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ASSOCIAO DE EDUCAO E CULTURA DE GOIS -

AECG
CURSO DE BIOMEDICINA





LQUIDOS CORPORAIS II
POPs DO LQUOR



Aline Fernanda de Souza
Brunno Cmara Lopes Costa
Rodolfo Marcelino de Barros
Tamires Rodrigues de Avelar



GOINIA
2010
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Aline Fernanda de Souza
Brunno Cmara Lopes Costa
Rodolfo Marcelino de Barros
Tamires Rodrigues de Avelar




LQUIDOS CORPORAIS II
POPs DO LQUOR










GOINIA
2010
Trabalho realizado como critrio de
complementao da nota de N1 da
disciplina de Lquidos Corporais II da
professora: Rhalcia Cristina.

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INTRODUO
Descoberto em 1964 por Cotugno, o lquido cefalorraquidiano o terceiro principal
fluido biolgico. Trata-se de um sistema fisiolgico destinado a distribuir nutrientes pelo
tecido nervoso, retirar resduos metablicos e servir de barreira mecnica para amortecimento
dos traumatismos que porventura atinjam o encfalo e medula espinal. produzido em
quantidade de aproximadamente 20 mL por hora nos plexos corides, quantidade essa
reabsorvida pelos vilos aracnideos para manter um volume total de 90 a 150 mL em adultos
e 10 a 60 mL em recm-nascidos.
Sua produo nos plexos corides ocorre por filtrao sob presso hidrosttica atravs
das paredes dos capilares corides. As junes estreitamente ajustadas entre as clulas
endoteliais dos capilares e dos plexos corides restringem a entrada de macromolculas, como
protenas, lipdeos insolveis e substncias ligadas s protenas sricas.

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Lquido Cefalorraquidiano, LCR, Lquor.
1. PRINCPIO
1.1 Exame Fsico
Deve-se verificar o volume, aspecto e cor do lquor. O volume pode ser varivel, mais
ou menos 10 mL em cada um dos trs tubos. A cor no seu estado normal incolor, mas pode
variar em xantocrmico, hemorrgico, esbranquiado e esverdeado. O aspecto em seu estado
normal lmpido cristalino, mas, tambm pode variar em ligeiramente turvo, turvo ou leitoso.

1.2 Exame Hematolgico

Usado para contagem de clulas como hemcias e leuccitos. usada uma Cmara de
Neubauer para a contagem dessas clulas.
- As hemcias devem ser contadas colocando a amostra diretamente nos nove quadrantes da
Cmara de Neubauer e depois jogando na frmula de clculo-padro, se tiver sobreposio de
hemcias, pode estar diluindo a amostra com soluo salina (NaCl a 0.9%). Em estado
normal, no so visualizadas hemcias.
- Para contagem de leuccitos deve-se lisar primeiro as hemcias com a adio de cido
actico glacial a 3% para melhor visualizao, depois colocar na Cmara de Neubauer, fazer a
contagem tambm nos nove quadrantes e jogar o nmero de clulas contadas na frmula de
clculo-padro de Neubauer. O normal de leuccitos deve ser de igual ou menos que 4
leuccitos por mm
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ou l.
- Depois da contagem total de clulas, fazer o diferencial de leuccitos com um esfregao na
lmina e corando com o corante pantico, fazer a contagem de 100 clulas e classific-las em
termos de porcentagens.
- Caso a quantidade de clulas seja escassa, pode-se estar fazendo uma centrifugao ou uma
citocentrifugao, retirando o sobrenadante para exames adicionais e utilizando o
sedimentado para o esfregao.





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1.3 Exames Bioqumicos
1.3.1 Protenas

A elevao dos valores proticos totais observada com mais frequncia nos quadros
patolgicos, as causas de elevao dos nveis proticos no liquido cefalorraquidiano so:
comprometimento da barreira hematoenceflica (causada principalmente por meningite e
hemorragias), produo de imunoglobulinas no sistema nervoso central, reduo da depurao
das protenas normais no lquor e degenerao do sistema neural. Valores anormalmente
baixos ocorrero quando o lquor estiver extravasando do sistema nervoso central.

