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GC-FR-012 Rev. 3 Manual de Laboratorio de Inmunologa Bsica
Clave de la materia: 12660
Plan de estudios 2010-1
Laboratorio 1
Autor: M.C. Martha Rosales Aguilar
Elabor Revis Autoriz MC. Martha Rosales Aguilar Q.F.B. Mayra Lilly Martnez Cruz MC Christian Rodrguez Arroyo Dr. Alfredo Renn Gonzlez Ramrez
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GC-FR-012 Rev. 3 NDICE I. Introduccin........................................................................................................... 3 II. Competencia general de la asignatura. ............................................................ 10 III. Reglamento de laboratorio ................................................................................ 10 Sesin No. 1: Encuadre, clasificacin y Separacin de RPBI . ...................... 11 Sesin No. 2: Clulas del linaje inmunolgico: Inmunidad natural. ............... 20 Sesin No. 3: Conteo leucocitario: Inmunidad natural .................................... 22 Sesin No. 4: Fagocitosis: Inmunidad natural. ................................................ 26 Sesin No. 5: Complemento .............................................................................. 29 Sesin No. 6: Velocidad de sedimentacin globular: Inmunidad natural ...... 40 Sesin No. 7: Perfil reumtico: Inmunidad natural .......................................... 43 Sesin No. 8: Lupus Eritematoso...................................................................... 46 Sesin No. 9: Inmunoglobulina E (IgE): Inmunidad adquirida ........................ 51 Sesin No. 10: Antgenos de reaccin febril. ................................................... 56 Sesin No. 11: Anticuerpos VIH: Efectos deseables de la inmunidad. ......... 59 Sesin No. 12: Antgenos de superficie Hepatitis . ......................................... 62 Sesin No. 13: Helicobacter pylori deteccin de anticuerpos de memoria. .. 66 Sesin No. 14: Grupo sanguneo, Rh y pruebas cruzadas. ........................... 68 Sesin No. 15: Tuberculina Hipersensibilidad retardada............................. 72 Sesin No. 16: Enfermedades autoinmunes y rel al sistema inmune. .......... 76 V. ANEXOS ............................................................................................................. 78 VI. TABLA DE CAMBIOS ........................................................................................ 83
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GC-FR-012 Rev. 3 PRLOGO Este manual tiene la intencin de dar una visin general sobre los aspectos bsicos clnicos de la inmunologa aplicada a la medicina, pretende que el estudiante entienda y maneje estos conocimientos para poder integrarlos paulatinamente en los avances de la carrera. I. Introduccin La inmunologa estudia los mecanismos por los cuales los seres vivos se defiende de lo extrao (microorganismo y sustancias txicas). Aunque tambin puede desempear un papel en la defensa antitumoral (actuando ante clulas tumorales). Existen dos tipos de inmunidad: 1. Inmunidad natural o no especifica. 2. Inmunidad adquirida o especifica. Inmunidad natural. Constituida por: barreras epiteliales, secreciones, macrfagos, natural killer, sistemas del complemento, interferones. Inmunidad adquirida. Se pone en marcha cuando una sustancia extraa (antgeno) se pone en contacto con el sistema inmune dando lugar a la memoria inmunolgica: hay una primera respuesta, menos intensa, y en sucesivas contactos se dan respuestas secundarias ms potentes. Existen dos grandes poblaciones de linfocitos, que son los encargados de la inmunidad especifica: - Linfocitos B. Encargados de la inmunidad humoral. - Linfocitos T. Encargados de la inmunidad celular. Existen dos subpoblaciones: Linfocitos T citotxicos (CD 8). Linfocitos T helper (CD 4+). La inmunidad especfica se basa en la seleccin clonal; el Ag selecciona aquellos linfocitos que son capaces de reconocerle de forma especfica y esos son los que proliferan. Los linfocitos activados ponen en marcha distintos mecanismo para eliminar el antgeno: l Los linfocitos B activados se transforman en la clula plasmtica que sintetizan inmunoglobulinas (anticuerpos). La unin antgeno-anticuerpo favorece fenmenos destinados a la eliminacin del antgeno por inflamacin o fagocitosis. l Los linfocitos T citotxicos lisan las clulas tumorales e infectadas por virus. l Los linfocitos T helper colaboran con los linfocitos B, con los linfocitos T citotxicos y con las clulas fagocticas. INMUNOPATOLOGA. Es un sistema de defensa para el organismo, en ocasiones est implicado en la gnesis de enfermedades. Puede ocurrir que las reacciones inmunolgicas tengan
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GC-FR-012 Rev. 3 efectos indeseables para el organismo (como cuando hay fenmenos de hipersensibilidad o alergia, autoinmune/autoinmunidad o hay rechazo de trasplante). En segundo lugar puede ocurrir que las reacciones inmunolgicas sean insuficientes y esto acontece a las llamadas inmunodeficiencias. HIPERSENSIBILIDAD. Se emplea el trmino para designar una serie de reacciones inmunolgicas que se caracterizan por que la respuesta es excesiva o bien porque se produce frente antgenos que normalmente son bien tolerados. Estas reacciones se acompaan de efectos perjudiciales par el organismo. Clsicamente se han descrito varios tipos de reacciones de inmunologa segn mecanismo de aparicin: las ms conocida reacciones de hipersensibilidad tipo I o inmediata. Estas son reacciones mediadas por IgE. Alergia: hipersensibilidad inmediata. Son reacciones de instauracin rpida que se producen como consecuencia de la liberacin de histamina y otras sustancias por dos tipos de clulas: los mastocitos o clulas cebadas y los PMN basfilos. Etiopatogena: las personas susceptibles cuando entran en contacto con el alergeno (como ejemplo: plenes, caros, frmacos, derivados de la epidermis animal, veneno de insectos, alimentos...) sintetizan IgE especificas para ese Ag que se dispone sobre la superficie de los mastocitos y basfilos (se dice que el sujeto esta sensibilizado). Ante nuevos contactos el alergeno se une a la IgE y esta unin provoca la degranulacin de histamina y otros mediadores de la alergia hacia el espacio extracelular. Los efectos en el organismo: - Contraccin del tejido muscular liso. - Secrecin de glndulas mucosas. 1. Aumento de permeabilidad de los vasos. Mediante estos efectos pueden tener lugar reacciones locales como la rinitis alrgica (afectacin de las fosas nasales) acompaada de conjuntivitis; asma bronquial alrgico (episodios de bronco espasmo); urticaria es un cuadro caracterizado por la aparicin de habones pruriginosos y son evaporescentes). Tambin llamado angioedema (tumefaccin de tejidos laxos: lengua, faringe, prpados...) Tambin se puedan dar reacciones generales. Un tipo que conocemos como anafilaxia o shock anafilctico (es grave, puede provocar la muerte del paciente), apariciones: cutneas, respiratorias (broncoespasmo, edema de laringe), digestivas (vmito), cardiovascular (schock o hipotensin). Se utiliza el trmino atopia para denominar una predisposicin a sufrir reacciones alrgicas. Puede ser de carcter familiar.
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GC-FR-012 Rev. 3 AUTOINMUNIDAD Una caracterstica importante del sistema inmune es la tolerancia inmunolgica. Autoinmunidad cuando el sistema inmune acta contra Ag propios, es decir, se pierde la tolerancia inmunolgica. Los mecanismos que ponen en marcha fenmenos de autoinmunidad pueden ser variados, se piensa que en muchos casos que el origen puede ser una infeccin. En teora existen dos mecanismos por lo que una infeccin puede dar lugar a ellos: - Unin del Ag del germen al Ag del tejido. - Puede existir una reactividad cruzada de Ag del germen y Ag propios, es decir, determinados Ag pueden ser similares bioqumicamente a un Ag del husped. Las enfermedades autoinmunes pueden afectar a una sola estructura u rgano (miastemia gravis, diabetes tipo I...) o pueden provocar enfermedad diseminada (artritis reumatoide, lupus eritematoso sistmico) Tambin existe predisposicin familiar a padecer enfermedades autoinmunes. 1. RECHAZO DE TRASPLANTES .Cuando se transplanta un rgano de un individuo, a otro el sistema inmune del receptor reconoce como extraos los Ag del donante y lo rechaza y se desencadenan reacciones, por lo que el organismo no es viable. Los Ag reInmunidad natural o no especifica. 2. Inmunidad adquirida o especifica. Inmunidad natural. Constituida por: barreras epiteliales, secreciones, macrfagos, natural killer, sistemas del complemento, interferones. Inmunidad adquirida. Se pone en marcha cuando una sustancia extraa (antgeno) se pone en contacto con el sistema inmune dando lugar a la memoria inmunolgica: hay una primera respuesta, menos intensa, y en sucesivas contactos se dan respuestas secundarias ms potentes. Existen dos grandes poblaciones de linfocitos, que son los encargados de la inmunidad especfica: - Linfocitos B. Encargados de la inmunidad humoral. - Linfocitos T. Encargados de la inmunidad celular. Existen dos subpoblaciones: Linfocitos T citotxicos (CD 8). Linfocitos T helper (CD 4+). La inmunidad especfica se basa en la seleccin clonal; el Ag selecciona aquellos linfocitos que son capaces de reconocerle de forma especfica y esos son los que proliferan. Los linfocitos
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GC-FR-012 Rev. 3 activados ponen en marcha distintos mecanismo para eliminar el antgeno: l Los linfocitos B activados se transforman en la clula plasmtica que sintetizan inmunoglobulinas (anticuerpos) La unin antgeno-anticuerpo favorece fenmenos destinados a la eliminacin del antgeno por inflamacin o fagocitosis. Los linfocitos T citotxicos lisan las clulas tumorales e infectadas por virus. Los linfocitos T helper colaboran con los linfocitos B, con los linfocitos T citotxicos y con las clulas fagocticas. INMUNOPATOLOGA. Es un sistema de defensa para el organismo, en ocasiones esta implicado en la gnesis de enfermedades. Puede ocurrir que las reacciones inmunolgicas tengan efectos indeseables para el organismo (como cuando hay fenmenos de hipersensibilidad o alergia, autoinmune/autoinmunidad o hay rechazo de trasplante). En segundo lugar puede ocurrir que las reacciones inmunolgicas sean insuficientes y esto acontece a las llamadas inmunodeficiencias. HIPERSENSIBILIDAD. Se emplea el trmino para designar una serie de reacciones inmunolgicas que se caracterizan por que la respuesta es excesiva o bien porque se produce frente antgenos que normalmente son bien tolerados. Estas reacciones se acompaan de efectos perjudiciales para el organismo. Clsicamente se han descrito varios tipos de reacciones de inmunologa segn mecanismo de aparicin: las ms conocida reacciones de hipersensibilidad tipo I o inmediata. Estas son reacciones mediadas por IgE. Alergia: hipersensibilidad inmediata. Son reacciones de instauracin rpida que se producen como consecuencia de la liberacin de histamina y otras sustancias por dos tipos de clulas: los mastocitos o clulas cebadas y los PMN basfilos. Etiopatogena: las personas susceptibles cuando entran en contacto con el alergeno (como ejemplo: plenes, caros, frmacos, derivados de la epidermis animal, veneno de insectos, alimentos...) sintetizan IgE especificas para ese Ag que se dispone sobre la superficie de los mastocitos y basfilos (se dice que el sujeto esta sensibilizado). Ante nuevos contactos el alergeno se une a la IgE y esta unin provoca la degranulacin de histamina y otros mediadores de la alergia hacia el espacio extracelular. Los efectos en el organismo: - Contraccin del tejido muscular liso. - Secrecin de glndulas mucosas. Aumento de permeabilidad de los vasos.
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GC-FR-012 Rev. 3 Mediante estos efectos pueden tener lugar reacciones locales como la rinitis alrgica (afectacin de las fosas nasales) acompaada de conjuntivitis; asma bronquial alrgico (episodios de bronco espasmo); urticaria es un cuadro caracterizado por la aparicin de habones pruriginosos y son evaporescentes). Tambin llamado angioedema (tumefaccin de tejidos laxos: lengua, faringe, prpados...) Tambin se puedan dar reacciones generales. Un tipo que conocemos como anafilaxia o shock anafilctico (es grave, puede provocar la muerte del paciente), apariciones: cutneas, respiratorias (broncoespasmo, edema de laringe), digestivas (vmito), cardiovascular (schock o hipotensin). Se utiliza el trmino atopia para denominar una predisposicin a sufrir reacciones alrgicas. Puede ser de carcter familiar. AUTOINMUNIDAD Una caracterstica importante del sistema inmune es la tolerancia inmunolgica. Autoinmunidad cuando el sistema inmune acta contra Ag propios, es decir, se pierde la tolerancia inmunolgica. Los mecanismos que ponen en marcha fenmenos de autoinmunidad pueden ser variados, se piensa que en muchos casos que el origen puede ser una infeccin. En teora existen dos mecanismos por lo que una infeccin puede dar lugar a ellos: - Unin del Ag del germen al Ag del tejido. - Puede existir una reactividad cruzada de Ag del germen y Ag propios, es decir, determinados Ag pueden ser similares bioqumicamente a un Ag del husped. Las enfermedades autoinmunes pueden afectar a una sola estructura u rgano (miastenia gravis, diabetes tipo I...) o pueden provocar enfermedad diseminada (artritis reumatoide, lupus eritematoso sistmico) Tambin existe predisposicin familiar a padecer enfermedades autoinmunes. RECHAZO DE TRASPLANTES.Cuando se trasplanta un rgano de un individuo, a otro el sistema inmune del receptor reconoce como extraos los Ag del donante y lo rechaza y se desencadenan reacciones, por lo que el organismo no es viable. El Ag responsable del rechazo son los Ag del sistema ABO y los del complejo mayor de inmunohistocompatibilidad (MHC) Para evitar los rechazos, dos tipos de medios:
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GC-FR-012 Rev. 3 1. Buena seleccin de donantes; que tengan el grupo sanguneo del sistema ABO igual y los Ag del MHC sean lo ms parecido posible a los del receptor. 2. Frenar la respuesta inmunolgica del receptor administrando inmunosupresores. INMUNODEFICIENCIAS. Incluye una serie de sndromes y enfermedades, en las que se produce un fallo cualitativo o cuantitativo del sistema inmunitario. Existen dos tipos: l Primarios. Alteraciones intrnsecas del sistema inmune (es defectuoso). l Secundarios. Son los ms frecuentes. En los cuales el sistema inmune previamente era normal pero sufre las consecuencias de factores nocivos ambientales (como la nutricin, frmacos inmunosupresores) o determinadas infecciones (como el SIDA). El principal dato analtico del SIDA es la disminucin de linfocitos T CD 4+ (los helper) porque el virus ataca predominantemente a estos. Las principales consecuencias: - Predisposicin a padecer infecciones (neumonia por Pneumocystis carinni) excepcionales u oportunista. - Aumento de la aparicin de neoplasias (sarcoma de kaposi muy frecuente en pasicentes con SIDA). Mediante estos efectos pueden tener lugar reacciones locales como la rinitis alrgica (afectacin de las fosas nasales) acompaada de conjuntivitis; asma bronquial alrgico (episodios de bronco espasmo); urticaria es un cuadro caracterizado por la aparicin de habones pruriginosos y son evaporescentes). Tambin llamado angioedema (tumefaccin de tejidos laxos: lengua, faringe, prpados...) Tambin se puedan dar reacciones generales. Un tipo que conocemos como anafilaxia o shock anafilctico (es grave, puede provocar la muerte del paciente), apariciones: cutneas, respiratorias (bronco espasmo, edema de laringe), digestivas (vmito), cardiovascular (shock o hipotensin). Se utiliza el trmino atopia para denominar una predisposicin a sufrir reacciones alrgicas. Puede ser de carcter familiar. AUTOINMUNIDAD Una caracterstica importante del sistema inmune es la tolerancia inmunolgica. Autoinmunidad cuando el sistema inmune acta contra Ag propios, es decir, se pierde la tolerancia inmunolgica.
