Titulo: Evidencia de Aprendizaje.

Mundo microbitico
Materia: Microbiologia y Taxonoma Microbiana
Facilitador: Martha Carolina Garcia Chavarria
Alumno: Mario Alredo !algado Mejia
Introduccin
Agua para Uso y Consumo Humano: agua que puede ser consumida sin restriccin. La calidad de
esta es fundamental para prevenir y evitar la transmisin de enfermedades gastrointestinales y otras,
para lo cual se requiere establecer lmites permisibles en cuanto a sus caractersticas microbiolgicas,
fsicas, organolpticas, qumicas y radiactivas, con el fin de asegurar y preservar la calidad del agua en
los sistemas, hasta la entrega al consumidor. El trmino se aplica al agua que cumple con las normas de
calidad promulgadas por las autoridades locales e internacionales.
Muestra simple: proporciona informacin sobre la calidad en un punto y momento dado puede ser
importante a la hora de establecer las caractersticas del agua en un punto de la red de abastecimiento
Lmites permisibles de calidad del agua
El contenido de organismos resultante del examen de una muestra simple de agua, debe austarse a lo
establecido en la tabla

CARACTERISTICA LIMITE ERMISI!LE
!rganismos "oliformes totales #usencia o no detectables
E. coli o "oliformes fecales u organismos
termotolerantes
#usencia o no detectables
$ao situaciones de emergencia, las autoridades competentes podr%n establecer los agentes biolgicos
nocivos a la salud que se deban investigar.
El agua abastecida por el sistema de distribucin no debe contener E. coli o "oliformes fecales u
organismos termotolerantes en ninguna muestra de &'' ml. Los organismos "oliformes totales no deben
ser detectables en ninguna muestra de &'' ml( en sistemas de abastecimiento de localidades con una
poblacin mayor de )' ''' habitantes( estos organismos deber%n estar ausentes en el *)+ de las
muestras tomadas en un mismo sitio de la red de distribucin, durante un periodo de doce meses de un
mismo a,o.
Agua potable: para uso de consumo humano, aquella que no contiene contaminantes obetables ya sea
qumicos o agentes infecciosos y que no causa efectos nocivos al ser humano
Metodologa"
#iltracin por membrana" -todo para la deteccin y recuento de las bacterias eventualmente
presentes en el agua. "onsiste en filtrar un volumen determinado de la muestra de agua a anali.ar
/tomada en un frasco estril0 a travs de una membrana con un tama,o de poro tal que retiene las
bacterias, y su incubacin en placas con medios de cultivo selectivos durante el tiempo y a la
temperatura adecuada para cada bacteria a determinar. 1i se detecta crecimiento bacteriano, al finali.ar
la incubacin se reali.a el recuento.
2entaas del mtodo de filtracin por membrana:
3 4roporciona recuentos directos.
3 Es m%s preciso /se obtienen resultados m%s reproducibles0 que la prueba de 5-4 /numero mas
probable0.
3 6%pido y f%cil de reali.ar.
3 #nali.a mayores vol7menes de muestras con baas concentraciones de organismos
8esventaas del mtodo de filtracin por membrana:
3 9nterfieren los altos niveles de turbiedad.
3 Los coliformes debilitados pueden sobrevivir meor en la prueba de 5-4.
3 Las altas concentraciones de no "oliformes interfieren en el recuento.
Coli$ormes Totales" "oliformes, bacilos :ram negativos, no esporulados, aerobios o anaerobios
facultativos que a ;) <" fermentan la lactosa con formacin de %cido, ocasionando en las colonias
desarrolladas el vire del indicador roo neutro presente en el medio y la precipitacin de las sales biliares.

Las bacterias de este gnero se encuentran principalmente en el intestino de los humanos y de los
animales de sangre caliente, es decir, homeotermos, pero tambin ampliamente distribuidas en la
naturale.a, especialmente en suelos, semillas y vegetales.
Los "oliformes se introducen en gran n7mero al medio ambiente por las heces de humanos y animales.
4or tal motivo suele deducirse que la mayora de los coliformes que se encuentran en el ambiente son
de origen fecal. 1in embargo, existen muchos coliformes de vida libre.
El grupo coliforme est% formado por los siguientes gneros:
&. Escherichia =. >lebsiella ;. Enterobacte ?."itrobacter
Coli$ormes #ecales" 1on aquellos que fermentan la lactosa a ??,) @ ?),)A", an%lisis que permite
descartar a Enterobacter, puesto que sta no crece a esa temperatura. 1i se aplica este criterio crecer%n
en el medio de cultivo principalmente Escherichia coli /*'+0, y algunas bacterias de los gnero
Klebsiella y Citrobacter. La prueba de coliformes fecales positiva indica un *'+ de probabilidad de que
el coliforme aislado sea E. coli
La Escherichia coli de origen animal y la de origen humano son idnticas. Los coliformes fecales en el
suministro de agua es un indicio de que el suministro de agua puede estar contaminado con aguas
negras u otro tipo de desechos en descomposicin. :eneralmente, las bacterias coliformes se
encuentran en mayor abundancia en la capa superficial del agua o en los sedimentos del fondo.
