Aumento de la radiosensibilidad.

Identificando las vas de reparacin del AND.

Los tumores cancerosos
Cncer: crecimiento anormal de las clulas, en esta patologa las clulas daadas tienden a
replicarse indiscriminadamente generando tumores.
Para evitar que las clulas cancergenas (aquellas que estn en constante crecimiento)
crezca mas y/o transmitan su comportamiento a otras clulas, se utiliza radiacin ( radio
terapia) con esto se busca destruir los tumores y las clulas cancergenas que los forman.
Muchas veces las clulas cancergenas son resistentes a la radiacin (radio resistencia) por
lo que es ms difcil eliminarlas o destruirlas usndola.
Debido a que las clulas cancergenas al igual que muchas clulas normales pueden al igual
que muchas clulas normales, reparar su ADN luego de ser sometidas a radiacin, es que
uno de los objetivos es como hacer que la radiacin destruya mas efectivamente las clulas
cancergenas ( en otras palabras como hacer de las clulas cancergenas clulas ms
sensibles a la radiacin, o radio sensibles).
Se sabe que la forma ms efectiva para destruir las clulas cancergenas es disminuir la
capacidad que tengan estas para reparar su ADN, que es lo que de alguna forma les
permite seguir su crecimiento y expansin.
Se piensa que la letalidad, es decir, la capacidad de matar las clulas cancergenas es
mayor si el dao que se realice a ellas ( con radiacin) es mayor al momento de comenzada
la divisin celular.
los individuos con defectos hereditarios de reparacin del ADN a menudo muestran
hipersensibilidad a la radiacin o mayor riesgo de cncer, o ambas.

Hay suficiente evidencia para creer que la reparacin del DNA evita la muerte celular. Esto
porque a medida que se destruyen las clulas cancergenas, estas constantemente van
reparndose a s mismas. Es por ello que aumentar la sensibilidad a la radiacin, es
fundamental para hacer del dao algo ms profundo que dificulte la reparacin de las
clulas cancergenas.

Para ello se ha pensado que las protenas encargadas de la reparacin del ADN son fundam
entales para hacer del tratamiento algo ms efectivo. Debido a que si la reparacin del ADN
se frena, o se frena la accin de las protenas encargadas de ello, no se permitir que lue
go de aplicar radiacin las clulas cancergenas tengan la capacidad de recuperarse.

La mayor parte de reparacin del ADN humano se lleva a cabo como parte de uno de las
cinco principales vas bioqumicas, aunque tambin se conocen subvias y variaciones de la
va que existen. Estas vas incluyen: la reparacin de nucletidos por escisin (NER),
desajuste de reparacin (MMR), la reparacin por escisin de base (BER), unin de extremo
s no homlogos (NHEJ) y recombinacin homloga (HR). Aunque todos pueden participar
en alguna medida en la reparacin de las enormemente variadas lesiones producidas por
las radiaciones ionizantes, los tres ltimos (es decir, BER, NHEJ y HR) probablemente son
responsables de la eliminacin de la mayora de los daos.

Por ejemplo, las protenas que contribuyen a la letalidad de la clula, SSB y de ONSD,
utilizan BER y NHEJ, respectivamente para su reparacin.

Cuestiones.


El objetivo clnico de la estrategia de sensibilizador de radiacin es radio sensibilizar
especficamente a las clulas tumorales sin radio sensibilizar el tejido normal circundante.
Esto ayudara a que la radiacin afecte ms efectivamente a las clulas tumorales que a las
clulas normales

Hoy en da se sabe que las clulas tumorales pueden regenerar su ADN ms lentamente que lo que
pueden hacerlo las clulas normales del cuerpo, esto justifica el empleo de tratamientos
fragmentado, esto es tratamientos divididos en tiempos, ya que al ocupar radiacin para atacar el
avance de una determinada clula cancergena, se est daando de igual forma y sin intencin a
parte del tejido normal que la rodea, el empleo de un tratamiento dividido en periodos de tiempos,
permite dejar espacios donde no se realice radioterapia lo cual ayudara a que el tejido normal (no
cancergeno) se recupere de las lesiones que podra haber sufrido luego de las sesiones previas de
tratamiento. Aunque esto, permita de igual forma la recuperacin del ADN en las clulas tumorales.

Por lo tanto, el fraccionamiento maximiza la reparacin del ADN del tejido normal y permite
una mayor dosis teraputica dirigida al tumor (esto es por qu si empleramos un
tratamiento continuado, sin parar, la destruccin sera irreparable en un periodo de tiempo, y
quizs se pueda acabar con el tumor, pero al mismo tiempo se habrn destruido demasiada
clulas no dainas lo que al fin y al cabo puede de igual forma traer consecuencias).

la reparacin del ADN, la reoxigenacin, redistribucin y repoblacin, tambin se cree que
contribuyen a la efectividad de la terapia de radioterapia fraccionada (estos cuatro factores
son denominados las cuatro Rs de la radiobiologa).

