Efecto inhibitorio de Lactobacillus acidophilus sobre

Candida albicans a distintas concentraciones de

glucgeno
vila, Cruz Miriam; Contreras, Delgadillo Cristofer Ulises; Coyol, Jimnez Zyanya Nahui;
L!ez, Carrillo Mariana; Madariaga, "retelin #ernanda; Mart$nez, Lara %le&andra'
La(oratorio de metodolog$a )ient$fi)a ** L+,-., .iolog$a, #a)ultad de /studios 0u!eriores *zta)ala, %v'
de los .arrios, Los 1eyes *zta)ala, 2lalne!antla, /stado de M3i)o'
Introduccin.
Las infe))iones vaginales son un fo)o de enfermedades y motivo im!ortante de )onsulta
mdi)a; ya sea )omo 4ni)a molestia u otros !ro(lemas de diferente relevan)ia' La vaginosis
(a)teriana 56.7 re!resenta el +89 y Candidiasis vulvovaginal 5C667 el -8 : -+9 de los
)asos de infe))in 5De la "arte et al', ;88<7'
/n )uanto a los agentes !atgenos =ue )ausan las infe))iones vaginales en la !o(la)in
general se en)uentra> Gardnerella vaginalis, Candida spp, y Trichonoma vaginalis' /l
mi)roorganismo =ue m?s afe)ta a las !a)ientes me3i)anas es Candida spp. /sta levadura se
en)uentra de manera normal en la flora vaginal de una mu&er aun=ue en un dese=uili(rio
!uede ser )ausante de infe))iones )ervi)ovaginales' 0eg4n #lores 5;88-7 en un muestreo
de <@,, !a)ientes en)ontr ,A',-9 de Candida spp', de las )uales B'@9 fueron Candida
albicans.
"ara el desarrollo C. albicans en la vagina es ne)esario un !C de D'D a +'<, y una
tem!eratura de -BEC !ara =ue !ueda adherirse en mem(ranas mu)osas 5Merino, ;8,,7'
"ara mantener un e=uili(rio ade)uado, la mi)roflora vaginal )um!le un rol !re!onderante en
la !rote))in )ontra mi)roorganismos !atgenos y o!ortunistas =ue se ve vulnera(le !or el
dese=uili(rio de este am(iente' /l !rin)i!al agente !rote)tor de la vagina es Lactobacillus sp.,
se han realizado estudios de la)to(a)ilos y se )ono)e =ue tienen un efe)to inhi(itorio so(re
C. albicans. 5Mart$n, ;88B7'
Los me)anismos !ro!uestos !ara la inhi(i)in de C. albicans u otros agentes !atgenos !or
Lactobacillus sp. son =ue !rodu)e !er3ido de hidrogeno, =ue forma iones su!er3idos,
afe)tan la mem(rana )elular, forman sustan)ias fungist?ti)as =ue inhi(en los hongos en la
flora vaginal )omo el ?)ido l?)ti)o y realizan una )om!eti)in !or el glu)geno )on los
mi)roorganismos !atgenos 50trus et al', ;88+ y "rez, ;88<7'
/l sustrato !rin)i!al de los mi)roorganismos de la flora vaginal !resente en las )lulas
e!iteliales es el glu)geno en)ontr?ndolo en una )on)entra)in normal de ,88FgGml 5"rez,
;88<7' /l glu)geno es un !ol$mero )on ramifi)a)iones de glu)osa =ue utiliza Lactobacillus
)omo fuente de )ar(ono o(teniendo ?)ido l?)ti)o' 0e ha demostrado en estudios in vivo =ue
el glu)geno en altas )on)entra)iones !uede favore)er el )re)imiento de organismos
o!ortunistas )omo C. albicans 5Dennerstein y /llis, ;88,7'
0e sa(e =ue en !a)ientes dia(ti)as, de(ido al )am(io )onstante de !C y )on alta
!rodu))in de estrgenos e3iste mayor )antidad de glu)geno en las )lulas e!iteliales, lo
=ue in)ide en una mayor !ro(a(ilidad de =ue )?ndida !rolifere 5MuHoz, ;8,;7'De a)uerdo a
0olano 5;88;7 en un estudio realizado en !a)ientes em(arazadas, =ue registran )andidiasis,
!oseen una mu)osa a(undante en glu)geno'
Los tra(a&os realizados so(re el glu)geno y el )re)imiento de mi)roorganismos son muy
es)asos, siendo todos realizados in vivo. %unado a esto se des)ono)e la rela)in entre el
glu)geno y el e=uili(rio de la flora vaginal; en !arti)ular de L. acidophillus )on C. albicans.
"or lo tanto se !retende )ono)er la rela)in de estos mi)roorganismos )on las varia)iones
del sustrato en un estudio in vitro.
