ASOCIACION ARGENTINA DE MEDICINA FELINA

Zoonosis Por Pasteurella

Aislamiento de Pasteurella spp. del rea amigdalina (tonsilar) de perros y gatos en
cautividad: sensibilidad a los antibiticos (mic) y consecuencias zoonsicas
(1)

Franco Brindani
(2)
- Mara Cristina Ossiprandi
(2)
- Andrea Zatelli
(3)
- Enrica Freschi
(2)

Palabras claves: Pasteurella, perro, gato, sensibilidad, antibiticos
Premisas
Las mordeduras inferidas por animales, principalmente por perros y gatos, han sido
definidas en los Estados Unidos, en consideracin a su notable incidencia, como "una
epidemia no reconocida". Se considera que en dicho pas el nmero de personas
mordidas por perros oscila de uno a dos millones cada ao y las vctimas de gatos sobre
los 400.000, frente a una poblacin animal estimada aproximadamente en 108 millones
de ejemplares. Adems, se ha valorado que slo la mitad de estos casos son
denunciados: muchas heridas son superficiales y un elevado porcentaje de vctimas
(cerca del 1,80%), juzgndolo superfluo, no recurren al mdico. Algunos consideran
que la incidencia real de las mordeduras pueda superar hasta 100 veces lo que se conoce
oficialmente. Sin embargo, se considera que cada cien intervenciones mdicas de
urgencia una es imputable a mordeduras.
En nuestro pas, los cerca de 5 millones de perros censados son considerados
responsables, cada ao, de otras 40.000 mordeduras, que podran, en realidad, aumentar
a ms del doble, si tenemos en cuenta los parmetros de estimacin adoptados en los
Estados Unidos.
Aunque muchos pacientes no recurren a un tratamiento mdico, despus de tales
lesiones pueden aparecer graves complicaciones, ms frecuentes en individuos de
edades superiores a los 50 aos o inferiores a los 10. Entre stas se pueden mencionar
osteomielitis, artritis sptica y septicemia, algunas veces con desgraciadas
consecuencias. Muchos de estos inconvenientes podran prevenirse con una adecuada y
precoz terapia antimicrobiana.
Investigaciones microbiolgicas han puesto de manifiesto que cerca del 1,85% de las
heridas por mordedura estn contaminadas por bacterias patgenas y que, en valores
porcentuales del 2 al 30% de tales heridas originan infecciones, generalmente no antes
de ocho horas. Por otra parte, del material obtenido del 10-15 % de las lesiones no
permite obtener el desarrollo de algn tipo de microorganismos. Adems, a menudo la
flora microbiana, aislada en pacientes cuya lesin no presenta sntomas de infeccin, es
idntica a la de la lesin infectada, siendo no predecible la evolucin de la herida.
Factores de virulencia, ligados a cada cepa bacteriana, pueden ser determinantes,
como tambin resulta fundamental la situacin inmunitaria de la vctima. El nmero de
mordeduras que pueden desarrollar complicaciones infecciosas parece discordante:
algunos consideran que solamente el 3-5% de las lesiones inferidas por el perro
evoluciona en tal sentido; otros han aumentado este porcentaje al 15-20%. En lo que
respecta al gato, la infeccin interesara el 20-50% e incluso ms.
El abanico de microorganismos con capacidad para causar infecciones en las heridas
producidas por mordeduras es indudablemente amplio: tanto los componentes de la
flora aerbica presentes en la dermis de la vctima como los de la flora oral, aerbica y
anaerbica, de los animales mordedores tienen capacidad para producir una infeccin.
Desde el punto de vista patognico estos ltimos son mucho ms importantes.
En la mayor parte de las heridas infectadas hay muchas especies de microorganismos
aerbicos y anaerbicos que interaccionan sinrgicamente: en la cavidad oral del perro y
del gato se han hallado ms de 60 especies de bacterias. Entre stas la Pasteurella
multocida parece tener una importancia determinante en las complicaciones infecciosas,
aunque la presencia de anaerbicos (25% de los casos) a menudo puede aumentar la
gravedad de la infeccin.
P. multocida es una bacteria Gram negativa, de forma cocobacilar o pleomorfa,
mesofila, inmvil y con metabolismo de tipo tanto oxidativo como fermentativo. Tales
microorganismos pareceran responsables de ms del 50% de las complicaciones
infecciosas derivadas de las mordeduras de los perros y del 90% de las inferidas por
gatos, siendo adems la bacteria ms frecuentemente aislada en los pacientes
hospitalizados por mordedura infectada.
Segn otros investigadores, que han focalizado su atencin en el papel que presenta la
