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i
f i
P
P P
PP
(1)
Slidos solubles
La concentracin de slidos solubles totales en grados Brix se determin en el jugo de la
mora, con un refractmetro marca Hanna modelo HI 96801, para mediciones entre 0 y 85
% Brix, los resultados se expresaron como porcentaje de slidos solubles totales (%SST).
La lectura se corrigi utilizando el porcentaje de cido, mediante la siguiente ecuacin (5):
(2)
Donde: A: % de cido y S.S.T.: grados Brix
48
pH
El pH se determin pesando 10 g de pulpa los cuales se homogenizaron en 100 ml de agua
destilada a 20 C, y se determin con un potencimetro (pH metro) marca Hanna modelo
Session1, previamente calibrado con soluciones Buffer de 4 y 7 (7).
Acidez
El % de acidez se determin por titulacin potenciomtrica, los resultados se expresaron
como % de acido mlico (cido predominante en el fruto) segn la NTC 4106 (5), y se
calcul con la siguiente ecuacin.
(3)
Donde: V
1
: Volumen de NaOH consumido (ml), V
2
: volumen de muestra (ml)
K: peso equivalente del cido mlico (0,067 g/meq), N: normalidad del NaOH (meq/ml)
49
Intensidad respiratoria
La intensidad respiratoria de la mora fue determinada de acuerdo al mtodo citado por
Mrquez et al., (37), expresado como mg de CO
2
*h
-1
*kg
-1
, que se fundamenta en la
modificacin del mtodo qumico de Pettenkoffer, el cual consiste en introducir los frutos
en una cmara de respiracin hermtica, posteriormente se neutraliza el CO
2
producido por
los frutos en una hora, en relacin al peso. Para la determinacin se seleccionaron al azar 20
frutos por tratamiento (control y con RC), se pesaron y se introdujeron 1 hora en la cmara
de respiracin en los das 1, 3, 5, 7 y 10 de almacenamiento.
Anlisis estadstico de datos
Se utiliz anlisis de varianza para determinar efectos significativos (P< 0,05) y el mtodo
LSD (mnimas diferencias significativas) como mtodo de comparaciones mltiples, con un
nivel de confianza del 95%. Se utiliz el paquete Statgraphics Plus (Chicago, Il, USA) para
realizar los anlisis estadsticos.
50
RESULTADOS Y DISCUSIN
Microscopia de la emulsin
El tamao de las gotas de cera es de gran importancia para evaluar la estabilidad fsica de la
emulsin, ya que influye directamente en la velocidad de agregacin, por fenmenos como
la coalescencia, la sedimentacin y la floculacin (38). Igualmente la integridad del
recubrimiento es un factor importante, ya que grietas de una mala emulsin puede reducir
las propiedades de barrera (39)
La figura 1 (A) presenta la micrografa a 500 aumentos del recubrimiento en emulsin y su
dispersin. La figura 1 (B) presenta una micrografa a 10.000 aumentos, la cual muestra el
tamao de las gotas de cera de carnaba que en promedio se encuentra entre 2,5 y 5 m.
Las gotas de la emulsin con cera carnauba utilizadas en el recubrimiento formulado
presentan un menor tamao a las reportadas por Restrepo (36).
A B
Figura 1. Micrografa del recubrimiento emulsin con cera carnauba. (A) microfotografa a 500X,
(B) microfotografa a 10.000X.
51
Prdida de peso
La prdida de peso de la mora fue diferente estadsticamente al comparar los tratamientos
control y con recubrimiento a partir del da 3 de almacenamiento (Vase figura 2). Esto
puede deberse a la accin de barrera que ejerce sobre el transporte de masa (39) y difusin
del vapor de agua el muclago de Aloe vera y la cera carnauba (35). En el aloe vera en su
composicin molecular predominan polisacridos, que son efectivos como barrera (31) y la
cera carnauba, esteres de ceras, las cuales contienen cidos grasos unidos a alcoholes grasos
ambos de cadenas largas entre 18 y 24 carbonos, lo que le da una propiedad hidrfobica al
recubrimiento (40). Esto muestra una tendencia similar a los resultados presentados por
(36) y (32) para un RC de aloe vera evaluado en fresa y cereza, respectivamente. Los
resultados coinciden tambin con otros tipos de RC donde se utiliz cera carnauba en
emulsin como los presentados por (41), para fresa y frambuesa, (42 y 43) para mango y
pera (24).
Figura 2. Evolucin del porcentaje de prdida de peso evaluado en mora sin recubrir
(control) y mora recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas durante 10
das a 5 + 0,5C.
52
Slidos solubles totales
La variable slidos solubles totales (SST) de las moras fue diferente estadsticamente al
comparar los tratamientos control y con recubrimiento a partir del da 3 de almacenamiento
(vase figura 3). Los SST presentaron mayor incremento en los frutos sin recubrimiento
con los das de almacenamiento, esto se puede ver influenciada por la hidrolisis de los
materiales de la pared celular. Este comportamiento es inverso a la acidez total AT,
coincidiendo con Sora et al., (44) quien estudi la mora con atmsferas modificadas. Trejo
y Prez (45) estudiaron el comportamiento de fresa tratadas con RC a base de gelatina
presentando resultados con tendencia ascendente. Los resultados obtenidos coinciden
tambin con los presentados por Tanada y Grosso (46) para fresas recubiertas y para los
controles almacenados en diferentes materiales de empaques, mostrando un aumento
progresivo en la relacin SST/AT.
Figura 3. Evolucin del porcentaje de slidos solubles totales (%SST), evaluado en mora
sin recubrir (B) y mora recubierta con muclago de penca sbila (R), almacenadas durante
10 das a 5 + 0,5C.
53
A su vez se realiz la correlacin de Spearman, con los resultados de SST y %PP, ya que en
el proceso de transferencia de masa se van concentrados los slidos presentes en el fruto,
conllevando al incremento ascendente como se ve en la figura 3. Los datos evaluados
estadsticamente arrojaron un coeficiente de correlacin (r
s
) igual a 0,9273, por lo tanto
existe una correlacin positiva fuerte, en todas las relaciones realizadas en los tiempos 1, 3,
5, 7 y 10 de almacenamiento. En la figura 4 de dispersin podemos notar la relacin directa
entre los componentes.
