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LABORATORIO 6

ABSORCIOMETRIA
Profesor Laboratorio:
- Alejandro Vega
Profesor Catedra:
- Patricio Ramos
Ayudantes:
-
-
Integrantes:
- Francisca Gonzlez
- Rodrigo Hermosilla
- Miguel Soto
- Antonio Toh
Fecha:
- 2!"#!$%
Instituto de biologa vegetal y biotecnologa
Escuela de odontologa
UNIVE!I"A" "E #ALCA
IN#$"UCCI%N
Por de&inici'n la c(lula es la )unidad m*nima de un organismo ca+az de actuar
de manera aut'noma, -na c(lula .del lat*n cellula/ diminuti0o de cellam/ celda/
cuarto +e1ue2o3 es la unidad mor&ol'gica 4 &uncional de todo ser 0i0o, 5e hecho/
la c(lula es el elemento de menor tama2o 1ue +uede considerarse 0i0o
$
6, 7s
entonces 1ue la c(lula se considera como la &orma de 0ida ms sim+le/ +ero
89'mo logra un organismo tan +e1ue2o o:tener la energ*a +ara realizar todos los
+rocesos &isiol'gicos +ara mantenerse 0i0o; 7sto se e<+lica mediante una
seguidilla de reacciones 1u*micas cu4o o:jeti0o &inal es la generaci'n de energ*a/
el nom:re 1ue se le da a este +roceso es el de meta:olismo,
7ntonces el meta:olismo es un )conjunto de todos los +rocesos :io1u*micos 4
&isico1u*micos de un ser 0i0o, 7s consecuencia de la 0ida 4 el crecimiento celular,
9onlle0a la generaci'n de energ*a/ la a:sorci'n 4 distri:uci'n de los nutrientes/ la
eliminaci'n de desechos/ el trans+orte de o<*geno 4 generaci'n de agua,
2
6, Ahora
:ien )Todos los +rocesos meta:'licos se +ueden clasi&icar en dos ti+os: +rocesos
ana:'licos/ o de s*ntesis/ 4 +rocesos cata:'licos/ o de degradaci'n
=
6,
9ata:olismo: )>as reacciones 1u*micas 1ue desdo:lan com+uestos
com+lejos orgnicos en com+uestos orgnicos ms sim+les se conoce en
&orma selecti0a como cata:olismo .cata ? hacia a:ajo3, 7l cata:olismo se
+uede iniciar con la descom+osici'n de mu4 di&erentes sustancias
orgnicas/ +ero/ al &inal/ la ma4or*a de las rutas cata:'licas con&lu4en en la
res+iraci'n celular/ a tra0(s de la cual los com+uestos orgnicos se
terminan +or degradar en sustancias inorgnicas
=
6,
Ana:olismo: )Se +uede decir 1ue el ana:olismo se inicia con la s*ntesis de
los +rimeros com+uestos orgnicos a +artir de sustancias inorgnicas/
mediante la &otos*ntesis o la 1uimios*ntesis, 7sos +rimeros +asos
ana:'licos s'lo los +ueden realizar los organismos aut'tro&os, >uego/ a
+artir de mol(culas orgnicas sim+les/ se &ormarn/ mediante di&erentes
rutas ana:'licas/ todos los com+onentes orgnicos de los seres 0i0os, 7n
las c(lulas 0i0ientes/ las reacciones 1u*micas 1ue com:inan sustancias
sim+les +ara &ormar mol(culas ms com+lejas se denominan en &orma
colecti0a/ Ana:olismo .ana ? hacia arri:a3, 7n total/ es &recuente 1ue
los +rocesos ana:'licos a:ar1uen a los +rocesos de s*ntesis
+or deshidrataci'n/ 4 re1uieren de energ*a +ara &ormar nue0os enlaces
1u*micos
=
6,
7n este tra:ajo se estudiar +rocesos 1ue son cata:'licos/ 4a 1ue
estudiaremos las reacciones 1ue +ermiten la li:eraci'n de energ*a 1ue +ermite
realizar todas las &unciones 0itales,
7s+ec*&icamente se in0estigar las rutas meta:'licas 1ue &orman la res+iraci'n
celular/ )es el conjunto de reacciones :io1u*micas +or las cuales determinados
com+uestos orgnicos son degradados com+letamente/ +or o<idaci'n/ hasta
con0ertirse en sustancias inorgnicas/ +roceso 1ue rinde energ*a .en &orma
