Qumico Farmacobilogo Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Manual del Laboratorio de Farmacologa (emestre %&&)*+ Q. ermelinda de la Cru! "ur#n Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Prctica No. 1 Experimentacin con Animales de Laboratorio Objetivo $l alumno se familiari!ar# con los m,todos em-leados -ara la sujecin e identificacin de los animales utili!ados en la -r#ctica de laboratorio. Introduccin $l bienestar de los animales utili!ados en investigacin es un tema de inter,s . en muc/os -ases se /an desarrollado le.es . regulaciones 0ue aseguran ese bienestar. (e /an buscado alternativas -ara sustituir el uso de animales de laboratorio1 como -or ejem-lo simulacin con com-utadoras1 modelos in-vitro1 cultivos de rganos . tejidos1 . las modernas t,cnicas biotecnolgicas. (in embargo e2isten todava limitantes de estas alternativas -ara algunos temas1 sobre todo en lo 0ue se refiere a farmacologa. 3or lo 0ue en algunos casos es indis-ensable la utili!acin de animales1 es-ecialmente el de ti-o roedor. "eben considerarse entonces algunas medidas -ara su mantenimiento en lugares a-ro-iados 4bioterios56 en donde recibir#n alimentacin . cuidados es-eciales de acuerdo a las caractersticas -ro-ias de la es-ecie a 0ue -ertenecen1 como son7 alimentacin1 jaulas de contencin1 control de enfermedades1 re-roduccin1 condiciones ambientales1 etc. Notas: 1. Se suspender en orma deinitiva de las sesiones de laboratorio al alumno !ue se sorprenda molestando a los animales "bajo nin#una circunstancia se deber $acer surir al animal% el maestro responsable deber indicar la manera en !ue $a de ser sacriicado% en caso necesario% as& como su manejo durante la experimentacin'. (. En caso de mordedura la persona deber acudir inmediatamente al )*+AI para recibir inmuni,acin contra t-tanos% as& como recibir atencin preventiva% aplica lo mismo para excoriaciones $ec$as por material !ue $a estado en contacto con los animales. El animal a#resor deber ser puesto en observacin durante un per&odo no menor de 1. d&as% el incidente debe ser reportado tanto al instructor como al responsable del bioterio. /rocedimiento +. (e /ar# un recorrido -or las instalaciones en forma ordenada -ara identificar las diferentes salas e2istentes. %. $l instructor mostrar# la forma correcta en 0ue se sujeta a cada animal de acuerdo a su es-ecie 4conejo1 ratn1 rata . -erro5. 8. Anote todas sus observaciones. Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo 0esultados +. $labore un informe escrito de las actividades reali!adas durante el recorrido as como de los siguientes datos7 a. Forma de sujetar a cada animal. b. $n caso de re0uerirse la administracin de una sustancia1 cual es el -rocedimiento mas adecuado en cada caso 4sujecin . administracin59 c. Las caractersticas de la cama 0ue utili!an cada uno de ellos. d. $l ti-o de alimentacin 4incluida agua . alimento slido5. e. Las condiciones ambientales -timas 0ue deben e2istir en un bioterio. f. Las diferentes formas de identificacin 0ue e2isten 4marcaje5. %. $labore sus conclusiones. )uestionario )omplementario +. Cual es la dosis de -entobarbital utili!ada -or va intra-eritoneal -ara anestesiar al ratn1 rata1 -erro . conejo9 %. Cual es el volumen m#2imo de una solucin farmacolgica 0ue -uede administrarse a las es-ecies mencionadas en la -regunta numero uno1 -or va I:1 IM1 I31 (C . ;ral9 $laboro7 Q. ermelinda de la Cru! "ur#n Fec/a7 $nero 8& de %&&' Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Prctica No. 2 1ariabilidad 2iol#ica Objetivo $l alumno diferenciar# los diferentes as-ectos 0ue -ueden variar el efecto de un f#rmaco . a-licarlos en los regimenes de dosificacin. Introduccin Los valores de las magnitudes biolgicas no son constantes7 varan en un mismo individuo . entre los individuos. $ste fenmeno1 se conoce como variabilidad biolgica. $sta variabilidad se divide en variabilidad fisiolgica1 causada -or las fluctuaciones metablicas . otros -rocesos fisiolgicos1 variabilidad -atolgica1 causada -or las enfermedades1 . variabilidad iatrog,nica1 causada -rinci-almente -or los tratamientos farmacolgicos. $s im-ortante subra.ar 0ue la variabilidad biolgica es un fenmeno absolutamente inde-endiente de la variabilidad debida a los -rocedimientos de medida1 conocida como variabilidad metrolgica. Las variaciones iatrog,nicas est#n causadas1 estrictamente1 -or medicamentos o actos tera-,uticos o diagnsticos. (in embargo1 no son los medicamentos los <nicos 2enobiticos 0ue -ueden -rovocar la variacin del valor de alguna magnitud biolgica6 los 2enobiticos de uso m#s generali!ado en nuestra sociedad = cafena1 nicotina . etanol= . las drogas de abuso tambi,n -ueden /acerlo. As -ues1 la biologa . la -r#ctica clnica indican 0ue no /a. dos sujetos iguales1 la farmacologa demuestra 0ue la misma dosis de f#rmaco -rovoca una intensidad de res-uesta diferente en diferentes -acientes. $sta diversidad1 en -arte a la farmacocin,tica 4diferente absorcin1 metabolismo . e2crecin del f#rmaco5 . a la farmacodin#mia 4interaccin f#rmaco*rece-tor51 -or causas del ti-o gen,tico1 ambientales o del curso clnico de las enfermedades 4agudas1 crnicas1 etc.51 /ace 0ue la medicin de los fenmenos biolgicos vare