Meso$ilos Aerobios" microorganismos unicelulares que derivan del reino vegetal, incluidos en el grupo
de los 1chycomysetes, su tama,o es variable y oscila entre ',)3= B, algunos tienden a formar filamentos
y pueden llegar a medir ;'3?' B. 4or su forma se encuentran esfricas /cocos0, bastones /bacilos0 y
espirales /vibrio0, se reproducen por biparticin.
En este grupo se incluyen todas las bacterias, mohos y Levaduras capaces de desarrollarse a ;)A"
durante ?CDoras, en este recuento se estima la microflora total sin especificar tipos de microorganismos,
refleando la calidad sanitaria de un alimento, las condiciones de manipulacin, las condiciones
higinicas de la materia prima. En recuento bao de aerobios no implica la ausencia de patgenos o sus
toxinas, de la misma manera un recuento elevado no significa presencia de flora patgena, no son
recomendables recuentos elevados.
Hongos " !rganismos pertenecientes al reino fungi, que se caracteri.an por tener un cuerpo formado
por estructura filamentosa con ramificaciones, que se conocen con el nombre de hifas, el conunto de
hifas constituye el micelio, se alimentan por absorcin pudiendo propagarse por esporas flageladas o no,
las paredes celulares pueden ser de queratina, celulosa o manana. "recen formando colonias en un
medio selectivo a =)A". 1on organismos eucariticos, poseen un n7cleo verdadero, formadores de
esporas no poseen clorofila. Los hongos viven como saprfitos en el suelo y agua donde contribuyen a
la descomposicin y reciclado de la materia org%nica, utili.ando en.imas extracelulares como celulasas
y pectinasas, manteniendo de esta manera la fertilidad del suelo. #lgunos hongos producen
enfermedades al hombre, a los animales y a las planta.
Le%aduras" 1on microorganismos cuya forma dominante de crecimiento es unicelular. 4oseen un
n7cleo y se multiplican por reproduccin sexual o asexual, por gemacin o por fisin transversal. La
reproduccin sexual cuando ocurre, es por medio de ascosporas contenidas en un saco o asca.
&ESARR'LL'
Reacti%os y Materiales
34lacas preparadas con #gar E58! /para determinacin de "oliformes Fotales y E. coli0 /2er anexo &0.
34lacas preparadas con #gar -todos Est%ndar /4ara determinacin de -esofilos #erobios0 /2er anexo
=0
34lacas preparadas con #gar -3:reen /4ara determinacin de Dongos y Levaduras0 /ver anexo ;0
3-embranas de ',?) Gm, esteriles ?Hmm millipore o equivalente /embudo, soporte del embudo y
portafiltros0
34lacas previamente Didratadas con &ml de solucin de fosfato de 1odio monobasico /solucin de
trabao0 de 4retrifilm para determinacin de E. coli /a0, -esofilos aerobios /b0, Dongos y Levaduras /c0
/estas solo se deber%n utili.ar 7nicamente cuando no se tengan placas preparadas de $80
Aparatos e instrumentos
3Equipo -anifold de millipore o equivalente
a0 b0 c0
3Iiltros -illipore o equivalente estriles

3#bra.aderas para filtros millipore o equivalente
3$omba de vaco
3-anguera de l%tex 3-atra. >ita.ato de ='''ml 3Fapn de hule horadado del 5o. C
34in.as estriles
3"ampana de fluo laminar
3 9ncubadoras con termostato que evite variaciones mayores de J &A", provista con termmetro.
3"ontador de colonias de campo oscuro, con lu. adecuada, placa de cristal cuadriculada y lente
amplificador.
3L%mpara de lu. ultravioleta /ver procedimiento FE3L#$3463&)?32 4reparacin del %rea de siembra0.
reparacin de la muestra
Las muestras de an%lisis deber%n contener mas de ?''ml de agua , ya que se inocula un total de
&''ml por an%lisis, esto es &'' ml para determinar coliformes, &'' ml para -esofilos aerobios y &''ml
para Dongos y levaduras, la muestra sobrante se utili.ara para determinar pD y cloro
El an%lisis de la muestra debe practicarse inmediatamente despus de su recoleccin. Es por ello que
se recomienda que de no efectuarse as el an%lisis, se inicie dentro de las dos horas prximas a la
recoleccin de la muestra y en ning7n caso, este lapso debe de exceder de =? horas para agua potable
y de K horas para otros tipos de agua para que sea v%lido el resultado del an%lisis.
