ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE RECURSOS NATURALES

ESCUELA DE INGENIERA FORESTAL

LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

INTEGRANTES

THALIA BOHORQUEZ
CARLOS CORDOVA
GABRIELA NARANJO
EVELIN RAMREZ


I. TEMA: ENUMERACIN DE BACTERIAS


II. OBJETIVOS

A. OBJETIVOS GENERALES
Determinar el nmero de bacterias presentes en las cajas petri.
B. OBJETIVOS ESPECFICOS
Analizar el nmero de bacterias que tiene en cada una de las divisiones que se hizo
en las cajas petri.
Contar y sacar el promedio de las bacterias sembradas en las cajas petri.

III. REVISIN BIBLIOGRFICA


A. CONTEO BACTERIANO
Es un mtodo que se utiliza para ver cul es la magnitud de la poblacin total de las
bacterias, se puede determinar por muchas maneras como los siguientes tipos de
medida:
Cuenta Celular (este mtodo puede ser por un microscopio o un contador
electrnico de partculas o indirectamente con la cuenta de colonias).
Masa celular (pesando el contenido celular del nitrgeno o por tubidimetra)
Actividad celular (relacionado a la actividad bioqumica al tamao de poblacin
bacteriana.
(WIKIPEDIA, 2013)


B. TIPOS DE CONTEO BACTERIANO
Conteo en caja de petri: Mtodo ms usado para contar bacterias. Un caldo de
cultivo con microorganismos es diluido y posteriormente muestras del mismo son
distribuidas en la caja de petri contenedora de agar. Es de suponerse que
cada clula se dividir en sus mltiples alrededores para producir colonias separadas
en el agarEste mtodo es deseable porque arroja el total de clulas viables (slo
clulas vivas); en contraste con el conteo microscpico y el conteo de peso seco.
Una desventaja se encuentra en el tiempo que requiere para producir las colonias, ya
que se necesitan como mnimo 24 horas o ms. Por otra parte, no es 100% fiable
porque regularme las colonias crecen unidas en cadenas o en grupos.
Conteo por filtracin: Es realizado cuando la cantidad de bacterias es muy
pequea, como en casos de lagos y arroyos relativamente puros. En esta tcnica se
necesitan al menos 100 ml. de agua que atraviesen una membrana delgada de un
filtro, con poros tan pequeos que no permitan el paso de bacterias, de esta forma
stas son retenidas en la superficie del filtro. Posteriormente el filtro es transferido a
una caja de petri que cuenta con un caldo nutritivo, en la cual las colonias surgen de
las bacterias en la superficie del filtro. Las colonias bacterianas formadas por este
mtodo son distintivas cuando se ocupan un medio diferencial. Este mtodo es
aplicado frecuentemente en la deteccin y enumeracin de bacterias coliformes, las
cuales son indicadores de contaminacin fecal en la comida o en el agua.
Determinacin directa por microscopio: Las clulas se pueden contar como un
frote teido colocando en la preparacin un volumen conocida de la suspensin de
clulas sobre un rea conocida del portaobjetos. Despus de haber fijado y teido el
frote, es posible contar con un microscopio las bacterias.
Mtodo de turbiedad: Para algunos experimentos, es necesario estimar turbiedad,
ya que es una forma prctica de monitorear el crecimiento bacteriano. Como una
bacteria se multiplica en un medio lquido, ste se torna turbio o de aspecto nublado
por las clulas.
Determinacin del peso seco en las clulas: Es el mtodo ms directo para las
mediciones cuantitativas de la masa celular y probablemente el ms fcilmente
realizable y reproducible, aunque se debe aplicar slo en suspensiones celulares
muy densas y las clulas deben ser lavadas muy bien para removerles todo material
extra.
(WIKIPEDIA, 2013)
C. MEDIO AGAR
El agar se introdujo como un agente gelificante para el medio de cultivo.
El agar entra en solucin a 100 C y permanece en estado lquido a una temperatura
aproximada de 40 C.
Por lo tanto, una vez gelificado, permanece en estado slido y se puede incubar a
diferentes temperaturas para cultivar bacterias. Adems como el agar es un carbohidrato
complejo atacado solo por algunas bacterias, El problema de la licuefaccin no es muy
frecuente por lo que el uso del agar en medios de cultivo selectivo y no selectivo ha
permitido obtener mayor flexibilidad y capacidad para detectar y enumerar bacterias en
todo tipo de muestras, incluidas las muestras clnicas, de alimentos, agua ambiental y
potable, suelos, sedimentos y superficies (cocinas y reas de preparacin de alimentos,
superficies de hospitales, etc.).
(REASONER,1998)
IV. RESULTADOS Y GRFICO













FIGURA 1
En el cuadrante 1 pudimos
observar 9 colonias.
En el cuadrante 2 hubo 21 colonias
En el cuadrante 3 hubo 7 colonias
En el cuadrante 4 hubo 21 colonias
















B. RESULTADOS

N= Nmero de bacterias / ml en el cultivo original
n= Promedio del nmero de colonias contadas en las dos repeticiones
10
x
= Valor de la dilucin (con exponente positivo), en la que se cont las colonias.
FIGURA 1
REPETICIN 10
-5


/2 =15

REPETICIN 10
-6

FIGURA 2
En el cuadrante 1 solo hay una colonia se
debe a que no se pudo coger bien la
muestra.
En el cuadrante 2 no hay nada se presume
que no se cogi la suficiente muestra.
En el cuadrante 3 tambin no hay nada es
igual a lo que paso en el cuadrante 2 no se
cogi bien la muestra.
En el cuadrante 4 hay 1.

FIGURA 2
REPETICIN 10
-7

REPETICIN 10
-8

V. CUESTIONARIO
1. Fue igual el nmero de colonias contadas en las dos replicaciones de cada
dilucin? por qu?
No fue igual ya que cada inoculacin est preparada a diferentes disoluciones y esto
hace que el nmero de bacterias as como tambin de colonias disminuya.
2. Por qu no se inocularon las diluciones10-
2
y 10
-4
?
Existiran demasiadas bacterias viables que formaran colonias.
3. Por qu se utiliz una solucin salina para los blancos de dilucin?
Las soluciones salinas no son medios de cultivo ya que no permiten el crecimiento de
los microorganismos. Mantienen los microorganismos en suspensin sin que disminuya
su viabilidad, debido a que son isotnicos y tienen niveles de pH adecuados.
VI. CONCLUSIONES
Se determin que en la repeticin de 10
-8
hay bacterias lo que da
como resultado que tiene mayor bacteria a comparacin de las otras repeticiones.
Se cont que el la repeticin de del primer cuadrante de 10
-5
hubo 9 colonias.
Hay que colocar bien la muestra de la bacteria en la caja petri para la observacin de
las colonias.
VII. BIBLIOGRAFA
Donald J. Reasoner, Ph.D, 1998. Agar. (en lnea). Estados Unidos. Disponible en:
www.bvsde.paho.org/bvsala/e/fulltext/recuento/recuento.pdf
WIKIPEDIA, 2013.Enumeracin de Bacterias. Disponible en :
www.wikipedia.com.