7. USOS ACTUALES Y TENDENCIAS EMERGENTES DE LA BIOTECNOLOGA
7.1. 203Fabricacin de pinturas, barnices y revestimientos similares; tintas de imprenta y masillas
7.1.1. Disolventes de origen biotecnolgico Las pinturas, barnices y revestimientos similares contienen invariablemente en su composicin disolventes. La funcin de stos es servir de vehculo para los dems ingredientes que componen los productos, materiales de recubrimiento y colorantes, mantenindolos en estado lquido (disuelto o disperso), con una viscosidad que permita su aplicacin sobre la superficie a tratar, y quedando adheridos a ella tras la evaporacin del disolvente. Por tanto, las industrias que fabrican esos productos emplean cantidades ingentes de disolventes. La inmensa mayora de los disolventes que se utilizan en este campo son disolventes orgnicos de origen petroqumico. El uso de estos disolventes presenta graves problemas medioambientales y de seguridad, por ser productos txicos, no biodegradables, voltiles, destructores de la capa de ozono e inflamables, entre otras razones. Algunos de los disolventes que actualmente se utilizan tienen o pueden tener un origen biotecnolgico, producidos mediante procesos de fermentacin a partir de materias primas renovables de biomasa. A este grupo perteneceran por ejemplo el etanol, el butanol, el propilenglicol (1,2-propanodiol), el 1,3-propanodiol y el isopropanol, todos ellos ya descritos en el informe del ao 2008 referido a los productos qumicos bsicos, por lo que no se insistir ms sobre ellos. Recientemente ha sido introducido el concepto de disolventes verdes, tambin llamados biodisolventes, entendindose por tales los disolventes producidos a partir de materias primas renovables y que son medioambientalmente benignos. Adems de estos beneficios medioambientales, tambin presentan ventajas desde el punto de vista econmico, derivadas de los menores costes que supone su eliminacin y gestin de residuos. Aunque todos los disolventes arriba indicados podran ser considerados como disolventes verdes, el ejemplo posiblemente ms paradigmtico sea el lactato de etilo. El lactato de etilo, ster etlico del cido lctico, se utiliza en la actualidad como disolvente en numerosas aplicaciones industriales, incluida la fabricacin de pinturas, barnices y revestimientos. El lactato de etilo presenta numerosas caractersticas muy atractivas que se 2
traducen en grandes beneficios medioambientales y ventajosas prestaciones. Se trata de un compuesto totalmente biodegradable, de reciclado sencillo y barato, no corrosivo, no carcinognico, y no destructor de la capa de ozono. No presenta problemas de toxicidad por ingestin oral ni por inhalacin (de hecho se utiliza incluso como aditivo alimentario). No contiene ingredientes medioambientalmente nocivos ni peligrosos, ni que contribuyan al calentamiento global. Adems, como se evapora lentamente, no se le considera como un compuesto orgnico voltil (VOC). Finalmente, sus propiedades disolventes son comparables a las de los disolventes petroqumicos tradicionalmente empleados. Tendencias en el Uso de la Biotecnologa en el Sector Qumico 15/80 En su utilizacin como disolvente en la formulacin de productos tales como pinturas, lacas y recubrimientos, el lactato de etilo incrementa las prestaciones de resinas, polmeros y colorantes a causa de su elevado poder de disolucin, alto punto de ebullicin, baja presin de vapor y reducida tensin superficial. Otras caractersticas que lo hacen de gran utilidad son sus buenas propiedades humectantes para una gran variedad de pigmentos y su buena capacidad de penetracin dentro de los materiales naturales. En pinturas de elevado contenido en slidos, su gran solubilidad hace de l un buen potenciador de la solubilizacin; en pigmentos dispersos y tintas concentradas, proporciona solubilidad, humectacin del pigmento y estabilidad de la formulacin; en resinas, se utiliza para su disolucin, para la humectacin de la superficie y para el control de la velocidad de evaporacin. Por otro lado, en lo que se