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DIRECCION DE SANIDAD ANIMAL

Subdireccin de Control y
Erradicacin de
Enfermedades

PROCEDIMIENTO: CONTROL Y ERRADICACIN
DE TUBERCULOSIS BOVINA Y BRUCELOSIS
BOVINA
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Fecha
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

M.V. J aime Villavicencio
Villafuerte
M.V. Oscar Domnguez
Falcn






Fecha




TABLA DE CONTENIDO

1. Objetivo.
2. Alcance.
3. Referencias.
4. Definiciones.
5. Responsabilidades.
6. Descripcin
7. Registros
8. Anexos
9. Control de Cambios.



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PROCEDIMIENTO: CONTROL Y ERRADICACIN
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1. OBJETIVO
Normar y uniformizar las estrategias, actividades operativas sanitarias y de
coordinaciones del personal del servicio oficial y de la actividad privada
autorizado, para el control y erradicacin de Tuberculosis Bovina y Brucelosis
Bovina en el territorio nacional.
Este documento describe la forma en que deben ser ejecutados los distintos
componentes del programa, entendidos como tales las acciones necesarias
para la incorporacin y clasificacin del rebao, la Vigilancia Epidemiolgica, el
Saneamiento de rebaos infectados, la Certificacin de Predios Libres de
Tuberculosis Bovina y Brucelosis Bovina, el Control de Movimiento de
Animales, el diagnostico de Laboratorio y los sistemas de Informacin.

2. ALCANCE
El presente Procedimiento es de aplicacin en el mbito de todas las
Direcciones Ejecutivas del Servicio Nacional de Sanidad Agraria SENASA, en
cuyas jurisdicciones se aplique el programa de control y erradicacin de
Tuberculosis Bovina y Brucelosis Bovina, y en el nivel central.
3. REFERENCIAS
3.1. Resolucin Jefatural N 038-2000-AG-SENASA, aprueba Directiva
General N 009-2000-AG-SENASA-OGP, que aprueba la formulacin,
trmite, aprobacin y actualizacin de Directivas, del 2 de marzo de
2000.
3.2. Ley N 27322, Ley Marco de Sanidad Agraria, 23 de julio de 2000.
3.3. Decreto Supremo N 048-2001-AG, Reglamento General de la Ley
Marco de Sanidad Agraria, 29 de julio de 2001.
3.4. Decreto Supremo N 008-2005-AG, Reglamento de Organizacin y
Funciones del SENASA, 9 de febrero de 2005.
3.5. Decreto Supremo N 015-98-AG, Reglamento de Registro, Control y
Comercializacin de Productos de Uso Veterinario y Alimentos para
Animales.
3.6. Decreto Supremo 031-2000-AG; Reglamento para el Control y
Erradicacin de la Tuberculosis Bovina, 8 de julio de 2000.
3.7. Decreto Supremo 033-2000-AG; Reglamento para el Control y
Erradicacin de la Brucelosis Bovina, 10 de julio de 2000.


4. DEFINICIONES
Anergia: Inactividad.
Animal no reactor: Bovino que no evidencia respuesta a las pruebas diagnsticas
para descarte de Tuberculosis o Brucelosis Bovina.


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Animal reactor: Bovino que evidencia una reaccin a las pruebas oficiales de campo
de tuberculosis o brucelosis y que es interpretada como propia de un animal infectado
por M.bovis o B. abortus.

Animal infectado: Animal de cuyos tejidos o fluidos se ha aislado el M. bovis o B.
abortus; o que es reactor perteneciente a un hato declarado como infectado.
Antgeno: sustancia que induce en los animales superiores alguna respuesta inmune
como la formacin de anticuerpos o las reacciones de hipersensibilidad inmunolgica.

Caso Confirmado: Caso presunto o probable que es confirmado en laboratorio.

Diagnstico de Tuberculosis bovina: Procedimiento mediante el cual con el uso de
pruebas de campo y complementarias se determina animales reactores o no.

Diagnstico de Brucelosis bovina: Procedimiento mediante el cual con el uso de
pruebas de campo y complementarias se determina animales reactores o no.

Establecimiento infectado por brucelosis bovina: Hato o predio en el cual, al
menos, un animal ha sido diagnosticado como reactor a brucelosis

Establecimiento infectado por tuberculosis bovina: Hato o predio en el cual, al
menos, un animal ha sido diagnosticado como reactor a tuberculosis

Establecimiento pecuario bovino: corresponde a todo lugar fsico donde exista una
unidad productiva de bovinos destinados a crianza, engorda, produccin de carne,
produccin de leche, produccin de gentica, trnsito de ganado, comercializacin de
animales y sus subproductos, o de beneficio y faenamiento de los mismos, sea en
forma extensiva o intensiva, independiente del nmero de animales y sin perjuicio de
pertenecer a un mismo propietario.

Hatos nivel I: Establos o hatos que ingresan al programa de control y erradicacin de
Tuberculosis y Brucelosis Bovina y que ejecutan por primera vez pruebas
diagnsticas.

Hatos nivel II: Establos o hatos que vienen trabajando por ms de una (1) campaa
en el programa de control y erradicacin de Tuberculosis y Brucelosis Bovina.

Hato infectado de Tuberculosis: Hato declarado oficialmente infectado por
Mycobacterium bovis. Esta declaracin se respalda en evidencia epidemiolgica,
pudiendo corroborar con pruebas histopatolgicas, aislamiento bacteriolgico, entre
otros.

Medico Veterinario Autorizado: Profesional de ejercicio privado, facultado por el
SENASA para realizar actividades oficiales del programa de control y erradicacin de
Tuberculosis y Brucelosis Bovina.


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Medico Veterinario Oficial: Medico Veterinario del SENASA.

PPD: Derivado proteico purificado que se puede obtener de cultivos de diferentes
especies y cepas de M. bovis, M. avium, M. tuberculosis y otras especies.

Predio: Unidad fsica territorial donde se encuentra el hato, el que corresponde al
conjunto de animales de una misma especie que se encuentran con similares
condiciones sanitarias y de manejo, criados y/o engordados bajo un sistema
productivo y administrativo de registros comn.

Pruebas oficiales de campo: pruebas diagnsticas establecidas como tales por el
SENASA, y que son empleadas en campo para descarte de Tuberculosis o Brucelosis
Bovina.

Prueba de Tuberculina Pliegue Ano-Caudal (PAC): Prueba diagnstica de campo
screening (selectiva) que es utilizada con fines de clasificacin, saneamiento y
certificacin de hatos.

Prueba de Tuberculina Cervical Simple (PCS): Prueba diagnstica de mayor
sensibilidad que la PAC, que debe ser usada como prueba confirmatoria en el
saneamiento de hatos infectados por M. bovis.

Prueba de Tuberculina Cervical Doble Comparativa (PCC): Prueba diagnostica
ms sensible usada solo para confirmar la enfermedad.

Pruebas complementarias: Pruebas diagnosticas usadas para confirmacin de la
infeccin por Mycobacterium bovis o Brucella abortus, como histopatolgicas y
bacteriolgicas.

Responsable del establecimiento: toda persona natural o jurdica bajo cuya
responsabilidad se encuentra el establecimiento pecuario bovino y los animales
pertenecientes a ste

Tuberculina: Extracto o derivado proteico purificado obtenido del crecimiento de una
micobacteria en un medio de cultivo lquido (PPD).


5. RESPONSABILIDADES
La Jefatura Nacional, la Direccin de Sanidad Animal, a travs de la
Subdireccin de Control y Erradicacin de Enfermedades y los funcionarios y
servidores de las Direcciones Ejecutivas del Servicio Nacional de Sanidad
Agraria SENASA-, son responsables de cumplir y hacer cumplir los
procedimientos establecidos en el presente Manual, en cada uno de sus
mbitos; sin perjuicio de las acciones de control de la Oficina de Control
Institucional del SENASA.
5.1. FUNCIONES GENERALES DEL NIVEL CENTRAL


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a) Revisin, actualizacin y dictado de normas legales y reglamentarias que
servirn de apoyo a la ejecucin del programa de Control y Erradicacin de
Tuberculosis y Brucelosis Bovina.
b) Elaborar las normas tcnicas operativas para la mejor ejecucin de las
actividades del programa de Control y Erradicacin de Tuberculosis y
Brucelosis Bovina.
c) Difusin de la Directiva General y del Procedimiento.
d) Adiestramiento y capacitacin del personal de los programas a nivel de las
Direcciones Ejecutivas
e) Formular y proponer proyectos nacionales y regionales para el financiamiento
de la cooperacin tcnica nacional e internacional.
f) Formular y apoyar con estrecha participacin de las regiones, en la gestin de
Convenios con organizaciones de productores para lograr fondos para la
reposicin de animales eliminados como reactores a las pruebas diagnsticas
g) Organizacin del sistema de informacin y de vigilancia zoosanitaria
sistematizada.
h) Educacin sanitaria y Comunicacin Social.

