ENTEROBACTERIAS

AGAR Hektoen Enterico (HEA): Agar es un medio moderadamente selectivo y de diferenciacin para el
aislamiento y el cultivo de microorganismos gram negativos entricos, y especialmente para el aislamiento
de especies de Shigella y Salmonella a partir de muestras fecales.
Las sales biliares hacen que el medio sea selectivo, inhibiendo los microorganismos grampositivos y
reduciendo el crecimiento de algunos microorganismos gram-negativos diferentes de Salmonella y
Shigella. Se incluyen lactosa, sacarosa y salicina para una ptima diferenciacin segn el color de las
colonias y del medio adyacente a stas. La Salmonella y la Shigella no fermentan estos compuestos de
carbono y, por tanto, no ocasionan un cambio de color en el sistema indicador del p, en tanto que los
microorganismos como la E. coli, por e!emplo, que fermentan uno o m"s de tales compuestos hasta
convertirlos en "cidos, causan un cambio de color a amarillo o anaran!ado. #l citrato frrico de amonio y
el tiosulfato sdico del medio permiten detectar la produccin de sulfuro de hidrgeno por la Salmonella.
#l sistema indicador del p consta de fucsina "cida y a$ul de bromotimol.
#ste medio se utili$a para muestras fecales de pacientes en quienes se sospecha una infeccin bacteriana
entrica y para materiales similares %p. e!. torundas rectales&, as' como para muestras de alimentos
(icroorganismos )esultados del crecimiento
E. coli *olonias grandes, color amarillo o salmn+ pueden inhibirse algunas cepas
Enterobacter/Klebsiella *olonias grandes, color amarillo o salmn
Proteus *olonias variables, color a$ul verdoso, a$ul o salmn, la mayor'a de las cepas tienen centro negro
o son totalmente de este color
Salmonella *olonias de color a$ul verdoso o a$ul+ la mayor'a de las cepas tienen centro negro o son
totalmente de este color
Shigella *olonias elevadas, verdes y hmedas
Pseudomonas *olonias irregulares, de color verde a marrn
,acterias grampositivas *recimiento nulo o escaso
Salmonella Shigella Agar (agar SS): es un medio selectivo y de diferenciacin para el aislamiento de
bacilos entricos patgenos, en especial los pertenecientes al gnero Salmonella, a partir de muestras
cl'nicas. #n ,- Salmonella Shigella Agar, la diferenciacin de los organismos entricos se logra mediante la
incorporacin de lactosa en el medio. Los organismos que fermentan lactosa producen "cido que, en
presencia del indicador ro!o neutro, propicia la formacin de colonias de color ro!o. Los organismos no
fermentadores de lactosa forman colonias incoloras. #ste ltimo grupo incluye la mayor'a de los patgenos
intestinales, incluidas Salmonella y Shigella. #l tiosulfato sdico y el citrato frrico permiten la deteccin
de produccin de "cido sulfh'drico, como lo demuestran las colonias con centros de color negro. #ste
medio se utili$a para el aislamiento primario de Salmonella a partir de muestras fecales humanas. -ado
que e.isten medios m"s eficaces para el aislamiento de Shigella, no debe utili$arse para el aislamiento de
este organismo.
Se trata de un medio selectivo de diferenciacin para el aislamiento de Salmonella a partir de muestras
fecales o torundas rectales de pacientes en los que hay sospecha de una infeccin entrica bacteriana.
#ste medio no se recomienda para el aislamiento de Shigella. #n cambio, deben utili$arse ,- /L- Agar o
,- e0toen #nteric Agar
XL Agar (agar !e "ilo#a$ li#ina$ !e#o"icolato)1 es un medio moderadamente selectivo y de diferenciacin
para el aislamiento y la diferenciacin de patgenos entricos gram negativos %Salmonella y Shigella& a
partir de muestras cl'nicas. #s adecuado en especial para el aislamiento de la especie Shigella.