de ATP3 a+ro0echa:le +or la c(lula
%
6,
>a res+iraci'n celular +uede terminar de dos maneras mu4 distintas/
de+endiendo si se est realizando en un medio aer':ico o anaer':ico/ el +rimero
es mucho ms e&iciente en la +roducci'n de energ*a,
Res+iraci'n aer':ica: 7s a1uella 1ue se +roduce en +resencia de
o<*geno/ es mucho ms com+leja 4 e&iciente 1ue la res+iraci'n
anaer':ica/ la ecuaci'n glo:al es C
&
'
()
$
&
* &$
)
+ &C$
)
* &'
)
$ *
,- energa .A#P/0 se realiza en distintas eta+as:
@ Glic'lisis: )una mol(cula de glucosa es o<idada 4 di0idida en dos mol(culas
de cido +irA0ico .+iru0ato3, 7n esta ruta meta:'lica se o:tienen dos
mol(culas netas de ATP 4 se reducen dos mol(culas de BA5
C
D el nAmero
de car:onos se mantiene constante . en la mol(cula inicial de glucosa/ =
en cada una de las mol(culas de cido +irA0ico3, Todo el +roceso se realiza
en el citosol de la c(lula
E
6, 7n Pocas +ala:ras/ la glucosa se di0ide +ara
&ormar dos mol(culas de cido +irA0ico con tres tomos de car:ono cada
una,
@ 9iclo de Fre:s: )es una ruta meta:'lica c*clica 1ue se lle0a a ca:o en la
matriz mitocondrial 4 en la cual se realiza la o<idaci'n de los dos acetilos
trans+ortados +or el acetil coenzima A/ +ro0enientes del +iru0ato/ hasta
+roducir dos mol(culas de 9G
2
/ li:erando energ*a en &orma utiliza:le/ es
decir +oder reductor .BA5H/ FA5H
2
3 4 GTP, Para cada glucosa se
+roducen dos 0ueltas com+letas del ciclo de Fre:s/ dado 1ue se ha:*an
+roducido dos mol(culas de acetil coenzima A en el +aso anteriorD +or tanto
se ganan 2 GTPs 4 se li:eran % mol(culas de 9G
2
, 7stas cuatro mol(culas/
sumadas a las dos de la descar:o<ilaci'n o<idati0a del +iru0ato/ hacen un
total de seis/ 1ue es el nAmero de mol(culas de 9G
2
1ue se +roducen en
res+iraci'n aer':ica
E
6, A +esar de 1ue en esta eta+a no se genera ATP/ es
la +arte del +roceso ms im+ortante en la 1ue se genera energ*a
almacenada en otras mol(culas,
@ 9adena trans+ortadora de electrones: )7s una &uente +rinci+al de energ*a
+ara las acti0idades celulares/ estas li:eran gran cantidad de energ*a/ la
cual es almacenada en &orma de ATP en la &os&orilaci'n o<idati0a ,7ste
+roceso es catalizado +or enzimas 1ue son ms com+lejas 4 +or lo 1ue son
menos conocidas, >a ma4or*a de estas enzimas se encuentran en la
mem:rana de la mitocondria

6, 7sto se realiza 4a 1ue los com+lejos 1ue


estn en la mem:rana mitocondrial genera un gradiente electro1u*mico lo
1ue +ermitir generar energ*a en &orma de ATP,
@ Fos&orilaci'n o<idati0a: )>a Fos&orilaci'n o<idati0a no es ms 1ue +asar
electrones desde BA5H/ BA5PH 4 FA5H .1ue se o:tu0ieron en la
gluc'lisis 4 en el 9iclo de Fre:s3 hasta o<*geno molecularD lo 1ue im+lica
1ue el o<*geno es el ace+tor &inal de electrones, 7ste +aso de los electrones
se da junto a s*ntesis de ATP/ es decir mediante este +aso es 1ue se logra
&inalmente la &ormaci'n de los =# ATP luego del meta:olismo de una
mol(cula de glucosa, Adems la &os&orilaci'n +roduce una reducci'n de G2
a H2G gracias a los electrones 1ue trans+ortan el BA5H 4 el FA5H2 esto
+uede ocurrir tanto en +resencia de luz como en la oscuridad
6
, 9on esta
eta+a se genera &inalmente los =# ATP de la res+iraci'n aer':ica,
Res+iraci'n anaer':ica: )>a res+iraci'n anaero:ia consiste en 1ue