5.2. FUNCIONES DEL RESPONSABLE DE LOS PROGRAMAS EN LAS
DIRECCIONES EJECUTIVAS

a) Organizar, coordinar y ejecutar las actividades del programas de control y
erradicacin de Tuberculosis y Brucelosis Bovina.
b) Elaborar el Plan de Trabajo del programa (calendario de monitoreo,
capacitacin, etc.).
c) Ejecutar actividades de difusin.
d) Elaborar y mantener actualizado el Padrn General de Productores de Bovinos,
mediante una ficha de datos en inicio de campaa (Ene-Mar) que contendr
informacin de poblacin de bovinos por categoras, nmero de productores y
nmero de predios de la jurisdiccin a su cargo y otros complementarios a la
Ficha de Inscripcin; de acuerdo al Formato 1
e) Registrar en el Sistema Integrado de Gestin de Sanidad Animal SIGSA, la
informacin de la ejecucin de las diversas actividades para el programa.
f) Coordinar con las entidades privadas la suscripcin de convenios de
cooperacin.
g) Determinar las rutas y secuencias de avances en el monitoreo, a travs de una
adecuada zonificacin que permita realizar las supervisiones.
h) Distribuir y asignar metas y recursos al personal ejecutor de campo.
i) Ejecutar cursos de capacitacin dirigida a productores y ejecutores.
j) Supervisar las actividades tcnico-operativas y evaluacin de resultados.
k) Dirigir la ejecucin de la toma de muestras y pruebas confirmatorias de los
reactores a las pruebas selectivas de tuberculosis y brucelosis bovina.
l) Llevar un inventario actualizado de insumos y materiales de campo asignados
a los programas.
m) Convocar a reuniones peridicas a Mdicos Veterinarios Oficiales y de prctica
privada.
n) Consolidar y evaluar datos estadsticos y elaborar los informes de fin de
campaa.


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o) Realizar actividades de vigilancia zoosanitaria en los hatos lecheros de la
jurisdiccin.
p) Publicar la relacin de predios declarados Oficialmente Libres de Tuberculosis
y Brucelosis Bovina y de los que mantienen esta condicin, una vez al trmino
de cada ao.
q) Asesorar a la Direccin Ejecutiva en aspectos de su competencia.
r) Las dems que le asigne la Direccin Ejecutiva o el Nivel Central.


5.3. FUNCIONES DE LOS EJECUTORES DE LAS CAMPAAS: OFICIALES / DE
PRCTICA PRIVADA

a) Inscripcin de nuevos productores en el programa.
b) Ejecucin de las pruebas diagnsticas de tuberculosis y brucelosis bovina; de
acuerdo a los lineamiento tcnicos establecidos por el SENASA en el presente
Manual.
c) Informar en forma inmediata la deteccin de reactores (positivos) a las pruebas
diagnsticas encomendadas.
d) Informar en forma peridica sobre el avance de la campaa en los modelos
establecidos en el presente Manual de Procedimientos.


6. DESCRIPCION

6.1. Tuberculosis Bovina
La Tuberculosis Bovina es una enfermedad de curso crnico, caracterizada por la
aparicin de ndulos o folculos tuberculosos como lesin principal. Afecta
fundamentalmente al aparato respiratorio. La lesin ms caracterstica, cuando se
encuentra, es el granuloma o tubrculo, muy variable en cuanto a su tamao,
morfologa, nmero y disposicin. Generalmente aparecen en las vsceras y suelen ir
acompaados de lesiones ganglionares.
La enfermedad es transmisible mutuamente con humanos y de diagnstico difcil a no
ser por las pruebas de tuberculina (reaccin al antgeno inoculado, con caracterstica
hinchazn de la piel en el sitio de la inyeccin, luego de un perodo de 72 horas).

La Tuberculosis y sus efectos en la salud pblica, originan gastos por enfermedad y
asistencia mdica de las personas afectadas, disminucin de la capacidad laboral,
indemnizaciones y mortalidad.
6.1.2. Agente causal
Mycobacterium bovis es el agente causal de la tuberculosis del ganado vacuno; sin
embargo, todas las especies, incluidos los seres humanos, son susceptibles a ste.
El microorganismo es un bastoncillo grampositivo, con 2-4 micras de largo, recto o
ligeramente curvo, a veces con aspecto granular y en ocasiones filamentoso. Es


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miembro de un gran grupo de microorganismos de tincin cido resistentes, conocidos
como Micobacterias. Son inmviles y de crecimiento aerobio, no forman esporos.

El Mycobacterium bovis es una bacteria lbil, no sobrevive al calor, ni en exposicin al
sol, ni en ambiente no hmedo. Conserva su vitalidad hasta 40 das en el moco
traqueal; en el agua de bebida estancada puede conservar su poder infectante hasta
18 das despus de su contaminacin.
6.1.3. Distribucin
La tuberculosis es una enfermedad zoontica de distribucin mundial, y constituye un
peligro para la salud humana.
6.1.4. Transmisin
El animal infectado con tuberculosis es la principal fuente de infeccin, aunque puede
ocurrir contagio mediato. Los microorganismos se eliminan en al aire espirado, esputo,
heces (procedentes de lesiones intestinales y del esputo deglutido, que a su vez deriva
de lesiones pulmonares), leche, orina, secreciones vaginales, uterinas y de ganglios
linfticos perifricos abiertos. Los animales con lesiones macroscpicas que
comunican con las vas areas, la piel o la luz intestinal son claros diseminadores de la
enfermedad. La entrada suele efectuarse por inhalacin o ingestin.

La inhalacin es la puerta de entrada casi invariable en animales estabulados, e
incluso aquellos que se encuentran en los pastos se consideran la principal fuente de
infeccin. La infeccin por ingestin es obviamente ms probable en los pastos
cuando las heces contaminan los alimentos, el agua comn de bebida y los
comederos.
La ingestin de leche infectada por animales jvenes es una de las vas mas
frecuentes de la diseminacin de la tuberculosis.
La facilidad y frecuencia con que la tuberculosis de los animales se extiende a las
personas en un medio no controlado convierten a esta enfermedad en una zoonosis
importante.
6.1.5. Susceptibilidad y resistencia. Poblacin receptiva:
Los animales ms jvenes son ms sensibles a contraer la Tuberculosis, as
como los de raza ms seleccionada y animales inmunodeprimidos
6.1.6. Diagnstico
El diagnstico se puede realizar en campo mediante Pruebas de tuberculinizacin:
Prueba Anocaudal, y Prueba Cervical Doble Comparativa, Cervical Simple como
confirmatorias, estas pruebas tienen sensibilidad de y especificidad de


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Para el diagnstico de Tuberculosis bovina sirven los signos clnicos, as como las
lesiones anatomopatolgicas e histopatolgicas, datos bacteriolgicos y pruebas
inmunolgicas.


6.2. Brucelosis Bovina

La Brucelosis Bovina es una enfermedad infectocontagiosa, crnica y zoontica de
origen bacteriano que afecta principalmente a bovinos, caprinos, ovinos y porcinos.
Suele consistir en procesos agudos con tendencia a cronicidad y tienen el aborto como
sntoma ms frecuente, pudiendo provocar infertilidad, y orquitis e infeccin de las
glndulas sexuales accesorias en el macho.
Se le conoce tambin como enfermedad de Bang, aborto infeccioso o aborto
contagioso
La Brucelosis bovina ocasiona grandes prdidas econmicas a la ganadera nacional
al causar disminucin de la produccin lctea, alargamiento del periodo entre partos
del ganado, rompimiento de las lneas genticas, infertilidad y esterilidad.

6.2.1. Agente causal

El agente etiolgico de la Brucelosis bovina es Brucella abortus. Los microrganismos
Brucella sp., son colibacilos pequeos, inmviles no esporulados, gram negativos. Se
desarrollan anaerobicamente, aunque su crecimiento se mejora agregando CO
2
. La
Brucella puede requerir medios especiales para su desarrollo, y por lo general
necesitan de 3 a 5 das de incubacin a 37 C.
6.2.2. Distribucin
La brucelosis bovina es una enfermedad zoontica de distribucin mundial, y
constituye un peligro para la salud humana.
6.2.3. Transmisin
En el caso de la Brucelosis, los animales son la fuente de infeccin ms importante ya
que mantienen las brucellas y las eliminan sin necesidad de padecer la enfermedad.
Adems, al eliminar las bacterias, stas contaminan el medio de forma que agua,
pastos o cama pueden actuar tambin como fuentes de infeccin. Normalmente la
enfermedad entra en la explotacin a partir de animales nuevos, explotaciones vecinas
infectadas y menos frecuentemente, a partir de hospedadores infrecuentes que
pueden entrar en contacto con el ganado.
La transmisin natural tambin puede producirse por lamer los genitales contaminados
de otros animales. Tambin por inseminacin artificial. Por leche contaminada. Las
bacterias pueden entrar en el cuerpo a travs de las membranas mucosas, las
conjuntivas y hasta a travs de la piel. La exposicin a la luz solar directa destruye el
microorganismo en unas pocas horas.


