BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES Bacilos Gram (-) Fermentadores No Fermentadores Klebsiella Enterobacter Serratia Proteus Pseudomonas Alcaligenes Acinetobacter Moraxella
Oxidasa (+) Enterobacterias:
Fermentan la Glu Reducen nitratos Oxidasa (-) Vibrio cholerae Aeromonas h.
ENTEROBACTERIAS OPORTUNISTAS Las infecciones producidas por estos microorganismos se da con frecuencia en los hospitales en neonatos y en pacientes inmunodeprimidos La antibioticoterapia frente a la infeccin por estos microorganismos puede carecer de eficacia debido a la resistencia frente a mltiples antibiticos. Gnero Pseudomonas Se compone de 10 especies aisladas de muestras clnicas y de la naturaleza. Son microorganismos ubicuos que se encuentran en la tierra, en la materia orgnica en descomposicin, en la vegetacin y el agua. Causan la degradacin de muchos compuestos solubles. Tambin estn en el ambiente hospitalario e industrial en ambientes hmedos. Es raro que formen parte de forma persistente de la flora microbiana normal del ser humano.
Algunas especies: Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas fluorescens Pseudomonas putida CARACTERSTICAS Requerimientos nutritivos sencillos Variedad de compuestos orgnicos Fuente de C Donadores de electrones energa
Factores estructurales Enzimas Toxinas Resistencia a los antibiticos
Virulencia Ej. P. aeruginosa puede usar azcares diferentes, cidos grasos, cidos di y tricarboxlicos, alcoholes, polialcoholes, glicoles, compuestos aromticos, aa. etc. Presencia de operones inducibles Gnero Pseudomonas Bacilos rectos o ligeramente curvos Flagelo(s) polar(es) No fermenta azcares. Va ED FISIOLOGA Y ESTRUCTURA: Se definen como aerobios estrictos, pero pueden crecer de forma anaerobia utilizando nitrato o arginina.
Excepto P.maltophilia y P.cepacia, todas las dems especies son citocromo oxidasa positivas lo que sirve para diferenciarlas de las enterobacterias. Algunas adquieren un aspecto mucoide por los polisacridos capsulares. Algunas producen pigmentos difusibles: Pioverdina (verde) Piocianina (azul) Fluorescena (amarillo) Piorrubina (marrn). Crece en agar sangre y A. McConkey. Presuntivamente un aislamiento podra ser P. aeruginosa si se detecta pigmento azul /verde y olor a uvas (por la piocianina).
Identificar especies de Pseudomonas distintas de P. aeruginosa ?. Informe como Pseudomonas spp., no Pseudomonas aeruginosa puede no ser suficiente para un mdico que trata a un paciente con septicemia. Especies de Pseudomonas NO3 --> NO2 Citocromo oxidasa Piocianina Fluorescena O/F Glucosa O/F Maltosa Desarrollo a 42C P. aeruginosa (+) (+) (+) (+) (+) (-) (+) P.fluorescens (-/+) (+) (-) (+) (+) (+/-) (-) P.putida (-) (+) (-) (+) (+) (+) (-) P.cepacia (-) (+) (-) (-) (+) dbil (+) adhesinas neuraminidasa Cpsula PATOGENIA E INMUNIDAD: ENFERMEDADES CLNICAS Desde colonizacin asintomtica traqueobronquitis benigna bronconeumona necrosante grave Otitis externa odo de nadador Otitis externa maligna (diabticos y ancianos) Posterior a un traumatismo de la crnea lceras corneales Infecciones de las quemaduras : colonizacin dao vascular necrosis tisular bacteriemia En pacientes con sonda de larga duracin Pseudomonas en alimentos Pseudomonas sp. Aguas en fbrica de alimentos Algunas veces relacionada a mastitis En el despiezado de carnes Microflora de moluscos La microflora de los peces de aguas fras Alteracin durante e inmediatamente despus de la retirada de los huevos del almacenaje ANLISIS DE LABORATORIO: CULTIVO: Agar Sangre (b-hemlisis), A. Mc Conkey. A. Cetrimide: colonias planas con bordes que se extienden, pigmentacin verde, olor caracterstico. Se pueden seleccionar pruebas bioqumicas rpidas (oxidasa). Aeromonas Bacilo gram(-) anaerobio facultativo Se han descrito 14 especies la mayora se asocian a enfermedad en el ser humano (gastroenteritis e infecciones de heridas).
