*Biotecnologa vegetal

Historia de la industria forestal: Se inici en EEUU donde los colonos comenzaron a cortar bosques
y se dieron cuenta que tenan que caminar mucho para sacar rboles, asi que comenzaron a
plantar bosques con fines de abastecer al pueblo.
Hbridos comerciales: Si tengo un rbol con cierto rasgo y otro con uno que tambin me interesa,
empiezo a cruzarlos sexualmente, obtenindose hbridos
rboles plus: Elegir el rbol ms apto (rasgo que yo quiero)
rboles clonados: Un individuo se propagaba en el laboratorio donde en teora todos deberan ser
iguales
*Demanda de madera
La demanda de madera proyectada es que aumentar a medida que aumente la poblacin, ya que
se le est dando nuevos usos.
*Industria forestal en Chile
La mayor parte es pino (73%), luego eucalipto (19%) y otras especies (8%) (lamo)
Poda de pinos: Papel son 8 aos y madera 12 aos. Tipo de pino depende del lugar donde se
encuentre, dependiendo de la altura donde este. Por ejemplo el lamo absorve mucho el agua lo
cual sirvi para secar vegas en el sur.
*Biotecnologa forestal
1- Programa de mejoramiento gentico: Como hacemos que el rbol rinda ms (salmn, pollo,
llamas, alpacas, etc) Estn concentrados en aumentar la ganancia gentica. (Escogiendo mejor los
rboles, mejores podas, etc)
2- Propagacin de rboles plus: Tomo un rbol que me gusta y lo propago en el laboratorio
3- Modificacin gentica: Cuando ya no est la opcin de mejorarlo a travs de una serie de
seleccin natural, se modifica geneticamente.
-Modificacin lignina/celulosa
-Control de la floracin (sobre todo con transgnicos)
-Resistencia a plagas/insectos
-Resistencias a herbicidas
-Crecimiento y rectitud (no mod gen)
-Absorcin de nutrientes (no mod gen)
-Tolerancia a fro/sal/deshidratacin

*Plantaciones modificadas geneticamente
Chile, H <2%
Canad, Estados Unidos, Australia, Nueva Zelanda, Sudfrica, Uruguay, Argentina (chilenos
compraron suelo argentino). Se prefieren zonas que no esten en partes muy tropicales, cercanas
hacia los polos
*Programa de mejoramiento gentico
Qu busca el programa de mejoramiento gentico? Busca, que de un rbol en la naturaleza sea
sin tantas hojas y ramas alto y recto; ya que la primera troza es la que ms dinero vale. La idea de
esto es la obtencin de un rbol plus y que de este de obtengan y planten muchos clones. CMPC y
Arauco producen ms de 60 millones de rboles al ao de esta manera.
Se puede hacer mediante 2 maneras en el laboratorio:
Organognesis: Trabajo de laboratorio in vitro, se toma una parte de la planta y al hacerla pasar
por distintos medios de cultivo con distintos nutrientes y hormonas, logramos que se vaya
rediferenciando. Se basa en el hecho que todas las clulas son totipotenciales, todas tiene en su
genoma todos los genes pero se encuentran especializados (clula de piel y que se regenere una
persona). Cuando yo tomo un trozo de planta (brote porque son tejidos jvenes y tienen millones
de clulas), se coloca en una placa este brote y, en todos los organismos que estn formados por
muchas clulas existe algo que se llama Variacin somaclonal si yo tengo 4 clulas, no todas se
comportan iguales, donde cada una de ellas da lugar a una planta que no todas sern iguales ya
que alguna de ellas tendr variacin somaclonal. Resultado que puede variar en homogeneidad,
las que son distintas es un bajo porcentaje pero a nivel industrial, es considerable la cantidad de
rboles que sean diferentes. Aqu se desarrolla un RGANO.
Embriognesis: Se desarrolla un EMBRIN. Se utiliza principalmente en pinos, ya que el pino
cuando es polinizado al interior de la semilla se tienen varias clulas fecundadas, que deben
ocupar cierto espacio, aqu empieza una competencia en donde solo 1 sobrevive y el resto muere.
En una etapa inmadura de desarrollo se corta la punta y el medio de cultivo hace que salgan todas,
por lo tanto en teora se estara partiendo de la que gan, la que se multiplica y madura
artificialmente y que empiece a dar lugar a un embrin, y como se parti de 1 SOLA clula el 100%
de las plantas van a ser homogneas. Disminuy la variabilidad casi totalmente, ya que pueden
haber ciertas excepciones.
Monocultivo gentico: Por muy bueno que sea, nunca es bueno para todo ya que si hay una plaga
afectar a todos los individuos por igual, por lo que se perdera mucho. Lo que se hace es que se
estn plantando 15 a 120 clones de lo mejor que existe, evitando el monocultivo.