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6.2.4. Susceptibilidad y resistencia. Poblacin receptiva:
La sensibilidad de los animales a la Brucelosis depende de varios factores, entre los
que la edad, raza (las razas seleccionadas son ms sensibles) y preez son los ms
importantes
El ganado es por lo general ms resistente a la brucelosis antes de la madurez sexual
y se vuelve cada vez ms susceptible a medida que se aproxima a la edad de la
procreacin. Los terneros que ingieren leche contaminada con Br. abortus excretan los
microorganismos en las materias fecales, pero rara vez desarrollan una infeccin
persistente. La incidencia de brucelosis ha sido menor en los machos que en las
hembras.
6.2.5. Diagnstico
El diagnstico de Brucelosis se efecta por:
a) Examen serolgico: se realiza la prueba de aglutinacin para descubrir anticuerpos
contra la brucella en leche, suero lctico, plasma seminal o en suero sanguneo. La
prueba de aglutinacin es una reaccin a simple vista que se presenta en ttulos de 1:
100 para animales no vacunados y de 1: 200 en animales vacunados y menores de 30
meses. Prueba de Rosa de Bengala, Fijacin de complemento
b) Examen bacteriolgico: se realiza el aislamiento y el cultivo de bacterias a partir de
placenta, estmago, feto abortado, etc. A veces quedan focos de infeccin en la ubre,
por lo que se puede aislar la bacteria a partir de leche o de secreciones de ubres no
lactantes.

6.3. DEL PROGRAMA

Para elevar la produccin y obtener productos inocuos de origen animal, es necesario
establecer un control estricto sobre la brucelosis y la tuberculosis, con el objetivo de su
erradicacin, que permita a la ganadera nacional por un lado, desarrollarse en
mejores condiciones sanitarias, y por otro, conseguir la apertura de mercados
internacionales.

La crianza de bovinos de leche en nuestro pas constituye una actividad
socioeconmica muy importante, como fuente de abastecimiento de productos lcteos
para el consumo interno y para la exportacin; por lo que es de suma importancia la
declaracin de rebaos y reas libres de stas enfermedades infectocontagiosas de
importancia en salud pblica.

El Servicio Nacional de Sanidad Agraria - SENASA, como organismo responsable de
cautelar la sanidad agraria del pas, ejecuta los Programas de Control y Erradicacin
de Tuberculosis Bovina y Brucelosis Bovina en las principales cuencas lecheras del
pas, sobre la base de estrategias claramente definidas como: capacitacin a
productores, diagnstico de campo y laboratorio, sacrificio de animales reactores y


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vigilancia epidemiolgica con el apoyo de organizaciones ganaderas, entidades
privadas y profesionales de prctica privada; teniendo como objetivo la declaracin
progresiva de reas libres de estas enfermedades.

En el Per las pruebas diagnsticas para estas enfermedades se vienen ejecutando
en algunos lugares por mas de 20 aos, existen departamentos que ya vienen
evaluando en forma ordenada desde el ao 1999; en todos los casos la prevalencia
para estas enfermedades es inferior al 1%, lo que ha motivado la modificacin del
Manual de Procedimientos expedido como anexo de la Directiva General N 16-2000-
AG-SENASA-DGSA. En el transcurso de estos tres (3) ltimos aos se ha recogido
mucha experiencia a nivel de los ejecutores de cada Direccin Ejecutiva, apoyados por
las reuniones anuales de armonizacin de criterios tcnicos, lo que ha permitido un
avance considerable, obligndonos a agilizar y reordenar la metodologa de trabajo.

Por este motivo, se ha elaborado el presente Procedimiento, a objeto de brindar un
marco normativo y de procedimientos acorde con los procesos de cambios, avances y
logros alcanzados, para la ejecucin estandarizada de las acciones oficiales en
Tuberculosis Bovina y Brucelosis Bovina.

El SENASA en coordinacin con los distintos actores involucrados, ha iniciado la
implementacin de una serie de acciones a fin de lograr un mejoramiento del estado
sanitario del ganado bovino en relacin a Tuberculosis Bovina y Brucelosis Bovina.

6.4. OBJETIVO DE LOS PROGRAMAS

El objetivo de estos programas es lograr el saneamiento de los rebaos lecheros del
pas, de las enfermedades de Tuberculosis bovina (TB) y Brucelosis Bovina (BB), con
el fin de mejorar los indicadores bioproductivos y econmicos de la ganadera bovina
de las cuencas lecheras, aumentar su competitividad en el mercado nacional o
internacional e impedir la transmisin de dichas enfermedades al ser humano.

6.5. DE LOS PRODUCTOS
Los productos de los programas de Control y Erradicacin de Tuberculosis y
Brucelosis Bovina son:
1. Plan de Control y Erradicacin de Tuberculosis bovina, ejecutado
2. Plan de Control y Erradicacin de Brucelosis bovina, ejecutado
3. Personal del SENASA, capacitado
4. Profesionales de Prctica privada y productores de ganado lechero, capacitados.
5. Certificacin de rebaos lecheros, realizada.

PRODUCTO 1: PLAN DE CONTROL Y ERRADICACIN DE TUBERCULOSIS
BOVINA EJECUTADO

La tuberculosis es una enfermedad crnica en la que debe considerase el hato como
una unidad epidemiolgica. No pueden tenerse en cuenta solamente animales
enfermos y sanos individualmente, sino referirse a la situacin sanitaria de la poblacin
como un todo.



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Con el objeto de determinar la presencia o ausencia de M. bovis en hatos sin
antecedentes de tuberculosis bovina, se debe someter a toda la poblacin bovina
mayor de 4 semanas a pruebas de tuberculina, lo que permitir clasificar el hato como
negativo o reaccionante.

Sern consideradas pruebas oficiales para el diagnstico de la Tuberculosis bovina
las siguientes pruebas de tuberculina:
- Prueba del Pliegue Ano-Caudal (PAC) utilizando tuberculina PPD bovino, la cual ser
aplicada en el pliegue de la base de la cola.
- Prueba Cervical Simple (PCS) utilizando tuberculina PPD bovino, aplicada en la tabla
del cuello.
- Prueba Cervical Comparativa (PCC) utilizando PPD Bovino y Aviar, aplicada en la
tabla del cuello.

La primera es de uso selectivo (screening) y las otras dos se utilizarn en situaciones
especiales, cuando el criterio epidemiolgico as lo aconseje, como pruebas
confirmatorias.
En las pruebas de tuberculina no existe relacin entre la magnitud de la respuesta y el
grado de avance de la infeccin.

La funcin de la PCC es clarificar si la probabilidad de que la causa de la sensibilidad
tuberculnica en un animal sospechoso es debida a una infeccin con M. bovis. Sin
embargo, an cuando esta prueba puede alcanzar alta especificidad, su sensibilidad
no es mayor del 70 al 75%. Analizar sensibilidad

Los resultados de las pruebas de tuberculina siempre deben ir acompaados de la
evaluacin de los antecedentes epidemiolgicos. Sobre todo si se desconoce el
estado sanitario del hato del cual provienen el o los animales, excepto cuando los
mismos proceden de un hato certificado libre, donde se puede garantizar dicha
condicin. Por lo tanto, es un instrumento valioso en el control y erradicacin de
tuberculosis bovina y con ese criterio debe manejarse.

A. PRUEBA DEL PLIEGUE ANO-CAUDAL (PAC)

Se considera as a la dosis de tuberculina PPD Bovina aplicada a cada bovino, para el
diagnstico de tuberculosis bovina, en la metodologa de intradermo-reaccin aplicado
en el pliegue ano-caudal de acuerdo a la tcnica descrita en el Anexo I, que permitir
diagnosticar animales como reaccionantes o negativos.
Esta prueba se emplear para probar hatos en los que se conoce la existencia de M.
bovis; o bien, para probar ganado que estuvo expuesto directa o indirectamente con
hatos infectados con M. bovis., usada como prueba selectiva.


B. PRUEBA CERVICAL SIMPLE (PCS)

Se considera as a la dosis de tuberculina PPD Bovina aplicada a cada bovino, para el
diagnstico de tuberculosis bovina, en la metodologa de intradermo-reaccin aplicado
en el tercio medio de la tabla del cuello de acuerdo a la tcnica descrita en el Anexo I.



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C. PRUEBA CERVICAL COMPARATIVA (PCC)

Se considera as a la dosis de tuberculina PPD Bovina y a la dosis de tuberculina Aviar
aplicada en la tabla del cuello de cada bovino, para el diagnstico de tuberculosis
bovina como prueba confirmatoria de acuerdo a la metodologa descrita en el Anexo
I.

CERTIFICACIN
Al finalizar cada prueba diagnstica, el mdico veterinario autorizado expedir el
certificado correspondiente, de acuerdo al Formato 2 quedando el original (i) para el
usuario, una copia (ii) para su archivo y una copia (iii) para el archivo del SENASA.

