Electrnica Industrial Universidad de los Llanos 2014

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LABORATORIO 1- MODELO ELCTRICO DE LA MEMBRANA CELULAR

Fabin Andrs Lozano Vargas
e-mail: f.andresl@hotmail.com
Jeisson Andrs Lpez Velsquez
e-mail: andreslopez-92@hotmail.com
Leonardo Conde Crdenas
e-mail: j.leonardoccf@live.com



RESUMEN:

Mediante el modelo elctrico de la membrana celular se logro
adquirir los valores de las corrientes para las diferentes
conductancias que se pueden presentar en la membrana, esto
se conoce tericamente como diferencia de concentracin de
cada especie inica. Comparando las magnitudes de los
canales inicos selectivos podemos observar el tipo de
permeabilidad de la membrana.

PALABRAS CLAVE:
Modelo elctrico, especie inica, canales inicos
selectivos, permeabilidad.


1. INTRODUCCIN.

En este informe se mostrara el desarroll paso a paso
de la Electrofisiologa (modelo elctrico de la membrana
celular), se mostrara el respectivo circuito con diferentes
valores de resistencia entre , k y M. Tambin se
expondrn los fundamentos tericos necesarios para
entender el funcionamiento del laboratorio.


2. OBJETIVOS

2.1 Objetivo General.

El objetivo del presente laboratorio, es determinar la
permeabilidad de la membrana celular comparando los
valores de las corrientes obtenidas con el circuito
equivalente a est. Comparar las magnitudes de las
corrientes inicas y as determinar a qu elemento es
permeable.

2.2 Objetivos especficos.

Entender el funcionamiento de la
Electrofisiologa (modelo elctrico de la
membrana celular), a travs del correcto uso de
los elementos bsicos para la medicin de las
variables.
Entender el funcionamiento de una membrana
en su interior de forma simblica.
Implementar el circuito con diferentes valores
de resistencia para ver que comportamiento
tienen ICl, INa IK.
Comprobar que lo visto en clase es posible
dentro de sus rangos de error tolerables
3. MARCO TERICO.

Ahora se explicar un poco los fundamentos
tericos que fueron aplicados en el laboratorio.

3.1 MEMBRANA CELULAR.

La membrana plasmtica, membrana celular,
membrana citoplasmtica o plasmalema, es una bicapa
lipdica que delimita todas las clulas. Es una estructura
laminada formada por fosfolpidos, glicolpidos y
protenas que rodea, limita, da forma y contribuye a
mantener el equilibrio entre el interior (medio
intracelular) y el exterior (medio extracelular) de las
clulas. Regula la entrada y salida de muchas
sustancias entre el citoplasma y el medio extracelular.
Es similar a las membranas que delimitan los orgnulos
de clulas eucariotas.

Est compuesta por dos lminas que sirven de
"contenedor" para el citosol y los distintos
compartimentos internos de la clula, as como tambin
otorga proteccin mecnica. Est formada
principalmente por fosfolpidos (fosfatidiletanolamina y
fosfatidilcolina), colesterol, glcidos y protenas
(integrales y perifricas).

La principal caracterstica de esta barrera es su
permeabilidad selectiva, lo que le permite seleccionar las
molculas que deben entrar y salir de la clula. De esta
forma se mantiene estable el medio intracelular,
regulando el paso de agua, iones y metabolitos, a la vez
que mantiene el potencial electroqumico (haciendo que
el medio interno est cargado negativamente). La
membrana plasmtica es capaz de recibir seales que
permiten el ingreso de partculas a su interior.

Cuando una molcula de gran tamao atraviesa o
es expulsada de la clula y se invagina parte de la
membrana plasmtica para recubrirlas cuando estn en
el interior ocurren respectivamente los procesos de
endocitosis y exocitosis.
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Tiene un grosor aproximado de 7,5 nm y no es
visible al microscopio ptico pero s al microscopio
electrnico, donde se pueden observar dos capas
oscuras bilaterales y una central ms clara. En las
clulas procariotas y en las eucariotas osmtrofas como
plantas y hongos, se sita bajo otra capa exterior,
denominada pared celular.

La membrana celular cumple varias funciones: a)
delimita y protege las clulas; b) es una barrera
selectivamente permeable, ya que impide el libre
intercambio de materiales de un lado a otro, pero al
mismo tiempo proporcionan el medio para comunicar un
espacio con otro; c) permite el paso o transporte de
solutos de un lado a otro de la clula, pues regula el
intercambio de sustancias entre el interior y el exterior
de la clula siguiendo un gradiente de concentracin; d)
poseen receptores qumicos que se combinan con
molculas especficas que permiten a la membrana
recibir seales y responder de manera especfica, por
ejemplo, inhibiendo o estimulando actividades internas
como el inicio de la divisin celular, la elaboracin de
ms glucgeno, movimiento celular, liberacin de calcio
de las reservas internas, etc.


