La epidemiologia es una de las bases ms importantes para el estudio correcto de una enfermedad ya sea de origen bacteriano, fngico, viral, entre otras., esta se encarga del estudio de la frecuencia, determinantes, relaciones, predicciones y control de los factores relacionados con la salud y enfermedad en poblaciones humanas, animales y vegetales. En medicina veterinaria la leptospirosis es una enfermedad de origen bacteriano de suma importancia debido a su gran incidencia en las diferentes especies, entre las cuales destacan carnvoros, lepridos, bovinos y porcinos, as pues adems de preocuparse por la salud animal, es responsabilidad del mdico veterinario mantener la salud humana mediante acciones de salud pblica en enfermedades zoonoticas, tales como la leptospirosis, el agente causal de esta es Leptospira que es dividida en 2 especies; interrogans y biflexa, siendo la primera donde encontramos las cepas patgenas y el resto saprofitas.En este trabajo hablaremos acerca de esta enfermedad, tomando en cuenta para su estudio desde su taxonoma hasta su impacto en saludpblica. Posteriormente debemos conocer sus caractersticas taxonmicas haciendo referencia a su clasificacin, as tambin patogenicidad, virulencia, mortalidad, mutagenicidad, morbilidad, entre otras. La patogenicidad es el potencial del agente para producir enfermedad a cualquier ser vivo, a diferencia de la virulencia que es la severidad del agente, as mismo la mutagenicidad es la capacidad de alterar o modificar caractersticas de su especie bajo condiciones especiales los cuales se dan en uno o varios genes. Por tal razn es importante tener un diagnstico correcto a travs de pruebas diagnsticas de apoyo, como hemogramas, qumicas sanguneas, urianlisis, y en muchos casos las pruebas serolgicas y de identificacin especficas que algunos laboratorios ofrecen como pruebas rpidas o como es el caso de esta enfermedad en laboratorios certificados, al tener un correcto diagnostico podemos hacer uso adecuado de los antimicrobianos para eliminar o inhibir el crecimiento del agente patgeno.
ETIOLOGIA E HISTORIA:
Leptospira (L) es el agente causal de la leptospirosis, la cual es una zoonosis de importancia a nivel mundial. El trmino procede del griego lepto-(fino) y spira (espiral). Se estima que 10 millones de personas son infectadas al ao pero se desconoce el nmero de muertes que son causadas por ella. En 1802, Lacereaux hizo la primer descripcin clnica de leptospirosis mientras que en 1883 Landarouzi describi un caso tpico con ictericia y hemorragias la cual fue denominado como tifus heptico, tres aos despus Mathieu en Francia y Weil en Alemania describen cuadros agudos febriles con ictericia y manifestaciones de agresin renal a la cual se le nombro enfermedad de Weil en 1887. Para 1914 los japoneses Inada e Ido encontraron una espiroqueta en el hgado de cobayos infectados con sangre de mineros enfermos, el cobayo presento signos hemorrgicos por lo cual se le dio el nombre de Spirochaeta icterohaemorrhagiae, tiempo despus el mismo equipo japons estudio la relacin de esta espiroqueta con las ratas de desage y concluyeron que 40% de esas ratas eran portadoras de esta enfermedad. Para 1917 y 1918al ser estudiadas las muestras aisladas fue propuesto el gnero Leptospira. En 1955 y 1957 Herrer estudio perros y gatos infectados y encontr que el 46.4% de 444 perros estudiados presentaban anticuerpos con ttulos positivos. Adems en 6 de los 435 perros (6.4%) en los que se consigui hacer cultivos de triturado de rin se aisl elmicroorganismo y en aquella muestra se encontr como predominante L. canicola con 84%. Se puede manifestar como una infeccin asintomtica, como un estado gripal o puede desarrollar manifestaciones hemorrgicas y asociarse con meningismo, ictericia e insuficiencia renal. Es conocida como enfermedad de weil, enfermedad de los porqueros o tambin como enfermedad de Stuttgart en perros. Morfolgicamente es una espiroqueta helicoidal con extremos de gancho, bastantes mviles con un tamao aproximado de 6-20 m de largo y un dimetro de 0.1 m; entre sus caractersticas metablicas principales esta que es una bacteria aerobia, son oxidasa positivas y Gram negativa con un pH de7.2-7.4 y una temperatura ptima de desarrollo cercana a los 30C. Posee un movimiento activo flexuoso de rotacin, ondulatorio y translucidacion que se produce en ausencia de flagelos externos y depende de dos flagelos piroplasmaticos insertados en ambos extremos de la bacteria. Solo puede ser visible por microscopia de campo oscuro o de contraste de fase. Su replicacin es por medio de fisin binaria y contienen endotoxinas, hemolisinas y protenas superficiales de adherencia.
figura1: diagrama que ilustra una espiroqueta tpica con indicacin de las caractersticas estructurales ms destacadas (A) y sus relaciones en un corte transversal (B).
