para medir densidad de flujo magntico.
Palabras clave: ELF, EMF, ondas electromagnticas, embrin, fertilidad, ratn.
Financiamiento: VRI-UNMSM. Proyecto Multidisciplinario RR N 00902-R-11.
CARACTERIZACIN DE miRNAs ESPECFICOS EN EL CROMOSOMA I DE PAPA UTILIZANDO
SECUENCIAMIENTO DE ALTO RENDIMIENTO Y ANLISIS BIOINFORMTICO
M. Eguiluz
1
y F. Guzman
2
1
Programa de Posgrado en Bioqumica y Biologa Molecular Universidad Peruana Cayetano Heredia (UPCH), Lima,
Per.
2
Programa de Posgrado en Gentica y Biologa Molecular Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS),
Porto Alegre, RS, Brasil. frank.guzman.e@gmail.com
Los miRNAs son pequeos RNA no codificantes de aproximadamente 21 nucletidos que desempean funciones
importantes en la regulacin a nivel postranscripcional de la expresin gnica por unin directa o clivaje de sus
mRNA blancos. La mayora de estos miRNAs estn presentes y son de abundante expresin a lo largo de las
diferentes familias de plantas, lo cual ha permitido su respectiva identificacin por homologa en diversas plantas.
Tambin existen miRNAs especficos para una determinada especie/familia, expresados en bajas cantidades e
importantes en la regulacin de genes involucrados en determinadas funciones biolgicas. El objetivo del trabajo fue
caracterizar los miRNAs especficos de papa presentes en el cromosoma I utilizando libreras de secuenciamiento de
pequeos RNA de diversos tejidos y la secuencia completa del cromosoma I del genoma de la papa. La identificacin
de los miRNAs se realiz utilizando mdulos bioinformticos clustering, mirplan y duplex (Baev et al., 2011) y scripts
en perl. Se identificaron cinco miRNA precursores especficos, agrupados en cuatro familias diferentes en base a
la comparacin de sus secuencias maduras. Asimismo, se observ que los niveles de expresin de los miRNA
maduros de cada uno de los precursores identificados varan dependiendo del tipo de tejido (hoja, estoln y flor).
Respecto a los blancos de los miRNA especficos identificados, estos estn involucrados en diferentes procesos
biolgicos de la papa. Es el primer reporte de miRNAs especficos en papa, que permitir conocer mucho mejor la
funcin e importancia de los miRNAs as como de los genes regulados por ellos.
Palabras clave: miRNA, cromosoma I, genoma, regulacin
Financiamiento: Recursos propios
69
POTENCIAL DE ACTIVIDAD ANTAGONISTA DE ACTINOMICETOS MARINOS FRENTE A Lactococcus
garvieae
N. Galindo, U. Tarazona y J. Len
Laboratorio de Ecologa Microbiana, Facultad de Ciencias Biolgicas Universidad Nacional Mayor de San Marcos.
nadiargc@gmail.com
Los actinomicetos tienen amplia distribucin y capacidad potencial de producir compuestos antimicrobianos. Actual-
mente existe inters en la bsqueda de nuevas cepas de origen marino con posibles aplicaciones en acuicultura. El
objetivo del estudio es determinar el potencial antimicrobiano de actinomicetos aislados de invertebrados marinos
frente al ictiopatgeno Lactococcus garvieae. Actinomicetos pertenecientes a la coleccin del Laboratorio de
Ecologa Microbiana aislados de concha de abanico (Argopecten purpuratus), erizo rojo (Loxechinus albus),
langostino (Litopenaeus vannameii) y esponjas calcreas colectadas del litoral peruano, fueron reactivados en
Caldo Marino, incubados en agitacin a 150 rpm por cinco das a 28C. Un total de 21 actinomicetos fueron sometidos
a pruebas de antagonismo in vitro (mtodo de 2 capa y pocillo) frente a dos cepas del patgeno Gram positivo
Lactococcus garvieae. Se realizaron pruebas complementarias de actividad utilizando extractos del sobrenadante
con diclorometano y pruebas de identificacin genrica. Los ensayos mostraron que nueve (43%) cepas de
actinomicetos tuvieron actividad antagonista a los ictiopatgenos, obteniendo halos inhibitorios de 11 a 100 mm de
dimetro. Las cepas que resaltaron por su actividad fueron ARG12-II (48 mm), EIIIA 10-4 y ARG1-III (ambos con halos
de 42 mm), la cepa LPL5 (aislado de L. vannameii post larva) mostr halos de inhibicin de mayor tamao (84 y 100
mm). Pruebas utilizando extractos diclorometnicos ratificaron la efectividad inhibitoria para ambas cepas de L.
garvieae. Asimismo, pruebas de identificacin preliminar sealan que se trata del gnero Streptomyces. Concluyen-
do, actinomicetos aislados de invertebrados marinos manifiestan gran actividad inhibitoria de patgenos emergentes
como Lactococcus garvieae.
Palabras clave: Actinomicetos marinos, antagonismo, ictiopatgeno, halo de inhibicin, Per.
Financiamiento: Vicerrectorado de Investigacin (Proyecto: 111001101).
GENMICA COMPARATIVA DE LOS MICROSATELITES PRESENTES EN EL GNERO Acidithiobacillus
F. Guzman, M. Eguiluz, A. Sumi y P. Ramrez
Laboratorio de Microbiologa Molecular y Biotecnologa. Facultad de Ciencias Biolgicas. UNMSM.
frank.guzman.e@gmail.com; pramirezr@unmsm.edu.pe
El gnero Acidithiobacillus ha sido reportado en muchos nichos alrededor del mundo y son importantes para los
procesos de biolixiviacin de minerales de inters comercial. El presente trabajo tiene como objetivo evaluar la
presencia de las repeticiones de secuencias simples (SSR) o microsatlites en los genomas completos de
Acidithiobacillus caldus SM-1, A. ferrivorans SS3, A. ferrooxidans ATCC 23270 y A. ferrooxidans ATCC 53993 para
identificar similitudes y variaciones en relacin a la abundancia, distribucin y composicin de este tipo de secuen-
cias en estas especies. Se obtuvieron las secuencias genmicas completas de cada especie del sitio FTP del NCBI
y se realiz el anlisis de los microsatlites con el programa ad-hoc desarrollado por Gurie et al. Se filtraron los
motivos de 3-10 pb con un mnimo de seis repeticiones. Los resultados indican que el genoma de A. ferrivorans SS3
presenta mayor cantidad de repeticiones en comparacin con el resto de especies de Acidithiobacillus. En todos
los genomas analizados, existe un predominio de SSRs en regiones codificantes, as como una alta representacin
de repeticiones dinucleotdicas del tipo CG/CG (90%) y una baja representacin del tipo AT/AT (10%). En el caso de
SSRs mononucleotdicos, los del tipo A+T (12%) estn en menor cantidad en comparacin con el tipo C+G (9%). Se
concluye que, los genomas analizados presentan un alto grado de similitud con respecto a la distribucin y compo-
sicin de SSRs los cuales podran ser utilizados para desarrollar marcadores moleculares que sirvan para la
genotipificacin intraespecfica de las especies en estudio.
Palabras clave: Acidithiobacillus, microsatlites, genotipificacin.
Financiamiento: CSI-UNMSM.
70
METALES PESADOS EN AGUA, SEDIMENTOS Y ORGANISMOS MARINOS EN LA ZONA COSTERA DE PAMPA
MELCHORITA, CAETE Y CERRO AZUL ENTRE 2010 Y 2011
A. Henostroza, R. Orozco, M. Guzmn y G. Snchez
Instituto del Mar del Per
ahenostroza@imarpe.gob.pe, ritaoro@imarpe.gob.pe
Concentraciones de cadmio, plomo, cobre, fierro y zinc, fueron determinados en agua, sedimentos y peces en
Pampa Melchorita, Caete y Cerro Azul en 2010 y 2011. Las muestras de agua se colectaron directamente, sedimen-
tos con draga Van Veen y los peces por pescadores. La metodologa, para determinar de trazas de metales en agua
se bas en la tcnica de quelacin-extraccin con APDC y MIBK, los sedimentos, previa liofilizacin se tamizaron
en malla Nytal 100 (149 micras) luego por digestin cida en sistema de microondas. Los organismos se liofilizaron
y sufrieron digestin cida. Las lecturas se realizaron en espectrofotmetro de absorcin atmica con sistema
automatizado de horno de grafito y flama. En agua las concentraciones promedio para cobre fueron: Cerro Azul
(0,0131 mg/L), Caete (0,0119 mg/L) y Pampa Melchorita (0,0118 mg/L); para plomo: Pampa Melchorita (0,0034 mg/
L), Caete (0,0025 mg/L) y Cerro Azul (0,0024 mg/L); el fierro en Pampa Melchorita obtuvo la mayor concentracin
promedio (0,0085 mg/L). El cadmio present valores por debajo del lmite de deteccin (<0,0005mg/L). En sedimentos
valores promedio para cobre en Pampa Melchorita (24,39 g/g), cadmio, plomo y hierro en Caete (1,42 3,33 g/
g y 2,44 %). manganeso y zinc en Cerro Azul (300,04 93,82 g/g). Cadmio y plomo en msculo dorsal de lenguado,
pejerrey y gnada de pejerrey, no superaron lo estipulado por la Comisin Europea (2006). Concluyendo, cadmio,
plomo y cobre en agua de mar, estuvieron por debajo de los valores establecidos en los ECA categora 4 y en
sedimentos no superaron el Probable Nivel de Efecto (Long et al, 1995).
Palabras clave: Metales pesados, zona costera, organismos marinos.
ALGUNAS CARACTERSTICAS BIOQUMICAS DE ANTIVENENOS OFDICOS DE DISTINTAS REGIONES DE
AMRICA Y SU ACCIN SOBRE VENENOS DE SERPIENTES PERUANAS
F.Huari
1
, C.Cabezas
2
,W. Silva
2
, R.Aching
1
, W. Seifert
1
y A. Yarlequ
1
1
Lab.de Biologa Molecular-Fac. Ciencias Biolgicas-UNMSM.
2
Instituto Nacional de Salud-Lima
ayarleque48@gmail.com
Las serpientes de las regiones tropicales y subtropicales de Amrica contienen en sus venenos una gran variedad
de componentes txicos siendo las enzimas, las ms importantes. Est demostrado que el nico tratamiento espe-
cfico para un accidente ofdico es el uso del antiveneno apropiado. En este contexto, la presente investigacin tuvo
por objeto comparar algunas caractersticas bioqumicas de antivenenos y ensayar su accin inhibitoria sobre las
actividades enzimticas asociadas a la toxicidad de dos venenos ofdicos del Per. Para ello se usaron sueros
antibotrpicos lquidos de origen equino producidos por el INS-Per, Instituto Clodomiro Picado-Costa Rica, INS-
Colombia, INLASA-Bolivia e Instituto Butantan-Brasil. Con tales anti venenos se realizaron los anlisis proteicos por
las tcnicas de UV a 280 nm, Lowry y Biuret, respectivamente, determinndose sus patrones electroforticos por
PAGE-SDS. As mismo, se midi la inhibicin de las actividades: proteoltica, hialuronidasa, fosfolipasa A
2
y coagulante
presentes en los venenos de las serpientes peruanas Bothrops atrox y Bothrops brazili. Los resultados mostraron
una variacin marcada en el contenido proteico de cada antiveneno, mientras que los electroferogramas indicaron
de 6 a 7 bandas proteicas siendo la principal la que equivale a un PM de 162 kDa (Ig G) y la de 66 kDa (albmina
srica). La inhibicin de actividades enzimticas con tales antivenenos fue tambin variable aun cuando la hialuronidasa
fue la enzima ms sensible a la inhibicin por todos los antivenenos. Por lo que se concluye que a pesar de las
diferencias entre cada antiveneno, todos son capaces de bloquear la difusin del veneno.
Palabras clave: Antiveneno, veneno, serpiente, enzima, regin.
Financiamiento: Convenio INS-UNMSM
71
ANLISIS CROMATOGRFICO Y ESPECTROFOTOMTRICO DE LAS FRACCIONES DE LAS HOJAS DE
CORDONCILLO Piper peltatum
D. Iparraguirre
1
, R. Gonzales
1
, E. Prez
1
, E. Carrillo
1,2
, P. Bonilla
3
, N. Lozano
3
y N. Oliveros
1
1
Laboratorio de Anatoma y Farmacognosia Vegetal, Instituto de Investigacin Antonio Raimondi-ICBAR, Facultad
de Ciencias Biolgicas-UNMSM
2
Museo de Historia Natural-UNMSM
3
Instituto de Ciencias Farmacuticas y Recursos Naturales, Facultad de Farmacia y Bioqumica-UNMSM
Las hojas de cordoncillo son utilizadas por los pobladores de la selva del Per, para disminuir las inflamaciones y
dolores. La cromatografa es una de las tcnicas que permite separar e identificar los componentes qumicos que se
encuentran en diversas muestras. La evaluacin se debe iniciar con el extracto total, luego debe ser fraccionado y
analizado. El objetivo del presente estudio es determinar que metabolitos secundarios estn implicados en la activi-
dad de esta planta medicinal. Hojas secas de Piper peltatum fueron trozadas y maceradas en alcohol de 60, se filtr
y se concentr mediante un rotavapor. El primer filtrado concentrado fue sometido a una cromatografa en columna
obtenindose 5 fracciones, la fraccin etanlica y acuosa mantienen la actividad del extracto total por lo que como
segundo paso fue someter a la fraccin etanlica (Fe) a una cromatografa en capa fina, obtenindose 6 manchas
visibles a UV, en el caso de la fraccin acuosa (Fa) se obtuvieron 7 manchas, cada mancha fue colocada en tubos
de ensayo con metanol como solvente, cada muestra diluida fue llevada a lectura espectrofotomtrica en luz visible
rango 400 a 700 nm. Las lecturas revelan dos picos de absorbancia que son caractersticos de los compuestos de
tipo flavonoide tanto en la fraccin etanlica como la acuosa. Las pruebas de determinacin de glicsidos dio
positivo, lo que concuerda con la naturaleza de muchos flavonoides que son glicsidos.
Palabras clave: cordoncillo, Piper peltatum, flavonoides, glicsidos, cromatografa capa fina, cromatografa colum-
na
Financiamiento: Proyecto CON CON 111001281 CSI-UNMSM
DETECCIN BACTERIANA EN CULTIVOS IN VITRO DE Ipomoea batatas CAMOTE MEDIANTE MTODOS
MOLECULARES
M. Izarra, A. Panta, C. Rivera, L. Gutarra, G. Villena y J. Kreuze
Centro Internacional de la Papa (CIP)
myriamiz@hotmail.com
La existencia de microorganismos bacterianos capaces de co-existir con los cultivos in vitro limitan la eficiencia de
los mtodos in vitro para la conservacin de recursos genticos. El objetivo del presente estudio fue desarrollar un
mtodo molecular para la deteccin bacteriana en cultivos in vitro de Ipomoea batatas camote. Se analizaron 2377
accesiones procedentes del banco de germoplasma de camote conservado en el CIP. Segmentos del tejido caulinar
y radicular fueron cultivados en caldo nutritivo e incubados por tres das a temperatura ambiente (Ta), tres das a
28C y catorce das a Ta. Los aislamientos fueron agrupados microbiolgica y bioqumicamente. Molecularmente, se
secuenci la regin ARNr 16S, se dise cebadores de ADN, y se determin su lmite de deteccin en ufc/l. Se
aislaron 185 cepas bacterianas; se identificaron 15 grupos [Sphingomona sp., Bacillus pumilus (tres cepas),
Bacillus cereus, Paenibacillus illinoisensis, Paenibacillus taichungensis, Methylobacterium extorquens,
Brevibacterium casei, Acinetobacter sp., Microbacterium, Streptomyces parvulus, Bacillus firmus, Staphylococcus
pasteuri, Bacillus licheniformis, Janybacter sp. y uno no definido]. Los cebadores resultaron altamente especfi-
cos para identificar a las diez primeras cepas. El lmite de deteccin bacteriana de 10
6
-10
1
ufc/l se determin a las
48h, excepto en Janibacter sp que fue a las 96h. Los resultados indican que este mtodo es eficiente para la
identificacin especfica de los microorganismos estudiados y de gran utilidad para la implementacin de medidas
preventivas y correctivas en los procedimientos de conservacin in vitro de grandes colecciones de germoplasma
de camote.
Palabras clave: Bacteria, ARNr 16S, Ipomoea batatas
Financiamiento: Centro Internacional de la Papa
72
INFLUENCIA DE LA RADIACIN UV-C 254 nm SOBRE LA CAPACIDAD MULTIENZIMTICA Y ANTAGONISTA
DE ACTINOMICETOS DE ORIGEN MARINO
M. Lino, M. Huamn y J. Len
Laboratorio de Ecologa Microbiana, Facultad de Ciencias Biolgicas, UNMSM.
mirkodlinax@gmail.com
El estudio tuvo como objetivo evaluar los efectos provocados por la radiacin UV-C a 254nm sobre la capacidad
antagonista y de produccin de enzimas extracelulares (EEC) de actinomicetos marinos.
Fueron aisladas cuatro cepas de actinomicetos (EIIIA-10
-4
; ER15; 13A-2 y LAPA) de invertebrados marinos, estos
actinomicetos fueron previamente evaluados por su capacidad de producir EEC (amilasas, lecitinasas, esterasas,
proteasas y caseinasas) y comprobar su actividad antagonista frente a ictiopatgenos (Vibrio anguillarum,
Aeromonas salmonicida y Lactococcus garvieae 1-2). Los actinomicetos mantenidos en medio lquido y distribuidos
en placas Petri estndar en agitacin constante a 100 rpm, fueron irradiados en 3 tiempos diferentes (5, 10 y 15
minutos. Los cultivos irradiados fueron evaluados nuevamente para verificar su capacidad antagonista y produc-
cin de EEC y luego comparados con las cepas silvestres para analizar daos o beneficios producto de la irradia-
cin. Las cepas irradiadas resultaron viables en todos los casos, sin embargo el comportamiento de su actividad
vario segn el tiempo de exposicin en comparacin con las cepas silvestres. Esta variacin incluyo desde una
supresin total de su bioactividad hasta una mejora considerable, tanto en la produccin multienzimtica como en su
capacidad antagonista frente a los ictiopatgenos en estudio.Se concluye que la radiacin UV a 254 nm permite
seleccionar cepas mutantes que favorecen la capacidad multienzimtica y antagonista de actinomicetos de origen
marino considerando los tiempos de exposicin.
Palabras clave: actinomicetos, radiacin UV-C, antagonismo, actividad multienzimtica.
Financiamiento:

Vicerrectorado de Investigacin, Estudios de Investigacin CON CON 2012 (Cdigo: 121001281).
ESTANDARIZACIN DEL MTODO DE DIFUSIN RADIAL EN AGAR CZAPECK CMC-NA USANDO ROJO DE
CONGO COMO COLORANTE PARA LA SELECCIN DE HONGOS FILAMENTOSOS CON CAPACIDAD
CELULOLTICA
H. Llacza*, P. Meza y P. Castellanos
Laboratorio de Micologa aplicada, FCB UNMSM
bequerel6@hotmail.com
El mtodo de difusin radial en agar czapeck-CMC ha sido empleado desde los ochentas para detectar
microorganismos capaces de segregar enzimas celulolticas. El objetivo es estandarizar las concentraciones de
rojo de congo, carboximetilcelulosa-Na y cloruro de sodio y emplearlo en la seleccin de cepas de hongos filamentosos
en condiciones de laboratorio.
Se tomo como variables carboximetilcelulosa sdica (CMC-Na), rojo congo y NaCl; se les hizo un diseo factorial de
concentraciones 0.1, 0.5 y 1 g/L; 0.5, 1, 1.5 g/L; 10, 20, 40 g/L, respectivamente, obteniendo 27 combinaciones
diferentes. Para la estandarizacin se emplearon placas con agar czapeck-carboximetilcelulosa-Na en concentra-
ciones ya mencionadas de CMC-Na, donde se sembr Penicillium incubado por seis das. Las placas, se prepara-
ron con solucin rojo de congo, dejando reposar 10 minutos. El revelado de las reas de hidrlisis se hizo usando
concentraciones de ClNa por lavados sucesivos hasta conseguir el aclaramiento. La concentracin de 0.1 g/L CMC-
Na influye en el dimetro promedio del micelio (18.5 mm) y total de hidrolisis (40 mm) de 0.5g/L D.M. 16.6 mm y D.T.
40 mm y 1.0 g/L D.M. 14.5 mm y D.T. 38.7 mm. Concluyendo, la concentracin de rojo de congo es directamente
proporcional al volumen de solucin de ClNa, a mayor concentracin de NaCl las reas de hidrlisis se revelan ms
rpido con respecto a una menor concentracin. Concentraciones optimas CMC-1g/L; rojo congo 0.5 g/L; NaCl 40g/
L favorecen obtener resultados cualitativos y semicuantitativos, de gran ayuda cuando se busca microorganismos
con enzimas extracelulares.
Palabras clave: enzimas celulolticas, rojo de congo, difusin radial, Carboximetil celulosa, Penicilllium.
Financiamiento: Laboratorio de Micologa aplicada, FCB UNMSM.
73
DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN LETAL MEDIA (CL50) Y EFICACIA DEL EUGENOL COMO
ANESTSICO SOBRE Xiphophorus helleri (HECKEL, 1848) (CYPRINODONTIFORMES: POECILIDAE)
C. Llanos, C. Monteza y C.Scotto
Laboratorio de Mejora Gentica y Reproduccin Animal. Facultad de Ciencias Naturales y Matemticas. Universidad
Nacional Federico Villarreal
camz11199@gmail.com
Se determin la concentracin letal media (CL
50
) y la eficacia como anestsico de eugenol a diversas dosis sobre el
pez espada Xiphophorus helleri (Heckel, 1848). Se trabaj con 10 individuos en el control y para cada concentra-
cin con tres replicas. El estimado del CL
50
a las 96 h para eugenol fue de 22,12 mg.L
-1
. La eficacia de anestesia se
hizo con 20 individuos por cada dosis de eugenol. El anestsico result efectivo a 100, 125 y 150 mg.L
-1
, con tiempo
de induccin total (T.I.T.) de 265,35 seg a 100 mg.L
-1
, 229,75 seg a 125 mg.L
-1
, 195,85 seg 150 mg.L
-1
y tiempo de
recuperacin (T.R.T.) de 325,45 seg a 100 mg.L
-1
, 259 seg 125 mg.L
-1
y 246,7 seg 150 mg.L
-1
. Se determin mayor
eficiencia a induccin y recuperacin a 125 mg.L
-1
mediante anlisis de correlacin. Se obtuvieron ecuaciones
logartmicas para las dosificaciones de mayor eficiencia: y = 118,1ln(x) + 141,77; R = 0,5883 (Tiempo de induccin
vs Peso a 125 mg.L-1), y = 401,33ln(x) - 349,75; R = 0,5786 (Tiempo de induccin vs Longitud a 125 mg.L
-1
), y =
172,22ln(x) + 130,69; R = 0,4285 (Tiempo de recuperacin vs Peso a 125 mg.L
-1
), y = 531,62ln(x) - 508,64; R =
0,3477 (Tiempo de recuperacin vs Longitud a 125 mg.L
-1
). Las ecuaciones logartmicas permiten ahorro en tiempo
y dosificacin. No se observ efecto letal durante la induccin de la anestesia y posterior recuperacin a sta. La
alta eficacia a bajas dosis, bajo costo y ausencia de toxicidad son importantes en pruebas con peces.
Palabras clave: Xiphophorus helleri, eugenol, concentracin letal media, anestesia, dosis.
Financiamiento: Interno.
TOXICIDAD AGUDA DEL ETANOL Y PERXIDO DE HIDRGENO SOBRE Danio rerio (HAMILTON, 1822)
(CYPRINIFORMES: CYPRINIDAE): EFECTO GENOTXICO EN ERITROCITOS DE SANGRE PERIFRICA DEL PEZ
CEBRA
C. Llanos, C. Monteza y C. Scotto
Laboratorio de Mejora Gentica y reproduccin Animal de la Universidad Nacional Federico Villarreal.
cllv_bio87@hotmail.com
Se determin la concentracin letal media (CL50) del etanol y del perxido de hidrgeno a diversas dosis sobre el pez
cebra Danio rerio (Hamilton, 1822), as como evidencias de genotoxicidad mediante el test de microncleos en
eritrocitos de sangre perifrica. Para la determinacin de la CL
50
se trabaj con seis individuos en el control y en cada
una de las concentraciones crecientes de etanol (55.3, 63.2, 71, 79, 118.5, 158, 395 y 790 mg.L-1) y de perxido de
hidrgeno (23, 46, 57.5, 69, 80.5, 92, 103.5 y 115 mg.L-1)con tres replicas. El estimado del CL
50
a las 24 h por anlisis
Probit para etanol fue de 125.08 mg.L-1 (95% de lmites de confianza) y para perxido de hidrgeno fue de 51.04
mg.L-1 (95% de lmites de confianza). Se obtuvieron muestras de sangre perifrica (2 individuos por CL
50
a las 24 h),
fueron procesadas y coloreadas con Giemsa 10% y se cuantificaron eritrocitos con microncleos. Se detect
efectos genotxicos del etanol y del perxido de hidrgeno por presencia de eritrocitos con ncleos fragmentados,
clulas con ncleos arrionados, clulas con dos microncleos y con un microncleo. Se evidenci dao en los
embriones del pez a las 24 h post-fertilizacin sometidos a concentraciones mnimas de CL
50
de etanol (79 mg.L-1)
y CL
50
de perxido de hidrgeno (23 mg.L-1). Se descart el uso de acido actico glacial que redujo los costos de
procesamiento. Se concluy que el etanol y el perxido de hidrgeno producen dao gentico en los eritrocitos de
D. rerio.
Palabras clave: Danio rerio, etanol, perxido de hidrgeno, concentracin letal media, microncleo.
Financiamiento: Interno.
74
LOCALIZACIN DE PROTEINAS FOSFORILADAS EN RESIDUOS DE TIROSINA EN ESPERMATOZOIDES DE
ALPACA CRIOPRESERVADOS CON VITAMINA E
I. Mancisidor, M. Suarez, N. Canorio y M. Valdivia
Laboratorio de Fisiologa de la Reproduccin Animal UNMSM
iselams@gmail.com, ncanorio@gmail.com
El proceso de criopreservacin de espermatozoides est asociado a la produccin de especies reactivas de
oxigeno (EROs), provocando desestabilizacin de las membranas, lo cual induce un fenmeno de criocapacitacin,
caracterizado por el incremento de la fosforilacin de protenas en residuos de tirosina, conllevando a una disminu-
cin de los parmetros funcionales del espermatozoide. La vitamina E es un antioxidante, protector de las membra-
nas contra EROs. El objetivo del trabajo fue comparar la distribucin de las protenas fosforiladas en residuos de
tirosina en espermatozoides de alpaca criopreservados con o sin antioxidante. Se usaron muestras de
espermatozoides epididimarios de machos adultos, las cuales fueron criopreservadas en el medio de congelamiento
TES TRIS YOLK con Dimetilacetamida (0.375M), se emple el mtodo de congelamiento lento (Canorio, 2009). El
diseo del trabajo se baso en dos grupos diferentes: espermatozoides criopreservados en el medio de congelamiento
con 200 g/mL Vitamina E (Grupo A) y espermatozoides criopreservados sin antioxidante (Grupo control). La
inmunodeteccin de las protenas fosforiladas, usada como un indicador de capacitacin, fue realizada post-
descongelamiento de las muestras, con el anticuerpo primario 4G10 conjugado a FIT-C, MILLIPORE.
El patrn de fosforilacin fue diferente en el grupo control con una alta proporcin de clulas con seal positiva en
la regin de la cabeza, comparado con el grupo antioxidante en el cual fueron localizadas principalmente en la regin
del flagelo. Concluyendo, el uso de vitamina E como suplemento del medio de congelamiento de espermatozoides de
alpaca redujo el estado de criocapacitacin.
Palabras clave: Criopreservacin, espermatozides de alpaca, vitamina E, fosforilacin en residuos tirosina.
Financiamiento: Autofinanciado.
EVALUACIN DE LA CAPACIDAD BIODEGRADATIVA SOBRE UN DETERGENTE ALQUIL SULFONATO LINEAL
DE POBLACIONES MICROBIANAS PRESENTES EN EL RO RMAC Y SU ESTUARIO
Y. Manrique, M. Hospinal, E. Paredes, S. Gutirrez y F. Merino
Laboratorio de Microbiologa y Biotecnologa Microbiana. Facultad de Ciencias Biolgicas. UNMSM
yessycris@gmail.com
Los detergentes de uso domstico e industrial, producen un alto nivel de contaminacin en cursos de agua impidien-
do su autodepuracin; dificultan la oxigenacin de los organismos y destruyen las branquias de los peces. Nuestro
objetivo fue medir la capacidad biodegradativa de las poblaciones microbianas presentes en el ro Rmac y su
estuario sobre detergentes tipo alquil sulfonato lineal (LAS); uno de los compuestos xenobiticos ms encontrados
en aguas residuales. Se colectaron tres muestras de agua (1L) y tres muestras de lodo (1Kg) del rio Rmac
pertenecientes a las zonas de San Martn de Porres, Ate-Vitarte y su estuario en el Callao. Las muestras fueron
inoculadas en un medio mineral usando un detergente del tipo LAS, como nica fuente de carbono. Luego del
crecimiento de los microorganismos, se realizaron pruebas de biodegradacin a tres diferentes concentraciones del
mencionado detergente; 78, 365 y 809 mg/L; usando el mtodo MBAS (Methylene Blue - Active Substances) y
leyendo en el espectrofotmetro UNICO - 2100 a 650nm. Los microorganismos presentes en la muestra de agua
procedente de Ate-Vitarte degradaron el 84% de detergente a 78 mg/L, mientras que los microorganismos presen-
tes en la muestra del estuario solo degradaron el 56% del detergente a la misma concentracin. Por otro lado, las
pruebas de biodegradacin con la mayor concentracin de detergente (809 mg/L) mostraron como mximo 54% de
biodegradabilidad. Estos resultados nos permiten confirmar la existencia de poblaciones microbianas con capacidad
biodegradativa sobre detergentes LAS, las cuales pueden ser usadas en procesos de biorremediacin.
Palabras clave: Biodegradabilidad, detergentes, alquil sulfonato lineal, MBAS.
Financiamiento: PIC 2010
75
HIDROCARBUROS DEL PETRLEO EN REAS MARINAS SOMERAS DEL PER ENTRE EL 2009 Y 2010
R.Martinez, C.Martinez y R.Orozco
Instituto del Mar del Per
rmartinez@imarpe.gob.pe
Entre los aos 2009 y 2010 fueron evaluados en agua y sedimento la concentracin de hidrocarburos de petrleo
y sus derivados procedentes del trfico martimo y/o industrias ribereas, en las reas costeras del Callao, Caete,
Pisco, Huarmey, Paracas, Sechura, Supe y Talara, lugares que constituyen parte de la red monitoreo ambiental del
IMARPE y donde se manifiesta una intensa actividad antrpica. La metodologa se bas en el Manual y Gua N 13
(COI-UNESCO 1984), el Manual y Gua N 11 (COI-UNESCO 1982) y los Mtodos referenciales para Estudios de
Contaminacin N 20 (UNEP/COI/IAEA 1992). Los resultados de los anlisis indicaron que la concentracin promedio
de hidrocarburos aromticos disueltos en el mar, en las reas evaluadas no super el valor establecido por la
Comisin Oceanogrfica Intergubernamental (10 g/L), excepto en el Callao que present valores de 16.82 ug/L en
octubre 2009 y de 7.81 ug/L en abril 2010. Los sedimentos marinos presentaron hidrocarburos aromticos totales,
por debajo del valor (16.8 ug/g), establecido por Development and Evaluation of Numerical Sediment Quality Assessment
Guidelines for Florida Inland Waters (SQAGs) 2000, con excepcin del Callao que en abril 2010 present la mxima
concentracin de 46,15 g/g, y una concentracin media de 4.91 ug/g. se concluye que, en general, no se
detectaron valores que superen los estndares de hidrocarburos de petrleo en agua de mar y sedimentos en los
lugares estudiados, con excepcin del Callao.
COMPARACIN DE TRES MEDIOS FORMULADOS CON TRIBUTIRIN PARA MEDIR LA MEJOR RESPUESTA DE
CEPAS LIPOLTICAS
L. Mendoza, C. Mndez, G. Vergaray y C. Parave
Lab. Control de Calidad de Alimentos, Aguas y Ambientes. C. Biolgicas-UNMSM.
mendozaclig@gmail.com
Utilizar un medio adecuado para la recuperacin de microorganismos lipolticos permite garantizar una determinacin
correcta de la calidad microbiolgica de un alimento. El estudio tuvo como objetivo determinar el medio formulado que
proporcione una mejor respuesta de liplisis. Se probaron nueve cepas de hongos asiladas de aceites vegetales de
desecho; ocho de Penicillium sp: M2-Cz, M4-APH, M4P-APH, M5a-Cz, M5b-Cz, M5-PaCz, M5-PbCz, M6-Cz y una
de Aspergillus sp: M6a-APH; todos con probada actividad lipoltica. Se prepararon 300 mL de los medios: Agar SLM
- Agar Plate Count (APC) ms 3% de tributirin; Agar Tributirin 3%- comercial y Agar Czapek con 3% de tributirin (pH
6). Las cepas fueron sembradas por triplicado y por puntura en el centro, se incubaron por 26 das a temperatura
entre 20 a 25 C. Los radios lipolticos de las cepas evaluadas fueron medidos cada tres das fluctuando de 0.2
a 1.2 cm en Agar Czapek con tributirin, de 0.1 a 0.7 cm en Agar SLM y de 0.1 a 0.6 cm en Agar. Tributirin. Las cepas
de Penicillium y Aspergillus desarrollaron siempre un radio lipoltico mayor en Agar Czapek, excepto para M5a-Cz
y M6-Cz que resultaron iguales que en Agar tributirin; slo en Agar Czapek, M4P-APH desarroll radio lipoltico y en
Agar SLM no hubo liplisis para M5b-Cz y M5- PbCz. Se demostr que Agar Czapek con 3% tributirin present la
mejor respuesta de liplisis y debe ser considerado el medio ms adecuado para evaluar la actividad lipoltica de
micromicetos del gnero Penicillium y Aspergillus.
Palabras clave: Agar Czapek, Agar Tributirin, actividad lipoltica, Penicillium, Aspergillus.
Financiamiento: LCCAAA-UNMSM.
76
EVALUACIN COMPARATIVA DE LA ACTIVIDAD LIPOLTICA DE CEPAS DE Penicillium sp Y Aspergillus
sp SOBRE TRIBUTIRIN Y ACEITE DE HIGUERILLA (Ricinus communis)
L. Mendoza
1
, M. Lino
1
, J. Santiago
2
y J. Len
1
1
Laboratorio de Ecologa Microbiana, Facultad de Ciencias Biolgicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos.
2
Laboratorio de Investigacin y Desarrollo de Qumica Orgnica (LIDQO), Facultad de Qumica e Ingeniera Qumica,
Universidad Nacional Mayor de San Marcos.
mendozaclig@gmail.com
Los microorganismos ambientales cumplen un rol fundamental en procesos de biodegradacin; es as, como los
hongos lipolticos pueden ser utilizados en el tratamiento de aceites residuales. El estudio compara la actividad
lipoltica de hongos sobre dos tipos de triglicridos: tributirin, de cadena corta y aceite de higuerilla (ricino) de cadena
larga. Cepas de Penicillium sp y Aspergillus sp aisladas de aceites vegetales de desecho fueron evaluadas
comparativamente por su actividad lipoltica en Agar Czapeck con tributirin (3%) y aceite de higuerilla (3%) como
nicas fuentes de carbono e incorporados por separado, pH 6. La actividad lipolitica se determin por la formacin
de halos alrededor de cada colonia. Cinco cepas de Penicillium sp fueron seleccionadas y cultivadas en sistemas
de Fermentacin en Substrato Lquido (FSL) empleando Caldo Czapeck (1% de peptona) y aceite de higuerilla (16%)
(pH 6), en agitacin constante a 150 rpm durante 12 das a temperatura ambiental. Los crudos enzimticos se
probaron en Agar Czapeck (pH 6) con 3, 6 y 9% de aceite de higuerilla (mtodo del pocillo). Cuando se emple aceite
de higuerilla los radios de crecimiento y actividad lipoltica variaron de 1,8 a 3,3 cm y de 0,2 a 1,5 cm, respectivamen-
te; en cambio, con tributirin variaron de 0,2 a 1,2 cm para ambas caractersticas. La liplisis por observacin directa
fue mejor con tributirin. Los crudos enzimticos obtenidos por FSL no evidenciaron liplisis para ninguna concentra-
cin de aceite de higuerilla. Se observ buena actividad lipoltica con el triglicrido de cadena corta. Sin embargo, en
aceite de higuerilla hubo mayor crecimiento radial que en tributirin.
Palabras clave: actividad lipoltica, Agar Czapek, Fermentacin Substrato Liquido (FSL), hongos lipolticos, triglicridos.
Financiamiento:

Laboratorio de Ecologa Microbiana, Facultad de Ciencias Biolgicas, UNMSM.Laboratorio de
Investigacin y Desarrollo de Qumica Orgnica (LIDQO), Facultad de Qumica e Ingeniera Qumica, UNMSM.
EVALUACIN DEL EFECTO CITOTXICO Y GENOTXICO DE EXTRACTOS ACUOSOS DE TARA
(Caesalpinia spinosa) EN CLULAS DEL MERISTEMO RADICULAR DE Allium cepa
D. Orihuela, Y. Villafani, H. Bonilla, L. Marin, A. Jimnez, Y. Romero, G. Manrique, K. Alva y A. Lpez
Laboratorio de Gentica. Grupo estudiantil CIRGEN (Crculo de Investigacin en Recursos Genticos), Facultad de
Ciencias Biolgicas UNMSM.
netto669@hotmail.com; angelus_6_6@hotmail.com
Con el propsito de evaluar el efecto citotxico y genotxico del extracto acuoso de tara (Caesalpinia spinosa)
en clulas del meristemo radicular de cebolla (Allium cepa), se utilizaron vainas de tara colectadas en la provincia
Tarma, Junn, a partir de las cuales se prepar un extracto acuoso. Se hicieron diluciones al 0.01%, 0.1% y 1% con
las cuales fueron tratados bulbos de cebolla durante tres das. El control positivo fue CuSO
4
0.01M y el control
negativo fue agua potable esterilizada con radiacin UV. La citotoxicidad se evidenci mediante la diferencia de
longitudes de las races antes y despus de los tratamientos. Luego, con dichas races se hicieron preparaciones
citogenticas que permitan evidenciar la genotoxicidad mediante daos visibles en la cromatina. Las races fueron
fijadas, hidrolizadas y finalmente teidas con Orcena. El material fue montado en lminas de vidrio para ser obser-
vado utilizando el microscopio. La citotoxicidad se cuantific mediante porcentajes de inhibicin de crecimiento de
races, los cuales fueron de 27.63%, 83.33% y 94.30% para las concentraciones 0.01%, 0.1% y 1%, respectiva-
mente. La genotoxicidad se evidenci mediante la observacin de anomalas en el ncleo; as, el porcentaje de
clulas normales fue de 75% y 14 % para las concentraciones 0.01% y 1%, respectivamente. Se concluye que el
extracto acuoso de tara produce citotoxicidad en races de cebolla, directamente proporcional a la concentracin,
y la genotoxicidad del extracto es mayor a concentraciones de 0.1% y 1%.
Palabras clave: Caesalpinia spinosa, citotoxicidad, genotoxicidad, extracto acuoso.
Financiamiento: Vicerrectorado de Investigacin, UNMSM.
77
IMPACTO DEL CO
2
SOBRE LA DENSIDAD CELULAR EN SEIS CEPAS DE MICROALGAS MARINAS
A. Oscanoa, G. Ynga, I. Chang

