UNIVERSIDAD DE SAN MARTN DE PORRES

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

FARMACOLOGA
PRCTICA DE LABORATORIO

NOVENA PRCTICA
ANALGSICOS


ALUMNO : Ascarza Vicua, Juan Carlos.

PROFESOR : Dr. Salazar Granada, Alberto.

GRUPO : 41C - Mesa 03.


Jueves: 10:00 12:00

LIMA PER 2011




EXPERIMENTO N 1: Efecto analgsico de frmacos analgsicos por el mtodo de
contorsiones abdominales en roedor.

Frmacos : Diclofenaco sdico, sol. 0.5 mg/ml / Metamizol. Sol. 1 % / Morfina clorhidrato, sol. 1 o/oo
/ Tramadol, sol. 50 mg/ml / Parecoxib sdico, sol. 40 mg/2ml / Solucin fisiolgica al 0.9%
/ c. Actico, sol. 2%

Especie : 7 Ratones de 25-30 g de p/c.

Software : Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of
Amsterdam

Metodologa : Trabajo en mesa de laboratorio.

Procedimiento :

Se procede a pesar y marcar 06 ratones. Administrar por va intraperitoneal, a un ratn
(animal control previamente recibe 0.1 ml de solucin fisiolgica por cada 10 g/pc),
cido actico al 2 %, en volumen de 0,2 ml por cada 10 gramos de peso. Observar, el
comportamiento del animal, el nmero de contracciones (El cido actico produce una
respuesta caracterstica de contorsin, que se manifiesta por contracciones abdominales,
retorcimiento del tronco y extensin de las patas posteriores), considerando el perodo
de latencia y el nmero total de contracciones durante 20 minutos. A los 5 ratones
restantes, administrar por va IP, segn el esquema propuesto, las siguientes sustancias
protectoras: Ratn A, cola, Diclofenaco sdico, 10 mg por Kg de peso. Ratn B, cabeza,
Metamizol sdico, 30 mg /Kg de peso. Ratn C, lomo, morfina clorhidrato, 10 mg /Kg de
peso. Ratn D, pata, Tramadol clorhidrato, 20 mg /Kg de peso. Ratn E, oreja, Parecoxib
sdico, 20 mg/kg de peso. Esperar 20 minutos y luego administrar, a todos los animales,
cido actico, va IP, a la dosis de 0.2 ml por cada 10 gramos de peso corporal ratn.
Contar el nmero de contracciones y estiramientos durante 20 minutos. Este
experimento, segn necesidad, podr ser simulado en el Software Virtual Pharmacology
Lab, en el segmento de metodologa demostrativa.




RESUMEN

Se observo el efecto de distintos frmacos para el manejo del dolor. Se trabaj con 7 ratones albinos con un
peso promedio de 27.5 gr. que fueron marcados e identificados como: cabeza, oreja, pata, cola y lomo.
Se utiliz cido actico que produce una respuesta caracterstica de contorsin, que se manifiesta por
contracciones abdominales, retorcimiento del tronco y extensin de las patas posteriores por va
intraperitoraneal. Al ratn cabeza se le administr cido actico y se evalu el periodo de latencia y el
nmero de contracciones durante 20 minutos luego de los cuales se le administr la dosis correspondiente de
metamizol y tramadol, volvindose a evaluar los parmetros de periodo de latencia y nmero de
contracciones. Al resto de ratones se les administr un nico analgsico y a los 10 minutos la dosis
correspondiente de cido actico por la misma va. Se evalu el periodo de latencia y el nmero de
contracciones durante 20 minutos. Solo morfina fue administrada por va subcutnea. Luego de obtener los
datos se organizaron en una tabla y se hall el porcentaje de PPL y el porcentaje de inhibicin de dolor de
cada frmaco.

































RESULTADOS
















































DISCUSIN
CONCLUSIONES




































































EXPERIMENTO N 2: Efecto analgsico de frmacos analgsicos por el mtodo de la placa
caliente en roedor.

Frmacos : Morfina / Fenilbutazona / NaCl.

Especie : Ratn.

Software : Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of
Amsterdam

Metodologa : Trabajo en mesa de laboratorio, mediante prctica simulada en Software

Procedimiento :

La placa caliente consiste en una superficie calentada, encima de un bao de agua. La
temperatura es controlada, entre 56 a 57C. Los animales son colocados en la superficie
caliente, y se toma el tiempo de latencia con un cronmetro, en que el animal reacciona
lamindose las patas delanteras o hacer saltos. Se registra el periodo de latencia, antes, y
despus de 20, 30 o 60 minutos luego de la administracin oral o subcutnea de las
drogas a probar. Si el tiempo de latencia excede 30 o 60 segundos, se retira el animal de
la placa caliente.