la c(lula o:tiene energ*a de una sustancia sin utilizar o<*genoD al
hacerlo/ di0ide esa sustancia en otras
#
6, 7ste ti+o de res+iraci'n/ en
com+araci'n con la aer':ica/ es mucho menos e&iciente, 5e+endiendo
del medio en donde se encuentre el organismo +uede terminar de
distintas maneras, Siem+re se 0a a realizar en el cito+lasma de la
c(lula,
@ Fermentaci'n lctica: )es una ruta meta:'lica anaer':ica 1ue ocurre en
el citosol de la c(lula/ en la cual se o<ida +arcialmente la glucosa +ara
o:tener energ*a 4 donde el +roducto de desecho es el cido lctico, 7ste
+roceso lo realizan muchos ti+os de :acterias .llamadas :acterias
lcticas3/ hongos/ algunos +rotozoos 4 muchos tejidos animalesD en e&ecto/
la &ermentaci'n lctica tam:i(n se 0eri&ica en el tejido muscular cuando/ a
causa de una intensa acti0idad motora/ no se +roduce una a+ortaci'n
adecuada de o<*geno 1ue +ermita el desarrollo de la res+iraci'n aer':ica,
9uando el cido lctico se acumula en las c(lulas musculares +roduce
s*ntomas asociados con la &atiga muscular
H
6,
@ Fermentaci'n ac(tica: )es la &ermentaci'n :acteriana +or Acetobacteri/
un g(nero de :acterias aer':icas/ 1ue trans&orma el alcohol et*lico en cido
ac(tico/ la sustancia caracter*stica del 0inagre
$"
6,
@ Fermentaci'n alcoh'lica: 7s este ti+o de &ermentaci'n a la 1ue se dar
(n&asis en el e<+erimento/ mediante las le0aduras/ este ti+o de
&ermentaci'n consiste en 1ue +rocesan los hidratos de car:ono .+or regla
general azAcares: como +or ejem+lo la glucosa/ la &ructosa/ la sacarosa/
el almid'n/ etc,3 +ara o:tener como +roductos &inales: un alcohol en &orma
de etanol .cu4a &'rmula 1u*mica es: 9 H
=
@9 H
2
@GH3/ di'<ido de car:ono
.9G
2
3 en &orma de gas 4 unas mol(culas de ATP 1ue consumen los +ro+ios
microorganismos en su meta:olismo celular energ(tico anaer':ico
$$
6,
7s im+ortante tam:i(n a:arcar a un organelo de suma im+ortancia +ara la
res+iraci'n aer':ica como lo es la mitocondria/ se de&ine como )un orgnulo de
gran tama2o cu4a &unci'n +rinci+al es lle0ar a ca:o la res+iraci'n celular aer':ica/
1ue tiene como &in la +roducci'n de energ*a en &orma de ATP, S'lo se encuentra en
c(lulas eucariotas, 7s el Anico orgnulo/ junto con cloro+lastos de c(lulas 0egetales/
1ue +resenta un sistema gen(tico +ro+io
$2
6, >a estructura 1ue +osee este organelo
es mu4 es+ecial 4a 1ue )est com+uesto +or una matriz rodeada +or una do:le
mem:rana .e<terna e interna3, Am:as mem:ranas 1uedan se+aradas +or el es+acio
intermem:rana, >a mem:rana interna se re+liega a:undantemente &ormando crestas
dentro de la matriz
$2
6,
Bo +odemos dejar de lado a unos actores mu4 im+ortantes dentro de la
generaci'n de energ*a dentro de la c(lula/ estas son las enzimas, 5entro de este
in&orme se a:arcarn solamente dos/ contenidas dentro de un orgnulo llamado
+ero<isoma/ el cual se de&ine como )orgnulos/ limitados +or una mem:rana/ 1ue
contienen enzimas o<idati0as, >a denominaci'n de este organelo se de:e a 1ue
en algunas reacciones genera +er'<ido de hidr'geno .H
2
G
23/
una sustancia
reacti0a ocu+ada en la o<idaci'n enzimtica de otras sustancias/ o degradada +or
medio de una reacci'n de des+ro+orci'n catalizada +or la enzima catalasa
$=
6,
7stas enzimas a4udan a acelerar reacciones 1u*micas/ haciendo +rocesos lentos/
en reacciones mucho ms r+idas,
$12E#IV$!
