CTEDRA DE FISIOLOGA Y FSICA BIOLGICA

GUA DE TRABAJOS PRCTICOS DE FISIOLOGA TRABAJO PRCTICO N 2

COAGULACIN Y GRUPOS SANGUNEOS

TRABAJO PRCTICO N 2
COAGULACION Y GRUPOS SANGUINEOS
1. Objetivos:
Al finalizar el trabajo prctico los alumnos debern ser capaces de:
- Diferenciar los procesos que forman parte de la hemostasia primaria y secundaria. Distinguir los
componentes de las vas de coagulacin intrnseca y extrnseca.
- Conocer las pruebas de Laboratorio que se utilizan para evaluar ambas vas y saber interpretar sus
resultados.
- Diagnosticar compatibilidad o incompatibilidad, en el caso de transfusiones, entre individuos de
diferentes grupos sanguneos.
2. Conocimientos necesarios:
Hemostasia
Estudios de laboratorio que evalan los mecanismos de la coagulacin.
Estudios de Laboratorio que evalan la funcin plaquetaria
Determinacin de grupos sanguneos. Pruebas de compatibilidad.
3.Desarrollo del Trabajo prctico
3.a Bases Tericas
3.a.1 Hemostasia:
Puede definirse como la serie de fenmenos biolgicos que ocurren en respuesta a la lesin de
un vaso y cuya finalidad es la detencin de la hemorragia.
La hemorragia ocurre luego de la seccin o ruptura de un vaso sanguneo y la gravedad de sta
depende del dimetro del vaso y de la duracin de la prdida sangunea.
La lesin de un vaso sanguneo pone en marcha tres mecanismos para controlar la prdida de sangre:
1) Espasmo vascular.
2) Adhesin y agregacin plaquetaria.
3) Coagulacin de la sangre, que permite, mediante una red de fibrina, la consolidacin del tapn
plaquetario.
3.a.2 Mecanismos de la Coagulacin
La coagulacin consiste en la conversin de una protena soluble del plasma, el fibringeno, en un
polmero insoluble, la fibrina, por accin de la enzima trombina.
Es importante recordar que:
a- La velocidad de desarrollo del proceso de coagulacin es mxima a 370C. El fro retarda el proceso.
b- El proceso de coagulacin requiere el concurso de varios factores. El bloqueo de algunos de ellos
retarda o impide el mismo. Un ejemplo lo constituye, el agregado de Citrato de Sodio que se
combina en forma reversible con el factor IV (Ca ++) y de oxalato que lo hace en forma irreversible,
precipitndolo.
3.b. Parte prctica
3.b.1 Materiales :
IMPORTANTE: los alumnos y docentes que participen en la tarea experimental debern usar guantes
de ltex.
Obtencin de la muestra de sangre . Material necesario:
Se prepararn previamente a la extraccin, 4 tubos de ensayo
Tubo1: vaco a 370C en bao termosttico.
Tubo2: vaco a 370C en hielo.
Tubo3: con 2 gotas de heparina.
Tubo4: con 0,5 ml de citrato de sodio al 3,8%.
Jeringa de 10ml descartable

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COAGULACIN Y GRUPOS SANGUNEOS

Aguja 25/8 descartable

Un trozo de ltex para se utilizado como lazo.
Algodn.
Alcohol etlico.
Se realizar la extraccin de 10 ml de sangre venosa del pliegue del codo, colocando 2ml en el tubo 1,
2ml en tubo2, 2 ml en tubo 3 y el resto en el tubo 4.
3.b.2 Pruebas de coagulacin:
Evaluacin de la va intrnseca
Tiempo de Coagulacin: el tiempo de coagulacin representa una medida del funcionamiento de la va
intrnseca de la coagulacin de la sangre entera. Su valor normal es de 5-15min.
Tcnica
-Colocar los tubos de ensayo N0 1, 3 y 4 en un bao termosttico. Tomar el tiempo 0 en el momento de
concluir la extraccin de sangre y cada 2 minutos, inclinar el tubo suavemente y anotar el tiempo en que
se produce el cogulo.
a- Repetir el procedimiento con el tubo de ensayo N0 2, pero mantenindolo en un recipiente con hielo
b- Explicar los resultados.
Existen otros mtodos para estudiar la integridad de la va intrnseca, ms precisos y reproducibles.
Todos ellos se realizan utilizando plasma descalcificado que se obtiene por centrifugacin de sangre
previamente citratada. En estos se mide el tiempo que tarda en aparecer la red de fibrina.
Ellos son:
Tiempo de recalcificacin : Determina el tiempo que tarda en coagular el plasma descalcificado luego
de agregarle un exceso de Ca++. Su valor normal oscila entre 100 y 240 segundos.
Tiempo parcial de tromboplastina (PTT): Determina el tiempo que tarda en coagular el plasma
previamente recalcificado luego de agregar un sustituto de fosfolpidos plaquetarios. Su valor
normal es de 60-90 segundos
Tiempo parcial de tromboplastina activada (KPTT): se realiza igual que el PTT pero se adicionan
sustancias como el caoln o cido elgico que activan a los factores XII y XI. Su valor normal es
de 25-40 segundos.
Evaluacin de la va extrnseca:
Tiempo de Protrombina ( Tiempo de Quick) : Representa una medida del funcionamiento de la va
extrnseca. La adicin de tromboplastina tisular y Cl 2Ca al plasma citratado desencadena la activacin
de esta va. El valor normal de tiempo que tarda en aparecer la red de fibrina es de 11-13 segundos.
Tcnica:
a) Centrifugar la sangre previamente citratada ( tubo 4) a 3000 rpm durante 10 minutos para separar el
plasma.
b) Agregar 0.1 ml de plasma a un tubo de Kahn que contenga 0.2 ml de tromboplastina con Cl 2 Ca
colocar a 370C, accionar el cronmetro y medir el tiempo que tarda en formarse la red de fibrina
En el siguiente esquema indique qu va o paso de la cascada de coagulacin evala cada uno de los
tiempos antes mencionados.

