Lambayeque, Junio del 2014 1. Mencione las etapas involucradas en el manejo de cultivos.
El manejo de un cultivo microbiolgico involucra las siguientes etapas: a) El aislamiento del microorganismo. b) La conservacin del microorganismo. c) La preparacin del medio de cultivo en el que se desarrolla. d) La preparacin del inculo. e) El escalamiento f) La produccin industrial.
Cada una de estas etapas es importante, y algn descuido en algunas de ellas puede conducir todo el proceso al fracaso.
2. Comente las siguientes expresiones:
a) Solo los cultivos puros pueden ser utilizados en la industria; esto se debe a que en algunos procesos industriales es imprescindible que se encuentre solo un tipo de microorganismo, mientras que en otros es necesario la presencia de un conglomerado de ellos para que se puedan alcanzar los objetivos esperados. b) En todos los procesos de fermentacin en necesario mantener condiciones estrictas de esterilidad en el equipo de produccin; ya que esto permitir el crecimiento y desarrollo adecuado del microorganismo, pues si se hallan presentes otros microorganismos, estos competirn por los nutrientes del medio, haciendo que la cepa de inters desaparezca o disminuya significativamente la produccin de metabolitos.
3. Describa las tcnicas utilizadas para el aislamiento de microorganismos.
Siembra en placa Petri por rayado. Esta tcnica se basa en la separacin de los microorganismos al dispersar por rayado sobre agar una muestra que los contiene. Siembra en placa vertida. En esta tcnica se hacen crecer los microorganismos en tubos, cada uno con una concentracin diferente, y se evala el tubo en el que las colonias crecieron en forma separada. Diluciones en serie. Esta tcnica se aplica cuando se conoce de antemano que el microorganismo de inters se encuentra en mayor cantidad que los dems.
4. Cite dos ventajas y dos desventajas de cada uno de los mtodos de conservacin de microorganismos. Resiembra o el subcultivo. Ventajas: Los procedimientos son simples No requiere de equipos especializados y costosos. Desventajas: la deshidratacin del medio y muerte del microorganismo. Alta posibilidad que el cultivo se contamine durante las resiembras. La desecacin. Ventajas: No se requiere un equipo especial ni mucho personal para ejecutarlo. Si no se contamina, el cultivo puede permanecer viable por muchos aos. Desventajas: No todos los microorganismos sobreviven a este mtodo. Mayormente son utilizados para microorganismos formadores de esporas. La congelacin. Ventajas No necesita mucho personal para ejecutar el mtodo. Se puede utilizar por periodos largos o cortos de tiempo. Desventajas El costo del equipo y mantenimiento de cultivos es alto. Se siembra en tubos inclinados, habiendo posibilidad de contaminacin en la resiembra. La liofilizacin. Ventajas puede mantener la viabilidad por 20 aos o ms. No requiere resiembras, evitando la contaminacin. Desventajas La inversin inicial es en la adquisicin del equipo es alta. 5. Menciones los grupos bsicos de nutrientes requeridos por los microorganismos, adems del agua y el oxgeno en el caso de los aerobios. Incluya tres ejemplos de cada uno. Energa: (fottrofos y Quimitrofos) energa de la luz o radiacin solar compuesto qumico inorgnico compuesto qumico orgnico Carbono: (Auttrofos y Hetertrofos) Melazas de caa y remolacha Granos de cereales, almidn, glucosa, sacarosa y lactosa Aceites comerciales. Nitrgeno: Licor de maceracin de maz, la harina de soya, los frijoles de soya. Hidrolizado de casena, desechos de matadero Harina de pescado y extracto de levadura. Minerales y vitaminas Fosfatos como principal fuente de fsforo. Azufre, presente en coenzimas. Fsforo, contribuye en el crecimiento celular y es un importante componente estructural.
6. Defina los siguientes trminos. a) Microorganismos organtrofo hetertrofo, microorganismos que son capaces de obtener su energa de un compuesto qumico orgnico y estos constituyen tambin su fuente de carbono.
b) Microorganismos fottrofo, microorganismos que obtienen la energa de la luz o radiacin solar.
c) Medio de cultivo sinttico, los medios sintticos se preparan a partir de compuesto puros en proporciones definidas.
d) Medios de cultivo complejos, se preparan a partir de ingredientes de origen natural cuya composicin qumica no est del todo definida. 7. Explique cundo es importante la utilizacin de un medio de cultivo sinttico y cundo un medio de cultivo complejo. Medio de cultivo sinttico, su mayor aplicacin se genera en el rea de la investigacin, porque es posible determinar los requisitos especficos para el crecimiento de los microorganismos o la formacin de un determinado producto. Medio de cultivo complejo, su composicin varia con el tiempo y el lugar y la forma de almacenamiento; ejemplo: extracto de carne, melazas, harina de semillas de algodn, harina de soya y agua de maceracin de maz.
8. Qu factores se deben tomar en cuenta durante la formulacin de medios? Rendimiento del producto por gramo de sustrato Concentracin del producto Velocidad de formacin del producto y Rendimiento de productos indeseables. Adems debe ser barato y de calidad adecuada. Estar disponible todo el ao y No ocasionar problemas serios en el rea de produccin.
9. Se utiliza el mismo medio de cultivo durante todas las etapas involucradas en la produccin de un metabolito? Explique. El medio de cultivo utilizado durante todo el proceso industrial no es necesariamente el mismo. Por lo general, el medio usado para la preparacin del inculo es diferente al utilizado en el proceso de produccin, porque cumplen diferentes funciones.
10. Describa brevemente cada una de las etapas involucradas en la preparacin de un inculo. Recuperacin de la cepa, para la recuperacin de la cepa, depender especficamente del mtodo de conservacin utilizado, que puede ser por liofilizacin, congelado, secado, etc. Crecimiento de microorganismos en un medio de cultivo slido, una vez preparada la suspensin de microorganismos, se toma una asada y se raya en un medio de cultivo slido en el interior de tubos de agar inclinado. Se incuba a temperatura y tiempo adecuados. Crecimiento en un medio de cultivo lquido, se toma una asada del crecimiento del microorganismo en el medio de cultivo slido y se introduce en matraces Erlenmeyers de 100 250 que contienen un medio de cultivo lquido. Luego se esteriliza y se incuban, de acuerdo con los requerimientos ambientales del microorganismo.