Alumno Mblgo: Rodrguez Camarena, Eric

Docente: Dr. Pedro Mercado Martnez

Es una Bacteria cido Alcohol
resistente.

Arobica estricta
No se pueden Clasificar en Gram
Positivas o en Gram Negativas

Muy resistente al fro Y Sensible
al calor, la luz solar y ultravioleta.
Se multiplica cada 16 a 20 horas

Tiene la capacidad de entrar en
estado latente retrasando su
multiplicacin desde algunos das
hasta varios aos.

Inmoviles y no produce
endosporas, ni capsula




Contienen una pared gruesa,
hidrofobica, cerosa, y rica en acidos
micolicos/micolatosque le confieren
resistencia

Utilizan amonaco como fuentes de
nitrgeno y glicerol como fuente de
carbono en presencia de sales
minerales.

Dosis infectante es baja

Un paciente con TBC activa sin
tratamiento puede infectar entre 10-
15 personas por ao.



Bacilo con una Longitud de 1 a 4 micras y 0,3 a 0,6 micras de dimetro
MICROSCOPICA
MEMBRANA CITOPLASMATICA
LPP. lipoarabinomananos (LAM)

Fosfatidil-inositol-mansidos.
LIPIDOS


Le dan la propiedad de
de ser BAAR
BACILOS
ACIDOS
ALCOHOL
RESISTENTES
Acidos Micolicos
lesiona las membranas
mitocondriales
Ceras
Fosfatos Inducen a la
necrosis

PROTEINAS
Otorgan la
Reaccin de la
Tuberculina

Formacin de
Anticuerpos

ANTIGENOS
Grupo l
Todas la especies
Grupo ll y III
presente en la
cepas de
crecimiento
lento y rapido
Grupo lV
Especificos de la
especie

POLISACARIDOS
Hipersensibilidad

Antigeno en la
reacciones de
personas
infectadas
COMPONENTES
Factor CORD
Forman Cordones
Microscopicos que le
conceden la virulencia

Provocan Granulos mas
Cronicos. Inhiben la
Diapedesis Leucocitaria y
lesiona las Mitocondrias
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No hay respuesta inmediata del husped (Factores de
virulencia no determinados) por carecer de endotoxinas y
exotoxina.
Factor cuerda ( dimicolato de trehalosa)
Las cepas virulentas crecen con un patrn en forma de
cuerda en serpentina.
Lpidos (dimicocerosatos de tiocerol).
Patogenia
La interaccin de M. tuberculosis con el husped comienza
cuando las gotitas infecciosas son inhaladas. La mayor parte
de los bacilos quedan atrapados en las vas respiratorias
superiores y son expulsados por el barrido ciliar de las clulas
de la mucosa y llegan hasta los alvolos.
PATOGENIA
En alveolos pulmonares, son fagocitados por macrfagos alveolares
En cuyo interior permanecen y se replican aproximadamente cada 25 horas
En esta etapa los macrfagos no destruyen a los bacilos en multiplicacin
Progreso de infeccin es limitado por induccin de inmunidad adaptativa
(respuesta celular Linfocitos T)
Inmunodeficiencias primarias o desnutricin favorecen multiplicacin bacilar
Principales caractersticas de la tuberculosis: la infeccin para organizar la defensa.
Reaccin de hipersensibilidad retardada a diversos antgenos bacilares
y destruye los macrfagos no activados que albergan a los bacilos en
fase de multiplicacin.
En la mayora de infecciones los macrfagos locales se activan cuando
los antgenos bacilares procesados por los macrfagos alveolares
estimulan los linfocitos T para que liberen diversas linfocinas.

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Respuesta celular
Antgenos micobacterianos procesados por clulas
dendrticas y macrfagos (presentadoras de antgenos, CPA)
Presentados a linfocitos T CD 4 y CD 8
IL 2 (CPA) LT CD4 Forman clonal Th1 (productora IL2,
TNF b e INF g)
INFg : activador de macrfagos, que as son capaces de matar
y digerir bacilos intracelulares que lo infectan
En sitios de multiplicacin de micobacterias se acumulan
macrfagos y LT activados Granulomas
Pequeo nmero bacilos vivos en estado latencia en el
granuloma (Tuberculosis latente)

Respuesta inmune celular contra M. tuberculosis
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Inmunidad:
Inmunidad celular.
FISIOPATOLOGA
Resistencia a ser Destruido
Altera la vesicula pinocitica
Bloquea la Apoptosis del Macrofago
Bloquea la Presentacin Antigenica
Apoptosis de la Celulas T

21

Lesiones exudativas. Respuesta inflamatoria aguda
Lesiones granulomatosas. Clulas gigantes de Langhans
Clulas epiteloides.
Tubrculo:es un granuloma rodeado por tejido fibroso que
ha experimentado una necrosis caseosa central. Cicatrizan
por fibrosis y calcificacin.
Complejo de Ghon: conjunto de lesiones parequimantosas
exudativas los ganglios linfticos.