En medio de cultivo lquido, el movimiento es de rotacin rpida sobre su eje longitudinal. En medios semislidos el movimiento es en serpentina y horadacin mientras que en medios solidos reptan por la superficie.
TAXONOMA:
La clasificacin taxonmica actual de Leptospira se inicia con el dominio procariotes, seguido por la clase scotobacterial, orden spirochaetales, familia leptospiraceae, genero leptospira y finaliza con las especies que en este caso la biflexa es saprofita y la interrogans es patgena para animales y humanos (figura 2)
Figura 2: diagrama representante de la clasificacin taxonmica de la leptospira.
EPIDEMIOLOGIA:
La leptospirosis es considerada una antropozoonosis de gran distribucin mundial, el estudio de la epidemiologia es complejo debido al gran nmero de factores que influyen en su presentacin, lo cual dificulta la extrapolacin entre diferentes regiones geogrficas y obliga el conocimiento individualizado de cada continente, pas, regin o zona.
Las diferentes cepas pueden afectar potencialmente a un gran nmero de especies animales que actuaran como hospederos de mantenimiento o accidentales en funcin del serovar considerado. Los hospederos de mantenimiento actan como fuente de infeccin que mantienen para otros mamferos de la misma u otra especie y son caracterizados por: - Gran receptividad a la infeccin por el serovar que mantienen. - Relativa baja patogenicidad del microorganismo en el hospedero. - Presencia de infeccin renal con leptospiruria prolongada. - En algunos hospedadores, mantenimiento de las leptospiras en el tracto genital. - Transmisin eficaz de la infeccin a los animales de la misma especie. Dominio:procariotes Clase:Schizomicete Orden: Spirochaetales Familia: Leptospiraceae Genero: Leptospira Especies: interrogans o biflexa
La clasificacin patgena (interrogans) de la cual se distinguen 250 serovariedades se encuentran divididos en 24 serogrupos. Entre las serovariedades ms comunes que afectan al ganado bovino en Mxico, estn: Icterohaemorragiae, Hebdomadis, Bratislava, Pyrogenes, Grippotyphosa, Pomona, panam, wolffi, hardjo (exclusiva de ganado bovino) y tarassovi; mientras que Pomona, Tarassovi y Australisson las que afectan de forma comn al ganado porcino; as mismo Pomona, Icterohaemorragiae, Canicola, Wolffi, Tarassovi, Gripotyphosa son serovariedades que afectan a perros siendo las ms comunes Icterohaemorragiae y Canicola, igualmente las cepas Canicola e Icterohaemorragiae afecta ratas que es el principal medio de propagacin de Leptospira. Los caballos y felinos no suelen verse afectados por Leptospira (Cuadro 1). Serogrupo Serovares ms representativos Australis australis, bratislava Autumnalis autumnalis Ballum ballum, castellonis Bataviae bataviae Canicola canicola Cynopteri cynopteri Grippotyphosa grippotyphosa Hebdomadis hebdomadis Icterohaemorrhagiae copenhagheni, icterohaemorrhagiae Javanica javanica, poi Louisiana louisiana Mini swajizak Pomona pomona Pyrogenes pyrogenes Sarmin sarmin Sejroe hardjo, saxkoebing, sejroe, wolffi Shermani shermani Tarassovi tarassovi
Cuadro 1. Serogrupos y serovariedades ms importantes.
En algunos hospederos, se mantiene en el tracto genital, la transmisin de la infeccin entre hospederos de mantenimiento se realiza independientemente de las condiciones climticas y ambientales. Sin embargo, en el caso de la transmisin entre hospederos de mantenimiento y accidental o entre accidentales hace necesario la supervivencia en el medio ambiente para poder efectuar la infeccin.