refiere a los aspectos de seguridad, a causa de que puede reemplazar a disolventes tales como N-metil pirrolidona, tolueno, acetona y xileno, el lactato de etilo puede contribuir a hacer ms seguro el lugar de trabajo. No requiere ventilacin extensiva ni causa problemas de exposicin. La combinacin de de su reducida volatilidad y su ausencia de consideracin como sustancia carcingena significan que para el lactato de etilo no existen lmites de exposicin. En lo que afecta a la participacin de la biotecnologa en la produccin de lactato de etilo, en principio, sta no es directa, entendiendo como tal que por medio de cierto procedimiento biotecnolgico se consiga su sntesis. Sin embargo, ello no quiere decir que la biotecnologa no tenga un papel muy importante en su produccin. El lactato de etilo se sintetiza a partir de dos productos qumicos bsicos, cido lctico y etanol, y ambos son producidos actualmente de un modo casi exclusivo mediante tecnologas de fermentacin microbiana, quedando nicamente la reaccin final de esterificacin, de tipo qumico generalmente, fuera del mbito de la biotecnologa. Por tanto, los dos procesos ms importantes, como son los de 3
produccin de los precursores, son enteramente biotecnolgicos. Como los procesos de produccin de cido lctico y de etanol ya fueron descritos extensamente en el informe del ao 2008 referido a los productos qumicos bsicos, nos remitiremos a lo en l indicado y no se insistir ms sobre ellos. Aun cuando en el prrafo anterior se ha indicado que la reaccin final de sntesis de lactato de etilo a partir de sus precursores es una reaccin de esterificacin qumica, y de hecho as se realiza industrialmente, algunos trabajos recientes describen la posibilidad de realizar tal reaccin mediante catlisis enzimtica, empleando lipasas. La introduccin de esta tecnologa biocataltica terminara por cerrar el crculo y conducira a una produccin de lactato de etilo 100% biotecnolgica, tanto en lo referido a las materias primas (actualmente ya lo es) como a los procesos. Referencias: 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10.
7.1.2. Ingredientes y procesos biotecnolgicos para pinturas y revestimientos El deseo por parte de los consumidores y de la industria por utilizar productos y procesos ms benignos desde el punto de vista medioambiental en la fabricacin de pinturas y revestimientos ha crecido rpidamente en los ltimos aos y, como consecuencia de ello, buena parte de los esfuerzos se han dirigido hacia la biotecnologa por sus conocidas propiedades relacionadas con la sostenibilidad. El resultado de estas nuevas tendencias es que cada vez se encuentra disponible un mayor nmero de productos y procesos en los que la biotecnologa juega un importante papel, algunos de los cuales han llegado incluso a establecerse a nivel Tendencias en el Uso de la Biotecnologa en el Sector Qumico 16/80 comercial. A modo de ejemplo se describirn a continuacin dos de tales logros, uno relacionado con el campo de las pinturas y otro con el de los revestimientos. Biopolmeros como base de pinturas. Los denominados aglutinantes (binders) se utilizan habitualmente como componentes en las formulaciones de pinturas y revestimientos. Los ms empleados son sintticos, del tipo de poliacrilatos, poliuretanos y polisteres que contienen grupos funcionales cidos y epoxi. Estos aglutinantes son transesterificados con polialcoholes y policidos para dar lugar a pinturas alqudicas de secado rpido, que son diluidas con un disolvente sinttico para obtener la viscosidad y estabilidad deseadas. Las caractersticas de los revestimientos alqudicos son determinadas en gran medida por la eleccin de los aglutinantes en combinacin con la retcula que se forma durante 4