3.2 COMPOSICIN QUMICA.

Antiguamente se crea que la membrana
plasmtica era un conjunto esttico formado por la
sucesin de capas protenas-lpidos-lpidos-protenas.
Hoy en da se concibe como una estructura dinmica
cuyo modelo se conoce como "mosaico fluido", trmino
acuado por S. J. Singer y G. L. Nicolson en 1972. Esta
estructura general -modelo unitario- se presenta tambin
en todo el sistema de endomembranas (membranas de
los diversos orgnulos del interior de la clula), como
retculo endoplasmtico, aparato de Golgi y envoltura
nuclear, y los de otros orgnulos, como las mitocondrias
y los plastos, que proceden de endosimbiosis.

La composicin qumica de la membrana
plasmtica vara entre clulas dependiendo de la funcin
o del tejido en la que se encuentren, pero se puede
estudiar de forma general. La membrana plasmtica
est compuesta por una doble capa de fosfolpidos, por
protenas unidas no covalentemente a esa bicapa, y
glcidos unidos covalentemente a los lpidos o a las
protenas. Las molculas ms numerosas son las de
lpidos, ya que se calcula que por cada 50 lpidos hay
una protena. Sin embargo, las protenas, debido a su
mayor tamao, representan aproximadamente el 50% de
la masa de la membrana.

3.2.1 CAPA LIPDICA.

El orden de las llamadas cabezas hidroflicas y las
colas hidrofbicas de la bicapa lipdica impide que
solutos polares, como sales minerales, agua,
carbohidratos y protenas, difundan a travs de la
membrana, pero generalmente permite la difusin pasiva
de las molculas hidrofbicas. Esto permite a la clula
controlar el movimiento de estas sustancias va
complejos de protena transmembranal tales como poros
y caminos, que permiten el paso de iones especficos
como el sodio y el potasio.

Las dos capas de molculas fosfolpidas forman un
"sndwich" con las colas de cido graso dispuestos
hacia el centro de la membrana plasmtica y las
cabezas de fosfolpidos hacia los medios acuosos que
se encuentran dentro y fuera de la clula.


3.2.2 COMPONENTES LIPDICOS.

El 98% de los lpidos presentes en las membranas
celulares son anfipticos, es decir que presentan un
extremo hidrfilo (que tiene afinidad e interacciona con
el agua) y un extremo hidrofbico (que repele el agua).
Los ms abundantes son los fosfoglicridos
(fosfolpidos) y los esfingolpidos, que se encuentran en
todas las clulas; le siguen los glucolpidos, as como
esteroides (sobre todo colesterol). Estos ltimos no
existen o son escasos en las membranas plasmticas de
las clulas procariotas. Existen tambin grasas neutras,
que son lpidos no anfipticos, pero slo representan un
2% del total de lpidos de membrana.

Fosfoglicridos. Tienen una molcula de glicerol
con la que se esterifica un cido fosfrico y dos
cidos grasos de cadena larga; los principales
fosfoglicridos de membrana son la
fosfatidiletanolamina o cefalina, la fosfatidilcolina
o lecitina, el fosfatidilinositol y la fosfatidilserina.

Esfingolpidos. Son lpidos de membrana
constituidos por ceramida (esfingosina + cido
graso); solo la familia de la esfingomielina posee
fsforo; el resto poseen glcidos y se denominan por
ello glucoesfingolpidos o, simplemente glucolpidos.
Los cerebrsidos poseen principalmente glucosa,
galactosa y sus derivados (como N-
acetilglucosamina y N-acetilgalactosamina). Los
ganglisidos contienen una o ms unidades de cido
N-acetilneuramnico (cido silico).

Colesterol. El colesterol representa un 23% de
los lpidos de membrana. Sus molculas son
pequeas y ms anfipticas en comparacin con
otros lpidos. Se dispone con el grupo hidroxilo hacia
el exterior de la clula (ya que ese hidroxilo
interacta con el agua). El colesterol es un factor
importante en la fluidez y permeabilidad de la
membrana ya que ocupa los huecos dejados por
otras molculas. A mayor cantidad de colesterol,
menos permeable y ms dura es la membrana. Se
ha postulado que los lpidos de membrana se
podran encontrar en dos formas: como un lquido
bidimensional, y de una forma ms estructurada, en
particular cuando estn unidos a algunas protenas
formando las llamadas balsas lipdicas. Se cree que
el colesterol podra tener un papel importante en la
organizacin de estas ltimas. Su funcin en la
membrana plasmtica es evitar que se adhieran las
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colas de cido graso de la bicapa, mejorando la
fluidez de la membrana. En las membranas de las
clulas vegetales son ms abundantes los
fitoesteroles.

