LA CITOTOXINA K (CITK

Cuando el Bacillus cereus se desarrolla en el intestino, segrega una toxina que

destruye las clulas epiteliales del intestino y produce la enfermedad. En
concreto, existen tres toxinas que producen diarrea: la citotoxina K (CitK), la
enterotoxina no hemoltica (ENH) y la hemolisina BL (HBL).

A partir de esta informacin, la cientfica noruega Annette Fagerlund, de la
Norwegian School of Veterinary Science, investig cmo funcionan estas
toxinas a nivel molecular, cmo est regulada su produccin y cmo se
segregan a partir de la clula bacteriana. Conocer esto es fundamental para
desarrollar mtodos que combatan al B. cereus, que en Noruega es, en la
actualidad, la causa ms frecuente de intoxicacin alimentaria de origen
bacteriano.

Que el B. cereus puede producir diarrea es algo que haba demostrado
originariamente Steinar Hauge en 1948. En la dcada de los 90, Per Granum y
su grupo de la Facultad de Ciencias Veterinarias de Noruega identificaron dos
de las toxinas que producen la enfermedad: CitK y ENH. En su investigacin,
Fagerlund ha descrito estas toxinas para saber cmo contribuyen a causar la
diarrea.

La toxina CitK fue descubierta originariamente como consecuencia de un brote
de intoxicacin alimentaria en 1998 en el que fallecieron tres personas. En su
tesis, Fagerlund seala que la cepa bacteriana que caus este brote en
concreto perteneca a una lnea extremadamente rara de B. cereus, que lo ms
probable es que a da de hoy sea una nueva especie. Adems, se ha
demostrado que CitK existe tambin en lneas ordinarias de B. cereus, pero
que la toxina es una variante que no produce un dao significativo a las clulas.

Esta investigacin ha demostrado que tanto CitK como ENH crean poros en las
membranas de las clulas a las que atacan. La ENH, por su lado, est
relacionada con HBL, la tercera toxina del B. cereus, y es la que puede producir
toxicidad alimentaria. Fagerlund ha demostrado que la toxina ENH consta de
tres protenas diferentes y que las tres son necesarias para producir el mximo
dao a las clulas.









































Accin de la lisozima en el peptidoglucano
Un viejo refrn dice que Dios llama a la puerta de un hombre solo una vez en la
vida. No es el caso de Sir Alexander Fleming a la de l llamo dos veces (o
ms), aunque es necesario coincidir que no es suficiente con el llamado, amn
de l, es necesario escuchar y responder.
Segn se cuenta el descubrimiento de la lisozima tuvo lugar cuando las
lagrimas de un nio (que estaba en el laboratorio donde trabajaba Fleming),
caen en un tubo y aclaran una suspensinMicrococcus lysodeikticus, que, hoy
se sabe, es la bacteria mas sensible a la lisozima, ma siii....
Este hecho esta un poco menos difundido que la novelesca historia de la
espora de Peniciliumque entro por la ventana del laboratorio de Fleming, cayo
en una placa de Petri y al crecer puso de manifiesto la accin bactericida
del antibitico que llamo penicilina....( Florey y Chain en Oxford la aislaron,
dieron las pautas de su produccin industrial y al hacerlo pusieron en marcha la
era de los antibiticos, por ello, Fleming , Florey y Chain recibieron el premio
Nobel en 1945 )
La lisozima descubierta en 1922, es una enzima que rompe el enlace beta
glucosdico de la murena. Se la encuentra en el lquido lagrimal, secreciones
nasales y en la clara de huevo. Tambin se la ha aislado de bacterias y
bacterifagos. La accin de la lisozima se pone en evidencia por un
aclaramiento rpido de una suspensin bacteriana, Micrococcus
lysodeikticus ya se lisa con 1 ug de lisozima / ml. Para lisar otras bacterias
p.e Bacillus megaterium se necesitan 50 ug / ml . La capa de murena de
muchas bacterias Gram negativas solo es atacada por la lisozima cuando se
aade EDTA (Etilen-diamino-tetractico).
El mecanismo de lisis es el siguiente: la destruccin de la pared celular deja al
protoplasma de las bacterias rodeado nicamente por la membrana celular
("protoplasto"), lo cual convierte a la bacteria en un organismo
extraordinariamente sensible a las variaciones de tonicidad del medio, esta es
la base del fenmeno de aclaracin que tiene lugar luego de la accin de la
lisozima, cuando la solucin es hipotnica.