P. Multocida en las complicaciones que se producen como consecuencia de las
mordeduras de perro y gato, dicha presencia resultara inferior: 20-25% en las lesiones
provocadas por perros y cerca del 50% en las de gatos.
Actualmente se han individualizado al menos cuatro especies del tipo P. canis, que se
localiza en la cavidad oral del perro y frecuentemente aislada en las lesiones infectadas;
P. dagmatis, aislable en la boca de perros y gatos y responsable de formas septicmicas;
P. stomatis, formando parte de la flora del aparato respiratorio de estos animales
sinntropos; y P. multocida propiamente dicha, que puede ser aislada en varias especies
de mamferos.
Sobre la base de las consideraciones precedentes, hemos podido valorar el inters que
tiene proceder a una investigacin que tienda a individualizar y tipificar
microorganismos referidos al genero Pasteurella en el rea tonsilar de los perros y de
los gatos con propietario, habitualmente objeto de asistencia veterinaria. Precisamente
es en esta categora de animales en el que con ms frecuencia se sitan, tanto en nuestro
pas como en otros, la mayor parte de los sujetos mordedores.
Materiales y mtodos
Obtencin, aislamiento y clasificacin de las cepas.
Las cepas de Pasteurella spp. objeto del presente estudio han sido aisladas en 53
perros y 57 gatos, en buen estado de nutricin, de diferentes edades y de ambos sexos.
Los sujetos considerados son animales con propietario que vivan habitualmente
sometidos a controles veterinarios y no presentaban, al menos aparentemente, sntomas
atribuibles a infecciones bacterianas, ni estaban sometidos a tratamiento antibitico.
A estos animales se les toma, de la regin tonsilar, mediante un hisopo esteril,
material que inmediatamente se extiende sobre el medio de cultivo, el cual contiene
como sustancia inhibidora bacitracina, gentamicina, poliximina B y micostatin,
preparado segn lo sugerido por Smith y Baskerville, con slo alguna leve
modificacin. Despus las placas se ponen en incubacin a 37C durante 3-4 das,
posteriormente las colonias transformadas morfolgicamente a Pasteurella son
transplantadas sobre Tryptose Broth (Difco), agarizado y adicionado el 0,3% de
levadura para ser sometido a sucesivos tests de identificacin. Posteriormente, despus
de un screening basado en algunas reacciones oxidativas (+), catalasia (+), ureasa (-)
con excepcin del P. dagmatis, lisina decarboxilasa (-) y desarrollo en McConkey Agar
(-), tendientes a individualizar los microorganismos que pertenecen al gnero
Pasteurella "sensu stricto", son tomados en consideracin algunas reacciones
bioqumicas-enzimticas interpretadas, en armonia con lo sugerido por Baldrias et al. y
por Mutters et al. segn esquema de la tabla n.1, con la finalidad de proceder a la
identificacin de especies y subespecies.
Test de sensibilidad a los antibiticos (CMI)
La determinacin de las concentraciones mnimas inhibitorias (CMI) se efectu
utilizando el sistema E Test (AB Biodisk). Dicho mtodo se caracteriza por la
combinacin de dos procedimientos: disolucin del antibitico a testar sobre una tira de
plstico inerte y su inmediata liberacin desde la tira a la matriz representada por el
medio de cultivo preparado con anterioridad.
Para la realizacin de este test la cepa a ensayar, despus de su cultivo en Tryptose
Broth a 37C durante 18-24 horas, resulta diluida, por medio de lectura
espectrofotomtrica a 600 nm, hasta una concentracin equivalente a 0,5 de la escala de
Mc Farland (1,5 x 108 celulas/ml).
La suspensin exparcida sobre la placa preparada con Tryptose Broth agarizado y
adicionado del 0,3 % de levadura; despus de haber colocado sobre sta las tiras con
diluciones que varan de 0,016 a 256 ug/ml o bien 0,002 a 32 ug/ml del antibitico y de
inmediato la placa se incuba durante 18 a 24 hs. a 36C.
Se ha procedido a verificar la sensibilidad de las cepas aisladas respecto de algunos
antibiticos y asociaciones de antibiticos utilizados con el fin de tener bajo control
eventuales complicaciones infecciosas en los sujetos que han sido mordidos. Se han
tomado en consideracin exponentes de las cuatro clases de cefalosporinas: cefalotin (I),
cefuroxima (II), cefotaxima (III) y cefepima (IV), adems de eritromicina, oxacilina,
tetraciclina y a la asociacin amoxicilina-cido clavulnico (2:1).