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GC-FR-012 Rev. 3 Los mecanismos que ponen en marcha fenmenos de autoinmunidad pueden ser variados, se piensa que en muchos casos que el origen puede ser una infeccin. En teora existen dos mecanismos por lo que una infeccin puede dar lugar a ellos: - Unin del Ag del germen a los Ag del tejido. - Puede existir una reactividad cruzada de Ag del germen y Ag propios, es decir, determinados Ag pueden ser similares bioqumicamente a un Ag del husped. Las enfermedades autoinmunes pueden afectar a una sola estructura u rgano (miastenia gravis, diabetes tipo I...) o pueden provocar enfermedad diseminada (artritis reumatoide, lupus eritematoso sistmico) Tambin existe predisposicin familiar a padecer enfermedades autoinmunes. RECHAZO DE TRASPLANTES. Cuando se trasplanta un rgano de un individuo, a otro el sistema inmune del receptor reconoce como extraos los Ag del donante y lo rechaza y se desencadenan reacciones, por lo que el organismo no es viable. Los Ag responsables del rechazo son los Ag del sistema ABO y los del complejo mayor de inmunohistocompatibilidad (MHC) Para evitar los rechazos, dos tipos de medios 1. Buena seleccin de donantes; que tengan el grupo sanguneo del sistema ABO igual y los Ag del MHC sean lo ms parecido posible a los del receptor. 2. Frenar la respuesta inmunolgica del receptor administrando inmunosupresores. INMUNODEFICIENCIAS. Incluye una serie de sndromes y enfermedades, en las que se produce un fallo cualitativo o cuantitativo del sistema inmunitario. Existen dos tipos: l Primarios. Alteraciones intrnsecas del sistema inmune (es defectuoso). l Secundarios. Son los ms frecuentes. En los cuales el sistema inmune previamente era normal pero sufre las consecuencias de factores nocivos ambientales (como la nutricin, frmacos inmunosupresores) o determinadas infecciones (como el SIDA). El principal dato analtico del SIDA es la disminucin de linfocitos T CD 4+ (los helper) porque el virus ataca predominantemente a estos. Las principales consecuencias: - Predisposicin a padecer infecciones (neumonia por Pneumocystis carinni) excepcionales u oportunista. - Aumento de la aparicin de neoplasias (sarcoma de kaposi muy frecuente en pasicentes con SIDA).
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GC-FR-012 Rev. 3 II. Competencia general de la asignatura. Analizar los elementos celulares y mediadores solubles que integran la respuesta inmune innata, natural y adquirida en los distintos rganos y tejidos, diferenciando sus mecanismos de vigilancia inmune en el estado de salud y los mecanismos de evasin de la respuesta inmune en la enfermedad del individuo, mediante la integracin y el anlisis de los fundamentos cito-funcionales, expresados a travs de las manifestaciones clnicas y de respuesta serolgica en los resultados de laboratorio en base a la respuesta inmune y sus consecuencias, para proporcionar soluciones a problemticas de salud presentadas en distintos casos y fundamentar con mayor claridad los diagnsticos emitidos, con compromiso, honestidad y responsabilidad.
III. Reglamento de laboratorio
1. El alumno llegara puntual a su clase, pasados 15 minutos depender del docente si le permite la entrada. 2. Deber llegar y entrar con la prctica correspondiente al calendario, leda y comprendida, de no hacerlo ser invitado a abandonar la sesin debido a su falta de responsabilidad. 3. Debern comportarse de manera disciplinada y con respeto hacia todo el personal trabajador del laboratorio 4. No debern tomar material del laboratorio que su docente no les haya dado el permiso de usar. 5. Tienen la responsabilidad al terminar la prctica de dejar todo limpio y en orden.
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GC-FR-012 Rev. 3 1. Sesin No. 1: Encuadre, clasificacin y Separacin de Residuos Peligrosos Biolgico-Infecciosos (RPBI) generados en el Laboratorio y bioseguridad en la prctica mdica.
2. Competencia a desarrollar en la sesin. Que el alumno (a) identifique, maneje, envase y recolecte, los residuos peligrosos biolgico infecciosos de forma adecuada y segura, que identifique los organismos gubernamentales involucrados en el manejo de RPBI para que en su prcticamdica pueda realizar una buena disposicin de los residuos. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. a) Que el alumno identifique y disponga los residuos peligrosos biolgico-infecciosos (RPBI) en la estacin de destreza y evaluacin de RPBI con una eficiencia del 100%. b) Lista de cotejo para verificar el llenado de bitcora de registro de RPBI. c) Calidad de las notas de su cuaderno de prcticas. d) Calidad del reporte. Los resultados de la practica sern la autoevaluacin de como se organizaron los residuos y reconsideraran los errores cometidos con actitud, responsabilidad y tica.
4. Fundamento terico e informacin de apoyo. En la sesin 1: Encuadre se sugiere se mencionen: Normatividad en el laboratorio Responsabilidades ante el SGC Buenas prcticas de laboratorio Criterios de evaluacin del laboratorio Caractersticas del reporte de prcticas Uso del manual de prcticas Sanciones La importancia del manejo adecuado de los RPBI y su aplicacin en hospitales, consultorio y casa; adems de sealar los que se generan en el laboratorio especfico.
En la realizacin de las prcticas del Laboratorio deinmunologia, se generan R.P.B.I. por lo que es importante conocer y aplicar las Normas Oficiales Mexicanas en especial la NOM-087- SEMARNAT-SSA1-2002 y la gua de cumplimiento de la Norma Oficial Mexicana. Es importante considerar minimizar la generacin de RPBI identificando correctamente a manera de y segregar los materiales que NO los contengan, por ejemplo: papel de envoltura de gasa estril, envoltura de la jeringa, protector de las agujas, etc. En el desarrollo de las actividades del laboratorio se deber separar adecuadamente los materiales que son reciclables, depositndolos en los recipientes
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GC-FR-012 Rev. 3 destinados para su posterior tratamiento y recuperacin (Ejemplo: tubos de ensayo, matraces, etc.). En el manejo de R.P.B.I. se debern utilizar los implementos de proteccin personal para el su manejo e identificar los sitios designados en el laboratorio para depositarlos. El depsito y envasado de RPBI se realizara de acuerdo a la siguiente tabla, observando que los recipientes solo se llenarn hasta las partes de su capacidad. Los depsitos se etiquetaran con la leyenda PELIGRO: RESIDUO PELIGROSO (SLIDO O LIQUIDO) BIOLOGICO INFECCIOSO. TABLA No. 1: IDENTIFICACION Y CLASIFICACION DE LOS R.P.B.I. Denominacin Estado fsico Envasado Descripcin
Sangre
Liquido
Envase Rojo Hermtico
La sangre y sus componentes, slo en su forma lquida, as como sus derivados no comerciales, incluyendo las clulas progenitoras, hematopoyticas y las fracciones celulares o acelulares de la sangre resultante (hemoderivados), Suero y plasma tubo de vidrio. Slido y lquidos en recipientes con tapa Bolsa roja Cogulo, suero y plasma en tubo de plstico con tapadera. Cultivos y cepas de agentes infecciosos
Solid
Bolsa roja Cultivos en caja y placas de Microscan
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GC-FR-012 Rev. 3 Solid Recipiente hermtico Cultivos en Tubos de vidrio Slidos
Bolsa roja Guantes contaminados, medios de transporte, asas de plstico. Liquido
Recipiente hermtico Colorantes y lquido de enjuague de tinciones.
Patolgicos
Slido/liquido
Bolsa Amarilla / Envase amarillo Biopsias, rganos, animales, tejidos.
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El temporal de depsitose encuentra previamente sealado en el Laboratorio con el smbolo universal que lo identifica y todos los recipientes que contiene RPBI deben ser colocados en estos sitios. El personal responsable del manejo de los RPBI de los laboratorios son los auxiliares de laboratorio y llevan el registro de su generacin y transporte al rea temporal de la Facultad, tambin es responsable de la recoleccin, y transporte al almacn general, almacenamiento y entrega a la empresa tratadora, registro y elaboracin de bitcoras y reportes, disposicin y tratamiento interno y externo y capacitacin y monitoreo de acuerdo a la norma NOM-087- SEMARNAT-SSA1-2002. Los lugares que ofrecen atencin medica y los centros de investigacin y rea de docencia, son considerados como establecimientos generadores de materiales contaminados con agentes biolgicos infecciosos, estos desechos se denominan Residuos peligrosos biolgicos infecciosos RPBI, su manejo y disposicin inadecuados representa peligro para la salud del personal que trabaja y acude a estos sitios. Ejemplos de reas temporales (RPBI) previamente sealadas en el laboratorio
Residuos no anatmicos Slido
Bolsa Roja Gasas, hisopos, papel, guantes, algodn que se encuentre empapado de sangre u otro contaminante, Tiras reactivas, asas de plstico, placas de reaccin, cubetas de plstico para el espectro, jeringas, pipetas transfer de plstico, abatelenguas Residuos punzocortantes Slido
Envase rojo hermtico para punzocortantes Lancetas, agujas, agujas de bolsa de sangra, capilares de hematocrito, aplicadores, tubos rotos, portaobjetos y cubreobjetos, puntillas, jeringas de insulina.
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GC-FR-012 Rev. 3 Generalidades de los RPBI Qu factores se requieren para que los residuos sean considerados como RPBI? Para que un residuo sea considerado RPBI debe contener agentes biolgicos infecciosos que de acuerdo a la norma se definen como cualquier microorganismo capaz de producir enfermedades, siempre y cuando ocurra lo siguiente: Cmo se clasifican los RPBI y en qu reas se pueden generar? Tabla No. 2: REAS DONDE SE PUEDEN GENERAR LOS RPBI Y SU CLASIFICACION CLASIFICACIN REAS DONDE SE PUEDEN GENERAR LA SANGRE La sangre y sus componentes, slo en su forma lquida, as como sus derivados no comerciales, incluyendo las clulas progenitoras, hematopoyticas y las fracciones celulares o acelulares de la sangre resultante (hemoderivados). No se considera como RPBI a la sangre seca.
Laboratorios Clnicos Banco de Sangre Quirfanos Urgencias Bioterios Centro de investigacin LOS CULTIVOS Y CEPAS DE AGENTES BIOLGICOINFECCIOSOS: Los cultivos generados en los procedimientos de diagnstico e investigacin, as como los generados en la produccin y control de agentes biolgicoinfecciosos. Utensilios desechables transferir, inocular y mezclar cultivos de agentes biolgico- infecciosos.
Laboratorios de Microbiologa Centro de investigacin y diagnostico
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GC-FR-012 Rev. 3 PATOLGICOS: Los tejidos, rganos y partes que se extirpan o remueven durante las necropsias, la ciruga o algn otro tipo de intervencin quirrgica y que no se encuentren en formol.
Son lquidos patolgicos los fluidos corporales No se consideran RPBI la orina y el excremento, sin embargo, cuando estos provengan de pacientes con enfermedades infectocontagiosas graves deben ser desinfectadas con hipoclorito de sodio o formol antes de ser desechadas. Muestras biolgicas para anlisis qumico, microbiolgico, citolgico e histolgico. No se consideran RPBI aquellos tejidos, rganos y partes del cuerpo que se encuentren en formol (lquido sinovial, pericrdico, pleural, cefalorraqudeo, peritoneal y pulmonar). Los cadveres y partes de animales que fueron inoculados con agentes entero- patgenos en centros de investigacin y bioterios. nicamente se consideran RPBI loscadveres de animales o partes de ellos que fueron inoculados con agentes patgenos. Laboratorios de patologa Laboratorios Clnicos Quirfanos Salas de labor Salas de necropsia Bioterios Centro de investigacin rea de hospitalizacin para pacientes con sospecha de alguna enfermedad infecciosa
NO ANATOMICOS: Recipientes desechables que contengan sangre lquida. Laboratorios Clnicos Banco de sangre Quirfanos
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GC-FR-012 Rev. 3 Materiales de curacin empapados, saturados o goteando sangre o fluidos corporales. Los sellos de agua desechables, sern considerados como RPBI no anatmico. Materiales desechables que contengan secreciones pulmonares de pacientes sospechosos de tuberculosis o sospecha/diagnstico fiebreshemorrgicas o enfermedades infecciosas, segn sea determinado por la SSA mediante memorndum interno o el Boletn Epidemiolgico. Materiales desechables usados para el cultivo de agentes infecciosos. Materiales absorbentes utilizados en las jaulas de animales que hayan sido expuestos a agentes patgenos. Urgencias
OBJETOS PUNZOCORTANTES: Los que han estado en contacto con humanos o animales o sus muestras biolgicas durante el diagnstico y tratamiento, nicamente tubocapilares, agujas de jeringas desechables, navajas, lancetas, agujas hipodrmicas, agujas de sutura, agujas de acupuntura y para tatuaje, bisturs y estiletes de catter. Excepto material de vidrio roto, utilizado en el laboratorio, ya que ste se deber desinfectar o esterilizar para ser dispuesto como basuramunicipal. rea de atencin a pacientes Hospitalizacin unidades de manejo ambulatorio Laboratorios Clnicos Banco de sangre Quirfanos Urgencias Toma de muestras Laboratorios de patologa Bioterios
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Organismos gubernamentales involucrados en el manejo de RPBI Antecedentes El Plan Nacional de Desarrollo 2001-2006 establece como uno de sus objetivos rectores lograr un desarrollo social y humano en armona con la naturaleza; para llevar a cabo lo anterior se plantea como una de sus estrategias detener y revertir la contaminacin del agua, aire y suelo. Otro de sus objetivos rectores es promover el desarrollo econmico regional y equilibrado, a travs de la estrategia para garantizar la sustentabilidad ecolgica del desarrollo econmico en todas las regiones del pas, en donde la proteccin y restauracin del hbitat natural de las diferentes zonas se mantendrn como propsitos no discutibles en los procesos de desarrollo econmico. El 17 de febrero de 2003 fue publicada en el Diario Oficial de la Federacin(DOF), la Norma Oficial Mexicana NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002, Proteccin ambiental-Salud ambiental- Residuos peligrosos biolgico-infecciosos-Clasificacin y especificaciones de manejo; cuyo objetivo es establecer la clasificacin de estos residuos, as como las especificaciones para su manejo, misma que es de observancia obligatoria para los establecimientos que generen dichos residuos y los prestadores de servicios que tengan relacin directa con los mismos. En la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 establece que la SEMARNAT, a travs de la Procuradura Federal de Proteccin al Ambiente y la Secretara de Salud, a travs de la Comisin Federal para la Proteccin Contra Riesgos Sanitarios, en el mbito de sus respectivas atribuciones y competencias, vigilarn el cumplimiento de la citada Norma Oficial Mexicana de conformidad con las Bases de Colaboracin que celebren entre SALUD y LA SEMARNAT, mismas que se publicarn en el DOF. Que LA COFEPRIS es un rgano Desconcentrado de la Secretara de Salud, con autonoma tcnica, administrativa y operativa, el cual tiene a su cargo, entre otros, proponer e instrumentar la poltica nacional de proteccin contra riesgos sanitarios en materia de sustancias txicas o peligrosas para la salud, identificar, analizar, evaluar, regular, controlar, fomentar y difundir las condiciones y requisitos para la prevencin y manejo de los riesgos sanitarios, ejercer las acciones de control, regulacin y fomento sanitario correspondientes, para prevenir y reducir los riesgos sanitarios derivados de la exposicin de la poblacin a factores qumicos, fsicos y biolgicos, as como de prevencin y control de los efectos nocivos de los factores ambientales en la salud del hombre, salud ocupacional y saneamiento bsico, conforme al artculo 17 bis fraccin I de la Ley General de Salud y el artculo 2o. apartado C, fraccin X y el artculo 3o. fracciones V y X del Reglamento de la Comisin Federal para la Proteccin contra Riesgos Sanitarios.
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5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. a) Kit de simulacin que contiene: Recipientes y bolsas especiales para depsito de RPBI, jeringas, tubos, gasas, asas de inoculacin, caja petri y todo el material que potencialmente pueda generarse en el laboratorios. 6. Metodologa de la sesin. a) Identifique y separe los materiales de acuerdo a la tabla 1. b) Identifique y envase los materiales en los recipientes adecuados de acuerdo a la tabla 2. c) Identifique el rea de depsito de los RPBI en el Laboratorio y construir una estacin para evaluacin la destreza del alumno, clasificando el conjunto de materiales generados en el laboratorio con los recipientes y bolsas para su adecuado almacenamiento. d) identificar los organismos gubernamentales involucrados en el manejo de RPBI 7. Bibliografa. Ver al final del manual
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2. Competencia a desarrollar en la sesin Diferenciar las clulas del el sistema de defensa y conocer su funcin en el organismo humano, desde su origen hasta la produccin de un foco de infeccin conociendo su morfologa para que el futuro medico comprenda el origen de la enfermedad. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Revisin de cuaderno de trabajo y aportaciones en la conclusin 4. Fundamento terico e informacin de apoyo. Los leucocitos (glbulos blancos) son clulas que circulan por la sangre con la funcin de combatir infecciones o cuerpos extraos. Son parte de las defensas inmunitarias del organismo, pero en ocasiones pueden atacar los tejidos normales del cuerpo.