Paradjicamente, la nocin de que los tumores son intrnsecamente deficientes en la
reparacin de su ADN en relacin a las clulas normales, sugiere que los frmacos
diseados para inhibir (detener) la reparacin del ADN se pueden orientar preferentemente
a la contencin de las clulas tumorales, deteniendo el progreso de ellas, de esta forma no
sera necesario el empleo de radiacin para su tratamiento, slo usaramos una droga que
les impedira dividirse y expandirse.


A pesar de las dificultades anteriores, los acontecimientos recientes en nuestro
entendimiento de la biologa molecular de los tumores han servido para exponer los detalles
de la reparacin del ADN humano y revel diferencias moleculares entre el tumor y la clula
normal adems, ahora hay mejores herramientas de investigacin para sondear los
aspectos mecnicos de la reparacin del ADN, que tambin han sugerido nuevas
secuencias o mecanismos de reparacin del mismo.



Nuevas estrategias.

Ahora sabemos que los tumores no son globalmente defectuoso en la reparacin de su ADN
, sino ms bien tiene defectos en la reparacin de algunas secuencias especficas, algunas
de estas, se cree, que algunas de estas vas, son importantes para la reparacin de los
daos producidas por la radiacin y otros no.

Si entendemos como el Tumor repara su ADN, podremos atacar estos mecanismos
impidiendo que esto ocurra con normalidad y destruyendo de manera muy efectiva el
avance del tumor.

Se cree que el mecanismo de reparacin MMR no es muy importante en la reparacin del
dao producido por la radiacin, mientras que el mecanismo NHEJ es de gran impacto para
la resistencia a la radiacin.

Esta claro hoy, que si un tumor presenta una deficiencia en alguno de sus mecanismo de
reparacin no le quedar ms que raparse a si mismo mediante algn mecanismo de
reparacin alternativo, entonces, ese mecanismo de reparacin alternativo, ser ahora,
nuestro objetivo a destruir.

Ahora bien, esta deficiencia en algunos mecanismos de reparacin, es lo que adems
diferencia a las clulas tumorales de las normales (las clulas normales no presentan estas
deficiencias), entonces esto podra, adems ser til para dirigir futuros tratamientos solo a
las clulas malignas no a las normales, reduciendo el impacto del tratamiento sobre tejido
sano.

Tambin abre la posibilidad de que un solo agente podra eliminar la capacidad de una
clula tumoral de reparar una clase entera de lesiones de su ADN.

los tumores impulsados por oncogenes estn bajo estrs replicativo. El estrs replicativo,
produce que todo tipo de lesiones del ADN, llmese ruptura de Cadenas o de mases, se
suman y potencian, produciendo una mayor alteracin de las clulas cancergenas
aumentando su dao interno y acelerando su muerte.

Por lo tanto, la inhibicin de los mecanismos de reparacin pertinentes pueden saturar
preferentemente de reparacin en las clulas tumorales en relacin a las clulas normales.

Otro factor a tener en cuenta, es el tiempo de reparacin del ADN de las clulas tumorales,
como mencionamos antes, es ms lento que el de las clulas normales.

Ahora bien, Muchas clulas tumorales son defectuosas en los puntos de control del ciclo
celular (aquellos donde el ciclo comienza o termina), lo que contribuye a su tumorignesis (
a su dispersin o expansin ) , pero que de igual forma permite una ms lenta reparacin en
algunos casos.

Por lo tanto, la reparacin del ADN en los puestos de control deficiente de los tumores
pueden radiosensibilizar a las clulas tumorales lo que resultara en una replicacin
prematuramente su ADN, antes que la reparacin del ADN pueda estar completada. Osea
el ADN del tumor aun estar daado, cuando este comience su divisin celular. Esto
significa una gran deficiencia en la calidad de la reparacin, y hace que el tumor sea menos
estable.

Esa es otra diferencia con las clulas normales, las clulas normales no comienzan su
divisin hasta pasado un tiempo razonable desde la reparacin de su ADN.

Sin embargo, la cuestin se complica porque algunas de las protenas que promueven la lle
gada a los puntos de control del ciclo celular (por ejemplo, TP53) tambin promueven la
apoptosis (es decir, programar muerte celular). Esto es malo, porque cuando suministramos
este potenciador de los puntos de control, ambas clulas se ven afectadas, las tumorales y
las normales. Y como estas drogas en si, producen muerte celular lo que en el caso de las
clulas tumorales no tendra contra (solo queremos eliminarlas) si los tendra en las celulas
normales las que de igual forma empezaran a morir.