Tab.1.- Caractersticas diferenciales de algunas especies y subespecies pertenecientes al
gnero Pasteurella "sensu stricto"
Produccin de acido en 24-48 horas de:

Ornitin
a
Indo
l
Ureas
a
Sorbito
l
Dulcito
l
Trealosi
o
Maltos
a
Xylos
a
Mannito
l
P. Multocida
subsp.
Multocid
a
+ + - + - v - v +
subsp.
Septica
+ + - - - + - + +
subsp.
Gallicida
+ + - + + - - + +
P. canis
biotipo
1
+ + - - - v - v -
biotipo
2
+ - - - - v - v -
P.
Stomatis
- + - - - + - - -
P.
Dagmatis
- + + - - + + - -
Leyenda:
+: cepas positivas >90%
-: cepas negativas >90%
V: cepas positivas >10% y <90%
Resultados
Durante la investigacin fueron aisladas, sobre la base del esquema de la tabla n.1,
cepas pertenecientes al gnero a P. multocida subs P. multocida en 8 (15,1%) de los 53
perros examinados y en 10 de los 57 gatos.
Se observ que un discreto porcentaje de muestras, especialmente de procedencia
canina, result contaminada por Pseudomonas spp. Dicha bacteria est presente, de
hecho, en la cavidad oral de 18 (33,9%) perros y de 15 (26,3%) gatos.
Como se puede observar en la tabla n.2, las 18 cepas de P. multocida subs P.
multocida , 8 de procedencia canina y 10 aisladas en felinos, sometidos al test CMI con
la metodologa anteriormente expuesta, han evidenciado una elevada sensibilidad tanto
a la cefalosporina, particularmente acentuada hacia las de III y IV generacin (CMI:
0,016-0023 mg/ml), como a la asociacin amoxicilina-cido clavulnico (CMI: 0,047-
0,123 mg/ml). La oxacilina ha manifestado una buena eficacia, resultando letal para 16
(88,9%) de las 18 cepas, mientras los restantes 2 (11,1%) son poco sensibles.

Tab. 2a - Concentraciones mnimas inhibitorias (CMI), relativas a los antibiticos
medidos, activos respecto a la cepas de Pasteurella multocida subsp. multocida aislada
en los perros ( )y en los gatos ( ) examinados
Concentraciones (/ml)
Antibitico
0,016 0,023 0,032 0,047 0,064 0,075 0,094 0,125 0,19
Cefalotn
(I gen.)













Ceforoxime
(II gen.)







Cefotaxime
(III gen.)



Cefepime
(IV gen.)