Existen dos grupos de leucocitos: los granulocitos (neutrfilos, basfilos y eosinfilos) y los agranulocitos (monocitos y linfocitos).
Los neutrfilos defienden el organismo contra bacterias y otros microorganismos. Se les puede denominar neutrfilos en banda o segmentados, dependiendo de si presentan o no divisiones de sus ncleos en 3 a 5 lbulos. Si el nmero es mayor, se habla de neutrfilos hipersegmentados.
Los basfilos poseen grnulos de heparina e histamina, mediadores de la inflamacin. Actan en estados de hipersensibilidad retardada. La liberacin masiva del contenido de sus grnulos puede causar choque anafilctico, mortal si no es controlado.
Los eosinfilos poseen actividad fagoctica: se comen los agentes extraos. Sus grnulos tienen sustancias que degradan lo fagocitado, sobre todo las larvas de parsitos. Adems, inician y regulan las reacciones alrgicas. Los monocitos poseen actividad fagoctica bactericida. Ante estmulos qumicos pueden seguir a los neutrfilos. Pueden fijarse a tejido de bazo, hgado y pulmn, dando lugar a macrfagos tisulares que forman el sistema retculo-endotelial, encargado de remover material extrao circulante en sangre. Los linfocitos B constituyen la minora del pool linfocitario circulante (10%-20%). Maduros, pasan de la mdula sea a la sangre y se dirigen hacia los rganos linfticos perifricos para ubicarse en los folculos linfoides. Bajo estmulo antignico, se activan y proliferan formando el centro germinal en el interior del folculo linfoide. Pueden seguir un proceso de estimulacin hasta transformarse en inmunoblastos, y stos en clulas plasmticas secretoras de inmunoglobulinas. Pueden tambin
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GC-FR-012 Rev. 3 regresar al estado quiescente de pequeo linfocito B con memoria inmunolgica, para pasar a formar parte del manto o corona. Los linfocitos T forman una poblacin mayoritaria. En el adulto normal oscilan entre 65% y 75%, con variaciones segn la edad. Ejercen sus efectos mediante la liberacin de protenas solubles, citocinas, encargadas de la transmisin de seales a otras clulas, o bien mediante interacciones directas con otras clulas. 5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1
6. Metodologa de la sesin. 1. Mezclar la sangre durante 3 minutos. 2. Realizar un frotis sanguneo; poner una gota de sangre sobre un portaobjetos y con otro portaobjetos limpio, se deslizar la gota sin hacer presin, pero uniforme y dejar secar el frotis. 3. Se fija con metanol, sumergindolo y sacndolo rpidamente, despus se introducir en el colorante de eosina (rojo) por 15 segundos, se enjuaga y luego se introducir en el colorante azul de policromo por 15 segundos se enjuaga y se deja secar. 4. Observar en el microscopio bajo objetivos 10x y 40x. 5. 5. Identificar las caractersticas de las diferentes clulas con el objetivo de 100X . 6. Dibuje las clulas como parte de sus resultados y describa las caractersticas observadaslos resultados.
7. Bibliografa Ver referencias al final del manual
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2. Competencia a desarrollar en la sesin Comprender la importancia y la utilidad que tiene la cantidad clulas blancas y sus tendencias en los pacientes ante la presencia de agentes agresores o lesiones comprendiendo la relacin que existe con el mecanismo de defensa y la aparicin de la enfermedad. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Los sealados en el encuadre Cuestionario. Cules son los valores normales de leucocitos? Qu puede interpretar el mdico, cuando las personas presentan valores por muy por debajo del valor normal? Que puede interpretar el mdico cuando las personas presentan valores muy superiores con referencia del valor normal? Qu actividades fisiolgicas pueden alterar el recuento de leucocitos? Cul es el significado clnico de la formula leucocitaria? Anlisis del caso clnico y su discusin y conclusiones 4. Fundamento terico e informacin de apoyo. Los leucocitos (glbulos blancos) son clulas que circulan por la sangre con la funcin de combatir infecciones o cuerpos extraos. Son parte de las defensas inmunitarias del organismo, pero en ocasiones pueden atacar los tejidos normales del cuerpo. El hemograma es un estudio muy solicitado en los laboratorios y permite dar una visin general del estado de salud del paciente y refleja la capacidad para reaccionar frente a la enfermedad, se compone de dos series la serie roja y la serie blanca. La serie blanca es el recuento de leucocitos y le ofrece al mdico una idea indicativa de diferentes padecimientos y a travs de ella puede dar seguimiento al desarrollo de las enfermedades. Los leucocitos son muy activos metablicamente, millones de ellos son liberados a torrente sanguneo y algunos tienen duracin de horas mientras que otros pueden vivir das. La formula leucocitaria orienta ms que el recuento leucocitario debido a que existen dos grupos de leucocitos: los granulocitos (neutrfilos, basfilos y eosinfilos) y los agranulocitos (monocitos y
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GC-FR-012 Rev. 3 linfocitos). Cada uno de ellos tiene un significado que orienta al mdico para su diagnostico de enfermedad. Para el desarrollo de esta prctica usted debe de: Buscar el significado de cada una de las formas de los leucocitos segn su linaje y su interpretacin en los resultados de la lectura del diferencial. Buscar los valores normales de los eosinfilos, linfocitos, neutrfilos, basfilos y monocitos. 5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1.
6. Metodologa de la sesin. 1. Toma de muestra sangunea en tubo con EDTA. 2. Mezclar la sangre durante 5 minutos. 3. se realizara la cuantificacin leucocitaria en equipo automatizado del laboratorio 4. Realizar un frotis sanguneo. Con la tcnica realizada en la sesin anterior 5. Observar y contar los leucocitos en el microscopio bajo objetivo 40x 6. Contar los leucocitos hasta 100 con ayuda del contador 7. Realizara un anlisis del conteo electrnico determinando si el nmero es normal o anormal.
Cules son los valores normales del recuento leucocitario y el diferencial? Qu indica un valor elevado o disminuido en el recuento total? Qu indica un valor elevado o disminuido de cada una de las clulas de la diferencial? Anlisis de un caso clnico: Mujer de 87 aos con policitemia vera, Hipertensin arterial. Insuficiencia artica y mitral leves con funcin sistlica conservada. Insuficiencia cardiaca grado funcional II. Fibrilacin auricular. Diagnosticada por Hematologa en octubre de 1998 de policitemia vera en tratamiento con hidroxiurea con monocitosis y eosinofilia progresivas sin otras alteraciones hematolgicas. Ingreso en Medicina Interna en noviembre de 2002 por neumona adquirida en la comunidad en lbulo inferior izquierdo. Magnfica calidad de vida. No intervenciones quirrgicas. No alergias conocidas. Medicacin actual: digoxina, enalapril, furosemida, espironolactona, cido acetilsaliclico e hidroxiurea 500 mg. /da excepto dos das a la semana con 1gr.Acude a Urgencias el da 19.02.04 por aumento de su disnea habitual que se ha hecho de pequeos esfuerzos y fiebre de 38 C desde hace nueve das habiendo sido diagnosticada de infeccin urinaria sin respuesta a amoxicilina-clavulnico oral y tobramicina intramuscular. Niega otra sintomatologa.TA 140/75, FC
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GC-FR-012 Rev. 3 115 l.p.m., FR 25 r.p.m., T 38 C. Buen estado general. Funciones intelectuales conservadas. Taquipneica. Bien perfundida. Ingurgitacin yugular. Tonos cardacos arrtmicos a 115 l.p.m., no soplos ni extratonos. Crepitantes basales bilaterales. Abdomen normal. Edemas maleolares con fvea +. Hemograma: leucocitos 12.900/mm 3 (neutrfilos 65,7 %, linfocitos 5,9 %, monocitos 20,8 %, eosinfilos 7,6 %, basfilos 0 %), hemates 4.260.000/mm 3 , hemoglobina 14,10 gr/dL, hematocrito 42 %, VCM 99,30, HCM 33,10, CHCM 33,3, plaquetas 144.000/mm 3 , INR 1,53, TPTA normal, fibringeno 750,1 mg/dL, VSG 27 mm 1 hora. Frotis de sangre perifrica: leucocitosis leve, neutrfilos con rasgos dismrficos, monocitosis, macrotrombocitosis con rasgos dismrficos, resto sin inters. Bioqumica: glucosa 133 mg/dL, sodio 126 mmol/l, calcio 7,7 mg/dL, fsforo 2,2 mg/dL, protenas totales 6,2 gr/dL ( albmina 3,01 g/dL, globulina alfa-1 0,44 gr/dL, globulina alfa-2 0,44 g/dL, globulina beta 0,56 g/dL, globulina gamma 1,56 g/dL), triglicridos 156 mg/dL, GOT 44 U/L, GGT 63 U/L, LDH 1927 U/L, ferritina 299 ng/mL, resto normal. Protena C reactiva 4,26 mg/dL. Inmunoglobulinas normales. Anticuerpos antinucleares negativos. Serologa virus hepatitis B y C negativa. Rosa de Bengala a Brucella negativo. Serologa Coxiellaburnetti: IgM fase I positivo 1/48, IgG fase I positivo 1/1.024, IgG fase II negativo, IgM fase II positivo 1/24. Orina normal. Gasometra arterial respirando aire ambiente: pH 7,47, pO2 54,1 mmHg, pCO2 33,3 mmHg, bicarbonato 24,4 mmol/L, saturacin oxgeno 89,9%. Hemocultivos negativos. Urocultivo: 30.000 col. /mLCandidasp. Esputo (tres muestras): cultivo estndar, Ziehl y Lowenstein negativo. Orina (tres muestras): Ziehl y Lowenstein negativo. Mantoux 2 U negativo. A su ingreso se inici tratamiento con amoxicilina-clavulnico, digoxina, furosemida, espironolactona, enalapril, omeprazol y heparina de bajo peso molecular a dosis profilctica. La paciente permaneci febril de forma intermitente y con disnea progresiva. Radiografa de trax en decbito con tcnica porttil a los once das de su ingreso: cardiomegalia, elongacin y ateromatosis artica, redistribucin vascular, patrn intersticio-alveolar bilateral de predominio en campos inferiores, derrame pleural bilateral. Toracentesis izquierda: lquido amarillento claro con aspecto de trasudado, 1.500 hemates/mm 3 , 160 leucocitos/mm 3 con predominio de linfocitos, pH 7,41, glucosa 180 mg/dL, protenas totales 1,80 gr/dL, LDH 503 U/L, colesterol 19 mg/mL, triglicridos 23 mg/dL, ADA 10,17 U/L, CEA < 0.20, beta-2 microglobulina 0.7680 mg/dL, cultivo estndar negativo, Ziehl negativo, Lowenstein negativo, ausencia de clulas neoplsicas. La paciente persisti con disnea y taquipnea progresiva a pesar de aumento de dosis de diurticos, vasodilatadores, y FiO2. El da 4.03.04 al conocerse el resultado de la serologa a Coxiellaburnetti se inici tratamiento con doxiciclina oral 100 mg/12 horas. La paciente falleci 18 horas ms tarde. Lea cuidadosamente el caso y de su opinin, primero localice los valores de las clulas blancas e interpretar estos valores de la paciente comparando con los valores de referencias?
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GC-FR-012 Rev. 3 Identifique las clulas y ponga el nombre que les corresponde de acuerdo a su morfologa
2. Competencia a desarrollar en la sesin Comprender el dao tisular, traumas o invasin de mltiples microorganismos o sustancias a travs del proceso de fagocitosis in Vitro.
3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica. Anlisis del Caso Clnico 4. Fundamento terico e informacin de apoyo. El sistema fagoctico mononuclear cumple dos funciones principales, cada una llevada a cabo por un tipo de clula procedente de mdula sea: 1. Macrfagos profesionales: eliminan partculas antignicas. 2. Clulas presentadoras de antgeno (CPA): ingieren, procesan y presentan los antgenos a los linfocitos T. Pertenecen al sistema fagoctico mononuclear tanto los monocitos (macrfagos) como los granulocitos. Los monocitos estn presentes en la sangre. Presentan un tamao de 10-18 m de dimetro. Su ncleo tiene generalmente forma de herradura y suele contener grnulos azurfilos. Poseen membranas irregulares y muchos lisosomas con peroxidasa e hidrolasas cidas, importantes en la destruccin intracelular de los microorganismos. Una vez extravasados son llamados macrfagos. Los granulocitos se dividen a su vez en neutrfilos, basfilos y eosinfilos, en funcin a la coloracin cida o bsica de sus grnulos citoplasmticos. Los neutrfilos (polimorfonucleares) son los ms numerosos. Poseen un ncleo lobulado de forma irregular (polimrfico). Intervienen en la defensa, destruccin de clulas viejas y regeneracin tisular. Liberan interleucina 1, un mensajero inmunitario. Realizan un proceso de heterofagia que les causa la muerte. La fagocitosis constituye una de las principales defensas del organismo contra infecciones producidas por bacterias y hongos. El proceso comprende pasos secuenciales: quimiotaxis,
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GC-FR-012 Rev. 3 adherencia del antgeno a la superficie de los fagocitos, captacin/ingestin (fagocitosis) y muerte intracelular mediada por mecanismos oxgeno-dependientes o independientes. Los fagocitos poseen receptores para el componente C3b del sistema del complemento, as como para la regin constante de las inmunoglobulinas. Esto permite que los microorganismos opsonizados puedan adherirse, facilitando la fagocitosis. Sin embargo muchas bacterias patgenas son destruidas con rapidez una vez ingeridas por las clulas polimorfonucleares o macrfagos. Algunos patgenos evaden la fagocitosis o los mecanismos microbicidas de los leucocitos al absorber componentes normales del husped sobre su superficie.
5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1. 6. Metodologa de la sesin. 1) Hacer un frotis sanguneo como en las prcticas anteriores, de la muestra que ser el control negativo 2) Encender los mecheros de alcohol y esterilizar el asa tomar un poco de la cepa Staphylococcusaureusal tubo que contiene la sangre, agite el tubo suavemente para que se distribuyan las bacterias homogneamente. 3) Incubar el tubo preparado en bao Mara por 30 minutos. 4) Terminada la incubacin realice un frotis sanguneo de la muestra que ser el control positivo. 5) Teir los frotis con la tcnica de Wright. 6) Poner una gota de aceite de inmersin a los frotis y distribuirlo homogneamente. 7) Revisar los frotis en el microscopio bajo el objetivo de 100x.y buscar clulas que hayan fagocitado
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GC-FR-012 Rev. 3
7. Bibliografa
Ver referencial al final del manual.
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GC-FR-012 Rev. 3 1. Sesin No. 5: Complemento
2. Competencia a desarrollar en la sesin Comprender la importancia del sistema de complemento en el diagnstico clnico de la enfermedad para interpretar la interaccin de las protenasa travs de reacciones que darn una idea al clnico del estado inmunolgico de su paciente. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prcticaanlisis del caso clnico. 4. Fundamento terico e informacin de apoyo. El sistema del complemento es un sistema de alrededor de 30 protenas sricas que interaccionan, formando una cascada enzimtica que amplifica la respuesta humoral.
El CH50 y CH100 son pruebas de la actividad del sistema del complemento, para determinar el desarrollo de una enfermedad, para monitorear la gravedad de la misma o para establecer la eficacia de un tratamiento. Por ejemplo, pacientes con lupus eritematoso activo pueden tener niveles de C3b y C4 bajos.
La cascada del complemento suele iniciarse por complejos antgeno-anticuerpo. El producto final es la unidad de ataque a membrana, que crea agujeros en las membranas bacterianas, induciendo su destruccin.
Existen productos secundarios de la cascada del complemento que atraen ciertos leucocitos y aumentan su capacidad para ingerir y destruir bacterias. Algunas bacterias no requieren la presencia de anticuerpos especficos para activar el sistema de complemento.
El sistema de complemento esta constituido por molculas implicadas principalmente en la defensa frente a infecciones y clulas tumorales. Parte de los factores del complemento activan la inflamacin y la fagocitosis y actan produciendo la lisis de las clulas y microorganismo. El complemento es especialmente importante frente a grmenes gram Negativos que pueden ser directamente lisados por anticuerpos y complemento.