Figura 4. Nube de dispersin de la relacin entre SST y %PP en mora sin recubrir (control)
y mora recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas durante 10 das a 5 +
0,5C.
pH
El pH en funcin del tiempo de almacenamiento present aumento significativo aunque los
rangos de variacin son mnimos, exhibiendo diferencias significativas (P<0,05) entre los
tiempos 1 y 10 para control y el tratamiento con RC con valores medios entre 2,97 a 3,35 y
54
2,98 a 3,25, respectivamente (figura 5). Entre los das 7 y 10 de almacenamiento en la
mora con RC se observ una tendencia a estabilizarse, lo que no sucedi con las moras
control que continuaron con la tendencia de aumento, dando como resultado una diferencia
significativa entre ambos tratamientos al finalizar el almacenamiento (da 10). El uso de RC
est relacionado con la diminucin de la senescencia del fruto, evitando que durante la
maduracin de la mora algunos fragmentos de pectinas se liberen desde la pared celular y
se unan a los polifenoles, lo cual incrementa los valores de pH (47). Gonzales (48),
argumenta que un aumento en los valores de pH durante el almacenamiento demuestra el
proceso de senescencia del producto.
Figura 5. Evolucin del pH evaluado en mora sin recubrir (control) y mora recubierta con
muclago de penca sbila (RC), almacenadas durante 10 das a 5 + 0,5C.
55
Acidez Titulable Total
La acidez titulable de los frutos exhibieron diferencias significativa (P<0,05) a partir del da
5 en los frutos con recubrimientos respecto a los frutos control (figura 6). Ambos
tratamientos mostraron un comportamiento de disminucin, comportamiento inverso al pH.
Gonzales (48) presenta tendencias similares para moras tratadas con un recubrimiento a
base de aceite esencial de canela y para el respectivo el control, Restrepo y Aristizabal (36),
Tanada (46) y Han et al. (41), muestran comportamientos similares en fresa con RC y sin
el RC el % de acidez de los frutos con RC durante todos los das de almacenamiento estuvo
dentro del rango de calidad (aprox. 2,8%) recomendado para la mora de Castilla grado 5
segn la NTC 4106. Sin embargo los frutos control presentaron disminuciones mayores en
mas corto tiempo (da 3). Esto puede estar relacionado a que los frutos sin RC presentan
mayores tasas de respiracin, mientras el recubrimiento con aloe puede producir una
modificacin en la atmosfera interna (32), adems Han et al, (41), Yaman y Bayoindirli
(49), argumentan que el RC retrasa la senescencia de la fruta, por consiguiente retrasan la
oxidacin de los cidos orgnicos, sustratos de las reacciones enzimticas de la respiracin.
Figura 6. Evolucin del % acidez evaluado en mora sin recubrir (B) y mora recubierta con
muclago de penca sbila (R), almacenadas durante 10 das a 5 + 0,5C.
56
Intensidad respiratoria
La figura 7 presenta los valores medios con intervalos LSD (95%) de la intensidad
respiratoria cuantificado a los 1, 3, 5, 7 y 10 das en las moras control y las moras
recubiertas con muclago de penca sbila, presentndose diferencias significativas
(P<0,05) entre el control y el tratamiento.
Figura 7. Comportamiento de la intensidad respiratoria para mora sin recubrir (B) y mora
recubierta con muclago de penca sbila (R), almacenadas durante 10 das a 5 + 0,5C.
No se present diferencia estadstica en esta variable en la mora con RC y el control
presentando valores medios de 20,6 y 21,2 para el da 1 de almacenamiento y de 57,1 y
26,77 para el da 10 de almacenamiento, respectivamente. Esto coincide a los reportados
por Farinango (50), entre 22 y 28 mg de CO
2
h
-1
kg
-1
para mora fresca grado 5
almacenadas a 4C y 90 95 % HR. Perkins (51) report entre 18 y 41 mg CO
2
h
-1
kg
-1
en
temperaturas de 0 a 5 C y a los reportados por Mitcham et al, (52) entre 11 y 31 mg de
57
CO
2
h
-1
kg
-1
en temperaturas de 0 a 10 C, para similar tiempo y temperatura de
almacenamiento.
La intensidad respiratoria de las moras con RC mostr diferencia significativa (P<0,05) con
respecto a los frutos control para 3, 5, 7 y 10 das de almacenamiento. La intensidad
respiratoria en ambos tratamientos tuvo un comportamiento ascendente, donde el fruto
control alcanz un valor mximo de 57,1 mg de CO
2
.h
-1
.kg
-1
en el da 10, mientras el fruto
con RC alcanz como valor mximo 26,8 mg de CO
2.
h
-1
.kg
-1
para el mismo tiempo de
almacenamiento, siendo este valor un 47 % inferior al obtenido en el control. Este valor
tiene la tendencia de algunas bayas con RC de aloe vera como la fresa, despus del quinto
da como lo muestra Restrepo y Aristizabal (36) y Vargas (53). Sin embargo para cerezas
con RC de aloe vera se observ que despus del tercer da hasta el das 16 de
almacenamiento tuvo una tendencia a incrementar la produccin de CO
2
. El RC aplicado a
los frutos logr reducir la intensidad respiratoria actuando como barrera al O
2
y al CO
2
producto del intercambio gaseoso que realiza el fruto con el ambiente que lo rodea (36, 54,
55). Joo et al, (47) evalu la vida til de la mora encontrando la misma tendencia a
incrementar la cantidad de CO
2
. Adems el efecto del glicerol como plastificante
probablemente ayuda a disminuir la permeabilidad del O
2
y CO
2
, caracterstica que es
deseable para la modificacin de la atmosfera interna de la fruta (56), retrasando los
procesos de senescencia y preservando la fruta (57).