RESULTADOS

DISCUSIN
CONCLUSIONES














TAREA DE LA DCIMA PRCTICA FRMACOS QUE AFECTAN LA MOTILIDAD INTESTINAL
EXPERIMENTO N2: Evaluacin de la motilidad intestinal in vitro en leon de rata.

Frmacos : Acetlcolina solucin 1% / Atropina Sulfato. Amp.1 mg/ ml / Pargeverina clorhidrato sol. 5
mg./ ml. Hioscina, sol. 20mg/ml. / Loperamida, 2mg en 10ml.

Especie : leon de rata.
Software : Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of
Amsterdam

Metodologa : Tarea y trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software.

Procedimiento :

Sacrificar una rata por dislocacin cervical. Seguidamente, realizar diseccin tipo
laparotoma, y extraer un segmento de intestino delgado, de aproximadamente 3 cm.
Realizar lavado de la luz intestinal, e instalarlo en el aparato de rganos aislados. Utilizar
como lquido nutricio una solucin de Ringer Locke, aireacin continua, y temperatura de
37C. Registrar la actividad espontnea, y agregar los frmacos al recipiente, en la
siguiente secuencia (Grafico N1): Instilar 0.2 ml de Acetlcolina, y observar las
contracciones y anotar. Encontrndose el segmento contrado, instilar 0.2 ml de Hioscina
y anotar. Cambiar el segmento intestinal, e instilar 0.2 ml. de Acetlcolina, y anotar.
Encontrndose el segmento contrado, instilar 0.6 ml de Loperamida y anotar. Cambiar el
segmento intestinal, e instilar 0.2 ml. de Acetlcolina y anotar. Encontrndose el
segmento contrado, instilar 0.2 ml. de Pargeverina. Cambiar el segmento intestinal, e
instilar 0.2 ml. Acetlcolina y anotar. Encontrndose el segmento contrado, instilar 1 ml.
de Atropina y anotar. Este experimento, ser simulado en el Software Virtual
Pharmacology Lab, y los resultados del experimentos, pueden ser revisados en el grfico
N1.
Las variaciones en las contracciones del segmento de intestino, se catalogan en intensidad de efectos, bajo la
siguiente forma: Leve +. Moderado ++. Intensa +++. Muy intensa ++++.


Grafico N1: EXPERIMENTO N2, Evaluacin de la motilidad intestinal in vitro en leon de rata.


RESULTADOS















Intensidad del efecto:
Leve +
Moderada ++
Intensa +++
Muy intensa ++++
INTENSIDAD DE CONTRACCIONES
Acetilcolina +++ Contraccin
Hioscina +++ Relajacin
Acetilcolina +++ Contraccin
Loperamida ++ Relajacin
Acetilcolina ++ Contraccin
Pargeverina +++ Relajacin
Acetilcolina +++ Contraccin
Atropina ++++ Relajacin
Efecto de los farmacos sobre el Tono y la Amplitud:




Efecto en la frecuencia de las contracciones por tiempo definido:



DISCUSIN
Los fenmenos de mezcla, propulsin y absorcin de nutrientes en las vas gastrointestinales (GI) son
controladas localmente por el sistema nervioso entrico (SNE). Este sistema interviene en el control
sensorimotor y consiste en neuronas organizadas en dos plexos: mientrico (de Auerbach) y submucoso (de
Meissner). Plexo mientrico interviene en la contraccin y relajacin de los msculos lisos del tracto
gastrointestinal. Plexo submucoso se encarga de la funcin secretora y absortiva del epitelio.


En el experimento se aplic ACETILCOLINA al segmento de intestino y lo que ocurri fue que este
neurotransmisor actu sobre los receptores M3 del msculo liso intestinal y por intermedio de protena G se
activa a la fosfolipasa C, la cual cataliza la reaccin de formacin de IP2 a partir de IP3. Este IP3 acta en los
receptores de IP3 ubicados en el retculo sarcoplsmico y ocasiona que los canales de Ca++ se abran y los
iones Ca++ salgan al citoplasma, reaccionen con la actina y de esta forma produzcan la contraccin del
msculo liso la cual fue muy intensa

Aqu observamos que la Acetilcolina provocara contracciones intensas, ya que la Acetilcolina ir hacia los
receptores M3 que predominan en el musculo liso del TGI produciendo efectos excitatorios, desarrollan un
incremento del tono y del peristaltismo gastrointestinal. Adems se incrementan las secreciones de todos los
jugos intestinales produciendo un incremento del tono, la amplitud de las contracciones y la actividad
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
Amplitud
Tono
0
20
40
60
80
100
Frecuencia Contracciones
Frecuencia
peristltica del estomago e intestino; ello puede causar dolor tipo clico, defecacin, diarrea, nauseas, eructo
y vmitos.

