FOTOSINTESIS y FLUORESCENCIA DE PLANTULAS DE PINUS RADIATA
REIMPLANTADAS EN RIEGO Y EN SEQUA MENA PETITE, A.; HERNNDEZ ALLIKA, 1; GONZLEZ MORO, B; Muoz RUEDA ,A. & * LACUEST A , M. DPTO. BIOLOGA VEGETAL y ECOLOGA. F. DE CIENCIAS. UNIVERSIDAD DEL PAS VAsco/E.H.U. * DPTO. BIOLOGA VEGETAL y ECOLOGA. F. DE FARMACIA. UNIVERSIDAD DEL PAs V Asco/E.H.U. RESUMEN Para comprobar en qu medida las condiciones de almacenamiento a las que se someten las plantas tras el arrancado del vivero pueden afectar su viabilidad tras reimplantarse, se sometieron las plntulas a diferentes condiciones de almacenamiento, 40C y lOoC, a raz desnuda o con cepelln. Posteriormente, estas plantas fueron reimplantadas tanto en rgimen de riego como de sequa, con el fin de simular condiciones naturales en el bosque. En este trabajo, se analizaron diversos parmetros fotosintticos, as como el cociente FvlFm que describe la eficiencia fotoqumica del foto sistema II, para detectar posibles daos a este nivel. Nuestros resultados indican que plantas almacenadas a 100C con la raz desnuda durante ms de 8 das, y reimplantadas en rgimen tanto de riego como en sequa, presentan descensos irrecuperables en la tasa de asimilacin de C02, as como alteraciones en la funcionalidad del aparato fotosinttico, sobre todo en aquellas reimplantadas en sequa. Sin embargo, en las plantas almacenadas con cepelln y regadas normalmente, no se alter la relacin FvlFm durante los das que siguieron a la reimplantacin, si bien las que fueron sometidas a sequa presentaron un descenso de este parmetro, que tendi a remitir al iniciar el riego. Los datos demuestran que el almacenamiento a raz desnuda provoca lesiones importantes en el aparato fotosinttico que pueden ser irreversibles si adems la temperatura de almacenamiento es mayor que 40C. P.C.: Cepelln, Estrs hdrico, Fluorescencia, Fotosntesis, Pino, Temperatura de almacenamiento. SUMMARY In this work we have studied the effect of temperature (40C and 100C) and soil presence around the roots of pine seedlings on photosynthetic parameters during storage and re- establishment. After the re-establishment, sorne plants were keep under water stress for several days and then watered until the end of the experiment. Sorne photosynthetic parameters were analyzed, as well as FvlFm rate, that describes photochemical efficiency of photosystem II Our results indicate that the bareroot plants maintained at 10 0 C for 8 days, and re-established under watered and dryness regimes suffer unrecoverable decreases in C02 assimilation rate, as well as alterations in the photosynthetic apparatus funcionality, 401 mainly in that ones re-established in dryness. Nevertheless, in plants maintained with soil plug root and watered, the Fv/Fm rate was not altered during the days tested after re- establishment. Data showed that storing the bareroot plants can produce ineversible damage on photosynthetic apparatus, being more dramatic if temperature is higher than 4 0 C K.W.: Fluorescence, Photosynthesis, Pine, Soil plug root, Storage temperature, Water stress. INTRODUCCION El almacenamiento en fro es un mtodo habitual de conservacin de las plntulas entre la etapa de crecimiento en el vivero y su definitiva implantacin en el bosque; sin embargo, puede afectar diversos procesos fisiolgicos (CANNELL y cols.,1990) que pueden modificar el comportamiento posterior de las plntulas tras su reimplantacin. Estudios previos (MENA-PETITE,1995), indicaron que durante el almacenamiento, el estado hdrico de la planta se vea afectado tanto por las condiciones de almacenamiento como por la duracin del mismo, lo que podra provocar una menor resistencia a la sequa tras su reimplantacin (JIANG y cols.,1995). Los efectos inhibidores del estrs hdrico sobre la fotosntesis son uno de los factores que ms limitan el crecimiento de la planta. La capacidad de las plntulas reimplantadas para mantener la fotosntesis bajo condiciones de