y C. Aguilar
rea de Biotecnologa Acutica, Instituto del Mar del Per (IMARPE)
aoscanoa@gmail.com
Debido a la facilidad con que las microalgas capturan el CO
2
del medio ambiente, resulta interesante evaluar la
cantidad y tiempo de ingreso de ste a los cultivos masivos, con la finalidad de aumentar la densidad celular. El
objetivo del estudio fue evaluar los tiempos de inyeccin de CO
2
, durante la produccin de biomasa que conlleve a
una mayor produccin, evaluando adems, la variacin del pH sin que este altere la calidad del cultivo. Se trabaj con
seis cepas obtenidas del Banco de Germoplasma de Organismos Acuticos del Instituto del Mar del Per (IMARPE),
las cuales fueron sometidas a cultivos tipo Batch dentro de un invernadero, el tiempo de cultivo de la fase exponencial
donde se realizaron las pruebas fue de tres das. Los datos se procesaron mediante el anlisis del parmetro
pendiente y regresin lineal. Los resultados mostraron que la densidad celular es inversamente proporcional al
tiempo de inyeccin de CO
2
al cultivo. La mayor densidad celular, en las diferentes cepas, se obtuvo entre los 5 y 10
minutos, excepto para la cepa de Chaetoceros gracilis la cual obtuvo sus mximos valores entre 10 y 15 minutos de
inyeccin. La variacin de pH tendi hacia la acidz, en un rango de 8 a 4, sin alterar la densidad celular, por el
contrario, los cultivos permanecieron libres de contaminantes. Como conclusin, los resultados permiten establecer
tiempos adecuados de inyeccin del CO
2
,

