Selo: Veterinria

A CHOCADEIRA. CONTAMINADA FOR

COMO FONTE DE INFECO PARA
DE PINTOS1
Aspergilius fumigatus
OS EMBRIES
WILIIELM BRADA
Sinopse
Foram realizados experimentos com chocadeira contaminada por
Aspergillus fumir,eius. Conse..
guiu-se fcilmente infectar os embries e isolar o fungo. A desinfeco da incubadeira com for-
mol a 2%, efetuada duas vzes, no se mostrou suficiente para evitar totalmente a infeco.
INTRODUO
A aspergilose uma das primeiras micoses encon-
tradas e descritas em aves. O agente etiolgico foi
isolado eiri 1 6O, recebendo o nome de Aspemgillus
fumigatus Fresenius 1 850.
O fungo afeta em primeiro lugar os pulmes e sa-
cos areos de aves jovens, embora a literatura faa
referncias tambm a casos de aspergilose no sistema
nervoso central (Huben 1 958). A infeco e a disse-
minao da molstia se d antes de tudo pela ina-
lao dos esporos do fungo presentes nos alimentos
e nos alojamentos das aves.
As pesquisas nos ltimos anos demonstraram que,
independentemente das doenas infecciosas que se
transmitem por via vertical, atravs do vo, e por
via horizontal, aps a ecloso, outros micrbios, pre-
sentes no ar da chocadeira, podem atingir os ovos na
incubadeira e infect-los. Chute e Barden (1 964) ve-
rificaram elevada mortalidade de embries de pintos,
relacionada com a presena de fungos no ar am-
biente.
Em estudos anteriores (Chute & O'Meara 1 958)
foi demonstrado que, entre os diversos fungos isola-
dos em pintos, Aspergiflus fumigatus se mostrou um
dos mais patognicos.
O que nos levou a realizar ste trabalho foi o fato
de que, nos ltimos anos, a incidncia de aspergilose
em pintos recm-nascidos aumentou sensivelmente.
Assim, por exemplo, foi isolado por ns A. fumlgatus
em pintos de 3 dias de idade, procedentes de gran-
jas localizadas em diferentes lugares, que receberam
1
1 eeebido em 27 de maio de 1 968 e aceito para pu-
blica6o em 3 de julho de 1968.
Boletim Tcnieo si. 74 do Instituto de Pesquisas e Ex-
erimenta1 0 Agropecuria do Centro-Sul (IPEACS).
Biologista da Selo de Omitopetologla do IPEACS,
Km 47, Campo Grande, GB. ZC.-26.
pintos de 1 dia da mesma fonte. Encontramos tam-
bni leses de aspergilose em pintos de 3 dias, rece-
bendo informaes de que a mortalidade com os mes-
mos sintomas e leses nos rgos se processava a
partir do primeiro dia de vida. A pesquisa foi rea-
lizada com o propsito de obter informaes pessoais
sbre o papel da chocadeira experimentalmente con-
taminada por A. fumigetus as conseqncias decor-
rentes para os ovos nela incubados.
MATERIAL E MTODOS
Foram utilizadas culturas da espcie Aspergithis
fumigatus Fresenius 1 850, isoladas de pintos proce-
dentes de uma granja com elevada mortalidade
(25%). Com estas culturas em Sabouraud, contami-
naram-se gros de trigo, seguindo o mtodo O'Meara
(1 959). Foram utilizadas duas chocadeiras da mar-
ca "Popular", eltricas, de 1 00 volts, com capacidade
para 60 ovos. A temperatura e a umidade se man-
tinham em limites para incubao habitual. Uma in-
cubadeira servia para os experimentos prpriamente
ditos e a outra para o contrle. A idade dos ovos
fecundados, de casca branca sem rachadura, variava
entre 4 a 1 7 dias. Foram efetuados dois testes com
trigo contaminado mantido na incubadeira, dois ex-
perimentos aps afastamento do trigo e limpeza iria-
nual, e um teste aps a desinfeco da chocadeira
cern formol a 2%.