estrs hdrico est relacionada con su estado hdrico y con la capacidad de expansin de las raices (BURDETT, 1990). Se requiere una fotosntesis activa, as como una disponibilidad de la energa almacenada para el crecimiento de nuevas raices. A su vez, un rpido crecimiento radicular y el crecimienco de nuevas raices permite superar el estrs hdrico, adems de favorecer la propia fotosntesis (GROSSNICKLE and REID,1984). En el presente estudio hemos analizado el efecto de las condiciones de almacenamiento sobre diversos procesos fotosintticos tanto de la fase oscura (intercambio gaseoso) como de la fase luminosa (fluorescencia), con el fin de determinar la relacin existente entre la alteracin de estos procesos y la futura viabilidad de la plntula tras la reimplantacin, y determinar cmo se ve afectada la capacidad de asimilacin del carbono bajo condiciones de dficit hdrico. MATERIAL YMETODOS Se utilizaron plntulas de P. radiata de 9 meses, que tras ser anancadas del vivero, fueron almacenadas a 4 0 C 100 C, con o sin cepelln durante un periodo de 1, 8 15 das. En cada uno de estos momentos se procedi a realizar medidas de parmetros fotosintticos tales como el intercambio gaseoso y la eficiencia fotoqumica del foto sistema II, mediante el anlisis de fluorescencia. Posteriormente, las plntulas fueron replantadas y se mantuvieron en una cmara de crecimiento durante 26 das, sometindolas a dos tratamientos simultneos. Algunas plantas fueron regadas habitualmente y otras no recibieron aporte externo de agua hasta el da 20 tras su reimplantacin. Con ello se pretenda simular las condiciones a las que puede verse sometida la planta tras su reimplantacin definitiva en periodos de baja pluviometra. Durante los das 5, 8, 12, 20, 22 Y 26 posteriores a la reimplantacin, se procedi a analizar los parmetros anteriormente descritos para comprobar si exista una recuperacin de los procesos fisiolgicos afectados por la conjuncin de estreses tales como las condiciones de almacenamiento y la sequa tras la reimplantacin. 402 Las medidas del intercambio gaseoso se han realizado en un analizador de gases en el infrarrojo (IRGA) utilizando el modelo porttil ADC tipo LCA-2 (The Analytical Development Co. Ltd., England) . Los parmetros de fluorescencia de la clorofila se han medido con un fluormetro porttil, Plant Stress Meter, PSM (Biomonitor AB, Umea, Sweden). Los diferentes tratamientos a que fueron sometidas las plntulas, quedan reflejados a modo de esquema en la figura 3. RESULTADOS Y DISCUSION Durante el periodo de almacenamiento, la tasa de asimilacin de C02 en plntulas conservadas con raz desnuda se redujo en un 50%, mientras que en las plantas almacenadas con cepelln, este descenso no super el 20%. Las plantas que fueron almacenadas con raz desnuda a 10 0 C durante periodos superiores a 8 das, y reimplantadas en regimen de riego, no slo no recuperaron las tasas de fotosntesis, sino que los valores de asimilacin de C02 fueron prcticamente nulos. Sin embargo, a 4 0 C las tasas de fotosntesis al final el estudio de reimplantacin presentaron valores prximos a los iniciales, si bien en el caso de reimplantacin en sequa se observ un descenso de dichas tasas durante los das que se mantuvieron en sequa (Fig. 1). Las plantas que fueron almacenadas durante 8 15 das presentaron una cada irrecuperable de los valores de conductancia estomtica, independientemente del rgimen hdrico de reimplantacin. Sin embargo, plantas almacenadas con cepelln y reimplantadas en rgimen de sequa recuperaron los valores iniciales de conductancia estomtica cuando se procedi al riego tras 20 das de reimplantacin en dichas condiciones (datos no mostrados). En todos los casos, la concentracin interna de C02 mostr un comportamiento inverso al de la asimilacin de C02, lo que sugiere que el descenso observado en la asimilacin de C02 no se deba al cierre estomtico, sino que fue un parmetro afectado por el tratamiento. Al analizar