15/04/2014

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ANALISISDEAGUA
TPN2
MICROBIOLOGIADEALIMENTOS
MODULOII
MICROORGANISMOS
INDICADORES Mtodo de Recuento
Recuento en placa
PATOGENOS
p
Nmero Ms Probable (NMP)
Recuento microscpico directo
Marcha de A/P
(baja dosis infectiva)
PATOGENOS
( j )
Marcha de Recuento
(alta dosis infectiva)
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MICROORGANISMOSINDICADORES
M.o.gruposdem.o.queorientan
acercade:
1 - PRESENCIA POTENCIAL DE M.O. PATGENOS
Cantidad >patgenos
Mayor o igual resistencia
Fcil deteccin e identificacin
1
Ser destruidos por el proceso o
tratamiento
2
2 - EFICACIA DE UN DETERMINADO TRATAMIENTO
MICROORGANISMOSENELANALISIS
DEAGUA
INDICADORES
- Recuento de Aerobios Mesfilos
- Coliformes
- Escherichia coli
PATOGENOS
- Pseudomonas aeruginosa
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MICROORGANISMOSINDICADORES
Todoslosm.o.aerobioscapacesdecrecera3537C.
1 AEROBIOSMESOFILOS
Indican:
Materiasprimascontaminadas
Limpiezaydesinfeccinincorrectas
Inadecuadotratamientotrmico
Inadecuadascondicionesdealmacenamiento
Fallasdeprocesoocontaminacinpostproceso
Cond.adecuadasparaeldesarrollodepatgenos
Rpidaalteracindelproducto(vidatil)
ENAGUA:
Buenas Prcticas de Manufactura
AEROBIOS MESOFILOS INDICAN:
BuenasPrcticasdeManufactura
Recontaminacinenelsistemadedistribucin
Supresencianoesdeimportanciasanitaria
Noresultaeneldeteriorodelalimento
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ENAGUA:
AEROBIOS MESOFILOS - METODOLOGIA:
APC:AgarPlateCount(AgarparaRecuentoenplaca)
APC Porvertido
37C24hs
SPC:StandardPlateCount
1mlTC 0,1mlTC
MICROORGANISMOSINDICADORES
Todos losm.o.aerobios yanaerobios facultativos,
2 COLIFORMESTOTALES
bacilos cortos G(),capaces defermentar lactosa
produciendo cido ygas a3237C.
Origenfecalynofecal.
Indican:
Contaminacin con fuentes areas y superficies de Contaminacin confuentes areas ysuperficiesde
contacto
FalladeBuenas Prcticas deManufactura
Fallas deProceso
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ENAGUA:
COLIFORMES TOTALES INDICAN:
FalladeBuenas Prcticas deManufactura
Fallas de proceso (No resisten cloracin)
COLIFORMES TOTALES INDICAN:
Fallas deproceso (Noresisten cloracin)
ENAGUA:
COLIFORMES TOTALES - METODOLOGIA: NMP
A Ensayo Presuntivo
Caldo Lauril Sulfato
35C 24h 35 C 24 h
10 ml 1 ml 0,1 ml
B Ensayo Confirmatorio
Caldo Brila
35C 24h
Ag. Selectivo: Lauril Sulfato
Ag. Diferencial: lactosa
35 C 24 h
Ag. Selectivos: Bilis, VB
Ag. Diferencial: lactosa
Tabla de NMP
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MICROORGANISMOSINDICADORES
Coliforme,fermentador delactosa a3537Cya
3 ESCHERICHIACOLI
, y
45Cconproduccin decido ygas.
Suhbitat eseltracto intestinaldel hombrey
animalesdesangre caliente.
Origenfecal.
Indica:
Contaminacin fecal
Posible presencia depatgenos entricos
ENAGUA:
ESCHERICHIA COLI INDICA:
Contaminacin fecal (por excelencia)
Posible presencia depatgenos entricos
NOESPATOGENO!
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ENAGUA:
E. COLI - METODOLOGIA: MARCHA DE A/P
100 ml
Filtracion por
membrana
Enriquecimiento
selectivo
Aislamiento
Agar ENDO o EMB
37C 24 h
Pruebas
bioqumicas
IMViC
membrana
Caldo Lauril SO
4
=
a) 30C 4 h
b) 44C 14 h
ENAGUA:
E. COLI - METODOLOGIA: MARCHA DE A/P
Agar ENDO
Ag. selectivos: sulfito sdico y
f i
Agar EMB
Ag. selectivos: eosina, azul de metileno
fucsina
Ag. diferenciales: lac y fucsina
Colonia tpica: roja con brillo verde
metlico
Ag. diferenciales: lac, eosina, azul de
metileno
Colonia tpica: oscura o con centro
oscuro y brillo metlico verde
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MICROORGANISMOSPATOGENOS
4 PSEUDOMONASAERUGINOSA
Bacilogram(),oxidasa(+).
Patgenooportunista(piel,heridas
quemados).
Hbitat: aguas Hbitat:aguas
Noespatgenoentrico
ENAGUA:
P. AERUGINOSA - METODOLOGIA: MARCHA DE A/P
100 ml
Filtracion por
membrana
Enriquecimiento
selectivo
Aislamiento
Agar Cetrimida
42C 48 h
Pruebas
bioqumicas
Gram
Oxidasa
Agar P
Agar F
Acetamida
membrana
Acetamida
Caldo Verde de
Malaquita
37C 48 h
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ENAGUA:
P. AERUGINOSA - METODOLOGIA: MARCHA DE A/P
AGARCETRIMIDA
Ag. selectivo: Cetrimida Ag.selectivo:Cetrimida
Ag.diferenciales:Notiene
Pseudomonas spp.producenpigmentos:
Verdeazulado:piocianina
AmarilloverdosofluorescentealUV(254
nm): fluorescena nm):fluorescena
Rojo:piorrubina
Marrnanegro:piomelanina
ENAGUA:
P. AERUGINOSA - METODOLOGIA: MARCHA DE A/P
PRUEBASBIOQUIMICAS
Gram Gram
Oxidasa
AgarF:favoreceformacindefluorescena
AgarP:favoreceformacindepiocianinay/opiorrubina
AgarAcetamida:P.aeruginosa desaminaacetamida
produciendoNH
3
.AumentaelpH,elindicador(rojofenol)
viraalrojofuerte.
2DE3PRUEBAS
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ENAGUA:
P. AERUGINOSA - METODOLOGIA: MARCHA DE A/P
AGAR P AGAR F UV (254 nm)
ANALISISDEAGUA ESQUEMADESIEMBRA
MUESTRA
1) RAM
3) E coli
4) Ps. aeruginosa
)
1ml TC 0,1ml TC
APC
37C 24 hs
2) Coliformes totales
Lauril SO
4
=
35C 24 hs
10 ml 1 ml 0,1 ml
DC SC SC
Para no diluir
los nutrientes
a) Ensayo presuntivo
3) E. coli
Enriquecimiento
Filtracin por
membrana
100 ml
Filtracin por
membrana
100 ml
Caldo Verde de
Malaquita 25 ml
Enriquecimiento
Brila
35C 48 hs
b) Ensayo confirmatorio
Lauril SO
4
=
25 ml
4 hs 30C
14 hs 44C
ENDO o EMB
37C 24 hs
Aislamiento
Confirmacin
bioqumica
Gas +
IMViC
37C 48 hs
Crec. +
Cetrimida
42C 48 hs
Aislamiento
- Gram
- Oxidasa
- Agar P
- Agar F
- Acetamida
Confirmacin
bioqumica