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TRIGLICRIDOS MONEREACTIVO
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Revisin: junio 2014




TRIGLICRIDOS MONOREACTIVO

FINALIDAD
Mtodo para la determinacin de los triglicridos. Prueba enzimtica colorimtrica, solamente
para uso diagnstico in vitro.

PRINCIPIO DE ACCIN

Metodologa: Enzimtico colorimtrico

Triglicridos + H
2
O Lipoprotena Glicerol + cidos Grasos
Lipasis

Glicerol + ATP Glicerol Kinase Glicerol-3-Fosfato + ADP
Mg
+


Glicerol 3 Fosfato + O
2
Glicerol Fosfato Fosfato + H
2
O
2

Oxidasis Dihidroxiacetona

2H
2
O
2
+ 4 Aminoantipirina + p-clorofenol Peroxidasis Cromgeno cereja + 4 H
2
O

El H
2
O
2
, 4 aminoantipirina y p-clorofenol, en la presencia de la peroxidasis, originan un
compuesto de color cereza, cuya intensidad de color es proporcional a la concentracin de
triglicridos.


TCNICA

Procedimiento Manual
Marcar 3 tubos de ensayo: B (Blanco), M (Muestra), P (Patrn), y proceder como sigue:

Blanco Patrn Muestra
Muestra ------- ------- 10 L
Reactivo N 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
R Reactivo N 2 ------- 10 L -------

Homogenizar bien y colocar en bao mara 37C por 10 minutos. Leer la absorbancia de la
Muestra y del Patrn en 500 nm (490-540 nm), acertando el cero con el Blanco. El color es
estable por 30 minutos.

Procedimiento automtico
La mencin el manual o POE para el uso del equipo de anlisis. Coloque la programacin de los
reactivos para el equipo automatizado.


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REACTIVOS NECESARIOS

15 mL; 100 mL o 250 mL Monoreactivo
Buffer PIPES 50 mmol/L
4-clorofenol 5 mmol/L
4-aminofenazona 0.25 mmo/L
Iones de magnsio 4,5 mmol/L
ATP 2 mmol/L
Lipasas 1300 U/L
Peroxidasas 500 U/L
Glicerol kinasa 400 U/L
Glicerol 3-fosfato-oxidasa 1500 U/L

3 mL estndar
Triglicridos 200 mg/ dL o 2.28 mmol/L


EQUIPAMIENTOS E INSUMOS OPERACIONALES

Procedimiento Manual
Equipamiento: Espectrofotmetro o colormetro
Bao mara 37C
Pipetas y tubos de ensayo
Reloj o cronmetro
Biocontrol x

Procedimiento automatizado
Equipamiento: Aparatos automticos de bioqumica
Biocontrol x

Inserte el nombre, modelo y ubicacin de los equipos, consulte el manual para su uso.

CLCULOS

Triglicridos (mg/dL) = Absorbancia de la muestra x 100
Absorbancia del patrn


Como la reaccin sigue la Ley de Lambert-Beer, el Factor de calibracin puede ser usado.
Factor de = Concentracin del patrn (100 mg/dL)
calibracin Absorbancia del patrn

mg/dL = Absorbancia de la muestra x Factor de calibracin


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RESULTADOS
Unidad de Medida: mg/dL
Fator de conversin de Unidad (SI): mg/dL x 0,0113 = mmol/L

ACCIONES CORRECTIVAS
Muestras com concentraciones superior deben ser diludas 1+4 com solucin salina (0.9%) y
repetirse. Multiplicar los resultados por 5.
Para corregir el glicerol libre, restar 10 mg/dL (o.11 mmol/L del valor de trigliceridos
claculados.

MUESTRAS
Suero obtenido libre de hemlisis (para evitar resultados falsamente elevados) o plasma con
EDTA o heparina. El analito es estable durante 3 das entre 2 y 8C y 4 meses a -20C.