1.3.2 Glicose

Nveis altos so sempre resultado de elevaes plasmticas. Nveis baixos so
importantes no diagnstico de agentes causadores de meningites, associados aos valores de
leuccitos e sua contagem diferencial. A grande reduo nos nveis de glicose no LCR
causada principalmente por alteraes no mecanismo de transporte de glicose atravs da
barreira hematoenceflica e por sua grande utilizao por parte das clulas enceflicas.

1.3.3 Lactato

Sua dosagem auxilia no diagnstico e no tratamento de meningites. A presena de
nveis altos no se limita meningite e pode ser resultante de qualquer quadro clnico que
reduza o fluxo de oxignio para os tecidos.

1.3.4 Glutamina

Observam-se nveis elevados de glutamina nos distrbios hepticos que elevam as
taxas de amnia no sangue e no lquor. Com nveis superiores a 35 mg/dL ocorrem alguns
distrbios de conscincia. A determinao dos nveis de glutamina no liquido
cefalorraquidiano analise indireta dos nveis de amnia no lquor.



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1.3.5 Enzimas

Dosagem da Deidrogenase Ltica (DHL) e da Creatina-quinase (CK). As isoenzimas
LD aparecem no lquor depois de destruio de clulas, principalmente neutrfilos, linfcitos
e clulas enceflicas.
Dosagem de CK aps paradas cardacas, se os nveis so elevados o prognstico
desfavorvel.

1.4 Exame Microbiolgico

Tem como objetivo a identificao de agentes etiolgicos de meningites, para isso so
realizados diferentes tipos de exames, como:
- Bacterioscopia: utilizado para visualizao de bactrias em geral, porm no muito
especfico na identificao das mesmas;
- Colorao de Gram: realizado para diferenciar bactrias Gram-negativas de Gram-positivas;
- Tinta da China: para identificao de fungos do gnero Cryptococcus;
- Baar: pesquisa de micobactrias;
- Aglutinao de ltex: presena de criptococos;
- Teste do lisado de Limulus: usado para diagnstico de meningites, causadas por bactrias
Gram-negativas.
Para uma identificao positiva, deve ser realizados meios de culturas adequados, com
o fluido contendo microorganismos, porm mais demorado, como exemplo, meningite
bacteriana em torno de 24 horas e meningite tuberculosa em torno de seis semanas.

1.5 Exame Sorolgico

Utilizado para identificao de microorganismos, porm mais utilizado para detectar
a presena de neurossfilis. usada a tcnica de VDRL, procedimento menos sensvel.




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2. PRINCIPAIS APLICAES CLNICAS

O lquor importante no diagnstico de meningites (bacterianas, virais, tuberculosas,
fngicas e parasitrias), esclerose mltipla, leucemias, neurossfilis e qualquer desordem no
Sistema Nervoso.

3. AMOSTRA

3.1 Preparo do Paciente

- No h idade mnima para a realizao do exame;
- O lquor obtido por uma puno lombar, entre L3 e L4 ou L4 e L5;
- No necessrio jejum, orienta-se apenas uma refeio leve.
- O paciente deve estar acompanhado por um adulto;
- Apresentar, se houver, exames recentes como Tomografia e Ressonncia Magntica de
Crnio e/ou Coluna.
- Aps a coleta do exame o paciente permanecer em repouso alguns minutos no laboratrio e
dever fazer repouso deitado em casa por, no mnimo, mais 24 horas, retornando a sua
residncia aps o atendimento, preferencialmente, de carro.

3.2 Armazenamento e Estabilidade da Amostra

O lquor deve ser armazenado em trs tubos, onde:
- Tubo 1: destinado para testes qumicos e sorolgicos, esses tubos podem ser congelados
para manter a estabilidade da amostra;
- Tubo 2: destinado para laboratrio de microbiologia, os tubos devem permanecer na
temperatura ambiente;
- Tubo 3: destinado hematologia, os tubos podem ser refrigerados.
Um quarto tubo pode ser retirado para fazer testes adicionais. Excesso de fluido no
deve ser descartado e deve ser congelado at que no haja nenhum uso para ele.