58
CONCLUSIONES
La aplicacin del recubrimiento comestible a base del muclago de penca sbila permiti el
desarrollo de un efectivo mtodo de conservacin, retrasando los cambios en las variables
como intensidad respiratoria, prdida de peso, contenido de slidos solubles totales, acidez,
pH e intensidad respiratoria. Lo que permiti mantener la calidad de la fruta hasta 10 das
de almacenamiento en refrigeracin y esto signific un aumento de 3 das de vida til.
Se encontr una relacin directa entre el aumento de la perdida de peso y el aumento
concentracin de los Slidos Solubles totales.
Las variables fisicoqumicas de pH y acidez total titulable del fruto de mora tratados
presentaron menos variaciones al compararlas con las expuestas en las mismas variables en
fruto control. ste comportamiento puede deberse a la disminucin de la actividad
respiratoria
La utilizacin del Ultra Turrax a 24.000 RPM, permiti disminuir el tamao de las gotas de
cera en la emulsin; la adicin de la cera carnauba y el glicerol disminuy la permeabilidad
de los gases y de vapor de agua, permitiendo que la relacin de intensidad respiratoria y la
prdida de peso fueran en una proporcin menor a la mora sin recubrir (control).
59
RECOMENDACIONES
La mora de castilla puede ser tratada con emulsiones a partir de aloe vera y otras ceras,
variando la composicin de la emulsin
La permeabilidad de las pelculas se puede evaluar como parte de un estudio riguroso para
su escalamiento.
Otros estudios similares se pueden desarrollar con esta metodologa para evaluar la
estabilidad y el comportamiento de vitaminas y antioxidantes presentes en la mora.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen a los Laboratorios de Frutas, de Microscopia y de Control de
Calidad de Alimentos de la Universidad Nacional de Colombia Sede Medelln, y al
Laboratorio de Control de Calidad de Alimentos de la Corporacin Interactuar.
60
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67
CAPITULO 2
EVALUACIN FISICOQUMICA, MICROBIOLGICA Y SENSORIAL DE LA
MORA DE CASTILLA (Rubus glaucus Benth) RECUBIERTA CON GEL DE
MUCLAGO DE PENCA DE SBILA (Aloe barbadensis Miller) ALMACENADA
CON REFRIGERACIN
PHYSICOCHEMICAL, MICROBIOLOGICAL AND SENSORY EVALUATION
OF BLACKBERRY (Rubus glaucus Benth) COATED WITH GEL
MUCLAGINOUS OF PENCA SABILA (Aloe barbadensis Miller) COOLED
STORAGE
Jhon D. Ramrez Q,
21
*; Ivn D. ARISTIZBAL T.
1
, Jorge I. RESTREPO F
1
.
1
Facultad de Ciencias Agrarias, Departamento de Ingeniera Agrcola y de Alimentos, Universidad Nacional de
Colombia. Sede Medelln. A.A. 568.
*
Autor a quien se debe dirigir la correspondencia: jdramirezq@unal.edu.co
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RESUMEN
La mora de Castilla (Rubus glaucus Benth) se caracteriza por tener una vida de anaquel
corta debido a que es un fruto no climatrico muy perecedero. Recubrimientos
desarrollados con gel de aloe vera han permitido prolongar la vida til de varios tipos de
frutos perecederos. La firmeza, el color en el espacio CIELab, y caractersticas
microbiolgicas y sensoriales fueron estudiadas en mora de Castilla para evaluar el efecto
de un recubrimiento comestible (RC) a base del muclago de penca sbila aplicado en esta
fruta almacenada a temperatura de refrigeracin. El RC fue aplicado por inmersin de los
frutos y secado a temperatura ambiente. Los frutos fueron empacados en cajas
termoformadas de Tereftalato de polietileno (PET). La firmeza, el color (L*, a*, b*), los
anlisis microbiolgicos y los atributos sensoriales fueron determinados hasta los 10 das
de almacenamiento a 5C y 85% HR. Se obtuvo en los frutos con RC un retras en la
prdida de firmeza, en el cambio de color, y en el crecimiento microbiano, manteniendo
favorables los atributos sensoriales en comparacin a los frutos sin recubrimiento. Se logr
aumentar la vida til de mora con el recubrimiento 5 das ms en comparacin con el
testigo.
Palabras claves: Mora de Castilla, aloe vera, muclago de penca sbila, recubrimiento
comestible, vida til, sensorial.
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ABSTRACT
The Castilla blackberry (Rubus glaucus Benth) is characterized by having a short shelf life
because it is a non-climacteric fruit highly perishable. Coatings developed with aloe vera
gel has allowed extending the shelf life of various types of perishable fruits. The firmness,
the color in the spacious CIELab and characteristic microbiological and sensory were
studied in Castilla blackberry by evaluate the effect of an edible coating (EC) based of aloe
vera mucilaginous applied in this fruit, stored at refrigeration temperature. The EC was
applied by dipping of fruits and dried at room temperature, the fruits were packed in boxes
thermoformed of polyethylene terephthalate (PET). Firmness, color (L *, a *, b *), the
microbiological analysis and sensory attributes were determined until 10 days of storage at
5 C and 85% RH. There was a delayed loss of firmness, the color change and the
microbial growth maintaining favorable the sensory attributes, compared to the fruits
without EC. It was able increased the shelf life of Castilla blackberry until 10 compared
with the control.
Keywords: Castilla blackberry, aloe vera, penca sabila mucilage, edible coating, shelf life,
sensory.
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INTRODUCCIN
La mora de Castilla (Rubus glaucus Benth) es una fruta de alto inters comercial, que
constituye un recurso alimenticio de excelente calidad, por ser fuente importante de
compuestos funcionales para el organismo y por ser una fruta que se cosecha casi todo el
ao (1, 2). Ha sido identificada como uno de los frutales con mayor potencial, sin embargo
este cultivo no ha adquirido el grado de desarrollo deseado debido al poco sustento
tecnolgico (3). El sabor est determinado por el contenido de azcares, cidos y voltiles,
el porcentaje de azcar juega un papel importante en la determinacin del sabor (4).
