I.

INTRODUCCIN

En el tratamiento de aguas residuales domesticas, el tratamiento primario se
ocupa bsicamente de la separacin fsica de los contaminantes presentes, ya sea
por desbaste, filtracin o decantacin, removiendo los contaminantes en
suspensin y dejando a un lado la materia orgnica disuelta que es frecuente en
estas aguas residuales. La separacin de materia orgnica disuelta de las aguas
residuales, es muy costosa por medios qumicos o fsicos, y generalmente se
utilizan tratamientos biolgicos, entre estos el ms comn es el sistema de lodos
activados. La eficiencia de este tratamiento, depender bsicamente de la cintica
de remocin de la materia orgnica disuelta por medio de los microrganismos,
siendo estos especficos para cada tipo de agua residual, haciendo a estos
parmetros fundamentales en el momento del diseo de una planta mediante este
sistema, ya que la cintica de remocin define los otros parmetros como
dimensionamiento, tiempo de retencin, caudal y carga a tratar. En este tipo de
tratamiento, para que sea viable, es muy importante que exista una cantidad
elevada de microrganismos, ya que de estos depende la velocidad de depuracin.
En el Per las aguas residuales domesticas, al igual que las aguas residuales
de los camales municipales, no son tratadas previamente para su posterior
vertimiento, solo un 35% de las aguas residuales tanto domesticas como de
camales municipales (SUNASS 2013), pasan por un tratamiento previo; nuestra
localidad no es ajena a esta realidad. Cabe mencionar que estas aguas contienen




un alto contenido de microrganismos; hacindolos ideales para el tratamiento
mediante el sistema de lodos activados







II. JUSTIFICACIN

Por lo expuesto anteriormente esta prctica es importante dada su aplicacin
practica en el diseo de cualquier sistema de tratamiento mediante lodos activos.
Importancia en el dimensionamiento de la planta, cantidad de agua a tratar, carga
contaminante del agua a tratar y tiempo en el que se llevara a cabo.
La presente prctica podr servir como base y referencia, para el diseo y
posterior construccin de una futura planta de tratamiento para las aguas residuales
del camal municipal Tingo Mara.








III. OBJETIVOS

3.1. Objetivos Generales

Estimar los parmetros biocinticos del agua residual del camal municipal
(Tingo Mara) mediante un sistema de lodos activados a escala de
Laboratorio

3.2. Objetivos especficos

Construccin de un equipo que simule un sistema de lodos activados a
escala de laboratorio.
Determinar del modelo matemtico a utilizar para la estimacin de los
parmetros biocinticos.
Determinar la carga orgnica en el periodo de evaluacin.
Determinar la biomasa microbiana en el periodo de evaluacin.
Determinar la relacin entre recuento en placa de microrganismos mtodo
Pour Plate, con los solidos suspendidos voltiles,
Ajustar los datos experimentales al modelo elaborado para la estimacin de
los parmetros biocinticos.








IV. REVISION DE LITERATURA.

4.1. Construccin de equipos que simulen un sistema de lodos activados a
escala de laboratorio.
4.1.1. Antecedentes de estimacin de parmetros biocinticos a escala de
laboratorio.
Los modelos fsicos han sido utilizados para el diseo de los sistemas a
escala real o prototipo. En el caso especfico de los sistemas de tratamiento de
lodos activados, la determinacin de constantes cinticas es una alternativa para
disear estos sistemas de tratamiento. La Planta Experimental de Tratamiento de
Aguas, Facultad de Ingeniera, Universidad Central de Venezuela, PETA, UCV, se
ha venido desarrollando investigaciones dirigidas a la evaluacin de un modelo
fsico a escala laboratorio, para la determinacin de las constantes cinticas K
s
,
U
max
, Y
xs
y k
d
y para su posterior metodologa de operacin. (FINAMORE etal 1999)