Pregunta de investigacin:
I% =u )on)entra)in de glu)geno, Lactobacillus acidophillus !uede inhi(ir a Candida
albicansJ
Objetivos:
Keneral>
Determinar la )on)entra)in de glu)geno en la )ual Lactobacillus acidophilus
es )a!az de inhi(ir a Candida albicans
"arti)ulares>
%nalizar la !rodu))in de ?)ido l?)ti)o, !er3ido de hidrogeno 5C
;
L
;
7, !C y
etanol en )ada uno de los tratamientos a distintas )on)entra)iones de
glu)geno'
Com!arar el efe)to inhi(itorio so(re Candida albicans )on las sustan)ias
!rodu)idas !or Lactobacillus acidophilus y la )on)entra)in ade)uada de
glu)geno'
los halos de inhi(i)in generados !or La)to(a)illus a)ido!hilus so(re Candida
albicans y )om!arar el efe)to inhi(itorio )on un medi)amento )omer)ial y el de
?)ido l?)ti)o'
Hiptesis:
/studios indi)an =ue las !a)ientes dia(ti)as, de(ido al )am(io )onstante de !C y alta
!rodu))in de estrgenos !resentan )andidiasis de(ido a =ue su )on)entra)in de
glu)geno en el e!itelio vaginal es alta, adem?s se )ono)e =ue en !a)ientes em(arazadas
)on una mu)osa a(undante en glu)geno !ose$an la misma enfermedad, !or esto se !uede
inferir =ue a una mayor )on)entra)in de glu)geno, L. acidophilus ser? )a!az de generar
?)ido l?)ti)o y !er3ido de hidrgeno )reando un am(iente !o)o favora(le !ara la
!rolifera)in de C. albicans'
Diseo:
Materiales !"todos:
Mi)roorganismos y su mantenimiento
"ara la )onserva)in y el mane&o ade)uado de Candida albicans y de Lactobacillus
acidophillus se realizan - siem(ras de )ada )e!a en medio 0D y M10 res!e)tivamente )on
un volumen de ,+ml )ada una' 0e alma)enaran en in)u(adora a -BEC hasta su utiliza)in;
tomando )omo )riterio de in)lusin su no )ontamina)in'
Desarrollo de Lactobacillus acidophillus en glucgeno
/n re)i!ientes de vidrio de +88ml =ue )ontendr?n solu)iones de glu)geno a
)on)entra)iones de M,88FgGmlN, M,+8FgGmlN y M;88FgGmlN )on Lactobacillus ,3 ,8 BU#CGml
!ara )ada )on)entra)in en D re!eti)iones )on medio M10 sin fuente de )ar(ono en
)ondi)iones anaero(ias 5"rez, ;88<7'
Las )ondi)iones anaero(ias se )onseguir?n mediante )om(ustin de - velas y al)aseltzer en
una !e)era de vidrio )on medidas de +83;83-8 sellada hermti)amente a -BEC
Cada ;D horas se toman muestras de ;8ml de solu)in la )uantifi)a)in de U#C !or es)ala
de M)#, !C )on !oten)imetro, C
;
L
;
!or t)ni)a de !ermanganotometr$a 5.ruhn et al', ;88<7
?)ido l?)ti)o !or titula)in de NaLC 5#eoli et al', ,AA+7 y glu)geno !or )urva !atrn de
glu)osa'
Inhibicin de Candidad albicans con sustancias producidas por Lactobacillus
acidophillus
/n (ase al !rimer ensayo se sele))ionar? la )on)entra)in de glu)geno !ara =ue
L.acidophillus genere los )ondi)iones !timas de !C, ?)ido l?)ti)o y !er3ido de hidrogeno
0e )entrifugara el medio l$=uido de la )on)entra)in sele))ionada a ,8,888 r!m !or ,8 min
o(tenido el so(renadante, este se utilizar? !ara el ensayo de inhi(i)in !or t)ni)a de
difusin de !ozos; !ara la )ual se sem(raran 8'+ mf) de Candida albicans en ,+ ml de medio
0D en )a&as !etri )on un !C de D'+'
/n )ada )a&a !etri se a(rir?n - !ozos de ,8 mm )ada uno agregando desde ,88 Fl de
so(renadante a ,889, B+9 y +89 res!e)tivamente, utilizando )omo )ontrol !ositivo ?)ido
l?)ti)o y antif4ngi)o )on D re!eti)iones'
Las re!eti)iones se de&aran en re!oso a tem!eratura am(iente !or ; horas !ara
!osteriormente in)u(ar durante ;D horas a -BEC' %l trmino de la in)u(a)in se medir?n los
halos de inhi(i)in en mm utilizando es)ala de 6ernier 5Oari!tas et al', ;8,87'
Inhibicin de Candida albicans en co!petencia por sustrato
/l efe)to de la !resen)ia de L. acidophillus en el )re)imiento de C. albicans se determinar? in
vitro )on !la)as de agar sem(rando !rimeramente el !ro(iti)o a una )on)entra)in !ara
tener una a(s de , a <88nm en agar M10; se in)u(ara durante D@ hras' a -BEC en
)ondi)iones anaero(ias'
Des!us de esto se agregar? agar suave 5M10, 8'B97 )on una )on)entra)in )e C. albicans
ne)esaria !ara tener una a(s de 8'8, a <88nm'
%l solidifi)arse se in)u(ar? a -BEC en una atmosfera aero(ia' 0e utilizar? )omo )ontrol de
estudio el mismo !ro)edimiento usando Streptococus aerus en lugar de L. acidophillus
5Oohler et al', ;8,;7'
/l efe)to inhi(itorio se o(servara en halos de inhi(i)in medidos en mm'
#iteratura citada.