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3.3 Critrios Para Rejeio da Amostra

Deve-se pedir uma nova amostra quando:
- A amostra for insuficiente;
- O lquido colhido estiver com mais de 12 horas;
- A amostra estiver contaminada;
- O recipiente da amostra estiver danificado.

4. REAGENTES

4.1 Hematologia

- Soluo salina, para diluio;
- cido actico a 3%, para lise de hemcias;
- Azul de metileno, para colorao de leuccitos;
- Corante pantico, para contagem diferencial de leuccitos.

4.2 Bioqumica

- cido tricloroactico, para dosagem de protenas totais;
- Reagente glicose enzimtica lquida, dosagem de glicose;
- Reagente Deidrogenase lctica, dosagem de lactato;
- Reagente para a determinao de CK-BB;
- Reagente para a determinao de glutamina;
- Reagente para a determinao de cloretos.

4.3 Microbiologia

- Violeta de genciana, fucsina, lcool e lugol, para colorao de Gram;
- Tinta da China, para pesquisa de criptococos;
- Lisado de Limulus, para bactrias Gram-negativas;
- Fucsina fenicada, lcool-cido e azul de metileno, para pesquisa de micobactrias.
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5. EQUIPAMENTOS E MATERIAIS

- Tubos de ensaio e estantes;
- Pipetas, ponteiras e peras;
- Cmara de Neubauer;
- Lminas e lamnulas;
- Microscpio;
- Centrfuga e/ou citocentrfuga;
- Banho-maria;
- Materiais para cultura: placas de Petri, ala de platina, gar, entre outros;
- Equipamento de eletroforese;
- Espectrofotmetro;
- Estufa e capela.

5.1 Procedimento Manual

5.1.1 Exame citolgico

As clulas rotineiramente contadas no LCR so os leuccitos. A contagem de ser feita
imediatamente, visto que os leuccitos (em particular os granulcitos) comeam a lisar-se em
uma hora, e 40% desintegram-se depois de duas horas.

5.1.2 Metodologia

- Devem-se contar os leuccitos nos nove quadrantes da Cmara de Neubauer, devido
pobreza de clulas;
- Quando a quantidade de hemcias grande necessria a lise dessas clulas com cido
actico a 3%;
- Depois da citometria deve-se fazer a contagem diferencial;
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- A contagem diferencial deve ser feita em um esfregao corado. Para garantir um nmero
mximo de clulas disponveis para o exame, a amostra deve ser concentrada antes da
preparao do esfregao.
- Devem ser contadas 100 clulas, que sero classificadas e registradas em termos de
porcentagem. Se a quantidade de clulas for baixa e no for possvel encontrar 100 clulas,
registram-se s os nmeros dos tipos celulares.
Na seo de bioqumica deve-se seguir a metodologia presente nos kits comprados.

5.2 Procedimento Automatizado

5.2.1 Citocentrfuga

Uma vantagem da citocentrifugao que ela produz maior rendimento celular.

5.2.2 Metodologia

- Pe-se a amostra de LCR na cmara cnica;
- Durante a centrifugao, as clulas presentes no fluido so depositadas num crculo de 6 mm
de dimetro sobre a lmina.
- O lquido sobrenadante absorvido pelo papel filtrante, o que concentra mais as clulas;
- Apenas 0,2 mL de LCR, misturado com uma gota de albumina a 30%, produz bom
rendimento e reduz a distoro frequentemente observadas em amostras centrifugadas;
- preciso examinar tanto as clulas provenientes do centro da lmina quanto as da periferia,
pois as suas caractersticas podem variar muito, segundo a rea da lmina.
Na seo de bioqumica utilizam-se equipamentos automticos para a determinao
dos valores das amostras.