a causa de estos factores ingobernables o accidentales. Los valores obtenidos ser#n diferentes1 sin embargo cada valor se a-ro2ima mas o menos a un valor medio1 -or lo 0ue -uede decirse 0ue ese conjunto de valores se distribu.e en torno a la media 4>5. Cuando ma.or sea el n<mero total de medidas1 el valor de la media se acercara al valor verdadero del fenmeno de referencia . la distribucin de esas medidas ser# sim,trica -or0ue las variaciones -ositivas o negativas se e0uilibran mutuamente. $l valor verdadero lo es tericamente en un conjunto infinitamente grande o universo1 -ero ante la im-osibilidad de obtener ese conjunto o universo1 -odemos obtener un valor cercano al verdadero si estudiamos una -arte de tal universo1 o sea efectuar un n<mero finito de medidas1 e2-erimentos u observaciones1 0ue constitu.en lo 0ue se llama una ?muestra? coleccin de ensa.o o tanteo. Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo /rocedimiento +. @ombrar dos voluntarios -or e0ui-o1 siguiendo los criterios de inclusin establecidos. %. "eterminar la tem-eratura cor-oral basal de cada individuo. 8. Administrar una dosis de as-irina de A&&mg a cada uno . determinar la tem-eratura en los siguientes intervalos de tiem-o7 A1 +&1 +A1 %&1 %A1 8& . B& minutos -ostadministracin. C. Concentrar en una tabla los resultados de cada e0ui-o. A. Con los datos de todo el gru-o determinar las variables7 media 4>5 . desviacin est#ndar 4D5 a cada intervalo de tiem-o. B. acer una gr#fica con los resultados1 con un margen de E una desviacin est#ndar. 0esultados +. Anota tus observaciones durante el e2-erimento. %. $labora tus conclusiones con base en los resultados obtenidos . los -lasmados en la gr#fica. )uestionario )omplementario +. Que es la desviacin est#ndar. %. Cuales son los factores m#s comunes 0ue interfieren en la res-uesta de un f#rmaco. 8. Como -uede interferir la variabilidad biolgica en un r,gimen tera-,utico. $laboro7 Q. ermelinda de la Cru! "ur#n Fec/a7 Agosto %+ de %&&B Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Prctica No. 3 1&as de Administracin Objetivo $l alumno ser# ca-a! de observar la influencia de las diferentes vas de administracin1 utili!ando animales de laboratorio . una solucin 0ue -ermitir# a-reciar la llegada de los com-uestos administrados a diferentes rganos . tejidos. Introduccin $2isten diversos medios -or los 0ue el medicamento -uede introducirse en el organismo. $s -osible 0ue un mismo medicamento est, -re-arado -ara utili!ar m#s de una va1 del mismo modo 0ue e2isten f#rmacos diseFados -ara acceder al organismo -or un <nico camino. $2isten varias vas de administracin -ara los medicamentos como la oral1 sublingual1 bucal1 t-ica1 transd,rmica1 in/alacin1 instilacin ocular1 rectal1 vaginal o -arenteral 4subcut#nea1 intramuscular1 intravenosa5. Cada medicamento est# -re-arado -ara ser administrado -or va determinada . 0ue ejer!a su accin de la forma m#s conveniente. 3ara cada va de administracin e2isten diferentes formas farmac,uticas. 3or ejem-lo1 -ara la va oral se -re-aran c#-sulas1 com-rimidos1 com-rimidos recubiertos1 com-rimidos efervescentes1 com-rimidos masticables1 sus-ensiones1 soluciones1 jarabes1 eli2ires1 etc. La eleccin de-ende de diversas variables. Algunas son7 el ti-o de medicamento1 es decir1 sus -articularidades. La absorcin del mismo7 en 0u, lugar del organismo 4estmago1 duodeno1 -iel1 etc.5 conviene 0ue se -rodu!ca . a 0u, velocidad. $l -ro-io -aciente6 /a. 0ue tener en cuenta los condicionantes fisiolgicos 4como el estado de su a-arato digestivo1 necesidad de una accin m#s o menos r#-ida1 etc.5 . condicionantes -sicolgicos 4es frecuente 0ue a los niFos les entre mejor un jarabe 0ue una grageas5. /rocedimiento +. 3esar las ratas . calcular -ara cada una el volumen de anest,sico a administrar de acuerdo al -eso del animal . a una dosis -onderada de +AmgG+&&gr de -eso. %. Anestesiar las ratas administrando el volumen total de anest,sico -or va intra-eritoneal 4I351 dejar re-osar +& minutos. 8. Administrar a!ul de metileno al &.&+H1 utili!ar una rata -ara cada va de administracin de acuerdo a la siguiente tabla7 Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo 1&a de Administracin 1olumen a Administrar "ml' Intravenosa 4I:5 &.A Intramuscular 4IM5 +*% Intra-eritoneal 4I35 A*+& (ubcut#nea 4(C5 A*+& ;ral 43;5 +*% C. "ejar re-osar %& minutos . /acer la diseccin de cavidad abdominal. A. Llevar a cabo una e2-loracin fsica interna . -or observacin buscar a!ul de metileno en rganos . tejidos. B. Anotar tus datos en la tabla de resultados. )uestionario )omplementario +. Cuales son las -rinci-ales vas de administracin de f#rmacos9 %. $2-li0ue ventajas . desventajas en la tera-,utica con f#rmacos en las siguientes vas de administracin7 oral1 sublingual1 rectal1 in/alacin1 subcut#nea1 intravenosa1 intratecal . t-ica. 8. "efine administracin -arenteral . menciona todos los ti-os 0ue cono!cas. C. Mencione dos f#rmacos 0ue se a-li0uen -or cada va de administracin. $laboro7 Q. ermelinda de la Cru! "ur#n Fec/a7 Agosto %+ de %&&B Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Prctica No. 4 3rmacos Anti$istam&nicos Objetivo A trav,s de la a-licacin d,rmica de /istamina el alumno