Sunteți pe pagina 1din 23

AZCAR

Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 4
Pgina: 1 de 4


1. DEFINICIN:

Cristales secos de sabor dulce, inodoros, solubles en agua, ligeramente soluble en
alcohol, obtenido del jugo de la caa por trituracin y sometido a un proceso
industrial por medio del cual se purificado hasta obtener concentraciones no
menores del 99.9%.

El azcar apta para la elaboracin de licores es la refinada.



2. ESPECIFICACIONES:

MNIMO MXIMO
2.1 Pureza (%) 99.9 -
2.2 Humedad (%) - 0.1
2.3 Potencial de Floc (Absorbancia) 0.14
2.4 Apariencia en solucin alcohlica Transparente



Parmetros Microbiolgicos:

Segn NTC 778

Toma de muestra
Cantidad mnima para procesamiento 300g segn NTC 1706.


Materiales:
Bolsas de cierre hermtico de tamao acorde a la cantidad de muestra.
Etiquetas adhesivas.
Marcador permanente.
Guantes.














AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 4
Pgina: 2 de 4


Requisitos Microbiolgicos
Mesfilos Aerobios UFC/g < 200
Mohos y Levaduras UFC/g < 100
NMP Coliformes /g < 3
NMP Coliformes Fecales /g 0

Procesamiento de Muestra
Seguir especificaciones mencionadas en los anexos.
Realizar Diluciones 1/10 y procesar 10
-1


3. USO:

Edulcoracin de licores y cremas.

4. PRESENTACIN O UNIDAD DE MEDIDA:

Presentacin de 50 kilogramos.

Unidad de Medida: Kilogramo.

5. ENSAYOS:

5.1 La pureza debe ser certificada por el proveedor.

5.2 Ver Norma de Procedimiento de Anlisis COC-CC-DE-17 (% de Humedad).











AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 3 de 23


5.3 Potencial de Floc:

Este ensayo nos sirve para determinar si el azcar presentar floculacin
cuando se elaboren bebidas alcohlicas con ella. El mtodo se basa en el
potencial de floc de los polisacridos, los cuales son insolubles en el alcohol
etlico. Se prepara una solucin en agua al 50% de azcar y se ajusta a
pH=7.0. Se calienta hasta hervir y se pasa por un filtro de 0.45 micras. Se
enfra el filtrado y se toman 5 ml del mismo los cuales se mezclan con 5 ml de
agua suavizada y 12 ml de etanol al 96%. Se espera hasta total desaparicin
de burbujas (50 minutos de reposo bao ultrasnico). Se lleva al
espectrofotmetro y se lee la absorbancia a 420 nm y el cual debe ser menor
de 0.14.

Nota: Se pueden tomar 250g de azcar, diluir con agua suavizada y aforar en
un baln de 500mL.

Resultado: Si la absorbancia es menor de 0.14 el producto cumple y la
probabilidad de que se presente Floc nebulocidad en el producto terminado
es mnima.

5.4 Apariencia en solucin alcohlica:

A una solucin de azcar de 50 g/l en alcohol al 50% de le observa el aspecto
y el cual debe ser lmpido y transparente.


5.5 Anlisis Microbiolgico

Metodologas Petrifilm de 3M para Mesfilos aerobios, Coliformes totales y E.
Coli, Staphylococcus aureus y Mohos y levaduras; y Agar Rambach para
Salmonella.


6. BIBLIOGRAFA:

Norma ICONTEC 778 Azcar refinada.
Norma ICONTEC 586 Azcar determinacin polarizacin.
Norma ICONTEC 572 Determinacin de la humedad.










AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 4 de 23




TABLA DE PRUEBAS

CUADRO DE PRUEBAS

PRUEBAS CODIGO M.O.P NTC

Polarizacin COC-CC-DE-23 NTC 586
Cenizas COC-CC-DE-24 NTC 570
Humedad COC-CC-DE-17 NTC 572
Color NTC 2085
Pureza Proveedor
Azucares Reductores
Mtodo GS2/3-5
ICUMSA
Potencial Floc COC-CC-DE-68
Apariencia en solucin alcohlica COC-CC-DE-68





















VALIDACIN DEL MTODO






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 5 de 23


El mtodo fue validad por medio de los criterios que se estipulan en la NTC-
ISO/IEC 17025: 2005 teniendo en cuenta puntos como: Linealidad, Sensibilidad,
Lmites, Repetibilidad y Reproducibilidad.
LINEALIDAD
Se analizaron 11 muestras las cuales contaban con concentraciones distintas del
azcar objeto de anlisis, analizadas cada un de forma independiente para
eliminar errores sistemticos. Las concentraciones van desde 10g hasta 300g
pasando por el peso de prueba que es de 250g. La herramienta utilizada para la
evaluacin de los datos es una plantilla de Excel.
TABLA 1: Datos obtenidos
GRAMOS ABSORBANCIA
10 0.009
50 0.021
80 0.038
100 0.045
130 0.063
150 0.074
200 0.095
230 0.11
250 0.115
280 0.132
300 0.151
PROMEDIO 0.077545455
DESVIACION ESTANDAR 0.046759734
VARIANZA 0.002186473

Con base en los datos obtenidos en las lecturas realizadas en el
espectrofotmetro a una longitud de onda de 420nm se grafico y hallo la ecuacin
de la recta, para de esta manera determinar la linealidad del mtodo.
GRAFICA 1: Linealidad






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 6 de 23




Ecuacin de la recta:
Y = 0.0005x 0.0002
El coeficiente de correlacin r=0.997246208 y el coeficiente de determinacin
r
2
=0.9945 muestran que existe una fuerte relacin entre las variables con una
pendiente positiva.
Para la evaluacin de linealidad del mtodo se aplic la prueba de t Student.
La formula es:


Donde:
t = valor del estimador del t Student obtenido para el coeficiente de
correlacin.
/r/ = valor absoluto de coeficiente de correlacin
y = 0,0005x - 0,0002
R = 0,9945
0
0,02
0,04
0,06
0,08
0,1
0,12
0,14
0,16
0 50 100 150 200 250 300 350
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

(
n
m
)

Concentracion (gramos)
LINEALIDAD
LINEALIDAD
Lineal (LINEALIDAD )






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 7 de 23


n-2 = numero de grados de libertad.
r
2
= valor del coeficiente de determinacin


Se obtiene el valor de t critico de la tabla para t Student de dos colas, con un =
0.05 y 8 grados de libertad.
t critico = 2.262
se puede observar que el valor de tr o t calculado es mayor que el valor de t critico
(38.03348>2.262), por los cual se afirma que existe una correlacin lineal
significativa entre los datos obtenidos.

SENSIBILIDAD
La sensibilidad es el cociente entre el cambio en la indicacin de un sistema de
medicin y el cambio
Correspondiente en el valor de la cantidad objeto de la medicin.
Este parmetro se evala calculando la pendiente de la recta en la curva de
calibracin por medio de una regresin lineal, con la siguiente formula:




Observando la pendiente en la Grafica 1 y el dato m, se determina que el mtodo
no es muy sensible a los cambios de concentracin del analito, esto se debe a que






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 8 de 23


mientras mas prxima al eje de las Y este la recta, significa que a ligeros cambios
en las concentraciones esperadas habr grandes variaciones en los resultados de
las lecturas observadas [m2] En el caso de [m3] grandes cambios en la
concentracin no son significativos para la lectura, como se muestra en la figura 1.
FIGURA 1: Interpretacin de calculo de la pendiente

Se dice, que un mtodo es sensible cuando una pequea variacin de
concentracin determina una gran variacin de respuesta. La sensibilidad permite
observar la capacidad de respuesta instrumental frente a una determinada
cantidad de analito. En el tiempo, visualiza como se comporta el instrumento.