la relacin Fv/Fm no se observ variacin de la misma en aquellas plantas almacenadas con cepelln y regadas tras su reimplantacin, mientras que las sometidas a rgimen de sequa presentaban un descenso progresivo de dicho valor mientras dur el periodo de sequa, valor que se recuperaba tras el riego, lo que indicara que no se produjo una lesin en el aparato fotoqumico (Fig. 2). En aquellas plantas almacenadas con raz desnuda en periodos superiores a 1 da s parecen producirse lesiones en el aparato fotoqumico como indicara la progresiva e irrecuperable cada de la relacin Fv/Fm incluso en plantas con buen aporte hdrico. CONCLUSIONES El almacenamiento de plantas con raz desnuda y a 10 0 C puede provocar importantes daos fisiolgicos en las plantas, que conllevaran a la muerte de las mismas si tras la reimplantacin se produce un periodo prolongado de sequa. Si bien el almacenamiento de plntulas con cepelln tambien provoca algunas alteraciones en la fisiologa de las plntulas, sobre todo en el caso de la conservacin a 10 0 C, las plntulas estn ms capacitadas para sobrevivir y la probabilidad de supervivencia sera mayor. 403 AGRADECIMIENTOS Agradecemos al vivero Oihanberri S.A. (Vizcaya) por la cesin de las plntulas de Pinus radiata. Este trabajo ha sido financiado por el Departamento de Industria, Agricultura y Pesca del Gobierno Vasco (GV 118.310-IDT4/93). BIBLIOGRAFIA BURDETT, A.N. (1990). Physiological processes in plantation establishment and the development of specifications for forest planting stock. Can. J. For. Res. 20: 415-427. CANNELL, M.G.R. Y cols. (1990). Sitka spruce and Douglas-fir seedlings in the nursery and in cold storage: root growth potential, carbohydrate content, dormancy, frost hardiness and mitotic indexo F orestry 63: 9-27. GROSSNICKLE, S.C. & REID, C.P.P. (1984). Water relation patterns of Engelmann spruce seedlings on a high-elevation mine site: an example of how reclamation techniques can alter microclimate and edaphic conditions. Reclam. Reveg. Res. 3: 199-221 JIANG, Y. Y cols. (1995). Effects of cold storage and water stress on water relations and gas exchange of white spruce (Picea glauca) seedlings. Tree Physiology 15: 267-273. MENA-PETITE, A. (1995). Evalucin del efecto de la temperatura de almacenamiento en los procesos fotosintticos de plntulas de Pinus radiata. IV Congreso Luso-Espaol de Fisiologa Vegetal. Servi<;os de Ac<;ao Social da Universidade Tcnica de Lisboa pg.332. CMARAS REIMPLANTACIN RIEGO, ...---------+ DIA 26
REIMPLANTACIN SEQUA 8 DAS 15 DAS RIEGO REIMPLANTACIN RIEGO 26 DA 26 REIMPLANTACIN SEQUA RIEGO REIMPLANTACIN RIEGO .-----------------+ DA 26
REIMPLANTACIN SEQUA RIEGO Figura 3. Esquema de los tratamientos a los que fueron sometidas las plantas de Pinus radiata durante el tiempo que dur el ensayo. 404 6--r-- 4 -"R-O-------------rr- 4 -"R-O-------------r 6 DIA 1 5 riego .equia 5 .... .(>0..... DIA 8 4 3 2 4 ---<)--- DIA 15 3 2
O o ""----07 O -=t==:t::=I::::::::::!==:::;;::::sr==tt=:::!:=:::E:=::::E::=::t:==I:::::::::t-J 5 4 ,-.. 3 2 O 5 4 4 3 2 1 5 4 3 2 4"CEP o uf.
1O"RO 5 4 3 2 o o
O 5 10 15 20 25 30 O 5 10 15 20 25 30 TIEMPO ( das ) Figura 1. Asimilacin de COl ( J.Lmoles COl .. rri 2 .s t ) de plntulas de Pinus radiata almacenadas durante 1 (0),8 (< 15 (O) das, en derentes condiciones de almacenamiento: a raz desnuda (RD), con cepelln (CEP), a 4 C (4) a 100 C (lOO) 405 o.Q-r---------------TT'"---------------,-o.9 0.7 0.5 0.5 0.3 f 0.3 riego 0.1 4"RD 0.1 ufa
0.7 0.7 0.5 0.5 0.3 l' riego 0.3 0.1 4"CEP 0.1 rl o
... .... 0.7 0.5 0.3 0.3 0.1 10"RD 0.1 O ri o O
0.5 l' riego 0.3 0.1 1O"CEP - -- 10"CEP rl8 .8 ua
O 5 10 15 20 25 30 O 5 10 15 20 25 30 TIEMPO ( das ) Figura 2. Relacin FvlFm de plntulas de Pinus radiata almacenadas durante 1 (O), 8 15 (O) das, en diferentes condiciones de almacenamiento: a raz desnuda (RO), con cepelln (CEP), a 4 C (4") a 100 C (100) 406 0.7 0.5 0.3 0.1 O --o-- DIA 1 ..... DIA 8 ---0-_. DIA 15