Los protoplastos son estables en medios hipertnicos e isotnicos; en medios
hipotnicos, tal lo sealado, estallan y dejan restos de membrana
citoplasmtica llamados "fantasmas" (ghosts).
El proceso de sntesis de la pared celular comienza en el citoplasma
bacteriano, a partir de N-acetilglucosamina-1-fosfato que se une
al UDP (uridin difosfato).

El UDP se combina con la N-acetilglucosamina-1-fosfato, para dar UDP-N-
acetilglucosamina que primero forma el ter lctico y luego en sucesivos
pasos enzimticos se unen al mismo los cinco aminocidos para formar el N-
acetilmurmico.

En el siguiente paso, que ocurre en el mbito de la membrana
citoplasmtica la molcula que es hidrfila cambia a lipfila, lo cual facilita
su transporte, por el cambio del UDP por undecaprenil-fosfato y el agregado
de un pentapptido de glicina a nivel de la L-lisina

En la siguiente fase, en el mbito de la pared celular, se produce la
transglucosidacin y formacin del enlace beta alargando de esta manera la
molcula.

Los enlaces transversales entre molculas del polmero se produce por
transpeptidacin, se libera una D-alanina y el grupo carboxilo se une a un
grupo amino de la lisina de otro oligopptido, tambin se libera el
undecaprenil-fosfato.
La penicilina interfiere en este ultimo paso, es decir impide la unin
transversal o puente interpeptdico pero no la elongacin del polmero. De la
misma manera actan las cefalosporinas, vancomicina, bacitracina y
cicloserina. Debe notarse que la sntesis de la pared no se realiza cuando no
hay lisina disponible o cuando se impide la racemizacin de la L-alanina y por
lo tanto la disponibilidad de la D-alanina por efecto de la c-clicoserina
(oxamicina).

























APORTES CHRISTIAN JOACHIM GRAM

( 1853-1938) Microbilogo y mdico dans. La vida e investigacin de Gram
transcurre en Copenhague, donde fue profesor de patologa y teraputica en la
univerisidad de dicha ciudad. En 1884, durante su viaje a Berln, dise y
present el mtodo microbiolgico de tincin de bacterias que lleva su nombre.
Se compone de yodo, yoduro potsico y agua, y permite teir determinados
elementos por contraste con otros o con el fondo. El mtodo de Gram permite
clasificar a las bacterias en dos tipos fundamentales, grampositivas y
gramnegativas. La diferencia entre bacterias grampositivas y gramnegativas
est en funcin de si retienen o no el colorante cristal violeta despus de una
serie de tratamientos. Esto permite permite averiguar que tipo de pared celular
tienen las bacterias. Otros microorganismos tambin responden a este tipo de
tinciones, como por ejemplo las levaduras, que son grampositivas y las
rickettsias, que son gramnegativas.













LOS APORTES DE LOUIS PASTEUR

Este cientfico francs, es uno de los grandes investigadores mundiales, que ha
pasado a la posteridad, ya que sus notables investigaciones lograron impulsar
y desarrollar la microbiologa moderna; sin ello, hubiera sido otro el panorama
de esta importante rama de la medicina.

Naci el 27 de diciembre en 1822, en Dole (Francia), estudi Ciencias Fsicas
en la Escuela Normal Superior. Posteriormente como profesor de ciencias en
Estrasburgo y en Pars, inicia sus primeras investigaciones en 1847 y descubre
el dimorfismo del cido tartrico y la contrapuesta accin de cada una de sus
formas cristalinas sobre el plano de polarizacin de la luz (dismetra de los
cristales). Posteriormente estudi tres grandes aspectos:



- Generacin espontnea.