los cuales fortalecen la fase de crecimiento exponencial aumentando la
densidad poblacional en un 30% sobre lo establecido en esta fase.
Palabras clave: Microalgas, densidad celular, CO
2
, cultivo masivo.
Financiamiento: Proyecto IMARPE-FINCyT, N025-PIBAP-FINCyT-2007 y Instituto del Mar del Per: IMARPE.
PURIFICACIN DE UNA LECTINA TIPO C DEL VENENO DE LA SERPIENTE PERUANA Lachesis muta
SHUSHUPE Y ACCIN DE INHIBIDORES
M. Palomino
1
, J. Delgadillo
1
, F. Lazo
1
, E. Rodrguez
1
, R. Severino
2
y A. Yarlequ
1
1
Laboratorio de Biologa Molecular,
2
Laboratorio Zoologa de Invertebrados-Facultad Ciencias Biolgicas-UNMSM
El envenenamiento por Lachesis muta es atribuido a su composicin enzimtica porque se observa severa hipotensin,
desordenes de la coagulacin y protelisis. Recientemente se ha iniciado una lnea de trabajo sobre componentes no
enzimticos, habindose identificado en este veneno una lectina tipo C. El objetivo del estudio fue obtener la lectina
al estado homogneo y evaluar la accin de algunos agentes que podan influenciar su actividad hemoaglutinante.
Para ello, 50 mg del veneno diluido en buffer acetato de amonio 0,1 M pH5 se aplicaron a una columna de DEAE
Sephadex A-50 eluda con el mismo buffer y la fraccin de lectina fue recuperada con NaCl 0,3M y analizada por
PAGE-SDS. La actividad hemoaglutinante fue medida en placas de microtitulacin a partir de una suspensin de
eritrocitos humanos al 3%. As mismo, se evaluaron los cambios en la actividad, en presencia de lactosa, galactosa,
arabinosa, maltosa y manosa, as como: 2-ME, DTT ,EDTA y los iones calcio, magnesio y manganeso. Como
resultado de este estudio se obtuvo una lectina cida al estado homogneo con un peso de 27,5 kDa (dmero ) y 14,3
kDa (monmero). Por otro lado la lactosa produjo la mayor inhibicin de la actividad hemoaglutinante seguida de
galactosa y arabinosa en tanto que maltosa y manosa no produjeron inhibicin. Con respecto a los agentes reductores
y quelantes la mayor inhibicin fue por EDTA y la actividad fue restituida por los iones divalentes. Se concluye que
el veneno de L. muta tiene capacidad hemoaglutinante debido a la lectina C purificada.
Palabras clave: serpiente, veneno, lectina tipo C. hemoaglutinacin.
Financiamiento: CSI-VRI-UNMSM.
78
EVALUACIN DE LA EFECTIVIDAD EN CAMPO DE CEPAS NATIVAS DE Bacillus subtilis BS-111 Y
Trichoderma harzianum TRHA-7 CONTRA Botrytis cinerea PUDRICIN GRIS EN VID VINFERA
A. Patio
1
, A. Flores
1
, M. Alcarraz
2
, J.C. Woolcott
1
, C. Trigoso
1
, L. Vargas
1
, E. Jurez
1
,
A. Evangelio
1
y N. Sols
1
1
Laboratorio de Microbiologa Ambiental y Biotecnologa Facultad de Ciencias Biolgicas UNMSM.
2
Laboratorio de Bioprocesos Industriales Facultad de Ciencias Biolgicas UNMSM.
jano_1111@hotmail.com
El estudio tuvo como objetivo evaluar el poder sinrgico de las cepas nativas Bacillus subtilis BS-111 y Trichoderma
harzianum Trha-7 contra Botrytis cinerea Pudricin gris en vid vinfera. Para desarrollar el trabajo se seleccion
un sector de tierra de cultivo de vid variedad Red Globe en el Fundo Torreblanca, Huaral; con sntomas tempranos de
la enfermedad. Se multiplic la cepa de Trichoderma harzianum Trha-7 en sustrato slido (maz molido) mediante
produccin artesanal. Se aplic diluyndolo a una concentracin final de 8.2x107 conidias/ml junto con Bacillus
subtilis BS-111 a una concentracin de 2.5x108 esporas/ml, producido en fermentacin sumergida en biorreactor
de 140 litros de capacidad; mezclndolos con aceite mineral al 2,0 %. Cada unidad experimental consisti de cinco
plantas, asperjadas en los estados de floracin, media pinta y pinta total ms una unidad testigo sin aplicacin; las
evaluaciones se dieron en 30 racimos de cada planta escogidas al azar y marcadas antes de la aplicacin.En los
resultados, los tratamientos sinrgicos con ambas cepas presentaron una incidencia significativamente menor de la
enfermedad a la presentada por los racimos testigos; de un 12.4% contra el testigo de 69.7%.Concluyendo, una
aplicacin sinrgica de Bacillus subtilis BS111 con Trichoderma harzianum Trha-7 reduce notablemente la inciden-
cia y la severidad causada por Botrytis cinerea en vid en aplicaciones a momentos de floracin, media pinta y pinta
total.
Palabras clave: Control biolgico, Bacillus subtilis, Thichoderma harzianum, Botrytis cinerea, Vid.
Financiamiento: Investigacin autofinanciada.
EVALUACIN EN CAMPO DE LA CAPACIDAD NEMATOCIDA DE LA CEPA Paecilomyces lilacinus PLI-111
CONTRA ESTADIOS JUVENILES EN TIERRA DE Meloidogyne sp. EN CULTIVO DE VID
A. Patio
1
,
A. Flores
1
,
M. Alcarraz
2
, J.C. Woolcott
1
, A. Evangelio
1
,
L.Vargas
1
, J. Claudio
1
, M. Mogolln
1
y N. Sols
1
1
2
Laboratorio de Bioprocesos Industriales Facultad de Ciencias Biolgicas UNMSM.
Con el propsito de evaluar la actividad nematocida de la cepa Phaecilomyces lilacinus PLI-111 contra estadios
juveniles en tierra de Meloidogyne sp se realiz un estudio en un cultivo de vid. Para su realizacin se multiplic la
cepa de Paecilomyces lilacinus PLI-111 en sustrato slido (maz molido) mediante produccin artesanal logrndose
una concentracin final de 1.7x1010 esporas/gr. Se seleccion un sector de tierra de cultivo de vid variedad Red
Globe, en el Casero de Chapair, Piura, infestado con el nemtodo Meloidogyne sp con una concentracin de
2,1x103 nematodos juveniles J2 por 100 gramos de tierra. Para el ensayo se utilizaron reas de 16 m2 de rea
superficial con 80 cm de profundidad; probndose tres tratamientos: tres bolsas de 600 g en 200 litros; cinco bolsas
de 600 g en 200 litros y un control con agua tratada; los tres con dos kilos de melaza como coadyuvante y cada
tratamiento con tres repeticiones. La concentracin de estadios juveniles se registr al inicio y a los 40 das de
aplicacin con la tcnica del embudo de Baermann modificada. Como resultado se registr un alto grado de eficacia,
slo teniendo una diferencia de eficacia de 75% contra 82% de mortalidad entre el primer y segundo tratamiento.
Concluyendo, la cepa de P. lilacinus PLI-111 aplicado en concentraciones mayores a 108 esporas/ml (segundo
tratamiento) produce una mortalidad mayor al 80% en juveniles del nematodo Meloydogyne sp. en campo, siendo
este potencial principio activo de formulaciones la cuales pueden usarse en la agricultura orgnica y convencional.
Palabras clave: Phaecilomyces lilacinus, Meloydogyne sp., control biolgico, produccin artesanal.
79
EVALUACIN DE LA CONCENTRACIN DE UREA Y EXTRACTO DE LEVADURA EN EL PROCESO DE
PRODUCCIN ARTESANAL DE Trichoderma harzianum TRHA-7.
A. Patio
1
,
A. Flores
1
, M. Alcarraz
2
, J.C. Woolcott
1
, E. Juarez
1
, M. Mogollon
1
, C. Trigoso
1
, M. Casanova
1
, C.
Montoya
1
, N. Galindo
1
, J. Claudio
1
1
2
Laboratorio de
Bioprocesos Industriales Facultad de Ciencias Biolgicas UNMSM.
Se evaluaron distintas concentraciones de Urea y Extracto de levadura en el agua ligada a la fermentacin de
sustrato slido por cultivo bifsico en produccin masiva de Trichoderma harzianum Trha-7. Para realizarlo se
reactiv esta cepa escalndola hasta dos litros en caldo YPG como inoculo para produccin por cultivo bifsico,
con maz molido como sustrato (600 gr./bolsa), evaluando concentraciones de urea: 0.3; 0.5; 0.8; 1 y 1.5 % (p/v); y
extracto de levadura (por hidrlisis cida): 0.5; 0.8; 1,2 y 1.5% (v/v) en agua ligada al sustrato (230 ml/bolsa) en 20
tratamientos y 30 bolsas/tratamiento, incubadas a 27 C y H.R. de 87 % por 15 das. La concentracin final se realiz
en cmara Neubauer, la viabilidad de esporas y porcentaje de pureza en siembra por diluciones en Agar Papa
Dextrosa. Los tratamientos que obtuvieron mayor concentracin de esporas fueron: T14: urea: 1.0 %: extracto de
levadura 1.2 % con 4.5x1010 esporas/gr.; T13: urea: 0.8 %: extracto de levadura 1.2%, con 2.4 x1010 esporas/gr.
y T19: urea: 1.0 %: extracto de levadura 1.5%, con 4.9 x1010 esporas/gr.; el mayor porcentaje de pureza el T14
con 97.5 %; y mayor porcentaje en prueba de viabilidad de esporas el T19, con 94.4 % con respecto a la
concentracin total. Concluyendo, el cultivo bifsico con sustrato maz molido, agua con urea al 1.0 % y extracto de
levadura al 1.5 % result ms apropiado para la produccin de Trichoderma harzianum, acelerando el proceso de
concentracin y viabilidad de esporas en produccin masiva.
Palabras clave: Biocontrolador, Trichoderma harzianum, cultivo bifsico, produccin de esporas, urea, extracto
de levadura.
ESTUDIO PRELIMINAR DE LA BIODIVERSIDAD DE Azotobacter ASOCIADOS A CULTIVOS ANDINOS Y
COSTEROS DE APURIMAC Y PIURA
E. Quillama, A. Medina y S. Dvila
Laboratorio de Microbiologa Industrial y Biotecnologa Alimentaria.
Facultad de Ciencias Biolgicas, UNMSM. Lima - Per
equillamap@unmsm.edu.pe
Las bacterias del gnero Azotobacter estn asociadas a la rizsfera de cultivos orgnicos. Estos microorganismos,
tienen la capacidad de fijar nitrgeno, sntetizar fitohormonas, solubilizar fosfatos y producir sustancias antagonis-
tas contra fitopatgenos. Por estas razones nos hemos propuesto conocer la diversidad de cepas nativas de
Azotobacter asociados a cultivos andinos y costeros de Per, para su uso como biofertilizantes. Las muestras de
la rizsfera de los diversos cultivos, fueron sembradas directamente en caldo Azul de Bromotimol libre de Nitrgeno
(Nfb) pH 7.0 e incubadas a 30C por 4 a 5 das. Seguidamente se sembraron en los medios selectivos Agar Nfb, Agar
Ashby y Agar Ashby + Benzoato pH 7.0. Las colonias tpicas, fueron transferidas a caldo tripticasa soya pH 7.0. La
identificacin, se hizo en base a la coloracin Gram, pruebas del KOH, catalasa, oxidasa, produccin de pigmento,
formacin de quistes, comportamiento cultural y bioqumico. De un total de 16 muestras procesadas, se logr aislar
97 cepas de Azotobacter, de las cuales, 10 (10.3%) correspondieron a Azotobacter nigricans, 5 (5.2%) a Azotobacter
chroococcum, 2 (2.1%) a Azotobacter paspali, 2 (2.1%) a Azotobacter vinelandi, y 78 (80.4%) a Azotobacter sp.
En conclusin, hay un alto porcentaje de cepas nativas de Azotobacter que coexisten con los cultivos regionales,