FUENTES DE INFECCIN: Una de las principales fuentes de contagio es constituida por la orina de animales enfermos, reservorios naturales, as como el contacto directo con estos.
Entre los principales vectores de contagio podemos encontrar a roedores como ratas y ratones los cuales son los ms importantes para su condicin de reservorio natural, de igual forma algunos autores consideran las garrapatas, aves e insectos como otros vectores (figura 3).
Figura 3. La principal fuente de infeccin son los roedores
De igual forma el agua contaminada, leche, descargas vaginales, fetos de animales infectados y abortos son una fuente infecciosa importante. De esta forma el agua es un medio idneo para mantenimiento de la bacteria ya que esta se beneficia por la temperatura ya sea baja o alta, llegando el tiempo de supervivencia aproximada de 22 das en agua y 5-6 das en barro, por lo cual los principales brotes son con frecuencia en pocas de lluvia o en lugares con clima templado. En la orina el factor de importancia para la supervivencia de la bacteria es el pH, aunque cabe mencionar que esta condicin no se da en humanos ni roedores debido a la acidez del medio por lo cual la orina no es el medio idneo para su supervivencia, pero en bovinos en los cuales el pH de la orina llega a un nivel menos cido tiene mayor posibilidades de sobrevivir, as pues en tejidos depende mucho del pH postmortem y el efecto antagnico que supone la contaminacin con otras bacterias. Algunos de los factores que afectan son ambientales tales como la temperatura, el pH, al igual que otros como la edad, estado inmunitario, sexo y alimentacin. Es por esto que el mdico veterinario se encuentra expuesto potencialmente a esta enfermedad as como el resto de la poblacin.
PREVALENCIA: En los animales domsticos la prevalencia nos indica que los porcinos, ovinos y bovinos son las especies con mayor incidencia en leptospirosis, mientras que los caprinos y las aves domesticas son los que presenta una seroprevalencia menor (cuadro 2)
Cuadro 2. Con la seroprevalencia de las principales especies de animales domsticos.
De acuerdo al Boletn epidemiolgico de la Secretaria de Salud en un periodo de 2009-2013 se observ que durante octubre se presentaron ms casos (Grfica 1) a nivel nacional siendo las entidades ms afectadas Sinaloa, Chiapas, Tabasco y Yucatn.
Grfica 1.Canal endmico de los casos de leptospirosis a nivel nacional en humanos de 2009-2013. 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Q1 zona de xito Q2 zona de alarma Q3 zona epidemica Zona de seguridad Zona de alarma Zona de xito Zona epidmica
Este canal endmico es un instrumento de vigilancia usado para comparar frecuencias de eventos de una enfermedad en relacin con aos anteriores, permitiendo el descubrir oportunamente si el caso notificado de un padecimiento cualquiera es el usual en cada semana o mes del ao en curso comparado con el mismo periodo en aos anteriores.
PATOGNESIS:
La leptospira es muy invasiva debido a la produccin de enzimas, su motilidad por excavacin y su tropismo orgnico. Esto puede ser debido a factores txicos tales como la hemosilina, fibrosilinas y lipasas, as mismo por endotoxinas como la catalasa, y la hialuronidasa, estas dan paso a una ictericia por causas isqumicas y toxicas y de igual forma terminan por producir anoxia y nefrosis hemoglobinuria. El agente infeccioso causante de la leptospirosis puede ingresar por medio de piel, ingestin o mucosas y se distribuye por todo el organismo incluyendo SNC y el humor acuoso, despus de la penetracin por medio de piel se disemina por medio del torrente sanguneo donde se multiplica al igual que en el parnquima heptico en un periodo aproximado de 30 das provocando una leptospiremia por al menos 7 das provocando dao funcional en algunos rganos principalmente rin e hgado, los anticuerpos especficos detectables aparecen aproximadamente despus de 10 das de infeccin, despus desaparece de torrente sanguneo pero es localizado en distintos rganos como el rin donde los anticuerpos tienen poco acceso. Los signos de la enfermedad generalmente coinciden con la fase de leptospiremia donde esto puede atribuirse a factores como las hemosilina y las lipasas siendo la primera causa de la anemia, estos factores son ms frecuentes en L. pomona y grippotyphosa. Posteriormente se le suma la accin de anticuerpos situados en la superficie de los eritrocitos sensibilizndolos causando su hemolisis, esta hemolisis causada por la hemosilina y por el dao hepatocelular se le atribuye a las causas isqumicas y toxicas (ictericia). Tras la ubicacin en los riones la cual se ve facilitada por la produccin de ureasa se multiplicarn en los tbulos renales donde la nefritis provocada por el dao capilar y la produccin de determinadas endotoxinas y hemosilinas que terminan por producir anoxia y nefrosis hemoglobinuria que obstruir los capilares y tambin por la presencia de mononucleares infiltrados. En una fase avanzada (leptospiruria) puede tener un carcter continuo o intermitente con una duracin variable dependiente de la especie, el bovino puede durar aproximadamente 7 meses, equinos de 2 a 3 meses, cerdos hasta 1 ao y perros aproximadamente 6 meses.