G:ser0aci'n microsc'+ica de la le0adura: 7l o:jeti0o de esta e<+eriencia es
com+render como es la estructura de la le0adura con distintos aumentos del
microsco+io,
G:ser0aci'n de mitocondrias: 7n esta e<+eriencia lo 1ue se :usca es +oder
o:ser0ar mitocondrias en le0aduras a tra0(s de la tinci'n con el colorante
0erde de Ianus,
Acti0idad de la catalasa so:re tejido 0egetal: 9on este e<+erimento se :usca
o:ser0ar la acci'n de esta enzima en un tejido 0egetal +ara 0er su 0elocidad 4
caracter*sticas, Tam:i(n se de:e com+render en 1ue es+ecie actAa con ma4or
0elocidad 4 +or1ue,
Acti0idad de la catalasa so:re tejido animal: 7l o:jeti0o de esta e<+eriencia/
es o:ser0ar a la catalasa en tejido animal/ 4 analizar donde realiza un tra:ajo
ms r+ido 4 +or1ue, Adems de sus di&erencias en su actuar en el tejido
0egetal,
7<+eriencia de la res+iraci'n celular: 7l o:jeti0o +rinci+al de este e<+erimento/
es +oner en e0idencia la res+iraci'n celular, Por otro lado lo 1ue se :usca
e0idenciar los +roductos de esta ruta meta:'lica 4 com+render distintos
&en'menos 1ue se 0en asociadas a ella,
Fermentaci'n alcoh'lica: 7l o:jeti0o +rinci+al de esta e<+eriencia es con&irmar
1ue la le0adura realiza &ermentaci'n alcoh'lica, Adems se :usca com+render
con 1ue reactante/ la &ermentaci'n alcoh'lica es ms e&iciente 4 +or 1u(,
3E#$"$! 4 P$CE"I3IEN#$!
3ateriales laboratorio 5: 6$7ANEL$! CELULAE!89
Soluci'n de glucosa al EJ
Microsco+io com+uesto
Porta 4 cu:re o:jetos
Verde de Ianus al ",""$ P!V
Aceite de inmersi'n
Agua destilada
9aja de Petr*
$" gramos de le0adura a E cc de soluci'n de glucosa al EJ,
3ateriales laboratorio :: 61I$ENE7;#ICA 4 FE3EN#ACI%N
ALC$'%LICA8
7KP7RL7B9LA $
Reloj o cron'metro
Fenol&tale*na
Pajillas +lsticas +ara re&resco
Soluci'n de BaGH al 2/EJ
MAgua destilada
Vasos de ++, de 2E"cc,
Pa+el +H
7KP7RL7B9LA 2
Term'metro
Na2o termorregulador
= tu:os de ensa4o
= tu:os de hem'lisis
Soluci'n de glucosa al $J
Soluci'n de &ructosa al $J
Soluci'n de maltosa al $J
>e0adura seca o granulada
Agua destilada
Gradillas
$ 0aso ++ de E""cc
= +i+etas 2ml
= +i+etas de Eml
= goteros
9u:eta con cloro +ara descartar material,
Procedi<iento laboratorio 5: 6$7ANEL$! CELULAE!89
(9 3I#$C$N"IA!