Un aumento en la muerte por radioinduccin producto del fracaso de la detencin del ciclo
celular puede ser compensado con la reduccin de las clulas apoptticas muertas. Esto
probablemente explica la falencia para demostrar una mejora radioteraputica de
respuesta para tumores TP53 mutado en comparacin con TP53 de tipo natural o no
mutado.

Sin embargo, puede ser posible desacoplar teraputicamente la detencin del ciclo celular y
la apoptosis apuntando a protenas de detencin del ciclo celular, tales como p21, esto es
Usar dogras que no traigan como consecuencia la muerte celular y que de igual forma nos
permitan alcanzar esos puntos de control del ciclo.

Hay tumores con deficiencias inherentes en la reparacin del ADN, la detencin del ciclo
celular puede aumentar la muerte celular y mejorar la radiorespuesta del tumor, mientras
que atacar los mecanismos de reparacin del ADN puede mejorar la respuesta
radioteraputica en los tumores con deficiencias en la detencin del ciclo celular.

Por ltimo, la hipoxia es otro factor que afecta la relacin radioteraputica. Los tumores
tienden a superar sus suministros de sangre y desarrollar reas de muy bajo contenido de
oxgeno (es decir, regiones hipxicas).

La hipoxia tumoral resultante protege preferentemente a las clulas tumorales del dao en el
ADN inducido por la radiacin, porque el oxgeno es un sensibilizador a la radiacin potente.
Y Aumenta en gran medida el nmero y la complejidad de las lesiones del ADN producidas
por radiacin.

Sin embargo, esta radio resistencia hipxica puede ser parcialmente compensada por la
regulacin a la baja de los genes implicados en la reparacin de HR, una de los las dos
principales vas de reparacin de la ruptura de doble filamento, por razones que son todava
no son claras. Por lo tanto, la orientacin de la reparacin teraputica de la otra cadenas
dobles rotas (es decir, NHEJ) puede disminuir la radioresistancia de clulas hipxicas en el
tumor y aumentar la ganancia teraputica.

Adems, se ha demostrado que la hipoxia crnica puede alterar el estado biolgico de las
clulas tumorales, incluyendo la transcripcin y la traduccin de diversas protenas implicada
s en la supervivencia celular. Este enfoque, para sensibilizar sobre las regiones hipxicas y
xicas dentro del tumor basado en un diferencial de bioqumica, es similar al enfoque letal
somtico de tumor sobre la sensibilizacin del tejido normal basado en un diferencia
gentica, como se describe anteriormente.

Estudio de caso en Terapia somatica letal -BRCA1 y 2, y
Reparacin del ADN

El concepto letal sinttico para la terapia del cncer se propuso por primera ves por Hartwell
et al., basado en gran parte en la gentica de la levadura. En principio, el enfoque deba ser
til para la terapia del cncer apuntando a cualquier par de mecanismo funcionalmente
redundantes (que tienen la misma funcin) que y tuviesen un papel en viabilidad celular del
tumor.

Recientemente se ha demostrado que los genes BRCA1 y BRCA2 asociados a los cnceres
de mama con descendencia familiar (gentica) son altamente sensibles a los inhibidores de
la enzima poli (ADP-ribosa) polimerasa-1 (PARP1) 0, inhibidores de PARP1 AZD2281 (Astra
Zeneca) y AG014699 (Pfizer GRD) sirven actualmente en los ensayos clnicos como
monoterapia (Terapia con un solo tipo de tratamiento) para las mujeres con BRCA1 o BRCA2
mutado o cncer de ovario.

Se cree que BRCA1 y BRCA2 tienen mltiples funciones, tanto que se cree que ambas
contribuyen al mecanismo de reparacin HR, y es por eso que se piensa que un defecto de
HR podra ser la consecuencia al efecto sinttico letal en BRCA1 o 2 de clulas tumorales
mutadas.

Esta afirmacin se apoya en la demostracin de que las deficiencias en otros genes
asociados con HR tambin confieren una sensibilidad a la inhibicin de PARP1 .

Esto, a su vez, sugiere que el HR del DSB reparado esta comprometido en la clulas
mutadas BRCA1 y BRCA2, y que la inhicin de PARP1 suprime al mecanismo de
reparacin NHEJ.

la principal funcin de PARP1 ha sido asociada a BER, que se cree que tiene un papel en la
reparacin del SSBS pero no del DSBs. No se espera que la inhibicin de la BER produzca
un efecto letal sinttico.

Sin embargo, una PARP1 dependiente de NHEJ ha sido descrita, por lo que un subtipo
de NHEJ podran ser la causa de la inhibicin PARP1.