Para las pruebas y exmenes, el odontlogo examinar la boca y los dientes y observar si las encas estn blandas, inflamadas o de color rojo prpura. Las encas generalmente son indoloras o levemente sensibles y es posible que se observe placa y sarro en la base de los dientes. El odontlogo emplear un explorador para examinar minuciosamente las encas con el fin de determinar si usted tiene gingivitis o periodontitis. Aunque generalmente no se necesitan exmenes adicionales, se pueden tomar radiografas de los dientes para ver si la inflamacin se ha diseminado a las estructuras de soporte de los dientes. Como se sabe la mayora de infecciones se pueden prevenir y en el caso de la gingivitis, se puede prevenir mediante la higiene oral regular que incluye el cepillado y el uso del hilo dental todos los das. El perxido de hidrgeno, solucin salina, alcohol en enjuagues bucales tambin puede ser empleado ya que poseen un gran poder blanqueador y ayuda a mantener la cavidad bucal limpia. La crema dental con triclosn tambin puede ser usada ya que segn estudios realizados en los E.E.U.U fue eficaz en la prevencin de la gingivitis. Por otro lado, al asistir al odontlogo, este hace una limpieza de los dientes, para lo cual puede usar diversos instrumentos para aflojar y remover los depsitos de los dientes. Es necesaria una higiene oral cuidadosa despus de una limpieza dental profesional. 2.1. Microbiologa oral La cavidad oral est formada por un conjunto de tejidos, con una amplia gama de microorganismos asociados a ellos, constituyendo un ecosistema. Cuando el ecosistema est en equilibrio, se llama eubiosis y, cuando las relaciones estn alteradas, se llama disbiosis, que correspondera a una boca enferma. La flora microbiana establecida suele vivir en armona con el husped; sin embargo, en la boca, los dientes proveen superficies rgidas para el establecimiento de depsitos bacterianos extensos. La acumulacin y metabolismo de las bacterias en las superficies de la cavidad bucal se consideran causas principales de la gingivitis y otras enfermedades orales. Los depsitos masivos suelen estar asociados con la enfermedad localizada en los tejidos subyacentes blandos y duros. En aproximadamente un milmetro cbico (1mm 3 ) estn presentes ms de diez mil bacteria. Aunque se han identificado ms de unas 300 especies en estos depsitos, todava no ha sido posible identificarse a todas. En la cavidad bucal, los depsitos bacterianos han sido denominados placa dentaria o placa bacteriana. Varios experimentos han demostrado que la acumulacin de bacterias en los dientes producen de manera reproducible una respuesta inflamatoria en los tejidos gingivales lo que posteriormente ocasionara una gingivitis.
2.1.1. Procariotas Son aquellos microorganismos que estn constituidos por clulas procariotas, es decir, clulas que presentan un ADN libre en el citoplasma, ya que no hay ncleo celular. Aqu se encuentran las bacterias que son microorganismos unicelulares con esferas, barras y hlices que a diferencia de las clulas eucariotas no tienen el ncleo definido ni presentan, en general, orgnulos membranosos internos. Muchas bacterias disponen de flagelos o de otros sistemas de desplazamiento y son mviles. Las bacterias son los organismos ms abundantes del planeta que disponen de una pared celular que rodea a su membrana citoplasmtica. Las paredes celulares bacterianas son distintas de las que tienen plantas y hongos, compuestas de celulosa y quitina, respectivamente. Existen dos diferentes tipos de pared celular bacteriana denominadas Gram-positiva y Gram-negativa, respectivamente. Estos nombres provienen de la reaccin de la pared celular a la tincin de Gram, un mtodo tradicionalmente empleado para la clasificacin de las especies bacterianas. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfologa celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximacin a la diferenciacin bacteriana, considerndose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella. Esta importante coloracin diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. En este mtodo de tincin, la extensin bacteriana se cubre con solucin de uno de los colorantes de violeta de metilo, que se deja actuar durante un lapso determinado. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se aade luego una solucin de yodo, que se deja durante el mismo tiempo que la anterior; despus se lava el portaobjetos con alcohol hasta que ste no arrastre ms colorante.