CONSTATACIN DE HATOS

La evaluacin de hatos es parte integral de los programas de la Campaa de
Tuberculosis Bovina, ya que mediante sta se mide el avance de la misma y se da
carcter oficial al procedimiento.
Para llevar a cabo el correcto procedimiento en la evaluacin de hatos, se necesita
que los Mdicos Veterinarios autorizados u oficiales efecten pruebas a los animales y
entreguen los resultados obtenidos en el dictamen de prueba oficial al personal
responsable de cada Direccin Ejecutiva, el cual deber revisar cuidadosamente los
procedimientos de realizacin de las pruebas y correcto llenado de la documentacin
recibida, para su posterior ingreso en el SIGSA.

Tener en cuenta que positividad no es sinnimo de enfermedad en la totalidad de los
casos. Un animal puede resultar negativo cuando realmente esta infectado o
viceversa, si lo reciente de la infeccin no ha permitido el adecuado desarrollo de
anticuerpos, o lo crnico de la enfermedad lo ha hecho pasar a un estado de anergia.
El test en ambos casos no podra clasificarlo correctamente.

HATOS NEGATIVOS
Son hatos negativos cuando:
1. Todos los bovinos resultaron negativos a la PAC.
2. Uno o ms bovinos, que habiendo sido calificados como reaccionantes a la
PAC, presentan resultados negativos al ser sometidos a una PCC, realizada
antes de los 8 das de efectuada la lectura de la PAC o en su defecto a los 90
das despus.
3. Uno o ms bovinos que habiendo presentado resultados sospechosos a una
primera Prueba Cervical Simple (1PCC), presentan resultados negativos al ser
sometidos a una Prueba Cervical Comparativa (2PCC), aplicada 60 das
despus.

HATOS INFECTADOS

Son hatos infectados cuando:



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1. Uno o ms bovinos reaccionantes a la PAC y sometidos a una PCC, resultaron
positivos
2. Cuando los bovinos con resultados positivos a cualquiera de las Pruebas
Oficiales Tuberculnicas y no fuesen inspeccionados y muestreados con
Pruebas Complementarias, se declararn oficialmente como hatos infectados
por M.bovis.
3. Cuando se observan lesiones histopatolgicas compatibles o se asla M.bovis
de lesiones en bovinos inspeccionados en centros de faenamiento, en casos
excepcionales.


PRUEBAS DE TUBERCULINA PARA MANEJO DE HATO INFECTADO

Frecuencia de evaluaciones

Un hato clasificado como infectado deber seguir la secuencia de evaluaciones
siguientes descrita para obtener su condicin de saneado, debiendo el Mdico
Veterinario Oficial elaborar un Plan de Manejo, con conocimiento del propietario y de
su Mdico Veterinario Autorizado; donde quedarn establecidas todas las medidas
sanitarias y acciones tendientes a eliminar la infeccin y proteger a los animales
susceptibles como tambin evitar la difusin a los hatos vecinos.
Segn lo cual deber realizar la siguiente secuencia de evaluaciones:

1. Identificar y eliminar el 100% de los bovinos que resultaron reaccionantes a la
prueba tuberculnica utilizada para el diagnstico y en el ms breve plazo
enviarlos a un centro de faenamiento.
2. Iniciar en un plazo no inferior a 60 das post eliminacin, evaluaciones
peridicas utilizando para este efecto la PAC o la PCS en la totalidad de los
bovinos mayores de 4 semanas.
3. Los intervalos entre evaluaciones no sern inferiores a 60 das entre la salida
del ltimo animal reaccionante y la primera evaluacin post eliminacin. Por
otro lado el lapso inter- evaluaciones entre negativo deber ser no inferior a los
180 das.
4. El hato requerir de tres (3) evaluaciones consecutivas negativos adems de la
evaluacin epidemiolgica del mdico veterinario oficial para obtener la
condicin de libre.
5. Una vez obtenida la condicin de hato libre, la poblacin bovina mayor de 18
meses, deber someterse a evaluaciones peridicas anuales de recertificacin
mediante el uso de la PAC.

SANEAMIENTO DE HATOS INFECTADOS

Todo hato declarado como infectado de Tuberculosis bovina debe ser incorporado a
un proceso de saneamiento, el cual tiene como objetivo eliminar la infeccin por
M.bovis, a travs de procedimientos diagnsticos y de manejo sanitario.
Como procedimiento diagnstico de campo, se debe utilizar para el saneamiento de
hatos infectados la Prueba Ano Caudal (PAC) o la Prueba Cervical Simple (PCS)
aplicada de acuerdo a lo indicado en el Anexo I.



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Subdireccin de Control y
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Enfermedades

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MEDIDAS SANITARIAS

Manejo y eliminacin de animales reactores
Los animales clasificados como reactores debern ser eliminados de forma inmediata.
En caso que tal medida no sea aplicada, se deber disponer la separacin de los
reactores del resto de los animales del hato en un lugar aislado que evite la difusin de
la infeccin.
Falta Responsabilidad del productor
Medidas de Limpieza y Desinfeccin
- Se dispondr una limpieza general a fondo, de todas las instalaciones usadas por
los bovinos, seguido de lavado con agua caliente y desinfeccin con un producto
de comprobada accin contra el M. bovis. Este proceso de desinfeccin se repetir
a los 7 das.
- Se identificarn el equipo o instalaciones (carros, sala de ordeo y bebederos etc.),
que son compartidas por los animales, las cuales debern ser limpiadas y
desinfectadas. Estas rutinas de limpieza y desinfeccin se mantendrn mientras
permanezcan animales reactores.
- Si se mantienen animales aislados dentro del predio, las instalaciones utilizadas por
estos animales sern limpiadas y desinfectadas con una frecuencia semanal.

Personal
Todo el personal del predio en contacto con los animales deber realizarse un examen
preventivo anual de salud. El personal que tiene acceso al grupo de animales
reactores deber tomar las precauciones de manera de no vehiculizar la enfermedad
al grupo de animales negativos. Se prohbe el consumo de leche cruda y sus
subproductos.

Bioseguridad ambiental

- Estircol: Debe ser sometido a procesos que aseguren la destruccin del M.bovis,
tales como compostaje o fermentacin. Si es utilizado como fertilizante debe usarse
en tierras de cultivo que no estn expuestas a consumo directo por animales, al
menos durante 2 meses.
- Agua: Las fuentes de agua deben estar libres de contaminacin por material fecal,
leche, calostro, cadveres y otros desechos orgnicos.
- Manejo de Pastos: En lo posible tratar que los animales clasificados como reactores
utilicen un rea de pastoreo exclusiva.
- Reciclaje de alimentos. No se deber utilizar restos de alimentacin (concentrados,
ensilaje u otro) de animales reactores en animales negativos.
- Alimentacin de terneros. Se prohbe la utilizacin de calostro y leche de vacas
reactoras en la alimentacin de terneros. Independiente de lo anterior, se
recomienda que toda la leche utilizada en la alimentacin de terneros deber ser
sometida a un tratamiento que asegure la destruccin del agente. En hatos
infectados debe priorizarse la alimentacin de terneros con sustituto lcteo.
- Suero de leche. El uso de leche constituye un riesgo sanitario, por lo tanto en su
utilizacin deber asegurarse que no vehiculice el agente.
- Perros y Gatos. Evitar que perros y gatos tengan acceso a instalaciones utilizadas
por los bovinos y que consuman leche, calostro o suero crudo.


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- Ingreso de animales. Cuando el hato requiera de reemplazos externos u otras
categoras de animales, stos debern provenir slo de predios certificados
oficialmente libres de la enfermedad. Se prohbe el ingreso temporal de animales.

REGISTRO DE INFORMACIN

Con el objetivo de poder medir y evaluar en forma permanente el grado de
cumplimiento de las actividades y los avances en las acciones establecidas, se
requiere mantener un mnimo de registros sanitarios de los hatos bajo control.

Registros mnimos requeridos:
- Formulario de inscripcin de establecimientos.
- Encuesta Predial (modelo?)
- Certificado de prueba diagnstica de Tuberculosis y Brucelosis bovina.

a) El Mdico veterinario del SENASA de la jurisdiccin correspondiente deber
mantener una carpeta individual por cada predio bajo control, en la cual tendr
bajo su responsabilidad el respaldo original de la Ficha de Inscripcin, Certificado
de prueba diagnstica y otras de las acciones oficiales realizadas por el programa.
b) El Mdico Veterinario Autorizado luego de cada accin efectuada en el predio,
debe dejar un reporte por escrito sobre las acciones realizadas y las medidas
sanitarias recomendadas. Formato
c) El Mdico Veterinario Autorizado tiene la obligacin de remitir a la oficina del
SENASA correspondiente los originales o copias de los documentos generados en
cada hato. En un perodo no mayor a los 15 das posteriores a la finalizacin de la
campaa; en caso de reactores a cualquiera de las pruebas la informacin ser
inmediata y por la va ms rpida.