3.2.3 COMPONENTES PROTEICOS.

El porcentaje de protenas oscila entre un 20% en
la mielina de las neuronas y un 70% en la membrana
interna mitocondrial; el 80% son intrnsecas, mientras
que el 20% restantes son extrnsecas. Las protenas son
responsables de las funciones dinmicas de la
membrana, por lo que cada membrana tiene una
dotacin muy especfica de protenas; las membranas
intracelulares tienen una elevada proporcin de
protenas debido al elevado nmero de actividades
enzimticas que albergan. En la membrana las protenas
desempea diversas funciones: transportadoras,
conectoras (conectan la membrana con la matriz
extracelular o con el interior), receptoras (encargadas
del reconocimiento celular, adhesin) y enzimas.

Las protenas de la membrana plasmtica se pueden
clasificar segn cmo se dispongan en la bicapa lipdica:

Protenas integrales. Embebidas en la bicapa
lipdica, atraviesan la membrana una o varias veces,
asomando por una o las dos caras (protenas
transmembrana); o bien mediante enlaces
covalentes con un lpido o un glcido de la
membrana. Su aislamiento requiere la ruptura de la
bicapa.

Protenas perifricas. A un lado u otro de la
bicapa lipdica, pueden estar unidas dbilmente por
enlaces no covalentes. Fcilmente separables de la
bicapa, sin provocar su ruptura.


Protena de membrana fijada a lpidos. Se
localiza fuera de la bicapa lipdica, ya sea en la
superficie extracelular o intracelular, conectada a los
lpidos mediante enlaces covalentes.

En el componente proteico reside la mayor parte de la
funcionalidad de la membrana; las diferentes protenas
realizan funciones especficas:

Protenas estructurales o de anclaje: estas
protenas hacen de "eslabn clave" unindose al
citoesqueleto y la matriz extracelular.

Protenas receptoras: que se encargan de la
recepcin y transduccin de seales qumicas.

Protenas de transporte: mantienen un
gradiente electroqumico mediante el transporte de
membrana de diversos iones.

Estas a su vez pueden ser:

Protenas transportadoras: Son enzimas con
centros de reaccin que sufren cambios
conformacionales.
Protenas de canal: Dejan un canal hidroflico
por donde pasan los iones.







3.2.4 COMPONENTES GLUCIDICOS.

Estn en la membrana unida covalentemente a las
protenas o a los lpidos. Pueden ser polisacridos u
oligosacridos. Se encuentran en el exterior de la
membrana formando el glicocalix. Representan el 8%
del peso seco de la membrana plasmtica. Sus
principales funciones son dar soporte a la membrana y
el reconocimiento celular (colaboran en la identificacin
de las seales qumicas de la clula).

3.3 PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA.

La permeabilidad de las membranas es la facilidad
de las molculas para atravesarla. Esto depende
principalmente de la carga elctrica y, en menor medida,
de la masa molar de la molcula. Molculas pequeas o
con carga elctrica neutra pasan la membrana ms
fcilmente que elementos cargados elctricamente y
molculas grandes. Adems, la membrana es selectiva,
lo que significa que permite la entrada de unas
molculas y restringe la de otras.

La bicapa lipdica, debido a su interior hidrofbico,
acta como una barrera altamente impermeable a la
mayora de molculas polares, impidiendo que la mayor
parte del contenido hidrosoluble de la clula salga de
ella. Pero por esta misma razn, las clulas han tenido
que desarrollar sistemas especiales para transporte las
molculas polares a travs de sus membranas.

Con el tiempo suficiente, esencialmente cualquier
molcula difundir a travs de una bicapa lipdica libre
de protenas, a favor de su gradiente de concentracin.
Sin embargo la velocidad a la que una molcula difunde
a travs de una bicapa lipdica vara enormemente,
dependiendo en gran parte del tamao de la molcula y
de su solubilidad relativa al aceite (es decir, cuanto ms
hidrofbica o no polar), tanto ms rpidamente difundir
a travs de una bicapa.