Foram os resultados obtidos que se seguem.
RESULTADOS
Teste n. 1 na chocadeira coes trigo contamin.ado
Foram colocados na chocadeira 1 5 ovos embriona-
dos com 6 a 7 dias de idade. No dia seguinte mor-
reram dois embries sem ser determinada a causa da
morte por agente infeccioso.
Fesq. agropcc. bjs. 4:161-164. 1969
161
162

WHELMBRADA
Aps a permanncia dos ovos por 14 a 16 dias
na chocadeira, nasceram sete pintos, e seis morreram
dentro da casca durante a ecloso. Os sete pintos nas-
cidos foram imediatamente sacrificados, notando-se
em seis dles leses de aspergilose nos pulmes e sa-
cos areos, tendo o fungo sido isolado de cada um
dles. Um pinto no apresentou leses de aspergilose,
mas o fungo foi isolado dos pulmes, sacos areos,
fgado e gema.
Os seis pintos encontrados mortos dentro da cas-
ca, revelaram pnemonia e aerocistite, tendo sido iso-
lado A. fumigatus em todos les.
As cascas dos ovos, tanto dos pintos nascidos como
dos mortos, se apresentaram nove vzes macroscpi-
camente inalteradas; porm, quando trituradas e pas-
sadas em Sabouraud, revelaram crescimento de As-
pergillus fumigatus. As cascas de quatro ovos mostra-
ram manchas de colorao verde azulada, tanto na
superfcie como tambm no interior, particularmente
embaixo da pelcula da casca. Amembrana se revelou
espssa, de colorao cinza-escuro esverdeada, como
demonstram as Figs. 1 e 2. O exame bacteriolgico
revelou o fungo em apro, tanto na superfcie do
vo como na membrana.
Teste n. 2 na chocadeira usada nas condies do
Teste n. 1
Foram colocados na chocadeira 14 ovos embriona-
dos de 17 dias de idade aproximadamente. Aps a
permanncia dos ovos por quatro dias na chocadeira
nasceram oito pintos clinicamente sadios, tendo sido
encontrados, dentro das cascas abertas dc seis ovos,
os embries j evoludos, porm mortos.
Tanto os pintos vivos, quando sacrificados no
1.0
dia de vida, como tambm os pintos mortos, apre-
sentaram leses de aspergilose nos pulmes e sacos
areos, tendo-se isolado o fungo em cada um dos ani-
mais.
Teste n. 3 na mesma chocadeira, porm, com ligeira
limpeza e afastamento do trigo contaminado
Foram colocados desta vez 16 ovos com quatro a
cinco dias de incubao. Aps a permanncia por
sete dias na chocadeira, morreram dois embries no
tendo sido determinada a causa da morte. Entre o
16.0
e
17.0
dias de incubao nasceram trs pintos
clinicamente normais e sem leses patolgicas nas
vias respiratrias, tendo sido isolado A. fumigitus de
dois dsses pintos.
Aps 18 dias de incubao, nasceram quatro pin-
tos sem sintomas de doenas, revelando, porm le-
ses caractersticas de pneumonia. e aerocistite mi-
ctica. De cada um dstes pinto foi isolado o fungo
Fesq. ogropc. brm. 4:161-164. 196
em questo. Sete pintos estavam mortos e presos den-
tro da casca j aberta, mostrando pneumonia nodular
e aerocistite fibrinosa. O exame bacteriolgico feito
dos rgos alterados positivou a infeco por A. fu-
migatus.
Teste n. 4 na chocadeira usada nas condies. do Tes-
te n. 3
Para ste teste foram colocados na chocadeira 20
ovos com 15 dias de incubao. Dois dias depois
morreram dois embries sem ser identificada a "cau-
sa morLr". Entre os
6.0
e 7. 1 dias de incubao nas-
ceram sete pintos, dos quais dois manifestavam dis-
pnia acentuada e leses nos pulmes e sacos areos.