SINTOMATOLOGA Y SIGNOLOGIA El periodo de incubacin generalmente es aproximado de 14 a 30 das, algunas de las manifestaciones son infecciones que pasan por subclnicas siendo muy comn en veterinarios, llegando a un cuadro anictrico leve o hasta una forma ictrica severa llamada enfermedad de Weil. La forma anictrica suele tener una duracin aproximada de 7 das con signos tales como la fiebre, escalofros, mialgias, nuseas y vmitos, los cuales van acompaados con dolor abdominal, diarreas, hepatomegalia y esplenomegalia. Mientras que la forma ictrica es mssevera y puede llegar a tener insuficiencia renal, ictericia, hemorragia intestinal o pulmonar, arritmias, insuficiencia cardiaca o disnea. En bovinos encontramos 5 tipos distintos de leptospirosis entre los cuales la primera es una forma frustrada la cual cursa con hemoglobinuria, sin ictericia y con una cura posteriormente, en el caso de la leptospirosis sobreaguda es caracterizada por una fiebre alta, hemoglobinuria, ictericia, disnea por congestin pulmonar, anorexia, altos niveles de urea en sangre, de albumina y de bilirrubina en orina, llega a provocar aborto las principales serovariedades son L. grippotyphosa, L. Pomona, L. icterohaemorrhagiae y L. autmnalis. En el caso de una leptospirosis aguda, es ms frecuente en terneros casi siempre mortal, presentando anorexia, laxitud, fiebre, hemoglobinuria, ictericia, septicemia, hemorragias, anemia y a veces puede presentar diarrea, por ltimo la subaguda, es de una forma similar a la aguda pero de menor severidad puede pasar por una enfermedad subclnica excepto en los animales gestantes en los cuales suele producir abortos, en algunos casos se ha observado dermatitis necrtica. La forma crnica est relacionada con L. hardjo es caracterizada por abortos, retencin de placentas, y la bacteria es eliminada por medio de la orina durante un largo periodo. En el caso de los cerdos es inaparente o subclnica presentando sntomas como anorexia, perturbacin del equilibrio, rara vez con ictericia, hemoglobinuria, convulsin, trastornos gastrointestinales y disminucin de peso, presentando una forma aguda la cual es muy similar a la presentada en terneros con la excepcin q siendo L. Icterohaemorragiaepresenta una tasa elevada de mortalidad. Tambin presenta una forma crnica en la cual su principal connotacin en esta especie es la presencia de abortos, infertilidad y casi siempre es causada por L. Pomona. En el caso de los caninos en las claves de aproximacin diagnostica globalizada muestran una proteinuria de origen renal, a la cual pueden mejorar entre el 3er y el 5toda, en esta especie cada manifestacin suele ser diferente, suele tener 6 veces ms prevalencia en machos. En una leptospirosis ambulatoria la cual es el 85% de los casos muestra una inyeccin de vasos epiesclerales, con decaimiento, secreciones purulentas, con una enfermedad renal. En un segundo tipo encontramos la leptospirosis crnica la cual es una evolucin prolongada de la leptospirosis ambulatoria con los signos de anorexia, vomito, inyeccin de vasos epiesclerales.
En la leptospirosis subclnica tenemos una escasa sinologa con algunas gastroenteritis, en un ltimo tipo tenemos la leptospirosis septicmica aguda la cual es infrecuente y tenemos una enfermedad renal aguda por infeccin, con hemorragias petequiales e ictericia, presenta secrecin purulenta escasa de coloracin amarillo, con inyeccin de vasos epiesclerales, pudiendo presentar una hipertermia seguido de una hipotermia. En equinos los sntomas suelen ser variables y en la mayora de los casos la enfermedad cursa de modo asintomtico aunque puede producirse fiebre, ictericia, hemoglobinuria, necrosis en piel y labios, conjuntivitis con edema en los parpados lagrime y fotofobia sonde se puede observar hepato-nefritis, presentando abortos.