El sistema se induce a travs de tres vas: CLSICA, ALTERNATIVA Y LECTINA en forma diferente y convergen a nivel C3, el cual activa el extremo final de la cascada, promoviendo la inflamacin, eliminacin de patgenos y facilitando la respuesta inmune.
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GC-FR-012 Rev. 3 5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1. 6. Metodologa de la sesin. 1. Seguir las instrucciones descritas en el estuche de reactivos para la determinacin del complemento C3 y C4. 2. Los resultados se deben extrapolarse con la curva patrn de estuche de reactivos para la determinacin de complemento C3 y C4. 3. Interpretacin de sus resultados para la comprensin del sistema de complemento
Descripcin de caso clnico: Lactante de un ao de edad, (fecha nacimiento 11/03/2004) sexo femenino, 2 hija de padres jvenes, primos hermanos (padre 31 aos, madre 24 aos, 1 hermana de 6 aos sana), residencia rural (Isla Marimelli - Sotom, X regin - Chile), consanguinidad alta, (ambos abuelos hermanos y ambas abuelas hermanas de madre) (Fig1)
Fig.1. rbol genealgico de la paciente estudiada
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GC-FR-012 Rev. 3 El embarazo curs con hipertensin arterial. Naci por cesrea a las 40 semanas. Lquido amnitico claro. RNT 40 semanas, 3.040 g/50 cm/34,5 cm, asfixia severa recuperada (Apgar 3-8, pH 7,08, BE -18 mEq/l, CK 2.683), 4 das de hospitalizacin en Unidad Neonatal y alta sin complicaciones.Es hospitalizada por 2 das a los 2 meses por Influenza A. Desarrollo psicomotor normal hasta los 8 meses edad. A los 8 meses (21/11/2004) ingresa por cuadro de 5 das de fiebre, coriza, conjuntivitis, rechazo alimentario y nuseas. Un da antes de su ingreso present polipnea, respiracin estertorosa y paresiabraquio-crural derecha. Al examen fsico febril (38,6 C), signos menngeos positivos, desviacin de la mirada a izquierda e hipertona. La exploracin de laboratorio inicial sugiri meningoencefalitis viral e infeccin urinaria por E. coli (Tabla 1).
Se trat con Aciclovir 180 mg cada 8 h ev por 9 das, anticonvulsivantes a permanencia y Cefuroximoev (100 mg/kg) por 10 das. Evolucion febril, con hipertona y compromiso de conciencia. Se repiti la puncin lumbar (3/12/2004) = (260 leucocitos/mm 3 25% PMN - 75% M, glucosa 58 mg/dL, protenas 1,5 g/L, cultivo negativo) que se interpreta como meningitis bacteriana parcialmente tratada, por lo que recibe Ceftriaxona 100 mg/kg/da fraccionado c/12 h durante 10 das. Evolucion hacia la mejora, cediendo la fiebre y el compromiso neurolgico. Alta el 13 de diciembre de 2004, sin fiebre, sonre, se sienta y se pone de pie con apoyo.
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GC-FR-012 Rev. 3 Reingres a las 48 h por distona facial y de extremidades superiores, incapacidad de recibir alimentos por va oral, febril (39 C) y sin conexin con el medio. Su cuadro clnico se interpret como vasculitis postinfecciosa, recibiendo metilprednisolonaev 30 mg/kg/da por 6 das.
Evolucion con fiebre persistente (hasta 40 C), con movimientos coreicos iterativos e hipersecrecin bronquial, presentando en dos oportunidades un cuadro de apnea y desaturacin de O 2 que motivaron el uso de ventilacin mecnica por 24 h. Exmenes microbiolgicos, hematolgicos e imagenolgicos revelan infecciones bacterianas sucesivas, en tratamiento (Tablas 2, 3, 4 y 5) por lo que se plantea el diagnstico de inmunodeficiencia congnita, constatndose deficiencia de C3, C4 y ausencia de CH50 en la paciente y valores bajos en ambos padres (Tablas 6 y 7).
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Su ltimo cuadro infeccioso bacteriano correspondi a septicemia por Staphylococcusaureusmeticilinoresistente, con osteomielitis de tibia izquierda (Tabla 8).
El 16 de Marzo se administr inmunoglobulina 4 g ev y 300.000 U de penicilina benzatina, manteniendo cotrimoxazol 30 mg cada 12 h oral y rifampicina 125 mg cada 12 h oral con los que se da de alta afebril, con secuela neurolgica severa (corea persistente, desconexin con el medio, alimentacin por sonda nasogstrica e hipertona). Discusin La incidencia de las inmunodeficiencias primarias o congnitas es de aproximadamente 1 x 10.000 RN vivos, excluida la deficiencia selectiva asintomtica de IgA 1 .
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GC-FR-012 Rev. 3 En forma general se clasifican en deficiencia de clulas T (inmunodeficiencia celular), deficiencia de clulas B (inmunodeficiencia humoral), deficiencia de fagocitos, deficiencia de complemento y miscelneas 2 . El 2% de las inmunodeficiencias primarias (IDP), corresponde a deficiencia de complemento 3 . Se estima que la prevalencia de la deficiencia completa de un factor de complemento heredada, es de 0,03% de la poblacin general, excluyendo la deficiencia de MBL (mannan-bindinglectina), que podra estar presente en la forma homocigota hasta en un 3% de la poblacin. El sistema de Complemento es un importante mecanismo de defensa innata, interacta con anticuerpos y es un importante mediador humoral de inflamacin. Actualmente se define como un sistema multimolecular compuesto por ms de 20 protenas, 7 sricas, 5 reguladoras de membrana, una protena reguladora srica, y 8 receptores de membrana celular que se unen a los fragmentos de Complemento 3,4 (Tabla 9).
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GC-FR-012 Rev. 3 Acta como una reaccin enzimtica en cascada, en que la protelisis limitada de un componente, activa al siguiente, produciendo un fenmeno de amplificacin 4 . El sistema se induce a travs de 3 vas: clsica, alternativa y de lectina, en forma diferente y convergen a nivel de C3, el cual activa el extremo final de la cascada, promoviendo la inflamacin, eliminacin de patgenos y facilitando la respuesta inmune 5 (Figura 2).
Figura 1. Sistema del complemento (ver texto). La mayora de los componentes del complemento se heredan en un modelo autosmico codominante 5 . El gen para el C3 se ha localizado en el cromosoma 19 6 . Los defectos de genes varan desde cambios en un solo nucletido que podra producir una protena disfuncional, hasta la deleccin completa, en que no se produce protena 5 . Los padres de los pacientes con deficiencia completa de un componente del Complemento, generalmente tienen concentraciones de ese componente inferiores al promedio del rango normal 5 , como se evidenci en el caso presentado, lo que indica una condicin de heterocigoto. Se han descrito deficiencias completas de la mayora de los componentes conocidos de Complemento 7 . La deficiencia hereditaria de C3 es raramente encontrada en humanos (aproximadamente 15 casos
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GC-FR-012 Rev. 3 hasta 1990) 6 . La ltima publicacin (2003) corresponde a un nio tunecino de 6 aos 8 . La deficiencia de C3, se transmite como un modelo autosmico recesivo 3 . C3 es la principal opsonina y la molcula central ms importante del sistema del Complemento. Es activada tanto por la va clsica como de lectina y por la va alternativa, y a su vez los productos de su activacin median la opsonizacin, actividad anafilctica y la activacin de los compuestos efectores finales del Complemento. El dficit de C3 se manifiesta por infecciones piognicas severas, causadas principalmente por organismos capsulados, que comienzan poco despus del nacimiento, con una presentacin clnica y una evolucin similar a la observada en hipogamaglobulinemia 5,6 , hechos que caracterizaron la evolucin clnica de la paciente presentada. De todos los pacientes notificados 79% tiene al menos un episodio de infeccin bacteriana, especialmente sinopulmonar, bacteremia o meningitis 6 . Desde el punto de vista de laboratorio puede distinguirse la deficiencia hereditaria de la adquirida, por el nivel de CH50, historia familiar y nivel de factor de complemento 5 , lo que tambin es coherente con los resultados encontrados en este caso (Tabla 10).
La presencia de infecciones bacterianas severas recurrentes -incluso durante el tratamiento antibitico-, con clnica de fiebre en aguja, leucocitosis elevada, desviacin a izquierda y etiologa confirmada desde el punto de vista microbiolgico, hizo sospechar la posibilidad de una inmunodeficiencia primaria de tipo humoral, lo que se descart por el recuento normal de linfocitos e inmunoglobulinas normales. Los antecedentes familiares de alta consanguinidad, sumado a un nivel inicial bajo de C3 y C4, hicieron plantear el diagnstico de deficiencia de complemento, la que se confirma con la ausencia de CH50 y con el estudio de ambos padres cuyos niveles an estando dentro de valores normales lmite, son bajos y concordantes con lo previamente descrito.
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GC-FR-012 Rev. 3 En las publicaciones a las que tuvimos acceso, no se encontr casos con deficiencia de factor C3 y C4 de complemento simultneamente. En Chile existen pocos casos comunicados al registro de inmunodeficiencia y segn nuestra revisin bibliogrfica este sera el primer caso publicado en nuestro pas. Agradecimiento Los autores agradecen la colaboracin de la Dra. Patricia Daz A., ICBM, Facultad de Medicina, Universidad de Chile, en la discusin y revisin de este artculo.
7. Bibliografa 1.- ITURRY, YAMAMOTO G R, PORTINHO C P. Sistema complemento: Ativacao, regulacao e deficiencias congnitas e adquiridas. RevAssocMedBras 2001; 47: 41-51. [ Links ] 2.- http://www.microbio.uab.edu/medmicro/Lectures/atkinson2.pdf (Consultada 11/04/2006) [ Links ] 3.- http://www.emedicine.com/med/topic1119.htm (Consultada 11/04/2006) [ Links ] 4.- WEN L, ATKINSON J P. Clinical and laboratory evaluation of complement deficiency. JACI 2004; 113: 585-93. [ Links ] 5.- BEHRMAN R. Disorders of the complement system. En: Nelson. Textbook of Pediatrics, Philadelphia 2000; 16: 628-34. [ Links ] 6.- http://www-micro.msb.le.ac.uk/MBChB/Merralls/Deficiencies.htmL (Consultada 11/04/2006) [ Links ] 7.- http://www.jcaai.org/param/Immune/Comp.HTM (Consultada 11/04/2006) [ Links ] 8.- SASSI F, BEJOUI M, AYED K. A congenital deficiency of the C3 fraction of complement. A familialstudy. TunisMed 2003; 81: 354-8. [ Links ]
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2. Competencia a desarrollar en la sesin Comprender y dar seguimiento a una respuesta inmunolgica idioptica, donde hay inflamacin sin foco de origen conocido para poder integrar los valores de este estudio como coadyuvante de un diagnstico. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica, analizar el caso clnico.
4. Fundamento terico e informacin de apoyo. La velocidad de sedimentacin globular (VSG) es la precipitacin de los eritrocitos en un tiempo determinado (1-2 horas), relacionada directamente con la tendencia de formar cmulos (pilas de monedas) y con la concentracin plasmtica de protenas (globulinas y fibringeno). La capacidad y velocidad depende de la atraccin de la superficie de los eritrocitos.
La VSG es una de dos pruebas para estimar y medir la inflamacin en el organismo. La otra prueba es la protena C reactiva (PCR). Los principales usos de la VSG son: 1. Detectar procesos inflamatorios o infecciosos. 2. Discriminar presencia de enfermedad. 3. Control de la evolucin de enfermedades crnicas o infecciosas. 4. Detectar procesos inflamatorios crnicos ocultos o tumores. 5. La VSG se ve afectada por el tamao de los eritrocitos, la concentracin, anisocitosis y poiquilocitosis. Valores de referencia Recin nacidos hasta 2 mm Lactantes hasta 10mm Escolares hasta 11mm
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GC-FR-012 Rev. 3 Hombres jvenes hasta 10mm Hombres adultos hasta 12mm Hombres mayores hasta 14mm Mujeres jvenes hasta 10mm Mujeres adultas hasta 19mm
5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1. 6. Metodologa de la sesin. 1. Rotular el tubo para la VSG. 2. Agregar 1 mL de sangre con una pipeta desechable. 3. Insertar con cuidado el tubo plstico con escala con presin, para que suba la sangre. 4. Depositar en una gradilla y registrar y tomar una la hora. 5. Al final de la hora tomar la lectura del tubo de sedimentacin (hasta donde se los eritrocitos formen una banda blanca y sea el lmite con el plasma). Descripcin de caso clnico: Se presenta el caso de una paciente de 40 aos de edad, raza blanca, de procedencia rural, portadora de una Granulomatosis de Wegener confirmada por estudio anatomopatolgico.Destacndose que puede considerarse un caso tpico de dicha enfermedad por presentarse de la forma que habitualmente se refiere en la literatura, con un comienzo que toma el segmento superior de vas respiratorias, expresado por rinorrea, secrecin sanguinolenta y sintomatologa general atribuible a una sinusitis. Posteriormente afect el pulmn, lo que motiv fuera intervenida quirrgicamente por la sospecha de absceso pulmonar. En su evolucin posterior pudo observarse un cuadro de vasculitis necrotizante en miembros inferiores, adems de focos supurativos ulcerados en la cavidad oral. Otro elemento a tener en cuenta fueron los episodios de artralgias con igera artritis en
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GC-FR-012 Rev. 3 varias articulaciones, queremos destacar que la Granulomatosis de Wegener no posee ningn dato analtico patognomnico pero si, algunos bastantes caractersticos, como son:Velocidad de sedimentacin globular bastante acelerada con una anemia de carcter crnico. En algunos casos se observa ligera leucocitosis que pudiera depender de los focos supurativos que tiene la enfermedad.No es infrecuente encontrar ttulos elevados de factor reumatoideo, e inmunocomplejos circulantes por encima de los valores normales, no as la presencia de anticuerpos antinucleares. Se puede presentar tambin una ligera hipergammanaglobulina a expensa de la IgA.Debemos destacar la buena evolucin clnica despus de instaurar tratamiento combinado con esteroides y citostticos (Ciclofosfamida) que le ha permitido una vida socialmente til hasta la fecha actual, cuando hace 4 aos del diagnstico.
7. Bibliografa Ver al final del manual
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2. Competencia a desarrollar en la sesin Conocer la etiologa molecular que puede ser la causa de inflamacin para poder entender el origen de la inflamacin o alteracin y deformacin de tejidos en algn caso clnico y poder establecer el seguimiento clnico adecuado. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica.Realizar una discusin y conclusin sobre posible diagnostico con los resultados obtenidos
4. Fundamento terico e informacin de apoyo. La protena C reactiva (PCR) es producida en el hgado durante la inflamacin, reacciona con el sistema del complemento, de ah su importancia biolgica. El factor reumatoide (FR) es un anticuerpo (Ac) reactivo contra la fraccin constante (Fc) de la inmunoglobulina G (IgG). Es producido por los linfocitos B y est compuesto por dos cadenas pesadas y dos cadenas ligeras, cada una de ellas con una regin constante y una regin variable, tal como las inmunoglobulinas. Se piensa que los linfocitos B-FR presentan los antgenos de los inmunocomplejos a los linfocitos T-Helper especfico. El FR circula por la sangre y, en caso de patologa, se une de manera anormal a inmunoglobulinas propias (IgG), producidas por linfocitos anmalos de las articulaciones. En este caso se habla de artritis reumatoide. La estreptolisina O es una citolisina oxgeno-lbil que provoca una beta hemlisis alrededor de las colonias de Streptococcuspyogenes del grupo A en placas de agar sangre. Es una de las tantas exotoxinas producidas por la bacteria. Una persona afectada por el estreptococo desarrolla anticuerpos frente a la estreptolisina O: la antiestreptolisina O (ASLO).
5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1. 6. Metodologa de la sesin.
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GC-FR-012 Rev. 3 Adems del descrito en los estuches para la determinacin de las estreptolisinas, PCR y FR: Revisar la tcnica del equipo 1) Rotular en una laminilla un control negativo, un positivo y el o los problemas. 2) Agregar una gota de suero problema o una por cada problema. 3) Adicionar una gota de reactivo de partculas de ltex de protena C reactiva a cada muestra a al control negativo y positivo. 4) Mezclar con un aplicador de madera y por separado c/u de las muestra incluyendo el control. 5) Mezclar a 100 rpm en el rotator durante 2 minutos. 6) Observar bajo una lmpara. 7) Comparar el problema con los controles. 8) si las pruebas resultan positivas hay que realizar la tcnica de cuantificacin leyendo el instructivo de las pruebas Nota: Las pruebas no deben tomarse como pruebas de diagnostico nicas.