Al agregarle la HIOSCINA que es un inhibidor de los receptores muscarnicos y es por este motivo que al
aplicarla sobre el segmento de intestino origina una relajacin muy intensa. Se inhibe la accin de la Ach
sobre el receptor M3.
La hioscina ejerce efecto espasmoltico a travs de su accin anticolinrgica. Acta a nivel de los receptores
colinrgicos perifricos, en las clulas efectoras autonmicas del msculo liso, msculo cardaco, ndulo
sinoatrial, ndulo aurculo-ventricular y glndulas exocrinas. Inhibe la motilidad gastrointestinal, reduce las
secreciones gstricas, as como las secreciones de faringe, trquea y bronquios. Dilata las pupilas, disminuye
las secreciones glandulares, aumenta el ritmo cardaco de forma transitoria, Posee una accin sedante,
ocasionalmente con amnesia parcial.


Luego se aplico nuevamente acetilcolina ocurriendo las contracciones previstas. Se le agrega esta vez
LOPERAMIDA Cuando se administra Loperamidase ste es un agonista opiceo que ejerce efecto
antidiarreico mediante una serie de acciones tanto perifricas en el tubo digestivo, como centrales. Su accin
gastrointestinal se ejerce mediante su accin sobre receptores MOR y DOR de la pared del tubo digestivo,
alterando tanto la motilidad como la secrecin, dando lugar una contraccin directa de las fibras musculares
de la capa circular que produce un incremento de la presin luminal, antagonizando el tono inhibidor motor
mediado por ciertos neuropeptidos, inhiben la liberacin de acetilcolina en las uniones neuromusculares de la
capa longitudinal. Su efecto inhibidor sobre la motilidad digestiva se lleva a cabo sobre todo el aparato
gastrointesitnal, incrementando el tono y reduciendo la motilidad.

Se aprecia en la grfica un leve descenso (10 mm.) y esto demuestra que este frmaco no es un
antimuscarnico potente. Lo que hace la loperamida es actuar sobre el msculo liso intestinal inhibiendo a la
calmodulina para que esta no interacte con el Ca++. La finalidad es disminuir la motilidad intestinal, lo que
permite la mayor absorcin de agua y electrolitos. Es usado como antidiarreico.


Se vuelve a cambiar el pedazo de intestino y se le aplica nuevamente acetilcolina por con efectos no tan
potentes como al inicio, esta vez fueron moderadas. Despus de tener los efectos con acetilcolina se le
administro PARGEVERINA. Este frmaco es un espasmoltico de accin antimuscarnica no selectivo y
musculotrpica que acta sobre la miofibrilla contracturada, produciendo relajacin directa e inespecfica del
musculo liso, reduciendo su tono y movilidad es un potente inhibidor de la liberacin de acetilcolina en las
terminaciones nerviosas.

El efecto ms importante es el musculotropo, el cual se debe probablemente a un bloqueo del ingreso de
calcio al interior de la clula muscular, de manera que esta accin pargeverina clorhidrato la ejerce como
relajante directa inespecfica sobre la musculatura lisa. La pargeverina clorhidrato posee una suave accin
antimuscarnica, llamada neurotrpica, al competir con acetilcolina por su receptor muscarnico, pero con
una potencia menor al compararla con atropina, por lo cual a dosis efectivas ejerce menos efectos
secundarios asociados a esta accin

Por ltimo, se le agrega nuevamente acetilcolina aprecindose efectos moderados. Cuando se administra
ATROPINA, la grfica tuvo una curva con una cada notoria. La accin principal de la atropina es competir por
el receptor M3 del musculo liso con la Ach e inhibir la sealizacin interna de contraccin. La atropina ejerce
su accin a travs de un antagonismo competitivo con la acetilcolina y otros antagonistas colinrgicos, por los
receptores muscarnicos. Con dosis teraputicas (1 mg de atropina) y an mayores, se bloquean todos los
receptores muscarnicos. Los receptores nicotnicos del ganglio autnomo y de la placa neuromuscular son
respetados con dicha dosis.

La atropina no distingue los receptores muscarnicos selectivos M1, M2 o M3, los bloquea a todos por igual.
La motilidad y el tono G-I son inhibidos por atropina y los agentes antimuscarnicos. El msculo liso se relaja y
los movimientos propulsivos disminuyen o se anulan. El tiempo de vaciamiento gstrico se prolonga y el
trnsito intestinal disminuye.
Las secreciones digestivas son tambin inhibidas o anuladas por la atropina. Con altas dosis, la secrecin
(cido clorhdrico, pepsina y mucina) es eficientemente reducida, principalmente la secrecin basal y menos
la secrecin inducida por el estmulo alimenticio, alcohol o la nicotina. Sin embargo las dosis de atropina dan
inevitablemente una serie importante de efectos adversos: sequedad de boca, taquicardia, palpitaciones y
ciclopleja.
