LESIONES ANATOPATOLGICAS: Las lesiones no suelen ser patognomnicas, por lo que no puede basarse en ellas para el diagnstico de la enfermedad, tambin las pocas lesiones observables dependen del serovar implicado as como los rganos y la especie afectada, comnmente el cadver a la necropsia muestra necrosis en piel, acmulo de lquido serogelatinforo rojizo en el tejido subcutneo, hgado hipertrfico y palidez heptica con algunos focos hemorrgicos en pulmones. En msculo cardiaco se observan degeneraciones y algunos puntos con hemorragias, comnmente el rin suele estar edematoso de color rojizo o pardo con nefritis intersticial, la vejiga con orina turbia o rosada y con los ndulos tumefactos.
DIAGNOSTICO:
El diagnstico en el caso de leptospirosis humana y animal suele ser complicado o difcil, dadas las caractersticas intrnsecas de las leptospiras y a su epidemiologia. En la actualidad se cuenta con un gran nmero de tcnicas de laboratorio distintos, pero su realizacin previa, es conveniente recabar informacin que pueda orientar al diagnstico, por lo cual lo ideal es combinar un diagnostico epidemiolgico, clnico y de laboratorio. El diagnostico real debe basarse en el aislamiento, cultivo e identificacin, pero dadas las caractersticas de la bacteria hacen que este mtodo sea el de menos eleccin a comparacin de los mtodos serolgicos o moleculares.
DIAGNOSTICO EPIDEMIOLGICO En algunas apariciones tanto humanas como animales, se encuentran cuadros sintomatolgicos compatibles con un caso de leptospirosis, se debe enfatizar en la anamnesis algunos aspectos como edad, sexo, direccin, antecedentes, lugares de posible exposicin, factores climticos, presencia de otras especies
domsticas, vacunacin y en el caso de humanos se agregan ocupacin y sintomatologa.
DIAGNOSTICO CLNICO Tiene un carcter presuntivo y se realiza fundamentalmente a travs de los signos y sntomas que presentan los animales y humanos, adems las lesiones anatomopatologicas caractersticas de la enfermedad aportan una gran informacin. (Figura 4)
Figura 4. Algoritmo diagnstico de la leptospirosis Fase 1: la anamnesis se diferencia en anamnesis clnica remota y datos clnicos del momento, en la primera se evalan los antecedentes patolgicos y los teraputico mientras que en la segunda debe tomarse en cuenta que la enfermedad puede expresarse en un amplio espectro de sntomas clnicos, desde un mnimo sndrome febril hasta marcados cuadros sobre agudos de CID o nefritis intersticial aguda. En el examen clnico general el veterinario debe constatar las formas clnicas mas graves, mientras que en el examen clnico se refiere a las formas clnicas ms expresivas y se centra en aparatos de visin, aparato cardiovascular, aparato respiratorio, aparato digestivo, sistema tegumentario, aparato dental, aparato musculo esqueltico, aparato urinario, sistema linfoide y sistema nervioso central. En la fase 2 y la fase 3 se basa a un diagnostico de laboratorio apoyado con pruebas diagnsticas.