/L- Agar es un medio selectivo y de diferenciacin. *ontiene e.tracto de levadura como fuente de
nutrientes y vitaminas. 2tili$a el deso.icolato de sodio como agente selectivo y, por consiguiente, inhibe
los microorganismos gram positivos. La .ilosa se incorpora en el medio dado que la fermentan
pr"cticamente todos los entricos, e.cepto Shigella, y esta propiedad hace posible la diferenciacin de
dicha especie. La lisina se incluye para permitir la diferenciacin del grupo Salmonella de los organismos
no patgenos, dado que, sin lisina, Salmonella fermentar'a r"pidamente la .ilosa y no se distinguir'a de las
especies no patgenas. *uando la Salmonella agota el suministro de .ilosa, la lisina es atacada por la
en$ima lisina descarbo.ilasa, lo que genera un cambio a un p alcalino que imita la reaccin de Shigella.
3ara evitar el cambio similar en los organismos coliformes positivos a la lisina, se a4aden lactosa y
sacarosa para producir "cido en e.ceso. 3ara aumentar la capacidad de diferenciacin de la frmula, se
incluye un sistema indicador de 5S, formado por tiosulfato sdico y citrato frrico amnico, para la
visuali$acin del "cido sulfh'drico producido, lo que origina la formacin de colonias con centros de color
negro. Los organismos no patgenos no productores de 5S no descarbo.ilan la lisina+ por tanto, la
reaccin "cida producida por dichos organismos evita el oscurecimiento de las colonias, lo que sucede slo
con p alcalino o neutro.
E%B Agar (&'rm(la !e Holt)Harri# * Teag(e): es un medio ligeramente selectivo y de diferenciacin para
el aislamiento y la diferenciacin de bacilos gram negativos entricos %#nterobacteriaceae y diversos otros
bacilos gram negativos& a partir de muestras cl'nicas.
,- #(, Agar, (odified contiene colorantes de a$ul de metileno y eosina 6, que inhiben las bacterias gram-
positivas en cierto grado. Los colorantes tambin actan como indicadores diferenciales en respuesta a la
fermentacin de la lactosa o la sacarosa por parte de los microorganismos. Los coliformes producen
colonias de color negro a$ulado, mientras que las colonias de Salmonella y Shigella son incoloras o de
color "mbar transparente. Las colonias de #scherichia coli pueden e.hibir un brillo verde met"lico
caracter'stico debido a la r"pida fermentacin de la lactosa. #l con!unto de medios de aislamiento de ba!a
selectividad para Salmonella en muestras fecales y de otros tipos incluye el #(, Agar %con y sin sacarosa&.
#ste medio puede inhibir el crecimiento de las bacterias gram-positivas como los estreptococos fecales,
estafilococos y levaduras, o bien favorecer su crecimiento con formacin de colonias puntiformes.
BACILOS GRA% NEGATI+OS NO ,ER%ENTAORES
-#e(!o#el Agar (agar cetrimi!a) se utili$a para el aislamiento selectivo de 3seudomonas aeruginosa a
partir de muestras cl'nicas. 3seudomonas aeruginosa es un organismo en el medio ambiente y un
importante patgeno nosocomiaL. ,- 3seudosel Agar se basa en la frmula de agar 7ech, dise4ado por
8ing et al para la produccin mayor de piocianina de 3seudomonas aeruginosa, pero se ha modificado con
la adicin de cetrimida para la inhibicin selectiva de organismos diferentes de 3. aeruginosa. #l medio se
utili$a para el aislamiento de 3. aeruginosa en los campos tanto cl'nicos como farmacuticos, y se
menciona en la farmacopea de #stados 2nidos y la farmacopea europea para uso en pruebas de l'mite
microbiano. #n ,- 3seudosel Agar, la peptona sirve como fuente de nitrgeno, y el glicerol se utili$a como
fuente de carbono y energ'a. La produccin de piocianina se estimula mediante el cloruro de magnesio y
el sulfato pot"sico en el medio. La cetrimida %bromuro de cetil trimetil amonio& es un compuesto de
amonio cuaternario que inhibe una amplia variedad de otros organismos, incluidos otras determinadas
especies de 3seudomonas y organismos relacionados.