- Diversas fermentaciones.

- Enfermedades contagiosas de los animales y el hombre.


En relacin a las fermentaciones. El descubrimiento de un fenmeno biolgico
de gran alcance, al demostrar que la fermentacin es debida a la presencia de
microorganismos. Ello, con sus estudios de desinfeccin y esterilizacin, sirvi
de base para el desarrollo de las tcnicas de pasteurizacin. Estos
descubrimientos suponen un nuevo camino para la medicina, y con ellos la
bacteriologa se DESARROLLA COMO UNA NUEVA RAMA DE LA CIENCIA
MEDICA.

En 1857: Fermentacin lctica: descubrimiento de la bacteria que la produce.

En 1860: Fermentacin butrica: carcter anaerobio de sus agentes.

1861-1876: Fermentacin alcohlica, invencin de la pasteurizacin para evitar
las enfermedades del vino y de la cerveza. Pasteur demuestra que los
hongos de los vinos, siempre presentes, son los causantes de la fermentacin
actica, responsable de malograr la formacin y conservacin del vino. Seala
que si se calienta el vino durante un minuto con la botella cerrada (69-75C), se
evita su descomposicin. Crea ENTONCES EL PROCESO DE
PASTEURIZACION, que constituye una base fundamental de la preparacin de
alimentos del tipo conservas y lcteos.

En relacin a las enfermedades contagiosas de los animales y el hombre:

1870: Estudia el problema (pelvine) del gusano de la seda: descubre los
agentes de la enfermedad y descubre el modo de evitarlas.

1877: Estudia el Carbunco: trabajando en el control de la enfermedad
(carbonosa) conocida como enfermedad de los campos malditos de Beauce,
por la gran mortandad que produca en los animales vacunos; investiga y
desarrolla una vacuna contra este flagelo, logrando un xito publicitario sin
precedentes para la ciencia, con un experimento pblico en Poeulli la Fort.

1880: Estudia el Clera de las gallinas: desarrolla la vacuna de ellas.

Otras investigaciones fueron: Sobre la erisipela del cerdo, la peripneumona de
los bvidos.

Desde 1868 se enferm de hemipleja y tuvo la lamentable muerte de tres de
sus hijos, a pesar de lo cual sigui investigando tercamente y tenazmente.

A partir de 1881, trabaja en la patologa infecciosa del hombre e investiga: la
septicemia puerperal, el furnculo, la osteomielitis y la rabia.

Importantes y notables fueron sus estudios sobre la rabia: tras la provocacin
artificial de la enfermedad, logr en el laboratorio la vacunacin preventiva
mediante la inyeccin de suspensiones envejecidas de mdula espinal
infectada (de animales infectados); poco despus el 6 de julio de 1885 era
vacunado con xito, contra la rabia, el primer ser humano, el nio pastor
Joseph Meister, de 9 aos, mordido por un perro rabioso, y el mtodo ganaba
fama universal.

Todos estos aportes e investigaciones de este notable cientfico, motivaron que
el gobierno francs fundara el primer Instituto Pasteur en 1888 (un ao antes
de morir Pasteur), rindiendo as un merecido homenaje a este valioso cientfico
universal.

Este Instituto se especializa en la investigacin y la fabricacin de vacunas,
asimismo es un importante centro de capacitacin para diversos investigadores
de todo el mundo. En los ltimos aos han sido importantes diversas
investigaciones, as por ejemplo, en este Instituto se descubri en 1983, el
agente del virus del SIDA (VIH 1) y posteriormente se descubri un segundo
agente (VIH 2).

Por ello, el recordar los 100 aos del fallecimiento de Louis Pasteur, nos debe
servir para valorar los distintos aportes que su actividad rindi estando vivo y
cmo su obra contina viva y actual en los grandes Institutos que llevan su
nombre alrededor del mundo.