observar# . medir# el efecto de f#rmacos anti/istamnicos. Introduccin Los anti/istamnicos /an sido usados durante los <ltimos A& aFos . se /an convertido en unos de los medicamentos de ma.or -rescri-cin en M,2ico. La denominacin actual es Ianta#onistas de los receptores de la $istaminaJ1 su accin consiste en evitar el efecto de la /istamina en los diferentes tejidos del cuer-o. La /istamina o b*aminoetilimida!ol fue aislada -or ve! -rimera en +K&' -or Lindaus . :ogt6 en +K+&1 "ale. . LaidloM estudiaron su efecto biolgico . descubrieron 0ue estimulaban a diversos m<sculos lisos. $n +KC&1 se desarroll el -rimer anti/istamnico antagonista + -ara uso en el /umano7 fenoben!amina con buenos resultados. $n +KCC se comerciali!a el maleato de -irilamina6 en +KCB1 la difen/idramina . tri-elenamina .1 en +KCK1 la clorfeniramina. Nodos estos anti/istamnicos + /an sido denominados de I-rimera generacin1 cl#sicos o sedantesJ -or ser los -rimeros. $n los <ltimos +A aFos se /an sinteti!ado anti/istamnicos con alto -otencial in/ibitorio6 a ,stos se les denomina anti/istamnicos + de Isegunda generacinJ. Con el advenimiento de nuevas t,cnicas de investigacin se fueron descubriendo nuevos rece-tores de la /istamina7 el rece-tor + en +KBB1 el rece-tor % en +K'%1 el rece-tor 8 en +K)8 . el rece-tor C en %&&&. Cuando la /istamina es liberada de mastocitos1 basfilos1 neuronas /istamin,rgicas u otras c,lulas1 se debe unir a cierto rece-tor de /istamina7 +1 %1 8 o C. Los anti/istamnicos + de -rimera . segunda generacin antagoni!an al rece-tor +1 utili!andose en la clnica contra rinitis1 urticaria1 lagrimeo1 o como antial,rgicos. Los antagonistas del rece-tor % se utili!an en la clnica -ara reducir la secrecin de #cido g#strico en el tratamiento del -aciente con enfermedad #cido -,-tica. asta el momento no e2isten antagonistas del rece-tor 8 . C -ara uso clnico6 sin embargo1 dentro del cam-o de estudio de estos rece-tores se /a descubierto 0ue -artici-an1 res-ectivamente1 en la regulacin de la neurotransmisin . en -rocesos inflamatorios. +aterial Balan!a granataria istamina Lancetas est,riles Agua est,ril Ootero Alco/ol Pegla Algodn Matra! volum,trico de +&cc Medicamentos anti/istamnicos Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Soluciones istamina al +&H /rocedimiento +. Formacin de e0ui-os de trabajo. %. 3re-aracin de soluciones. 3esar e2actamente + gr de /istamina. "isolver en 8cc de agua est,ril. $n Matra! volum,trico llevar a un volumen de +&cc con agua est,ril. 8. Administracin de medicamentos anti/istamnicos. @ombrar un voluntario -or e0ui-o . administrarle el medicamento anti/istamnico 0ue seFale el instructor. @ombrar un e0ui-o -ara 0ue el voluntario sea el Iindividuo controlJ. Administrar cada medicamento de acuerdo a la dosis usual del anti/istamnico 0ue se trate. C. Administracin de /istamina. "es-u,s de transcurrida + /ora de administrado el medicamentos anti/istamnico1 asear con una torunda alco/olada el antebra!o del voluntario. Colocar una gotita de /istamina al +&H sobre la -iel1 evitar 0ue esta se derrame. (obre la gota de /istamina1 -inc/ar con una lanceta est,ril. Nomar lecturas del di#metro del /alo de reaccin a la /istamina 4inflamacin .Go enrojecimiento5 a los +A1 8&1 CA1 B&1 K& . +%& minutos -ost a-licacin de la /istamina. A. Con el individuo control -roceder igual 0ue en C6 -ero sin /aber tomado alg<n f#rmaco anti/istamnico. B. $laborar una tabla con los resultados de todo el gru-o. '. $labora tus conclusiones. )uestionario )omplementario +. Menciona los ti-os de rece-tores /istamnicos91 con 0ue efectos est#n com<nmente relacionados en nuestro cuer-o9 %. Que efecto4s5 tiene la /istamina en nuestro cuer-o9 8. Cual es la frmula desarrollada de la /istamina9 C. Que ti-o de enlaces 0umicos -uede formar con su rece-tor biolgico9 A. Menciona los f#rmacos anti/istamnicos 0ue se utili!an con fines tera-,uticos9 B. Menciona al menos un medicamento -ara cada f#rmaco de los mencionados en la -regunta anterior. $laboro7 Q. ermelinda de la Cru! "ur#n Fec/a7 $nero 8& de %&&' Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Prctica No. 5 4istribucin de 3rmacos Objetivo 3or medio del an#lisis cualitativo . cuantitativo determinar la distribucin de un f#rmaco en los diferentes com-artimentos del organismo. Introduccin La distribucin es un -roceso farmacocin,tica en el 0ue tiene lugar el trans-orte del f#rmaco desde su lugar de absorcin /asta el rgano donde va a ejercer su efecto. @o obstante1 es im-ortante considerar 0ue una ve! absorbido el f#rmaco es distribuido no solo /asta el sitio donde va a actuar1 si no 0ue al mismo tiem-o llega a otros rganos en donde va a ser eliminado1 metaboli!ado o acumulado. La ma.ora de los f#rmacos se unen a -rotenas -lasm#ticas -ara circular en el organismo. La alb<mina es la -rinci-al de estas -rotenas acarreadoras6 tiene dos sitios de unin -ara f#rmacos1 uno -ara f#rmacos de car#cter #cido1 . otro -ara f#rmacos de car#cter b#sico. Los esteroides corticales . algunos otros f#rmacos de car#cter b#sico se unen tambi,n a las alfa*+*globulinas. La unin de los f#rmacos a las -rotenas de-ende esencialmente de la afinidad 0ue tengan los f#rmacos1 . constitu.e una cifra estable -ara cada