UNIVERCIDAD

AVIERTA Y ADISTANCIA
DE MEXICO

[Capte la atencin del lector con una descripcin breve atractiva.
Esta descripcin es un resumen breve del documento. Cuando est
listo para agregar contenido, haga clic aqu y empiece a escribir.]
PRCTICA 1.
CUANTIFICACIN DE
GLUCOSA EN
MERMELADAS
MARCO TERICO
Una mermelada corresponde a una mezcla de fruta entera, trozada o molida, con una misma
cantidad de azcar (sacarosa, granulada), que ha sido calentada y evaporada hasta alcanzar una
concentracin de azcar equivalentes a los 65 Brix.
La adicin de azcar ms ciertas sustancias de las frutas producen la consistencia de gel que
conforma la textura de las mermeladas y jaleas. Para lograr esto es necesario que exista un nivel de
acidez y un porcentaje de azcar adecuados.
Para determinar la concentracin de glucosa en mermelada es necesario hidrolizar las molculas de
sacarosa en glucosa y fructosa en presencia de cido 3,5-dinitrosaliclico (DNSA) generando una
coloracin rojo-marrn.

OBJETIVOS
Determinar la concentracin de glucosa en una muestra de mermelada.

DESARROLLO
Material:
Matraz aforado
Pipeteas
Matraz Erlenmeyer
Embudo
Papel filtro
Tubos de ensaye
Equipo:
Balanza
Bao de agua
Espectrofotmetro
Reactivos:
Muestras de mermelada
DNSA (cido 3,5-dinitrosaliclico)
cido sulfrico H2SO4
Solucin de NaOH
Tartrato de sodio y potasio



Preparacin del reactivo DNSA (cido 3,5-dinitrosaliclico)
Disuelvan 10 g de DNSA en 200 ml de NaOH 2.0M.
Calienten la disolucin y mezclen perfectamente.
Disuelvan 300 g de tratrato de sodio y potasio en 500 ml de agua (estabilizante de color).
Mezclen ambas disoluciones, agiten y enrasen a 1.0 l con agua destilada.

Cuantificacin de azcares totales
1. Pesen 1.0 g de mermelada en un matraz Erlenmeyer y aadan 10 ml de H2SO4 2M.
2. Calienten en bao de agua hirviendo durante 20 minutos
3. Dejen enfriar y aadan con mucho cuidado 12 ml de NaOH al 10% p/v
4. Agiten y filtren a un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua destilada.
5. Transfieraan 10 ml de la disolucin de la mermelada a otro matraz aforado de 100 ml y
enrasar con agua destilada.

Cuantificacin de azcares reductores
1. Pesen 3.0 g de mermelada en un matraz Erlenmeyer y aadan 50 ml de agua destilada.
2. Calienten y agiten durante 10 minutos
3. Filtren a un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua destilada.
4. Transfieran 10 ml de la a otro matraz aforado de 100 ml y enrasar con agua destilada.

ANLISIS DE LOS RESULTADOS
Obtencin de la curva de calibracin
1. Preparen la solucin estndar de glucosa (15 mg/ml): pesen 1.5 g de glucosa en un matraz
aforado de 100 ml y enrasen con agua destilada.
2. Etiqueten 5 matraces aforados de 100 ml con las letras A, B, C, D y E.
3. En cada matraz transfieran los volmenes de solucin estndar de glucosa y agua destilada
de acuerdo a la siguiente tabla:

Matraz A B C D E
Volumen de solucin estndar de glucosa (ml) 2 3 6 8 10
Volumen de agua destilada (ml) 98 97 94 92 90
Concentracin de glucosa (mg/ml) 0.3 0.45 0.9 1.2 1.5


1. Etiqueten y llenen seis tubos de muestra tal y como se muestra en la siguiente tabla:

Nmero de la muestra Blanco 1 2 3 4 5
Solucin estndar de glucosa (matraz) N/A A B C D E
Volumen de solucin estndar de glucosa (ml) 0 1 1 1 1 1
Volumen de reactivo DNSA (ml) 1 1 1 1 1 1
Volumen de agua destilada (ml) 3 2 2 2 2 2

2. Calienten los tubos en agua hirviendo durante 5 minutos.
3. Dejen enfriar los tubos y aadan 6 ml de agua destilada a cada tubo.
4. Midan la transmitancia de cada uno de los tubos a 430 nm en el espectrofotmetro.