Las molculas pequeas no polares se disuelven
fcilmente en las bicapas lipdicas y por lo tanto difunden
con rapidez a travs de ellas. Las molculas polares sin
carga si su tamao es suficientemente reducido tambin
difunden rpidamente a travs de una bicapa. Ejemplos
de estas sustancias no polares son los solventes
orgnicos, que presentan una polaridad alta o baja. Por
ejemplo: el metanol, la acetona, el etanol, la urea, etc.
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La reaccin que provocan en la membrana
plasmtica, dichos solventes, al no ser capaces de
atravesar dicha membrana, es de degradacin, al ser
molculas muy polares provocan que la bicapa lipdica
se degrade, que sufra un desgaste. Hay que tomar en
cuenta que la permeabilidad de cada soluto se expresa
como su penetracin relativa. Los alcoholes, como
ejemplo de ellos el metanol, etanol, butanol, octanol,
etc., pueden actuar en las membranas biolgicas
fundamentalmente de 3 formas:

Alterando la fluidez de las membranas, lo que
indirectamente afectara el funcionamiento de
las protenas como enzimas y canales
Produciendo una deshidratacin a nivel de las
membranas
Interactuando directamente con las protenas
de la membrana.

La membrana plasmtica puede sufrir un proceso
llamado lisis, que hace referencia al rompimiento de la
membrana, ya sea mecnicamente, qumicamente o por
alguna combinacin de los dos. Para realizar la lisis
qumica, las clulas se suspenden en una solucin que
contiene detergentes y otros reactivos que interfieren
con los enlaces qumicos que sostienen las protenas de
las membranas juntas. Esto resulta en la rotura de la
membrana y la liberacin de los componentes
intracelulares.

Existen dos tipos de lisis: la lisis tradicional
(mecnica) y la lisis por medio de detergentes (qumica)
haciendo referencia al prrafo anterior:

Dentro de la tradicional se encuentran tres
ejemplos; Homogenizacin lquida, donde las clulas se
rompen al ser forzadas a pasar por espacios muy
pequeos, Sonificacin, aplicada a ondas de alta
frecuencia rompen las clulas y Congelamiento, lo cual
son ciclos de congelacin continuos rompen la clula
induciendo la formacin de cristales.

De igual manera esta la lisis por medio de
detergentes (qumica), donde los detergentes rompen la
barrera lipdica de una manera suave, solubilizando las
protenas e interrumpiendo la interaccin lpido-lpido,
lpido-protena y protena-protena. Los detergentes, al
igual que los lpidos, se asocian entre ellos y se unen a
superficies hidrofbicas. Se componen de una cabeza
polar hidroflica y una cola no polar hidrofbica.

La permeabilidad depende de los siguientes
factores:

Solubilidad en los lpidos: Las sustancias que
se disuelven en los lpidos (molculas
hidrfobas, no polares) penetran con facilidad
en la membrana dado que est compuesta en
su mayor parte por fosfolpidos.

Tamao: la ms grande parte de las molculas
de gran tamao no pasan a travs de la
membrana. Slo un pequeo nmero de
molculas polares de pequeo tamao pueden
atravesar la capa de fosfolpidos.

Carga: Las molculas cargadas y los iones no
pueden pasar, en condiciones normales, a
travs de la membrana. Sin embargo, algunas
sustancias cargadas pueden pasar por los
canales proteicos o con la ayuda de una
protena transportadora.

Tambin depende de las protenas de membrana
de tipo:

Canales: algunas protenas forman canales
llenos de agua por donde pueden pasar
sustancias polares o cargadas elctricamente
que no atraviesan la capa de fosfolpidos.

Transportadoras: otras protenas se unen a la
sustancia de un lado de la membrana y la
llevan al otro lado donde la liberan.


3.4 MODELO ELCTRICO DE LA
MEMBRANA CELULAR.

El comportamiento de la membrana celular puede
ser descrito mediante un modelo elctrico que permite a
partir de las concentraciones inicas que participan en el
potencial de membrana y sus canales inicos selectivos,
determinar las diferencias de concentracin de cada
especie inica a ambos lados de la membrana, es decir,
la fuerza con la cual cada ion tiende a moverse de un
lado a otro de la membrana.

Esta fuerza impulsora para los iones es la
diferencia entre el potencial de membrana y el potencial
de equilibrio para cada ion, visto desde el punto elctrico
esta fuerza se puede representar como una batera, la
cual tiene la capacidad de generar corrientes inicas en
la medida en que la membrana permita el flujo de iones.

Esto no ocurre libremente ya que la membrana
presenta una resistencia selectiva para cada ion, la cual
se encuentra en serie con la batera y debido que para
cada especie inica se tiene una va independiente, es
decir, un canal inico selectivo especfico, cada batera
con su respectiva resistencia se conecta en paralelo a
las dems.