6. CLCULOS

A frmula de Neubauer, utilizada para o clculo de hemcias, tambm se aplica
contagem de clulas no lquido cefalorraquidiano para determinar seu nmero por microlitro
(). A frmula a seguinte:
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Essa frmula pode ser usada para amostras diludas e no-diludas, com flexibilidade
do nmero e do tamanho dos quadrantes contados.
Existem clculos de correo por introduo artificial de leuccitos e protenas no
LCR como resultado de puno traumtica. Para isso, necessrio ter a contagem de
hemcias do lquor e de hemcias e leuccitos do sangue. Determinando-se a relao de
hemcias para leuccitos no sangue perifrico e comparando-se essa razo com o nmero de
hemcias contaminantes, pode-se calcular o nmero de leuccitos introduzidos artificialmente
com o uso da frmula:





7. RESULTADOS

As clulas encontradas no LCR so principalmente linfcitos e moncitos. Os adultos
geralmente tm mais linfcitos que moncitos, enquanto os moncitos predominam nas
crianas. Com o aperfeioamento dos mtodos de concentrao esto sendo observados
alguns neutrfilos no lquor normal. Considera-se anormal o resultado que mostra um nmero
elevado dessas clulas (o que recebe o nome de pleocitose), assim como a presena de
leuccitos imaturos, eosinfilos, plasmcitos, macrfagos, de grande nmero de clulas
teciduais e ocorrncia de clulas malignas.
Quando o nmero de clulas presente est aumentado, o papel de contagem diferencial
do LCR na maioria das vezes fornecer informaes diagnsticas sobre o tipo de
microrganismo que est causando alguma infeco nas meninges (meningite).
Deve-se ser liberada a quantidade de clulas por microlitros de LCR (unidade de
medida).





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8. VALORES DE REFERNCIA

8.1 Hematologia

Hemcias: 0/l
Leuccitos: 4/l
Linfcitos: 95% dos leuccitos
Moncitos: 3 a 5% dos leuccitos
Neutrfilos: 0 a 2% dos leuccitos
Eosinfilos: 0
Basfilo: 0
Plasmcitos: 0

8.2 Bioqumica

Protenas: 15 a 45 mg/dL
Glicose: 40 a 80 mg/dL
Lactato: < 25 mg/dL
Glutamina: 8 a 18 mg/dL
Cloretos: 120 a 130 mmol/L


9. CONTROLE DE QUALIDADE

9.1 Controle Interno

- Identificar as amostras corretamente;
- Manusear e armazenar as amostrar corretamente;
- Identificar os Kits utilizados citando fabricante e nmero de catlogo, obedecer s normas de
armazenamento dos kits;
- Observar a calibrao das pipetas e equipamentos utilizados;
- Fazer uma limpeza e secagem correta dos materiais;
- Observar temperatura do banho-maria, caso for utilizar;
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- Checar o funcionamento dos aparelhos;
- Citar a utilizao de soros controles nas anlises realizadas juntamente com a freqncia da
utilizao dos mesmos;
- Descrever o procedimento de verificao de novos lotes de controles e reagentes.


9.2 Controle Externo

- Descrever os procedimentos utilizados nas avaliaes de qualidade feitas por programas de
comparao entre laboratrios ou outros controles de qualidade: PNCQ-SBAC e/ou PELM-
SBPC;
- Definir como os dados de controle so arquivados e gerenciados.