D. SACRIFICIO DE ANIMALES REACTORES A LA PRUEBA CERVICAL
COMPARATIVA

Luego de comprobar la existencia de animales reactores a la Prueba Cervical
Comparativa (PCC), el veterinario autorizado deber extender una notificacin de
animal reactor o reaccionante; en donde constar la identificacin del animal,
establecimiento de origen y destino del mismo. Estos animales debern ser enviados
a faena inmediata o ser aislados hasta su envo al centro de faenamiento.(modelo)
Todo animal positivo que sea enviado a faena deber ser sacrificado al finalizar la
jornada, y la inspeccin veterinaria del centro de beneficio deber realizar un informe
sobre el resultado post-mortem del mismo.
En el centro de faenamiento solamente deben compartir corrales con animales con
el mismo destino.

El vehculo que transporte los animales, al desocuparse, debe lavarse y
desinfectarse. Los gastos que se originen de estas actividades son de cuenta del
propietario de los animales.



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E. VIGILANCIA EN CENTROS DE FAENAMIENTO

El control sanitario en centros de faenamiento, consistir en la inspeccin clnica de
ganglios superficiales (supramamarios, precrurales, preescapulares y submaxilares)
de bovinos delgados o flacos; a fin de identificar la posible presencia de tuberculosis.
Para otras especies, deber tenerse en cuenta adems, los siguientes detalles:
- Presencia de tos de uno o dos golpes, a la presin de la faringe o al provocar el
ejercicio.
- Disnea de moderada a intensa (puede descubrirse anormalidades por auscultacin
y percusin del trax.
- Signos compatibles con bronconeumona para el caso de ovinos y caprinos.

La inspeccin la efectuar el Mdico Veterinario oficial y se realizar por lo menos una
vez cada dos meses en cada centro de beneficio de su jurisdiccin.
Al establecer el nmero de lesiones observadas en centros de faenamiento durante
el primer trimestre de cada ao se debe instituir la recoleccin de un nmero
representativo de muestras, las que deben ser enviadas al laboratorio para su
diagnstico histolgico y bacteriolgico, lo cual contribuir a mantener un alto y
activo nivel de vigilancia.

Los Mdicos Veterinarios de los centros de faenamiento, tienen la obligacin de
notificar de inmediato a la oficina del SENASA y al productor de origen de los
animales, cualquier deteccin de lesiones compatibles con tuberculosis durante la
faena de bovinos u otra especie animal, debiendo quedar registrado este hecho; con
la finalidad de iniciar medidas de control y determinar prevalencias actualizadas de
las distintas zonas del pas.

La toma y envo de muestras de origen animal que se remitan al Centro de
Diagnstico, debern seguir los lineamientos descritos en el Manual de
Procedimientos para Toma y Envo de muestras de TBC Bovina.

La informacin de los hallazgos de dichas inspecciones, ser registrado en el SIGSA
(opcin: supervisin en centros de beneficio, subopcin: supervisin sanitaria, del
mdulo de Vigilancia Zoosanitaria).

F. DIAGNSTICO SITUACIONAL EN NUEVOS REBAOS LECHEROS


PRODUCTO 2: PLAN DE CONTROL Y ERRADICACIN DE BRUCELOSIS BOVINA
EJECUTADO


DIAGNSTICO DE BRUCELOSIS BOVINA

A. PRUEBA DIAGNSTICA ROSA DE BENGALA

a. Considerada como la prueba oficial de campo para el diagnstico de Brucelosis
Bovina, obtenido del anlisis de la muestra de suero sanguneo extrado a cada
bovino.


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b. El registro de esta meta ser respaldado con la copia del certificado de prueba
diagnstica que se emite, el que debe constar en los archivos del
Subcomponente de la Direccin Ejecutiva del SENASA correspondiente; esta
prueba es considerada como selectiva (Screening).
c. En la ejecucin de la prueba Rosa de Bengala, con la finalidad de simplificar la
clasificacin de Niveles de Hatos se considerarn solo los siguientes:
- Nivel I = Hatos nuevos que se inscriben en el programa
- Nivel II = Hatos que tienen dos o ms campaas de estar participando en el
programa, pudiendo ser estos Oficialmente Libres o no.
Recomendaciones.- El antgeno puede deteriorarse cuando se retira del refrigerador o
si se mantiene a temperatura ambiente por tiempo prolongado; si la prueba se realiza
eventualmente en pocas muestras se recomienda hacer pequeas alcuotas del
antgeno para no extraer todo el frasco del refrigerador. Nunca debe congelarse.
La prueba diagnstica Rosa de Bengala utiliza como antgeno una suspensin
bacteriana a la que se ha aadido el colorante rosa de bengala, enfrentndola al suero
sin diluir del animal, est tamponada a bajo pH, normalmente 3.65 + 0.05. Proporciona
una aproximacin diagnstica en pocos minutos con una sensibilidad y especificidad
muy altas. Presenta elevado grado de correlacin con la seroaglutinacin y, por su
simplicidad, es muy til como prueba de despistaje inicial o screening. Sus falsos
negativos se limitan a animales con procesos de pocos das de evolucin y a algunos
casos de enfermedad de curso muy prolongado.

B. PRUEBA DIAGNSTICA FIJACIN DE COMPLEMENTO

a. Las muestras positivas a la prueba Rosa de Bengala sern remitidas al Centro
de Diagnstico de Sanidad Animal del SENASA para que se efecte la prueba
confirmatoria de Fijacin de Complemento, siendo este el resultado definitivo.
b. De igual manera en los hatos cuyas muestras de leche resultaran positivos a la
Prueba de Anillo en Leche, se correr un prueba serolgica de Rosa de Bengala
a todo los animales en edad reproductiva; si a esta ltima prueba resultaran
positivas, las muestra de suero sanguneo sern remitidos igualmente al Centro
de Diagnstico de Sanidad Animal del SENASA para que se efecte la prueba
confirmatoria de Fijacin de Complemento, siendo este el resultado definitivo.
La Fijacin de Complemento FC- es una prueba confirmativa ampliamente usada y
aceptada. Existen muchas variaciones de FC, pero la prueba ms adecuada se
realiza en formato de microtitulacin.
Una propiedad importante del sistema de complemento es que sus componentes son
enzimticamente alterados, de modo que no reaccionarn en una nueva secuencia de
reacciones, es decir si el complemento es consumido durante las reacciones
antgeno-anticuerpo, esto es llamado FIJACIN DEL COMPLEMENTO y ocurre
cuando un anticuerpo de tipo Ig G o Ig M reacciona con el antigeno en presencia de
complemento, an cuando ste no sea requerido en la reaccin.


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La prueba de fijacin de complemento se lleva a cabo en dos fases: en la primera se
mezclan el suero del animal y el antgeno en presencia de complemento. Si se forman
los complejos antgeno-anticuerpo, el complemento es fijado. En la segunda fase se
aade el sistema indicador que consiste en glbulos rojos de carnero y anticuerpos
contra glbulos rojos de carnero. La ocurrencia de hemlisis indica que el
complemento no fue utilizado, por lo tanto es negativa la fijacin de complemento. La
ausencia de hemlisis indica que el complemento ha sido fijado, por lo tanto es
positiva la fijacin de complemento.
C. SACRIFICIO DE ANIMALES REACTORES A LA PRUEBA CONFIRMATORIA

a. Luego de comprobar la existencia de animales reactores a la Prueba de ELISA
o Fijacin de Complemento (FC), el veterinario autorizado deber extender una
notificacin de animal reactor o reaccionante; en donde constar la
identificacin del animal, establecimiento de origen y destino del mismo. Estos
animales debern ser enviados a faena inmediata o ser aislados hasta su envo
al centro de faenamiento.
b. Todo animal positivo que sea enviado a faena deber ser sacrificado al finalizar
la jornada y el inspector veterinario deber realizar un informe sobre el
resultado post-mortem del mismo.
c. En el centro de faenamiento solamente deben compartir corrales con animales
con el mismo destino.
d. El vehculo que transporte los animales, al desocuparse, debe lavarse y
desinfectarse. Los gastos que se generen por estas actividades sern asumidas
por el transportista.
e. El beneficio se efectuar al final de la jornada, luego de concluidas las faenas
diarias.




D. PRUEBA DIAGNSTICA ANILLO EN LECHE

a. La prueba de anillo en leche (Milk Ring Test) podr emplearse al inicio de la
campaa para:
1. Deteccin rpida de hatos infectados.
2. Mantener la vigilancia epidemiolgica.
3. Conocer la condicin sanitaria de reas fuera de programa.
b. Los reactores positivos a esta prueba, sern verificados con la prueba serolgica
de Rosa de Bengala y confirmados con la Prueba de ELISA y/o Fijacin de
Complemento.

c. Evaluacin de una o mas muestras de leche por cada HATO lechero,
dependiendo de la cantidad de vacas en produccin y el volumen de leche
producida. Una muestra debe obtenerse de no menos 30 litros o kilogramos de
leche producida, para el diagnstico de brucelosis bovina mediante la prueba de
anillo en leche, efectuada tres (3) veces al ao, con un intervalo de 120 das; se


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entiende que los hatos del primer, segundo y tercer muestreo son los mismos
durante el ao. Esta prueba tambin es considerada como selectiva (Screening)
para hatos. Cada muestreo ser del total del nmero de ordeos que efecten
los establos lecheros.

d. Para el registro de la Meta Pruebas de anillo en Leche, se considera como el
nmero de hatos a los que se efectu el muestreo independiente del nmero de
muestras que fueron procesados por cada uno de ellos; ello debe contener el
nmero de animales con que cuenta cada hato de manera que facilite la
informacin. Para el efecto se tendr en cuenta lo establecido en el Formato 4.