Amoxicilina/Ac.
clavulanico (2:1)











Tab. 2b - Concentraciones mnimas inhibitorias (CMI), relativas a los antibiticos
medidos, activos respecto a la cepas de Pasteurella multocida subsp. multocida aislada
en los perros ( )y en los gatos ( ) examinados
Concentraciones (/ml)
Antibitico
<0,25 0,25 0,38 0,50 0,75 1 1,5 2 3 4 8 12 16 32
Oxacilina














Eritromicina






Tetraciclina











La tetraciclina ha resultado muy eficaz en 16 (88,9%) cepas (CMI: 0,025-0,75 mg/ml)
pero completamente inactiva en 2 (1,1%). En fin, la eritromicina ha dado resultados
muy bajos mostrndose eficaz solamente respecto de 2 (11,1%) cepas.
Consideraciones y conclusiones
Si se comparan los porcentajes de positividad para P. multocida subsp. multocida en
los animales que hemos examinado, con los referidos en la literatura al respecto,
resultan indiscutiblemente modestos. Goldstein e coll. encontraron dicha bacteria en el
20-25% de los perros y en el 50% de los gatos, mientras Baldrias e coll. obtuvieron
porcentajes de positividad nada menos que del 92% y del 99%. Resulta tambin
confirmada por nuestros resultados la mayor frecuencia de positivos en los gatos que en
los perros. Dicha frecuencia en el hallazgo de la bacteria en los felinos se relaciona con
la confirmacin clnica de ms complicaciones spticas recurrentes de Pasteurella,
valoradas de tres a diez veces superiores para la mordedura de gatos respecto de la
provocada por perros. En el caso de mordeduras inferidas por animales el empleo de
antibiticos de la modalidad llamada "emprica", sin que le preceda la realizacin de
antibiograma, es necesario. As, cuanto ms precoz sea el tratamiento, tanto mayor es la
probabilidad de evitar complicaciones spticas. Por lo tanto, la individualizacin a priori
de antibiticos eficaces con respecto a los microorganismos causa de las infecciones,
como P. multocida subs P. multocida , resulta de importancia determinante. En el
mbito de estos antibacterianos, nuestra experiencia confirma la eficacia de la
asociacin entre amoxicilina-cido clavulnico (2:1), considerando las modestas
cantidades (40 veces inferiores al umbral de eficacia) de frmaco suficientes para inhibir
las cepas examinadas.
No obstante, las cefalosporinas pueden considerarse unos muy vlidos directores,
particularmente en su III generacin (cefotaxime) y IV (cefepime). Modestas resultan,
entre otras, las diferencias de sensibilidad a esta categora de antibiticos, entre las
cepas de origen canino y felino como ha sido reconocido por otros investigadores. Hay
que recordar, sin embargo, que algunos presentan reservas sobre la eficacia de la
cefalosporina suministrada por os.
Puede considerarse buena la actividad de la tetraciclina y la oxacilina, registrndose
ambas no eficaces respecto de dos nicas cepas de origen felino, lo cual hace inclinarse
hacia una mayor peligrosidad de los mordeduras inferidas por estos animales. Dichos
antibiticos pueden, por tanto, considerarse una alternativa vlida a las cefalosporinas,
teniendo en cuenta la recomendacind e Goldstein y coll. relativa a la escasa validez
hallada en la oxacilina.
Entre todas estos ensayos, el antibitico que ha evidenciado la menor eficacia es, sin
duda, la eritromicina; diversos informes han probado su escaso efecto, de modo tal que
no puede considerarse, actualmente, una alternativa vlida.
Resumen
Se hace referencia a los resultado relativos al aislamiento de microorganismos que
pertenecen al gnero Pasteurella, en particular al P. multocida subs. multocida,
localizados en el rea tonsilar de perros y gatos con propietario. Dichas bacterias se
encontraron en 8 (15,1%) de los 53 perros y en 10 (17,5%)de los gatos objeto de la
investigacin.
Posteriormente se verific la sensibilidad de los microorganismos en cuestin,
mediante determinacin de la concentracin mnima inhibitoria (CMI) respecto de
algunas cefalosporinas (cefalotina, cefuroxima, cefotaxima, cefepima), de la asociacin
amoxicilina-cido clavulnico (2:1), de tetraciclina, de oxacilina y de eritromicina.
(*) Publicado en Obiettivi & Documenti Veterinari. N 7/8 Luglio-Agosto 1996.
(1) Investigacin realizada con la contribucin MURST 60%.
(2) Instituto de Microbiologa, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad de
Estudios de Parma.
(3)Ambulatorio Veterinario "San Prospero", Reggio Emilia.
Traduccin : Lic. Ana Bretn