UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN

BRUNA LISBOA
CECILIA MOZZER
LUIS GUSTAVO DOS SANTOS






RELATRIO DE AULA PRTICA
MICOLOGIA











CURITIBA
JUNHO - 2014
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BRUNA LISBOA
CECILIA MOZZER
LUIS GUSTAVO DOS SANTOS





RELATRIO DE AULA PRTICA
MICOLOGIA



Relatrio apresentado como requisito parcial
aprovao na disciplina de Microbiologia (BP001) do
Curso de Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia,
ministrada pelo Departamento de Patologia Bsica do
Setor de Cincias Biolgicas, Campus Centro
Politcnico, da Universidade Federal do Paran.

Orientador: Prof. Dr. Ida Pimentel







CURITIBA
JUNHO - 2014
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1. INTRODUO

Os fungos, assim como as bactrias, possuem sua importncia no estudo
microbiolgico. A cincia de estudo dos fungos micologia torna-se cada vez mais
importante medida que os fungos tornam-se presentes no nosso dia-a-dia. Os
fungos, dependendo da espcie, tm seu potencial benfico para o homem, da
mesma forma que h espcies causadores de doenas e produtoras de substncias
txicas para o homem as micotoxinas. Partindo disso, todo conhecimento
adquirido pelos fungos de grande valor.
Os fungos so organismos eucariticos, ou seja, so mais prximos dos
humanos do que as bactrias (TORTORA, 2005). Segundo Conceio (2010), os
fungos so quimioheterotrficos, predominantemente aerbicos ou fermentadores
facultativos. Os fungos se alimentam por absoro e isso acaba por gerar uma
importncia biotecnolgica e ecolgica imensa para os ecossistemas terrestres
(RICKLEFS, 2009), uma vez que grande parte da decomposio ocorre por via de
produo de enzimas que degradam molculas complexas em molculas simples
para absoro (TORTORA, 2005). A importncia biotecnolgica deve-se ao fato
dessas enzimas serem facilmente isoladas e posterior transformao em produtos
de alto valor agregado (MENEZES et al. 2009; ALEXANDRINO et al. 2007 APUD
CONCEIO, 2010).
Os fungos podem ser unicelulares os leveduriformes e pluricelulares os
filamentosos (TORTORA, 2005). As clulas dos fungos agrupam-se em filamentos,
septados ou no (SILVA & COELHO, 2006). Esses filamentos so denominados
hifas, as quais entrelaam-se, formando o miclio. A hifas, quando divididas e
septos, so denominadas hifas septadas; caso contrrio, quando no h a presena
de septos, so chamadas de hifas cenoctica. Essa ltima vista como clulas
longas e contnuas, multinucleadas. As hifas so importantes para a absoro de
nutrientes e tambm como estruturas de suporte aos esporos reprodutivos.
(TORTORA, 2005)
A presena de esporos nos fungos filamentosos importante para a
reproduo, tanto sexuada quanto assexuada. A identificao do fungo d-se pela
anlise do esporo, os quais so agrupados conforme a sua estrutura reprodutora. Os
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esporos assexuais formam-se pelas hifas do organismo, e, quando germinados,
foram organismos geneticamente idnticos. Os sexuais originam-se da fuso de
ncleos entre fungos da mesma espcie. (TORTORA, 2005).
Para uma pesquisa razovel da espcie do fungo, deve-se analisar as
caractersticas morfolgicas macroscpicas estudo da colnia e microscpicas
estudo das estruturas de reproduo. Assim, conduz-se experimentos
especificamente para esse fim.


2. OBJETIVO

O objetivo o isolamento de uma espcie de fungo epiftico, com sua devida
purificao e repique em ponto nico para anlise das caractersticas
macromorfolgicas; e tambm anlise das caractersticas micromorfolgicas pelo
microcultivo.