Fase 1 Anamnesis:fisiologica Examen clinico objetivo general Examen clinico objetivo particular Diagnostico signologico Fase 2 EXAMENES CLINICOS COMPLEMENTARIOS INESPECIFICOS Diagnostico clinico presuntivo Fase 3 EXAMENES COMPLEMETARIOS ESPECIFICOS Diagnostico clinico comfirmativo o de alta presuncion de leptospirosis
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Algunos de los exmenes complementarios de diagnstico son inespecficos entre los cuales encontramos principalmente un hemograma y una qumica sangunea los cuales son las pruebas ms frecuentes en clnicas de pequeas especies. Hemograma: en este estudio complementario encontramos q el hematocrito y hemoglobina son variables segn la anemia, deshidratacin, la vasculitis y el curso de la enfermedad, mientras que los eritrocitos presentaran normocitemia u oligocitemia por ditesis hemorrgica o, en la insuficiencia renal crnica por dficit de eritropoyetinas. En el caso de los leucocitos, al inicio de la enfermedad puede mostrar una leucopenia y en estadios medios una leucocitosis con neutrofilia, frecuente desviacin a la izquierda y monocitosis, y leve linfopenia y eosinopenia mientras que en estados tardos, linfocitosis. En el recuento de plaquetas encontraremos una posible trombocitopenia, la magnitud de esta es signo de gravedad por la marcada vasculitis y el inicio de la CID. Esto es ms frecuente en la forma aguda grave. Qumica sangunea: en la qumica sangunea encontraremos una urea elevada a partir del tercer o cuarto da, una creatinemia elevada tardamente, estos parmetros deben relacionarse con el compromiso funcional del filtrado renal (deshidratacin general y edema renal), as como tambin con el porcentaje del parnquima renal que sigue siendo funcional. Por otra parte la bilirrubinemia total y directa estar elevadas en la hepatitis por inversin del polo de excrecin del hepatocito, presentara una uricemia elevada en un 20% en las hepatitis grave. Igualmente presentara proteinemia ya que la albumina y las globulinas sern variables segn el estado de hidratacin. Por otra parte las tcnicas bacteriolgicas son las ms complejas, puesto que nos brindan resultados importantes como la observacin, aislamiento e identificacin del microorganismo, este diagnstico debe ser basado en el conocimiento de la patogenia de la bacteria y de sus propiedades. Algunas de estas tcnicas pueden ser divididas en: tcnicas indirectas, las cuales detectan anticuerpos y tcnicas directas encaminadas a la deteccin de leptospiras o sus antgenos en tejidos y fluidos corporales. En algunos casos tales como en muestras procedentes de fetos por eleccin las tcnicas directas estn mas indicadas que las indirectas pues el diagnostico individual cobra mayor importancia, en el caso de ser animales adultos las tcnicas de eleccin suelen ser indirectas ya que son ms sencillas y su costo es reducido. Para animales vivos lo ideal es enviar sangre y/o leche en la fase aguda y orina en una fase crnica, en el caso de un animal muerto los rganos de eleccin son hgado, rin, cerebro y glndulas adrenales, as como cualquier fluido interno. En los humanos en el periodo de leptospiremia, los productos patolgicos tiles son sangre y LCR durante la primera semana y orina en las semanas siguientes.
TCNICAS DIRECTAS Algunos mtodos serolgicos nos brindan un diagnostico en corto tiempo y son capaces de detectar anticuerpos, estas son las pruebas de laboratorio ms utilizadas en el diagnstico de la leptospirosis, al igual que para la realizacin de estudios epidemiolgicos, el principal problema es que en algunos casos que se presentan crnicamente no siempre son detectados ya que se encuentra en un nivel bajo de anticuerpos. Para este tipo de diagnstico se han utilizado diversas tcnicas tales como la tcnica de aglutinacin microscpica (MAT), prueba de microaglutinacion microscpica con antgeno muerto (MSAT), aglutinacin macroscpica, prueba hemoltica, fijacin de complemento, ensayo inmunoenzimatico (ELISA) y reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
TCNICA DE AGLUTINACIN MICROSCPICA (MAT):Es el mtodoserolgico de referencia para el diagnstico de leptospirosis, se usa para detectar anticuerpos en suero del paciente sospechoso o enfermo, donde el suero reacciona con antgenos vivos de leptospira de 10 das de crecimiento en medio liquido de EMJH con enriquecimiento. Para la realizacin de la prueba se utilizan cultivos de cuatro u ocho das de edad cuya suspensin produzca una transmitancia del 60-70% en un espectofotometro a 400nm de longitud de onda. A pesar de ser la prueba ms recomendada y extensa, presenta una serie de desventajas de entre las cuales no distingue anticuerpos vacnales de los de infeccin, resulta difcil una estandarizacin ya que su valorizacin es subjetiva y requiere el mantenimiento de cultivos de leptospira, de igual forma no siempre es detectado el animal enfermo principalmente cuando el serovar implicado es L. hardjo que tiene como caracterstica ser poco antignico (Figura 5).