Concluyendo se puede decir que el flujo de iones,
la fuerza impulsora y la permeabilidad de la membrana
se encuentran definidas dentro de los trminos de
corriente, voltaje y resistencia (o conductancia), los
cuales pueden ser asociados mediante la ley de ohm.


4. PROCEDIMIENTO.

En esta seccin explicaremos paso a paso como
se realiz el laboratorio. Se debe aclarar que los valores
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que adquieren las fuentes durante el desarrollo del
laboratorio son valores amplificados, para lograr una
mejor comprensin y visualizacin del comportamiento
del circuito, as pues los valores son en el orden de los
miliamperios y microamperios.

4.1. CLCULOS

a) La primer parte fue realizar en siguiente montaje y
tambin calcular las corrientes respectivas



Figura 1. Circuito elctrico de la membrana

Para realizar los clculos se utilizaron mallas,
obteniendo las siguientes ecuaciones:

(1)

(2)

Ahora, para el primer caso tenemos que:

Entonces, reemplazando en (1) y (2) tenemos:

Al resolver tenemos que:

Ahora, para el segundo caso tenemos que:

Entonces, reemplazando en (1) y (2) tenemos:

Al resolver tenemos que:

Ahora, para el tercer caso tenemos que:

Entonces, reemplazando en (1) y (2) tenemos:

Al resolver tenemos que:

Para
Valor medido Valor Calculado

0,411 A 0,427 A

0,164 A 0,172 A

0,247 A 0,255 A

Para
Valor medido Valor Calculado

470 A 0,470 mA

185 A 0,187 mA

280 A 0,283 A

Para
Valor medido Valor Calculado

6,3 A 0,0068 mA

5,32 A 0,00546 mA

710 nA 0,75 uA
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4.2. SIMULACIONES



Simulacin (resistencias en valor de ohmios)

Para
Valor Simulado

0,429 A

0,173 A

0,256 A



Simulacin (resistencias en valor de kilo ohmios)

Para
Valor Simulado

470 A

284 A

188 A




Simulacin (resistencias en valor de Mega ohmios)

Para
Valor Simulado

3,71 uA

3,41 uA

0,31 uA



b) Al colocar un condensador de 1uF paralelo a los
canales inicos, podemos ver que la permeabilidad
sigue siendo la misma ya que los valores en las
corrientes sufren un cambio mnimo y se conserva la
relacin de magnitudes y diferencias entre ellas en cada
circuito.


Simulacin (resistencias en valor de ohmios)

Para
Valor Simulado

429 mA

173 mA

256 mA


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Simulacin (resistencias en valor de kilo ohmios)

Para
Valor Simulado

472 A

284 A

188 A



Simulacin (resistencias en valor de Mega ohmios)

Para
Valor Simulado con capacitor

3,70 uA

3,42 uA

0,31 uA









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5. CONCLUSIONES

Se comprendi que con cada cambio de
resistencia se haca ms permeabilidad
cambiaba en cuanto a cada ICl, INa IK .


Con el segundo circuito donde se utilizaba el
capacitor este funcionaba como un circuito
abierto sin producir mayor incidencia en el
circuito.


En un circuito utilizado donde las 3 resistencias
fueron con gran diferencia Omica, se nota que
la corriente circula en su mayora por la de
menor resistencia.

7. REFERENCIAS.

1. Tratado de fisiologa mdica, Arthur C. Guyton y
John E. Hall, Mc Graw Hill, Dcima Edicin.

2. Electrofisiologa Humana: Un enfoque para
ingenieros, P. Castellanos brego y col. Publicado
por la Universidad Autnoma Metropolitana.
Mxico, Primera Edicin, 1997.

3. Fisiologa de Constanzo, Linda S. Constanzo.
Publicado por Mc Graw-Hill, Interamericana.
Mxico, 2000.

4. Introduccin a la bioingeniera, Jos M. Poblet.
Publicado por Marcombo, S.A., 1988.

5. Bioelectrnica: Seales Bioelctricas, Jos M.
Ferrero Corral, y de Loma-Osorio, Universidad
Politcnica de Valencia Departamento de
Ingeniera Electrnica, 1994.

6. Electrocardiografa diagnstica, Fernando Antonio
Bermdez Arias. Publicado por McGraw-Hill
Interamericana, 1998.

7. Instrumentacin Electrnica Bsica, Ramn
Pallas. Publicado por Marcombo, S.A., 1987.

8. Sensores y acondicionadores de seal: Prcticas,
Ramn Pallas. Publicado por Marcombo, S.A.,
2007.