)esultados
-espus de la incubacin, e.aminar si las placas presentan crecimiento y la pigmentacin de verde
a$ulada a verde caracter'stica alrededor del crecimiento. La fluorescencia puede detectarse ba!o lu$ 29
%5:; nm&. La presencia de piocianina puede confirmarse e.trayndola con cloroformo. 3. aeruginosa por lo
general produce piociania y fluoresce'na. 3uede observarse una variacin tanto en la morfolog'a de
colonias como en la formacin del pigmento de una cepa a otra. *onsultar las referencias.
Sta.h*lococc(#
Agar %anitol Sala!o: se utili$a para el aislamiento selectivo de estafilococos y para la deteccin de
Staphylococcus aureus a partir de muestras cl'nicas. #l agar sal manitol en una frmula dise4ada por
*hapman para la diferenciacin de estafilococos positivos a la coagulasa %por e!emplo, Staphylococcus
aureus& de los estafilococos negativos a la coagulasa. #ste agar se utili$a para el aislamiento de
estafilococos a partir de muestras cl'nicas, de cosmticos y de pruebas de l'mite microbiano.#l agar sal
manitol contiene peptonas y e.tractos de carne bovina, que suministran los nutrientes esenciales. 2na
concentracin de cloruro sdico de <,:= tiene como resultado una inhibicin parcial o completa de los
organismos bacterianos diferentes de los estafilococos. La fermentacin de manitol, indicada por el
cambio del indicador de ro!o fenol, facilita la diferenciacin de la especie de estafilococos. Los
estafilococos positivos a la coagulasa %por e!emplo, Staphylococcus aureus& producen colonias de color
amarillo y un medio circundante de color amarillo, mientras que los estafilococos negativos a la coagulasa
producen colonias de color ro!o y no producen cambio de color en el indicador de ro!o fenol.
)esultados
Bair!)-arker Agar es un medio moderadamente selectivo y de diferenciacin para el aislamiento y
recuento de Staphylococcus aureus en alimentos, muestras ambientales y cl'nicas. #s un medio
parcialmente selectivo que utili$a la capacidad de los estafilococos de reducir el telurito a telurio y
detectar la lecitinasa a partir de la lecitina del huevo. *ontiene las fuentes de carbono y nitrgeno
necesarias para el crecimiento. La glicina, el cloruro de litio y el telurito pot"sico actan como agentes
selectivos. La yema de huevo constituye el sustrato para determinar la produccin de lecitinasa y,
adem"s, la actividad de lipasa. Los estafilococos producen colonias de color de gris oscuro a negro debido
a la reduccin del telurito+ los estafilococos que producen lecitinasa descomponen la yema de huevo y
crean $onas transparentes alrededor de las colonias correspondientes. #s posible que se forme una $ona
de precipitacin debido a la actividad de lipasa. #l medio no debe utili$arse para el aislamiento de
estafilococos diferentes de S. aureus.
Na#e Te#t Agar (agar !e .r(e/a Na#a B) se utili$a para diferenciar los microorganismos basados en la
actividad de deso.irribonucleasa %->asa&. La triptona proporciona nutrientes para el crecimiento. #l
cloruro sdico mantiene el equilibrio osmtico. #l alto nivel de "cido deso.irribonucleico molecular hace
posible la deteccin de la deso.irribonucleasa %->asa& que despolimeri$a el A->. -espus de la incubacin
del medio con la cepa de prueba, la placa se inunda con "cido clorh'drico, que causa la precipitacin del
A-> polimeri$ado y hace al medio opaco. Los organismos que degradan el A-> producen una $ona
transparente alrededor del "rea de crecimiento. #ste medio se utili$a principalmente en la identificacin
de los estafilococos, pero tambin puede usarse para la deteccin de la actividad de la ->asa en otros
microorganismos.
)esultados
-espus de la aplicacin y penetracin del "cido clorh'drico en el medio, los organismos positivos a la
->asa, tal como Staphylococcus aureus o Serratia marcescens estar"n rodeados de $onas transparentes de
A-> despolimeri$ado, mientras que el medio m"s ale!ado de la banda de inoculacin tendr" un aspecto
opaco y blancu$co debido al A-> polimeri$ado. Las colonias de organismos con resultado negativo a la
->asa no presentar"n $onas transparentes alrededor de las colonias.