Anlisis y la Descripcin de Caso clnico: Paciente de 48 aos. Artritis reumatoide deformante desde hace catorce aos. Tendencia a enquistar; presenta quistes en ovarios, codos y articulaciones de manos y pies. Hace cinco aos se le trat con homeopata y psicoterapia. Por prescripcin facultativa y para paliar dolores se le aconsej la aplicacin de tcnicas de acupuntura y la aplicacin de la diatermia TRATAMIENTO: Sesin: una vez por semana en manos y muecas. Se present con toda la mano engarrotada y con un dedo que no poda articular. A los cinco meses presenta la mano prcticamente recuperada en su totalidad. Aplicacin: primero se aplic la placa en la mueca; placa activa enrollada en la mueca y placa pasiva por debajo del codo. La duracin de la sesin sobre unos veinte minutos. Segundo se aplica sobre las articulaciones de los dedos.
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GC-FR-012 Rev. 3 Como caracterstica curiosa se puede destacar que le aliviaba mucho el dolor el hecho de aplicar calor en el centro de la mano mediante el electrodo pequeo, lo que le permita el poder articular los dedos. Se aplicaba el electrodo de esta manera hasta que senta que le quemaba el centro de la mano, posteriormente se volva a repetir el proceso durante dos veces ms. Tambin se recomienda el aplicar el electrodo unos cinco minutos en cada dedo. La aplicacin en el codo aliviaba mucho el dolor causado por el ndulo. Tener en cuenta la NO aplicacin de la diatermia en las zonas en la que se presente inflamacin para evitar que aumente. Como resumen indica que esta enfermedad no se cura, pero s se pueden mitigar los dolores mediante la aplicacin de la diatermia, ya que con ocho o diez sesiones diarias seguidas y otras diez en das alternos se consigue mucha mejora. Se recomienda el tratamiento acompaado por la acupuntura y homeopata. Lo ms destacable es que mediante la incorporacin de la diatermia en el tratamiento que se vena aplicando se consigui la paralizacin de aparicin de nuevos quistes, as como, la mitigacin del dolor. Anlisis Discusin por equipo del caso clnico. 9) Responda las siguientes preguntas. 1. Qu es la artritis reumatoide y que relacin guarda con la PCR? 2. Explique la relacin existente entre la PCR y el corazn. 3. Cul es la base de la prueba de antiestreptolisina y para qu sirve sta? 4. Qu es la artritis reumatoide y que relacin guarda con la PCR? 5. Explique la relacin existente entre la PCR y el corazn. 6. Cul es la base de la prueba de antiestreptolisina y para qu sirve sta?
7. Bibliografa Ver referencial al final del manual
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2. Competencia a desarrollar en la sesin Conocer la etiologa molecular que puede ser la causa de la formacin de anticuerpos especficos de algunas enfermedades de origen autoinmune y a travs de esta pruebas poder iniciar el diagnostico para para el seguimiento clnico adecuado. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica. Anlisis del caso clnico 4. Fundamento terico e informacin de apoyo. La enfermedad conocida como lupus eritematoso se considera una enfermedad compleja, las personas que la presentan, presentan una gran variedad de sntomas, siendo en algunos casos letal, segn las estadsticas son las mujeres quienes presentan mayor predisposicin a presentarla Se puede presentar en edades de los 15 a 40 aos durante los picos de fertilidad, por lo que se considera un factor clave en la presentacin de esta enfermedad. Se cree que algunos genes estn involucrados en el desarrollo de lupus , los cuales se localizan en los cromosomas 1,4 y 6. Esta enfermedad afecta al tejido conjuntivo que se caracteriza por la afeccin de la piel, articulaciones, rin, sistema nervioso central, vasos y huesos entre otros. La clasificacin de la enfermedad se clasifica en una forma puramente cutnea, el lupus eritematoso discoide, lupus neonatal, lupus eritematoso cutneo subagudo y el lupus eritematoso sistmico 5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1. 6. Metodologa de la sesin. Adems del descrito en los estuches para la determinacin de las clulas LE: Revisar la tcnica del equipo para realizar la prctica, principalmente seguir las instrucciones de su profesor. 1) Rotular en una laminilla un control negativo, un positivo y el o los problemas. 2) Agregar una gota de suero problema o una por cada problema.
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GC-FR-012 Rev. 3 3) Adicionar una gota de reactivo de partculas de ltex a cada muestra a al control negativo y positivo. 4) Mezclar con un aplicador de madera y por separado c/u de las muestra incluyendo el control. 5) Mezclar a 100 rpm en el rotator durante 2 minutos. 6) Observar bajo una lmpara. 7) Comparar el problema con los controles. 8) si las pruebas resultan positivas hay que realizar la tcnica de cuantificacin leyendo el instructivo de las pruebas Nota: Las pruebas no deben tomarse como pruebas de diagnostico nicas.
Anlisis de la Descripcin del Caso clnico: Adolescente mujer de 17 aos de edad que consulta por presentar desde hace varios meses fotosensibilidad, lesiones eritematopapulosas en dedos de las manos, acrocianosis y fenmeno de Raynaud en ambas manos con la exposicin al fro. Aftas bucales recidivantes. Sensacin de fatiga y malestar. No refiere fiebre, tos ni disuria. Hbito intestinal normal. Antecedentes personales Embarazo normal. Parto a trmino, eutocico. Peso al nacer: 3.100 gr. Buena gananciaponderoestatural. Desarrollo psicomotor normal. Calendario vacunalcompleto.Varicela a los 9 aos de edad. Menarquia a los 13 aos. No dismenorrea. Menstruaciones6/30. Antecedentes familiares Segundo hijo de padres sanos. Abuela rama materna diabetes mellitus tipo II. Abuelorama paterna hipertensin arterial. Exploracin fsica Peso 64.6 kg (Pc 90-97). Talla 172 cm (Pc 97). TA 110/60 mm Hg. Buen estadogeneral. Palidez cutnea. Rash malar en alas de mariposa. Lesiones eritematosas deaspecto vascultico en dedos de las ambas manos lupus pernio. Acrocianosis. Aparatolocomotor con movilidad conservada, sin signos de artritis. No adenopatas latero cervicales, axilares ni inguinales. Auscultacin cardiopulmonar normal. Abdomen blando y depresible. No hepato ni esplenomegalia. No se palpan
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GC-FR-012 Rev. 3 masas patolgicas. No edemas en miembros inferiores. Desarrollo puberal estadio M5 y P5 de Tanner.Genitales externos femeninos normales. Resto de la exploracin normal. Exmenes complementarios Hemates: 3.740.000/mm3 Hb.: 11.7 g/100 mL Hto.: 33%. VCM 85 u3. HCM 31.7 pg. CHCM 37.1%. Leucocitos: 3.700/mm3. Frmula leucocitaria: N 68%, L 26%, M 5%, E 1%. Plaquetas: 170.000/mm3. V.S.G.: 85 mm/1 hora. Perfil bioqumico, pruebas de funcin heptica e iones: normal. Creatinina plasmtica: 0.7 mg/dL. Protenas totales: 7.2 g/dL. Albmina: 4.4 g/dL. Gammaglobulina: 24%. Cociente A/G: 1.6 g/dL. IgG: 1456 mg/dL, IgA: 115 mg/dL, IgM: 129 mg/dL, IgE: 1.5 mg/dL. Hierro: 26 g/dL. Capacidad fijacin libre: 234 g/dL. Ferritina: 40 ng/mL. Test de Ltex: negativo. VDRL: negativo. TSH basal: 1.39 U/mL. Fraccin C3 del complemento: 62 mg/dL. Fraccin C4 del complemento: 8 mg/dL. Anticuerpos Antinucleares (ANA): positivos, patrn homogneo y moteado, ttulo 1/640, con:
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GC-FR-012 Rev. 3 Tras valoracin conjunta con el Servicio de Reumatologa del HUC se inicia tratamientocon antipaldicos Cloroquina 250 mg/da y se recomienda evitar la exposicinal sol. A los 6 meses presenta junto con el rash malar, aftas bucales y lupus pernio, nduloreumatoideoyuxtaarticular en interfalngica proximal derecha, artritisbilateral en intefalngicas proximales de ambas manos y alopecia difusa. La analticapresenta como datos destacables: leucopenia de 3.500/mm3, fraccin C4 del complementoen 9 mg/dL, ANA positivo patrn moteado, ttulo de 1/5120, proteinuria de1.110 mg/24 horas y un Recuento de Addis 3 horas, con: Cilindros: 0, Leucocitos:12.300/min. y Hemates: 112.800/min. Se propone su ingreso hospitalario para realizar biopsia renal, que es efectuada por el Servicio de Nefrologa del HUC sin complicaciones. El estudio histopatolgico mostr varios glomrulos de rea medular sin alteraciones. Se mantiene el tratamiento con Cloroquina, al que se asocia prednisona a dosis de 45 mg/da y profilaxis de osteoporosis con carbonato de calcio 1.000 mg/da y calcifediol 300 mg/da. La evolucin en los meses siguientes fue favorable con desaparicin de la artritis, disminucin en la intensidad y frecuencia de los brotes de manifestaciones cutneas, normalizacin de la fraccin C4 del complemento y proteinuria negativa. Discusin El Lupus Eritematoso Sistmico (LES) es una conectivopata de causa desconocida producida por el depsito de mltiples autoanticuerpos e inmunocomplejos en diversos rganos. Aunque no es una enfermedad muy frecuente en la prctica peditrica, aumenta a partir de los 10 aos de vida, especialmente en mujeres, alcanzando entrelos 10 a 20 aos una incidencia de 13 por 100.000. Se cree que las formas leves son ms frecuentes, pero no se disponen de cifras exactas (1,2). Los sntomas iniciales ms frecuentes en nios y adolescentes son: fatiga, malestar y manifestaciones cutneas. Tambin son comunes la artritis o artralgias, fiebre, anomalas hematolgicas (anemia hemoltica, leucopenia o trombocitopenia) y nefritis (1-3). La demostracin de anticuerpos antinucleares se considera la mejor prueba para el diagnstico de este proceso. De los diferentes tipos de anticuerpos antinucleares, los anticuerpos anti-DNA son los ms especficos del LES puesto que no se presentan en otras conectivopatas Criterios de la American College of Rheumatology para el diagnstico de LES El LES se caracteriza por la gran diversidad de sus manifestaciones clnicas. Por ello su diagnstico solo puede establecerse en base a la presencia de unos determinados hallazgos clnicos y analticos considerados caractersticos de esta enfermedad. Un grupo de expertos del American College of Rheumatology ha publicado 11 criterios para el diagnstico de LES (5, 6), que son:
1. Eritema malar.
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GC-FR-012 Rev. 3 2. Nefritis con proteinuria o cilindros 3. Eritema discoide 4. Erupcin fotosensible en la piel 5. lceras en boca o vas nasales 6. leucopenia o trombocitopenia, 7. serositis 8. trastorno neurolgico en forma de convulsioneso psicosis 9. artritis 10. ANA positivo.
Otros datos de laboratorio que demuestran trastorno inmunolgico, como: positividad de anticuerpos anti-DNA, o anticuerpos frente al antgeno nuclearSm (anti-Sm) o fenmeno LE positivo, o resultado falso positivo en serologalutica. Basta la presencia de cuatro de estos criterios para establecer el diagnstico A) Conteste las siguientes preguntas. 1Por qu se considera el Lupus una enfermedad inmunolgica? 2. Que son los anticuerpos antinucleares y cul es la utilidad clnica 3. Cul es el fundamento de estas pruebas y que otra pruebas son importantes estn asociadas a la deteccin del lupus eritematoso?
7. Bibliografa Ver referencial al final del manual
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2. Competencia a desarrollar en la sesin Asociacin de los valores de la Inmunoglobulina E total para relacionarlo con algunas etiologas de origen principalmente ambiental y su influencia en la presentacin de ciertas patologas como el asma o las alergias. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica
4. Fundamento terico e informacin de apoyo. La IgE es el anticuerpo responsable de la mayora de las reacciones alrgicas. Slo representa el 0.002% de las inmunoglobulinas (0.3 mg/mL suero), pero es reactiva y eficaz. Su peso es de 200,000 D. Presenta un dominio adicional (C2) y es la mediadora de las rxs de hiper-sensibilidad inmediata (alergia), como fiebre del heno, asma extrnseco o choque anafilctico. Las IgE se unen a receptores especficos para Fc de IgE en la membrana de mastocitos tisulares y basfilos sanguneos. Cuando dos molculas de IgE unidas a sus receptores se entrecruzan con el alergeno especfico, se produce la degranulacin y la liberacin extracelular de histamina y citocinas, as como la sntesis de novo de eicosanoides (prostaglandinas, tromboxanos y leucotrienos). Todo lo anterior produce los signos y sntomas de la alergia. La IgE tambin confiere proteccin local frente a patgenos grandes, como los helmintos. Si el parsito ha logrado atravesar mucosas e IgA, puede ser reconocido por IgE especficas, previamente unidas a receptores de mastocitos. Ello desencadena una reaccin de inflamacin aguda en que aminas vasoactivas como la histamina, y factores quimiotcticos, atraen polimorfonucleares y activan IgG, complemento y granulocitos. En especial, los eosinfilos reconocen al parsito cubierto por IgG, y colaboran en su destruccin. 5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1...
6. Metodologa de la sesin. El descrito en el instructivo de estuche de diagnostico para la determinacin de IgE y la utilizacin del espectrofotmetro.
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GC-FR-012 Rev. 3 Anlisis de la Descripcin del Caso clnico: La paciente es producto del primer embarazo; gestacin de 8 meses por infeccin urinaria y ruptura prematura de membranas; parto vaginal intervenido con frceps. Sin anoxia perinatal, examen fsico neonatal normal; pes 2900 g, Talla de 52 cm.A los 20 das de vida consulta por primera vez debido a la presencia de una conjuntivitis bacteriana aguda severa y una dermatitis moderada con pstulas que comprometa el cuero cabelludo y el tronco. Desde el segundo mes de vida es evaluada en el Servicio de Inmunologa de la Facultad de Medicina de la Universidad de Antioquia, en Medelln - Colombia debido a infecciones recurrentes de: piel y anexos: dermatitis pruriginosa impetiginizada, forunculosis persistente, abscesos fros, infecciones micticas de piel y uas,piodermitis de cuero cabelludo, ojos: conjuntivitis bacteriana aguda, mucosas: candidiasis oral frecuente, aparato respiratorio superior e inferior: otitis media ,supurada, bronconeumona, mltiples neumonas supurativas desde los primeros meses de vida; estas infecciones fueron causadas por S. aureus, S. pneumoniae y H. influenzae.Los episodios infecciosos mejoraban con el tratamiento antibitico, pero presentaba, rpidamente recadas al descontinuar el tratamiento. A los dos aos sufri una neumona con empiema por S. aureus, despus de la cual desarroll bulas en el lbulo superior del pulmn derecho.A los cinco aos padece un absceso en el lbulo superior pulmonar derecho y como secuela desarrolla neumatoceles perennes.A los 8 aos se le practica una lobectoma superior derecha por un nuevo absceso pulmonar y un gran neumatocele persistente. A los 16 aos presenta un absceso del lbulo medio pulmonar derecho; en el cultivo del esputo y en muestras del lavado broncoalveolar crecen abundantes Aspergillus fumigatusy flora mixta con predominio de Proteusspp. Es llevada a ciruga para practicar reseccin de dicho lbulo; en el post-operatorio presenta un empiema derecho y fstula broncopleural de alto dbito. Recibi Itraconazol por 20 meses.A los 18 aos presenta abscesos mamarios recurrentes por Morganellamorganii y una bronconeumona por Proteusmirabilis.A los 19 aos padece de un cuadro de neumona basal derecha; el examen de esputo report abundante S. pneumoniae. Los estudios radiolgicos de trax mostraron adems de la neumona una gran cavidad en las dos terceras partes superiores del hemitrax derecho, con paredes gruesas que indicaban largo tiempo de evolucin. Al tercer da de hospitalizada present un neumotrax espontneo, con gran enfisema subcutneo, adems de neumomediastino, neumopericardio y una fstula broncopleural de alto dbito. Los exmenes del lquido eliminado por la sonda a trax fueron positivos para Proteusmirabilis. Es llevada ciruga para lavado y reseccin de la cavidad, toracoplastia y toracostoma abierta para hacer curaciones seriadas. La evolucin fue irregular en los primeros das debido a un estado nutricional deficiente (present albumina srica de 2,6 g/dL); el cultivo del material obtenido por un lavado bronco alveolar fue positivo para E. coli y Klebsiellaoxytoca.La evaluacin de la respuesta de anticuerpos a la vacuna de polisacridos de neumococo demostr una deficiencia en la produccin de anticuerpos especficos, por lo cual se inici tratamiento con Gamaglobulina endovenosa, 400 mg/Kg peso, cada 4 semanas. Adems, se instaur nutricin enteral por sonda nasogstrica, logrando mejora general. Se di alta luego de 30 das de hospitalizacin, continuando hasta ahora con una vida normalmente activa.