Durante el manejo poscosecha se generan efectos adversos como la prdida de peso,
cambios de color y ablandamiento, los cuales son acompaados por la aparicin de la
pudricin debido principalmente a bacterias como Erwina, Pseudomonas y por hongos
como Penicillium, Botrytis, Aspergillus, Fussariun (5, 6), que provocan importantes
prdidas econmicas (7). La mora es una de las bayas ms perecederas debido a su piel
fina, frgil y los fenmenos fisiolgicos de respiracin y transpiracin que realiza, lo que
genera en los frutos rpidos cambios en las propiedades fisicoqumicas, nutricionales,
adems de acelerar el crecimiento de los mohos que se producen durante el periodo
poscosecha (8).
La textura es un atributo de calidad importante de los alimentos de origen vegetal. La pared
celular de las plantas es un factor determinante de la estructura de las frutas y hortalizas,
los cambios en la firmeza incrementan la susceptibilidad al ataque y crecimiento de los
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microorganismos en periodos largos de almacenamiento, estos son los que ms contribuyen
a la prdida de frutas en poscosecha y tienen un importancia significativa comercial y
econmicamente (9), otro de los atributos importantes en la comercializacin de la mora es
el color, la decoloracin en la mora se puede ver afectada por la prdida de jugos en las
frutas menos maduras (10). El almacenamiento refrigerado retrasa la senescencia de los
frutos. La reduccin de la intensidad respiratoria disminuye las prdidas de aroma, sabor,
color, firmeza y la calidad del producto almacenado (11), lo que permite aumentar su vida
til.
Los recubrimientos comestibles (RC) son matrices continuas que pueden estar formadas
por protenas, polisacridos, y lpidos, las cuales mejoran la calidad de los alimentos
mediante la limitacin de migracin de humedad, grasa, oxigeno y compuestos
responsables del sabor, color y aroma (12). El uso de RCs independiente de la fuente,
pueden proveer una capa adicional de proteccin para los productos frescos. Los
recubrimientos orgnicos retardan el deterioro de las fruta, son seguros para la
incorporacin de compuestos antimicrobianos y para los frutos son el empaque primario
(13). Entre otros beneficios se encuentra la disminucin a la desecacin, crecimiento
microbiano adems retienen el sabor y el aroma (14). Los RCs son tradicionalmente usados
para mejorar la apariencia y la conservacin del alimento (15).
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Para la elaboracin de un RC se debe tener en cuenta las propiedades fisicoqumicas,
reolgicas, microbiolgicas y sensoriales, por lo que se ha llegado a estudiar el uso de
materiales alternativos como el muclago del cactus de nopal (Opuntia ficus Indica) y el
glicerol como plastificante para extender la vida til de las fresas, obteniendo resultados
favorables en los atributos de calidad evaluados a los 9 das de conservacin (16). Muchos
beneficios a nivel de salud se han asociados al Aloe vera por su contenido de polisacridos
presentes en el gel de las hojas. Las actividades biolgicas incluyen promocin del curado
de heridas, actividad antifngica, hipoglicemia antidiabticas, efecto anti inflamatorio,
propiedades anti cancergenas, inmuno moduladoras y gastro protectoras (17, 18).
El gel del muclago del Aloe vera ha sido usado y evaluado como RC sobre cerezas, que
fueron almacenadas a 1C y 95 %HR y evaluadas al 2, 6, 9, 13 y 16 das, donde el anlisis
sensorial revel efectos favorables de conservacin de sus atributos durante el tiempo de
almacenamiento (15). Tambin al ser aplicado sobre fresas frescas permiti aumentar la
vida til, manteniendo la firmeza y retrasando los cambios de color, adems en el anlisis
sensorial satisfizo la percepcin de los jueces entrenados (19), igualmente Del Valle et al,
(16) demostr una tendencia a prolongar la vida til de la fresa, al mantener las propiedades
fsicas y sensoriales.
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El objetivo de esta investigacin fue evaluar microbiolgica, fisicoqumica y
sensorialmente la mora de Castilla tratada con y sin recubrimiento comestible a base de gel
muclaginoso de penca de sbila durante su almacenamiento refrigerado.
MATERIALES Y MTODOS
Materiales
La investigacin se llev a cabo en los Laboratorios de Frutas y de Control de Calidad de
Alimentos de la Universidad Nacional de Colombia Sede Medelln, Laboratorio de Control
de Calidad de Alimentos de la Corporacin Interactuar y en el Laboratorio de Anlisis
Sensorial de la Fundacin Intal.
Se seleccionaron moras de Castilla (Rubus glaucus Benth), recolectadas con grado de
madurez 5 de acuerdo a la norma tcnica colombiana NTC-4106 (20), cultivadas en la
vereda pantanillo del Municipio de Envigado (Antioquia Colombia). Las hojas de penca
sbila (Aloe barbadensis) especie Miller, fueron obtenidas de cultivos del Municipio de
Guarne (Antioquia Colombia), las cuales fueron cosechadas e inmediatamente
transportadas a temperatura ambiente al laboratorio, extrayendo y lavando solamente la
fraccin carnosa de la hoja. Cera carnauba grado alimentario en escamas, glicerol (99,5 %)
y polisorbato 80 (mono oleato de sorbitan) fueron adquiridos comercialmente. El RC se
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elabor con el muclago de penca sbila a una concentracin del 50 % P/P con
homogenizacin a 24.000 rpm por 4 minutos. Se dividieron los frutos en lotes control y
tratados con el recubrimiento comestible. La aplicacin del recubrimiento fue por
inmersin y los frutos control fueron sumergidos en agua destilada. Despus de aplicar
ambos tratamientos, todos los frutos se dejaron secar al ambiente, luego de lo cual se
dividieron aleatoriamente en grupos de 20 frutos almacenados a 5 C y 85 % HR en cajas
termoformadas de PET, segn recomendaciones de la NTC 5141 (21). Los lotes de frutos
con RC y control se evaluaron en tres replicas y siete repeticiones durante los das 1, 3, 5, 7
y 10 de almacenamiento, en las variables firmeza, color, anlisis sensoriales y
microbiolgicos.