A. Gram negativos Son aquellas bacterias que no se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram, y lo hacen de un color rosado tenue; de ah el nombre. Esta caracterstica est ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que refleja un tipo natural de organizacin bacteriana. Una de las varias caractersticas nicas de las bacterias Gram-negativas es la estructura de la membrana externa. La parte exterior de la membrana comprende un complejo de lipopolisacridos cuya parte lipdica acta como una endotoxina y es responsable de la capacidad patgena del microorganismo. Este componente desencadena una respuesta inmune innata que se caracteriza por la produccin de citosinas y la activacin del sistema inmunolgico. La inflamacin es una consecuencia comn de la produccin de citosinas, que tambin pueden producir toxicidad. Tambin, tienen una gran facilidad para modificar su informacin gentica a travs de conjugacin y traduccin con intercambio de plsmidos y factores de resistencia. Esta propiedad favorece la emergencia de cepas de alta virulencia de cepas resistentes a prcticamente todos los antibiticos y son responsables de la mayora de infecciones intrahospitalarias y causantes de la muerte de individuos debilitados por otros padecimientos. a. Anaerobios facultativos Son aquellas que pueden desarrollar un metabolismo tanto respiratorio usando el oxgeno, como fermentativo en ausencia de oxgeno. Se las suele encontrar en la piel o en la va area alta como parte de la flora normal o tambin tienen reservorios animales y naturales. Por ser gram negativa puede iniciar shock endotxico si alcanza la circulacin y pueden obtener energa en ausencia de oxgeno, pero el oxgeno no les es txico. Segn su morfologa en la gingivitis, se presentan con forma de bastoncillos. Aqu hay bacterias como la capnocytophaga gingivalis que est presente en la flora de la cavidad oral humana y se asla a partir del saco gingival y de la placa dental de personas sanas. Necesitan para su desarrollo CO2, hecho del que deriva su nombre. Morfolgicamente, son bacilos gramnegativos, de aspecto fusiforme semejante al de las fusobacterias, aunque tambin pueden presentar un aspecto curvo o con formas rectas. Carecen de flagelos, pero presentan una movilidad por deslizamiento, tambin caracterstica, por lo que, en medios slidos, las colonias adquieren un aspecto singular, como con un halo que rodea la zona central. Son catalasa negativo (gracias a la prueba catalasa se sabe que en este caso la enzima catalasa no descompone al perxido de hidrgeno), oxidasa negativo (por la prueba oxidasa, se reconoce que esta bacteria no produce citocromo oxidasa y por lo tanto no utiliza oxgeno en la cadena de transporte de electrones) y sus cidos son producidos a partir de D-glucosa, D-maltosa, D- manosa, D-sacarosa. Tienen un metabolismo estrictamente fermentativo, con produccin de cido actico y succnico como productos principales. Actan como patgenos oportunistas en pacientes inmunodeprimidos, produciendo bacteriemias que pueden resultar fatales aunque en trminos generales responden favorablemente al tratamiento antibitico, o bien los pacientes se recuperan una vez que la cifra de neutrfilos alcanza niveles normales.
b. Anaerobios obligados Son aquellos organismos que no pueden vivir o desarrollarse con la presencia de oxgeno y no llevan a cabo fosforilacin oxidativa. Estos mueren en presencia de oxgeno ya que carecen de ciertas enzimas como la catalasa [la cual rompe el enlace del perxido de hidrgeno, H2O2, a agua y oxgeno], la peroxidasa [por la cual NADH+ H2O2 se convierten a NAD y O2] y la superxido dismutasa [por la cual el superxido, O2; es convertido a H2O2]. Estas enzimas detoxifican los radicales libres producidos a partir del perxido de hidrgeno y del oxgeno producidos durante el metabolismo aerobio (en presencia de oxgeno). Con forma de bastoncillo tenemos tambin a las porphyromonas gingivalis que forma parte de la familia de los bacteroides y aprovecha las condiciones que da el husped para generar mayor dao. Esta bacteria es un bacilo corto o cocobacilo, que mide de 0.5 - 0.8 um x 1 - 3.5 um considerado un comensal en la cavidad oral. Su pared celular presenta a nivel de la membrana externa las endotoxinas. Son capsulados, no esporulados, sin flagelos y abundantes fimbrias de diferentes tipos. A nivel superficial presenta vesculas que contienen una variedad de enzimas que juegan un rol importante en su virulencia. As tambin produce mltiples enzimas con capacidad de degradar compuestos proteicos. Est predominantemente en las bolsas periodontales 1 , especficamente en el biofilm subgingival (placa dental que por lo general se ubica en el surco gingival entre el diente y la enca y donde hay predominio de anaerobios estrictos) y es por eso que la muestra para su aislamiento es a partir del biofilm subgingival, que se toma con diferentes instrumentos, como curetas, cintas, conos de papel. Pasado el tiempo, la lectura de las colonias debe reconocer caractersticas como; tamao de 1-2 mm, forma redonda, convexa y ser pigmentados de un color marrn a negro. La