Figura 5: interpretacin de resultados siendo el control una prueba negativa de aglutinacin siendo el +1 el menos aglutinado y el 4+ el que presenta mayor aglutinacin
PRUEBA DE ELISA: Las deficiencias que permite el MAT ha obligado a los cientficos emplear esta tcnica que ayuda a la deteccin de anticuerpos tanto en tanque de leche como en el suero, esta es capaz de detecta la Inmunoglobulina M durante la primera semana de la enfermedad y la deteccin tarda de inmunoglobulina G que permite diferenciar infecciones recientes de pasadas. Esta prueba es considerada como ms sensible que MAT, es de fcil estandarizacin, puede ser almacenada durante meses, pero al igual que MAT no diferencia los anticuerpos vacnales de las infecciones, y al contrario de MAT no detecta la cepa de infeccin (figura6)
Figura 6: kit para la prueba de Elisa
REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA: Permite una excelente identificacin y tipificacin de las leptospiras, pues logra una amplificacin rpida y exponencial de una secuencia determinada del ADN. Se puede aplicar a muestras clnicas sin necesidad del aislamiento de la leptospira y as obtener resultados precoces de valor diagnostico. Requiere laboratorio con equipamiento costoso y con personal altamente especializado.
TCNICAS INDIRECTAS La demostracin de la presencia de leptospiras, o sus componentes en la sangre, tejidos y/o leche es de gran valor diagnstico, entre las tcnicas indirectas encontramos la observacin en microscopio de campo oscuro, tincin argenica, tcnica de tincin inmunohistoquimica, tcnica de deteccin y estudio de cidos nucleicos y aislamiento.
OBSERVACIN EN MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO: Este mtodo se realiza para la observacin de leptospiras en los fluidos orgnicos. Es difcil debido al gran nmero de artefactos que, por su parecido con las leptospiras, pueden crear confusin. Adems precisa que haya un gran nmero de microorganismos en las muestras (figura 6)
Figura 6: aspecto de las leptospiras cuando se estudian con microscopio de campo oscuro. Su estructura helicoidal, que les proporciona un aspecto a modo de cordn y extremos en forma de gancho diferencia a estas bacterias de la mayora.
TCNICA DE TINCIN INMUNOHISTOQUIMICA: Tiene una baja sensibilidad, por lo que son poco adecuado para el diagnstico de portadores crnicos, lo que depende del nmero de microorganismos en la muestra, en esta podemos encontrar la tcnica de inmunofluoresencia, la cual es ms adecuada para la deteccin de leptospiras, la mayor de las veces se utiliza en el diagnstico para los casos de abortos y de la presencia de leptospiras en sedimentos de orina. Su mayor desventaja es que requiere de la produccin de antisueros policlonales de buena calidad y de la utilizacin de microscopios de fluorescencia (figura7).
Figura 7. Prueba de inmunofluoresencia
DIAGNOSTICO DIFERENCIAL Para llegar al diagnstico diferencial, es necesario tener una buena anamnesis que abarque los antecedentes particulares y/o animales patolgicos de 15 a 20 das anteriores a la presentacin de la enfermedad. Dada la diversidad de presentaciones, se deben diferenciar de algunas por especies segn las manifestaciones clnicas predominantes.
Bovinos: Se deben diferenciar con cuadros que cursan con hemoglobinuria, hematuria, hemolisis, abortos, mastitis y disminucin de la produccin lctea tales como anaplasmosis, babesiosis, pasteurellosis, brucelosis, listeriosis, toxoplasmosis, intoxicacin por cobre o algn trastorno alimentario. Porcinos: Brucelosis, enfermedad deAujezky, salmonelosis y una deficiencia nutricional.
Equinos: anemia infecciosa equina, salmonelosis, tripanosomiasis y rinoneumonitis viral equina.
Humanos: dengue, malaria, influenza, hepatitis viral, etc.
PREVENCION: La prevencin de la leptospirosis, en general la erradicacin es difcil debido a que est bastante extendida entre los animales domsticos y salvajes, pero la vacunacin de las mascotas si reduce la incidencia en animales, esta vacunacin se realiza con una bacterina.
Por otra parte acciones como el control sanitario de animales importados, el drenaje de los terrenos, las medidas de proteccin en el campo, junto con la construccin de establos y edificios a prueba de roedores tambin reducen la incidencia de leptospirosis en humanos.