*Modificacin gentica
a) Transformacin mediante biobalstica: Dispararle a una planta (tejido), con una partcula de
tungsteno o de oro recubierta por DNA con el gen de nuestro inters, funciona a alta presin.
Causan heridas en el tejido, y al lado de estas el DNA se va a liberar y va a transformar este tejido.
Se puede usar en plantas vivas
COSTO= Muy caro, por el oro y la pistola. Eficiencia menor (cuantas plantas transformadas se
obtienen)
b) Transformacin mediante agrobacterium: Esta bacteria genera un callo, que contiene a esta
bacteria, es un transformador gentico que existe en la naturaleza. Lo que hace es tomar un gen (3
genes) transforma las clulas al interior de la planta, hace que las clulas de la planta generen los
nuetrientes que la bacteria necesita para sobrevivir, el callo va creciendo bajo la corteza.
Se tom a agrobacterium, le sacaron esos 3 genes que codifican para los nutrientes que esta
necesita, y a esta se le pusieron otros genes para que transforme plantas. Arabidopsis, lamo, etc.
Para transformar hay que tener en cuenta el tamao del genoma; en Arabidopsis tenemos un
genoma bastante pequeo, pino el nmero es mucho mayor. Desventaja: Cuando se intenta
transformar tenemos dificultades en tener una eficiente transformacin.
Para saber cuales son las clulas transformadas se utiliza un antibitico o un gen reportero. Si es
con antibitico todas las clulas que no poseen nuestro gen van a morir excepto la que est
transformada
COSTO= Menor y ms eficiente
*Mejorar y extender la eficacia de los mtodos de modificacin gentica:
-Mejorar eficiencia de transformacin: Arabidopsis 5% de transformacin (de 100 plantas obtengo
5 transformadas), en lamo 0.5 y 1%
-Reducir costos involucrados
-Extender a varios genotipos: Por ejemplo solo un tipo de lamo se deja transformar, lo malo es
que este tipo no es el que tiene la mejor madera
-Estabilidad de la expresin gnica a travs del tiempo: Soya transgnica se corta en una
temportada, si se genera una planta resistente a un herbicida se espera que sea resistente
siempre.
-Optimizar proceso para reducir efectos del silenciamiento de genes: A veces cuando yo
transformo una planta obtengo el efecto contrario, se debe al nmero de copias que se insertan
en un organismo transgnico; si se inserta 1 copia del gen lo ms probable es que funcione, sobre
3 puede ser posible obtener el efecto de silenciamiento de genes, no se pueden regular cuantas
copias se insertan, hay que revisar cuantas copias hay.
-Desarrollar tcnicas que permitan la transferencia de ms de 2 genes a la vez, posiblemente un
trozo de cromosoma

*Planta modelo: Populus sp. lamo
Ventajas: Rpido crecimiento, fcil propagacin vegetativa, hibridacin interespecfica
(cruzo lamos con rasgos distintos), transformacin, genoma pequeo. Lo corto y luego
crece de nuevo. Se usa como biocombustible. nica leosa que se transforma
Qu es lo que le interesa a la industria forestal arreglar?
Como la madera est constituida, porque en el proceso de fabricacin de pulpa y celulosa cuando
se toma un tronco y pasa por una etapa donde tenemos que separar la lignina de la celulosa, los 2
principales componentes que tiene la madera. La lignina le otorga rigidez a la madera y la celulosa
que se utiliza para papel. Para separar estos componentes existen 2 mtodos:
Mtodo mecnico Implica el uso de rodillos gigantes, el problema es que no se logra aislar toda
la lignina de la celulosa y genera un papel de mala calidad (papel craft por ejemplo)
Mtodo qumico Se obtiene papel de buena calidad (como el de los libros). Para realizar este
proceso se utilizan altsimas cantidades de cido sulfrico. Es por esto que las plantas de celulosa
estn cerca de un afluente de agua, para eliminar luego el cido sulfrico.
Lo que le interesa a la industria es disminuir la cantidad de lignina para obtener papel de buena
calidad, asi se obtiene un menor gasto de cido sulfrico menor contaminacin.
Para entender como modificar la lignina hay que entender como se forma, este proceso es muy
complejo modificarla an ms. En un trabajo se logr disminuir la cantidad de lignina en un rbol;
en un mutante se dieron cuenta que al cortar un pino la madera era de otro color el cual tena
menos lignina y provocaba un cambio de color en la madera.
Mediante cruzamientos, se obtuvo un rbol con menos lignina (-52%) y ms celulosa (30%), se
dieron cuenta que el rbol tiene que compensar las cantidades. La lignina al estar en menor
cantidad provoca que el rbol pierda rigidez y comience a doblarse, adems de otro efecto en la
diminucin de la lignina es con los animales que pastorean, la vaca al rascarse hiere al rbol e
ingresan los patgenos, pjaros pueden tambin romper sus ramas, las hojas estaran susceptibles
al ataque de patgenos, races al tener menos lignina estn propensas a tener problemas con la
flora y fauna de esta parte.
*Biocombustibles
Hay personas que comen el maz, por lo tanto la gente se opone a usar este tipo de plantas para la
generacin de biocombustibles.
Por qu hay tanto esfuerzo en generar biocombustibles? Porque las plantas son la mquina
perfecta, a travs de una hoja que absorve luz solar (gratis), CO
2
(abundante y daino) y un poco
de agua, nos entrega oxgeno y glucosa. La idea es pasar de una tecnologa petro a una bio, es
decir que la hoja nos entregue el combustible que necesitamos. Las industrian generan CO
2
constantemente, el cual si no es absorbido se produce el calentamiento. Plantar mas plantas para
que el CO
2
lo absrovan y al cortar estas plantas se recicle.