3. MATERIAIS E MTODOS

Foram coletadas folhas com a presena de leses. Foi escolhida uma leso
para ser destacada da folha e, posteriormente, dividida em quatro fraes de
aproximadamente 1 cm. Aps isso, os pedaos foram desinfeccionados
superficialmente, sendo imergido numa soluo de hipoclorito de sdio 3,5% por 2
minutos. Em seguida, esses fragmentos foram depositados numa placa com meio
Sabouraud, com a parte abacial em contato com o gar, e incubado de 3 a 7 dias,
numa temperatura aproximada de 28 C.
Aps o isolamento, foi feita a purificao, pela tcnica do esgotamento da ala
e o repique de ponto nico, ambos em placa com meio batata-dextrose gar (BDA),
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para a identificao da macromorfologia. As duas placas foram incubadas de 3 a 7
dias, a uma temperatura aproximada de 28 C.
Para anlise da micromorfologia, foi efetuado o microcultivo do fungo. Em
uma placa de Petri contendo meio BDA camada alta, foram retirados, com um
estilete flambado, dois cubos de gar. Esses cubos foram transferidos para uma
segunda placa, contendo duas lminas de vidro uma cruzada sobre a outra, e um
chumao de algodo, ficando os cubos cada um sobre uma extremidade da lmina
superior. Em seguida, com o auxilia de uma ala de nquel cromo, previamente
flambada, foram retiradas amostras da colnia fngica e inoculadas nos quatros
cantos da parte superior de cada cubo de BDA. Ento, separou-se duas lamnulas
de vidros, as quais foram esterilizadas passando no lcool e depois na chama. Em
seguida, as lamnulas so depositadas sobre os blocos de BDA. Aps, o chumao
de algodo foi umedecido com gua destilada, com o auxlio de uma pipeta. Ento, a
placa foi incubada de 3 a 7 dias a aproximadamente 28 C.
Aps esse tempo, deposita sobre uma lmina uma gota de lactofenol de
Amonn e, com o auxlio de uma pina flambado, deposita-se a lamnula do
microcultivo sobre a gota de lactofenol e ento observar ao microscpio tico.


4. RESULTADOS E DISCUSSES

As caractersticas macromorfolgicas, encontradas no repique de ponto nico,
apresentaram uma colnia algodonosa, com o verso branco (FIGURA 1) e o reverso
num tom de creme (FIGURA 2). O tamanho da colnia apresentou um dimetro de
8,5 cm.
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FIGURA 1 Verso da Colnia. (MOZZER, Ceclia, 2014)

FIGURA 2 Reverso da Colnia. (MOZZER, Ceclia, 2014)

J, para as caractersticas morfolgicas, foram avaliadas diversas lminas
com espcies variadas de fungos. Os resultados foram os mais variados, conforme a
espcie e gnero do fungo observado. A Figura 3 ilustra uma espcie com hifa
septada, ou seja, sem a presena de septos. Alm disso, fcil observar a presena
um artrsporo segmentado, presente no meio da figura.
A segunda lmina examinada apresentou uma espcie septada, com a
presena de um condio (FIGURA 4). Esse condio apresenta uma colorao
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mesclada de partes claras e partes mais escuras, alm de possuir uma forma
levemente achatada.
Por fim, a figura 5 exemplifica numa cartilha, as possveis caractersticas
micromorfolgicas de fungos do gnero Mucor. A hifa quase cenoctica e os
esporangisporos so grandes e apicais, ficando evidente a estrutura endgena dos
esporos assexuados.

FIGURA 3 Lmina com fungo, aumento 1000x (MOZZER, Ceclia).

FIGURA 4 Lmina com fungo, aumento 1000x (MOZZER, Ceclia)

FIGURA 5 Imagem ilustrando aspectos da micromorfologia do Mucor sp. (SANTOS, Luis)
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5. CONCLUSES

possvel perceber a grande presena dos fungos ao nosso redor e tambm o
poder patognico de algumas espcies em relao s plantas. Para uma devida
anlise, deve ser feito um estudo sobre as caractersticas morfolgicas do fungo,
tanto macro (colnia) quanto micro (lmina). No entanto, a identificao dos fungos
pode se tornar uma atividade que exige grande conhecimento e experincia do
pesquisador. Isso ocorre, uma vez que essas caractersticas mudam conforme os
recursos e condies do meio ou, por vezes, no sendo possvel encontrar as
estruturas reprodutivas do organismo em questo.


6. REFERNCIAS

TORTORA, Gerard J.; FUNKE, Berdell R.; CASE, Christine L.. Microbiologia. 8
edio, So Paulo: Editora ARTMED S.A., 2005.
CONCEIO, Taiana A. Estudo da produo de enzimas ligninolticas por
fungos agaricomycetes cultivados em resduos agro-industriais do estado da
Bahia. 40 f. Dissertao (Mestrado em Biotecnologia) Programa de Ps-
graduao em Biotecnologia, Universidade Estadual de Santana, Santana, 2010.
SILVA, Ricardo R.; COELHO, Glauciane D. Fungos: Principais grupos e aplicaes
biotecnolgicas. Programa de Ps-graduao em Biodiversidade Vegetal e Meio
Ambiente Instituto de Botnica, 2006.
RICKLEFS, Robert E.. A Economia da Natureza. 5 edio, Rio de Janeiro: Editora
Guanabara Koogan, 2009.