8urante el perodo que transcurre del muestreo al an%lisis, se debe conservar la muestra a ? A", con
obeto de inhibir la actividad bacteriana para no obtener resultados falsos o dudosos.
La muestra se debe recibir con la siguiente 9dentificacin:
5ombre del lugar donde se tomo
Iecha del muestreo
5ombre de quin muestreo
Dora en que se muestreo
Ena ve. recibida la muestra registrar en bit%cora con pluma indeleble tinta negra, en cada po.o se
anali.an diferentes puntos de muestreo por lo cual cada muestra lleva doble identificacin
Resultados
I(TERRETACI)( &E RESULTA&'S*
A+AR E(&' ,C'LI#'RMES T'TALES- E* coli.
#0 El recuento de las placas preparadas debe hacerse en un contador de colonias est%ndar u otra fuente
de lu. amplificada. Ena ve. transcurridas =?hrs a ;)J &A" sacar de la incubadora las placas observar la
morfologa colonial
$0 4lacas sin colonias, cuando las placas no muestren colonias reportarlas como ' EI"L&''ml
"0 1i las placas presentan crecimiento revisar la morfologa colonial como a continuacin se describe

8eber%n contarse todas las colonias independientemente de su tama,o o de la intensidad del color
80 #ltas concentraciones de colonias en las placas ocasionar% que toda el %rea de crecimiento se vuelva
roa o rosada. !casionalmente, en placas demasiado cargadas, el centro de la placa puede carecer de
colonias visibles pero pueden apreciarse muchas colonias peque,as en los bordes. "uando esto ocurra
se reportara incontable
E0 Las colonias puede aislarse para una posterior identificacin. Mnicamente seleccionando la colonia
que creci sobre la membrana. 4roceder al an%lisis siguiendo mtodos standard.
A+AR MET'&'S ESTA(&AR ,MES'#IL'S AER'!I'S.
#0 El recuento de las placas preparadas debe hacerse en un contador de colonias est%ndar u otra fuente
de lu. amplificada. Ena ve. transcurridas ?Chrs a ;)J &A" sacar de la incubadora las placas observar la
morfologa colonial seg7n sea el caso.
$0 4lacas sin colonias, cuando las placas no muestren colonias reportarlas como ' EI"L&''ml
"0 1i las placas presentan crecimiento revisar la morfologa colonial como a continuacin se describe:
&.3 Fama,o: 8i%metro en mm, los lmites de tama,o de las colonias varan desde fracciones de
milmetros has &' mm de di%metro. La mayora de los microorganismos forman colinas de tama,o
limitado al tiempo de incubacin.
=.3 Iorma: La forma de la colonia es la apreciacin general de su figura la cual puede ser puntiforme,
circular, filamentosa, irregular, ri.oide, como huso.
;.3 Elevacin: esta puede ser, elevada , plana, convexa, pulvinada, umbonada, umbilicada.
?.3 $orde: 1e refiere al contorno de las colonias y puede ser, entero, ondulado, lobulado, crenado,
filamentoso, ri.ado.
).3 "olor: $lanco, amarillo, negro, marrn anaranado.
K. 3 1uperfcie: Lisa o rugosa.
H. 3 #specto: D7medo, seco, algodonoso, pulverulento, aterciopelado, velloso, granuloso
C. 3 "onsistencia: 1uave /butirosa0, viscosa, membranosa o dura.
*.3 Lu. refleada: Las colonias pueden ser brillantes o mate
&'.3 Lu. transmitida: pueden ser trasl7cidas o transparentes
#lgunas de las colonias pueden presentarse de las siguientes formas:
&.3 "adenas de colonias no separadas claramente entre si, que parecen se causadas por la
desintegracin de un c7mulo de bacterias.
=.3 "olonias que se desarrollan en pelcula en la orilla de la caa sobre la superficie del agar.
;.3 "olonias de crecimiento extendido y en algunas ocasiones acompa,adas de inhibicin del
crecimiento
"uando las colonias se presenten como en el punto &, =, ; contarlas como provenientes de una sola
fuente, si la caa contiene una sola cadena contar como una sola colonia y si la caa contiene varias
cadenas que parecen originarse de fuentes separadas, contar cada cadena como colonia individual, no
contar cada colonia de la cadena individualmente.
