Ingeniera gentica

Manipulacin gentica.
La ingeniera gentica es la tecnologa del control y transferencia de ADN de un organismo a
otro, lo que posibilita la correccin de los defectos genticos y la creacin de nuevas cepas
(microorganismos), variedades (plantas) y razas (animales) para una obtencin ms eficiente
de sus productos.
Tcnicas
La ingeniera gentica incluye un conjunto de tcnicas biotecnolgicas, entre las que
destacan:
La tecnologa del ADN recombinante;
La secuenciacin del ADN;
La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Plasmotosis
Clonacin molecular
Mutacin excepcional
Transgnesis
Bloqueo gnico
La tecnologa del ADN recombinante
Artculo principal: ADN recombinante

A. tumefaciens adhirindose a una clula de zanahoria.
La tecnologa del ADN recombinante consiste en aislar y manipular un fragmento de ADN de
un organismo para "recombinarlo" con el de otro organismo.
Generalmente se trata el ADN con una endonucleasa de restriccin que origina en este caso
un corte escalonado en las dos hebras dobles de ADN. Los extremos escalonados de ambas
hebras de ADN son complementarios, una condicin que tienen que tener si se quieren unir.
Los dos ADNs as cortados se mezclan, se calientan y s enfran suavemente. Sus extremos
cohesivos se aparearn dando lugar a un nuevo ADN recombinado, con uniones no
covalentes. Las uniones covalentes se forman aadiendo ADN ligasa y una fuente energtica
para formar los enlaces.
Otra enzima clave para unir ADNs es la transferencia terminal, que puede adicionar muchos
residuos de desoxirribonucletidos sucesivos al extremo 3de las hebras del ADN. De este
modo pueden construirse colas de poli Guanina en los extremos 3 de una de las hebras de
ADN y colas de poli Citosina en los extremos de la otra cadena. Como estas colas son
complementarias, permitirn que los dos ADNs se unan por complementariedad.
Posteriormente, se forman los enlaces covalentes por la ADN ligasa.
El ADN recombinado se inserta en un ADN vector que acte como vehculo para introducirlo
en una clula hospedadora que lo replique, los vectores o transportadores ms utilizados son
los plsmidos y el ADN del fago lambda.
La secuenciacin del ADN
Artculo principal: Secuenciacin del ADN
Es un conjunto de tcnicas que permiten conocer el orden en que aparecen los nucletidos en
el ADN, que es la base de la informacin gentica de los organismos . Mediante esta tcnica
tiene aplicaciones mdicas, como la bsqueda de algn polimorfismo gentico que se asocie
con una enfermedad; bsicas: comparar la historia evolutiva de un organismo; o forenses.
La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
Artculo principal: Reaccin en cadena de la polimerasa
La tcnica de la PCR aprovecha la actividad enzimtica por la que se replica el ADN en las
clulas para conseguir una gran cantidad de copias de ADN a partir de cantidades pequeas.
Se utiliza una polimerasa o una mezcla de varias que puedan resistir temperaturas elevadas,
siendo la ms comn la polimerasa taq.
La tcnica consiste en realizar varios ciclos de temperaturas elevadas para conseguir
la desnaturalizacin del ADN y temperaturas ms bajas para la amplificacin del ADN
desnaturalizado mediante la polimerasa.
Biotecnologa gentica
En la dcada de 1970 se abrieron nuevas perspectivas en el campo de
las biotecnologas gracias a la elaboracin de nuevas tcnicas que permiten llegar
directamente al material que est en el origen de todas las caractersticas y procesos vitales,
es decir, el ADN. Este conjunto de tcnicas moleculares de manipulacin gentica recibe el
nombre de ingeniera gentica.
Su objetivo es la manipulacin in Vitro del ADN, la introduccin de este ADN as modificado en
clulas vivas y la incorporacin del mismo como parte del material hereditario de dichas
clulas. De este modo, ADN de diversas procedencias, por ejemplo, la fraccin de ADN
humano regula la sntesis de insulina, puede introducirse en bacterias de manera que pasa a
formar parte de su genoma y lograr as que la bacteria adquiera la capacidad de elaborar
insulina.
Terapia gentica
La terapia gentica consiste en sustituir o aadir, segn el caso, una copia normal de la regin
defectuosa del ADN para poder solucionar y restablecer la funcin alterada, evitando el
desarrollo de enfermedades de origen gentico, como por ejemplo la facultad defensiva ante
las enfermedades infecciosas. Las enfermedades con las que se ha empezado a trabajar son,
entre otras, la deficiencia de la enzima ADA (adenosina desaminasa), conocida como la de
los nios burbuja y la DMD o distrofia muscular de Duchenne.
La posibilidad de curar las enfermedades genticas con un tratamiento especfico justifica lo
esfuerzos que se estn realizando en este sentido.
Implicaciones ticas
La ingeniera tiene aplicaciones en campos muy diversos; dos de los ms importantes son la
medicina y la creacin de nuevas especies o mejora de las existentes. El progreso en estos
mbitos puede aportar resultados capaces de aliviar algunos problemas de gran importancia,
pero no se debe olvidar que la explotacin comercial de las tecnologas requeridas slo est al
alcance de unas pocas empresas multinacionales. Como era de esperar, la tradicional
dependencia econmica de los pases subdesarrollados tiene en la ingeniera gentica un
nuevo elemento de desequilibrio. En otro orden de cosas, la ingeniera gentica puede
plantear graves problemas ticos. Hay opiniones muy diversas sobre dnde han de situarse
los lmites de manipulacin del material que est en la base de todos los procesos vitales.
Al inicio de los experimentos del ADN recombinante, varios investigadores mostraron su
preocupacin por los riesgo que se pueden realizar con dichas tcnicas. En varios pases se
crearon comits para discutir el uso y la aplicacin de tcnicas de ingeniera gentica.
Ingeniera gentica en seres vivos
Ingeniera gentica en bacterias
Son los seres vivos ms utilizados en Ingeniera Gentica. La ms utilizada es la Escherichia
coli. Se usa prcticamente en todos los procesos de I.G.
Ingeniera gentica en levaduras y hongos
Son junto con las bacterias los sistemas ms utilizados. El Saccharomyces cerevisiae fue el
primer sistema eucariota secuenciado completamente. Otra levadura importante es P.
pastoris, utilizada para conseguir proinsulina en cultivo discontinuo y quitinasa en cultivo
continuo. En el campo de los hongos destaca por su labor mdica el Penicillium.

Ratones knockout.
Ingeniera Gentica en animales
La manipulacin gentica de los animales persigue mltiples objetivos: aumentar el
rendimiento del ganado, producir animales con enfermedades humanas para la investigacin,
elaborar frmacos, etc.
Produccin animal por ingeniera gentica:
Peces transgnicos: las principales aplicaciones en animales se han realizado en peces,
debido a que la fecundacin es externa, lo cual permite la introduccin del gen en el cigoto
antes de que se unan el ncleo del espermatozoide y el del vulo. Se han producido carpas
transgnicas que crecen mucho ms rpido, debido a la incorporacin del gen de la hormona
del crecimiento de la trucha, y salmones transgnicos, que resisten mejor las bajas
temperaturas. Mamferos: se han obtenido ratones transgnicos, con distintos genes
modificados. Sin embargo, todava su aplicacin para la mejora de especies es preliminar,
enfocndose el estudio desde un punto de vista ms bien puramente cientfic.