f#rmaco. $sta unin es reversible1 encontr#ndose siem-re un determinado -orcentaje libre . cuando ,ste se elimina del -lasma una nueva cantidad de f#rmaco se des-rende de su unin a -rotenas . toma su lugar1 de tal modo 0ue las fracciones libre . unida a -rotenas -ermanecen constantes. ;casionalmente1 cuando se sobre-ase la ca-acidad de fijacin de la alb<mina1 aumenta la fraccin libre. (olamente el f#rmaco libre es activo1 -uesto 0ue es el <nico ca-a! de atravesar barreras . difundir a los tejidos. Una ve! 0ue el f#rmaco se encuentra en -lasma1 la concentracin 0ue alcan!a en los diferentes tejidos de-ende esencialmente de dos factores7 el flujo sanguneo regional1 . la salida del f#rmaco del interior vascular. La unin del f#rmaco a las -rotenas . la salida del f#rmaco del interior vascular condicionan un -ar#metro 0ue conocemos con el nombre de volumen de distribucin 4:d5. (e define como :d el volumen de agua cor-oral en el 0ue el f#rmaco se encuentra realmente disuelto. 3ero este -ar#metro de I:d realJ no es f#cilmente medible1 -or lo 0ue recurrimos al I:d a-arenteJ 0ue corres-onde a7 Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' 1d 5 4OSIS )p Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo "ecimos 0ue este volumen de distribucin es a-arente -or 0ue no refleja con e2actitud donde se encuentra el f#rmaco. 3or ejem-lo1 (i la C- es mu. baja el :d ser# mu. alto1 indic#ndonos 0ue esta acumulado en alg<n tejido6 -or el contrario1 si el f#rmaco esta mu. unido a -rotenas la C- ser# alta . el :d ser# bajo. A -esar de ello nos sirve -ara conocer la distribucin cor-oral de un f#rmaco7 :d 8 Litros ********************* F#rmaco en -lasma :d +% Litros ********************* F#rmaco en -lasma Q intersticio :d C& Litros ********************* F#rmaco en -lasma Q intersticio Q c,lulas
+aterial 6 E!uipo $s-ectrofotmetro U:*:I( Matra! volum,trico de A&& cc 4+5 Balan!a analtica Matra! volum,trico de +&& cc 4+5 Balan!a granataria Matra! volum,trico de %A cc 4)5 Balan!a -ara roedores Matra! volum,trico de +& cc 4A5 Mesa de ciruga -ara roedores 3i-eta volum,trica &.A cc 4+5 $0ui-o de diseccin com-leto 3i-eta volum,trica + cc 485 Raula metablica 3i-eta volum,trica % cc 4+5 Centrfuga 3i-eta volum,trica 8 cc 4+5 Agitador :orte2 3i-eta volum,trica A cc 4+5 3ortaobjetos 4B5 3i-eta graduada %& cc 4+5 Reringa de +cc 4%5 3i-eta graduada de +& cc 4%5 Nubo de ensa.e +B2+&& con ta-n de rosca 4+&5 3i-eta graduada A cc 4+5 Nubo de ensa.e +B2+%A con ta-n de rosca 4+&5 3i-eta graduada + cc 4+5 Soluciones 6 0eactivos 3entobarbital sdico (ulfacetamida C mgGcc 4+&cc5 Scido tricloroac,tico 4NCA5 idr2ido de sodio &.+ @ 4 B&cc5 @itrito de (odio Scido tricloroac,tico +AH 4%Acc5 (ulfacetamida Scido clor/drico C @ 4+& cc5 Cloroformo @itrito de sodio &.+H 4+&cc5 idr2ido de sodio (ulfamato de amonio &.AH 4+&cc5 Alfa*naftiletilendiamina Alfa*naftiletilendiamina &.+H 4+&cc5 (ulfamato de amonio Scido clor/drico Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo /rocedimiento Sesin 1 "primera parte' +. (e administra a la rata sulfacetamida en dosis de +& mgGTg de -eso. %. (e coloca el animal en una jaula metablica -or es-acio de 8& minutos. 8. (i no se /a colectado orina en este intervalo de tiem-o1 indu!ca al animal -resion#ndole levemente la -arte inferior del abdomen. C. Anestesie al animal . -re-#relo en la mesa de ciruga. Abra la cavidad abdominal 4en este momento -uede obtener orina -or insicin directa en la vejiga1 si no se logro anteriormente5. A. Abra adem#s la cavidad tor#2ico . craneana. ;btenga +cc de sangre -or -uncin directa al cora!n del animal. B. ;btenga tambi,n muestras de &.A*+.& gr de los siguientes rganos7 /gado1 riFn1 intestino1 cora!n1 cerebro . m<sculo de la regin gl<tea. '. Colo0ue las muestras obtenidas en un -ortaobjetos . -,selo1 des-u,s de esto -roceda a desmenu!arlas con la a.uda de una navaja de bistur . transfi,ralas a un tubo de ensa.e 0ue contenga +&cc de @a; &.+ @1 lave el -ortaobjetos . -,selo de nuevo -or diferencia conocer# el -eso de la muestra. ). 3rocese cada una de las muestras de acuerdo al -rocedimiento indicado. /rocesamiento de las muestras: San#re7 Lleve +cc de sangre a un tubo 0ue contenga Kcc de agua . agite en vorte2. Nome +cc de esta dilucin . transfi,rala a otro tubo1 adicione +%cc de agua . agite de nuevo. Agregue Ccc de ANC al +AH . agite -or + minuto. Centrifugue a 81&&& r-m -or 8 min. "el sobrenadante tome una muestra de Acc . -#sela a un tubo lim-io. $ti0uetar el tubo es-ecificando fec/a1 laboratorio1 n<mero de e0ui-o . contenido. Ouardar en congelacin -ara la segunda -arte de esta -r#ctica. Orina7 Nome +&& mcl de orina . agregue a un tubo 0ue contenga +.Kcc de agua. Agite . tome +cc de esta orina diluida . transfi,rala a otro tubo conteniendo ++cc de agua. Adicione Ccc de NCA al +AH agite . centrifugue a 81&&& r-m -or 8 minutos. "el sobrenadante tome una muestra de Acc . -#sela a un tubo lim-io. $ti0uetar el tubo es-ecificando fec/a1 laboratorio1 n<mero de e0ui-o . contenido. Ouardar en congelacin -ara la segunda -arte de esta -r#ctica. 