10. INTERPRETAO


Um resultado de LCR deve sempre ser analisado em conjunto com outros dados
clnicos e laboratoriais. Em particular, deve ser lembrado que o LCR pode estar refletindo
alteraes sanguneas, sobretudo quando h aumento da permeabilidade da barreira
hematoenceflica. Hipertenso liqurica pode ser causada ou por aumento do LCR, situao
em que a presso final permanece mais prxima da inicial, ou por processos expansivos,
situao acompanhada de queda acentuada da presso liqurica. O ndice Qr assume valores
acima de seis e abaixo de trs, respectivamente. Na hipotenso liqurica a presso inicial
inferior a 5 cm de gua e em geral resulta de diminuio na produo ou perdas anormais de
lquor. Turvao liqurica em geral devida a aumento de clulas ou presena de
microorganismos. Eritrocromia caracteriza a presena de hemoglobina, resultante de hemlise
recente, enquanto xantocromia representa a presena de bilirrubina. Em recm-nascidos o
LCR usualmente xantocrmico, contribuindo para isto a imaturidade da barreira
hematoenceflica.
Pleocitose indica processo inflamatrio lepto-menngeo, que pode ser agudo
(predomnio de neutrfilos polimorfonucleares), subagudo ou crnico (predomnio de
linfcitos, moncitos e plasmcitos). A presena de eosinfilos ou basfilos indica presena
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de reao imuno-alrgica. A hipercitose pode ou no estar acompanhada de aumento da
protena total. A presena de macrfagos com pigmentos de hemossiderina indica hemorragia
subaracnidea, podendo ser o nico vestgio de uma hemorragia pregressa. Clulas
neoplsicas podem eventualmente ser encontradas no LCR. Sua origem, porm, raramente
pode ser definida.
De um modo geral, as alteraes liquricas podem ser enquadradas em grandes
sndromes:
1. Estase: encontrada abaixo dos bloqueios do canal raquiano e que podem ser parciais ou
completos. Caracteriza-se por alteraes nas provas manomtricas de permeabilidade do canal
medular e dissociao proteico-citolgica.
2. Processos expansivos intracranianos: nos tumores, abscesso, cistos, hematomas e
aneurismas gigantes h hipertenso do tipo tumoral e dissociao proteico-citolgica,
aumento de enzimas, hipercitose neoplsica ou no; hipoglicorraquia pode estar presente.
3. Hemorragia subaracnidea: o LCR caracteriza-se por eritrocromia ou xantocromia e
presena de macrfagos com pigmentos de hemossiderina. Na hemorragia todos os elementos
do sangue passam para o liquor, habitualmente, para cada 1000 hemcias/mm
3
haver um
acrscimo de 1 ou 2 leuccitos/mm
3
e 1 mg/dL de protenas. A presena de sangue no espao
subaracnideo pode, porm desencadear um processo inflamatrio assptico ou facilitar
instalao de processo infeccioso.
4. Sndromes inflamatrias: podem ser agudas, subagudas ou crnicas.
Processos bacterianos: geralmente o LCR turvo, com hipercitose custa de neutrfilos,
associada hiperproteino, hipoctoro e hipoglicorraquia. A identificao do agente etiolgico
feita pelo isolamento do mesmo ou por pesquisa de antgenos.
Processos virais: usualmente ocorre dissociao cito-proteica (aumento predominante da
celularidade), com glicose e cloretos normais. A hipercitose predominantemente linfo-
monocitria.
Neurotuberculose: caracteriza-se por hipercitose linfo-mononuclear, hiperproteinorraquia,
hipocloro e hipoglicorraquia. A confirmao pode ser feita pela identificao da micobactria.
Infeces por fungos: alteraes semelhantes s da tuberculose, porm habitualmente menos
exuberantes. A confirmao pode ser feita pelo isolamento do fungo.
Neurossfilis: caracteriza-se por hipercitose custa de linfomononuclearese plasmcitos,
hiperproteinorraquia discreta, com glicose e cloretos normais.
Neurocisticercose: geralmente existe algum grau de hipertenso liqurica, acompanhada de
hipercitose e hiperproteinorraquia. Predominam linfcitos e moncitos, sendo frequente o
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encontro de eosinfilos e plasmcitos. As reaes imunolgicas positivas orientam o
diagnstico.


11. REFERNCIA BIBLIOGRFICA

- STRASINGER, Susan King, DI LORENZO, Marjorie Schaub. Uroanlise e Fluidos
Biolgicos. 3 edio. Livraria Mdica Paulista Editora LTDA., So Paulo, Brasil, 2009.

- Laboratrio Senne Liquor Diagnstico, So Paulo, Brasil. Acessado em 21 de Setembro de
2010. URL: http://www.senneliquor.com.br/instrucoes.php

- Laboratrio de Anlises Mdicas Maurlio de Almeida, Paraba, Brasil. Acessado em 21 de
Setembro de 2010.
URL: http://www.mauriliodealmeida.com.br/exames/ver_exame.asp?tipo=liquor&id=254