con perspectivas de ser utilizadas para mantener una produccin orgnica sostenible.
Palabras clave: biodiversidad, Azotobacter, cultivos de Per.
Financiamiento: UNMSM
80
EVALUACIN DE LA BIODIVERSIDAD LCTICA DE TOCOSH, ALIMENTO FERMENTADO TRADICIONAL DE
PER
E. Quillama, S. Dvila, A. Medina, C. Avalos y D. Paredes
Facultad de Ciencias Biolgicas UNMSM, Lima - Per
La papa (Solanum tuberosum), es un tubrculo de origen andino utilizado para la produccin de Tocosh. Durante
la fermentacin, participan las bacterias lcticas de rol metablico desconocido, por esta razn, decidimos evaluar
la diversidad de la microbiota lctica nativa que interviene en este proceso. Las muestras de Tocosh (papa
fermentada), procedentes de Huanuco, Ancash y Junn, fueron sembradas en los medios Man Rogosa Sharpe
(MRS) y M17 pH 6.5 e incubadas a 30 C por 72 horas en condiciones de microaerofilia. La identificacin morfolgica
y bioqumica incluyendo las pruebas de Gluconato y Voges Proskauer, as como la determinacin de la capacidad
proteoltica, amiloltica y lipoltica, fueron realizadas utilizando suspensiones microbianas a partir de cultivos activos
por mtodos morfolgicos y bioqumicos.De las 25 muestras evaluadas, se lograron aislar 250 cepas de bacterias
lcticas, de las cuales el 80% correspondi al gnero Lactobacillus y 20% a Pediococcus. Por otro lado, de 73
cepas de Lactobacillus, se lograron identificar 47.9% de Lactobacillus plantarum, 21.9% de Lactobacillus
alimentarius, 13.7% de Lactobacillus casei, 8.2% de Lactobacillus brevis, 5.5% de Lactobacillus reuterii y 2.8%
de Lactobacillus fermentum. 127 cepas no se identificaron. Por primera vez se logr comprobar la presencia de
bacterias lcticas en el 100% de muestras de Tocosh, lo que estara indicando su activa participacin en el
proceso de fermentacin como cultivo iniciador y/o controlador biolgico.
Palabras clave: biodiversidad, bacterias lcticas, Tocosh.
Financiamiento: CSI-UNMSM
SELECCIN DE CEPAS NATIVAS DE BACTERIAS LCTICAS CON CAPACIDAD ANTAGONISTA PARA SU USO
EN LA FERMENTACIN DE TOCOSH
E. Quillama, S. Dvila, A. Medina, C. Avalos y D. Paredes
Facultad de Ciencias Biolgicas. UNMSM, Lima - Per
El Tocosh de papa, constituye una fuente potencial de bacterias lcticas con capacidad fermentativa y antagonis-
ta. Muchos de sus productos metablicos como los cidos orgnicos, perxido de hidrgeno, reuterina y bacteriocinas,
contribuyen con la preservacin de los alimentos. Por este motivo, nos propusimos seleccionar nuevas cepas de
bacterias lcticas autctonas con capacidad antimicrobiana. Los cultivos puros de bacterias lcticas preseleccionadas
de Tocosh, se reactivaron en el medio Man Rogosa Sharpe pH 6.5 a 30 C por 24 horas en condiciones de
microaerofilia. La bsqueda de cepas lcticas productoras de sustancias antimicrobianas y cepas sensibles a los
compuestos en mencin, se realiz mediante las tcnicas de bicapa y difusin en agar, enfrentndolas unas contra
otras en grupos de 10. De 50 cepas de bacterias lcticas aisladas, se seleccionaron nueve cepas de Lactobacillus
productoras de sustancias antimicrobianas, correspondiendo siete a Lactobacillus plantarum (TBIII.a, Tsh.pa, Pa.1,
Pa.2, Pa.3, Pa.7, Pa.8), dos a Lactobacillus casei (Tsh1.a, Tsh1.e), y una cepa a Pediococcus sp (Tsh1.A).
Adems, se seleccionaron 10 cepas sensibles (Tsh1.C, TB.I2, TBIII.2a, Tsh4.a, Tsh20.a1, Tsh20.a2, Tsh20.a3,
Tsh20.a4, Tsh2.c, TshIII.b). Se concluye que Lactobacillus plantarum Tsh.pa y Tsh.IIIa son las mejores cepas, por
mostrar mayor capacidad antagonista frente a cepas taxonmicamente afines y con posibilidades de ser utilizadas
como bioconservantes de alimentos.
Palabras clave:Bacterias lcticas, antagonismo, Tocosh
Financiamiento: CSI-UNMSM
81
DETECCIN DE CLONES POSITIVOS DE MICROSATLITE TRI-NUCLETIDO EN EL GENOMA DE LA CONCHA
DE ABANICO PERUANA (Argopecten purpuratus)
G. Snchez
1,2
, V. Mendoza
1
, S. Barahona
2
, D. Ore
1,2
, R. Quiroz
2
y R. Fujita
1
1
Centro de Gentica y Biologa Molecular (USMP)
2
Laboratorio de Artes y Mtodos de Pesca Facultad de C. Biolgicas, UNMSM
gustavosanchezsilva@gmail.com
La especie Argopecten purpuratus concha de abanico peruana es uno de los recursos de exportacin ms
importantes para la economa peruana. Durante aos, la extraccin del recurso para cultivo, se ha realizado
indiscriminadamente, sin tener conocimiento acerca de su diversidad gentica y del flujo poblacional. El anlisis
comparativo de los marcadores microsatlites sirve para estudiar la gentica y dinmica poblacional. El objetivo del
trabajo fue encontrar microsatlites con motivo CAT en el genoma de A. purpuratus que puedan servir para estudios
de biodiversidad. Para esto, se realiz la extraccin de ADN genmico de un ejemplar de A. purpuratus con el mtodo
TNESurea (Asahida et al., 1996). Se gener una librera genmica de PCR enriquecida utilizando una sonda
biotinilada que posee (CAT)
7
mediante captura con perlas magnticas con estreptavidina (Fleisher & Loew, 1995).
Los segmentos seleccionados fueron clonados con el kit TA-Cloning (Promega). Se realiz una transformacin
bacteriana electrocompetente, se ordenaron 137 clones y analizados mediante una primera hibridacin en placa con
el kit Biotin Chromogenic Detection (Fermentas) para detectar clones positivos (motivos (CAT)
n
repetidos). Se extrajo
ADN plasmdico de los clones positivos y fueron digeridos con la enzima de restriccin EcoRI. Finalmente se
observ presencia del inserto en geles de agarosa al 1.5% y se realiz una hibridacin en gel para corroborar la
presencia de insertos positivos. Se detectaron 103 clones positivos (CAT)
n
. Concluyendo, este mtodo permite
obtener clones positivos con motivos (CAT)
n
. que servirn para confeccionar primers (cebadores) para PCR que
deben ser evaluados en poblaciones para determinar polimorfismo.
Palabras Clave: marcadores microsatlites, Argopecten purpuratus, biodiversidad
Financiamiento: Convenio FINCYT- Proyecto de Inters Nacional PIN-060
EVALUACIN DE LA INMUNOGENICIDAD DE LA ENZIMA SIMILAR A TROMBINA DEL VENENO DE LA
SERPIENTE PERUANA Bothrops atrox
G. Sandoval
1
, I. Espinoza
2
, E. Rodrguez
1
, D. Vivas
1
, J. Mendoza
1
, F. Huari
1
y A.Yarlequ
1
1
Laboratorio Biologa Molecular-Facultad Ciencias Biolgicas-UNMSM
2
Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrin-UNMSM
Dentro de los efectos patolgicos producidos por el veneno de B. atrox, el ms notable, es la incoagulabilidad de la
sangre, debido a la accin contrapuesta de enzimas coagulantes y anticoagulantes; de ellas las ms importantes es
la enzima similar a trombina (EST) caracterizada previamente. Por tanto, el objetivo de este trabajo fue realizar una
evaluacin inmunognica de la EST del veneno de B. atrox y evaluar su reactividad contra los venenos de las
principales serpientes venenosas del pas. Se inmunizaron conejos albinos (2,5 Kg) con 150 g de la EST purificada
basndose en protocolos estandarizados en este laboratorio; una vez obtenido el suero hiperinmune anti EST, se
analizaron los patrones de reactividad inmunolgica del suero contra la enzima purificada del mismo veneno y los
venenos totales Bothrops atrox, Bothrops brazili, Lachesis muta y Crotalus durissus mediante la tcnica de ELISA.
Como resultado del estudio se obtuvo al finalizar el protocolo de inmunizacin, un suero anti EST con un ttulo de 64
000. Por otro lado, los anticuerpos producidos reaccionaron de forma cruzada con los venenos completos de B.
atrox (9,9%) y B. brazili (9,6%) mientras que, en menor intensidad con los de L. muta y C. durissus, con valores de
5,1% y 4,8%, respectivamente. Esto demuestra el potencial inmunognico de esta protena as como su baja
reactividad cruzada con otros venenos de serpientes peruanas, por lo que se concluye que la EST es una candidata
para la elaboracin de un kit de diagnstico rpido y especfico de un envenenamiento ofdico.
Palabras clave: Antiveneno, inmunogenicidad, ELISA, veneno, serpiente.
Financiamiento: Fundacin Instituto Hiplito Unanue.
82
USO DE LA TCNICA DE DOBLE TINCIN PARA DETECTAR LA REACCIN ACROSOMAL Y VIABILIDAD DE
ESPERMATOZOIDES DE ALPACA (Vicugna pacos)
M. Surez, I. Mancisidor y M. Valdivia
Laboratorio de Fisiologa de la Reproduccin Animal, Facultad de Ciencias Biolgicas, UNMSM.
suarez3m@gmail.com, iselams@gmail.com
En mamferos, la capacitacin seguida de la reaccin acrosomal de espermatozoides son pasos esenciales antes
del xito de la fertilizacin y formacin del cigoto. El estado de la integridad del acrosomal puede ser utilizado como
un marcador adecuado para ver la capacidad de fertilizacin de los espermatozoides. El objetivo fue evaluar el
estado acrosomal y viabilidad de espermatozoides epidimarios de alpaca post descongelacin. El mtodo de
criopreservacin fue por congelamiento lento utilizando el medio dilutor TES-TRIS-YOLK. Se trabajo con 25 indivi-
duos, las muestras fueron evaluadas pre y post-congelacin mediante la tcnica Doble Tincin, en la que se utilizo
el azul de tripano al 2% para identificar el porcentaje de espermatozoides vivos y el colorante giemsa al 20% para
identificar el estado acrosomal. Se evaluaron cuatro patrones de coloracin, espermatozoides vivos con acrosoma
intacto (no teido en la parte post-ecuatorial y regin acrosomal fucsia), espermatozoides vivos sin acrosoma
(regin post-ecuatorial y regin acrosomal no teidas); espermatozoides muertos con acrosoma intacto (regin
post-ecuatorial azul y regin acrosomal fucsia), y espermatozoides muertos sin acrosoma (regin post-ecuatorial
azul y regin acrosomal no teida). Este estudio mostr que el proceso de criopreservacin disminuy el porcentaje
de espermatozoides vivos con acrosoma intacto, as mismo se detect un aumento significativo de espermatozoides
muertos con acrosoma intacto post-descongelacin. Se concluye que la tcnica de doble tincin es un mtodo
eficiente para detectar la integridad acrosomal y viabilidad en espermatozoides de alpaca.
Palabras clave: Criopreservacin, espermatozoides de alpaca, Doble tincin, integridad acrosomal y viabilidad.
Financiamiento: Autofinanciado con el apoyo del Laboratorio de Fisiologa de la Reproduccin Animal.