O exame bacteriolgico revelou crescimento de A. fu-
migatvs. Cinco pintos se apresentavam clinicamente
normais e continuaram na chocadeira por mais sete
dias, no revelando durante ste perodo, nenhutn
sintoma de doena. Sacrificados no stimo dia de
vida mostraram, porm, leses nos pulmes e sacos
areos, representadas pok granulomas e presena de
hifas com reao inflamatria, alm de clulas gi-
gantes, demonstradas pelo exame histolgico.
O exame bacteriolgico confirmou o diagnstico de
aspergilose em estudo.
Os 11 embries restantes, evoluidos, estavam mor-
tos dentro das cascas, apresentando-se hemorrgicos
com depsitos fibrinosos nos sacos areos e ndulos
amarelos nos pulmes. De cada um dstes pintos foi
isolado A. fumigatus.
Teste n. 5 na chocadeira desinfectada
Aps o trmino do teste n. 4 foi efetuada rigorosa
limpeza da incubadeira e lavagem com formol a 2%.
Achocadeira ficou vazia durante 15 dias e a desin-
fecsi com formol foi repetida. 15 dias aps a ltima,
desinftco, foram nela colocados 18 ovos para incu-
bao, os quais passaram a ser controlados diriamen-
te pela ovoscopia. Dstes ovos nasceram, aps a in-
cubao de 21 dias, 12 pintos. Dois embries mor-
reram durante a ecloso e quatro, embora evoludos,
no chegaram a romper a casca.
Os embries mortos apresentaram congesto pulmo-
nar, um embrio revelou reas amareladas no fgado,
em dois embries encontramos congesto renal acom-
panhada de dilatao de urteres cheios de sais de
uratos, e um embrio apresentou focos pequenos de
cr amarelada no corao. O exame histolgico dos
rgos alterados demonstrou congesto pulmonar, ex-
tensa degenerao gordurosa do fgado, infiltrao
entr& as fibras miocrdicas de tecido granulomatoso
e gor&iroso,, degenerao hidrpica do epitlio, dos
tubos contornados. Pelo exame bacteriolgico 'isola-
' 4
1
na e 1 ic 1, ta rIa casca do vo.
' 4 4
1'1U. 2

Apergi1Ius fwiigatus na peUcula que foi tirada da casca do vo

Peq. ugropec. hra. 4:162-164. 1969
CHOCADEIRA CONTAMINADA POR Aspergiflua furnigrstua COMO FONTE DE INFECO 183
aios simente em dois embries A. fumlgatus dos pul-
mes e dos sacos areos, enquanto nos outros quatro
o exame foi negativo.
Dos 12 pintos nascidos, seis demonstraram aps seis
dias de permanncia na chocadeira, retardamento do
crescimento, sonolncia, sem todavia apresentarem
sintomas respiratrios. Sacrificados, mostravam rgos
macroscpicamente inalterados. O exame bacteriol-
gico dos pulmes revelou, em dois animais, cresci
usento de A. jurnoatus. Os outros seis pintos, manti-
dos na chocadeira por mais de 21 dias, se compor-
taram clinicamente normais durante tda a sua vida.
DISCUSSO
Entre 65 ovos fecundados e colocados na choca-
deira contaminada, morreram pela infeco por As-
pergillrss fumigatus 32 embries, enquanto na choca-
deira para as testemunhas a incubao ocorreu sem
acidente.
As perdas entre os embries ocorreram independen-
temente da intensidade da contaminao e, j aps
o quarto dia da entrada na chocadeira, era possivel
identificar o fungo como causa da morte de em-
bries. A maioria morreu dentro da casca ou durante
a eclosSo no fim do perfodo da incubao.
Dos 29 pintos que nasceram, dois apresentaram
sintomas respiratrios associados com alteraes nos
pulmes e sacos areos; os demais 27 pintos eram
clinicamente normais. Aps o sacrificio, 25 dessas
aves revelaram leses nos pulmes e sacos areos,
enquanto dois apresentavam os seus rgos macros-
cpicamente inalterados, digno de ser salientado
que se conseguiu isolar o fungo no smente em ani-
mais com rgos patolgicamente alterados, como
tambm em pintos sem leses patolgicas. Estas ob-
servaes foram registradas tambm por Aller (1967)
que, pelo exame cultural, isolou A. fumigatus dos r-
gos respiratrios sem alteraes micticas.