7ejidos 6 8r#anos7 $n el tubo 0ue contiene la muestra . la solucin de @a; deber# agitarse en vorte2 -or + minuto en 8 ocasiones1 en un -erodo de +& minutos. "es-u,s se dejar# re-osar -or +A minutos. (e toman %cc del sobrenadante . se adicionan %cc de NCA al +AH1 agitar -or 8& seg. Adicionar Bcc de agua . agitar de nuevo. Centrifugar -or A minutos a 81&&& r-m. Nomar del sobrenadante una muestra de Acc . -asar a un tubo lim-io. $ti0uetar el tubo es-ecificando fec/a1 laboratorio1 n<mero de e0ui-o . contenido. Ouardar en congelacin -ara la segunda -arte de esta -r#ctica. Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Sesin ( "se#unda parte' 3ara iniciar con esta sesin1 -ermita 0ue las muestras se descongelen a tem-eratura ambiente1 o en baFo de agua a tem-eratura ambiente. )uantiicacin de Sulacetamida por la t-cnica anal&tica de Bratton-Marshal +. A Acc del sobrenadante se le adicionan +cc de Cl C@1 +cc de @itrito de sodio al &+H . se agita en vorte2 -or A minutos. %. 3osteriormente agregar +cc de (ulfamato de amonio al &.AH . agite de nuevo -or 8 minutos1 manualmente de manera vigorosa. 8. 3or ultimo adicione +cc de alfa*naftiletilendiamina al &.+H1 agite . re-ose en la oscuridad -or +& minutos. C. Lea la absorbancia en es-ectrofotmetro a una longitud de onda de ACB nm. A. acer e2actamente este mismo -rocedimiento a un blanco 0ue consiste en Acc de agua1 0ue se trata a la -ar con las muestras.. )urva patrn de sulacetamida: Solucin patron de Sulacetamida "1.. mc#9cc57 3esar en balan!a analtica A&mg de (ulfacetamida1 colocarla en un matra! volumetrico de A&&cc. Llevar al aforo con agua. Soluciones estndar de Sulacetamida7 Nomar la alcuota necesaria de la solucin -atrn de sulfacetamida . -re-arar %A cc de cada una de las concentraciones descritas a continuacin7 +1 %1 C1 B1 )1 +% . +B mcgGcc. Nomar A ml de cada una de las soluciones est#ndar de sulfacetamida . colocar en un tubo de ensa.e . -roceder de acuerdo a la t,cnica de Bratton*Mars/al. acer este -rocedimiento -or du-licado -ara cada una de las concentraciones. Incluir un blanco con Acc de agua. 0esultados Con los resultados de la curva est#ndar calcular el -romedio1 desviacin est#ndar . el coeficiente de variacin de las absorbancias obtenidas -ara cada concentracin. $laborar una gr#fica de concentracin de sulfacetamida 4mcgGml5 vs Absorbancia -romedio6 calcular -or mnimos cuadrados el coeficiente de correlacin. Con la gr#fica obtenida /acer inter-olaciones con los valores de absorbancias de las muestras . calcular las concentraciones de sulfacetamida en sangre1 orina . en los diferentes rganos . tejidos. Pe-orte sus resultados en una tabla donde se es-ecifi0uen los valores de absorbancia . concentraciones obtenidas1 . la gr#fica corres-ondiente. $labora tus conclusiones. Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo )uestionario )omplementario +. Que -ro-iedades deber# tener un f#rmaco -ara -oder encontrarse en el eritrocito9 %. Cual es el com-onente -roteico m#s im-ortante en la distribucin de f#rmacos. 8. La distribucin ser# un -roceso reversible9 $laboro7 Q. ermelinda de la Cru! "ur#n Fec/a7 $nero 8& de %&&' Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Prctica No. 6 Estimulacin en In$ibicin del +etabolismo 3armacol#ico Objetivo $studiar la influencia de la induccin del metabolismo -or medio de daFo /e-#tico . la estimulacin del metabolismo -or medio de la administracin crnica de un f#rmaco utili!ando animales de laboratorio. Introduccin $l metabolismo es uno de los -rinci-ales mecanismos -or medio del cual la accin de un f#rmaco se -uede concluir. La ma.ora de los f#rmacos -asan -or un -roceso metablico1 0ue los convierte en -roductos m#s -olares 4metabolitos5. $sto es de suma im-ortancia en el manejo global de un f#rmaco1 .a 0ue al -asar -or esta biotransformacin no solo se diminu.e su actividad biolgica1 si no 0ue lo /ace m#s susce-tible a ser e2cretado. La intensidad . duracin de la accin de un f#rmaco es determinada -or el grado de biotransformacin 0ue sufre . la velocidad con 0ue sea eliminado del cuer-o. $ste grado de transformacin o metabolismo -uede ser afectado -or varios factores como edad1 se2o1 ra!a1 dieta1 as-ectos gen,ticos1 e2-osicin a sustancias 0umicas1 etc. A trav,s de estudio cin,ticos esta demostrado 0ue una sustancia -uede ser ca-a! de modificar el -atrn metablico de otra. $jem-los de ello son el Tetocona!ol 4antimictico5 0ue es ca-a! de in/ibir el metabolismo de "iace-am 4anticonvulsivo51 -udiendo -resentarse sntomas de into2icacin -or elevacin de niveles -lasm#ticos de "iace-am. Mientras 0ue -or otro lado Fenobarbital es ca-a! de inducir el metabolismo de muc/os otros f#rmacos disminu.endo su concentracin1 lo 0ue -odra /acer 0ue se -resenten niveles subtera-,uticos.