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ANTECEDENTES FAMILIARES Los padres de la paciente y dos hermanos (uno de cada sexo) no presentan antecedentes patolgicos. HIPOTESIS DIAGNOSTICA El desarrollo temprano de infecciones recurrentes severas de la piel y del aparato respiratorio superior e inferior sugiere la presencia de una inmunodeficiencia primaria por alteracin en la produccin de anticuerpos, una deficiencia severa del factor C3 del complemento o trastornos en la funcin de las clulas fagocticas. La asociacin de las anteriores infecciones con lesiones supurativas profundas y micosis de piel y mucosas, puede sugerir una Enfermedad Granulomatosa Crnica, una Deficiencia en la Adhesin Leucocitaria o un Sndrome de HiperIgE. La presencia de neumonas supurativas con desarrollo de neumatoceles perennes, asociado a una dermatitis crnica y lesiones micticasmucocutneas, sugirieron que esta paciente tena un Sndrome de HiperIgE. ESTUDIOS DE LABORATORIO Diferentes hemoleucogramas realizados durante los perodos libres de infeccin han mostrado unas cifras de leucocitos normales (excepto los eosinfilos que han estado elevados en algunas oportunidades, con cifras hasta de 1.000/m L). Durante los episodios infecciosos los exmenes han mostrado una respuesta de leucocitosis con neutrofilia de acuerdo a lo esperado. Una anemia leve a moderada ha estado asociada a las infecciones crnicas. La evaluacin inmunolgica di los siguientes resultado 1. Cifras normales de linfocitos CD3+, CD4+, CD8+ y CD19+, determinados por citometra de flujo 2. Electroforesis de protenas normal a los 17 aos de edad. Hipoalbuminemia (2,6 g/L) durante la ltima hospitalizacin a los 19 aos 3. Las cifras de IgA e IgM han sido normales en varias determinaciones realizadas; la IgG ha estado normal o elevada (hasta 2.725 mg/dL durante uno de los episodios infecciosos) 4. La dosificacin de las subclases de IgG en junio de 1996 arroj resultados normales. 5. Evaluacin por ELISA de la produccin de anticuerpos especficos contra polisacridos del neumococo: pre y 4 semas post-vacunacin muestra una
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GC-FR-012 Rev. 3 respuesta adecuada a cuatro serotipos y deficiente para otros cinco serotipos (respuesta parcial). 6. Quimiotaxis in vitro de los neutrfilos: medida a los 11 aos revel una disminucin altamente significativa frente al control normal (p 0.00001) 7. Reduccin del NBT en placa: 100% (normal) 8. Las pruebas de funcin renal y heptica han sido normales DIAGNOSTICO DEFINITIVO: Sndrome de Hiperinmunoglobulinemia E PREVENCIN Y TRATAMIENTO Desde los dos y medio aos recibe en forma profilctica Dicloxacilina 100 mg/K peso/da dividida en 4 dosis VO, y Vitamina C en altas dosis VO (2 a 4 gramos al da). La candidiasis oral ha mostrado una buena respuesta a la Nistatina VO y al Ketoconazol VO a dosis teraputicas. Recibi durante 20 meses 100 mg/cada 12 horas de Itraconazol VO, hasta la negativizacin del Aspergillus fumigatus en los cultivos de esputo. Desde los 19 aos de edad recibe cada 30 das 400 mg/k endovenosos de Gamaglobulina humana. COMENTARIO Esta paciente se caracteriza por la presentacin en forma temprana de una dermatitis crnica moderada muy pruriginosa, con infeccin recurrente de piel, mucosas y aparato respiratorio. Fue destacado el desarrollo de neumopatas supurativas y neumatoceles perennes que ocasionaron mltiples complicaciones y requirieron de intervencin quirrgica en tres oportunidades.Los niveles sricos elevados de IgE asociados con dermatitis leve a moderada, abscesos fros de la piel y neumopatas supurativas son hallazgos asociados caractersticamente al Sndrome de Hiperinmunoglobulinemia E (SHIE).Una vez realizado el diagnstico, el manejo de la paciente ha comprendido el desarrollo de un completo programa de atencin, con indicaciones precisas sobre higiene, nutricin, control estricto del medio ambiente y en especial evitar hbitos y contacto con individuos infectados o materiales que puedan incrementar la exposicin a bacterias pigenas y hongos.El manejo farmacolgico ha incluido el suministro permanente de antibiticos con buena sensibilidad para S. aureus; corrientemente se usa la Dicloxacilina, pero otros como el Trimetropn- sulfa han sido tambin prescritos. Adems recibe Vitamina C oral y diferentes preparaciones de cremas hidratantes para la piel. En los episodios infecciosos se realiza examen directo y cultivo de las secreciones, para determinar el germen causal y su sensibilidad a los antibiticos.Es de resaltar como esta paciente, a pesar de tener un adecuado control y recibir permanentemente antibitico- terapia profilctica, continua presentando infecciones severas y complicaciones graves. Esto
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GC-FR-012 Rev. 3 probablemente se debi a que el SHIE se encuentra asociado a una deficiencia en la produccin de anticuerpos especficos que debe buscarse precozmente. La confirmacin de una deficiencia concomitante de anticuerpos constituye una indicacin para el suministro de gammaglobulina venosa, previniendo el desarrollo de infecciones recurrentes y secuelas por grmenes diferentes al S. aureus. Es importante tener en mente la sospecha diagnstica de este sndrome en pacientes peditricos con dermatitis moderada crnica e infecciones supurativas recurrentes de piel y aparato respiratorio superior e inferior. Adems, es preciso iniciar la bsqueda de marcadores tempranos de la enfermedad que permitan la identificacin precoz de los pacientes, debido a que en el pronstico es determinante la edad del paciente al momento de la deteccin de la inmunodeficiencia. El inicio precoz del manejo profilctico y teraputico ha demostrado ser una forma eficaz de prevenir el desarrollo temprano de las complicaciones, especialmente las pulmonares, logrando algunos pacientes llegar a la edad adulto 7. Bibliografa Ver al final del manual
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GC-FR-012 Rev. 3 1. Sesin No. 10:Antgenos de reaccin febril: Efectos deseables de la inmunidad.
2. Competencia a desarrollar en la sesin Interpretacin de la cantidad de anticuerpos producidos cuando hay contacto con antgenos conocidos como bacterias y la utilidad de la cuantificacin de los mismos para interpretar las por infecciones que pueden producir fiebre. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica Anlisis y discusin de resultados en su reporte
4. Fundamento terico e informacin de apoyo. Infeccin Las enfermedades infecciosas son provocadas por microorganismos que invaden el organismo y se multiplican en l. La invasin inicia mediante su adherencia a las clulas del hospedero, implicando acoplamientos precisos similares a los de una llave con su cerradura. La permanencia en el punto de invasin o su extensin hacia otros puntos depende de factores como: produccin de enzimas, toxinas (venenos que se unen a molculas especficas de clulas diana a las cuales afectan), u otras sustancias. Para provocar la infeccin, los microorganismos deben multiplicarse una vez ocurrida la invasin. Pueden entonces suceder tres eventos: primero, que se multipliquen a tal grado que desborden las defensas inmunolgicas y puedan matar al hospedero; segundo, que se alcance un estado de equilibrio donde ni los microorganismos ni el enfermo ganen la batalla, desarrollndose una infeccin crnica; y tercero, que el propio organismo, sin intervencin mdica, consiga erradicar al microorganismo, restablecer la salud y conseguir inmunidad duradera. Muchos microorganismos resisten los mecanismos de defensa del organismo. Algunas bacterias producen enzimas que rompen los tejidos, permitiendo su rpida extensin. Otras pueden interferir con la produccin de anticuerpos o el desarrollo de linfocitos T. Otras ms poseen cpsulas (cubiertas externas) que impiden la fagocitosis. Mecanismos de defensa del organismo Durante la infeccin, la cantidad de leucocitos suele aumentar en pocas horas por la liberacin de clulas almacenadas en mdula sea. Aumentan primero los neutrfilos. Si la infeccin persiste, aumentan los monocitos. Los eosinfilos aumentan en reacciones alrgicas e infestaciones parasitarias, pero no en bacterianas. Ciertas infecciones, como la fiebre tifoidea, disminuyen el
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GC-FR-012 Rev. 3 nmero de leucocitos porque la mdula es incapaz de reponer clulas a la velocidad que el organismo las pierde. La fiebre, una temperatura corporal superior a 37.7C (termmetro en boca), es un mecanismo de defensa ante la infeccin. Sus causas incluyen infecciones, enfermedades autoinmunes y cncer (en especial leucemia o linfoma). Para establecer la causa, el mdico debe indagar acerca de sntomas, enfermedades presentes y pasadas, medicaciones, exposicin a infecciones, viajes recientes, etctera. Una fiebre que aparece cada dos o tres das es tpica del paludismo. Los anlisis de sangre pueden arrojar el nmero de leucocitos, la presencia de anticuerpos contra un microorganismo y hasta el microorganismo en s para un cultivo. En general, el aumento de los leucocitos indica infeccin. El incremento del anticuerpo especfico ayuda a identificar al invasor. 5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1.
6. Metodologa de la sesin. 1) Marcar 6 espacios en la placa de vidrio, adems de un control positivo y uno negativo. 2) Agregar 80 L de suero a cada uno de los espacios y colocar una gota de cada antgeno, poner una gota de control negativo y control positivo en espacios independientes y agregar tambin cualquier antgeno. 3) Mezclar de manera circular, en cada espacio con un aplicador de madera para cada antgeno. 4) Poner la placa en el rotator por un minuto, a baja velocidad. 5) Observe la placa y analice las reacciones, si no es claro, ponga la placa al microscopio y realice la interpretacin. 6) Las pruebas positivas debern montarse en la siguiente dilucin: 40, 20, 10,5 L.Solo las pruebas positivas se realizan hasta que sean negativas o la ultima dilucin Buscar el valor clnico para cada una de las diluciones y que significado de cada uno de los antgenos causantes de la reaccin febril.
Descripcin de un caso clnico. Se trata de una paciente de sexo femenino, de 23 aos de edad, la cual refiere que inicia su padecimiento hace dos meses (24 de marzo) al presentar debilidad, mialgias, escalofros y fiebre de hasta 40C con predominio por la tarde y noche; de 3 das de evolucin, tratada con neo-
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GC-FR-012 Rev. 3 melubrina, la cual no cedi; motivo por el cual la paciente decide acudir con mdico particular quien le manda practicar estudios de laboratorio (la paciente refiere que le fue tomada una muestra sangunea) diagnosticndole infeccin bacteriana, misma que ha sido tratada con tetraciclina I.M. cada 6 horas durante 8 das. La paciente refiere que su sintomatologa cedi lentamente, persistiendo solo la debilidad. Sin embargo comenta que hace 1 mes inicia con dolor en glteo izquierdo tipo opresor, sin irradiacin, con una calificacin de 10/10 (lo calific como el dolor ms fuerte que ha tenido), el cual aumenta con la actividad fsica y no permite la de ambulacin, disminuye su intensidad al estar acostada o sentada. La paciente coment que se aplic rnica tpica y minizan el dolor el cual disminuy un poco (mencion que solo se mejor en un 30%). Sin embargo, hace 3 das previos a su ingreso el dolor volvi a ser intenso como al inicio y esta vez se acompa de parestesia de pierna izquierda; persistiendo la debilidad generalizada (la paciente refiere que esta se acentu mas impidindole sus actividades diarias: solo quera estar acostada), motivo por el cual decide acudir al servicio mdico de urgencias del Hospital Civil Fray Antonio Alcalde. Se le realizaron exmenes laboratoriales encontrando; Reacciones Serolgicas Febriles efectuadas el 03/04/09: Paratfico A negativo Paratfico S negativo Tfico O positivo 1:80 Tfico H positivo 1:80 BrucelaArbotus Positivo 1:320 Proteus OX19 Positivo 1:80 Rosa de bengala positivo. De acuerdo con las caractersticas clnicas de la paciente y sus estudios de laboratorio. DX________________ Buscar los valores normales de cada reaccin febril y compararlos con los resultados de la sesin y darle su valor clnico. 7. Bibliografa Ver referencial al final del manual
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GC-FR-012 Rev. 3 1. Sesin No. 11:Anticuerpos VIH: Efectos deseables de la inmunidad.
2. Competencia a desarrollar en la sesin Realizacin de una prueba serolgica que nos ayude en encontrarla presencia de los anticuerpos que se producen en la infeccin viral ms importante para el Sistema inmunitario, y poder dar seguimientopara un diagnostico del Virus de la inmunodeficiencia Humana. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica. Anlisis del caso clnico, contestar el cuestionario. 4. Fundamento terico e informacin de apoyo. El virus de inmunodeficiencia humana (VIH) pertenece a los retrovirus, virus con ARN en lugar de ADN. Como todos los virus, el VIH slo puede replicarse dentro de una clula. Para ello utiliza una enzima llamada transcriptasa inversa, que convierte el ARN en ADN para poder incorporarlo al genoma de la clula hospedera. El VIH pertenece a un subgrupo de retrovirus llamado lentivirus (virus lentos). La infeccin por estos virus se caracteriza por un largo intervalo entre la exposicin y la manifestacin de la sintomatologa. El VIH causa un deterioro gradual de la funcin inmunolgica. Especficamente inhabilita y destruye la porcin CD4 de los linfocitos T-Helper, que normalmente indican a otras clulas del sistema inmunolgico su funcin especfica. Una persona no infectada tiene normalmente 800-1,200 linfocitos T-Helper CD4 por milmetro cbico. Durante la infeccin por VIH, el nmero decrece progresivamente. Cuando alcanzan niveles inferiores a 200 clulas por milmetro cbico, la persona se vuelve vulnerable a infecciones oportunistas y cnceres tpicos del SIDA (sndrome de inmunodeficiencia adquirida), etapa final de la infeccin por VIH.
5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1.
6. Metodologa de la sesin. 1) Incubar la bandeja de reaccin a 37C antes de empezar la prueba. 2) Tomar 50 L de suero.
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GC-FR-012 Rev. 3 3) Perforar la cubierta de papel aluminio de la fila A y agregar la muestra. 4) Desechar la punta. 5) Repetir el paso 1 con los controles positivo y negativo. 6) Insertar el peine (con el lado impreso hacia usted) en los pocillos de la fila A. 7) Retirar e insertar el peine varias veces para asegurar el mezclado. 8) Incubar por 10 minutos.
Primer lavado (fila B) 9) Insertar el peine en la fila B. 10) Agitar vigorosamente durante 10 segundos. 11) Incubar por 2 minutos. Unin del conjugado (fila C) 12) Insertar el peine en los pocillos de la fila C. 13) Mezclar vigorosamente por 10 segundos. 14) Incubar por 10 minutos. Segundo lavado (fila D) 15) Insertar el peine en los pocillos de la fila D. 16) Mezclar vigorosamente por 10 segundos. 17) Incubar por 2 minutos.
Deteccin de reaccin de color (fila E) 18) Insertar el peine en los pocillos de la fila E. 19) Agitar vigorosamente por 10 segundos.
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GC-FR-012 Rev. 3 20) Dejar reposar por 2 minutos.
Deteccin de la reaccin (fila F) 21) Insertar el peine en los pocillos de la fila F. 22) Mezclar vigorosamente por 10 segundos. 23) Incubar por 10 minutos con todo y peine.