el secado. El endurecimiento final tiene lugar a travs de la formacin de una red polimrica generada mediante enlace qumico y, en ciertos casos, interacciones fsicas entre los residuos de cidos grasos insaturados presentes. Recientemente ha sido descrito el uso de poli(3-hidroxialcanoatos) (PHA) como agente aglutinante en formulaciones de pinturas, como aditivo a los aglutinantes sintticos convencionales. Su uso resulta en un endurecimiento ms rpido y en un menor tiempo de secado. En otros estudios se ha comprobado que la utilizacin de ciertos PHA hace innecesario el empleo conjunto de otros aglutinantes sintticos. De hecho, en la prctica, los PHA pueden actuar por s mismos como aglutinantes. El resultado es la obtencin de pinturas que producen un revestimiento biodegradable tras el secado, en contraposicin con las pinturas que contienen aglutinantes sintticos, que son no biodegradables. Los PHA que pueden ser utilizados con este fin pueden estar formados por monmeros de entre 6 y 16 tomos de carbono, preferentemente conteniendo una o varias insaturaciones. Como resultado de la presencia de las insaturaciones en las cadenas laterales, durante el secado se produce una reticulacin de la matriz. Adems, el secado es acelerado si se realiza a elevadas temperaturas (proceso oxidativo) o bajo luz ultravioleta (fotooxidacin). Tras el secado, las pinturas conteniendo los aglutinantes basados en PHA poseen unas propiedades adecuadas en relacin a sus caractersticas hidrfobas, brillo, flexibilidad y adhesin a diversos sustratos, entre los que se incluyen vidrio, metal, madera y papel. Los PHA son polisters sintetizados por ciertas bacterias constituidos por unidades repetitivas de diversos hidroxicidos o mezclas de ellos. Al igual que el poli(cido lctico), los PHA son polisteres alifticos producidos a partir de materias primas renovables. Sin embargo, mientras que la produccin de poli(cido lctico) es un proceso en dos etapas (una primera de fermentacin para obtener el monmero seguida de un paso convencional de polimerizacin qumica), los PHA son producidos directamente mediante fermentacin de una fuente de carbono por parte del microorganismo. En los ltimos 20 aos ha sido aislada una enorme cantidad de PHA diferentes a partir de bacterias, conteniendo aproximadamente 150 hidroxicidos diferentes como constituyentes. Estos polisteres insolubles en agua se acumulan en el citoplasma y se depositan como inclusiones que se denominan grnulos de PHA, que pueden suponer ms del 90% del peso seco celular. stos sirven a las bacterias como compuestos de almacenamiento y reserva de carbono 5
y energa. Las enzimas clave que intervienen en la sntesis de estos biopolmeros son las PHA sintasas, que catalizan la adicin estereoselectiva de nuevas unidades de monmero a la cadena de polmero a partir de sustratos en forma de (R)-3-hidroxiacil-CoA, con la consiguiente liberacin de CoA (coenzima A). La estructura genrica de los PHA responde a la siguiente frmula: Tendencias en el Uso de la Biotecnologa en el Sector Qumico 17/80 en la que X es igual a 1 para todos los polmeros comercialmente relevantes y R puede ser H o una cadena hidrocarbonada de hasta alrededor de 16 tomos de carbono, que puede contener a su vez diversos grupos funcionales. Pueden ser homo- o co- polmeros, segn contengan un slo tipo de monmero o ms de uno, respectivamente. Los copolmeros de PHA varan en el tipo y la proporcin de monmeros y presentan generalmente una distribucin de los monmeros al azar dentro de su secuencia. El proceso de produccin de PHA por fermentacin bacteriana consiste en tres pasos bsicos: fermentacin, aislamiento y purificacin, y mezcla y peletizacin. El tipo de polmero producido depende fundamentalmente de la cepa bacteriana utilizada y del sustrato o mezcla de sustratos suministrados a las clulas para su crecimiento y produccin. La mayora de los PHA pueden ser obtenidos nicamente si los sustratos precursores, que deben ser estructuralmente relacionados con los constituyentes que sern incorporados a los PHA, son suministrados como fuente de carbono a las bacterias, ya que los intermediarios del metabolismo primario celular no pueden ser canalizados hacia este fin. Por ello, nicamente unos pocos PHA pueden ser obtenidos a partir de las fuentes de carbono habitualmente disponibles, tales como carbohidratos