Concentracin de
glucosa (mg/ml)
Transmitancia (lectura
del Spektra, T%)
Absorbancia (A) Absorbancia especfica
de la glucosa (A
A
blanco
)
0 (Blanco) 27.54 0.56 0
0.30 23.44 0.63 0.07
0.45 20.04 0.69 0.13
0.90 18.21 0.74 0.18
1.20 15.13 0.82 0.26
1.50 14.45 0.84 0.28

8. Grafiquen los valores de absorbancia vs. Concentracin, para obtener la curva de calibracin.


Medidas de las muestras de mermelada
1. Coloquen 1 ml de la disolucin de mermelada, 1 ml del reactivo de DNSA y 2 ml de agua
destilada en un tubo de ensayo.
2. Calienten los tubos en agua hirviendo, durante 5 minutos.
3. Dejen enfriar los tubos y aadan 6 ml de agua destilada a cada tubo .
4. Determinen la transmitancia de cada tobo en el espectrofotmetro a 430 nm.
5. Los valores obtenidos para las muestras fueron los siguientes:

Muestra Transmitancia
(lectura del Spektra, T%)
Absorbancia
(A)
Absorbancia especfica de la glucosa
(A A
blanco
)
1 18.6 0.73 0.17
2 21.3 0.67 0.11

6. Con la ayuda de la curva estndar, determinen la concentracin de glucosa en las muestras.
Utilizando la ecuacin de la grfica despejando x

Sustituimos la absorbancia para cada muestra y obtenemos valores de concentracin para las
muestras, resultados en la siguiente tabla:

y = 0.1717x + 0.0346
R = 0.9614
0.0000
0.0500
0.1000
0.1500
0.2000
0.2500
0.3000
0.3500
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin de Glucosa (mg/mL)
Curva de Calibracin de Glucosa
Muestra Transmitancia(lectura del
Spektra, T%)
Absorbancia
(A)
Absorbancia
especfica de la
glucosa
(A Blanco)
Concentracin de
glucosa (mg/ml)
1 18.6 0.73 0.17 0.79
2 21.3 0.67 0.11 0.44

1. Finalmente determinen la concentracin de glucosa por gramo de mermelada, no olviden
considerar las diluciones de cada una de las muestras.
a) Considerando que para obtener la concentracin de la muestra se aplica la siguiente frmula:

Donde:
C = Concentracin de la muestra expresado en
mg/mL
Pm = Peso de la muestra expresado en mg
Fd = Factor de dilucin de la muestra (mL)

b) El factor de dilucin de la muestra de mermelada de acuerdo a la preparacin para la
cuantificacin de azcares totales es:
Peso de la muestra: 1 g
Volumen de primer aforo: 100 mL
Volumen de alcuota: 10 mL
Volumen final de aforo: 100 mL

c) Despejando Pm y sustituyendo para cada muestra:

La concentracin de glucosa por gramo para la muestra 1 es de 0.79 g y para la muestra 2 es de
0.44 g.

CONCLUSIONES
En esta prctica se observ la utilizacin correcta del espectrofotmetro como mtodo instrumental
para determinar la concentracin de azcares en una sustancia orgnica.

REFERENCIAS
Skoog Douglas, Anlisis Instrumental, Mxico, 2000, Ed Interamericana
Daniel C. Harris; Anlisis Qumico Cuantitativo, 1999.Ed. Revert