.eh)et U';8,8' %ntifungal /ffe)ts of Lactobacillus spp'.a)teria on Candida Peast'
.ruhn %', Li(erona L', Lis(oa C' y .orzone K' ;88<' Limita)iones de la t)ni)a de
determina)in de C
;
L
;
en el )ondensado del aire es!irado de !a)ientes )on s$ndrome de
distrs res!iratorio adulto' "ontifi)ia Universidad Catli)a de Chile' D,5,87>+D;:<'
De la !arte M' %', Mendoza M', .rito %' ;88<' *dentifi)a)in de es!e)ies de levaduras del
gnero Candida !rovenientes de !a)ientes )on vulvovaginitis' #a)ultad de Medi)ina:
Universidad Central de 6enezuela' ;B5B7> A@:,8D'
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L(stet Kynae)ol' D,5-7>-;<:@'
#eoli .' M', /s)o(ar K' C', Mar$n M' 1' ,AA+' L(ten)in de ?)ido l?)ti)o !or fermenta)in
)on Lactobacillus delbrueckii bulgaricus' 1evista Colom(iana de )ien)ias =u$mi)o
farma)uti)as' ;-'
#lores "' 1, 1ivera 0' 1', Kar)$a J' /', %rriaga %' M' ;88-' /tiolog$a de la infe))in )rvi)o
vaginal en !a)ientes del Cos!ital Ju?rez de M3i)o' 0alud "4(li)a M3i)ana' D+5+7><AD:<AB'
Oari!tas /', 2ulumoglu 0', /rdem .';8,8 %ntifungal /ffe)ts of Lactobacillus spp. Bacteria on
Candida Yeast' OafQas Univ' 6et' #aQ' Derg' ,< 5<7>,8<,:,8<D'
Oohler K' %', %ssefa 0', 1eid K' ;8,;' "ro(ioti) *nterferen)e of Lactobacillus rhamnosus
GR! and Lactobacillus reuteri RC!" Rith the L!!ortunisti) #ungal "athogenCandida
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morfolgi)o de vio!el$)ulas de Candida albicans !rodu)idas en diferentes )ondi)iones de !C
y tem!eratura analizadas !or mi)ros)o!$a !ti)a y de fuerza atmi)a' 1evista Me3i)ana de
Mi)olog$a' -- 5,7 ,:@'
MuHoz J' /', Danoza *' S', Castro %', Ch?vez C' M', Lu&?n 6' M' N', Silson O' J' C', %layo /'
K' ;8,;' %islamiento de Candida albicans de mu&eres )on )andidiasis vaginal atendidas en el
Cos!ital 1egional Do)ente de 2ru&illo "er4' 1evista Cient$fi)a de la #a)ultad de Cien)ias
.iolgi)as' -; 5-7> D;:,8-'
"rez C' L' ;88<' La)to(a)illus "ro(iti)os> 0ustan)ias Naturales .ioa)tivas !ara la
"reven)in de *nfe))iones Urogenitales' 1evista de la 0o)iedad Me3i)ana de
.iote)nolog$a,,8 5,7> < :,-'
0olano 0' L' /' ;88;' /studio so(re agentes etiolgi)os de vaginitis en la mu&er gr?vida
)ostarri)ense' 1evista de .iolog$a 2ro!i)al' +8 5;7 <AA:B,;'
0trus M', Ou)harsQa %', OuQla K', .rzy)h)zy:STo)h M', Maresz O', Ce)zQo "'.' ;88+' 2he in
vitro a)tivity of vaginal La)to(a)illus Rith !ro(ioti) !ro!erties against Candida' *nfe)t Dis
L(stet Kyne)ol' ,-5;7><A:B+'