Siguen viviendo en
el interior de los
macrfagos
Los bacilos
permanecen activo y
latente, pero sin
progreso.
Respuesta monocitaria
y de macrfagos
Bacilo
destruidos en el
mismo sitio de
inoculacin
Reaccin inflamatoria inespecfica
alvolos
Los bacilos
penetran
A las 48 horas Los bacilos
TUBERCULOSIS PULMONAR
FISIOPATOLOGA
AISLAMIENTO PRIMARIO
MUESTRAS RESPIRATORIAS
Vias Altas
Esputo
Lavados Bronquiales
Lavado Bronqueo Alveolar

MUESTRAS
Lowentein-Jensen Medio Base.
MiddleBrook
Sales Inorganiscas proporcionan
sustancias escenciales
Citrato Sodico ayuda a mantener
cationer inorganicos

Catalasa destruye los peroxidos toxicos

Sustancias escenciales y de
enriquecimiento
De 3 a 5 semanas
BALTEC 12 B

Base de MiddleBrook
Albumina de suero bovino
Polemicina B
Anoterimicina B
Trimetropim
Acido Palmitico
marcado como 14c
como detector de crecimiento
Se librea 14CO2 que se mide
para indicar el indice de crecimiento

HEMOCULTIVOS
HECES
ORINA
OTRAS MUESTRAS ESTERILES
ALGORITMO DE IDENTIFICACIN
Tincin de Bacilos Acido-
Alcohol Resistentes
MUESTRA DE AILAMIENTO PRIMARIO
Ziehl-Neelsen Kinyoun Auromina O
POSITIVA
Mycobacterium
tuberculosis presuntivo
Formacin de
Cordones

POSITIVA
Medios de
Cultivo
Inocular
BACTEC MGIT
crecimiento
POSITIVO
Frasco NAP
Crecimiento
POSITIVO
Inocular los
Medios de Cultivo
Middlebrook Lowenstein
Jensen
Crecimiento
POSITIVO
Pruebas
Bioquimicas
Sondas de
Ac. Nucleicos
Observar
Micro
colonias

Nido de Aves

Formacin de
Cordones
POSITIVA
Tcnicas diagnsticas

Convencionales:
Cuadro clnico
Antecedente
epidemiolgico
Hallazgos radiolgicos
PPD

Ziehl Neelsen

Cultivo d Lowestein
Jensen
Estudio histopatolgico
Nuevas:
BAAR auramina
Cultivos lquido
Dubos, Middlebrook 7H9,
Bactec 12B y Bactec
13A, MGIT, etc.

PCR (reaccin encadena de
lapolimerasa)

Tets directo de M tuberculosis M12
Serolgicas , ADA

Mtodos diagnsticos en
Tuberculosis
Mtodo Carga Bacilar Sensibilidad
BAAR 5,000-10,000 50-80 %
Cultivo L-J 1-10 80-90 %
PCR 1-10 97 %
- Se basa en el mismo principio de la cido-alcohol resistencia
- VENTAJ AS:
- Los BK se ven fluorescentes --> M. menos aumentos (200-400)
- Menor tiempo de observacin (2-3 minutos para BK-)
- INCONVENIENTES:
- Equipo tcnico y materiales ms costosos y complejos
- Necesidad de un aporte elctrico continuo.
- La tincin Z-N debe confirmar. Observa mejor los BK

Aunque es igual de eficaz que Z-N, slo est indicada
en laboratorios que procesan + de 25-30 BK por tcnico
Nuevas Tcnicas en el Dx. de la TB
en la baciloscopia
- TINCION CON FLUOROCROMOS /AURAMINA-
BACTEC 460 TB
1979
Meddlebrook y Siddiqi

Mide el indice de crecimiento M
tuberculosa
Lquidos Middlebrook

Bactec 7H12B
Ac. Palmitico marcado con C14
se capta y se transforma en
una camara de iones leida por
sensor
Sensibilidad
antimicrobiana(HRSE)
Resultado a los 8-15 das
LIMITACIONES
Costos elevados
Utilizacin isotopos
radiactivos
Procesar un gran nmero de
muestras
Equipo semiautomatizado
Requiere personal
especializado
Debe ser utilizado en
laboratorios de 3 nivel
Tubo indicador de
bacteriano MGIT
crecimiento
Tecnica Ventajas
Reduce contaminacin
cruzada
No emplea agujas para
inoculacin
No Istopos radiactivos
Es mas econmico
1.


Lquidos Middlebrook
Halo de fluorescencia
sensible al oxigeno
7H9,
2.
3.
Lectura: Complejo metlico
que en presencia O2 emite
luz ultravioleta
4.
Desventajas
Altos rangos de contaminacin
Falsos positivos
Deteccin en 24 hs
1.