1 Profundizacin patolgica del surco gingival, es decir, una fisura patolgica entre la parte interna de la enca (epitelio crevicular) y la superficie del diente. coloracin gram debe evidenciar una morfologa cocobacilar de 0.5x1-2 um y ser negativa. La prevotella intermedia y prevotella nigrescens tambin estn envueltas en infecciones periodontales como la gingivitis. El primero llamado tambin bacteroides melaninogenicus subsp. Intermedius por su posesin de pigmentos negros que est comnmente aislado de abscesos dentoalveolares y viven en bolsas periodontales (alrededor de los dientes, donde coexisten con otros microbios formando la biopelcula microbiana), donde predominan los anaerobios obligados. Se caracteriza por tener una membrana exterior y el interior, junto con una fina capa de peptidoglicano. La formacin de la placa por lo general es inducida por la falta de higiene oral y conduce a mayores cantidades de fluido crevicular gingival en la boca. Su crecimiento es estimulado por la afluencia de fluido crevicular, ya que contiene nutrientes como hemina y vitamina K, que son esenciales para el crecimiento de los microbios. Las condiciones de crecimiento ideales para la prevotella intermedia tambin incluye un pH ligeramente bsico y una temperatura constante entre 34 y 36 grados Celsius. Este tipo de bacterias aumenta en proporcin a su hbitat subgingival cuando hay un marcado aumento de esteroides. La bacteria los usa como factores de crecimiento, por lo que su nmero es mayor en las mujeres embarazadas. Esto se da con el aumento de prolactina y de estrgeno en el embarazo, las cuales condicionan cambios en las estructuras de todo el organismo y, entre ellas, especialmente en los tejidos de la boca. Estos tejidos aumentan la irrigacin sangunea y sufren una mayor capacidad inflamatoria ante los irritantes locales externos, haciendo que algunas mujeres en perodo de gestacin sean ms susceptibles a problemas odontolgicos como la gingivitis. Prevotella intermedia secreta proteasas IgA que degrada IgA1 salivar y IgA2 (la primera lnea de defensa de la boca contra la invasin de patgenos) hacindolas que inicien la usurpacin de los dientes y de la mucosa oral. Los bacteroides es un gnero de bacterias Gram-negativas con forma de bacilo que son habitantes normales de las cavidades orales, respiratorio, intestinal, y genitourinario de los seres humanos y los animales; algunas especies pueden causar abscesos potencialmente fatales y bacteriemias. Dentro de esta clase de bacterias, existe la B. oris y la B.forsythia o Tannerella forsythia. Este primero se ha implicado en diversas formas de la enfermedad periodontal y puede ser responsable de otras enfermedades en los seres humanos. La segunda es una bacteria fusiforme considerada como agente etiolgico en la enfermedad periodontal. Otras bacterias son las espiroquetas y micoplasmas. Estas primeras forman parte de la familia Spirochaetes y son un filo de bacterias Gram- negativas que tienen clulas alargadas y enrolladas helicoidalmente. Tienen una longitud comprendida entre 5 y 500 m y un dimetro de alrededor de 0,1- 0,6 m. Casi todas son unicelulares, si bien se sospecha que Spirochaeta plicatis pudiera ser pluricelular. Poseen una membrana externa formada por mltiples capas llamada "envoltura celular" o "vaina externa" que rodea completamente el cilindro protoplasmtico. Espiroquetas de ANUG o GUNA: son las bacterias (espiroquetas) que causan la gingivitis lcero-necrotizante aguda, que es una infeccin gingival rpidamente destructiva de etiologa compleja. Se caracteriza clnicamente por necrosis de la papila interdental, sangrado espontneo, dolor y halitosis. En caso de ausencia de tratamiento, puede extenderse lateral y apicalmente (durante la aparicin de sucesivas recidivas) y transformarse en una periodontitis lcero-necrotizante aguda (PUNA) con destruccin del soporte seo dental. La GUNA se caracteriza por la ausencia de signos prodrmicos con aparicin sbita que cursa con dolor, inflamacin y sangrado gingival. El signo principal de la GUNA considerado mayoritariamente como signo patognomnico de la enfermedad es la ulceracin y necrosis de las papilas interdentales con la aparicin de crteres gingivales. Las lesiones se localizan mayoritariamente en la zona anterior mandibular aunque tambin podremos encontrarlo sobre el oprculo de dientes parcialmente erupcionados, principalmente terceros molares, zonas de extracciones, dientes mal posicionados y dientes con bandas de ortodoncia. Es muy frecuente encontrar sobre la superficie ulcerada una pseudomembrana de color gris o gris- amarillento que en caso de ser retirada deja una superficie sangrante. Otros signos que aparecen con frecuencia son: mal olor bucal, sensacin de mal sabor o sabor metlico, excesiva salivacin, sensaciones anormales en los dientes afectados. A medida que se incrementa la severidad y gravedad del cuadro podemos observar la aparicin de fiebre, linfoadenopatas, incremento del pulso sanguneo, leucocitosis, prdida de apetito y fatiga general.