8eber%n contarse todas las colonias independientemente de su tama,o o de la intensidad del color
80 #ltas concentraciones de colonias en las placas ocasionar% que toda el %rea de crecimiento se vuelva
color crema o rosada. !casionalmente, en placas demasiado cargadas, el centro de la placa puede
carecer de colonias visibles pero pueden apreciarse muchas colonias peque,as en los bordes. "uando
esto ocurra se reportara incontable.
A+AR M/+REE( ,H'(+'S 0 LE1A&URAS.
#0 El recuento de las placas preparadas hacerse en un contador de colonias est%ndar u otra fuente de
lu. amplificada. Ena ve. transcurridos ) das a =)J &A" sacar de la incubadora las placas observar la
morfologa colonial seg7n sea el caso.
$0 4lacas sin colonias, cuando las placas no muestren colonias reportarlas como ' EI"L&''ml I"Lml
"0 1i las placas presentan crecimiento revisar la morfologa colonial como a continuacin se describe:
&.3-orfologa colonial: Las levaduras unicelulares, tienen colonias semeantes a las bacterias, el
di%metro oscila entre =3?mm, de color blanco, crema, amarillo, roo, etc. "ncavas de aspecto brillante o
mate, opacas, de bordes lisos. Los hongos filamentosos /mohos0, tiene colonias de =3; cm de di%metro,
de color olivo, verde claro, grises, blancas, roas, amarillas, etc. "on aspecto polvoso, rugoso, terroso,
aterciopelado, algodonoso, generalmente mates, opacas de bordes irregulares.
=.3 -orfologa microscpica: 1e observa con la ayuda del microscopio a seco fuerte, identificando las
siguientes estructuras:
a0 Fipos de micelio
1eg7n su nivel de organi.acin celular pueden ser:
3Enicelulares /levaduras0.
34luricelulares /mohos0.
38imrficos /posee ambos tipos de micelio0.
4or su funcin:
3-icelio vegetativo: se encarga de la captacin de nutrientes.
3-icelio areo o reproductor: produccin de esperoas /sexual o asexual0.
b0 8e acuerdo al color de las hifas:
3Dialino: "uando no est% pigmentado.
38emati%ceo: "uando posee color caf oscuro.
4or el tipo de la hifa puede ser:
31eptado: 4osee divisiones.
3"enoctico: 5o tiene divisiones.
c0 1u sistema de reproduccin es asexual y sexual:
Las esporas asexuales son:
Falosporas:
#0 #rtrosporas: 1on esporas que se forman por fragmentacin de las hifas.
$0 $lastosporas: 1e forman en las levaduras por la gemacin a partir de una clula ya
preexistente.
"0 "lamidosporas: Estas son redondeadas y poseen una doble pared gruesa que les confieren
gran resistencia.
"onidiosporas:
1on esporas producidas en estructuras especiali.adas llamadas esporangios, que son sacos
redondos unidos al micelio vegetativo, por una estructura llamada esporangiforo.
Las esporas sexuales son:
3 Nigosporas: Esporas contenidas en cigosporangios en los Nigomycetes.
3 #scosporas: Esporas contenidas en saquitos denominados ascas en los #scomicetes.
3 !osporas: Esporas contenidas en oosferas correspondientes a los oomycetes.
3 $asidiosporas: Esporas contenidas en basidios correspondientes en basidiomicetes
8eber%n contarse todas las colonias independientemente de su tama,o o de la intensidad del color
80 #ltas concentraciones de colonias en las placas ocasionar% que toda el %rea de crecimiento
se vuelva verde, blanca o a.ul, o podran apreciarse muchas colonias peque,as en toda la
superficie de la placa. "uando esto ocurra se reportara incontable.
RE#ERE(CIAS
5orma !ficial -exicana 5!-3&=H311#&3&**?, 1alud ambiental. #gua para uso y consumo humano.
Lmites permisibles de calidad y tratamientos a que debe somete el agua para su potabili.acin
5orma !ficial -exicana 5!-3&&&311#&3&**? -todo para la cuenta de -ohos y Levaduras en
alimentos.
-icrobiologa :eneral Enero =''& E49$9 945.
-todo #naltico Dongos y Levaduras L"3-93') ='').
-todo E-# ';=; "uenta de Dongos y Levaduras, por vaciado en placa.
-todo E-# ';== "uenta de Dongos y Levaduras, por difusin en placa.
5orma !ficial -exicana 5!-3'*=311#&3&**? -todo para la cuenta de bacterias aerobias en placa
-icrobiologa :eneral Enero =''& E49$9 945
-todo #naltico "uenta Fotal /-esofilos #erobios0 L"3-93'; ='')
-todo E-# ';&C "uenta de -esofilos #erobios
9nstrucciones de uso medio en placa listo para uso $8 Ounio =''*