y cidos grasos. Durante la fermentacin la fuente de carbono es suministrada al medio a diferentes velocidades hasta que es totalmente consumida y el crecimiento celular y la acumulacin de PHA es completa. Este paso de fermentacin suele durar entre 38 y 48 horas. A continuacin, para aislar y purificar los PHA, las clulas son concentradas, secadas y extradas con un disolvente caliente. Los residuos celulares son eliminados del disolvente conteniendo los PHA disueltos mediante un proceso de separacin slido-lquido. Los PHA son entonces precipitados mediante la adicin de un disolvente en el que no son solubles, y recuperados. Finalmente los PHA son lavados con disolvente, secados bajo vaco y temperaturas moderadas, y empaquetados en forma de pelets. Todos los PHA comparten ciertas propiedades recomendables para determinadas 6
aplicaciones y que los hacen interesantes para la industria: i) son compuestos termoplsticos y/o elastmeros que pueden ser procesados con los equipos utilizados en la industria de manufactura de plsticos; ii) son insolubles en agua; iii) presentan un considerable grado de polimerizacin que oscila entre 10 5 y casi 107 Da; iv) son compuestos enantiomricamente puros, constituidos generalmente slo por el estereoismero R; v) no son txicos; vi) son biocompatibles; vii) presentan propiedades piezoelctricas; viii) pueden ser obtenidos a partir de materias primas renovables; ix) todos son biodegradables. Sntesis enzimtica de ceras para revestimientos. Uno de los tipos de revestimiento ms utilizado en el sector de la madera es el basado en las ceras, cuya funcin principal es impermeabilizar las superficies y hacerlas resistentes al agua. Las ceras son steres de cidos carboxlicos de cadena larga y alcoholes de cadena larga, y su atractivo radica en que son compuestos no peligrosos y con buenas propiedades de biodegradabilidad. Adems, las ceras pueden ser obtenidas a partir de materias primas renovables, tales como los aceites vegetales. Tendencias en el Uso de la Biotecnologa en el Sector Qumico 18/80 La sntesis de las ceras se realiza mediante una reaccin de esterificacin, que puede ser catalizada qumica o enzimticamente. El mtodo convencional industrialmente establecido emplea un catalizador qumico, habitualmente un cido fuerte. Como alternativa a estos procesos qumicos, que presentan diversos inconvenientes relacionados con los elevados gastos energticos (se requieren temperaturas superiores a 150 C), la reducida selectividad de la reaccin y la necesaria eliminacin de residuos durante la purificacin del producto, se estn desarrollando otros procesos basados en la utilizacin de enzimas como catalizadores de la reaccin, concretamente enzimas del tipo lipasas, que reducen en buena medida tales inconvenientes. As, por ejemplo, ha sido descrita la sntesis de diversas ceras, tanto monosteres (palmitato de cetilo y behenato de behenilo) como disteres (adipato y sebacato de dibehenilo), mediante biocatlisis, empleando preparaciones comerciales de lipasa B inmovilizada de la levadura Candida antarctica como catalizador. La reaccin se lleva a cabo en un medio libre de disolventes, para lo que la temperatura se debe ajustar a valores comprendidos entre 65 y 90 C para permitir que los sustratos permanezcan en estado lquido. Dado que las reacciones de esterificacin son reversibles, para conseguir el mayor rendimiento posible del ster, es muy conveniente que el medio de reaccin contenga la menor cantidad posible de agua, que es el otro 7