Cuadro 1. Valores tpicos de parmetros biocinticos en lodos activados
para la ecuacin de Monod
Parmetros
Cinticos Base de clculo Valor
Umax dia-
1
0,6 - 13.2
Kd dia-1 0,01 - 0,14
Ks DBO 12 - 120
Ks DQO 22 - 223
Y SSV/DBO 0,38 - 0,75
Y SSV/DQO 0,31 - 0,67
FUENTE: GIL Modelizacin matemtica de Lodos Activados
La lnea de investigacin en aguas residuales de la Facultad de Ingeniera
Civil, Universidad Militar Nueva Granada ha venido desarrollando investigaciones
en modelos fsicos a escala laboratorio en donde con aguas residuales de un
frigorfico se han determinado las constantes cinticas K
d
, K
s
, K
m
, K
0
, K
1
, K
2
, K
e

utilizando el proceso de lodos activados. En esta investigacin se trabaj con lodos
activados de mezcla completa con flujo continuo. (RODRIGUEZ, 2003).

Existes trabajos del mismo tipo de los anteriores en diferentes tipos de
aguas residuales, como las aguas de la industria lctea (CARDENAS etal. 2008),
aguas residuales municipales (BLANCO etal. 2011), aguas de las actividades
porcinas (LOPEZ, 2009).

Estos parmetros cinticos dependen fundamentalmente del lquido
residual (domestico, porcino, industrial, entre otros), as como de las condiciones
ambientales, lo cual trae como consecuencia que los valores reportados en la
bibliografa fornea deben ser evaluados con cuidado, ya que en algunos casos
pueden ser inaplicables. Por esta razn se hace necesario su determinacin para




condiciones particulares locales y, por ende, la metodologa a emplearse debe ser,
en la medida de lo posible, sencilla, prctica y econmica. (FINAMORE etal 1999).
Cuadro 2. Valores obtenidos de parmetros biocinticos en lodos
activados para la ecuacin de Monod
Parmetros biocinticos Valor Unidad
max 0.64 da
-1

K
S
35 mg/L
Y
XS
0.39 mgSSV/mgDBO
K
d
0.034 da
-1

FUENTE: (FINAMORE etal 1999).Constantes cinticas en un sistema de lodos activados a escala de
laboratorio

4.1.2. Sistemas convencionales de lodos activados a escala de laboratorio
El sistema convencional de lodos activados, cuenta con 2 cmaras, una de
aireacin y otra de decantacin secundaria, el agua residual a tratar, antes de llegar
a la cmara de aireacin, pasa previamente por un pretratamiento, para deshacerse
en de una gran parte de los solidos suspendidos, y as tratar solo el agua con
materia orgnica disuelta (GERARD etal. 1999), el flujograma del sistema
convencional de lodos activados se presenta a continuacin:

Figura 1. Esquema convencional de lodos activados




El esquema mostrado anteriormente no es el nico, existen
combinaciones de sistemas que hacen aun ms eficiente el tratamiento, pero el
anterior es el sistema mas utilizado. A escala de laboratorio el tamao y disposicin
de los sistemas es un poco distinto, la cmara de aireacin y la cmara de
decantacin secundaria no estn separados si no juntos separados solamente por
una pared.
En el estudio realizado por el municipio de Cali en Colombia, sobre lodos
activados a escala de laboratorio, se utilizaron dimensiones de 9.8 Litros para la
cmara de aireacin, y 7.8Litros para la cmara de decantacin (TORRES etal.
2011).
Otro trabajo estim los parmetros biocinticos de una agua residual
sinttica, para lo cual utilizo el sistema convencional, con una cmara de aireacin
de 8 Litros y una cmara de decantacin de 5.9 Litros. Este utilizo diferentes
tiempos de retencin, para lo cual el trabajo se realizo con diferentes caudales de
3.2, 4.9, 7.1 y 20 mL por minuto, para hacer posible esto, en este estudio se
utilizaron bombas peristlticas, que garantizaron un flujo constante para cada
caudal, tambin se trabajaron con difusores de aires que garantizaron la mezcla
homognea y una adecuada aireacin con una potencia de 35 W/m
3
. La DBO fue
de 750 ppm, esta DBO es la que representaba la materia orgnica disuelta en el
agua sinttica y con una concentracin de solidos suspendidos voltiles de 1600
ppm, que representaba la biomasa microbiana. (VARILA y DIAZ 2008).
Un parmetro de mucha utilidad al momento de disear sistemas de lodos
activados es la relacin F/M (alimento/microrganismo). Este sistema alcanza el