LIMITES
Los limites se determinan con el fin de tener un rango conocido para las
observaciones, para ello se tiene en cuenta parmetros como el Valor Critico (LC),
el Limite de Deteccin (LOD) y el Limite de Cuantificacin (LOQ). Estos valores se






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 9 de 23


determinaron con las mediciones de la muestra patrn y aplicando las siguientes
formulas:
Valor Crtico:
LC = 1.645 x S
0

Siendo:
S
0
= La desviacin estndar de la lecturas de la muestra patrn
Limite de Deteccin:
LOD = 3.29 x S
0


Limite de cuantificacin:
LOQ = 10 S
0

Un criterio de aceptacin adecuado es LC<LOD<LMP, considerando que el LMP
para este caso es 0.14.
Resultados:
La muestra patrn se determino utilizando el valor en gramos comnmente
utilizado en el laboratorio (250 gramos de azcar), y realizando lecturas
consecutivas.
En la siguiente tabla se muestran los datos de las observaciones realizadas con
una muestra patrn, adems de los resultados de la determinacin de los lmites.

TABLA 2: Datos muestra patrn y determinacin de lmites.
Repeticin Absorbancia (420nm)
1 0.065
2 0.075






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 10 de 23


3 0.064
4 0.069
5 0.078
6 0.091
7 0.096
8 0.096
9 0.077
10 0.086
Media 0.07970
Desviacin Estndar 0.012055888
Varianza 0.000145344
%CV 15.12658516
LMP 0.14
LC 0.019831936
LOD 0.039663873
LOQ 0.120558884

Se puede observar que el criterio de aceptacin se cumple, ya que, LC<LOD<LMP
(0.019831936<0.039663873<0.14).
EXACTITUD
Veracidad: Determina el grado de coincidencia existente entre el valor medio
obtenido de una serie de resultados y un valor de referencia aceptado. En este
caso el valor de referencia ser 0.14, el cual es el lmite mximo permitido. Para la
evaluacin de la veracidad se calcula un parmetro denominado sesgo.
Sesgo (s): La diferencia entre la expectativa relativa a los resultados de un
ensayo o una medicin y el valor verdadero. El sesgo es el error sistemtico total
en contraposicin al error aleatorio. Este se calcula como:
S = X Xa
Siendo:
S = sesgo






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 11 de 23


X = lectura obtenida o valor promedio de las lecturas obtenidas.
Xa = valor asignado, valor certificado del material de referencia o valor
esperado.
Los datos de ensayo se realizaron con muestras de un mismo lote de azcar y con
3 analistas distintos que siguieron exactamente el mismo procedimiento. En la
siguiente tabla se muestran los resultados obtenidos por cada uno de los analistas
y la determinacin del error sistemtico en cada caso.
TABLA 3: Datos Experimentales y sesgo
POTENCIAL FLOC EN AZUCAR
ANALISTA REPETICION
ABSORVANCIA
Sesgo 420nm
1
1 0.105 -0.035
2 0.100 -0.04
3 0.084 -0.056
4 0.089 -0.051
5 0.073 -0.067
6 0.078 -0.062
7 0.091 -0.049
8 0.090 -0.05
9 0.084 -0.056
10 0.109 -0.031

2
1 0.105 -0.035
2 0.104 -0.036
3 0.094 -0.046
4 0.087 -0.053
5 0.079 -0.061
6 0.080 -0.06
7 0.094 -0.046
8 0.098 -0.042
9 0.089 -0.051
10 0.109 -0.031






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 12 de 23



3
1 0.107 -0.033
2 0.097 -0.043
3 0.089 -0.051
4 0.086 -0.054
5 0.082 -0.058
6 0.081 -0.059
7 0.110 -0.03
8 0.098 -0.042
9 0.098 -0.042
10 0.105 -0.035

TABLA 4: Clculos datos experimentales y sesgo
CALCULOS
Valor referencia 0.14
Media Observados 0.093166667
Desviacin Estndar 0.010593047
Numero de Muestras 30
Sesgo 0.046833333

Para evaluar es sesgo se debe realizar una prueba t, en el cual t calculado debe
ser menor al t critico.


Donde:
t calc= t observado o calculado
Xa = Valor esperado o valor certificado en concentracin
X= Promedio de valores ledos u observados en concentracin
S= Desviacin estndar
n= Numero de lecturas o valores observados.








AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 13 de 23


El t crtico se determino con la tabla de prueba de t Student para una cola con un
y con 29 grados de libertad.
t critico = 2.045
Como el t calc < t critico se dice que el sesgo obtenido para el mtodo utilizado es
aceptable por lo tanto su veracidad es aceptable.
PRECISION:
Este se expresa en trminos de repetibilidad y reproducibilidad.
a) Repetibilidad: se tuvo en cuenta los datos de los 3 analistas para tener
datos mas significativos, los cuales fuero obtenidos en das diferentes pero
siguiendo los mismo tems de la prueba.
b) Reproducibilidad: se tuvieron en cuenta 3 analistas con conocimiento
bsico en la realizacin de la prueba y cada uno realizo 10 mediciones.
Estos parmetros fueron evaluados bajo un anlisis estadstico de la varianza de
repetibilidad y la varianza de reproducibilidad, basado en la norma tcnica NTC
3529-2.
Previo al anlisis de la repetibilidad y reproducibilidad se realizo un anlisis de
varianza o Anova para determinar si existe diferencia significativa entre los datos,
adems, se examinaron resultados atpicos por medio del modelo estadstico h y k
de Mendel.



Anlisis de Varianza o Anova
TABLA 5: Datos Experimentales
POTENCIAL FLOC EN AZUCAR
REPETICION ABSORVANCIA






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 14 de 23


420nm
1 2 3
1 0.105 0.105 0.107
2 0.100 0.104 0.097
3 0.084 0.094 0.089
4 0.089 0.087 0.086
5 0.073 0.079 0.082
6 0.078 0.080 0.081
7 0.091 0.094 0.110
8 0.090 0.098 0.098
9 0.084 0.089 0.098
10 0.109 0.109 0.105

N = Numero de observaciones = 10x3 = 30
TABLA 6: Sumatorias:

ANALISTAS SUMATORIA
TOTAL 1 2 3
SUMATORIA Xi 0.903 0.939 0.953 2.795
SUMATORIA Xi
2
0.082733 0.089129 0.091793 0.263655

SUMATORIA TOTAL DE CUADRADOS:


Grados de libertad totales = N-1 = 30-1 = 29
SUMATORIA DE CUADRADOS ENTRE GRUPOS


Grados de libertad entre grupos = n -1 = 10 1 = 9






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 15 de 23


SUMA DE CUADRADOS DENTRO DEL GRUPO


Grados de libertad dentro del grupo = gl
total
gl
B
= 29 9 = 20
TABLA 7: Cuadro resumen
ORIGEN DE LA VARIANZA
GRADOS DE
LIBERTAD
SUMA
CUADRADOS
CUADRADOS
MEDIOS
ENTRE GRUPOS (B) 9 0.000133067 1.47852E-05
DENTRO DEL GRUPO (W) 20 0.0031211 0.000156055
TOTAL (T) 29 0.003254167 --------------

Se aplica la prueba de Fisher o test F para determinar si existe diferencia
significativa entre las varianzas.
Prueba F



Se determina el valor de F critico en la tabla F, colocando los grados de libertad
entre grupos en la fila horizontal y los grados de libertad dentro del grupo en la fila
vertical. Con un valor de y 1 cola.
F critico = 2.44707
Como el Fcalc<Fcrititco se concluye que no hay diferencias significativa entre los
resultados de cada analista.
Examen de resultados Atpicos
Se examino por medio de las medidas llamadas estadstico h y k de Mendel.






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 16 de 23


Estadstico de consistencia interlaboratorio, h:


La media de las medidas (

) y la gran media (

) se determinaron de la siguiente
manera:
Media de la Celda:


Gran Media o Media Global:


TABLA 8: Medias de la celda
MEDIAS ENTRE CELDAS
ANALISTA
ABSORVANCIA
420nm
1 0.0903
2 0.0939
3 0.0953
MEDIA GLOBAL 0.093166667

TABLA 9: Estadstico de consistencia interlaboratorio, h
h DE MENDEL INTERLABORATORIOS
ANALISTA
RESULTADO
H
1 -0.945226177






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 17 de 23


2 0.241802045
3 0.703424131

GRAFICA 2: Grafica de h de Mendel Interlaboratorios

Estadstico de consistencia intralaboratorio, k



La desviacin estndar intracelda (

) se calcula como:






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 18 de 23


Y la desviacin estndar combinada intracelda se calcula:


TABLA 10: Desviacin estndar intracelda
DESVIACION ESTANDAR INTERCELDA
ANALISTA
RESULTADO


1 0.011508934
2 0.010311267
3 0.010392839

TABLA 11: Varianza intracelda
VARIANZA INTRACELDA
ANALISTA
RESULTADO


1 0.000132456
2 0.000106322
3 0.000108011
Desviacin estndar combinada
intracelda por nivel 0.010751572



TABLA 12: Estadstico de consistencia intralaboratorio, k






AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 19 de 23


K DE MENDEL
INTERLABORATORIOS
ANALISTA
RESULTADO
k
1 1.070441972
2 0.959047379
3 0.966634424

GRAFICA 3: Grafica de k de Mendel intralaboratorio


Los resultaros fueron comparados con los indicadores de los estadsticos h y k de
Mendel para los niveles de significancia de 1% y 5% que fueron tomados de los
anexos de la NTC 3529-2.








AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 20 de 23


TABLA 13: Indicadores de los estadsticos h y k de Mendel
NIVEL DE SIGNIFICANCIA
INDICADOR 1% 5%
H 1.15 1.15
K 1.39 1.29
p=3 y n=10

Se trazaron lneas sobre los grficos h y k interlaboratorio y intralaboratorio
respectivamente con ls indicadores de Mendel con su respectivo nivel de
significancia.
Anlisis de resultados atpicos
Examinando los grficos h y k, y comparndolos con los indicadores de ambos
estadsticos, se observo que todas las medidas de los distintos analistas estn por
debajo del valor critico del 1%, lo cuan indica que los datos son consistentes y no
hay variabilidad en los resultados.

REPETIBILIDAD y REPRODUCIBILIDAD
Calculo de la Media y la Varianza
Se calcula la varianza de repetibilidad, la varianza entre analistas y la varianza de
reproducibilidad. Los datos bsicos para el clculo de dichas varianzas se
encuentran en las tablas 5, 8 y 10.
Los clculos son expresados en la tabla 14 y se realizaron con las siguientes
formulas:
Varianza de repetibilidad:








AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 21 de 23



Donde:

= Desviacin estndar de repetibilidad


X = Media Global
Varianza entre analistas


En donde:


Varianza de reproducibilidad









AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 22 de 23


TABLA 14: Resultado de Varianzas y Desviacin Estndar
VARIANZAS Y DESVIACIONES
VARIABLE RESULTADO
Varianza de Repetibilidad S
rj
2
0.0001157
Desviacin Estndar de Repetibilidad 0.010754844
S
dj
2
6.65333E-06
N
j
10
Varianza entre analistas S
Lj
2
-1.09013E-05
Varianza de Reproducibilidad S
Rj
2
0.0001157
Desviacin Estndar de Reproducibilidad 0.010754844
%CV repetibilidad 11.54366068
%CV reproducibilidad 11.54366068

NOTA: En el caso de la varianza entre analistas que el resultado fue negativo, la
norma NTC 3529-2 afirma que este valor debe tomarse como cero, por lo cual la
varianza de repetibilidad y la varianza de reproducibilidad sern iguales.
Anlisis de datos:
El mtodo debe ser considerado como aceptable, con una desviacin estndar de
repetibilidad y reproducibilidad del 0.01075 y un porcentaje de coeficiente de
variacin de 11.54366, siendo este ultimo un poco alto, pero sin embargo entra en
el rango de aceptabilidad (<15%).

INCERTIDUMBRE
Para este mtodo no se determina la incertidumbre de la medicin debito a que en
los datos puede ser mucha con respecto al patrn, y no existe un rango exacto en
le cual oscilen las observaciones sino que se tiene en cuenta que el valor de la
absorbancia a 420 nm sea menor al 0.14.







AZCAR


Cdigo: COC-CC-DE-68
Versin No: 3
Pgina: 23 de 23


CONCLUSIONES
Segn los datos obtenidos en la evaluacin de linealidad, sensibilidad,
limites, exactitud, repetibilidad y reproducibilidad, se puede afirmar que el
mtodo de anlisis del potencial Floc en azcar realizado en el laboratorio
de calidad y control de la Industria Licorera de Caldas se encuentra
validado.