CONSIDERACIONES ESPECIALES
Los reactivos se mantienen estables hasta la fecha de vencimento, an despus de abrir, si se
almacena entre 2...8 C entre 20...25C, el RGT se mantiene estable por 4 semanas. Se debe
evitar la contaminacin. Proteger de la luz.

Los reactivos contienen azida de sdio (0.05%) como preservativo. No ingerir. Evitar el
contacto con la piel y las membranas mucosas.
No interfieren en la prueba valores de hemoglobina hasta 150 mg/dL o de bilirrubina hasta
150 mg/dL. Ascorbato > 4 mg/dL puede dar resultados falsamente bajos.

Solamente para uso diagnstico in vitro.

Seguir con rigor la metodologa propuesta para obtencin de resultados exactos.

El agua utilizada en la limpieza del material debe ser reciente e exenta de agentes
contaminantes.

Columnas deonizadoras saturadas liberan agua alcalina, ones diversos y agentes oxidantes y
reductores, que pueden alterar de forma significativa los resultados.

El nivel de agua en bao mara debe ser superior al nivel de los reactivos en los tubos de
ensayo.

Determinar el factor periodicamente y a cada lote del producto.

Se recomienda la aplicacin de la ley local, estatal y federal de proteccin ambiental para la
eliminacin de reactivos y material biolgico se hace de acuerdo con la legislacin vigente.

VALORES DE REFERENCIA
Los valores de referencia, en mg/dL, para el presente mtodo, fueron obtenidos a travs de la
determinacin de triglicridos en poblaciones sanas de sexo masculino y femenino.

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Suero: menor que 160 mg/dL
Para convertir los valores de mg/dL en mmol/L ( SI ) multiplicar por 0,0113. Estos valores
deben ser usados como orientacin, siendo que cada laboratorio deber crear su rango de valores
de referencia, de acuerdo con la poblacin atendida.


LINEALIDAD
La prueba es lineal hasta concentraciones de triglicridos de 1000 mg/dL o 11.4 mmol/L

CONTROL DE CALIDAD
Se pueden utilizar todos los sueros control com valores de triglicridos determinados por este
mtodo.

SIGNIFICADO DIAGNSTICO
Los triglicridos, constituyentes de varias lipoprotenas, son encontrados en diferentes
concentraciones y tienen grande importancia en la clasificacin y fenotipaje de las
hiperlipoproteinemias. En varias patologas en que ocurre hiperlipidemia, los triglicridos
solamente no se encuentran elevados en el Tipo IIa. Son verificados valores aumentados en
varias patologas como en la diabetes, dolencias cardiovasculares, pancreatitis, sndrome
nefrtica, uremia, hipotiroidismo, alcoholismo crnico. En procesos de seleccin, la dosificacin
de los triglicridos, colesterol, la prueba de refrigeracin srica y otros parmetros pueden
fornecer datos consistentes a la clasificacin y fenotipaje de las hiperlipoproteinemias.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1-BUCOLO, G.; DAVID, H., Clin. Chem., 1973, 476.
2 - TONKS, D. B., Quality Control in Clinical Laboratories, 1983.
3 - MC GOWAN, M. W.; ARTISS, J. D.; STRANDBERGH, D. R.;ZAK, B., Clin. Chem., 1983,
29-538.
4 - TRINDER, P.; Ann. Clin. Biochem, 1969, 6-24.
5- Bioclin Dados de arquivo



Nombre Cargo Firma Fecha
Elaborado
por:
Hctor Daniel Sierra
(Micrbilogo y
Qumico Clnico,
UNAH)
Supervisor del rea
de Anlisis
Bioqumico.
2/mayo/2014
Revisado y
Aprobado
por:
Dra. Heydi Cabrera
(Microbiloga y
Qumica Clnica,
UNAH)
Jefe de Laboratorio
Central, Secretara
de Salud, Honduras.

4/junio/2014


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