F. DIAGNSTICO SITUACIONAL EN NUEVOS REBAOS LECHEROS


EVALUACIN DE CASOS HUMANOS POSITIVOS QUE TIENEN RELACIN
EPIDEMIOLGICA CON CASOS ANIMALES No esta en nuevos productos

Coordinar con los Centros de Salud del Ministerio de Salud -MINSA, a fin de obtener
informacin mensual de todos los casos humanos positivos a brucelosis por Brucella
abortus que se reportan en sus respectivas jurisdicciones. Esta informacin se
respalda con la copia del informe del MINSA, que se conservar en los archivos de la
Direccin Ejecutiva del SENASA respectiva, lo que permitir efectuar la rastreabilidad
a fin de determinar la relacin epidemiolgica con casos positivos animales.

Tener en cuenta que en la mayora de los casos humanos existen grupos de riesgo
donde se documenta relacin con animales, lugar de residencia rural y sobre todo
relacin laboral; Mdicos Veterinarios, trabajo en mataderos, centros lecheros,
engorde, etc., donde el porcentaje de casos de brucelosis por B. abortus debe ser
mucho mayor que el global.

G. MANTENIMIENTO DE REAS LIBRES
PREVALENCIA APARENTE
DIRECTIVA?
La medicin de la ocurrencia de brucelosis bovina en el pas, se dar mediante
estudios de prevalencia, para lo cual cada Responsable del Programa de cada
Direccin Ejecutiva, registrar los resultados de diagnstico de las pruebas
diagnsticas realizadas, en la Opcin: Actividades BB-TBC Bovina, Subopcin:
Vigilancia, del mdulo de Programas del SIGSA; con la finalidad que el nivel central
recopile esa informacin a fin de obtener la prevalencia real a nivel pas.


PRODUCTO 3: PERSONAL DEL SENASA CAPACITADO

a) El personal del SENASA ser capacitado en temas de Tuberculosis y
Brucelosis Bovina, a travs de cursos organizados por el Nivel Central o por la
Direccin Ejecutiva competente.


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b) Con la finalidad de ser considerado y registrado con fines auditables, el
personal participante, deber presentar un Informe del Curso dictado o
recibido, que incluir el Programa del evento y copia del Certificado o
Constancia de capacitacin emitida o recibida; los que debern conservarse en
los archivos de la Direccin Ejecutiva del SENASA respectiva.
c) Los Mdicos Veterinarios que reciban capacitacin tanto en el pas como en el
extranjero sobre Tuberculosis y Brucelosis Bovina, harn una rplica con la
misma metodologa y temas tratados, a todos los Mdicos Veterinarios que
ejecutan las campaas en sus respectivas jurisdicciones y a los Mdicos
Veterinarios de los centros de faenamiento donde se efectuar las
inspecciones de vigilancia zoosanitaria para Tuberculosis y Brucelosis Bovina.
d) Toda esta informacin deber ser registrada en el Sistema Integrado de
Gestin en Sanidad Animal (SIGSA), en el mdulo respectivo.



PRODUCTO 4: PROFESIONALES DE PRCTICA PRIVADA, Y PRODUCTORES DE
GANADO LECHERO CAPACITADOS

Se considerar en este Producto a la capacitacin efectuada a terceras personas
(profesionales de prctica privada, productores, ganaderos o responsables de
ganado), sea en forma grupal o de persona a persona. Los capacitados deben haber
asistido a charla tcnica de no menos de 2 horas y haber firmado una relacin de
asistentes, que est debidamente archivada en la Direccin Ejecutiva respectiva.

REGISTRO DE INFORMACIN
La informacin de las pruebas realizadas se ingresarn en los sistemas informticos
SIP y SIGSA, respectivamente; en los resultados de las pruebas diagnsticas de Rosa
de Bengala (Prueba de Placa) se ingresarn las que se efectan en los hatos del Nivel
I, o sea de los hatos nuevos que durante el ao se inscribieron en el programa. El
ingreso de los resultados de las pruebas diagnsticas de los dems hatos (de ms de
dos aos de participacin en el programa), se registraran en la meta Hatos Nivel II del
SIP o en el item Hatos de Nivel II, del software SIGSA, en las casillas
correspondientes (Rosa de Bengala, Anillo en Lecha, Fijacin de Complemento).
Confirmacin de Hato Positivo

Cuando aparecen animales reactores en los sistemas de vigilancia descritos
anteriormente, se realiza un rastreo para determinar el predio de origen y en caso de
no tener antecedentes de ese predio se procede a confirmar la presencia de brucelosis
en el.

El destino de los animales reactores del plantel en ningn caso puede ser a otro
predio, deben tener como nico destino final obligatoriamente a faena.

MEDIDAS DE CONTROL DE DIFUSIN DE LA ENFERMEDAD



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El objetivo de estas medidas es proteger los predios donde no existe la enfermedad,
ya sea porque se ha saneado o porque nunca estuvo presente.
MODIFICAR
1.- Vacunacin de terneras:
Como accin preventiva en los predios o establos con alta prevalencia es de
responsabilidad de los ganaderos y sus mdicos veterinarios autorizados inmunizar a
las terneras entre los 3 y 8 meses de edad y repetir la dosis antes del empadre.

2.- Control en exposiciones, ferias y remates ganaderos.
Los animales concurrentes a estos eventos debern provenir de predios libres con
certificacin vigente.

3.- Identificacin de animales reaccionantes
Todos los animales reconocidos como reaccionantes a la prueba confirmatoria, deben
ser identificados o marcados en forma oficial en un plazo no superior a 5 das desde la
fecha del diagnstico, pudindose utilizar marcas de no ms de 6 x 4 cm. al fuego o en
fro en el carril derecho.

4.- Manejo de los animales reaccionantes.
Se deber sealar claramente las vas y los plazos en el cual sern eliminados y/o
separados los animales reaccionantes. Debe quedar establecida la prohibicin de
empadre para las hembras reaccionantes que no sean eliminadas inmediatamente. Se
deber identificar de forma especial las cras hembras de madres infectadas, las
cuales no podrn destinarse a la reproduccin.

5.- Manejo de Abortos y disposicin de placentas y fetos abortados.
Para este efecto se debern enterrar profundamente y cubrir con cal viva.

6.- Recomendaciones en el Manejo de Partos
Se puede considerar la existencia de un rea restringida para las pariciones donde se
llevaran las hembras prximas al parto, se deber desinfectar las reas donde se
produzcan los partos, para lo cual se sugiere el uso de productos yodados.


PRODUCTO 5: CERTIFICACIN DE REBAOS LECHEROS, REALIZADA


A. REBAOS INSCRITOS EN EL PROGRAMA DE CONTROL Y ERRADICACIN
DE TUBERCULOSIS Y BRUCELOSIS BOVINA

Todos los predios de ganado bovino de explotacin lechera, deben incorporarse a los
programas de Tuberculosis y Brucelosis Bovina de manera voluntaria, inicindose esta
accin a travs del titular o responsable del establecimiento pecuario en conformidad
con el Mdico Veterinario Autorizado si lo hubiere y el Mdico Veterinario del
SENASA.
La suscripcin se realizar mediante la Ficha de Inscripcin (Declaracin Jurada) en
modelo establecido en el Formato 1, cuyo original con una copia (i) se conservar en
los archivos de la Direccin Ejecutiva del SENASA respectiva, y otra copia (ii) se le
entregar al interesado para el archivo individual del productor lechero.


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La inscripcin de rebaos se registrar en la Opcin: Actividades BB-TBC Bovina,
Subopcin: Certificaciones-Hatos inscritos, del mdulo de Programas del SIGSA.


B. REBAOS CERTIFICADOS OFICIALMENTE LIBRES DE TUBERCULOSIS
BOVINA

Rebaos lecheros previamente inscritos, de acuerdo a lo establecido en el presente
Manual y que cumplen los requisitos tcnicos (pruebas tuberculnicas negativas) para
obtener el Certificado de Establecimiento Oficialmente Libre de Tuberculosis Bovina.

El objetivo de la certificacin es verificar y hacer constar la condicin sanitaria de
ausencia de infeccin por M.bovis en hatos bovinos.