EVALUACIONES
Firmeza
Para cada fruta, la firmeza fue determinada utilizando un analizador de textura TA.XT2
(Stable Micro System) y el software Texture Expert Excced, v 2.64. Se utiliz una sonda
de acero inoxidable plana de 5 mm de dimetro (Referencia P/5), a una velocidad de 2
mm/s y una penetracin hasta 10 mm de profundidad (50% del dimetro del fruto), sobre
una de las caras en la zona ecuatorial media de cada fruto hasta el centro basal (receptculo)
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(22). El regreso de la sonda al punto cero fue realizado a una velocidad de 2 mm/s. la
firmeza se expres en g-f. (19, 23)
Medicin instrumental del color
La medicin del color se realiz sobre el epicarpio de la zona ecuatorial de cada fruto
tomando tres lecturas en diferentes puntos, utilizando un espectrocolormetro X-Rite,
modelo SP64, con iluminante D65 y el observador 10 como sistema de referencia, modo
SCI, obteniendo las coordenadas de color L* a* b*, donde L* indica la luminosidad, a*
indica la cromaticidad en el eje verde (-) a rojo (+) y b* indica cromaticidad azul (-) a
amarillo (+). Con estas coordenadas se calcul la diferencia de color (E) utilizando la
siguiente expresin:
(1)
Donde L*, a* y b* representan la diferencias entre las coordenadas de color de los
frutos recubiertos y de los frutos control en los das 1, 3, 5, 7 y 10 de almacenamiento,
respecto a las coordenadas medias de los frutos de control en el da cero (inicio de
almacenamiento).
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Anlisis Microbiolgicos
El recuento de bacterias mesfilas se realiz de acuerdo a la NTC 4519 (24), por la tcnica
de recuento de colonias en placa a 35 C, norma equivalente a la ISO 4833. Los resultados
se reportaron como UFC (unidades formadoras de colonias) de bacterias mesfilas.
Recuento de mohos y levaduras se realiz de acuerdo a la NTC 4132 (25), con base en la
tcnica de recuento de colonias en placa a 25 C, norma equivalente a la ISO 7954. Los
resultados se reportaron como UFC de mohos y levaduras.
Anlisis sensorial
Se llev a cabo en un laboratorio sensorial externo con un panel compuesto por 9 jueces
entrenados en la metodologa previamente. La prueba utilizada fue un perfil sensorial por
aproximacin multidimensional para el tratamiento y el control, utilizando 4 frutos por
tratamiento cada da y se cuantific a travs de una escala descriptiva teniendo en cuenta
que 0 es ausente y 7 muy intenso. De acuerdo a las normas NTC 3932 (26) y NTC 5328
(27), se evaluaron los atributos de sabor caracterstico, color, olor/aroma caracterstico y
firmeza.
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Anlisis estadstico
Se utiliz anlisis de varianza para determinar efectos significativos (P< 0,05) y el mtodo
LSD (mnimas diferencias significativas) como mtodo de comparaciones mltiples, con un
nivel de confianza del 95%. Se utiliz el paquete Statgraphics Plus (Chicago, Il, USA) para
realizar los anlisis estadsticos.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Firmeza
La figura 1, presenta la evolucin de la firmeza de la mora tratada y control durante el
almacenamiento a 5 + 0,5 C por 10 das. El anlisis de varianza report diferencias
significativas (P< 0,05) por efecto del tratamiento con muclago de penca sbila y del factor
tiempo a partir del da 3. La prueba LSD mostr que al da 10 de almacenamiento la mayor
firmeza la obtuvo la mora con el RC con un valor promedio de 1636 gf. En general la
firmeza disminuy de 2664 gf a 1636 gf para la mora con RC, mientras para la mora
control fue de 2662 gf a 914 gf. Despus del primer da la firmeza se redujo en ambos
casos, pero la muestra con recubrimiento present valores significativamente ms altos
frente al control. Esta tendencia se mantuvo hasta el final del almacenamiento. Esto podra
78
explicarse por los procesos de degradacin de los polmeros de la pared involucrados en la
adhesin celular (protopectinas insolubles) a cidos pcticos y pectinas ms solubles se ven
afectados por el RC disminuyendo sus procesos metablicos. Durante el almacenamiento la
prdida de firmeza se puede ver influenciada por la prdida de la presin de turgencia,
prdida de aire extracelular y vascular, la degradacin de la pared celular, la consecuente
prdida de agua por el rompimiento de las clulas (16), y a la propia senescencia (28).
Igualmente se puede ver afectada por una mayor migracin de vapor de agua a nivel de la
superficie favoreciendo el crecimiento de mohos que genera daos estructurales en los
tejidos permitiendo su ablandamiento (29, 30), estos procesos ocurren con una menor
rapidez en los frutos con el RC, ya que el recubrimiento acta como barrera a la migracin
de vapor de agua.
La tendencia de los resultados obtenidos para la firmeza estn de acuerdo con los
presentados por Del Valle et al. (16), quienes trabajaron con muclago de cactus en fresas y
Yaman y Bayoindirli (31) quienes trabajaron con un recubrimiento comercial a base de
polisacridos y cidos grasos en cerezas. Los valores obtenidos para los frutos control
difieren de los resultados presentados por Perkins-Veazie (10) encontrando que los valores
de firmeza fueron ms altos despus del almacenamiento.
79
Figura 1. Evolucin de la firmeza evaluada en mora sin recubrir (B) y mora recubierta con
muclago de penca sbila (R), almacenadas 10 das a 5 + 0,5C.