Especies ms conocidas: Aeromona hydrophila Aeromonas caviae Aeromonas veronii var. Sobria
Estos microorganismos son ubicuos en el agua dulce. Los reservorios pueden ser reptiles, anfibios y peces. Se aslan de pollos crudos y en productos perecibles. El 3% de los individuos son portadores gastrointestinales (ms en verano)
gastroenteritis Enfermedad aguda y grave. Enfermedad crnica Otras enfermedades: Infecciones sistmicas oportunistas
Por exposicin a agua contaminada
Alcaligenes, Acinetobacter, Moraxella Gnero Metabolismo Movilidad Oxidasa McConkey Otras Caractersticas Alcaligenes Oxidativo y no sacaroltico (+) (+) Negativo Aerobios estrictos, si bien algunas cepas utilizan nitrato en lugar de O2.Requieren para su desarrollo sustancias nitrogenadas simples. Acinetobacter Oxidativo y no sacaroltico (-) (-) Positivo No requieren factores de desarrollo especiales. Produccin de H+ a partir de Glu dbil o ausente. Aparecen como diplococos. Todas resistentes a la penicilina. Moraxella Oxidativo y no sacaroltico (-) (-) Escaso o negativo La mayora de las cepas son exigentes y algunas requieren para su desarrollo suero. Aerobios estrictos. En gram: cocobacilos. Sensibles a la penicilina. CARACTERSTICAS Alcaligenes Alcaligenes faecalis es un saprofito comn del tracto intestinal del hombre, el cual no se considera causante de ninguna enfermedad infecciosa conocida. No metaboliza ningn CH usual pero oxida los cidos orgnicos o los aa, haciendo el medio ms alcalino. Es presumible que un diminuto bacilo G(-), incapaz de utilizar CH, ya sea fermentativa u oxidativamente sea Alcaligenes Se puede encontrar en las heces o en los esputos como saprofito inocuo, pero tambin se ha observado en infecciones graves. Acinetobacter Acinetobacter est ampliamente distribuido (agua, suero, leche). Se localiza en la piel y los tractos gastrointestinal, genital y respiratorio. Son bacilos o cocobacilos inmviles, gruesos, apareados, oxidasa (-). En la fase estacionaria adoptan la forma de diplococos y se pueden confundir con las neisserias. Aerobios obligados. Especies: Acinetobacter calcoaceticus es la nica designacin de especie, siendo el A. anitratus (anteriormente Herellea vaginicola) y el A. iwoffi (anteriormente Mima polimorpha) considerados cepas variantes. Su virulencia en los seres humanos es baja, aunque se han reportado casos raros de meningitis e infecciones del tracto urinario. El A. calcoaceticus puede causar enfermedad infecciosa en pacientes debilitados o sometidos a inmunosupresin, habindose descrito casos de septicemia. Es comensal en la vagina. Las variantes crecen bien en A. McConkey.
Moraxella Los microorganismos del gnero Moraxella son muy exigentes nutricionalmente, no usan CH. Incapacidad de desarrollar en A. McConkey. Debido a su aspecto diplococos gram(-) y su reaccin oxidasa (+) tambien se pueden confundir con neisserias. M.catarrhalis el patgeno ms importante. Causa frecuente de bronquitis y bronconeumona, sinusitis y otitis M. lacunata causa rara de conjuntivitis e infecciones corneales. M. osloencis, M. nonliquefaciens, M. phenylpyruvica miembros de la flora normal del hombre. Gnero Vibrio El gnero se compone de ms de 60 especies de bacilos curvados 10 producen enfermedad en el ser humano. Especies importantes:
V.cholerae, V.parahaemolyticus Vibrio vulnificus
El polisacrido O de su PC se emplea para dividir al gnero en serogrupos. Las cepas puras que reaccionan con antisueros para el grupo O1 son llamados: V. cholerae O1. Son ms de 140 serogrupos de V. cholerae (O1-O140). Los serogrupos O1 y O139 sintetizan la toxina del clera asociados a epidemias.
El serogrupo O1 se subdivide a su vez en serotipos y biotipos. Hay 2 biotipos: Clsico y El Tor. Hay 3 serotipos: Inaba, Ogawa e Hikojima.
V. vulnificus y V.cholerae no O1 producen cpsulas acdico polisacridasimportantes para las infecciones extendidas. V. cholerae y V. parahaemolyticus poseen 2 cromosomas circulares. En el gnero tambin se encuentran plsmidos que codifican la resistencia antimicrobiana.