A9 E=>eriencia n? (: $bservaci@n 3icrosc@>ica de Levaduras:
Se coloca so:re un +ortao:jetos :ien lim+io dos gotas de agua 4 se adiciona un
gramo de le0adura, Finalmente/ se agita sua0emente la sus+ensi'n hasta 1ue la
le0adura est( :ien re+artida en toda el agua,
19 E=>eriencia n? ): $bservaci@n de 3itocondrias
Se coloca en una caja de Petr* E gotas de le0adura en incu:aci'n/ se agrega una
gota de colorante 0erde de Ianus 4 se deja actuar durante 2 minutos, >uego de
hacer una +re+araci'n microsc'+ica/ se o:ser0a con el o:jeti0o de inmersi'n,
)9 AC#IVI"A" PE$AI!$3A
Para +oder estimar la 0elocidad de reacci'n considere una escala entre " 4 E ." ?
no ha4 reacci'nD $ ? mu4 lentoD E ? mu4 r+ido3, Registre los datos en una ta:la,
A9 Actividad de la Catalasa de #eBido Vegetal sobre Agua $=igenada9
Se realiza un corte &ino de r:ano 4 uno de +a+a/ cu4as dimensiones sean iguales
4 se coloca cada uno en di&erentes cajas Petri, Se agrega so:re cada trozo tres
gotas de H2G2,
19 Actividad de la Catalasa de teBidos ani<ales sobre Agua $=igenada9
Se hacer un corte &ino de tejido he+tico 4 renal/ cu4as dimensiones sean iguales
4 se colocan so:re di&erentes +lacas Petri, Finalmente/ se agrega tres gotas de
agua o<igenada,
Procedi<iento laboratorio :: 61I$ENE7;#ICA 4 FE3EN#ACI%N
ALC$'%LICA8
A9 E=>eriencia n? (: 61I$ENE7;#ICA8
$, 7n el 0aso de +reci+itado se adiciona $""ml de agua destilada 4 se mide su +H,
2, Se a2aden = gotas de &enol&tale*na, Si el agua no se colorea de rosado/ se
agrega gotas de BaGH hasta 1ue la soluci'n +ermanezca rosada ms de $E
segundos, Se mide el +H antes 4 des+u(s de agregar &enol&tale*na,
=, Mediante una +ajilla se so+la dentro de la soluci'n +or %" segundos/
+osteriormente se mide el +H,
%, >uego de medir el +H/ se agrega gota a gota BaGH hasta 1ue la soluci'n
retorne al color rosado inicial, Posteriormente/ se mide el +H nue0amente,
E, Se corra +or 2 minutos sin descansar e inmediatamente des+u(s se e<hala +or
la +ajilla sumergida en la soluci'n/ durante %" segundos, Posteriormente/ se mide
el +H,
, Mediante una +ajilla se so+la dentro de la soluci'n +or %" segundos/
+osteriormente se mide el +H,
19 E=>eriencia n? ): 6FE3EN#ACI$N ALC$'$LICA8
$, Se numera = tu:os de ensa4o de $ a = 4 se identi&ica de la misma manera
los tu:os de hem'lisis,
2, Se a2ade a cada tu:o de hem'lisis 2 ml de soluci'n de car:ohidratos:
@ #ubo (: 7lucosa9
C #ubo ): Fructosa9
C #ubo ,: 3altosa9
=, Posteriormente se adiciona le0adura en cantidad su&iciente a cada uno de los
tu:os,
%, Se introduce los tu:os de hem'lisis in0ertidos dentro de los tu:os de ensa4o
.cam+ana de 5urham3,
E, Se coloca los tu:os en una gradilla 4 lle0e a :a2o termorregulador a =O P9 +or
=" minutos/ cuidando 1ue la tem+eratura se mantenga constante,
, Se anota el tiem+o en 1ue inicia el +rocedimiento,
O, Se registra resultados al &inal de la o:ser0aci'n,
E!UL#A"$!
Laboratorio n? 5: $7ANEL$! CELULAE!
(9 3I#$C$N"IA!