Los micoplasmas (mycoplasma), son bacterias que carecen de pared celular. Debido a la ausencia de pared celular, los micoplasmas no son sensibles a los antibiticos que bloquean la sntesis de la pared celular, como la penicilina u otros antibiticos betalactmicos Pertenece a la clase Mollicutes, tienen genomas pequeos y tienen un bajo contenido de GC (18-40%). Esto hace referencia al bajo contenido de las bases guanina y citosina en el ADN o ARN de la bacteria. Ac se encuentran: M.Orale que es una especie bacteriana de Mycoplasma asociados con las cavidades bucal y farngea de los seres humanos. M.Salivarium est fuertemente implicada en la infeccin oral, enfermedad periodontal, trastornos oculares y del odo, y artritis sptica. M. Campylobacter tienen forma de coma y mviles por la presencia de uno o dos flagelos polares. Miden entre 0,5 y 5 micras de largo por 0,2 a 0,5 micras de ancho, tomando forma cocoide en cultivos antiguos o expuestas de forma prolongada al aire. Estudios han asociado a esta bacteria con la salud y la enfermedad periodontal. Por ejemplo, la presencia de Campylobacter Showae en sujetos periodontalmente sanos e incluidos sujetos con gingivitis. Las fusobacterias (Fusobacteria) son un filo de bacterias de aspecto filamentoso que comprende nicamente el gnero Fusobacterium. Algunos de los organismos que la representan contribuyen a numerosas enfermedades, incluyendo enfermedades periodontales, sndrome de Lemierre y lcera de piel tropical. En humanos, constituyen uno de los principales tipos de flora del aparato digestivo, y se encuentran en muchas partes del tracto gastrointestinal. Las proteobacterias (Proteobacteria) son uno de los principales grupos de bacterias. Incluyen una gran variedad de patgenos, tales como Escherichia, Salmonella, Vibrio, Helicobacter, Neisseria gonorrhoeae, la Burkholderia glumae y muchos otros. Otras son de vida libre, e incluyen muchas de las bacterias responsables de la fijacin del nitrgeno. El grupo se establece principalmente en trminos de secuencias de ARN, y se denominan as en honor al dios griego Proteus, el cual poda cambiar de forma, dada la gran diversidad de formas encontradas en ellas. Tienen una pared celular formada principalmente de lipopolisacridos, su morfologa es muy variable, desde bacilos,, cocos simples hasta gneros con prosteca, y ms, incluso cuerpos fructferos. Muchas se mueven utilizando flagelos, pero algunas lo pueden hacer por deslizamiento bacterial. Entre estas se encuentran las mixobacterias, un grupo nico de bacterias que pueden agruparse para formar cuerpos fructferos. Tienen tambin una gran variedad de tipos de metabolismo. La mayora de las proteobacterias son anaerobias, pero hay muchas excepciones. Las mitocondrias que permiten respirar a las clulas eucariotas se derivan de proteobacterias, probablemente similares a las rickettsias. Las proteobacterias estn clasificadas en alfa, gamma, delta y psilon.