+aterial 6 E!uipo Balan!a -ara roedores Reringa +cc 3entobarbital sdico Netracloruro de carbono Algodn Raula -ara ratones Patones /rocedimiento +. Cada e0ui-o tendr# A ratones -esados . marcados -erfectamente. %. Los alumnos se dividir#n en tres e0ui-os1 el e0ui-o numero + trabajar# con ratones sin -retratamiento 4control56 el e0ui-o numero % trabajara con ratones inducidos6 . el e0ui-o numero 81 con ratones in/ibidos. Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo 8. A cada ratn se le administra -entobarbital a una ra!n de A& mgGTg de -eso. C. "eterminar el tiem-o de inicio del sueFo . duracin del mismo. $l tiem-o de inicio de sueFo se determina -or la -erdida del reflejo de endere!amiento. $sto se logra cuando al voltear al animal ,ste no regresa instant#neamente sobre sus -atas. /retratamiento Los ratones se tratar#n -or A das -revios al e2-erimento1 como a continuacin se describe7 o Induccin enzimtica .* cada ratn recibe -entobarbital a una ra!n de +& mgGTg de -eso1 -or va intra-eritoneal diariamente. o Inhibicin enzimtica .* los ratones se introducen en un frasco 0ue contiene algodn im-regnado de tetracloruro de carbono1 /asta 0ue el animal muestre alg<n signo de incoordinacin. (#0uelo inmediatamente -ara 0ue -ueda recu-erarse. Nenga cuidado al utili!ar el tetracloruro de carbono6 el algodn no debe contener l0uido en e2ceso . la e2-osicin no debe ser -rolongada1 -ues -uede matar al animal o sedarlo -or com-leto1 lo cual no es recomendable. $sto se re-ite diariamente. 0esultados +. Constru.a una tabla con los resultados de los tres gru-os anotando los tiem-os de -erdida del reflejo de endere!amiento 43P$5 . duracin del efecto o tiem-o de sueFo. %. Calcule los tiem-os -romedio de cada gru-o. 8. $labore una gr#fica de barras . com-are los tiem-os -romedio de induccin 4I5 . duracin 4"51 obtenidos -ara cada gru-o. C. "e acuerdo a los resultados . la gr#fica obtenidos 0ue -uede concluir acerca del e2-erimento9 )uestionario )omplementario +. Continuar# -or siem-re la induccin en!im#tica a<n cuando se sus-enda la administracin del f#rmaco 0ue la ocasiona9 %. "efina los t,rminos de induccin e in/ibicin farmacoinducida. 8. "e -or lo menos tres ejem-los de otros f#rmacos 0ue sufran este mismo fenmeno. $laboro7 Q. ermelinda de la Cru! "ur#n Fec/a7 $nero 8& de %&&' Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Prctica No. 7 4eterminacin de 4osis Eectiva al :. "4E :. ' 6 4osis Letal al :. "4L :. ' Objetivo $l alumno se familiari!ara con la metodologa e2-erimental . los c#lculos necesarios -ara obtener la "osis $fectiva al A& . "osis Letal al A& de un com-uesto e2geno. Introduccin Una manera im-ortante de conocer . caracteri!ar el efecto de un f#rmaco es la determinacin de su curva dosis*res-uesta. $n este caso1 en la ordenada o eje de las IUJ o eje vertical se es-ecifica la intensidad del efecto farmacolgico /asta su m#2ima e2-resin1 relacion#ndola con la dosis o el logaritmo de la dosis en el eje de las I>J o abscisa o eje /ori!ontal. $n Oeneral el incremento de la dosis -roduce un aumento -aralelo en la intensidad de la res-uesta1 /asta un determinado limite 0ue es el efecto m#2imo. $n Farmacologa la res-uesta aumenta /asta ese -unto m#2imo1 des-u,s del cual el incremento de la dosis no va acom-aFado de un incremento de los efectos farmacolgicos. $l efecto m#2imo determina ante el aumento de la dosis1 el -lateau o la meseta de la curva. $n caso de aumentar la dosis des-u,s del -lateau -ueden a-arecer efectos t2icos o la muerte sin aumentar la intensidad de los efectos farmacolgicos. La to2icidad de un f#rmaco -uede medirse con el conocimiento de la dosis letal A& 4"L A& 51 0ue es la dosis ca-a! de -rovocar la muerte del A&H de los animales de laboratorio. La dosis efectiva A& 4"$ A& 5 es -or otra -arte la dosis 0ue -roduce los efectos deseados o tera-,uticos en el A&H de los -acientes. Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo $l tratamiento logstico -ara la transformacin lineal de la curva1 -ro-uesto -or BerVon 4+K8C5 consiste en a-licar logaritmos a las dosis utili!adas . en la transformacin de la res-uesta en Logit de la siguiente manera7 L 5 ln "p9!' "onde7 - W -robabilidad de acierto. 0 W -robabilidad de error. $ntonces1 graficando L vs ln 41 obtenemos la ecuacin de la recta L 5 ln 4 ; b< donde m W -endiente . b W interce-to al eje de las IUJ. U si 0ueremos encontrar ln " A& 1 des-ejando7 ln 4 :. 5 =b9m 4 :. 5 e >b9m /rocedimiento +. Cada e0ui-o de trabajo utili!ar# un gru-o de A ratones. A los cuales se les administrar# una misma dosis. %. Marcar . -esar cada uno de los ratones. 8. Administrar el volumen de anest,sico 0ue le corres-onda a cada ratn de acuerdo a su -eso . a la dosis 0ue le toca -robar al e0ui-o de trabajo. C. Las dosis a -robar durante el e2-erimento son7 +&1 %&1 8&1 C&1 A&1 B&1 )&1 +%&1 . +B& mgGTg de -eso. A. "eterminar el n<mero de animales muertos . vivos. B. "es-u,s de media /ora sacrificar los ratones 0ue /allan 0uedado vivos con una dosis de -entobarbital a una ra!n de %&& mgGTg de -eso. '. 3roceder con los ratones muertos de acuerdo a las buenas -r#cticas de dis-osicin de P3BI. 0esultados +. ;rdena los resultados de tu e2-erimento de acuerdo a la siguiente tabla7 4osis "m#9?#' Lo# 4 No. 0atones /orcentaje 0atones p ! ln"p9!' "ormidos Muertos "ormidos Muertos "ormidos Muertos "ormidos Muertos "ormidos Muertos +& %& 8& C& A& B& )& +%& +B& Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo %. $labora una gr#fica con tus resultados6 con los valores de @Eecto vs Lo# 4. 8. $labora una gr#fica con los valores de L vs ln 4. C. "etermina -or el m,todo gr#fico la "$ A& . "L A& . A. Calcula -or el m,todo Logit los valores de "$ A& . "L A&. B. $labora tus conclusiones con res-ecto al e2-erimento. )uestionario )omplementario +. Cual es la "$ A& . "L A& de -entobarbital sdico rata . ratn1 re-ortados en la literatura. %. Como -odemos medir la -otencia de un f#rmaco91 e2-lica tu res-uesta. 