A9 E=>eriencia n? (: $bservaci@n <icrosc@>ica de Levaduras9
19 Experiencia n 2: Observacin de Mitocondrias.
AU3EN#$ 5A
Se o:ser0an aglomeraciones celulares distantes una de otras, Similar a
unas manchas con&ormadas +or muchos +untos,
AU3EN#$ (DA
Se a+recian c(lulas es&(ricas de le0adura/ +or lo 1ue 4a no se 0en como
+untos, Se +ueden o:ser0ar mejor las aglomeraciones
AU3EN#$ 5DA
>a muestra se 0e un +oco ms oscura, Se a+recia mu4 :ien isodiametr*a
de la c(lula, 9ontornos de&inidos 4 :ien redondeados, Se 0islum:ran una 1ue
otra c(lula con contenido 0erdoso,
AU3EN#$ (DDA .In<ersi@n/
Se o:ser0an zonas de color 0erde en la c(lula/ se +resume son/ las
mitocondrias, 7n muchas le0aduras/ se 0e casi todo el contenido celular con
zonas 0erdosas, Se a+recia mo0imiento +ues/ las le0aduras estn inmersas en
&ase l*1uida 4 (sta tiene &luidez,
AU3EN#$ 5A C AU3EN#$ (DA C AU3EN#$ 5DA
C
Se +uede a+reciar el crecimiento de las le0aduras 4 su +roli&eraci'n/
tam:i(n se +ueden 0er c(lulas de distinto tama2o/ las ms +e1ue2as +arecen
gemas,
@ Se o:ser0a mu4 similar a la muestra anterior .le0adura sin glucosa3 con
la Anica di&erencia 1ue/ no se o:ser0an es+acios 0ac*os en la muestra o
)manchas aisladas6,
@ 7s +osi:le identi&icar zonas 0erdosas dentro de 0arias c(lulas.A: %"<3
AU3EN#$ (DDA .In<ersi@n/
Se +ueden a+reciar claramente de&inidas las le0aduras/ se 0en marcadas
con color 0erde en el centro 4 un color ms claro en la se+araci'n entre ellas,
Tam:i(n/ se o:ser0a el crecimiento de las le0aduras 4 su +roli&eraci'n
.multi+licaci'n de estas3/ lo 1ue da como resultado 1ue se +uedan 0er
le0aduras de distinto tama2o/ las ms +e1ue2as dan sensaci'n de +arecer
gemas,
)9 AC#IVI"A" CA#ALA!A
Para +oder estimar la 0elocidad de reacci'n considere una escala entre " 4 E ." ?
no ha4 reacci'nD $ ? mu4 lentoD E ? mu4 r+ido3,
A9 Actividad de la Catalasa de #eBido Vegetal sobre Agua $=igenada
@ Pa+a C H2G2: Se o:ser0a una reacci'n lenta al +rinci+io 4 en(rgica al &inal
de la reacci'n,
@ R:ano C H2G2: Se o:ser0a una reacci'n d(:il 4 mu4 lenta/ casi +areciera
no ha:er reacci'n,
19 Actividad de la Catalasa de teBidos ani<ales sobre Agua $=igenada9
@ H*gado C H2G2: Se o:ser0a una reacci'n :astante r+ida e intensa desde
el +rinci+io,
@ Ri2'n C H2G2: Se o:ser0a una reacci'n un +oco ms lenta 4 d(:il 1ue en
el h*gado/ +ero 1ue de igual manera &ue r+ida,
#abla n? (: Velocidad de reaccin de cada muestra al agregar agua oxigenada
#E2I"$
E!CALA
$ ( ) , 5 :
PAPA K
RQNABG K
HRGA5G K
RLBSB K
Procedi<iento laboratorio :: 61I$ENE7;#ICA 4 FE3EN#ACI%N
ALC$'%LICA8
A9 E=>eriencia n? (: 61I$ENE7;#ICA8
N de
gotas de
NaOH
N de gotas
de
Fenolftaleina
Cambio
observado
Tiempo que
demora en cambiar
de medio acido a
bsico
Cambio
en el
pH
Control 1 1 Color rosado
(medio
acido)
-------------------- 6.5 a 9
Normal (sin
ejercicio)
1 1 Color rosado
(medio
acido)
71 segundos 9 a 6
espu!s de
ejercicio
1 1 Color rosado
(medio
acido)
32 segundos 9 a 6
#abla n?): BAmero de gotas BaGH agregadas segAn estado normal o des+u(s de
ejercicio
Se a+recia una gran di&erencia en el tiem+o en 1ue demora la soluci'n en 0ol0er a
tornarse de color normal des+u(s de ha:er estado en ejercicio 1ue en estado
normal,
19 E=>eriencia n? ): 6FE3EN#ACI$N ALC$'$LICA8
#abla n? ,: 9antidad de :ur:ujas +roducidas +or los di&erentes car:ohidratos en
+resencia de le0adura,
Carbo"idrato Cantidad de burbujas de CO#
$lucosa Gran cantidad de burbujas
Fructosa Gran cantidad de burbujas
%altosa Escasa cantidad de burbujas
Se o:ser0a 1ue la glucosa es la 1ue +resenta ma4or cantidad de :ur:ujas/
seguidamente encontramos la &ructosa 4 &inalmente la maltosa,
"I!CU!I%N
LA1$A#$I$ N? 5: $7ANEL$! CELULAE!
