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UNIDAD3Virologa|

PRCTICA
NMERO3
ESTRUCTURASDELEMBRINDEPOLLO
YSUSVASDEINOCULACIN
PRCTICA NMERO 3
ESTRUCTURAS DEL EMBRIN DE POLLO Y SUS VAS DE INOCULACIN



PRCTICA NMERO 3 |
UNIDAD 3 - VIROLOGA


Los primeros investigadores en
utilizar embriones de pollo son, Rous
y Murphy en 1911 que los utilizaron
por primera vez, usando la
membrana corioalantoidea del
embrin de pollo para el estudio de
los virus. En 1931 Goodpasture
logr introducir el embrin de pollo
para cultivar virus. Los primeros
trabajos fueron para aislar e
identificar al virus influenza y luego
se extendi para estudios de otros
virus y bacterias intracelulares como
la Viruela, Herpes simplex,
Rickettsias y Chlamidias. Por lo que
el embrin de pollo es uno de los
mtodos ms antiguos y eficientes,
para cultivar virus, y otros
microorganismos intracelulares.
Esta tcnica es til para el
aislamiento e identificacin de
agentes etiolgicos de
enfermedades virales.
El embrin tambin se utiliza para
cultivar virus para obtener vacunas
contra; la Rabia, el Newcastle o la
Influenza.
Por todo lo anterior se hace
indispensable conocer las partes de
un embrin de pollo y sus vas de
inoculacin.


Cuadro 3.1 Relacin de infecciones
virales y la va de inoculacin

MEMBRANA VIRUS SIGNOS DE
CRECIMIENTO
Saco vitelino Herpes
simple
Muerte
Coriolantoies Herpes
simple
Poxvirus
Sarcoma
de Rous
Varicela
Muerte
Pstulas
Pstulas
Alantoides Influenza Hemaglutinacin
Amnitica Parotiditis
Virus de
la gripe
Muerte
INTRODUCCIN
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ESTRUCTURAS DEL EMBRIN DE POLLO Y SUS VAS DE INOCULACIN



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OBJETIVOS:
1. Adquirir el conocimiento para el correcto manejo de la tcnica de
inoculacin de embrin de pollo por las vas ms utilizadas.
2. El alumno conocer las diversas partes del embrin de pollo de 9 das
de incubacin.

MATERIAL POR EQUIPO:
Un ovoscopio.
Cinco embriones de pollo de 9 a 10 das.
Algodn, 100 g
Cinco jeringas de un mL
Cuatro agujas del nmero 27.
Una aguja del nmero 22 larga.
Azul de metileno, 10 mL
Un lpiz de nmero 2.
Pinzas de diseccin.
Cinco cajas de Petri.
PRCTICA NMERO 3
ESTRUCTURAS DEL EMBRIN DE POLLO Y SUS VAS DE INOCULACIN



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A. Estructura Normal:

1. Ilumine con el ovoscopio el embrin de
pollo, identificando y marcando la
cmara de aire y la mancha ocular.
2. Corte el cascarn a la altura de la
cmara de aire, procurando que no
queden bordes filosos.
3. Deposite el contenido del embrin en
una caja de Petri.
4. Proceda a identificar las estructuras del
embrin de pollo de 9 das.








Figura.3.1 Partes del embrin de pollo
B. Inoculacin de Membrana
Corioalantoidea.

1. Ilumine con el ovoscopio el embrin y
marcar la cmara de aire.
2. Divida imaginariamente al embrin en
tres partes, al final del primer tercio
seale el punto de inoculacin entre los
vasos sanguneos.
3. Perfore sobre la cmara de aire y el
punto de inoculacin.
4. Succione con una boquilla por el orificio
de la cmara de aire. Se debe formar
una cmara de ms menos un cm de
dimetro.
5. Con una aguja del 27 corta depositar
0.1 mL del colorante.

** Cuide de no perforar la membrana
corioalantoidea **

C. Inoculacin en Saco Vitelino.

1. Ilumine con el ovoscopio el embrin y
marque la cmara de aire.
2. Coloque el embrin en plano horizontal
y localice el saco vitelino (mancha
obscura y densa).
3. Introduzca una aguja del 22 larga
verticalmente a travs de la cmara de
aire y depositar 0.1 mL de colorante.
D. Inoculacin de la Cavidad
Alantoidea.

1. Ilumine con el ovoscopio el embrin y
marcar la cmara de aire y marcar un
punto en la cima.
2. Aproximadamente 5 mm por abajo de
la cmara de aire localice una zona
libre de vasos y del lado opuesto al
embrin marque el punto de
inoculacin.
MTODO
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DIAGRAMA DE FLUJO
3. Perfore los puntos marcados e inocule
0.1 mL del colorante con una aguja del
27 corta.
4. La inoculacin se puede realizar
tambin a travs de la cmara de aire
con una aguja del 22 larga.
E. Inoculacin en Cavidad
Amnitica.

1. Ilumine con el ovoscopio el embrin,
marcar la cmara de aire y marcar un
punto en la cima.
2. Marque el punto de inoculacin
exactamente donde se ve el embrin
(localice las manchas oculares).
3. Ilumine el embrin e inocule con la
aguja del 22,0.1 mL del colorante.
NOTAS:
1. Despus de cada inoculacin ilumine al
embrin y haga sus observaciones.
2. Despus de cada inoculacin vace el
embrin en una caja de Petri y haga
sus observaciones.




A. Estructura Normal:










B. Inoculacin de Membrana
Corioalantoidea.
















C. Inoculacin en Saco Vitelino.


















Iluminar embrin
de pollo y cortar
cascaron en la
cmara de aire.
Depositar
embrin en caja
petri e identificar
estructuras.
Iluminar embrin
de pollo y
marcar cmara
de aire.
Inocular
colorante
perforando por
la cmara de
aire.
Inocular
colorante
perforando por
la cmara de
aire.
Iluminar embrin
de pollo
colocndolo en
plano horizontal
y marcar cmara
de aire.
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D. Inoculacin de la Cavidad
Alantoidea.


















E. Inoculacin en Cavida Amnitica.



















1. Qu otros tipos de cultivos se cuentan
para desarrollar virus?
2. Qu ventajas o desventajas tiene el
uso de un embrin de pollo?
3. Qu tipos de virus se pueden inocular
en cada una de las partes del embrin
de pollo?
4. Qu efectos causa la inoculacin de
un virus en un embrin de pollo?
5. Esquematizar y explicar los ciclos de
replicacin viral.


1. Stuart-Harris C, Shild G, Oxford J .
Influenza: the viruses and the disease.
2
a
London: Editorial Arnold London,
1985.
2. Kendal AP, Cate TR. Increases
sensitivity and reduced specificity of
hemagglutination inhibition tests with
ether treated influenza b/
Singapore/222/79 J Clin Microbiol
1983; 18: 930-934.
3. Harmon MW, Rota PA, Walls HH,
Kendal AP. Antibody responses in
human to influenza type b host cell
derived variant following vaccination
with standard (eggs-derivaded)
vaccine or natural infection. J Clin
Microbiol 1988;26: 333-337.



CUESTIONARIO
Iluminar embrin
de pollo y
marcar cmara
de aire y zona
libre de vasos.
Inocular
colorante
perforando los
puntos
marcados.
Iluminar embrin
de pollo, marcar
cmara de aire y
un punto donde
se encuentre el
embrin
(manchas
oculares).
Inocular
colorante.
REFERENCIAS