Ingeniera gentica

Manipulacin gentica.
La ingeniera gentica es la tecnologa del control y transferencia de ADN de un
organismo a otro, lo que posibilita la creacin de nuevas especies, la correccin de los
defectos genticos y la fabricacin de numerosos compuestos.

ndice
1 Tcnicas
o 1.1 La tecnologa del ADN recombinante
o 1.2 La secuenciacin del ADN
o 1.3 La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
2 Biotecnologa gentica
o 2.1 Terapia gentica
o 2.2 Implicaciones ticas
3 Ingeniera gentica en seres vivos
o 3.1 Ingeniera gentica en bacterias
o 3.2 Ingeniera gentica en levaduras y hongos
o 3.3 Ingeniera Gentica en animales
o 3.4 Ingeniera Gentica en plantas
4 Aplicaciones de la Ingeniera Gentica en medicina e industria farmacutica
o 4.1 Obtencin de protenas de mamferos
o 4.2 Obtencin de vacunas recombinantes
o 4.3 Diagnstico de enfermedades de origen gentico
o 4.4 Obtencin de anticuerpos monoclonales
5 Vase tambin
6 Bibliografa relacionada
7 Enlaces externos
Tcnicas
La ingeniera gentica incluye un conjunto de tcnicas biotecnolgicas, entre las que
destacan:
La tecnologa del ADN recombinante;
La secuenciacin del ADN;
La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Plasmotosis
Clonacin molecular
Mutacin excepcional
Transgnesis
Bloqueo gnico
La tecnologa del ADN recombinante
Artculo principal: ADN recombinante


A. tumefaciens adhirindose a una clula de zanahoria.
La tecnologa del ADN recombinante consiste en aislar y manipular un fragmento de ADN
de un organismo para "recombinarlo" con el de otro organismo.
Generalmente se trata el ADN con una endonucleasa de restriccin que origina en este caso
un corte escalonado en las dos hebras dobles de ADN. Los extremos escalonados de ambas
hebras de ADN son complementarios, una condicin que tienen que tener si se quieren unir.
Los dos ADNs as cortados se mezclan, se calientan y s enfran suavemente. Sus extremos
cohesivos se aparearn dando lugar a un nuevo ADN recombinado, con uniones no
covalentes. Las uniones covalentes se forman aadiendo ADN ligasa y una fuente
energtica para formar los enlaces.
Otra enzima clave para unir ADNs es la transferencia terminal, que puede adicionar
muchos residuos de desoxirribonucletidos sucesivos al extremo 3de las hebras del ADN.
De este modo pueden construirse colas de poli Guanina en los extremos 3 de una de las
hebras de ADN y colas de poli Citosina en los extremos de la otra cadena. Como estas colas
son complementarias, permitirn que los dos ADNs se unan por complementariedad.
Posteriormente, se forman los enlaces covalentes por la ADN ligasa.
El ADN recombinado se inserta en un ADN vector que acte como vehculo para
introducirlo en una clula hospedadora que lo replique, los vectores o transportadores ms
utilizados son los plsmidos y el ADN del fago lambda.
La secuenciacin del ADN
Artculo principal: Secuenciacin del ADN
Es un conjunto de tcnicas que permiten conocer el orden en que aparecen los nucletidos
en el ADN, que es la base de la informacin gentica de los organismos . Mediante esta
tcnica tiene aplicaciones mdicas, como la bsqueda de algn polimorfismo gentico que
se asocie con una enfermedad; bsicas: comparar la historia evolutiva de un organismo; o
forenses.
La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
Artculo principal: Reaccin en cadena de la polimerasa
La tcnica de la PCR aprovecha la actividad enzimtica por la que se replica el ADN en las
clulas para conseguir una gran cantidad de copias de ADN a partir de cantidades
pequeas. Se utiliza una polimerasa o una mezcla de varias que puedan resistir
temperaturas elevadas, siendo la ms comn la polimerasa taq.
La tcnica consiste en realizar varios ciclos de temperaturas elevadas para conseguir la
desnaturalizacin del ADN y temperaturas ms bajas para la amplificacin del ADN
desnaturalizado mediante la polimerasa.
Biotecnologa gentica
En la dcada de 1970 se abrieron nuevas perspectivas en el campo de las biotecnologas
gracias a la elaboracin de nuevas tcnicas que permiten llegar directamente al material que
est en el origen de todas las caractersticas y procesos vitales, es decir, el ADN. Este
conjunto de tcnicas moleculares de manipulacin gentica recibe el nombre de ingeniera
gentica.
Su objetivo es la manipulacin in Vitro del ADN, la introduccin de este ADN as
modificado en clulas vivas y la incorporacin del mismo como parte del material
hereditario de dichas clulas. De este modo, ADN de diversas procedencias, por ejemplo, la
fraccin de ADN humano regula la sntesis de insulina, puede introducirse en bacterias de
manera que pasa a formar parte de su genoma y lograr as que la bacteria adquiera la
capacidad de elaborar insulina.
Terapia gentica
La terapia gentica consiste en sustituir o aadir, segn el caso, una copia normal de la
regin defectuosa del ADN para poder solucionar y restablecer la funcin alterada,
evitando el desarrollo de enfermedades de origen gentico, como por ejemplo la facultad
defensiva ante las enfermedades infecciosas. Las enfermedades con las que se ha empezado
a trabajar son, entre otras, la deficiencia de la enzima ADA (adenosina desaminasa),
conocida como la de los nios burbuja y la DMD o distrofia muscular de Duchenne.
La posibilidad de curar las enfermedades genticas con un tratamiento especfico justifica
lo esfuerzos que se estn realizando en este sentido.
Implicaciones ticas
La ingeniera tiene aplicaciones en campos muy diversos; dos de los ms importantes son la
medicina y la creacin de nuevas especies o mejora de las existentes. El progreso en estos
mbitos puede aportar resultados capaces de aliviar algunos problemas de gran importancia,
pero no se debe olvidar que la explotacin comercial de las tecnologas requeridas slo est
al alcance de unas pocas empresas multinacionales. Como era de esperar, la tradicional
dependencia econmica de los pases subdesarrollados tiene en la ingeniera gentica un
nuevo elemento de desequilibrio. En otro orden de cosas, la ingeniera gentica puede
plantear graves problemas ticos. Hay opiniones muy diversas sobre dnde han de situarse
los lmites de manipulacin del material que est en la base de todos los procesos vitales.
Al inicio de los experimentos del ADN recombinante, varios investigadores mostraron su
preocupacin por los riesgo que se pueden realizar con dichas tcnicas. En varios pases se
crearon comits para discutir el uso y la aplicacin de tcnicas de ingeniera gentica.
Ingeniera gentica en seres vivos
Ingeniera gentica en bacterias
Son los seres vivos ms utilizados en Ingeniera Gentica. La ms utilizada es la
Escherichia coli. Se usa prcticamente en todos los procesos de I.G.
Ingeniera gentica en levaduras y hongos
Son junto con las bacterias los sistemas ms utilizados. El Saccharomyces cerevisiae fue el
primer sistema eucariota secuenciado completamente. Otra levadura importante es P.
pastoris, utilizada para conseguir proinsulina en cultivo discontinuo y quitinasa en cultivo
continuo. En el campo de los hongos destaca por su labor mdica el Penicillium.