(9 3I#$C$N"IA!9
9on res+ecto a la acti0idad de o:ser0aci'n de organelos/ en este caso de
mitocondrias/ se +udo dar cuenta 1ue en la le0adura haci(ndola reaccionar con
agua/ 4 +osteriormente o:ser0arla en el microsco+io '+tico/ no se o:ser0' ningAn
cam:io/ 4a 1ue el agua es un com+onente 1ue est +resente en las c(lulas/ en el
cito+lasma/ +or lo tanto las mitocondrias de la le0adura se encontrar*an en un
am:iente normal/ +or lo cual no +rodujo ningAn cam:io en los com+onentes de la
le0adura,7n cam:io/ al hacer reaccionar la le0adura con glucosa/ estas c(lulas se
acti0an comenzando a +roducirse un am:iente aer':ico/ +ro0ocando as*/ un
cam:io de crecimiento de estas/ 1ue se o:ser0aron +osteriormente en el
microsco+io electr'nico/ 1ue se +ueden a+reciar mejor a tra0(s de la tinci'n Verde
de Ianus/ esto se de:e a 1ue )las levaduras xerfilas crecen sobre Malta-Sal-
Glucosa o Malta-50%Glucosa
14
!
)9 Actividad Catalasa
7n cuanto a la acti0idad de la catalasa/ se +udo o:ser0ar 1ue el trozo de
h*gado &ue el ms r+ido en actuar/ esto de:ido a la &unci'n deto<i&icadora 1ue
este 'rgano en nuestro cuer+o/ +roducto de esta &unci'n 1ue +resenta el h*gado
es mucho ma4or la cantidad de +ero<isomas 1ue en resto del cuer+o, "#os
$eroxisomas $oseen un di%metro medio de 0&' un ( su n)mero var*a entre +0 (
100 $or c,lula& aun-ue en las c,lulas .e$%ticas ( renales suelen ser muc.o m%s
numerosos
15
"/ +or lo tanto/ las c(lulas he+ticas degradan mucho ms +er'<ido de
hidrogeno 1ue las dems muestras, >a siguiente muestra con ma4or ra+idez de
degradaci'n del +er'<ido de hidrogeno &ue el ri2'n/ 1ue tam:i(n se e<+lica con la
cita anterior +uesto 1ue su &unci'n es tam:i(n es deto<i&icar el organismo
mediante el &iltrado de la sangre, 7n cuanto a la +a+a/ su reacci'n tam:i(n es
relati0amente r+ida/ +uesto 1ue es un tu:(rculo 1ue se encuentra :ajo tierra 4 no
tiene ma4or contacto con el o<*geno/ +or lo cual no contiene grandes cantidades
de +ero<isomas 4 la acti0idad de la catalasa ser menor, 7n cuanto al r:ano 1ue
es antio<idante 4 +or lo tanto +rotege a sus c(lulas de los radicales li:res 4
contiene enzimas o<idati0as/ al contrario 1ue la +a+a,
Procedi<iento laboratorio :: 61I$ENE7;#ICA 4 FE3EN#ACI%N
ALC$'%LICA8
A9 E=>eriencia n? (: 61I$ENE7;#ICA8
7l +H del agua destilada inicialmente era de ,ED al agregar BaGH esta
soluci'n se alcaliniz' 4 en +resencia de &enol&taleina se torn' de color rosado/
+ero al agregar aire a tra0(s de una :om:illa a+ortamos 9G
2
al medio
+roduciendo la siguiente reacci'n/ 1ue neutraliza el medio,
9G
2
C H
2
G H
2
9G
=
7ntonces/ al aumentar la acti0idad muscular el cuer+o re1uerir de ma4or