SENSIBILIDAD A LOS ANTIMICROBIANOS:
El objetivo primordial para el tratamiento contra la infeccin por leptospirosis, es controlar la infeccin antes del dao irreparable que puede ocurrir en el hgado y rin. Prcticamente todos los antimicrobianos tienen efecto sobre la infeccin por leptospiras, excepto de la sulfonamidas y el cloranfenicol en animales. Los antibiticos ms recomendados son Dihidroestreptomicina, penicilina, estreptomicina, oxytetraciclina y tetracilina. El tratamiento vara dependiendo la especie.
Bovinos: Dihidroestreptomicina: 25mg/kg./5 das /IM. Estreptomicina: 12-25mg/kg./ dos veces al da por 3 das / IM. Estreptomicina: 25mg/Kg. una sola vez durante la fase de leptospiruria. Clorhidrato de tetraciclina: 11mg/kg./5 das Tetraciclina: 15-25 ml/kg. /4 das / IM. Oximicina: 100g/5 das / IM. Transfusin sangunea 5-10 L/450kg en caso de anemia hemoltica.
Equinos: Dihidroestreptomicina: 20-25mg/kg./24h durante 4-6 das / IM. Tetraciclina: 15-25mg/kg./12h durante 4-6 das /IM. Penicilina en caso agudo: 10000-20000UI/kg./12h durante 5-7 das /IM. Corticoesteriodes por va parenteral en caso de oftalmia peridica en equino Pomada de atropina en equino tres al da.
Porcinos: Tetraciclina: 6,6 mg/kg./da/5dias/IM Oxytetraciclina: 800g/ tonelada de pienso de 8-11 das Estreptomicina: 40-50mg/kg./dic/4-6 das/IM Oximicina: 20-30mg/kg./4-6dias/IM
Caninos: Dihidriestreptomicina: 20-25mg/kg./24h durante 4-6 das / IM. Tetraciclina: 15-25mg/kg./12h durante 4-6 das /IM. Penicilina en caso agudo: 10000-20000UI/kg./12h durante 5-7 das /IM. Terapia para una enfermedad renal crnica.
IMPORTANCIA VETERINARIA:
La leptospira agente causal de la leptospirosis afecta a una gran parte de los animales, ya sea domsticos o silvestres pero as mismo tambin es un problema de salud pblica al ser una enfermedad zoonotica de impacto a nivel mundial. Teniendo en cuenta q son 250 serovares patgenos conocidos actualmente es muy difcil controlar la enfermedad pero se reduce la prevalencia al aplicar una vacunacin con los serovares principales dependiendo la especie (cuadro 3)
Cuadro 3: principales serovares, el hospedador y las caractersticas clnicas.
Siendo estas cepas las cepas importantes en el mbito veterinario, en el cual se debe dar la prevencin con el uso de vacunas, aislando al animal o con un aseo adecuado y en algunos casos educando a los dueos para que contribuyan con estos procedimientos preventivos.
Conclusiones
La leptospira spp es una bacteria y es el agente causal de la leptospirosis, la cual es una enfermedad zoonotica de suma importancia a nivel mundial pues bien afecta a las especies animales de produccin, animales de compaa y a la especie humana.
Su principal vector son los roedores en especfico las ratas, pero con la capacidad de sobrevivir en un medio hmedo por algunos das usando ese mismo como medio de infeccin tales como agua estancada, leche o fetos abortados. El ingreso de la bacteria puede ser por piel o por mucosas pasando al torrente sanguneo donde se replicara y llegara a los rganos blanco, que en este caso son hgado y rin.
En los ltimos 5 aos se ha visto que en los meses de octubre (verano) es cuando se tiene mayor prevalencia principalmente en lugares hmedos tales como Sinaloa, Tabasco, Yucatn solo por mencionar algunos.
En la mayora de los animales susceptibles puede causar aborto, infertilidad, algn problema renal y/o heptico, suele ser mortal en algunos animales jvenes tales como terneros y en otras especies como el gato llegan a ser portadoras pero no llegan a presentar algn signo de la enfermedad pues tienen desarrollada una alta resistencia a esta.
El diagnostico se puede efectuar de distintas maneras como por ejemplo hemogramas, qumica sangunea, prueba de Elisa, prueba de aglutinacin microscpica, reaccin en cadena de la polimerasa, entre otras. Por otra parte la sensibilidad que tiene hacia los antimicrobianos es muy marcada pues solo es resistente al cloranfenicol y las sulfonamidas, dando opcin a elegir entre otras opciones como la estreptomicina y la penicilina entre otros.
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