OBTENCIN DE PLANTAS TRANSGNICAS DE CAMOTE (Ipomoea batatas (L) Lam.) CV. JEWEL MEDIANTE
Agrobacterium tumefaciens
A. Sumi, M. Untiveros y J. Kreuze
Centro Internacional de la Papa (CIP)
El camote es uno de los cultivos ms importantes del mundo por su valor alimenticio y su contenido de pro-vitamina
A, pero su produccin est afectada debido a diferentes enfermedades. La enfermedad viral del camote (SPVD,
Sweet Potato Virus Disease), afecta ms severamente a este cultivo, y es el resultado de la interaccin sinrgica
entre Sweetpotato Feathery Mottle Virus (SPFMV) y Sweetpotato Chlorotic Stunt Virus (SPCSV), reduciendo su
rendimiento hasta en un 98%. El presente trabajo fue realizado con la finalidad de obtener lneas transformadas de
camote que puedan ser resistentes a SPVD. Se realiz la transformacin gentica de Ipomoea batata (camote)
cultivar Jewel, mediada por Agrobacterium tumefaciens que portaba un plsmido con secuencias repetidas del
virus SPCSV (regin 3UTR del RNA1) que inducira silenciamiento gnico a nivel postranscripcional (PTGS) como
mecanismo de defensa en la planta frente a SPVD, y la regeneracin fue mediante organognesis. Posteriormente,
se efectuaron anlisis moleculares mediante pruebas de PCR, dot blot, para determinar la presencia del transgen
dentro del genoma de los regenerantes obtenidos, y Northern blot para la presencia de miRNA que puedan inducir
resistencia a SPVD. La eficiencia de regeneracin fue 1,7% y la eficiencia de transformacin fue 7,6%. Se obtuvie-
ron 11 lneas confirmadas con la presencia de los transgenes dentro de sus genomas. Concluyendo, con la
metodologa de transformacin y regeneracin ensayada, fue posible obtener lneas transgnicas de Ipomoea
batatas (L.) Lam cv. Jewel, que sern posteriormente evaluadas para determinar su resistencia a SPVD.
Financiamiento: Centro Internacional de la Papa
83
ACTIVIDAD HIDROCARBONOCLSTICA DE CEPAS PSICRTROFAS AISLADAS EN LA ANTRTIDA
P. Tern, D. Martnez, C. Meza, E. Castaeda, B. Misari , T.Tabushi, S. Gutirrez y F. Merino
Laboratorio de Microbiologa y Biotecnologa microbiana. FCB. UNMSM
abilio1007@gmail.com
El objetivo del presente trabajo fue caracterizar bacterias hidrocarbonoclsticas en un cepario aislado de la
ensenada Mackellar, Baha del Almirantazgo,Isla Rey Jorge en la Antrtida. Se trabajaron 73 viales de cepario
colectados de un aislamiento primario, a partir de muestras de agua de mar y suelo en la Estacin Machu Picchu Base
peruana en el Continente Antrtico. Las cepas fueron reactivadas mediante dos pasajes sucesivos en caldo
Nutricio e incubadas a 25C durante 36 horas y a 10C durante 72 horas; posteriormente se verific la pureza
mediante coloracin Gram y cultivo en Agar Tripticasa Soya (TSA). Para probar la actividad hidrocarbonoclstica,
se seleccionaron 20 cepas que fueron sembradas en Caldo Millis con petrleo como nica fuente carbonada y se
incubaron a 25 y 10 C durante 15 -21 dias. Se lograron obtener 140 microorganismos a 25C, de los cuales 124 eran
bacterias y 16 hongos. A 10C lograron crecer 64 bacterias y un hongo. Al analizar la tolerancia al frio pudimos
observar que de las 124 bacterias solo 64 lograron crecer a 10C y a 25C y las restantes solo a 25C. De los 16
hongos aislados solo uno pudo crecer a 10C y el resto lo haca a 25C. Las 20 cepas seleccionadas presentaron
capacidad hidrocarbonoclstica,evidenciado en el crecimiento en el medio Millis con petrleo con una turbidez d0.5
Mac Farland. De acuerdo a los resultados parciales, podemos afirmar que hay presencia de microorganismos
hidrocarbonoclsticos psicrotolerantes en las muestras obtenidas de la Antrtida.
Palabras clave: psicrtrofas, oleoflicas, hidrocarburos de petrleo, degradacin
Financiamiento: Proyecto: 121001271
ESTUDIO QUMICO DE HOJAS DE Ipomoea batatas CAMOTE, POSIBILIDADES DE INDUSTRIALIZACION
G. Toms, J. Montoya, M. Villalobos, H. Santos, J. Huamn y M. Guerrero
Laboratorio de Productos Naturales- Dpto de Qumica Orgnica-Facultad de Qumica e Ingeniera Qumica- Universi-
dad Nacional Mayor de San Marcos
gtomasc@unmsm.edu.pe
Se ha establecido que la especie Ipomoea batatas camote, batata, boniato, papa dulce fue domesticado
primero en Amrica Central, lo cual significa que fue cultivado desde la poca prehispnica. El camote ha ido
cobrando cada vez mayor espacio en la alimentacin humana, puesto que principalmente estuvo destinado a la
alimentacin de cerdos. Hoy en da el camote se distribuye por todo el Per en Costa, Sierra y Selva, en altitudes
que van desde el nivel del mar hasta los 2500 msnm. El objetivo del estudio de las hojas de camote es conocer los
principios activos de las hojas de camote los cuales seran responsables de cortar, aliviar o curar enfermedades.
Por el mtodo de Cain-Bohlmann modificado se determin la presencia de: triterpenoides, saponinas esteroidales,
flavonoides, flavonas, leucoantocianidina, cumarina fija y tanino flavnico. Igualmente con las hojas de camote se
puede elaborar harinas, jarabes, almidn, sirve de forraje para el ganado, por la presencia de taninos se le atribuye
propiedades antibactericidas, y las saponinas para elaborar jabones biodegradables, adems tiene potencial econ-
mico ya que se usa para consumo humano, tiene propiedades medicinales, porque cura hinchazones, infecciones
de la piel, caracha, vrices, reumatismo, picadura de insectos como chinches y escorpiones. Se continuar con el
estudio con la finalidad de separar estos metabolitos secundarios, y purificarlos para determinar sus estructuras
qumicas, con la finalidad de procurar su sntesis y proponer modificaciones estructurales en busca de una mayor
actividad y dar a conocer a la humanidad los resultados de estos estudios.
Palabras clave: Ipomoea batatas, triterpenos, taninos, cumarinas, flavonas.
Financiamiento: Facultad de Qumica e Ingeniera Qumica-UNMSM.
84
SCREENING FITOQUMICO DE HOJAS DE Passiflora mollisima BAILEY TUMBO
G. Toms, M. Espritu, J. Sulca, C. Ticona, J. Huamn y M. Guerrero
Laboratorio de Productos Naturales- Dpto de Qumica Orgnica-Facultad de Qumica e Ingeniera Qumica- Universi-
dad Nacional Mayor de San Marcos
gtomasc@unmsm.edu.pe
La especie Passiflora mollisima B. tumbo pertenece a la familia Passifloraceae y es una planta leosa, trepadora,
pubescente, con tricomas rectos u ondulados, amarillos, verdosos o incoloros. Su raz es muy superficial y fibrosa.
El tallo es cilndrico y verde. Se le atribuye propiedades como: cicatrizante, antiespasmdico, diafortico, diurtico,
contra las infecciones urinarias, hipotensor, y con efectos depresores sobre el sistema nervioso central. Las hojas,
motivo de estudio son tri, tetra o penta lobuladas, alternas, coriceas, elpticas u oblongo elpticas, sus bordes son
aserrados, dentados u ondulados. La planta fue recolectada en la ciudad de Huancayo-Junn a 3500msnm pero
tambin esta distribuda en Moquegua, Huancavelica y Apurmac. El objetivo de esta investigacin es determinar la
presencia de metabolitos secundarios mediante un screening fitoqumico de las hojas de tumbo con la finalidad de
establecer a qu compuestos se debe su actividad farmacolgica tradicional. Aplicando el mtodo de Cain-Bohlmann
modificado se determin la presencia de: saponinas, alcaloides (indlicos) en gran cantidad, taninos, cumarinas
fijas (fluorescencia), flavonoides y triterpenos; ausencia de antocianinas, betalanas y quinonas. En las hojas la
presencia de taninos confirma la actividad astringente, antibacteriana, antisptica y cicatrizante. Por la gran cantidad
de alcaloides que se encuentra se determina su actividad diafortico (excesiva sudoracin), diurtica, sedante,
tranquilizante, calmante y contra el insomnio. Se continuar con el estudio para determinar su capacidad antioxidante
debido a la presencia de flavonoides y cumarinas.
Palabras clave: Passiflora mollisima, taninos, cumarinas, diafortico.
Financiamiento: Facultad de Qumica e Ingeniera Qumica-UNMSM
EFECTO DEL SUPLEMENTO DE Lepidium meyenii MACA SOBRE LA FERTILIDAD DE RATONES
MACHOS, DOMINANCIA LETAL Y DESARROLLO EMBRIONARIO
M. Valdivia
1
, V. Cruz
2
, J. Vsquez
1
, J. Gonzales
1
, R. Lpez
1
y S. Cisneros
1
1
2
Facultad de Ingeniera Elctrica y Electrnica FIEE-UNMSM
marthavaldiviacuya@gmail.com,
vcruzor@gmail.com
Lepidium meyenii Walp (maca), es empleada tradicionalmente por sus propiedades, entre las que destacan la
mejora en el desempeo sexual en humanos, ratas y ratones, adems de mejorar la espermatognesis. Sin embargo,
se desconoce los efectos de la ingesta de maca en la fertilidad de los machos y el posterior desarrollo embrionario.
Ratones machos de la cepa Balb C de 10 semanas de edad se dividieron en dos grupos, Grupo Control GC (n=8)
recibi agua destilada y el grupo tratado con Maca GM (n=8) en dosis de 666mg/kg peso, ambas soluciones fueron
suministradas diariamente durante 35 das (un ciclo espermatognico). Posteriormente los machos se cruzaron con
hembras vrgenes de 6-7 semanas de edad, las hembras preadas se sacrificaron al tercer da de gestacin para
evaluar migracin, desarrollo y calidad embrionaria. En ambos grupos, GC y GM, el 100% (8/8) de machos prearon
hembras y produjeron 13 y 14 camadas respectivamente. El transporte embrionario no fue alterado, el porcentaje de
embriones encontrados en oviducto en GC (91.15 4.47) no vari significativamente respecto a GM (82.14 7.54)
(p0.05), tampoco se encontraron diferencias significativas en el porcentaje de embriones en estado de mrula y
ocho clulas en GC (82.00 5.25) con GM (86.86 5.02) (p0.05), ni en el porcentaje de embriones de buena calidad
en GC (87.54 3.64) con GM (88.29 3.88) (p0.05). En conclusin, el suplemento de maca durante un ciclo
espermatognico no afecta la fertilidad de ratones macho, ni el posterior desarrollo embrionario.
Palabras clave: Embrin, fertilidad, maca, ratn.
Financiamiento: VRI-UNMSM. Proyecto Multidisciplinario RR N 00902-R-11.
85
LA EXPOSICIN DURANTE DOS CICLOS ESPERMATOGNICOS A ONDAS ELECTROMAGNTICAS DE
FRECUENCIA EXTREMADAMENTE BAJA NO DISMINUYE LA CALIDAD ESPERMTICA EN RATONES
M. Valdivia
1
,