*Factores de conversin de energa para producir etanol
Si yo tengo un salmn y le doy un kilo de comida espero que ese salmn crezca 1 kilo
Maz= gasto 1.5 y obtengo 0.9
Lignocelulosa= 1-2
*Componentes de la madera
Celulosa 41%
Hemicelulosa 28% BIOETANOL= Celulosa, hidrlisis enzimtica, glucosa, fermentacin con
levaduras, etanol
Las levaduras aun no fermetan tan eficazmente la glucosa a etanol, se estn haciendo levaduras
transgen.
Lignina 27%
Resina 4% BIODISEL

*Resistencia a plagas
Resistencia a hongos: Afectan a los pinos, Dothistroma septospora. Para arreglar esto no fue
necesario utilizar ingeniera gentica, simplemente podaron las ramas mas bajas para que el
hongo no afecte las partes bajas y no mantenga la hmedad.
Polilla del brote: La larva de la polilla se comen los brotes tiernos, los brotes apicales conducen
el crecimiento hacia arriba, si la larva se comen estos, los arboles solo empiezan a sacar ramas
hacia los lados. Se trabajo con tecnologa BT, Bacillus thuringiensis que es una bacteria que vive en
el suelo aca en Chile y en todo el mundo, genera un toxina BT, cuando una lepidoptera consume
esta toxina se muere.
Cuando se est experimentando con lneas transgnicas evala siempre varios individuos de cada
lnea, en teora todos deberan ser iguales pero depende del n de copias insertadas del gen.
Tambin depende del efecto insercional que si yo tengo 1 gen no da lo mismo en que parte del
genoma se inserte. En los pinos BT se colocaron larvas en cada uno de los pinos, y se midieron
cuantas larvas estaban sobreviviendo (pino radiatta). En la que se moran la mayor parte de las
larvas y se clon en el laboratorio.
Cisgenia: Trata de modificar un gen interno de tal manera de que no se genere la mal imagen de
los transgnicos
Biocontroladores: Hay insectos que se alimentan de las pupas y de los huevos de la polilla del
brote. Si se acaba el alimento luego se acaban las avispas.


*Resistencia a herbicidas
Monsanto gener primero un herbicida, que interrumpe la va del shikimato, en el cual de un
zucar se generan aminocidos aromticos. Las plantas tienen que generar los aminocidos, por lo
que con un herbicida la planta no los puede generar y se muere. Monsanto tom Canola (planta) y
le coloc una va alternativa (by-pass), por lo que ahora yo puedo agregar Glifosato, y la planta
puede sobrevivir igual a la aplicacin del herbicida gracias a esta ruta alternativa. Este mismo
proceso se est aplicando al cultivo del lamo.
Con este proceso, no crece pasto abajo por lo que no hay mayor competencia por los nutrientes
tampoco.
*Floracin
Para que no pueda haber reproduccin sexual de transgnicos. Polen pino 10 a 20 km desde su
fuente. Que produzca flor femenina pero que no produzca polen. El transgen no genera polen.
(Arabidopsis) estas secuencias se tranfirieron a pinos, evitando que el polen transgen contamine
otras fuentes de plantas.
*Fitorremediacin
Remediacin: Implica la eliminacin de txicos asociados a metales pesados de diversas fuentes.
La fitorremediacin es la remediacin a travs de plantas
El lamo se est utilizando para la fitoacumulacin o fitoextraccin. La identidad que ms financia
esta investigacin en estados unidos, por la armada ya que sus suelos tienen plomo que es donde
guardaban sus armas.
De mercurio, una planta lamo transgen volatiliza el mercurio desde el suelo, lo que elimina es
muy muy bajas concentraciones.
*Madera in vitro
Se tom un trozo de tejido y mediante el uso de hormonas lograron que este tejido se comience a
diferenciar a formar toda la estructura de la madera, formando traqueidas (PINO). As se genera
una madera 100% de celulosa.
El proceso an es lento, pero est en curso an.
*Madera libre de nudos (Clearwood)
Se gener en Chile. La madera de primera casi no tiene nudos, la de segunda tiene nudos ciegos si
lo aprieto no pasa nada queda fijo, la de tercera tiene otro tipo de nudos donde se aprietan y salen
se rompen. Los nudos son los lugares donde van las ramas. Se van cortando las ramas y se les
ponen pastas para la cicatrizacin. Esto genera un mayo valor agregado a la madera.
Agathis australis (Kauri, araucaria): Este rbol se poda solo a medida que aumenta su altura, hace
autoabsicin. Proviene de nueva zelanda y los neozelandeses acordaron que est protegido.