VIP para E.

coli 0157:H7 Paquete inicial

Equipo Requerido
• Balanza
• Licuadora ú homogenizador (estomacher)
• Bolsas para homogenizador o vasos de licuadora y recipientes de
500mL
• Incubadora de 35°C
• Mezclador Vórtex
• Pipetas
• Autoclave
• Tubos de ensayo

Medios Requeridos
• Caldo de Soya Tripticasa (# 63000 - 500 gm)
• Novobiocina, sal sódica (# SN1628)

Número de Catálogo Presentaciones de VIP para E.coli O157:H7

• 600020 20 ensayos
• 600050 50 ensayos

12822 SE 32nd Street Bellevue, WA 98005

800.245.0113 or 425.603.1123 • fax 425.603.0080
info@rapidmethods.com • www.rapidmethods.com
Especificidad de VIP para E.coliO157:H7 dentro de un Amplio
Rango de Enterobacteriaceae

Noventa y cinco cepas de Enterobacteriaceae fueron analizadas para evaluar la especificidad de VIP
para E.coliO157:H7. Muchos organismos fueron aislados de alimentos naturalmente contaminados.
Otras aislados fueron obtenidas de fuentes institucionales, incluyendo laboratorios independientes, el
CDC, ATCC, USDA y FDA. Los organismos considerados como productores potenciales de reactividad
cruzada en otros estudios (1,2) también fueron incluidos en esta investigación.

Número de Número de
Número de Muestras Muestras
Organismo Cepas Positivas Negativas
Citrobacter spp. 3 0 3

Enterobacter spp. 6 0 6

Escherichia spp. (excepto O157) 14 0 14

Escherichia coli O157 (incluyendo H7) 45 45 0

Hafnia spp. 3 0 3

Providencia spp. 5 0 5

Salmonella spp. 4 1 3

Yersinia spp. 5 0 5

Klebsiella spp. 3 0 3

Proteus spp. 3 0 3

Serrattia spp. 4 0 4

Resultados: VIP para E.coliO157:H7 identificó correctamente al 100% de los cultivos de E. coli O157:y
eliminó correctamente a más del 98% de los productores potenciales de reactividad cruzada.

1
Doyle, M.P., and J.L. Schoeni. 1987. Isolation of Escherichia coli O157:H7 from retail fresh meats and poultry. Appl. Environ. Microbiol. 53:
2394-2396.
2
Todd, E.C.D., R.A. Szabo, P. Peterkin, A.N. Sharpe, L. Parrington, D. Bundle, M.A.J. Gidney, and M.B. Perry. 1988. Rapid Hydrophobic grid
membrane filter-enzyme-labeled antibody procedure for the identification and enumeration of Escherichia coli O157:H7 in foods. Appl. Environ.
Microbiol. B54B: 2536-2540.
12822 SE 32nd Street Bellevue, WA 98005
800.245.0113 or 425.603.1123 • fax 425.603.0080
info@rapidmethods.com • www.rapidmethods.com
 VIP Ensayo de Inmunoprecipitación Visual para E.coliO157:H7
Sumario de Resultados del Estudio de Validación Comparativo AOAC

En un estudio pre-colaborativo realizado en el Estado de Washington, diecinueve tipos

distintos de alimentos fueron analizados con VIP para E.coliO157:H7 y con las
recomendaciones de cultivo BAM. De los diecinueves alimentos analizados, hubo un
énfasis especial en productos de carnes crudas. Un total de 1050 muestras y controles
fueron analizados y los resultados se ilustran en la tabla mostrada abajo.

Tabla de Resultados de VIP para E. coli O157:H7 (EHEC) 3,4

VIP para EHEC

Tasa de Falsos Negativos 0.06%

Tasa de Falsos Positivos 2.70%

Tasa de Sensitividad 99.94%

Tasa de Especificidad 97.30%

Enriquecimientos para Assurance EHEC EIA y VIP para

EHEC

3
Si el estudio diseñado de cultivo se asume como correcto, las tasas de falsos negativos y falsos positivos según
BAM, por definición, 0%.
4
La tasa de falsos negativos es el número de resultados negativos falsos como porcentaje del total de muestras y controles. La
tasa de falsos positivos es el número de resultados positivos falsos como porcentaje del total de muestras y controles. La tasa
de sensitividad es 100-tasa de falsos negativos. La especificidad es 100-tasa de falsos positivos.
12822 SE 32nd Street Bellevue, WA 98005
800.245.0113 or 425.603.1123 • fax 425.603.0080
info@rapidmethods.com • www.rapidmethods.com
 Caldo de Soya Tripticasa Modificado + Novobiocina (CSTm + n)

Caldo de Soya Tripticasa (#63000) 33.0 g

Disuelva 33 g en un litro de agua purificada. Mezcle totalmente y dispense

en alícuotas de 225mL para muestreo de producto ó en alícuotas de 10mL
para hisopos ambientales. Esterilice mediante autoclave a 121°C por 15
minutos. Enfríe a temperatura ambiente. Añada 1.1mL de la solución de
Novobiocina al 0.4% a cada frasco de 225mL de CSTm (ó 0.05mL a cada
tubo de 10mL) justo antes de añadir la muestra.

Solución de Novobiocina al 0.4% (100mg/ml)

Novobiocina, Sal sódica (Sigma #N1628) 0.4 g

Agua Desionizada 100 ml

Disuelva Novobiocina en agua desionizada. Esterilice filtrando por una

membrana de 0.2 µm y jeringa. Puede permanecer almacenada por varios
meses en un frasco ámbar a 4°C.

VIP para E. coli O157:H7 RESUMEN

12822 SE 32nd Street Bellevue, WA 98005

800.245.0113 or 425.603.1123 • fax 425.603.0080
info@rapidmethods.com • www.rapidmethods.com
DÍA 1: 25G MUESTRA → 225ml CTSm con Novobiocina
(Caldo de Soya Tripticasa
modificado
con Novobiocina añadida el día de
uso).



 Incube @ 35° C por 18 - 24 horas


↓

DÍA 2: Añada 0.1mL del pre-enriquecimiento a la unidad VIP

(no se requiere paso de calentamiento letal)

(LEA LA REACCIÓN DENTRO DE 10 MINUTOS)

Vea las direcciones de uso para una descripción completa del procedimiento.

¿ Otras preguntas? Llame al Depto. de Servicio Técnico de Biocontrol al 1-800-245-0113

12822 SE 32nd Street Bellevue, WA 98005

800.245.0113 or 425.603.1123 • fax 425.603.0080
info@rapidmethods.com • www.rapidmethods.com