V. Cruz
2
,

J. Vsquez
1
, J. Gonzales
1
, J. Tafur
2
, A. Varela
3
, R. Lpez
1
, J. Gonzales
1
y S. Cisneros
1
1
marthavaldiviacuya@gmail.com
La interaccin de los campos electromagnticos de frecuencia extremadamente baja (ELF-EMF) con los humanos es
cotidiana y en la actualidad sus efectos sobre la fertilidad masculina permanecen controversiales. Nuestro objetivo
fue evaluar si la exposicin durante uno y dos ciclos espermatognicos (duracin: 35 y 70 das, respectivamente)
a ELF-EMF altera el sistema reproductor y calidad espermtica. Ratones machos de la cepa Balb C de 10 semanas
de edad se dividieron en 4 grupos, Los Grupos Controles: GC35 (n=8) y GC70 (n=7) no estuvieron expuestos a ELF-
EMF durante 35 y 70 das y los grupos tratados GC35 (n=8) y GT70 (n=8) se expusieron a ELF-EMF, a una frecuencia
de 50Hz y 500uT de intensidad, 22 horas diarias. Posteriormente, los animales fueron eutanizados, registrndose el
peso promedio de: ambos testculos y epiddimos as como la movilidad y concentracin espermtica. Los pesos de
ambos testculos (0.1308 0.0081; 0.1201 0.0061; 0.1240 0.0073; 0.1246 0.0079) y epiddimos (0.0434
0.0032; 0.0420 0.0023; 0.0442 0.0021; 0.0438 0.0026), no variaron significativamente entre GC35, GC70, GT35
y GT70 (p>0.05), respectivamente. Los valores fisiolgicos de movilidad progresiva (32.61 4.24; 28.79 5.35;
34.98 7.55; 30.92 6.54) y concentracin espermtica (18.5 2.89; 23.11 3.83; 20.06 7.92; 23.33 3.11) no
fueron afectados entre GC35, GC70, GT35 y GT70 (p>0.05), respectivamente. Concluyendo, la exposicin a ELF-
EMF durante uno dos ciclos espermatognicos no ejerce daos sobre la calidad espermtica en ratones.
Palabras clave: Calidad espermtica, concentracin espermtica, ELF-EMF, movilidad espermtica, ratn
Fuente de financiamiento: VRI-UNMSM. Proyecto Multidisciplinario RR N 00902-R-11.
EFECTO DE Lepidium meyenii MACA DURANTE DOS CICLOS ESPERMATOGNICOS SOBRE LA
FERTILIDAD DE RATONES MACHO Y EL DESARROLLO EMBRIONARIO PRE IMPLANTACIONAL
J. Vsquez , R Lpez , J. Gonzales, S. Cisneros y M. Valdivia
1
jvcbioreprod@gmail.com
A la maca Lepidium meyenii Walp, se le atribuyen propiedades benficas sobre el desempeo sexual en
humanos, ratas y ratones, y tambin que potencia la espermatognesis. Sin embargo, es desconocido si estos
efectos atribuidos durante la espermatognesis ejercen accin sobre la fertilidad de machos y el desarrollo
embrionario pre implantacional. Ratones machos de la cepa Balb C de ocho semanas de edad se dividieron en: Grupo
Control GC (n=9) recibi agua destilada y grupo GM (n=11) recibi maca a 666mg/kg peso, ambas soluciones fueron
suministradas durante 70 das (dos ciclos espermatognicos). Posteriormente los machos se cruzaron con hembras
vrgenes de seis semanas de edad, las hembras preadas se sacrificaron al cuarto de da de gestacin para evaluar
desarrollo, calidad embrionaria y grado de blastulacin. Del GC, el 88.8% (8/9) prearon hembras y produjeron 14
camadas y del GM 81.8 % (9/11) prearon hembras y produjeron 16 camadas. En los embriones obtenidos, no se
encontraron diferencias significativas en el porcentaje de blastocistos en GC (72.86 5.85) con GM (83.53 3.77)
(p0.05), tampoco en el porcentaje de embriones de buena calidad en GC (91.47 5.66) con GM (93.78 3.08)
(p0.05), respecto al porcentaje de embriones con blastocele mayor al 50% del tamao del embrin en GC (49.23
9.33) se encontr menor cantidad que en GM (68.01 6.41), sin ser significativo (p0.05). Concluyendo, la ingesta
de maca durante dos ciclos espermatognicos no altera la fertilidad de ratones macho, ni el desarrollo embrionario
pre implantacional.
Palabras clave: Embrin, fertilidad, maca, ratn.
Financiamiento: Laboratorio de Fisiologa de la Reproduccin (LFRA), FCB - UNMSM
86
EVALUACIN DE LA CALIDAD OVOCITARIA MEDIANTE LA CAPACIDAD DE DESARROLLO EMBRIONARIO
PRE IMPLANTACIONAL IN VIVO EN RATONAS SUMINISTRADAS CON EL EXTRACTO ACUOSO DE Lepidium
meyenii MACA
J. Vsquez
1
, J. Gonzales
1
y M. Valdivia
1
jvcbioreprod@gmail.com
Lepidium meyenii Walp maca, es empleada tradicionalmente por sus propiedades, destacando la mejora en el
desempeo sexual en humanos, ratas y ratones; sin embargo, se desconoce qu efectos ejerce sobre el ovocito.
El objetivo de este estudio fue investigar el efecto del suplemento del extracto acuoso de maca sobre la calidad
ovocitaria evaluando la capacidad de desarrollo embrionario in vivo. Se utilizaron dos grupos de ratonas Balb C
vrgenes de 6 semanas de edad, Grupo Control GC (n=11) recibi agua destilada y el grupo GM (n=10) recibi maca
a 666mg/kg peso durante 25 das, abarcando aproximadamente cinco ciclos estrales. Posteriormente se cruzaron
con machos de fertilidad comprobada de 12 semanas de edad y luego de confirmar cpula mediante la visualizacin
del tapn vaginal (da 1 de preez), se continu proporcionando maca por 4 das ms (periodo pre implantacional).
Las hembras fueron eutanizadas 90 horas post-cpula; se evalu el desarrollo y calidad de los embriones, as como
el grado de blastulacin. Respecto al desarrollo embrionario no se encontraron diferencias significativas en el
porcentaje de blastocistos en GC (78.82 6.54) con GM (80.40 5.82) (p0.05), tampoco en el porcentaje de
embriones de buena calidad en GC (92.09 3.55) con GM (93.80 3.43) (p0.05), ni en el porcentaje de embriones
con blastocele mayor al 50% del tamao del embrin en GC (63.27 7.24) con GM (63.40 10.86) (p0.05).
Concluimos que el suplemento con el extracto acuoso de maca no ejerce efecto beneficioso ni daino en la calidad
ovocitaria.
Palabras clave: Calidad ovocitaria, embrin, Lepidium meyenii, ratn.
Financiamiento: Recursos propios LFRA UNMSM.
DEGLICOSILACIN Y ANLISIS FUNCIONAL DE LA BARNETOBINA, UN PRINCIPIO COAGULANTE DEL
VENENO DE LA SERPIENTE PERUANA Bothrops barnetti
D.Vivas
1
, E. F. Snchez
2
,

G. Sandoval
1
, F.Lazo
1
, J. Mendoza
1
, M. Palomino
1
y A. Yarlequ
1
1
Laboratorio Biologa Molecular-Facultad de Ciencias Biolgicas-UNMSM
2
Fundacin Ezequiel Dias Brasil
La Glicosilacin de protenas es el evento post traduccional ms predominante en las clulas eucariotas, conside-
rndose que este proceso est asociado a la estabilidad, proteccin de la protena y evasin del sistema inmunolgico.
En el presente estudio, investigamos el rol de los carbohidratos de una glicoprotena con actividad coagulante
purificada previamente y denominada barnetobina la cual fue obtenida del veneno Bothrops barnetti, serpiente que
habita en las tres regiones naturales de la zona norte del Per. Para ello, se prepararon pre incubados por separado
a diferentes intervalos de tiempo (horas) de la enzima con N-glicosidasa y O-glicosidasa recombinantes de origen
comercial y luego las muestras se analizaron por PAGE-SDS para establecer los cambios en el peso molecular de
la barnetobina. Los resultados mostraron que la protena en estudio presenta N-glicosilacin lo cual constituye el
48% de la masa molecular lo que se evidencia por el descenso del peso molecular original. As tambin, la N-
deglicosilacin bajo condiciones no denaturantes mostr que la enzima sin sus carbohidratos reduce considerable-
mente su actividad enzimtica sobre el sustrato BApNA; as como, su estabilidad funcional cuando fue sometida a
diferentes pHs y temperaturas. La enzima deglicosilada tampoco fue reconocida por el suero antiofdico. Concluyen-
do, nuestros resultados indican que los carbohidratos asociados a la enzima modulan su funcionalidad as como su
antigenicidad.
Palabras Clave: Bothrops barnetti, glicoprotena, glicosilacin, antigenicidad.
Financiamiento: CONCYTEC-FUNED de Brasil-UNMSM.
87
OBTENCIN Y CARACTERIZACIN DEL CDNA DE BARNETOBINA PRESENTE EN EL VENENO DE LA
SERPIENTE Bothrops barnetti
D. Vivas
1
, R. Inga
1
, F. Lazo
1
, E. Rodrguez
1
, J. Crdenas
2
, G. Sandoval
1
y A. Yarlequ
1
1
Laboratorio Biologa Molecular- Facultad Ciencias Biolgicas-UNMSM;
2
Laboratorio Bioqumica- Facultad Ciencias de
la Salud-UNC
Los estudios a nivel gentico y molecular de los principios activos del veneno de serpientes, involucra el sacrificio
de los animales para la obtencin de las glndulas venenosas; sin embrago, es posible obtener cDNA a partir del
veneno total y con ello explorar la carga gentica que codifican tales componentes. El objetivo del presente trabajo
ha sido iniciar la caracterizacin molecular de la Barnetobina, protena coagulante del veneno de B. barnetti a partir
de su cDNA. Para ello, se obtuvieron muestras de veneno fresco de B. barnetti e inmediatamente se procedi a
separar el RNA total y mediante kits especficos con transcriptasa reversa se obtuvo el cDNA. Posteriormente se
amplific el gen mediante uso de iniciadores en base a secuencias de genes semejantes obtenidas del GenBank,
realizndose luego el procedimiento convencional de PCR. El producto obtenido fue analizado en geles de agarosa
y secuenciado en compaas especializadas. Como resultado se obtuvo una secuencia nucleotdica de 720 pb la
cual tena identidad y semejanza con otras serino proteasas ofdicas coagulantes. Las secuencia nucleotdica
codifica una protena madura de 233 aminocidos e inclua el pptido de activacin y parte del pptido seal propio
de este grupo de enzimas. Se concluye que el procedimiento utilizado es idneo para obtener y amplificar el gen de
Barnetobina.
Palabras clave: veneno, coagulacin, enzima, cDNA, serpiente.
Financiamiento: CONCYTEC-UNMSM.
IDENTIFICACIN Y SEPARACIN PARCIAL DE UNA INSECTOTOXINA Y UNA PROTEASA DEL VENENO DE
Tityus footei (SCORPIONES: BUTHIDAE)
J. Zeballos, L.Velsquez, C. Pantigoso, M. Paredes y E. Escobar
Laboratorio de Bioqumica de Toxinas Naturales. Facultad de Ciencias Biolgicas. UNMSM.
eescobarg@unmsm.edu.pe
Los venenos de escorpiones poseen toxinas que daan el sistema nervioso de insectos y mamferos; adicionalmente
tambin poseen algunas enzimas.
El estudio de estos principios es importante por el potencial uso que algunos de ellos pueden tener, como por ejemplo
las insectotoxinas en el control biolgico de plagas.
En este trabajo se estudi el veneno de escorpin de la especie Tityus footei con el objetivo de separar y determinar
preliminarmente algunos de sus componentes proteicos. Se utilizaron especmenes adultos de ambos sexos, cap-
turados en las provincias de Quispicanchis y Urubamba (Cuzco). El veneno fue obtenido por estimulacin elctrica.
Para la separacin de las protenas, fueron disueltos 27 mg de veneno en 2 ml de buffer acetato de amonio 0,05M pH
7 y se aplicaron a una columna de CM Sephadex C-25 (1,1x17cm). Las protenas retenidas en el gel fueron eluidas
con el mismo buffer conteniendo NaCl 0,2M y NaCl 0,6M.Se obtuvieron siete picos de protena (del I al VII). La
actividad de insectotoxina, ensayada sobre grillos, se encontr en el veneno crudo (12.9 g) y el pico V (1.83 g).
La actividad proteoltica fue ensayada sobre casena y evaluada cualitativamente por PAGE-SDS, encontrndose la
actividad tanto en el veneno crudo (12,9 g ) como en el pico I (4,19 g). En conclusin, el veneno de T. footei se ha
separado en siete picos proteicos, encontrndose actividad de insectotoxina en el pico V y actividad proteoltica en
el pico I.
Palabras clave: insectotoxina, proteasa, veneno, escorpin
Financiamiento: Consejo Superior de Investigaciones

BIOTECNOLOGÍA

Încărcat de

Informații document

Descriere originală:

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

BIOTECNOLOGÍA

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Seccin II

S-ar putea să vă placă și