Nota: Desechar las bandejas, puntas de micropipetas, papel absorbente y guantes en RPBI Caso Clnico: Hombre de 32 aos sin antecedentes previos, homosexual, inici un sndrome febril secundario a absceso subcutneo de muslo derecho y parrilla costal. Se realiz drenaje quirrgico y el cultivo demostr Staphylococcusaureus oxacilina sensible. Recibi terapia antibitica con cloxacilina, con buena respuesta clnica. Dentro de su estudio solicito la prueba de deteccin para VIH. Resultados: Prueba de Deteccin para VIH : Reactivo Contestar el cuestionario para conocer el seguimiento de este paciente. Buscar qu pruebas de diagnstico solicita el mdico para comprobar que un paciente tiene el VIH. Cul es la base del mtodo? Una vez que ya le confirmaron que el paciente tiene VIH, qu pruebas de diagnstico le indican el estado de salud de su paciente durante el seguimiento de la enfermedad? En que se basan los tratamientos para el control de la enfermedad? Cmo favorecen al sistema inmunolgico? 7. Bibliografa Ver al final del manual
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GC-FR-012 Rev. 3 1. Sesin No. 12: Antgenos de superficie Hepatitis B: Efectos deseables de la inmunidad.
2. Competencia a desarrollar en la sesin Comprender la infeccin viral del virus de la hepatitis B y la afectacin en otros rganos, para poder solicitar la prueba diagnstica cuando la sintomatologa de algn paciente se presente y corroborarla con la presencia de los anticuerpos. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica. Anlisis del caso clnico Discutir en equipo los resultados de las pruebas de laboratorio. a) responda las siguientes preguntas. 1. Cuntos tipos de Hepatitis existen? 2. Cul es la diferencia clnica entre cada uno de ellos? 3. Cmo se adquiere la hepatitis (medios de transmisin)? 4. Qu pruebas son importantes para determinar el tipo de hepatitis y el seguimiento del laboratorio? 5. Cules son las recomendaciones clnicas y de tratamiento para esta enfermedad?
4. Fundamento terico e informacin de apoyo. El virus de la hepatitis B (VHB) es un hepadnavirus (hepa: se replica en el hgado; dna: genoma de ADN). El VHB se transmite a travs de sangre o fluidos. Infecta principalmente al hgado, produciendo una inflamacin que destruye los hepatocitos y altera su funcin. Se calcula que es 100 veces ms infeccioso que el VIH. El VHB tiene al humano por nico hospedero, pero es extremadamente resistente a condiciones adversas fuera del organismo. Por ejemplo, puede sobrevivir durante meses sobre equipo mdico y dental contaminado. Durante la infeccin, en los hepatocitos se producen grandes cantidades de antgeno de superficie. Slo pequeas cantidades de l se combinan con las nucleocpsides para formar
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GC-FR-012 Rev. 3 partculas de virus completas. El resto es liberado al torrente sanguneo, sin contener ADN, y funciona como marcador de infeccin. As, el estado de infeccin por VHB se refleja por la presencia de diversos antgenos y anticuerpos en sangre: 6. HBsAg: Antgeno. Primer indicador de infeccin. Generalmente aparece 6 semanas despus de la exposicin y persiste durante 414 semanas. Est presente durante el periodo de incubacin, antes de la manifestacin clnica. 7. anti-HBs: Anticuerpo. Se desarrolla en respuesta al HBsAg. Es detectable 26 semanas despus de que el HBsAg ya no lo es. Su presencia indica recuperacin clnica y est asociado a inmunidad. 8. HBcAg: Antgeno. Asociado a la nucleocpside del VHB. No puede detectarse en sangre durante la hepatitis B, aguda o crnica. 9. anti-HBc: Anticuerpo. Se produce en respuesta al HBcAg. El anti-HBc (IgM) es el primero en aparecer tras la infeccin, seguido por el anti-HBc (IgG). Es detectable cuando aparece la manifestacin clnica y est presente en pacientes con hepatitis B crnica y aguda, y en aquellos que la han padecido. No neutraliza al VHB. 10. HBeAg: Antgeno. Aparece despus y desaparece antes que el HBsAg. Persiste 3-6 semanas. Indica replicacin viral activa en el hgado, y en niveles moderados a elevados indica que el paciente es muy contagioso. 11. anti-HBe: Anticuerpo. Se produce en respuesta al HBeAg. Representa una disminucin en la inefectividad del paciente. Permanece durante un ao o ms despus de la infeccin. 5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo1.
6. Metodologa de la sesin. 1) Incubar la bandeja de reaccin a 37C antes de empezar la prueba. 2) Tomar 75 L de suero. 3) Perforar la cubierta de papel aluminio de la fila A y agregar la muestra. 4) Desechar la punta.
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GC-FR-012 Rev. 3 5) Repetir el paso 1 con los controles positivo y negativo. 6) Insertar el peine (con el lado impreso hacia usted) en los pocillos de la fila A. 7) Retirar e insertar el peine varias veces para asegurar el mezclado. 8) Incubar por 120 minutos. Primer lavado (fila B) 9) Insertar el peine en la fila B. 10) Agitar vigorosamente durante 10 segundos. 11) Incubar por 2 minutos. Unin del antiHBsbiotinilado (fila C) 12) Insertar el peine en los pocillos de la fila C. 13) Mezclar vigorosamente por 10 segundos. 14) Incubar por 30 minutos. Unin de la estreptavidina/fosfatasa alcalina (fila D) 15) Insertar el peine en los pocillos de la fila D. 16) Mezclar vigorosamente por 10 segundos. 17) Incubar por 20 minutos. Deteccin de reaccin de color (fila E) 18) Insertar el peine en los pocillos de la fila E. 19) Agitar vigorosamente por 10 segundos. 20) Dejar reposar por 2 minutos. Deteccin de la reaccin (fila F) 21) Insertar el peine en los pocillos de la fila F. 22) Mezclar vigorosamente por 10 segundos.
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GC-FR-012 Rev. 3 23) Incubar por 10 minutos con todo y peine.
Descripcin de caso clnico: Varn de 33 aos no fumador con el nico antecedente personal de hipercolesterolemia a tratamiento con dieta. Realiza ejercicio fsico de forma regular y su trabajo es sedentario.En Marzo del 2004 acude a nuestra consulta relatando malestar general acompaado de cefalea, astenia y fiebre vespertina de hasta 39,2 C, acolia y coluria. En la exploracin fsica, se observan signos de ictericia, se percibe un aumento de los ruidos hidroareos abdominales. En la anamnesis el paciente nos refiere la ingesta de moluscos vivos (ostras) haca un par de semanas. Ante la sospecha de hepatitis se le recomienda reposo relativo y la realizacin de analtica de sangre y orina junto con una serologa de virus hepatotrpos y citomegalovirus. Los resultados revelan un aumento de aminotransferasas (GOT 626 U/L y GPT 2134 U/L) y gamma-glutamiltranspeptidasa (GGT 252 U/L), junto con patrn de colestasis [fosfatasa alcalina (532 U/L), LDH (422 mg/dL) e hiperbilirrubinemia total y directa (5.4 mg/dL y 6.1 mg/dL). El resto de parmetros estn dentro del rango de la normalidad. La serologa nos confirma un proceso agudo de hepatitis A (IgM positiva e IgG negativa), anticuerpos VHB positivo,VHC y CMV negativos.
7. Bibliografa Ver referencial al final del manual
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GC-FR-012 Rev. 3 Sesin No. 13: Helicobacter pylori deteccin de anticuerpos de memoria.
1. Competencia a desarrollar en la sesin. Comprender como un agente infeccioso al instalarse en un tejido especifico causa alteraciones inmunolgicas generando anticuerpos de infeccin aguda y despus de memoria para que le faciliten su diagnostico en su futura prctica clnica.
2. Mecanismos de evaluacin : Al realizar la prctica se obtendrn resultados los cuales le permitirn elaborar una conclusin sobre los mismo y sern revisados y evaluados por su profesor.
3. Fundamento Terico e informacin de apoyo Helicobacter pylori (HP) es una bacteria microaerfila, gramnegativa, de crecimiento lento y forma helicoidal con abundantes flagelos se ha detectado que este microorganismo se encuentra en casi todos los pacientes con inflamacin gstrica, lcera duodenal o gstrica. HP est implicado en ms del 90% de las lceras duodenales y hasta e 80% de las lceras gstricas. Afecta al 50 % de la poblacin mundial, ha sido identificado como el agente causal de la lcera pptica y se ha clasificado adems como carcingeno tipo I. El HP se adapta fuertemente al nicho ecolgico de la mucosa gstrica, debido a sus caractersticas que le permiten entrar dentro del moco, nadar, atacar a las clulas epiteliales, con una evasin de la respuesta inmune y como resultado, la colonizacin y transmisin persistentes. La supervivencia del germen en la mucosa gstrica se lleva a cabo por una serie de mecanismos que incluyen: adhesinas, que le impiden ser arrastrado por el peristaltismo, la actividad ciliar o el recambio epitelial; enzimas bacterianas, como la ureasa, que transforma la urea en amonio, produciendo un microclima alcalino que lo protege de la acidez gstrica, lipasay proteasa que propician la desintegracin del moco gstrico y la prdida de la hidrofobicidad de la mucosa disminuyendo la capacidad de las clulas mucosas para secretar moco,catalasa y superxido dismutasa como lnea de defensa ante polimorfonucleares activados.
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GC-FR-012 Rev. 3 El HP causa una continua inflamacin de la mucosa gstrica. La respuesta inflamatoria inicialmente consiste en el reclutamiento de neutrfilos, seguidos por linfocitos T y B, clulas plasmticas, y macrfagos. Tambin participan molculas del complejo mayor de histocompatibilidad que inducen la apoptosis de las clulas epiteliales. Los genes del HP inducen la formacin de IL-8 y otras quimiocinas que atraen a los neutrfilos, tambin est involucrado el factor de necrosis tumoral y la IL-1 y el interfern que incrementan la liberacin de gastrina y de este modo inducen la produccin de la secrecin cida, y adems el factor de necrosis tumoral produce una disminucin del nmero de clulas antrales. La infeccin aguda de los HP causa hipoclorhidria transitoria y se diagnostica raramente. La gastritis crnica se desarrollar en todas las personas persistentemente colonizadas, pero 80 a 90 por ciento nunca tendrn sntomas. El curso clnico posterior es altamente variable y depende de factores bacterianos y del husped. Los pacientes con una secrecin cida elevada son ms propensos de tener gastritis antral preferentemente, que los predispone a las lceras duodenales. Los pacientes con una secrecin cida disminuida, generalmente desarrollan gastritis en el cuerpo del estmago, que los predispone a la lcera gstrica y puede iniciar una secuencia de eventos que, en casos raros, conducen al carcinoma gstrico. La infeccin de los HP induce la formacin del tejido linfoide mucosa-asociado (MALT) en la mucosa gstrica. La relacin causal entre esta infeccin y la lcera gstrica o duodenal ha sido demostrada por la influencia favorable de la erradicacin del HP en la enfermedad ulcerosa.
5 .Equipo , instrumental , material e insumos
Ver anexo 1.
6. Metodologa de la sesin. Seguir las Instrucciones del Kit de Helicobacter pylori IgG Inmunocomb II y de su Instructor
7. Bibliografa Ver al final del manual
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GC-FR-012 Rev. 3 1. Sesin No. 14: Grupo sanguneo, Rh y pruebas cruzadas: Efectos indeseables de la Inmunidad.
2. Competencia a desarrollar en la sesin Aprender la Importancia del grupo sanguneo y Rh, y la importancia inmunolgica de la compatibilidad con otros tipos sanguneos y observar la reaccin Ag-Ac. Para comprender la utilidad de la transfusin sangunea en la prctica clnica. 3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica 4. Fundamento terico e informacin de apoyo. El descubrimiento del sistema ABO para el grupo sanguneo fue fundamental en la evolucin de la transfusin sangunea. Se supo entonces que si los eritrocitos de un grupo eran mezclados con el suero de otro grupo, seran aglutinados o hemolizados, aun cuando provinieran de individuos con un parentesco cercano. Tiempo despus, se descubri el factor Rh (Rhesus en honor al mono donde fue investigado). La inmunidad humoral comprende la produccin de inmunoglobulinas (anticuerpos) por linfocitos B, en respuesta a estmulos antignicos especficos. La inmunidad celular comprende la interaccin directa de los linfocitos T con las clulas extraas. Al entrar en contacto con eritrocitos de un grupo sanguneo distinto al propio, el sistema inmunolgico libera anticuerpos que se fijan a las clulas y las destruyen. En la prctica, la investigacin de anticuerpos irregulares abarca la deteccin de los anticuerpos mediante las pruebas cruzadas: el contacto directo de los hemates o el suero de un donador con los hemates o el suero de un receptor. 5. Equipo, Instrumental, Material e insumos.
Ver anexo 1.
6. Metodologa de la sesin. a) Grupo sanguneo y Rh 1) En caso de no contar con una placa marcada, trazar tres crculos en una placa de vidrio. 2) Colocar una gota de sangre en cada crculo.
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GC-FR-012 Rev. 3 3) Agregar a cada crculo una gota de reactivo distinto (Ac anti-A, anti-B, anti-D). 4) Mezclar el contenido de cada crculo con aplicadores de madera distintos. 5) Observar la presencia o ausencia de aglutinacin. Nota: La aglutinacin indica la presencia de antgeno para el anticuerpo agregado. b) Prueba cruzada mayor: Suero del receptor con eritrocitos del donador. 1) Preparar los eritrocitos del donador al 5% (1 gota de eritrocitos por 19 de solucin salina). 2) Incubar por 10 minutos. 3) En un tubo de ensayo, agregar los eritrocitos del donador y suero del receptor. 4) Mezclar, centrifugar y observar. 5) Agregar 1 gota de antiglobulina. 6) Mezclar, centrifugar y observar.
c) Prueba cruzada menor: Suero del donador con eritrocitos del receptor. 1) Preparar los eritrocitos del receptor al 5% (1 gota de eritrocitos por 19 de solucin salina). 2) Incubar por 10 minutos. 3) En un tubo de ensayo, agregar los eritrocitos del receptor y suero del donador. 4) Mezclar, centrifugar y observar. 5) Agregar 1 gota de antiglobulina. 6) Mezclar, centrifugar y observar.
d) Prueba autotestigo: Suero del receptor con eritrocitos del receptor. 1) Preparar los eritrocitos del receptor al 5% (1 gota de eritrocitos por 19 de solucin salina). 2) Incubar por 10 minutos.
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GC-FR-012 Rev. 3 3) En un tubo de ensayo, agregar los eritrocitos del receptor y suero del receptor. 4) Mezclar, centrifugar y observar. 5) Agregar 1 gota de antiglobulina. 6) Mezclar, centrifugar y observar.
Nota: La aglutinacin indica incompatibilidad de pruebas cruzadas. Descripcin clnica de una investigacin descriptiva transversal: La principal particularidad de la hemoterapia es que tanto el principio activo como el excipiente son de origen humano. Esta doble especificidad da cuenta de lo particular del producto proveniente de la sangre o de sus derivados, por lo cual el conjunto de riesgos es as ligado al origen humano. Cada transfusin de sangre o sus componentes es seguida de una reaccin transfusional, esta reaccin en la inmensa mayora de los casos es la esperada de acuerdo con su indicacin: correccin de la hipoxia, correccin de la coagulacin, entre otras, pero en un exiguo nmero (0,5- 3 %) el receptor puede experimentar un efecto adverso, frecuentemente inmediato y otros de tipo tardo. 1 Los riesgos de transfusin sangunea se pueden dividir en 2 grupos: inmunolgicos y no inmunolgicos. 1. Las complicaciones inmunolgicas pueden provenir de la incompatibilidad de eritrocitos, leucocitos o plaquetas, o de reacciones alrgicas a los componentes del plasma. 2. Las complicaciones no inmunolgicas comprenden la transmisin de agentes infecciosos y la sobrecarga circulatoria en las transfusiones masivas. La terapia transfusional moderna requiere, por tanto, de iniciativas teraputicas y educacionales para evitar transfusiones innecesarias, con el consiguiente riesgo de reacciones adversas y transmisin de enfermedades. Existen mltiples estrategias que permiten lograr ese objetivo y que bien implementadas disminuiran su uso indiscriminado. Resultados En el perodo de estudio se realizaron 509 transfusiones en 147 pacientes. De estos, 29 fueron transfundidos en 2 o ms ocasiones. Predomin el sexo masculino y el grupo de edad de 5 a 14 aos. El componente sanguneo ms empleado fue el glbulo rojo con 304 unidades, seguido por el concentrado fresco de plaquetas con 111. Se detectaron 12 reacciones adversas postransfusionales en un total de 10 pacientes, de los cuales 2 presentaron reacciones en 2
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GC-FR-012 Rev. 3 ocasiones. Todas las reacciones fueron no hemolticas inmediatas, siendo el 50 % de estas de tipo febril y el 50 % alrgica. De las 6 febriles, en 5 casos el aumento de temperatura estuvo acompaado de temblores. En el caso de las reacciones alrgicas se present rash, prurito, urticaria y eritema de forma independiente en 4 pacientes, y en los 2 restantes se manifest prurito combinado con urticaria en un caso y con rash en otro. Discutir con su equipo los resultados de esta investigacin.
