Cortando o mal pela raiz

Pesquisadores usam protena de bactria para remover o vrus HIV escondido no DNA de
pacientes com Aids. A estratgia, testada apenas em laboratrio, erradica o vrus latente e impede
novas infeces, mas ainda no totalmente segura.
Por: Sofia Moutinho
Publicado em 21/07/2014 | Atualizado em 21/07/2014

Testada em clulas do crebro, nova estratgia de terapia gentica erradica a infeco latente pelo HIV.
Na foto, os vrus (em amarelo) infectam uma clula do sistema imune humano. (foto: National Institutes of
Health (NIH))
Os medicamentos antirretrovirais tm sido a principal ferramenta de combate Aids. Segundo o recm-
divulgado relatrio do Programa das Naes Unidas para Aids(Unaids), at o final de 2012, cerca de 9,7
milhes de pessoas tiveram acesso terapia e a meta que 15 milhes de pacientes estejam cobertos
at 2015 atualmente estima-se que haja 16 milhes de pessoas diagnosticadas.
O tratamento farmacolgico, no entanto, no se mostrou capaz de eliminar por completo a infeco pelo
HIV, pois no age sobre os vrus latentes, que ficam silenciosamente integrados ao DNA humano e
podem ser reativados a qualquer momento. Pesquisadores agora se valem de uma protena bacteriana
para fazer microcirurgias no genoma e extirpar o vrus invasor.
Acoplada a um pedao de RNA guia, a protena deletou partes
importantes do vrus, erradicando-o do genoma humano e
impossibilitando a sua reativao
A protena usada a Cas9, responsvel pelo sistema imune das bactrias. Ela corta fragmentos de
material gentico de vrus invasores e os incorpora ao DNA bacteriano. Quando a bactria cruza
novamente com o vrus que contm aquela sequncia gentica, o identifica como inimigo e o ataca. Essa
habilidade tem sido aproveitada por pesquisadores para modificar trechos de DNA humano. Acoplada a
uma molcula de RNA criada em laboratrio que lhe serve como guia at segmentos especficos do
genoma, a protena Cas9 se direcionada a uma sequncia de DNA equivalente representada pelo RNA
e a corta fora.
No incio do ano, pesquisadores da Universidade da Pensilvnia (EUA) usaram a Cas9 para modificar o
receptor celular CCR5, ao qual o vrus HIV se liga para entrar nas clulas do sistema imune humano.
Com a interveno, as clulas de 12 pacientes passaram a ficar resistentes ao HIV, o que impede uma
infeco inicial, mas no resolve o problema dos vrus escondidos, j instalados e misturados ao DNA
humano.
Hoje, pesquisadores da Universidade Temple (EUA) publicaram um artigo no peridico
cientfico PNAS em que relatam ter usado a Cas9 para atingir diretamente os vrus HIV latentes em
clulas do crebro in vitro. Acoplada a um pedao de RNA guia, a protena deletou partes importantes do
vrus, erradicando-o do genoma humano e impossibilitando a sua reativao tudo isso sem prejudicar o
DNA do paciente, que foi reparado pelo prprio organismo.

A protena Cas09 acoplada a uma tira da RNA que serve como guia e se une apenas a uma
sequncia de DNA equivalente do RNA. Quando a sequncia encontrada, a Cas9 abre a dupla
hlice do DNA e corta fora o material gentico viral. (montagem: Sofia Moutinho)
Segundo os cientistas, a estratgia, ainda no testada em pacientes, funciona no s para acabar com
uma infeco j existente por HIV, como tambm para evitar novas. Ao menor sinal de tentativa de
integrao do material gentico do vrus HIV com o DNA humano, a protena Cas9 entra em ao
destruindo o invasor.
Podemos explorar vrios sistemas e rotas para aplicar a Cas9 em indivduos j infectados com o HIV e
tambm para imunizar indivduos de grupos de risco, dizem os autores no artigo da PNAS.
Promissora, mas no prtica
O geneticista Renato Santana, que conduz pesquisas de combate ao HIV com terapia gentica na
Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ), pontua que a nova abordagem extremamente
relevante e de fcil manipulao no laboratrio, mas ressalta que ainda necessrio desenvolver
mtodos eficientes de aplicao da estratgia nos pacientes.
Uma das possibilidades seria injetar a protena Cas9 acoplada ao RNA diretamente na medula ssea,
importante reservatrio de vrus latentes e fbrica de clulas sanguneas. Mas o procedimento no
trivial.
A entrega da Cas9 nas clulas ainda complicada; a repopulao da medula um procedimento
custoso, que requer muito cuidado e no vivel como estratgia de tratamento de grande abrangncia
entre a populao, pondera Santana. A abordagem pode ser boa a longo termo, mas, a curto prazo, as
estratgias farmacolgicas ainda so mais plausveis.
Santana: A abordagem pode ser boa a longo termo, mas, a curto
prazo, as estratgias farmacolgicas ainda so mais plausveis
O pesquisador nota ainda que, antes de se pensar no uso dessa terapia, preciso garantir que a
estratgia seja segura. Um dos perigos que a Cas9 corte no s o genoma viral, mas sequncias
relevantes do DNA do paciente. Vrias partes do nosso genoma so oriundas de vrus inseridos em
nossas clulas h milhares de anos e elas controlam processos relevantes ao desenvolvimento celular,
como o transporte de colesterol e a formao da placenta, explica Santana.
Para o pesquisador, as estratgias que miram na reprogramao das clulas para torn-las resistentes ao
HIV so mais seguras por enquanto. Em seu laboratrio, Santana e colegas trabalham nessa linha e
desenvolvem uma abordagem que impede a entrada do HIV nas clulas e, ao mesmo tempo, destri os
vrus que conseguirem entrar. Estamos tentando tornar as clulas duplamente resistentes, diz Santana.
Modificamos o receptor CCR5 para que o vrus no entre e, se ele escapar, uma protena entra em ao
e modifica o vrus, tornando-o inativo.
Por outro lado, o grupo da Universidade Temple destaca que sua pesquisa com a Cas9 est em plena
ascenso e evolui rapidamente, de modo que a abordagem proposta tende a ficar cada vez mais prxima
da aplicao clnica. A edio genmica por Cas9 tem mostrado uma eficcia promissora e suas
propriedades podem fornecer um caminho vivel para uma cura permanente da Aids e outros vrus
patognicos, concluem os pesquisadores no artigo da PNAS.
Segundo o novo relatrio da Unaids, estima-se que existam 35 milhes de pessoas infectadas com HIV
no mundo, das quais 19 milhes no foram diagnosticadas. Apesar de apresentar queda global, a taxa de
novas infeces pelo vrus da Aids aumentou 11% no Brasil entre 2005 e 2013, impulsionada
principalmente pela maior transmisso da doena entre indivduos de grupos de risco, como homens
homossexuais.

Sofia Moutinho
Cincia Hoje On-line