producto de la reaccin. Por ello, y sobretodo tratndose de medios concentrados tales como ste libre de disolventes, el agua generada durante la reaccin de esterificacin debe ser eliminada, aunque tampoco totalmente ya que algunas enzimas necesitan cierta cantidad de agua para su correcta actividad cataltica. Entre los diferentes procedimientos de control de la concentracin de agua disponibles, el ms ventajoso demostr ser uno basado en el flujo a travs de la mezcla de reaccin de una corriente de aire seco/hmedo, cuya composicin vena determinada en respuesta a la humedad del medio medida por un sensor. Adems, el flujo de aire presentaba una ventaja adicional, como es que mejoraba la mezcla en el reactor, reduciendo o incluso haciendo innecesaria la utilizacin de agitacin, lo que reduce el consumo energtico. Empleando este sistema se han conseguido conversiones de los sustratos en las ceras arriba indicadas comprendidas entre en 95 y 99%. A la hora de comparar este proceso enzimtico con el proceso qumico convencional, se observa que el primero es altamente ventajoso es diversos aspectos particulares y en el balance global. La cantidad de residuos (disolventes, residuos de blanqueadores y subproductos) generados en los procesos qumicos convencionales son hasta cinco veces superiores a los de los procesos enzimticos. Adems, en los procesos qumicos se necesitan procedimientos de neutralizacin del cido, de tratamiento de los vapores de destilacin, y de desodorizacin y blanqueamiento, pasos que requieren el uso de cidos y bases, junto con catalizadores. En el mtodo qumico se necesita tambin el secado del producto, as como grandes cantidades de materias primas debido a la baja selectividad del proceso. Durante las etapas posteriores a la reaccin se produce adems una prdida de rendimiento del producto, que puede llegar al cinco por ciento, como consecuencia de la mayor necesidad de refinado en el proceso qumico. Finalmente, el procedimiento qumico, a causa de la mayor temperatura a la que se desarrolla y las etapas post- reaccin que se requieren, presenta unos requerimientos energticos hasta dos veces y media superiores a los del procedimiento enzimtico. En definitiva, el proceso enzimtico es ms respetuoso con el medio ambiente, econmicamente ms rentable y ms sostenible que el proceso qumico convencional. Referencias: 9, 10, 11, 12, 13. Tendencias en el Uso de la Biotecnologa en el Sector Qumico 19/80
7.1.3. Enzimas en pinturas y revestimientos Las estructuras sumergidas en el mar, tales como los cascos de las embarcaciones, se encuentran sometidas a la denominada incrustacin (fouling), 8
entendindose por tal el crecimiento o adhesin de organismos marinos sobre el rea de inmersin. Los organismos que pueden causar estas incrustaciones incluyen bacterias, algas y animales marinos. Las principales consecuencias de este fenmeno son el deterioro esttico y estructural de los revestimientos y el acero, as como un incremento de la rugosidad superficial, con las consecuencias econmicas y de rendimiento de la embarcacin que ello acarrea. Durante las ltimas tres dcadas, la incrustacin sobre el casco de las embarcaciones se ha venido controlando principalmente mediante el uso de pinturas antiincrustacin que contienen agentes biocidas basados en metales (cobre) y compuestos organometlicos (tributil estao). Sin embargo, estos compuestos tienen tendencia a bioacumularse y causar un impacto medioambiental negativo. Ello ha provocado que se estn buscando nuevas alternativas respetuosas con el medio ambiente. Entre ellas, una de las ms prometedoras es la incorporacin de enzimas en las pinturas y revestimientos. El uso de enzimas en revestimientos antiincrustaciones se ha venido investigando durante los ltimos veinte aos. Desde un punto de vista comercial, estos revestimientos deben estar disponibles para los consumidores, ser de fcil aplicacin e impedir las incrustaciones durante la totalidad de la vida til del revestimiento. Como consecuencia de estos requerimientos, cualquier enzima que se utilice con este fin debe poseer al menos las siguientes propiedades: i) ser resistente frente a los dems constituyentes del revestimiento; ii) ser no- destructiva frente a los mecanismos de revestimiento; iii) poseer un efecto antiincrustaciones de amplio espectro; y iv) poseer una actividad estable en el revestimiento y durante la exposicin del revestimiento al agua de mar. En funcin del mecanismo de accin de las enzimas, el tipo de antincrustacin puede dividirse en dos grupos, directo e indirecto.