7. Bibliografa Ver al final del manual
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GC-FR-012 Rev. 3 1. Sesin No. 15: Tuberculina Hipersensibilidad retardada: Efectos Indeseables de la Inmunidad.
1. Competencia a desarrollar en la sesin Ver el efecto in situ de la reaccinque causa la tuberculina para comprender la hipersensibilidad retardada con la administracin de un antgeno especfico y saber que el individuo ha estado ante la presencia de dicho antgeno. 2. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. Obtencin de resultados y elaboracin de una conclusin sobre los resultados de la prctica Interpretacin. Negativo: El dimetro de reaccin no rebasa los 20 mm. Hay enrojecimiento o inflamacin, pero no induracin. Positivo: El dimetro es igual o mayor a 20 mm. Hay induracin a la palpacin. El Mycobacterium tuberculosis se encuentra en el organismo, pero no necesariamente a causando enfermedad. 3. Fundamento terico e informacin de apoyo. La tuberculosis es la enfermedad infecciosa con mayor prevalencia en el mundo. La prueba de la tuberculina PPD (derivado proteico purificado) fue dada a conocer en 1941 por Seibert y Gleenn. El PPD consiste en un principio proteico activo obtenido del filtrado de cultivos de bacilos tuberculosos en medio sinttico esterilizado en autoclave, desprovisto de albmina y extrado por cido tricloroactico o por precipitacin con sulfato neutro de amonio. Desde julio de 1958, el StatenSerumInstitute de Dinamarca ha preparado por orden de la OMS un lote de PPD, el RT-23, cuya potencia es cinco veces mayor que el PPD-S. El contenido de una solucin de tuberculina se mide por unidades. La tuberculina es una prueba de la formacin del tubrculo primario. La infeccin tuberculosa puede comprobarse aproximadamente 12 semanas despus de iniciada, dado que produce una reaccin de hipersensibilidad retardada, mediada por linfocitos T-Helper CD4. La sensibilidad a la tuberculina contina utilizndose como indicador de infeccin tuberculosa. La tcnica de Mantoux, cutnea, es la prueba estndar a nivel mundial, porque entrega informacin cuantitativa de la respuesta. Una reaccin positiva define la infeccin tuberculosa y contribuye a la deteccin de la magnitud del problema en una poblacin.
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GC-FR-012 Rev. 3 Resulta importante destacar que una reaccin positiva no necesariamente indica la infeccin tuberculosa actual: puede tambin indicar un contacto previo con la enfermedad o la presencia del Mycobacterium tuberculosis en el organismo. La prueba de la tuberculina no debe utilizarse como mtodo diagnstico. 4. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1.
5. Metodologa de la sesin. a) Durante la prueba 1) Realizar asepsia en la cara anterior del antebrazo con alcohol isoproplico al 70%. 2) Llenar la jeringa de insulina con 5 unidades de tuberculina 3) Aplicar la tuberculina va intradrmica en el sitio de la asepsia. 4) Trazar con el plumn un crculo de 20 mm de dimetro alrededor de la puncin. 5) En el caso de presentar reaccin positiva esta debe ser visible, registrar en mm el rea de induracin a las 24 horas de la puncin y medir hasta las 72 hrs. COMO MEDIR Imaginar una cruz para poder medir como del norte a sur y del oeste a este y registrar los resultados en mm. b) Tras la prueba 1) NO colocar una banda adhesiva sobre el sitio de puncin. 2) NO rascar el sitio de puncin. En caso de prurito, colocar una compresa fra. 3) NO friccionar el sitio de puncin al secarlo. Anlisis de la presentacin de un caso de tuberculosis no pulmonar.
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GC-FR-012 Rev. 3 Nia de 15 meses de edad con cuadro de 4 meses de evolucin de irritabilidad, fiebre intermitente y prdida de peso progresivas, tratada como infeccin del tracto respiratorio sin mejora. Al mes de iniciado el cuadro la nia presento dolor dorso lumbar que se interpreto como infeccin de vas urinarias. Al examen fsico buenas condiciones generales, irritable e hiperreflexia en miembros inferiores. Cuadro hemtico normal, VSG, PCR y hemocultivos negativos. Prueba de tuberculina negativa y sin antecedentes epidemiolgicos de tuberculosis La resonancia magntica de la columna evidencio cambios sugestivos de espondilodiscitis T12- L1 con absceso peridural compresivo del canal y absceso de psoas izquierdo, hallazgos sugestivos de tuberculosis, por lo cual se inici tratamiento triconjugado con pirazinamida, isoniacida y rifampicina. A los 15 das de tratamiento, la resonancia de control mostr persistencia de la coleccin epidural con compresin del cono medular a nivel T12-L1 (Figura 2). Se llev a ciruga para decomprensin y fijacin. La biopsia report granulomas caseificantes tanto en tejido cartilaginoso como seo, compatible con tuberculosis. La paciente es dada de alta a las 6 semanas con esquema triconjugado para TBC. La tuberculosis osteoarticular representa el 1 al 3 % de las formas extrapulmonares donde la columna vertebral ocupa alrededor del 50% (1,6,7). En el 10 % se pueden encontrar lesiones mltiples. Existen diferentes formas de diseminacin del microorganismo hacia el sistema osteoarticular, predominando la hematgena, secundaria de un foco primario activo o latente ya sea en pulmn, ganglios o vsceras, que llega al sistema msculo esqueltico por canales
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GC-FR-012 Rev. 3 vasculares arteriales (8). En la presentacin articular la forma de diseminacin es por va directa a travs de los vasos subsinoviales o por va indirecta a travs del hueso adyacente. El curso es lento, produciendo hipertrofia y formacin de tejido de granulacin en la sinovial con derrame articular y por ultimo erosin del hueso (1). El diagnstico de tuberculosis se basa en 7 criterios: clnico, epidemiolgico, prueba cutnea de la tuberculina (PPD), radiolgico, baciloscopia, cultivo e histopatolgico (2). Sin embargo puede presentarse dificultad para hacer el diagnstico de esta patologa, ya que en muchos casos puede comportarse como osteomielitis aguda o subaguda o como una artritis sptica (5,6,9,10). La presentacin clnica es de inicio insidioso. La prueba de tuberculina (PPD) generalmente es positiva, teniendo en cuenta que en pacientes con anergia por inmunosupresin o por desnutricin puede dar resultado falso negativo Discuta el caso con sus equipo y manifestar su opinin sobre las diferentes presentaciones de la Tuberculosis. Pregunte a su profesor sobre las dosis de presentacin de la Tuberculina para usar los mismos valores de Referencia, si no hay que buscarlos de acuerdo con las unidades de Tuberculina.
6. Bibliografa Ver referencial al final del manual
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GC-FR-012 Rev. 3 1. Sesin No. 16: Enfermedades autoinmunes y relacionadas al sistema inmune. Revisin bibliogrfica.
2. Competencia a desarrollar en la sesin Bsqueda de informacin reciente sobre una enfermedad especifica del sistema inmune, para entender su complejidad y obtener la visin integral que le ayudara en su futura prctica clnica.
3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo. La entrega de un ensayo por escrito con un mnimo de 6 cuartillas y con una revisin de 15 artculos sobre la enfermedad que por equipo haya sido seleccionada, los alumnos probaran su capacidad de hacer una integracin global de la informacin cientfica. Por equi po se realizara una exposicin oral para dar a conocer a sus compaeros las relevancia de conocer esa enfermedad.
4. Fundamento terico e informacin de apoyo.
El sistema inmunolgico comprende un sistema complejo molecular de protenas y clulas con interaccin a rganos y tejidos que trabajan en una red elaborada y dinmica. La interaccin con agente extraos siempre va a proporcionar una respuesta que implica la capacidad de adaptacin y reconocimiento de los patgenos y crear memoria. Los desordenes en el sistema inmunolgico pueden causar enfermedades, causando inmunodeficiencias que disminuyen la capacidad de respuesta dando lugar a reacciones que pueden poner en peligro la vida del individuo.
5. Equipo, Instrumental, Material e insumos. Ver anexo 1.
6. Metodologa de la sesin.
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GC-FR-012 Rev. 3 Presentacin de informacin de artculos cientficos y revisin de los mismos con su profesor Los Artculos deben de tener un mnimo de 8 aos de haber sido publicados. Presentacin del ensayo escrito en borrador con la informacin ms relevante y actual de la enfermedad. Entrega del mismo terminado para ser evaluado. Exposicin Oral. por equipo La cual no debe de tomar ms de 15 minutos
7. Bibliografa Ver referencial al final del manual
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GC-FR-012 Rev. 3 V. ANEXOS Anexo 1. Lista de Material, Reactivos, instrumentos y equipo para las prcticas de laboratorio
R P B I
C e l
L i n .
C o n t e o
F a g o c .
C o m p l
V S G
P . R e u
L E S
I g E
R x . F e b
V I H
H e p
B
H P
A B O
T B
R . B i b l .
Material 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Kit de simulacin RPBI x Contenedor hermtico rojo, contenedor hermtico amarillo, contenedor punzocortantes, bolsa roja, recipiente basura comn. x x x x x x x x x x x x x x x x Torniquete, torundas con alcohol, Bandas adhesivas redondas x x x x x x x x x x x x x x Aguja Vacutainer Verde x x x x x x x x x x x x x Aguja Vacutainer negro x x x x x x x x x x x x x Sujetador/Holder vacutainer x x x x x x x x x x x x
Jeringas para insulina x Tubos rojos
x x x x x x x x x x x x Tubos amarillos
x x x x x x x x x x x x
Tubos lavanda EDTA
x x x
x
x
Puntillas todas las medidas x x
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GC-FR-012 Rev. 3 Celdas x x Aplicadores de madera x x x x x x x x x x papel parafilm x x x x x x x x x x Portaobjetos x x x Dispensador Diff-safe x x x Asa de siembra x Mechero de alcohol X Tubos de 13x100 x x x x x x x x x x x Gradillas x x x x x x x x x x x x x x Pipetas transfer x x x x x x x x x x x x x Papel para limpiar microscopio x x x x x Placas para aglutinacion en latex x x x x
Placa de vidrio para febriles x
Placa para tipo sanguneo
x Insertos correspondientes x x x x x x x x x x x Reactivo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Kit tincin writgh (Policromo, eosina, metanol) x x x
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GC-FR-012 Rev. 3 Aceite de inmersin x x x Kit C3 y C4 x Controles C3, C4 x Kit VSG x Kit PCR x Kit Factor Reumatoide x Kit ASLO x Kit Cel. L.E x Kit IgE x Control para IgE x Kit Rx Febriles con controles x
Kit VIH x Kit Hep. B x Kit Helicobacter pylori x Anti A x Anti B x Anti D x Inmunoglobulina IgG x Albumina de bovino x Solucin salina x
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GC-FR-012 Rev. 3 Tuberculina 5 UT x Especmen biolgico 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Staphylococcus aureus coagulasa (-) x
Instrumental 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Contador de clulas (piano) x x
Micropipeta 0.5-10 uL x x x x x x x x x Micropipeta de 20-200 uL x x x x x x x x x Micropipeta de 100- 1000 uL x x x x x x x x x Micropipeta de 50uL x x x x x x x x x Cronmetro x x x Equipo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Microscopio x x x x x Bao Mara x x x x Centrfuga x x x x x x x x x x Espectrofotmetro x x Rotator x x x x Equipo automatizado para Hematologa x
Lmpara x x x x
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GC-FR-012 Rev. 3 Nota: El material se requiere por equipo. Los reactivos, material biolgico y equipo por sesin
7. Referencias Bibliogrficas a) Exposure to Blood, What Healthcare Personnel Need to Know. Disease Control and Prevention National Center for Infectious Diseases Divison of Healthcare Quality Promotion and Division of Viral Hepatitis. Junio del 2003. http://www.cdc.gov/ncidod/dhqp/pdf/bbp/Exp_to_Blood.pdf b) NORMA Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Proteccin ambiental Salud ambiental - Residuos peligrosos biolgico-infecciosos - Clasificacin y especificaciones de manejo. Secretara de Medio Ambiente y Recursos Naturales [en lnea]. [Fecha de acceso 20 de enero de 2003]. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.htmL c) La gua de cumplimiento de la Norma Oficial Mexicana NOM-087. Colaboracin entre la Secretara de Medio Ambiente y Recursos Naturales, la Procuradura Federal de Proteccin al Ambiente, la Secretara de Salud, y la Comisin Federal para la Proteccin contra Riesgos Sanitarios.[Fecha de acceso martes 14 de abril del 2009]. http://www.cofepris.gob.mx/work/sites/cfp/resources/LocalContent/1909/5/GuiaNOM087.pdf d) Norma Oficial Mexicana NOM-003-SSA2-1993, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines teraputicos. Secretara de Salud. [Fecha de acceso 18 de julio de 1994]. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/003ssa23.htmL e) Norma Oficial Mexicana NOM-010-SSA2-1993, Para la prevencin y control de la infeccin por Virus de la Inmunodeficiencia Humana. Secretara de Salud. [Fecha de acceso 18 de julio de 1994]. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/010ssa23.htmL f) Norma Oficial Mexicana NOM-013-SSA2-1994, Para la prevencin y control de las enfermedades bucales.Secretara de Salud. [Fecha de acceso 11 de enero de 1999]. g) http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/m013ssa24.htmL h) NORMA Oficial Mexicana NOM-036-SSA2-2002, Prevencin y control de enfermedades. Aplicacin de vacunas, toxoides, sueros, antitoxinas e inmunoglobulinas en el humano. Secretara de Salud.[Fecha de acceso 17 de julio de 2003]. i) http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/036ssa202.htmL j) W AA. Inmunologa: Biologa y Patologa del Sistema Inmune. Madrid. Edit Medica Panamericana, 1er ed.2003.Espaa.256p k) Roitt I, Male D ,Brostoff J. Inmunologa Fundamentos. Madrid. Edit Mdica Panamericana. 11va. Ed.2009.Espaa.528p l) Gonzalez,R . Inmunologa y patologa del sistema inmunitario.Madrid.Edit Panamericana.4ta ed.2007.Espaa.274p m) Luttman W. Inmunologa: Manual de Tcnicas de Investigacin en el Laboratorio. Zaragoza. Acribia Editorial, 1er ed.2008.Espaa.482p
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GC-FR-012 Rev. 3 n) Abbas,K.A. Inmunologa Celular y Molecular. Madrid Ed. Elsevier. 2ed.2007 Espaa.274p o) Estrickler P A, Lagos KMI,GonzalezMB. Deficiencia congnita de complemeto:C3 y C4 comunicacin de un caso clinico. Rev. Chil.enf.resp 2006;vol22(2)pp.119-125 p) Busuti l P ,Rodrguez N,Rodriguez A,HallC. Granulomatosis de Wegwner: Reporte de un caso Oramas A, Lima Peru. Revista Peruana de Reumatologia; 1997:Vol3 (2)88-92.
VI. TABLA DE CAMBIOS Tabla de Cambios Revisin Fecha Descripcin 0 19/07/2010 Alta 1 17/01/11 Adaptacin al nuevo formato y cambio de competencias. 2 28/05/12 Se modifica la metodologa de la sesin para la practica 3, conteo leucocitario: inmunidad natural, se incorpora la practica Helicobacter pylori, quedando como numero 13, se adecua al formato GC-FR-012 Rev.3 se modifica la practica 16 Proyecto de investigacin a Enfermedades autoinmunes y relacionadas al sistema inmune. Revisin bibliogrfica. As como su competencia. Se actualiza el anexo 1. Se corrigen errores de ortografa.