Un rebao para ser certificado como libre de tuberculosis deber realizar una
secuencia de chequeos a la sub-poblacin elegible segn los plazos y la frecuencia
que se indica a continuacin:

Rebaos sin infeccin histrica, entendindose como tales, aquellos rebaos que
han sido clasificados como negativos en las pruebas realizadas para conocer su
condicin sanitaria:
- Contar con tres (3) pruebas de tuberculina (?) realizadas a toda la sub-poblacin
bovina mayor de 4 semanas con un intervalo entre pruebas mnimo de 90 das.
- Si estas pruebas resultaren negativas, el rebao calificar para ser certificado como
LIBRE OFICIALMENTE DE TUBERCULOSIS BOVINA.

- La certificacin ser entregada en forma oficial, una vez aprobada la evaluacin
epidemiolgica que considera las condiciones ambientales y de manejo sanitario que
respaldan la bioseguridad del hato. La certificacin tendr una vigencia de 12 meses.

El medio de verificacin de este procedimiento, estar respaldado con la copia de los
certificados de pruebas diagnsticas negativas (i) y el documento original de la
inscripcin de hato (ii); los que deben constar, en los archivos del programa de la
Direccin Ejecutiva del SENASA correspondiente. Estos documentos se expedirn de
acuerdo al modelo establecido en el Formato 3.

Las certificaciones de hato libre de esta enfermedad, se registrar en la Opcin:
Actividades BB-TBC Bovina, Subopcin: Certificaciones-Hatos certificados, del mdulo
de Programas del SIGSA.

Asimismo la relacin de productores que participan en el programa se registrar en el
SIGSA, debiendo actualizarse anualmente al trmino de las campaas.

Recertificacin de Rebaos Libres de Tuberculosis

Los rebaos certificados como Libres de Tuberculosis Bovina, debern someter a la
sub-poblacin bovina mayor de 04 meses, a evaluaciones peridicas anuales de
recertificacin mediante prueba del Pliegue Ano-Caudal, en un periodo no mayor de 30


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das naturales antes de la fecha de vencimiento de la constancia. En el caso de que se
detecten animales positivos se cancelar la constancia de hato libre.
Los rebaos o establos con una prevalencia del 10% ms de su poblacin total,
quedan obligados a formar rebaos paralelos, con la finalidad de erradicar la
tuberculosis bovina.


C. REBAOS CERTIFICADOS OFICIALMENTE LIBRES DE BRUCELOSIS
BOVINA
La Direccin Ejecutiva del SENASA respectiva, extender un Certificado oficial de
"Rebao Libre de Brucelosis Bovina", para aquellos hatos que hayan reaccionado
negativos a dos (2) pruebas consecutivas de Brucelosis, efectuadas con intervalos de
seis (6) meses. Ver Reglamento
Para el caso de rebaos sin historial de infeccin que efecten la Prueba de Anillo en
Leche, sern declarados oficialmente libres si hubieran realizado en el trmino de un
(1) ao tres (3) pruebas diagnsticas sucesivas, con un intervalo de cuatro (4) meses;
siendo la ltima prueba negativa a Rosa de Bengala.
Un rea puede declararse libre de Brucelosis, cuando todos los rebaos comprendidos
en la zona, estn declarados oficialmente libres de Brucelosis Bovina, desde hace por
lo menos 3 aos.

Rebaos en que se evidencien seropositivos a las pruebas de Brucelosis, debern ser
puestos a aislamiento, eliminando los reactores y repitiendo las pruebas a intervalos
no inferiores a los 30 das, ni mayor de 60 das.
Para mantener o recobrar la condicin de rebao libre de Brucelosis Bovina, todo el
ganado mayor de 12 meses debe ser sometido anualmente a pruebas para
diagnstico de esta enfermedad, con resultados negativos.
PRDIDA DE LA CONDICIN DE PREDIO LIBRE DE BRUCELOSIS BOVINA
Las condiciones por las cuales un predio libre de brucelosis bovina puede perder su
condicin son las siguientes:
- Por trmino del perodo de vigencia de las pruebas diagnosticas.
- Por trmino de la explotacin o venta del hato.
- Por deteccin de bovinos infectados.
- Por no cumplimiento de las condiciones establecidas para predio libre

6. REGISTROS
a. Formato 1 : Solicitud de Inscripcin del Productor
b. Formato 2 : Certificado de Prueba Diagnstica
c. Formato 3 : Certificado de Establecimiento Oficialmente Libre


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d. Formato 4 : Certificado de Prueba Diagnstica de Anillo en Leche para
Brucelosis Bovina
7. ANEXOS
ANEXO I: METODOLOGA PARA LAS PRUEBAS DIAGNOSTICAS DE
TUBERCULOSIS BOVINA

8. CONTROL DE CAMBIOS
PARRAFO DICE DEBE DECIR









FORMATO 1


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ANEXO I

METODOLOGA PARA LAS PRUEBAS DIAGNOSTICAS DE TUBERCULOSIS
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1. PRUEBA PLIEGUE ANO-CAUDAL

a. MATERIAL
1. Jeringa de tuberculina, en lo posible automtica.
2. Agujas de tuberculina descartable 25G x 5/8.
3. Tuberculina PPD Bovino mamfero
4. Papel absorbente o algodn hidrfilo

b. PUNTO DE INOCULACIN
1. Se inyecta en forma intradrmica a unos 6 cm de la base de la cola y en
la parte central del pliegue externo, 0,1 ml de PPD Bovino mamfero.
Una vez inoculada la tuberculina debe quedar a la vista y palpacin un
pequeo ndulo del tamao de una lenteja, su ausencia indicar que la
inoculacin fue subcutnea, por lo cual la operacin deber repetirse en
el mismo punto.
2. No se deben utilizar desinfectantes o productos qumicos que irriten la
piel de la regin.
3. Generalmente se utiliza el pliegue ano-caudal izquierdo del animal por
ser ms cmodo para trabajar, antes de la aplicacin se debe visualizar
si la zona de inoculacin no tiene alguna lesin o tumoracin que pueda
interferir en la posterior lectura, en ese caso se debe aplicar en el
pliegue opuesto y anotar en la planilla dicha anotacin.
4. No se deben utilizar sobrantes de tuberculina de un da para otro.

c. LECTURA E INTERPRETACIN:
1. La lectura de la tuberculinizacin se realizar a las 72 horas (+/- 6
horas) post inoculacin y en ella se pueden encontrar bsicamente dos
(2) tipos de reacciones:
- Un engrosamiento circunscrito o
- Un edema difuso del pliegue.


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2. A la lectura de la prueba de tuberculina los bovinos sern clasificados
como Negativos o Reaccionantes.

d. NEGATIVOS: Cuando no se observe, ni se palpe ningn cambio en la piel
del sitio de aplicacin de la tuberculina.

e. REACCIONANTES: cuando sea visible y/o palpable cualquier
engrosamiento, rubor, calor, dolor o necrosis en el sitio de aplicacin.





2. PRUEBA CERVICAL SIMPLE
La sensibilidad de la prueba cervical es superior a la del pliegue ano-caudal,
ella se aplica con el fin de obtener una mayor seguridad en la eliminacin de
bovinos infectados en hatos en los que se ha comprobado la infeccin.

a. MATERIAL
1. Tijeras curvas de aproximadamente 15 cm de largo y con punta
roma-roma, para depilacin.
2. Cutmetro o pe de metro.
3. Jeringa de tuberculina, en lo posible automtica.
2. Agujas de tuberculina descartable 25G x 5/8.
5. Tuberculina PPD Bovino mamfero
6. Papel absorbente o algodn hidrfilo

b. PUNTO DE INOCULACIN:
ste se encuentra ubicado en el lmite entre el tercio anterior y medio de
la tabla del cuello, en un punto equidistante del surco yugular y borde
superior del cuello.
A las personas que trabajan con la mano derecha se les recomienda
inocular en el lado izquierdo del cuello del animal y a los zurdos en el
lado derecho.

c. DEPILACIN:
Se realizar en el lugar anteriormente descrito y abarcar un rea de
2 3 cm de dimetro.

d. MEDICIN:
Se tomar un pliegue de piel del rea depilada y se proceder a su
medicin utilizando un cutmetro o pe de metro. La lectura obtenida se
registra en el Protocolo de Tuberculinizacin junto a la identificacin del
animal correspondiente.

e. INOCULACIN:
Se inocular intradrmicamente y en forma oblicua (45) a la piel una
dosis de 0,1 ml de tuberculina PPD Bovina. La aguja debe insertarse en
las capas superficiales de la piel, retirarse levemente e inyectarse la


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tuberculina. Una vez realizada la inoculacin debe quedar a la vista o
en forma visible un pequeo ndulo del tamao de una lenteja; su
ausencia indicar que la inoculacin fue subcutnea, por lo cual deber
repetirse en el mismo punto.

f. LECTURA DE LA PRUEBA:
Se realizar a las 72 horas (+/- 6 horas) post inoculacin y en ella se
considerarn slo dos (2) factores: aumento de grosor del pliegue de la
piel o su induracin, ambos expresados en milmetros. La lectura se
har con cutmetro o pe de metro para determinar el aumento de
grosor y con una regla para medir la induracin.

g. INTERPRETACIN:
Certificacin Sanitaria de Exportacin.
Se considerarn Reaccionantes aquellos animales que responden a la
prueba con un aumento de grosor del pliegue de la piel igual o
superior a 2 mm.