Ratones knockout.
Ingeniera Gentica en animales
La manipulacin gentica de los animales persigue mltiples objetivos: aumentar el
rendimiento del ganado, producir animales con enfermedades humanas para la
investigacin, elaborar frmacos, etc.

Produccin animal por ingeniera gentica:
Peces transgnicos: las principales aplicaciones en animales se han realizado en peces,
debido a que la fecundacin es externa, lo cual permite la introduccin del gen en el cigoto
antes de que se unan el ncleo del espermatozoide y el del vulo. Se han producido carpas
transgnicas que crecen mucho ms rpido, debido a la incorporacin del gen de la
hormona del crecimiento de la trucha, y salmones transgnicos, que resisten mejor las bajas
temperaturas. Mamferos: se han obtenido ratones transgnicos, con distintos genes
modificados. Sin embargo, todava su aplicacin para la mejora de especies es preliminar,
enfocndose el estudio desde un punto de vista ms bien puramente cientfico.
Ingeniera Gentica en plantas
Actualmente se han desarrollado plantas transgnicas de ms de cuarenta especies.
Mediante ingeniera gentica se han conseguido plantas resistentes a enfermedades
producidas por virus, bacterias o insectos. Estas plantas son capaces de producir
antibiticos, toxinas y otras sustancias que atacan a los microorganismos. Tambin se han
conseguido otro tipo de mejoras, como la produccin de distintas sustancias en los
alimentos que aumentan su calidad nutricional, mejorar las cualidades organolpticas de un
producto o que ciertas plantas sean ms resistentes a determinados factores ambientales,
como el fro.
Las tcnicas de ingeniera gentica tambin permiten el desarrollo de plantas que den frutos
de maduracin muy lenta. As, es posible recoger tomates maduros de la tomatera y que
lleguen al consumidor conservando intactos su sabor, olor, color y textura. La mejora de la
calidad de las semillas es tambin un objetivo.
Las aplicaciones farmacuticas son otro gran punto de inters. La biotecnologa permite
desarrollar plantas transgnicas que producen sustancias de inters farmacolgico, como
anticuerpos, ciertas protenas y hormonas, como la hormona del crecimiento.
Aplicaciones de la Ingeniera Gentica en medicina e
industria farmacutica
Obtencin de protenas de mamferos
Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento, factores de
coagulacin, etc., tienen un inters mdico y comercial muy grande. Antes, la obtencin de
estas protenas se realizaba mediante su extraccin directa a partir de tejidos o fluidos
corporales. En la actualidad, gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan los
genes de ciertas protenas humanas en microorganismos adecuados para su fabricacin
comercial. Un ejemplo tpico es la produccin de insulina que se obtiene a partir de la
levadura Sacharomyces cerevisae, en la cual se clona el gen de la insulina en humanos.
Obtencin de vacunas recombinantes
El sistema tradicional de obtencin de vacunas a partir de microorganismos patgenos
inactivos, puede comportar un riesgo potencial. Muchas vacunas, como la de la hepatitis B,
se obtienen actualmente por ingeniera gentica. Como la mayora de los factores
antignicos son protenas lo que se hace es clonar el gen de la protena correspondiente.
Diagnstico de enfermedades de origen gentico
Artculo principal: Diagnstico gentico preimplantacional
Conociendo la secuencia de nucletidos de un gen responsable de una cierta anomala, se
puede diagnosticar si este gen anmalo est presente en un determinado individuo.
Obtencin de anticuerpos monoclonales
Este proceso abre las puertas para luchar contra enfermedades como el cncer y
diagnosticarlo incluso antes de que aparezcan los primeros sntomas