energ*a 4 ma4or cantidad de o<*geno/ +or lo tanto se +roducir ma4or res+iraci'n
celular 4 como resultado ma4or cantidad de 9G
2
/ +or ende des+u(s del ejercicio/
al agregar 9G
2
al medio/ el cam:io ser ms r+ido,
19 E=>eriencia n? ): 6FE3EN#ACI$N ALC$'$LICA8
>a Glucosa es 1uien ms cantidad de :ur:ujas genera en +resencia de
le0adura/ 4a 1ue es un monosacrido de &cil 4 r+ida degradaci'n
+ro+orcionando una ma4or cantidad de energ*a, Por otra +arte/ le sigue la
&ructosa/ 1ue tam:i(n es un monosacrido/ +ero 1ue es ms com+leja su
degradaci'n +or lo 1ue a+orta una menor cantidad de energ*a ,Por Altimo/ la
maltosa 1ue al ser un disacrido 4 no un monosacridos como los anteriores
necesita ma4or cantidad de tiem+o +ara rom+er el enlace/ generando menor
cantidad de desechos 4 +or lo tanto menos :ur:ujas de 9G
2

C$NCLU!I %N
5e acuerdo a lo realizado en el la:oratorio/ +odemos dar cuenta 1ue/ en las
muestras de le0adura con agua 4 le0adura con glucosa se encuentran di&erencias
:astante marcadas, 7n la muestra con agua/ las le0aduras se homogeneizaron/ la
muestra solo se a+reci' un +oco ms tur:ia 4 en microsco+io una :aja cantidad de
le0aduras 4 :astante dis+ersas, 7n cam:io/ en la muestra con glucosa/ las
le0aduras +roli&eraron &ormndose grumos de considera:le tama2o incluso 0isi:les
sin necesidad del microsco+io, Bo o:stante/ al ser o:ser0adas mediante este
instrumento las le0aduras en medio con glucosa +udo a+reciarse en mejor detalle,
7n la identi&icaci'n de mitocondrias utilizamos la tinci'n Verde de Ianus
1ue/ en estado original es incoloro 4 una 0ez 1ue se a+lic'/ ti2o la mitocondria con
una coloraci'n azul@0erdosa/ este cam:io se +udo o:ser0ar claramente con el
microsco+io con el o:jeti0o de inmersi'n,
Al +oner en contacto la muestra de +a+a 4 r:ano/ 4 al a2adirle agua
o<igenada se o:ser0' 1ue li:eran agua 4 o<*geno/ la +a+a en un +rinci+io
comenz' a li:erar o<*geno 4 agua lentamente +ero +osteriormente la reacci'n
acelero 4 comenz' a e<+eler r+idamente o<*geno 4 agua/ al contrario del r:ano
1ue mu4 lentamente li:ero los com+onentes 4 en mu4 :aja cantidad, Al hacer el
mismo +rocedimiento con los tejidos de h*gado 4 ri2'n se o:ser0a una acci'n
+arecida en am:os/ el h*gado li:ero aceleradamente agua 4 o<igenoD el tejido de
ri2'n hizo el +roceso r+idamente +ero no en la magnitud del tejido de h*gado,
7<isten di&erentes mecanismos +ara generar energ*a +ara nuestro
organismo/ la cual de+ende de la +resencia de o<*geno/ +or lo cual 0amos a
encontrar mecanismos aero:ios 4 anaer':icos +ara la generaci'n de energ*a,
1I1LI$7AFIA
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