Color
Las figuras 2, 3 y 4, exhiben los valores medios con intervalos LSD (95%) de las variables
de color L*, a* y b* respectivamente, en la epidermis de la zona ecuatorial de los frutos
control y moras recubiertas evaluados a los 1, 3, 5, 7 y 10 das de almacenamiento. En
todas las variables se observaron diferencias significativas (p<0,05) por efecto de los
factores tiempo y tratamiento. En general todas las coordenadas del color (L*, a* y b*)
mostraron una disminucin marcada desde el da 3 de almacenamiento. La mayor
disminucin se present en la coordenada a*, con una reduccin de 13 unidades. Esta
disminucin muestra similitud a la presentada por Serradilla et al. (32) en cerezas.
Igualmente Del Valle (16) obtuvo una tendencia a disminuir a*, en fresas con RC a base de
muclago de cactus.
80
Hubo diferencia significativa en L* (p<0,05) por efecto del factor tiempo entre el da 1 y el
da 10 tanto para el tratamiento como para el control, (vase figura 2). De igual manera
hubo una diferencia significativa (p<0,05) despus del da 3 entre el tratamiento y el
control. Esto debido posiblemente a que se presenta reacciones de Pardeamento oxidativo
y tambin prdida de humedad que se pueden generar durante el almacenamiento (33, 34).
La menor proporcin en el cambio de L* para la mora con RC se pudo presentar debido al
retraso de los procesos de oxidacin enzimtica que generan el Pardeamento (35, 36).
Figura 2. Evolucin de la luminosidad L* en la zona ecuatorial del fruto evaluada en
mora sin recubrir (control) y en mora recubierta con muclago de penca sbila (RC),
almacenados 10 das a 5+ 0,5C.
Con respecto a la coordenada a*, se encontr diferencia significativa (p<0,05) entre el
tratamiento y el control en el da 5 y 10. El tratamiento y el control tuvieron un descenso
en los valores comparados desde el da 1 hasta el final del almacenamiento en el da 10
(vase figura 3), los frutos recubiertos no presentaron diferencia significativa entre ellos
despus del da 5 de almacenamiento, manteniendo los valores cercanos a 15, donde los
valores para los das 5, 7 y 10 de los frutos con recubrimiento se comportaron como un
81
grupo homogneo. As, este recubrimiento promueve un ligero retraso del desarrollo del
color de la epidermis en comparacin con el tratamiento de control (37). La disminucin de
los valores de a* (disminucin del color rojizo oscuro) se ve afectada probablemente con el
incremento de la tasa de respiracin y de los procesos enzimticos que conducen a
reacciones de Pardeamento (16) oscurecimiento enzimtico.
Figura 3. Evolucin de la coordenada a* en la zona ecuatorial del fruto evaluada en mora
sin recubrir (control) y en mora recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas
10 das a 5+ 0,5C.
En la figura 4 se presenta el comportamiento de la coordenada cromtica b* en moras
control y tratadas. No se presentaron diferencias significativas entre tratamientos al final
del almacenamiento en el da 10. Los frutos control en los das 7 y 10 se comportaron como
un grupo homogneo con los frutos tratados con RC del da 10. En cuanto al factor tiempo
se encontr una diferencia significativa, donde el control al da 1 tuvo un valor promedio de
11,05 y para el da 10 declino a 5,59 y para el tratamiento RC el da 1 present un valor
promedio de 11,30 y para el da 10 disminuy hasta 7,18. La disminucin que se present
82
de este parmetro en los frutos control y en los frutos con RC puede ser atribuido a la
deshidratacin superficial del fruto (38). Adems la reduccin de las coordenadas de a* y
b* se ve traducida en la prdida de la tonalidad amarilla, lo que puede indicar evidencia del
Pardeamento enzimtico.
Figura 4. Evolucin de la coordenada b* en la zona ecuatorial del fruto evaluada en mora
sin recubrir (control) y en mora recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas
10 das a 5+ 0,5C.
Diferencia de color (E)
La figura 5 muestra los valores medios con intervalos LSD (95%) de la diferencia de color
(E) durante el tiempo de almacenamiento de los frutos control y tratados respecto al color
de referencia de los frutos control en el da inicial. A partir del da 1 en el control como en
el tratamiento con RC evidenci un incremento en el cambio del color. El ANOVA mostr
83
diferencia significativa (P<0,05) entre el control y el tratamiento al da 10 de
almacenamiento siendo los frutos tratados con RC los que presentaron un menor cambio.
Algunos fenmenos fisiolgicos en los tejidos como la transpiracin se ven reflejados en la
prdida de humedad durante el almacenamiento lo cual puede afectar el cambio de color
(16). La diferencia significativa entre el control y el tratamiento a partir del da 3 puede
deberse al incremento de la respiracin y a los procesos enzimticos que dan como
resultado la prdida de calidad y de algunas pigmentaciones (34). Los recubrimientos
tienden a retardar los cambios bioqumicos ya que actan como barrera, alterando la
permeabilidad a los gases, conllevando a un incremento del contenido de CO
2
, retrasando
los cambios del color externo e interno de la fruta (39), pudiendo explicar el menor cambio
obtenido para los frutos con RC en el da10 de almacenamiento, lo cual pudo verse afectado
tambin por la degradacin del cido ascrbico propiciado por las reacciones de
Pardeamento enzimtico (40).
Figura 5. Evolucin de la diferencia de color (E*) evaluada en mora sin recubrir (control)
y mora recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas 10 das a 5+ 0,5C.