Serotipo/Ag A B C Inaba + + Ogawa + + Hikojima + + + V. Cholerae : FISIOLOGA Y ESTRUCTURA Puede crecer en una variedad de medios sencillos. T: 14-40 C. V. cholerae es capaz de desarrollarse en ausencia de sal. Tolera un amplio rango de pH (6.5-9) aunque es sensible a los cidos gstricos. Posee un nico flagelo polar pero tiene diversos pilis. Toxina del clera Enterotoxina accesoria del clera Toxina de la zona occludens Pili coregulado por la toxina (Tcp) Siderforos Neuraminidasa 2 tipos de pili: Factor de colonizacin accesorio (Acf) Factores que afectan el crecimiento:
Temperatura Nutrientes Acidez Actividad del agua
Su crecimiento se favorece por la T (alta a moderada) y la salinidad (baja a moderada). PATOGENIA E INMUNIDAD Codifica los genes para las 2 subunidades de la toxina del clera CTX ctx A ctxB Pili coregulado por la toxina tcp El locus del fago se integra al genoma (O1 y O139 muchas copias) Fago contiene otros genes: Gen ace: enterotoxina accesoria Gen zot: toxina de la znula occludens Gen cep: factor de colonizacin
MECANISMO DE ACCIN B se une a los ganglisidos GM1 de las clulas epiteliales del intestino delgado Se internaliza e interacciona con las protenas G Estas protenas controlan la adenil ciclasa ATP AMP cclico Originando hipersecrecin de agua y electrolitos. Prdida de hasta 1L/h El AMPc causa la secrecin activa de Na+, Cl-, K+, HCO3- y agua fuera de la clula. Tcp y toxina en Vibrio: Las bacterias no se eliminan en las diarreas Pili Protenas quimiotcticas TCP: pili corregulado por toxina Receptores de la Toxina del clera y dianas intracelulares de la toxina. V. cholerae O139 posee el mismo complejo de virulencia que las O1.
Produce diarrea acuosa semejante.
Otras cepas como V. parahaemolyticus producen una hemolisina directa termoestable (TDH o hemolisina de Kanagawa) que es una enterotoxina induce la secrecin de ion cloruro en las clulas epiteliales como consecuencia de un aumento de la concentracin intracelular de iones Ca.
Estas cepas son b-hemolticas en Agar Sangre (con sangre humana) positivas para Kanagawa. EPIDEMIOLOGA Se encuentran en hbitats acuticos con variedad de salinidad y son comunes en ambientes marinos. Crecen rpidamente en aguas con crustceos quitinosos. Tambin se pueden encontrar en agua dulce, donde pueden sobrevivir unas horas o hasta algunas semanas si se encuentra contaminada con materia orgnica y tiene pH entre 6 y 9. El clera se propaga a travs del agua y la comida contaminadas.
Han ocurrido 7 grandes pandemias de clera desde 1817. La sptima comenz en Asia en 1961 hasta 1970 y 1980. En 1981, esta cepa se extendi hasta el Per. En 1992 apareci otra cepa (O139) en la India y se extendi rpidamente por toda Asia, Europa y USA. Parece ser que la cepa O139 emergi de la cepa de la 7ma. Pandemia (O1 El Tor) a travs de un rearreglo gentico del AgO y genes capsulares.
La transmisin de persona a persona es poco frecuente se necesita un elevado inculo (ms de 10 8 microorganismos). Las infecciones producidas por los otros vibrios son consecuencia del consumo de mariscos cocinados insuficientemente, o exposicin a agua de mar contaminado. Reservorios de V. cholerae: CLERA COLONIZACIN ASINTOMTICA ENFERMEDAD DIARREICA LEVE O GRAVE MUERTE INGESTIN 2-3 DAS ENFERMEDAD PRDIDA DE LQUIDOS :AGUA DE ARROZ ACIDOSIS METABLICA (PRDIDA DE BICARBONATO) HIPOCALEMIA, SHOCK HIPOVOLMICO, ARRITMIAS CARDACAS, FALLA RENAL DETECCIN EN LABORATORIO: Bacilos gram (-) curvados, pequeos. Medio de transporte de Cary- Blair. Crecen en A.Sangre, A. McConkey.
Agar selectivo: A. Tiosulfato Citrato sales Biliares Sacarosa (TCBS) Crece en caldos enriquecidos pH 8.6 (APA) Se establece el serotipo utilizando antisueros polivalentes Prueba del Cordn: COLONIAS GRANDES, LISAS, AMARILLAS DE CENTRO OPACO Y ALREDEDOR TRANSLCIDO. Antisuero o AcMo pueden usarse para identificar el grupo O1, as como el subgrupo Inaba (factores AC) y Ogawa (factores AB). Otro antisuero se usa para identificar el serotipo O139. Para serologa las colonias deben provenir de un agar no selectivo.