Antiincrustacin directa: Corresponde al uso de enzimas que interfieren activamente con los organismos implicados en la incrustacin, bien mediante un efecto biocida directo o bien impidiendo su adhesin. El efecto biocida directo imita el mecanismo de accin de los biocidas qumicos aplicados habitualmente, y se basa en la liberacin de enzimas que afectan a la viabilidad de los organismos que forman las incrustaciones. Las enzimas que pueden utilizarse de este modo incluyen las enzimas que degradan la pared celular, la lisozima, la quitinasa y la hialuronidasa, enzimas que pueden degradar los materiales que dan soporte estructural a clulas y tejidos de distintos organismos y causar lisis celular. Por otro lado, los organismos implicados en la incrustacin se sujetan a una superficie slida 9
a travs de varios tipos de adhesivos, por lo que las enzimas capaces de degradar stos deberan evitar su adhesin. Aunque no es mucho lo que se conoce sobre la composicin de estos adhesivos, sus principales componentes parecen ser carbohidratos y protenas, lo que significa que al menos dos tipos de enzimas deben ser empleadas para lograr una amplia actividad antiincrustaciones, una polisacarasa (enzima que hidroliza polisacridos) y una proteasa (enzima que degrada protenas).
Antiincrustacin indirecta: Implica el uso de enzimas para generar biocidas inhibidores de la incrustacin a partir de ciertos sustratos, que pueden encontrarse en el medio circundante (en el agua marina) o in situ en el revestimiento. Un ejemplo de biocida que puede ser generado a partir de sustratos presentes en el agua de mar son los cidos hipohalognicos (HOBr o HOCl), cidos oxidantes derivados de halgenos de potente accin antiincrustante, que pueden producirse a Tendencias en el Uso de la Biotecnologa en el Sector Qumico 20/80 partir de los haluros correspondientes y perxido de hidrgeno en una reaccin catalizada por la enzima haloperoxidasa. Sin embargo, el mayor inconveniente de esta aproximacin es la disponibilidad de perxido de hidrgeno en el agua de mar, que no suele exceder de 0,1 mM. La alternativa podra venir de la utilizacin de oxidasas productoras de perxido de hidrgeno, que tambin posee efecto antiincrustaciones. Los sustratos de estas oxidasas no se encuentran como tales presentes en el medio circundante, pero s pueden estarlo en forma de precursores (polisacridos y protenas), por lo que sera necesaria una segunda enzima (polisacarasa o proteasa) que generase los sustratos utilizables por la oxidasa. En cuanto a la posibilidad de incorporar los sustratos en el propio revestimiento, han sido propuestas varias reacciones enzimticas que podran utilizarse en este sentido, si bien presenta el inconveniente de que el sustrato debe encontrarse presente en el revestimiento en suficiente cantidad como para permitir la generacin continua y prolongada de una dosis efectiva del agente antiincrustante. Aunque posiblemente el campo en el que la utilizacin de enzimas en pinturas y revestimientos ms ha avanzado sea el de las incrustaciones, han sido tambin planteados otros usos alternativos. Uno de los ms interesantes podra ser el de 10
proporcionar al revestimiento una actividad cataltica con capacidad de eliminacin de sustancias txicas de superficies. Esta posibilidad ha sido aplicada por ejemplo en la remediacin de compuestos organofosforados, que incluyen a muchos de los pesticidas comnmente utilizados as como a ciertos agentes de guerra qumica. La estrategia se basa en la inclusin de la enzima hidrolasa de compuestos organofosforados en el revestimiento, que es capaz de hidrolizar compuestos como el paraoxon, demeton-S y diisopropilfluorofosfato. Referencias: 16, 17, 18.