3. PRUEBA CERVICAL DOBLE COMPARATIVA

Esta prueba puede realizarse dentro de los 10 das posteriores a una prueba
ano-caudal o en su defecto, despus de transcurridos 60 das.

a. MATERIAL
1. Tijeras curvas de aproximadamente 15 cm de largo y con punta
roma, para depilacin.
2. Cutmetro o pe de metro.
3. Dos jeringas de tuberculina, en lo posible automticas.
4. Agujas de tuberculina descartable 25G x 5/8.
5. Tuberculina PPD Bovino mamfero y PPD Aviar
6. Papel absorbente o algodn hidrfilo
7. Regla

b. PUNTO DE INOCULACIN:
El punto de inoculacin para el PPD Aviar se encuentra ubicado a unos
10 cm por debajo del borde superior del cuello, en el tercio anterior y
medio de la tabla de cuello. Y para el PPD Bovino, el punto se localiza
12,5 cm. ms abajo que el punto dado para el PPD Aviar.

c. DEPILACIN
En los lugares anteriormente descritos, se realizar la depilacin de
una superficie de la piel de 2 - 3 cm. de dimetro aproximadamente.

d. MEDICIN
En ambos puntos de inoculacin, se tomar un pliegue del rea
depilada y se proceder a su medicin, utilizando el cutmetro o pi de
metro. Se anotar el valor obtenido (lectura inicial) y la identificacin
del animal correspondiente en el protocolo de Registro de


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Tuberculinizacin, de acuerdo al modelo del Formato 2. La anotacin
deber hacerse en milmetros, con un decimal.

e. INOCULACIN
Se inocular intradrmicamente y en forma oblicua a la piel, con
jeringas especficas para cada tuberculina, una dosis de 0,1 ml de PPD
Aviar (zona depilada superior) y 0,1 ml de PPD Bovino (zona depilada
inferior). La aguja debe insertarse en las capas superficiales de la piel,
retirarse levemente e inyectarse la tuberculina. Una vez realizada la
inoculacin debe quedar a la observacin y palpacin un pequeo
ndulo del tamao de una lenteja; su ausencia indicar que la
inoculacin fue subcutnea, por lo cual deber repetirse en el mismo
punto.

f. LECTURA DE LA PRUEBA
Se realizar a las 72 horas (+/- 6 horas) post inoculacin, la lectura se
har con cutmetro o pe de metro para determinar el aumento de
grosor en cada punto de inoculacin y los resultados obtenidos (lectura
final) deben anotarse inmediatamente en el Registro de
Tuberculinizacin, frente a la identificacin del animal correspondiente.

g. INTERPRETACIN DE RESULTADOS
- Se deber calcular la diferencia entre la lectura final y la inicial
expresada en milmetros con un decimal, de cada tuberculina, anotando
el resultado. Se recomienda no hacer los clculos en la manga o
corrales, a fin de no cometer errores.
- Con las cifras de las diferencias de ambos PPD, de cada uno de los
bovinos inoculados, se procede a representar grficamente los puntos
obtenidos en el Grfico de Interpretacin.
- Segn el rea en que las lecturas de diferencias sean representadas
vamos a observar tres (3) tipos de resultados.
- Esta prueba permite obtener tres tipos diferentes de animales
reaccionantes a PPD Bovino: los positivos, los sospechosos y los
negativos.
* Positivos, bovino que presenta diferencias en las lecturas del PPD
Bovino superiores a las observadas con el PPD Aviar y cuya
representacin grfica combinada las sita en el rea denominada
POSITIVO del grfico, ya sea en la interpretacin severa o estndar.
* Sospechoso Bovino cuyas diferencias tanto en la lecturas de PPD
Bovino y Aviar al ser representadas en el grfico, caen en la zona
denominada SOSPECHOSO, tanto en la interpretacin estndar como
severa
* Negativos a PPD Bovino: Bovino que presenta diferencias en las
lecturas del PPD Aviar superiores a las observadas con el PPD Bovino
y cuya representacin grfica combinada las sita en el rea
denominada NEGATIVO del grfico, ya sea en la interpretacin
estndar como severa




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ANEXO II

METODOLOGA PARA LAS PRUEBAS DIAGNOSTICAS DE BRUCELOSIS
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1. PRUEBA ROSA DE BENGALA

La aglutinacin en sus diferentes modalidades, entre ellas Rosa de Bengala, es la
prueba ms utilizada debido a su rapidez y sensibilidad. El aumento significativo del
ttulo de anticuerpos es la base diagnstica de la enfermedad.
PROCEDIMIENTO
i) Llevar las muestras de suero y de antgeno a temperatura ambiente (22+4C);
slo debe sacarse del refrigerador el antgeno suficiente para las pruebas del
da.
ii) Colocar 25-30 ul de cada muestra de suero en una baldosa blanca, placa
esmaltada o de plstico, o en una placa para hemaglutinacin de la OMS.
iii) Agitar bien la botella de antgeno, pero suavemente, y colocar el mismo
volumen de antgeno prximo a la gota de suero.
iv) Inmediatamente despus de aadir la ltima gota de antgeno en la placa,
mezclar cuidadosamente el suero y el antgeno (usando un portaobjetos
limpio o una varilla de plstico para cada prueba) hasta producir una zona
circular u oval de aproximadamente 2 cm. de dimetro.
v) La mezcla se agita suavemente durante 4 minutos a temperatura ambiente
en un agitador circular o tridimensional ( si la zona de reaccin es oval o
circular, respectivamente.
vi) Comprobar la aglutinacin tan pronto como se completa el periodo de
cuatro minutos. Cualquier reaccin visible se considera positiva. Antes de
las pruebas de cada da se debe probar un suero control que origine una
reaccin positiva mnima para comprobar la sensibilidad de las condiciones
de la prueba.
La prueba Rosa de Bengala es muy sensible. Sin embargo, como toda prueba
serolgica, a veces origina una reaccin positiva debido a una vacunacin o a
reacciones positivas falsas. Por tanto, las reacciones positivas deben confirmarse
con estrategias confirmativas (que incluyan tanto la realizacin de otras pruebas
como la investigacin epidemiolgica). Sin embargo, Rosa de Bengala es
adecuada como una prueba de anlisis para detectar rebaos infectados o para
garantizar la ausencia de infeccin en rebaos libres de brucelosis.

2. PRUEBA FIJACIN DE COMPLEMENTO (FC)


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PROCEDIMIENTO
Los sueros problema sin diluir y los estndar se inactivan por 30 minutos en bao de
agua a 60 C + 2 C. Con el empleo de placas de microtitulacin estandar de 98
pocillos de fondo redondeado (en U), la tcnica se realiza as:
j) En el pocillo de la primera, segunda y tercera filas, se colocan 25 ul de suero
problema inactivado diluido. La segunda fila es un control anticomplemento
para cada suero. Se aade a los pocillos de la primera fila 25 ul de tampn FC
(controles anticomplemento) para compensar la falta de antgeno. A todos los
otros pocillos se aade 25 ul de tampn FC excepto a los de la segunda fila. A
continuacin se hacen diluciones dobles seriadas transfiriendo volmenes de
25 ul de suero de la tercera fila en adelante.
ii) A cada pocillo, excepto en la primera fila, se aade 25 ul de
antgeno, diluido a la concentracin de trabajo, y 25 ul de
complemento, diluido al nmero de unidades requerido.
iii) Se establecen controles con diluyente, solo suero + complemento +
diluyente, antigeno + complemento + diluyente, que contengan en
cada caso 75 ul de volumen total. En cada serie de pruebas debe
probarse un suero control que d una reaccin positiva mnima para
comprobar la sensibilidad en las condiciones de la prueba.
iv) Las placas se incuban a 37C por 30 minutos o durante toda la
noche a 4 C y se aade a cada pocillo un volumen de SRBCs
sensibilizados (25 o 50 ul segn la tcnica). Las placas se
reincuban a 37C por 30 minutos.
v) Los resultados se leen despus de centrifugar las placas a 1.000 g
durante 10 minutos a 4C y despus dejarlas en reposo a 4 C
durante 2-3 horas para permitir que sedimenten las clulas no
lisadas. El grado de hemlisis se compara con estndares que
correspondan a una lisis del 0, 25, 50, 75, y 100% de lisis. La
ausencia de actividad anticomplementaria se comprueba en la
primera fila para cada suero.
INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS
Los sueros con un ttulo equivalente a 20 UIFC/ml o ms, se consideran positivos.
La prueba FC es muy especfica. Sin embargo, como todas las pruebas
serolgicas, puede dar un resultado positivo, debido a vacunacin.

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