Integrantes: Caizapanta Estalin Grupo N: 3R Cobos David Naranjo Diego Informe Nro.: Fecha:
1. TEMA: TECNICAS DE TINCION PARTE II
2. OBJETIVOS:
a. OBJETIVO GENERAL: 3. Identificar las diversas estructuras de los microorganismos y sus caractersticas mediante diversos tipos de tincin. a. OBJETIVOS ESPECFICOS: Utilizar la tincin para poder reconocer las diversas estructuras de un microorganismo esporas y capsulas. Observar clulas vivas y si existe movimiento.
1. REPORTE DE RESULTADOS:
Resultados de las observaciones
TIPO DE ESPORAS Microorganismo: a)Descripcin del cultivo: (lquido, slidos, edad del cultivo)
Bacilus cereus Bacilus subtilis Cultivo: Solido (MacKonkey) Cultivo: Solido (Manitol) Edad del cultivo: Edad del cultivo: Menos de 24 horas Menos de 24 horas
b) Forma: (Cocos o Bacilos) En forma bacilar En forma de cocos c) Forma de agrupacin: Agrupamiento en empalizada lineal Agrupamiento en racimos TINCIN CPSULA Klebsiella neumoniae a)Descripcin del cultivo: Cultivo: lquido Edad del cultivo: Menos de 24 horas
B) Coloracin de la cpsula despus de la tincin.
Gota Pendiente E. coli S. aureus a)Descripcin de la observacin: Los microorganismos estn en movimiento hacia la periferia de la gota Los microorganismos no se mueven.
4. DISCUSIONES: Las esporas son estructuras muy resistentes que no se tien con facilidad por eso para poder observarlas se deben usar mtodos de tincin especiales son muy difciles de localizar y se puede observar que las diferentes especies generan diferentes esporas las cuales pueden ser en el centro, en los extremos o intermedia. Para poder observar las capsulas se observo con un mtodo de tincin negativa usando tinta china ya que es muy difcil teir estas estructuras y con esta tcnica se puede ver como es la forma de la capsula. Para ver si existe movilidad se usa diversos mtodos el cual puede ser el de la gota pendiente en el cual se puede apreciar si existe o no movilidad en los microorganismos como la Escherichia coli que tiene movimiento ya que posee flagelos en una forma peritrica y el staphylococcus aureus que no se mueve.
5. CONCLUSIONES:
Se diferencio claramente de una tincin estructural y una diferencial puesto que la tincin estructural como su nombre lo indica determina las estructuras de los microorganismos, esta tincin incluye la visualizacin de cpsulas, endoesporas, flagelos etc. La tincin diferencial consisten en la aplicacin de dos colorantes que contrastan en su intensidad o color y un paso intermedio que provoca una respuesta diferente entre microorganismos distintos o entre determinadas clulas dentro de una poblacin.
Aunque las bacterias no aparecen muy diferentes del medio que las rodea, difieren mucho de mecanismos qumicos esta diferencia qumica es lo que permite distinguir las bacterias por tincin, pues generalmente, el colorante reacciona con la clula bacteriana, pero no reacciona con su medio exterior.
En la presente prctica se pudo observar claramente las estructuras predispuestas por la gua, as con la conformidad de ver cada estructura vista en el microscopio.
6. CUESTIONARIO
EXPLIQUE EL FUNDAMENTO DE LA TINCIN DE ESPORAS. Las endoesporas son estructuras de resistencia a condiciones adversas como: altas temperaturas, radiaciones UV, etc. Son estructuras de resistencia, con tres gruesas cubiertas protectoras, las cuales la hacen impermeables a los colorantes. Debido a esto, para teir las endoesporas es nec6esario aplicar el colorante con calor para ablandar sus capas protectoras. Adems, el colorante vaporizado penetra, los micro-poros que se forman con el calor, ms fcilmente que en estado lquido. Al enfriar y lavar el portaobjeto con agua, los micro-poros se cierran quedando el colorante (verde malaquita), atrapado dentro de las endoesporas. Finalmente, en esta tincin se usa un colorante de contraste, la safranina, que tie la clula vegetativa de color rojo, contrastando con las endoesporas que se observan de color verde.
EXPLIQUE EL FUNDAMENTO DE LA TINCIN DE CPSULAS. Las bacterias que presentan una capa externa a la pared se las denomina capsulas, compuesta de azucares y protenas, esta estructura no es vital para la bacteria as que es posible que bajo condiciones ambientales genere la capsula o en otras no. La presencia de la capsula dificulta la fagocitosis de las bacterias constituyndola como un factor de virulencia. Esta tincin se conoce como tincin negativa ya que tie la el fondo de la preparacin mas no el microorganismo, aclarando esto no se puede decir que es una tincin ya que no fija al microorganismo. Sino que prepara al microorganismo, su realizacin es rpida y sencilla. Consiste en colocar la muestra hmeda sobre el porta-objetos y gotear tinta china, la tinta china cubre la preparacin a excepcin de las capsulas. El microscopio se puede observar negro el fondo y los microorganismos con capsula sin tincin.
EXPLIQUE EL FUNDAMENTO DE LA TINCIN DE FLAGELOS. Los flagelos se tien con mucha dificultad puesto que tienden a retraerse con facilidad si la tincin no es adecuada no se podr captarlos, de ah que se requiere de tcnicas especiales y especificas apoyadas en la afinidad que los flagelos presentan frente a ciertas anilinas para su tincin. 7. Bibliografa: http://www.csi- csif.es/andalucia/modules/mod_ense/revista/pdf/Numero_11/ROSARIO_ALORS_1.pd f http://www.izt.uam.mx/ceu/publicaciones/MMBG/files/manual_microbiologia_gene ral.pdf http://www.unavarra.es/genmic/microgral/manual%20practicas%20micagral.pdf