Achamos proveitosos os resultados obtidos durante
o teste na chocadeira desinfectada.
Apesar da desinfeco, morreram no fim da incu-
bao seis embries, sendo isolado o fungo em dois
dles.
Se a morte dos outros quatro embries foi cansada
tambm pela ao do fungo ou pela toxina por le
produzida, foge a nosso conhecimento.
Relacionados com ste aspecto, devemos assinalar
dois fatos:
1.0)
no encontramos outro agente infec-
cioso que pudesse responder pelas mortes em apro;
2) a incubao e ecloso dos ovos galados teste-
munhas Ocorreram sem acidente.
A literatura, todavia, nada registra sbre a toxici-
dade desta estirpe do fungo, embora haja suspeita de
que le desenvolve toxinas. Carri et aZ. (1955) con-
seguiram extrair de cereais contaminados por A. furni-
gatos uma substncia que se mostrou txica para
coelhos, bezerros e cavalos, provocando nestes ani-
mais, aps a aplicao por via oral, lacrirnejamento,
depresso, dispnia, congesto do fgado e congesto
pulmonar e renal.
Os 12 pintos que nasceram no decorrer dste ex-
perimento no apresentaram sintomas de doena, de-
monstrando, porm, seis dles, no stimo dia da per-
manncia na incubadeira, retardamento do crescimen-
to. Quando sacrificados, no revelaram leses suges.
ti'vas de aspergilose. Apesar disso, foi isolado o fungo
em dois dles. Os seis pintos restantes, mantidos mais
de 21 dias dentro da chocadeira, se comportavam
e evoluiam normalmente.
Os nossos resultados demonstraram, tambm, a im-
portncia da casca do vo, como fonte de contamina-
o para o embrio, pois conseguimos isolar o fungo
da casca macrosc6pienmente inalterada.
As providncias a serem tomadas para se evitar a
disseminao de doenas dentro da chocadeira va-
riam muito. Kohler (1966) atribui grande iniportn-
cia ao ar puro, no smente na incubadeira mas tam-
bm nos lugares adjacentes. Muitas vzes no se mos-
tram satisfatrias a limpeza e desinfeco realizadas
com os meios e maneiras habituais. Pela adaptao de
filtros dentro da chocadeira e adjacncias possivel
reduzir sensivelmente a infeco e as perdas.
ACIIADECIMENTOS
Consignamos os nossos agradecimentos ao Dr. Maa
Goto, do Instituto Oswaldo Cruz, pela identifica5o de fungo,
que fui realizada por intermdio do Dr. Jefferson Andrade
dos Santos. Prof. Catedrtico da Escola Fluminense de Ve-
terinria, e ao Dr. Vicente Leite Xavier, Prof; Catedrtico da
Escola d0 Veterirsiria da Universidade Federal Rural do Rio
de Janeiro pia valiosa colaborao dada na reviso do ma-
nuscrito. Os nossos agradecimentos ao Dr. Jrgea Diibereiner,
Veterinrio da Seo de Anatomia Patolgica do IPEACS,
pela ajuda na corfeeo das fotografias.
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tierrztl. Wsclsr, 14:265-268.
Pesq. agropec. beaa. 4:161-164. .1969
164 WILHELM BRADA
THE CONTAMINATED'INCUBATOR AS A CAUSE OF AspergilIus fwnigatus
INFECTION. OE CHICK EMBRYOS .
Experiments with by Aergillus fwnigatu contamnated incutator . . were inade. The author ohtained
easily embryos infected and was able to isolate the fungus A desinfection of the incubatr wfth 2% for-
malin performed twice, was not sufficient to avoid completely. the Infection.
aroe.byiu 4:561-164. 1989