Resultado
Ventaja
2 a 3 horas
2.
3.
Tubo indicador de crecimiento
bacteriano MGIT
Caractersticas comunes:
-
-
-
-
No invasivos
No radioistopos
Totalmente automatizados. Lectura continua
Identificacin y antibiograma de M. tuberculosis sin
necesidad de hacer subcultivos.
Sensibles y rpidos.
Muy costoso
-
-

MBBACT
Organon Technica

BACTEC MGIT
Becton - Dickinson

ESP II
Difco

Nuevas Tcnicas en el Dx de la TB
Cultivos Lquidos Automatizados
No Radiomtricos
Indicaciones del cultivo para
diagnstico

Sintomtico respiratorio (sospechoso de tuberculosis pulmonar)
reiteradas baciloscopas negativas ( 2 series)
Sospecha de TB extrapulmonar (paucibacilares)

Sospecha de TB en nio


Sospecha de TB-SIDA


Sospecha de TB renal o genitourinaria

Otras
Tipificacin

Confirmacin de fracaso


Susceptibilidad a antuberculosos

Cuando Incorporar Nuevas
Diagnsticas
Tcnicas
Tb extrapulmonar
Tb
SIDA

Pobre carga bacilar

Priorizar el uso de acuerdo
de riesgo
a los factores
PCR (Reaccin en cadena de la
polimerasa)
contaminacin ambiental
DNA o RNA (falsos
Pruebas diagnosticas rapidas en Tuberculosis.
?Cual es su uso apropiado? American Riv.
SocTaller99

Inconveniente
problemas de
con fragmentos libres de
positivos)
Costos elevados
Laboratorio especializado
Personal capacitado

Detecta y amplia una secuencia
genmica DNA o RNA (Gen.probe MTD
o AMPLICOR, otros)
Permite identificar al Complejo
M. tuberculosis en secuencia
IS6110 de otras micobacterias ( MNT)
Gran sensibilidad puede detectar
muestras con carga bacilar baja (1-
10 bacilos)
Especfica ya que reconoce gnero
y especie en unas cuantas horas
En muestras de esputo y liq pleural
sensibilidad del 90-100%
GENMA DE LATUBERCULOSIS
LECTURA DE PCR
PCR para diagnstico
Complejo M. tb.
secuencia de insercin
IS6110.
Los fragmentos de 123pb
Especie M. tuberculosis
iniciadores para la
secuencia mtp40.
Los fragmentos de 358pb
358pb
- TB Pulmonar BK+:
Sensibilidad y Especificidad >98%, tanto ADN como ARN
- TB Pulmonar BK-:
ARN:
ADN:
Sensibilidad: 83-85% (aumentan 2-3.000 la diana de amplif. Respecto a ADN)
Sensibilidad: 50-60% (Su diana est presente en pocas copias en el genoma
Micobacteria.
- TB Extra-Pulmonar:
ARN:
ADN:
Sensibilidad: 65-77% (aumentan 2-3.000 la diana de amplif. Respecto a ADN)
Sensibilidad:
PCR: <30-40% (no son eficazmente eliminadas subst. Inhibidoras de l muestra)
LCR: 71-78% (S consigue eliminar eficazmente las subst. inhibidoras)

Tcnicas de Amplificacin Gentica
Resultados
Nuevas Tcnicas de
de
I dentificacin Micobacterias
1.- Cromatografa
2.- I dentificacin por
Sondas Genticas
3.-Otras Tcnicas Moleculares

Nuevas Tcnicas en el Dx. de la
TB
Identificacin por PCR-RFLP
Digestiones con BstEII y

HaeIII de productos de
PCR del gene de la
protena hsp65 de
aislados de M.
tuberculosis y
M. intracellulare.
TETS DIRECTO DE M. tuberculosis MT2
El bcilo es identificado por hibridacin
molecular en sondas de DNA marcadas
ester acrinidina y RNA ribosomal
con
Resultado 2 a
3 hrs.
En muestras repiratorias:

Sensibilidad 94.7%

Especificidad 100%
Journal of. Clinical Microbiology 1996 Pag.834-841
JAMA feb2 20 02 VOL283pag 639-645
LUMINOMETRO
PRUEBA DE MT2
Identificacin por HPLC
M. terrae
M intracellulare
M. tuberculosis
CONCLUSIONES
Las pruebas moleculares pueden ser un apoyo
importante en el diagnstico de la tuberculosis.
En la clnica, la PCR es una herramienta, valiosa pero
no definitiva para el diagnstico.
Desde el punto de vista epidemiolgico, la
informacin que las pruebas moleculares aportan es
nica e invaluable.
En otros aspectos identificacin de aislados y
deteccin de resistencia, se requieren mas estudios.
Todava existen problemas para que las pruebas
moleculares puedan usarse a nivel general.

Nuevas tcnicas en el Dx deTb

Pruebas serologicas
Sanos >10 4.

Utilidad diagnstica
Sensibilidad %
1. TBP+ 65-85
2. TBP - <50
3. EXTRAPULMONAR <25-40
4. TB SEROSA <20
5. TB INFANTIL <20
Especificidad
1. TB Residual >50
2. Micobacteriosis >30
3. Infectados TB >10

Mtodo
1889 primer intento
Deben detectar el 90 %

de los casoc Z-N +
ELISA : estracto soluble de
cepa danesa
Absorcin en placa de
microtitulaciones y se adiciona
el suero problema
Sensibilidad depende de la
tecnica ELISA
Especificidad depende de la
naturaleza protica o lipidica