8. "efine los conce-tos de7 a. Intervalo tera-,utico 4IN5. b. "osis No2ica A& 4"N A& 5 c. Xndice de seguridad 4I(5 $laboro7 Q. ermelinda de la Cru! "ur#n Fec/a7 ;ctubre 8& de %&&B Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Prctica No. 8 Inluencia del pA *rinario en la Excrecin de 3rmacos Objetivo A trav,s de la cuantificacin de #cido acetil saliclico en orina el alumno determinar# la influencia del - urinario en la e2crecin de f#rmacos. Introduccin $l riFn es el rgano de e2crecin de -rinci-ios activos . de metabolitos. 3era esto1 ejecuta tres funciones7 filtracin glomerular1 secrecin tubular . reabsorcin tubular. Filtracin glomerular7 el -aso del f#rmaco del -lasma al filtrado glomerular se efect<a a trav,s de la -ared del glom,rulo -or filtracin debido a un gradiente de -resin. (olamente -ueden atravesar esta membrana las mol,culas 0ue -oseen un tamaFo lo suficientemente reducido7 las macromol,culas1 como la alb<mina1 las globulinas . otras -rotenas -lasm#ticas no -ueden atravesarla1 ni muc/o menos el f#rmaco 0ue se encuentre unido a ellas. La velocidad de filtracin es funcin del flujo sanguneo renal1 -or lo 0ue en casos de insuficiencia cardiaca se -roducir# un descenso de la e2crecin renal de los f#rmacos. (e trata de un -roceso -asivo 0ue no re0uiere gasto de energa. Secrecin tubular7 -roceso 0ue sigue un mecanismo de trans-orte activo1 0ue se efect<a en el t<bulo -ro2imal1 -or el 0ue algunos f#rmacos -resentes en la sangre -asan a la lu! tubular. (e trata de un -roceso saturable1 e2istiendo1 -or lo tanto1 mecanismo de com-etencia -or un mismo sistema de trans-orte activo. Reabsorcin tubular7 -roceso -or el 0ue el f#rmaco 0ue a llegado a la lu! tubular1 .a sea -or filtracin glomerular o -or secrecin tubular1 es reabsorbido a nivel tubular . -asa de nuevo a la sangre. $ste -roceso se efect<a -or difusin -asiva1 -or lo 0ue influ.en notablemente la li-osolubilidad1 el grado de ioni!acin . el -eso molecular del f#rmaco a reabsorber. Conviene recordar 0ue el - de la orina -uede modificar el grado de ioni!acin de numerosos f#rmacos .1 -or tanto1 su ma.or o menor facilidad -ara -oder ser reabsorbidos . -asar a la sangre o1 de forma alternativa1 ser e2cretados en la orina. A la vista de todo lo anterior1 se -uede afirmar 0ue la velocidad de e2crecin renal de un f#rmaco es igual a la velocidad de filtracin m#s la secrecin1 menos la velocidad de reabsorcin. Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo /rocedimiento A' El #rupo se dividir en tres e!uipos. $0ui-o @o.+. $studiar# la e2crecin de as-irina en un - urinario alcalino. $0ui-o @&.%7 $studiar# la e2crecin de as-irina en un - urinario #cido. $0ui-o @o.87 $studiar# la e2crecin de as-irina en un - normal. Cada e0ui-o nombrar# un voluntario1 0uien se tomar# una dosis de + gr de As-irina va oral1 . -roceder# de acuerdo al -rotocolo e2-erimental 0ue a continuacin se muestra. 2' )riterios de inclusin 69o exclusin. +. Rvenes sanos de +) a %) aFos de edad. %. (e2o masculino o femenino. 8. @o -adecer ning<n ti-o de enfermedad crnica. C. Al momento del e2-erimento no estar enfermos. A. @o consumir1 al menos una semana antes . durante el e2-erimento1 alg<n f#rmaco tera-,utico1 social o de abuso. B. @o consumir bebidas alco/licas al menos 8 das antes . durante el e2-erimento. '. Pes-etar el -rotocolo e2-erimental1 mismo 0ue se le dar# a leer . entender# antes de iniciar el estudio. ). Firmar carta de consentimiento informado1 antes de iniciar el estudio. /rotocolo experimental: +. $l da del e2-erimento cada voluntario vaciar# com-letamente la vejiga a las A7&& am. Llevar a cabo la miccin en un vaso de -reci-itados. Nomar el - de la orina1 anotar el valor en la /oja corres-ondiente . desec/ar la orina. %. Nomar una tableta de As-irina de +g con %&& ml de agua natural. Anotar en la /oja corres-ondiente la /ora e2acta de la toma del medicamento. 8. A las B7&& am Nomar la siguiente solucin7 $0ui-o @o.+ 4orina alcalina57 tomar C& m$0 4C g5 de bicarbonato de sodio 4@aC; 8 51 -osteriormente tomar +% m$0 4+ g51 cada C /oras 4a las +&7&& am . %7&& -m5. $0ui-o @o.% 4orina acida57 tomar C g de #cido ascrbico1 -osteriormente tomar % g1 cada C /oras 4a las +&7&& am . %7&& -m5. $0ui-o @o.8 4control57 tomar %&& ml de agua natural. C. Asegurarse de tomar %&& ml de agua cada /ora1 las -rimeras B /oras -ostadministracin. "es-u,s de las B /oras consumir agua al gusto. A. "urante el e2-erimento no consumir ninguna otra clase de l0uidos 4bebidas carbonatadas1 agua de frutas1 agua con sabori!antes1 etc.5. B. Colectar la orina durante +& /oras 4ultima orina colectada a las 87&& -m5 -ostadministracin del f#rmaco. "urante este -eriodo orinar cada ve! 0ue el cuer-o lo re0uiera. Asegurarse de cada ve! de vaciar com-letamente la vejiga. "e-ositar la orina en un vaso de -reci-itado . medir el volumen total en una -robeta graduada. Nomar el - de la orina. Ouardar una alcuota de %&& ml . desec/ar el resto. Anotar volumen de orina1 - urinario . la /ora de miccin en la /oja corres-ondiente. Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo '. A las 4)7&& am consumir un desa.uno1 el cual consistir# de % s#ndMic/es6 elaborados con una rebanada de jamn . una de 0ueso1 una rodaja de tomate .1 lec/uga . ma.onesa al gusto. Adem#s1 una man!ana de tamaFo mediano. ). A las +87&& consumir una comida al gusto. Incluir una bebida de t, /elado1 m#2imo de 8&& ml. )uantiicacin de salicilatos en orina +aterial + matra! volum,trico de +&& ml + matra! volum,trico de A& ml + matra! volum,trico de %A ml 8 -i-etas volum,tricas de + ml + -i-eta graduada de A ml +% tubos de ensa.e de +82+%& mm E!uipo Balan!a analtica $s-ectrofotmetro U:*visible Centrfuga Agitador vorte2 0eactivos (alicilato de sodio @itrato f,rrico nona/idratado Cloruro merc<rico Scido clor/drico +@ Soluciones Reactivo para desarrollar color7 3esar con e2actitud . -or se-arado C g de nitrato f,rrico nona/idratado . C g de cloruro merc<rico1 colocarlos en un matra! volum,trico de +&& ml. Adicionar un -oco de agua destilada -ara disolver1 aFadir +% ml de una solucin + @ de #cido clor/drico . diluir /asta el aforo con agua destilada. Solucin patrn de referencia de salicilato de sodio a concentracin de 100 mcg/ml7 3esar con e2actitud A& mg de salicilato de sodio . de-ositarlos en un matra! volum,trico de A& ml1 disolver totalmente en %& ml de orina libre de medicamentos 4diluida +7+ con agua5 . llevar /asta el aforo con la misma orina. "e esta solucin tomar con e2actitud una alcuota de %.A ml . de-ositar en un matra! volum,trico de %A ml1 llevar al aforo con agua. "esarrollo del m,todo analtico -ara cuantificar salicilatos en orina. $n un tubo de ensa.e colocar + ml de muestra de orina . adicionar A ml del reactivo -ara desarrollar color1 agitar la muestra en vorte2 durante + min . centrifugar durante A min a %A&& r-m -ara obtener una solucin trans-arente6 decantar la solucin a un nuevo tubo de ensa.e . determinar absorbancia a una longitud de onda de AC& nm1 ajustando a cero con Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo un blanco de agua -re-arado a las mismas condiciones 0ue la muestra. "e igual manera -roceder con A ml de la solucin -atrn de referencia de salicilato de sodio a +&& mcgGml. 0esultados +. Calcular la concentracin de salicilato en las muestras de orina1 utili!ando la siguiente ecuacin7 Concentracin de la muestra W %. Calcula la cantidad total de salicilato en cada una de las muestras de orina. 8. "eterminar la cantidad total de salicilato eliminado durante el -eriodo com-leto de muestreo. C. Com-ara los resultados de los tres e0ui-os de trabajo . elabora tus conclusiones. )uestionario )omplementario +. Que otro com-uesto se -uede utili!ar -ara acidificar la orina9 %. Menciona tres f#rmacos b#sicos . tres #cidos con los cuales se favore!ca su e2crecin acidificando o alcalini!ando la orina1 res-ectivamente9 $laboro7 Q. ermelinda de la Cru! "ur#n Fec/a7 @oviembre &) de %&&B Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' 4Absorbancia solucin -atrn de referencia5 4Concentracin solucin de referencia54Absorbancia de la muestra5 Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo Inluencia del pA *rinario en la Excrecin de 3rmacos Aoja de 0e#istro Fecha: Nombre del Voluntario: Edad: Peso: Sexo: M ( ) F ( ) Orina: Acida ( ) Alcalina ( ) Control ( ) p !rinario "asal: ora de toma del medicamento: Numero Muestra Hora pH Orina Volumen Excretado Observaciones + % 8 C A B ' ) K +& Comentarios: Inluencia del pA *rinario en la Excrecin de 3rmacos Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo )arta de )onsentimiento Inormado #u$ar % Fecha: &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&' Por medio de la presente acepto participar en el estudio de: &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&( correspondiente a la practica No' ) del manual de laboratorio de *armacolo$+a' El ob,eti-o del estudio es: &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&' Se me a explicado .ue mi participaci/n consistir0 en: &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&' 1eclaro .ue se me ha in*ormado ampliamente sobre los posibles ries$os( incon-enientes( molestias % bene*icios deri-ados de mi participaci/n en el estudio( .ue son los si$uientes: &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&' El in-esti$ador(es) se ha(n) comprometido a responder cual.uier pre$unta % aclarar cual.uier duda .ue le plantee acerca de los procedimientos .ue se me lle-aran a cabo( los rie$os( bene*icios o cual.uier otro asunto relacionado con el experimento' Entiendo .ue conser-o el derecho de retirarme del estudio en cual.uier momento en .ue lo considere con-eniente( sin .ue ello a*ecte mi per*il como estudiante del #aboratorio de Farmacolo$+a' Nombre % Firma del Voluntario: &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&' Nombre % Firma del 2n-esti$ador: &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&' Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&' Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Ciencias Qumicas e Ingeniera Qumico Farmacobilogo 3esti$os: &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& % &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&' Manual del Laboratorio de Farmacologa Q. ermelinda de la Cru! "ur#n $nero %&&'