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Y GRUPOS SANGUNEOS
Va intrnseca

intrintrnseca
intriintrnseca

Va extrnseca

Superficie negativa Calicrena

Ciningeno alto PM

F XII

Factor tisular
III
Factor VII
Ca 2+

F XII activo
Ca 2+

F XI

F XI activo

Factor IX

Factor IX activo
2+

FVIII, Ca ,
Factor Plaquetario III

Factor X activo

Factor X

Factor V
Ca 2+
Factor Plaquetario III

Protrombina

Trombinaa

3.b.3.Examenes de laboratorio que evaluan la funcin plaquetaria:

Tiempo de sangra: Evala la integridad de las primeras etapas de la formacin del tapn hemosttico,
es decir el espasmo vascular y la formacin del tapn plaquetario (cantidad y calidad de plaquetas).
Mide el tiempo necesario para que se detenga la hemorragia, en respuesta a la incisin de vasos
subcutneos pequeos. Su valor normal oscila entre 2-6 minutos.
Tcnica :
Realizar una incisin en la yema del dedo de la mano, secar por absorcin (sin presin) con un papel
de filtro cada 30 segundos. Anotar el tiempo de cese de la hemorragia.

4- Grupos sanguneos y Factor RH

4.a.Bases Tericas:
Los eritrocitos de cada ser humano presentan en su membrana antgenos del sistema ABO y del
sistema Rh determinados por su cdigo gentico. El nombre del grupo lo da el antgeno especfico
presente en los eritrocitos (aglutingeno). En el plasma, a su vez, existen anticuerpos que tienen la
propiedad de aglutinar los eritrocitos (aglutininas) que poseen antgenos ABO diferentes a los del propio
individuo.

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COAGULACIN Y GRUPOS SANGUNEOS

GRUPOS
O
A
B
AB

AGLUTINOGENOS
ERITROCITOS
A
B
AB

EN AGLUTININAS EN PLASMA
Anti A - Anti B
Anti B
Anti A
No posee

El sistema Rh comprende tres antgenos que se los designa como C, D y E. De ellos el ms importante
por ser el ms antignico es el D. Un individuo es Rh positivo si sus eritrocitos poseen el antgeno D.
4.b.Parte Prctica
4.b.1. Material necesario:
- Sueros anti A, anti B y anti-D
- tres gotas de sangre
- Lmpara y vidrio
- varilla y portaobjetos
4.b.2.Tcnica:
Limpiar y desengrasar el vidrio con alcohol.
Colocar una gota de cada uno de los sueros bien separados en el portaobjetos.
Poner una gota de sangre sobre los sueros y mezclar con varilla. Observar si hay aglutinacin
manteniendo el portaobjetos sobre una lmpara.
Anote los resultados obtenidos en cada prueba
1) Tiempo de coagulacin a 370 C
2) Tiempo de coagulacin a 4 0C
3) Tiempo de Quick
4) Tiempo de sangra
5) Factor Rh
6) Grupo sanguneo

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SEMINARIO DE FISIOLOGIA N02 INMUNIDAD

Cuestionario:
1) Defina el concepto de sistema inmune e indique sus principales caractersticas.
2) Qu condiciones debe reunir una molcula para ser un antgeno o inmungeno? Qu es un
epitope?. Explique polivalencia y poliespecificidad de antgenos.
3) Describa la estructura y funcin de las distintas inmunoglobulinas. Cules son las consecuencias
de la reaccin antgeno-anticuerpo in vitro e in vivo?
4) Explique el origen , desarrollo , colonizacin y procesamiento de los linfocitos T y B.
5) Describa los mecanismos de captura, procesamiento y presentacin de antgenos, indicando el
papel de la interaccin TCD4-CMHII.
6) Describa los pasos que llevan a la activacin de los linfocitos B y T-CD4 sealando la funcin de las
citoquinas.
7) Describa los mecanismos de citotoxicidad de las clulas T-CD8 y NK.
8) Caracterice las respuestas primaria y secundaria al ingreso de antgenos.
9) Describa la transferencia materno fetal y sntesis postnatal de anticuerpos.