84
Microbiolgicos
Recuento de bacterias mesfilas
La figura 6 muestra el crecimiento microbiano durante los das de almacenamiento. Como
se puede observar tanto la mora control como la mora con RC tuvieron un considerable
ascenso del crecimiento de mesfilos. El ANOVA present diferencia significativa
(p<0,05) por efecto del tratamiento y del tiempo en todos los das evaluados pasado el da
1. Para las lecturas realizadas en el da 10 de almacenamiento, el control exhibe una media
mxima de 40,3x10
3
UFC, que comparadas frente a los frutos recubiertos en el mismo da
que fue de 12,5x10
3
UFC, indicando la importante accin retardante del RC hasta un 69%
menos. Esto puede ser debido a las propiedades antimicrobianas que poseen los compuestos
del Aloe vera (41). La actividad antimicrobiana del gel del Aloe vera contra bacterias Gram
positivas y Gram negativas ha sido demostrada por varios mtodos. Las antraquinonas
aisladas del gel de aloe vera muestran actividad antimicrobiana, el emodin igualmente tiene
actividad antimicrobiana contra Escherichia coli, mediante la inhibicin del transporte de
solutos en las membranas (17). Pero adems el aloe vera tiene actividad antimicrobiana
contra bacterias y patgenos (42, 43). Los RCs pueden extender la vida til debido a que
reducen el contenido de oxigeno, lo suficiente para retardar la respiracin permitiendo que
ocurra una anaerobiosis e incrementando el dixido de carbono que puede inhibir
efectivamente el crecimiento microbiano (14, 44, 45). Resultados similares obtuvo
85
Martnez (15), quien trabajo un RC a base de Aloe vera aplicado sobre cerezas dulces,
obteniendo una disminucin en el crecimiento de microorganismos mesfilos de hasta un
58% menos frente a las muestras control.
Figura 6. Evolucin del recuento de bacterias mesfilas en mora sin recubrir (control) y
mora recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas 10 das a 5+0,5C
Recuento de mohos y levaduras
La ANOVA mostr en moras control y tratadas diferencia significativa (P< 0,05) a partir
del da 3 de almacenamiento. Las frutas control y las frutas con RC presentaron un
incremento de UFC para mohos y levaduras (figura 7). Las moras recubiertas con aloe
mostraron un menor crecimiento de mohos y levaduras, con un valor promedio de 2,7x10
4
al da 10 de almacenamiento, frente a las moras control que para el mismo da presentaron
86
un promedio mucho mayor (6,7x10
4
), exhibiendo un incremento mayor del 60%. La
reduccin del crecimiento de mohos y levaduras con el RC posiblemente se puede atribuir a
las propiedad antifngica que presenta el aloe vera y que ha sido reportada contra
patgenos como es el Penicillium digitatum, P. expansum, B. cinerea y Alternaria alternata
contra B. gladiolorum, F. oxysporum f.sp. gladioli, H. pruneti and P. gladioli, demostrando
la supresin de germinacin e inhibicin del crecimiento micelial de los mohos (7, 46, 47,
48). Los resultados obtenidos en trminos de reduccin de crecimiento microbiano
coinciden con los presentados por Martnez (15) quien aplic un RC a base de Aloe vera
en polvo sobre cerezas dulces.
Figura 7. Evolucin del recuento de mohos y levaduras en mora sin recubrir (control) y
mora recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas 10 das a 5+0,5C
87
Anlisis sensorial
El sabor (figura 8) mostr diferencias significativas (P<0,05) entre los tiempos de
almacenamiento, presentando tendencia a disminuir la percepcin del sabor en los jueces
para ambos tratamientos. En el factor tiempo se presentaron 4 grupos homogneos de los
cuales los ms representativos son; el da 1 en el cual no se present diferencia significativa
entre los tratamientos, y el conformado por los das 3, 5 y 7, para los cuales la mora con RC
mantuvo una apreciacin similar de sabor por los jueces. En el da 10 se presentaron
diferencias en la percepcin del sabor, siendo mejor los percibidos en los frutos tratados. El
control obtuvo un valor mximo promedio de 6,11 en el da 1 y un mnimo en el da 10 de
4,22, obteniendo una diferencia de 1,89 sobre la escala de 0 a 7. En cambio la mora con RC
obtuvo un valor mximo promedio de 6,22 en el da 1 y un mnimo en el da 10 de 4,89,
obteniendo una diferencia de 1,33, el RC de Aloe posiblemente inhibe la actividad de las
enzimas y las reacciones de Pardeamento que conllevan al deterioro del fruto incluyendo
su sabor (45). El mayor descenso en la percepcin del sabor se present en el da 10 en el
control debido a la presencia de sabores objetables (no caracterstico al fruto) percibidos
por los jueces.
88
Figura 8. Evolucin del atributo sabor caracterstico de la mora sin recubrir (control) y la
mora recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas 10 das a 5+0,5C
En cuanto a la percepcin del color (vase figura 9) ste present diferencias significativas
en el tiempo de almacenamiento, pero no entre los tratamientos (p<0,05), sin embargo para
la mora con RC entre los das 3 y 7 tuvo una tendencia a mantenerse estable entre 5,22 y
5,33. El control obtuvo un valor mximo promedio de 5,88 en el da 1 y un mnimo en el
da 10 de 4,33. En cambio la mora con RC obtuvo un valor mximo promedio de 6,11 en el
da 1 y un mnimo en el da 10 de 4,77. La diferencia significativa que se presenta en el
factor tiempo entre el da 1 y el 10 de almacenamiento en ambos tratamientos,
posiblemente es debida a la actividad enzimtica y a los cambios sensoriales producto del
metabolismo normal (14, 49) y observada por los jueces como la decoloracin de la
tonalidad roja de los frutos. La tendencia decreciente en ambos tratamientos de la
precepcin del color tambin pudo ser afectada por el tiempo de almacenamiento a baja
temperatura, que eventualmente causa cambios de color (38). La percepcin de los jueces
entrenados est relacionada inversamente con los resultados obtenidos en el cambio de
89
color (E) realizado con las mediciones instrumentales, donde a medida que decrece la
percepcin de los jueces durante los das de almacenamiento, el cambio de color (E)
aument tanto para los frutos control como para los frutos con RC, y est relacionado con
disminucin de las variables de color L*, a* y b* presentada en la epidermis de los frutos.
Adems se present una tendencia estable en los das 5 y 7 para los frutos con RC en las
mediciones instrumentales, al igual que en la percepcin de los jueces mostrndose estable
desde el da 3 hasta el da 7, al final en ambos tratamientos hubo una disminucin
significativa de color.
Figura 9. Evolucin del atributo color de la mora sin recubrir (control) y de la mora
recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas 10 das a 5+0,5C
Para el descriptor olor (vase figura 10) las muestras analizadas presentaron una tendencia
decreciente en el tiempo donde los frutos control presentaron un promedio en el da 1 de
4,44 y en el da 10 de 4,11, y los frutos con RC 4,22 en el da 1 y 3,88 en el da 10.