7.1.4. Pigmentos de origen natural para tintas Las tintas modernas son formulaciones complejas en las que adems del pigmento se incluyen otros ingredientes adicionales a los que se denomina globalmente como vehculos. Entre estos componentes de las tintas se incluyen modificadores del pH, humectantes para retardar el secado prematuro, resinas polimricas para conferirles propiedades de adhesin, agentes antiespumantes para regular la eficiencia de las espumas, tensioactivos para controlar las propiedades superficiales, biocidas para inhibir el crecimiento microbiano, y espesantes o modificadores reolgicos para controlar la aplicacin de la tinta. Los pigmentos son considerados como los componentes principales de las tintas y suponen alrededor del 50% de su coste. Un pigmento es esencialmente un slido coloreado y particulado que altera la apariencia de un objeto mediante la absorcin y/o dispersin selectiva de la luz. Se presenta en las tintas como una suspensin coloidal y mantiene una estructura cristalina o particulada durante el proceso de coloreado o de impresin. En la actualidad la inmensa mayora de los pigmentos utilizados en tintas son de origen sinttico, con una reducida proporcin de origen natural. En este sentido, la contribucin de la biotecnologa es ciertamente escasa, aunque se pueden citar algunos casos, casi de modo anecdtico, en los que se puede encontrar alguna posibilidad de participacin. Una de las tintas ms conocidas y que ya se utilizaba en la Edad Media es la tinta de hierro, de color negro, que contiene como colorante un complejo ferroso de cido glico. El cido glico se obtena tradicionalmente a partir de materiales ricos en taninos, tales como agallas de plantas, cscaras de nueces y otros frutos, y cortezas. El complejo ferroso del cido glico presenta poco color al aplicarlo sobre el papel, Tendencias en el Uso de la Biotecnologa en el Sector Qumico 21/80 11
pero al secarse se oxida en contacto con el aire y se convierte en el compuesto frrico insoluble, que es negro. El cido glico, como se ha indicado, se produce a partir de los taninos, mediante hidrlisis de stos. Se conocen diversos microorganismos que producen tanasas, enzimas capaces de hidrolizar los taninos a cido glico, fundamentalmente hongos filamentosos pertenecientes a los gneros Aspergillus y Rhizopus. Por lo tanto, mediante la utilizacin de estos microorganismos o de sus tanasas se podra obtener a partir de materiales y residuos vegetales ricos en taninos cido glico utilizable en la fabricacin de tintas. Otro ejemplo que puede ser mencionado es el del pigmento natural ndigo, de color azul. El ndigo es considerado como uno de los pigmentos ms antiguos conocidos por la humanidad. Su utilizacin actual se dirige mayoritariamente a la tincin de tejidos en la industria textil, principalmente en la fabricacin de los tejidos vaqueros, si bien puede ser tambin utilizado, aunque de modo muy minoritario, en la fabricacin de tintas. Su fuente de obtencin original son ciertas plantas que lo producen, de las que se extrae. Su sntesis total se consigui durante el siglo XIX, hecho que fue considerado como uno de los logros ms importantes de la industria qumica en ese siglo. Ms recientemente se ha encontrado que ciertas enzimas de origen microbiano, dioxigenasas y monooxigenasas, son capaces de catalizar la oxidacin de indol a ndigo (figura 1). De hecho, se ha demostrado que un proceso biotecnolgico que implica la utilizacin de la enzima naftaleno dioxigenasa puede ser comercialmente viable. Los microorganismos que expresan dioxigenasas durante su crecimiento sobre hidrocarburos aromticos han sido implicados en la transformacin de indol para formar el dihidrodiol, que es deshidratado a indoxilo y dimeriza para formar el ndigo. Las monooxigenasas implicadas en el metabolismo de tolueno y 1-naftol tambin se ha demostrado que son capaces de producir ndigo. Figura 1. Conversin enzimtica de indol en ndigo. Recientemente, la empresa Genencor ha desarrollado un proceso de fermentacin de glucosa a ndigo utilizando una cepa recombinante de la bacteria Escherichia coli. En esta cepa, mediante tecnologas de ingeniera metablica, se ha modificado, por un lado, la ruta metablica del triptfano para obtener niveles elevados de indol y, por otro lado, se han introducido los genes que codifican la enzima naftaleno dioxigenasa, que cataliza la oxidacin aerbica de indol a ndigo. El proceso no es todava viable comercialmente, probablemente a causa de sus bajos rendimiento (18 g/L) y productividad (<1 g/L h), pero puede ser optimizado en el futuro y, en cualquier caso, permite ofrecer una alternativa ms sostenible al proceso qumico de sntesis vigente en la actualidad. Referencias: 19, 20, 21, 22, 23, 24.