CONCLUSIONES



Los frmacos utilizados mostraron tener buen efecto antiespasmdico.Por el mecanismo de accin y
su efecto sobre la motilidad intestinal, estos frmacos son de utilidad dependiendo del trastorno del
intestino.


Acetilcolina en el tracto gastrointestinal provoca aumento del tono muscular del mismo, aumenta
las secreciones endocrinas gastrointestinales, estos efectos pueden producir nusea, vmito y
diarrea. Hioscina es un frmaco anticolinrgico ejerce una accin espasmoltica sobre la musculatura
lisa del tracto gastrointestinal. Loperamida es un frmaco que provoca relajacin del tracto
gastrointestinal y es utilizado para el tratamiento de la diarrea. Pargeverina es un antiespasmdico
antagonista moderado y no selectivo de los receptores muscarnicos y con accin directa sobre el
msculo liso visceral. Atropina es una droga anticolinrgica, antagonista competitivo del receptor
muscarnico de acetilcolina se utiliza para disminuir la motilidad gastrointestinal.




































EXPERIMENTO N3: Efecto de Acetlcolina en dosis escalonada, en leon aislado de rata.

Frmacos : Acetilcolina.

Especie : leon aislado de rata.

Software : Software Microlabs, Dr Henk van Wilgenburg, Dept. of Pharmacology, University of
Amsterdam.

Metodologa : Tarea y trabajo en mesa de laboratorio, mediante simulacin en Software.

Procedimiento :

Un sistema de rganos aislados, permite la evaluacin de los efectos de una sustancia en
una porcin especfica de tejido. Esto se logra aislando el rgano de una especie animal;
en esta prctica se utiliza una rata, y se obtiene de ella una porcin de leon de
aproximadamente 3 cm, que es llevada a la copa del sistema de rganos aislados, en la
que existe una sustancia nutricia especifica, solucin de Ringer Locke, con aireacin
continua con carbgeno y oxigeno, mantenida a una temperatura constante de 37 C. En
estas condiciones, uno de los extremos del leon es sujetado a la base de la copa que lo
hospeda, y el otro es conectado a un transductor, que convierte los movimientos de
contraccin y relajacin del intestino aislado, en fuerza, que a su vez es conectada a un
computador, que automticamente la convierte en porcentajes. En este sistema
simulado en el Software Microlabs, procedemos a someter al leon de rata, a dosis
escalonada de Acetilcolina, la secuencia y los resultados podemos observarlos en el
grfico N2. En base a los resultados observados, analizarlos, segn los mecanismos
farmacolgicos implicados en este efecto farmacolgico.


RESULTADOS
Grafico N2: EXPERIMENTO N3, Efecto de Acetlcolina en dosis escalonada, en leon asilado de rata.


DISCUSIN
En el intestino delgado se distinguen tres porciones: duodeno, yeyuno e leon. Constituidas por una capa serosa,
muscular, plexos nerviosos, submucosa y mucosa. Las clulas de musculatura lisa, de la capa muscular, van a
contraerse en respuesta a diversos estmulos y por tanto las responsables de la respuesta que vamos a registrar.

Entre los neurotransmisores con capacidad de producir contraccin del leon, que posee sus respectivos
receptores, tenemos: ACh, histamina, noradrenalina, etc. La ACh es un agonista de receptores muscarnicos y
nicotnicos. El nicotnico es un receptor preganglionar, y no se encuentra en el leon, sino en el ganglio donde
sinaptan las neuronas que inervan el intestino. Esto quiere decir que mientras que el rgano aislado (sin
inervacin) no responde a la estimulacin del receptor nicotnico, en el animal entero, esta estimulacin s
provocara respuesta. El leon presenta una contraccin bifsica, con un componente fsico (un pico de
contraccin) seguido de otro tnico (una meseta mantenida). El pico de contraccin se asocia con la liberacin de
Ca2+ de los depsitos intracelulares y la contraccin tnica con la entrada de Ca2+ a travs de canales. Ya
sabemos que la Ach produce contraccin del leon, por lo que se puede ver en l grfico del experimento como
este efecto depende de la concentracin de Ach en contacto con los receptores.


CONCLUSIONES

La ACh interacciona con receptores muscarnicos, concretamente M3. Tras su estimulacin se desencadenan una
serie de procesos que conducen a un incremento de [Ca2+] intracelular, provocando la contraccin del msculo
liso (receptor M3 est asociado auna proteina G cuya activacin estimula la actividad de la fosfolipasa C ). Es por
ello que al aumentar las dosis escalonadas de Ach, aumentan la intensidad de los efectos, los movimientos de
contraccin y relajacin del intestino aislado.








BIBLIOGRAFA

P. Loredo, et all. VELAZQUEZ, FARMACOLOGIA BASICA Y CLINICA. Editorial medica
panamericana. Edicin 2008.


Farmacologa bsica y clnica Bertram G. Katzung