90
Realizando los anlisis comparativos entre el control y el tratamiento con RC, no se
encontr diferencias significativas, aunque el control tuvo una menor variacin dentro de la
percepcin, la menor percepcin presentada por la mora con RC en el da 10, pudo ser
debida a que el RC se comporta como barrera semipermeable que reduce el paso de
compuestos aromticos desprendidos por el fruto. (50), tambin es posible que los
compuestos del RC encapsulen los compuestos aromticos, debido a su baja permeabilidad
al oxigeno (45).
Figura 10. Evolucin del atributo del olor/aroma caracterstico de la mora sin recubrir
(control) y de la mora recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas 10 das
a 5+0,5C
La firmeza de los frutos de mora mostr diferencia significativa (p<0,05) en el tiempo de
almacenamiento y entre los dos tratamientos aplicados a partir del da 5 (figura 11). Ambos
tratamientos tuvieron la misma tendencia decreciente, donde los frutos control presentaron
un promedio en el da 1 de 5,55 y en el da 10 de 3,77 y los frutos con RC en el da 1 de
91
5,66 y 4,77 en el da 10. La percepcin de la firmeza de la mora con RC fue
aproximadamente un 50 % mayor con respecto a la presentada por la mora control en el da
10 de almacenamiento. Este comportamiento fue quizs debido a la degradacin gradual de
la pectina de la pared celular por efecto de la actividad enzimtica propia del fruto despus
de su recoleccin (10, 31) y a la misma senescencia del fruto (28). En estos eventos
metablicos de la senescencia se generan cambios en la firmeza de las frutas que implican
la prdida de presin de turgencia, la degradacin de los componentes y otros cambios
fisiolgicos en las membranas, adems de las modificaciones en las relaciones simplasto /
apoplasto, la degradacin del almidn, y las modificaciones en la estructura de la pared
celular (51). El comportamiento que se present entre la percepcin del atributo firmeza por
parte de los jueces entrenados y la firmeza instrumental tuvieron una tendencia similar al
presentar un decrecimiento progresivo desde el da 1 hasta el da 10 de almacenamiento.
Los jueces entrenados pudieron percibir los cambios significativos en la firmeza a partir del
da 5 mientras las diferencias arrojadas por texturmetro se observaron desde el da 3.
Figura 11. Evolucin del atributo firmeza de la mora sin recubrir (control) y de la mora
recubierta con muclago de penca sbila (RC), almacenadas 10 das a 5+0,5C
92
CONCLUSIONES
El RC a base de aloe vera aument la vida til de la mora almacenada en refrigeracin y
retras los procesos fisiologicos como la respiracin y la transpiracin. Tambin disminuy
hasta un 50% la prdida de firmeza, tanto por anlisis instrumental como sensorial. El uso
del RC a base de muclago de aloe vera, retras los cambios de color, el crecimiento de
microorganismos mesfilos y mohos y levaduras, en comparacin con los las moras sin
recubrimiento. El anlisis sensorial mostr que la aplicacin del RC mejor la percepcin
de los atributos evaluados por los jueces entrenados en comparacin con los frutos control.
La percepcin del sabor fue favorable en los frutos con RC comparado a los frutos control;
igualmente en los parmetros de color, olor y firmeza hasta el decimo da de
almacenamiento. El RC a base de aloe es una alternativa de conservacin poscosecha para
prolongar 5 das ms la vida til de la mora de Castilla almacenada con refrigeracin.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen a los Laboratorios de Frutas, y de Control de Calidad de Alimentos
de la Universidad Nacional de Colombia Sede Medelln, al Laboratorio de Control de
Calidad de Alimentos de la Corporacin Interactuar y al Laboratorio de Anlisis Sensorial
de la Fundacin Intal.
93
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CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES GENERALES
La utilizacin de recubrimiento comestible del gel muclaginoso de penca sbila en dilucin
acuosa en una concentraciones del 50% P/P, forma una pelcula para la utilizacin como
revestimientos para productos vegetales frescos como la mora de Castilla.
La adicin de la cera carnauba y el glicerol cumplen un papel importante en la disminucin
de la permeabilidad de los gases y del vapor de agua, permitiendo que la relacin de ndice
de respiracin y la prdida de peso sea menor a la presentada por mora sin recubrir
(control).
En condiciones de almacenamiento refrigerado a 5 0,5C y a una humedad relativa del
85% el recubrimiento comestible desarrollado a base de gel muclaginoso de penca sbila
y aplicado sobre la mora de Castilla fresca, permiti aumentar la vida til de esta fruta y
retras los procesos fisiolgicos de la respiracin y la transpiracin.
El RC a base de aloe vera disminuy hasta un 50% la prdida de firmeza, lo cual fue
avalado tanto por anlisis instrumental como sensorial. Adems retras los cambios de
color (coordenadas L* y *a), la prdida de peso, el sabor, el crecimiento de
100
microorganismos mesfilos, de mohos y de levaduras, en comparacin con los las moras
sin recubrimiento.
La evaluacin sensorial demostr que las moras con el recubrimiento desarrollado a base
de gel muclaginoso de penca sbila tuvieron mejor aceptacin en todos los atributos
evaluados, hasta el da 10 de almacenamiento con refrigeracin.
La utilizacin de gel muclaginoso de penca sbila como recubrimiento comestible en mora
de Castilla fresca es un sistema de conservacin bastante promisorio para el manejo en
poscosecha de esta fruta altamente perecedera y susceptible a daos y deterioros durante su
almacenamiento.
Otros estudios similares se pueden desarrollar con esta recubrimiento comestible para
evaluar la estabilidad, el comportamiento de vitaminas y antioxidantes presentes en la
mora, adems de utilizar el recubrimiento como vehculo de micronutrientes de baja
presencia en la fruta de bajo consumo en la dieta de alguna poblacin especfica.
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