equilibrio cuando la cantidad de alimento es igual a la cantidad de microrganismo.
La prdida de esta igualdad, significa demasiado alimento, muy poco alimento,
demasiados microrganismos, pocos microrganismos. (GERARD 1999)
Cuadro 3. Rangos de la relacin F/M para el funcionamiento optimo para un
determinado sistema
Tipo de Sistema Rango
Relacin

Aireacin Prolongada 0.03 - 0.8
Convencional 0.8 - 2
Sistema por oxigeno puro >2
FUENTE: (GERARD 1999) Ingeniera Ambiental, Fundamentos Entornos tecnologas y Sistemas de Gestin
Tambin es importante el control de los parmetros de temperatura y pH
ya que estos influencian de manera determinante, en el funcionamiento del
proceso. (GERARD 1999).
Cuadro A. Rangos de los parmetros pH y Temperatura para la
ptima tasa de crecimiento de microrganismos
Parmetro Rango Unidad
Temperatura 30 - 45 C
pH 5.9 7.7 s/u
FUENTE: GIL 2001. Modelizacin matemtica de Lodos Activados

Cabe mencionar de que no siempre se obtienen pH y T C dentro del
rango establecido en el Cuadro A. como es el caso del trabajo realizado por
(VARILA y DIAZ 2008) que se muestra en el Cuadro B.




Cuadro B. Rangos de los parmetros pH y Temperatura obtenidos
en el trabajo de (VARILA y DIAZ 2008)
Parmetro Rango Unidad
Temperatura 17.30 25.8 C
pH 6.2 7.68 s/u
FUENTE: VARILA y DIAZ 2008. Tratamiento de aguas residuales mediante lodos
activados a escala de laboratorio
Cuadro C. Caracterizacin del agua residual porcina
Compuestos Valores Unidades
DQO 9300 mg/L
DBO 5751 mg/L
SST 2332 mg/L
SSV 2030 mg/L
NTK 1907 mg/L
N-NH 1472 mg/L
N-(N02- + NO3-) 0.63 mg/L
P Total 62.2 mg/L
pH 6.94 s/u
Recuento 9.20x10
8
Numero/mL
FUENTE: GARZON 2013. Caracterizacin de aguas residuales porcinas y su
tratamiento por diferentes procesos en Mxico

4.2. Elaboracin de modelos matemticos para la estimacin de parmetros
biocinticos

4.2.1. Parmetros biocinticos de crecimiento de microrganismos
La ecuacin de la cintica de degradacin de la materia orgnica, y la
consiguiente produccin de lodos, es un ejemplo de reacciones no elementales,
cuya ecuacin estequiomtrica, se representa por:

La velocidad relativa del crecimiento de lodos es el balance de la tasa de
crecimiento microbiano , menos la tasa de degradacin K
d
:

Ecuacin que integrada nos lleva a:

Si la tasa de crecimiento es mayor que la tasa de degradacin, y si existe
sustrato disponible, habr un crecimiento exponencial de los lodos. El crecimiento
exponencial slo se observa experimentalmente en perodos iniciales de
crecimiento. Cuando la poblacin alcanza valores elevados, la velocidad de
crecimiento disminuye, a causa de la competencia por el sustrato y la interaccin
entre congneres distancias cortas.
En los procesos de depuracin de aguas, es muy frecuente que el sustrato
se encuentre en concentraciones limitantes para el desarrollo microbiano, por tanto
su crecimiento est limitado por la disponibilidad de sustrato, de modo que la
Ecuacin (3) no es generalizable, por lo cual es necesario expresar la dependencia
explcita del sustrato. La dependencia de la tasa de crecimiento por la
concentracin de sustrato disponible se determina por consideracin de las
reacciones enzimticas tipo Michaelis-Menten.
Se considera que el sustrato, en una primera reaccin elemental, se une
mediante una reaccin reversible, con constantes k
1
y k
2
a las enzimas
microbianas, para producir un complejo enzima- sustrato:

Este producto intermedio, SE*, se descompone irreversiblemente en una




segunda reaccin elemental, con constante k
3
, para dar los Productos Finales, PF,
y liberar las enzimas utilizadas:

La velocidad neta de formacin del complejo enzima - sustrato ser:

La concentracin de enzima libre ser la concentracin total inicial E
0
, menos
la que esta formando parte del complejo enzima - sustrato.

Quedando de la siguiente manera:

Considerando el estado estacionario:

Por tanto la velocidad de formacin de productos finales ser:

Jrme Monod expreso la ecuacin (10) de la siguiente manera

Donde:




= Tasa de crecimiento de los microrganismos.
S = Sustrato o Carga orgnica en nuestro caso

max
= Tasa mxima de crecimiento de microrganismos
K
s
= Constante de semisaturacin.


Para poder determinar la cintica de consumo de sustrato (DBO), a partir de la
cintica de crecimiento microbiano, GERARD, propone la proporcionalidad a una
fraccin de sustrato o carga orgnica que se convierte a bioamasa en (mg
Biomasa/mg Sustrato):

Utilizando la ecuacin (12) y remplazando la ecuacin (11) en la ecuacin (2)
obtenemos finalmente:

Existen otras ecuaciones que representan la cintica del consumo microbiano
y la degradacin de la materia orgnica, estas las expresiones de Contois (1959),
Edwards (1970), Moser (1958), Levenspiel (1953), (GIL 2001). Existen otras
ecuaciones que representan mas rigurosamente la dinmica en funcin de varios
componentes (DBO, nitratos, fosfatos, COT), entre estas ecuaciones tenemos a la
ecuacin IAWPRC (GERARD 1999).

4.2.2. Balance de Materia.




En ingeniera aparecen con frecuencia las leyes de conservacin de la
masa. Para la ingeniera ambiental es de especial inters la ley de conservacin de
la masa que subyace bajo los balances de materia. Establece La suma de los
pesos (masas) de sustancias que entran a una reaccin es igual a la suma de los
pesos (masas) de los productos de una reaccin. (Gerard 1999).

4.2.3. Reactor de Mezcla completa.
Donde los reactivos se alimentan al reactor continuamente, (Puede ser que
una vez por da, por hora, etc.) y los productos incluyendo los reactivos no utilizados
se descargan continuamente de un recipiente bien mezclado. Al estar bien
mezclado se supone que el contenido es uniforme en su concentracin en toda la
masa sin gradientes de concentracin, por tanto se supone que la concentracin de
salida es igual que la del reactor. Un mayor tiempo de retencin supone una mayor
conversin de reactantes a productos. Este reactor es habitual en la depuracin de
aguas residuales.






Figura 2. Reactor contnuo de mezcla completa (CSTR)

Donde:
Q
e
= Caudal de entrada.
C
e
= Concentracin de entrada
V = Volumen del reactor
r
i
= Tasa de reaccin (Consumo o Produccin)
Q
s
= Caudal de salida.
C

= Concentracin en el reactor

4.3. Determinacin de la carga Orgnica en aguas residuales
4.3.1 Demanda Bioqumica de Oxigeno




La Demanda Bioqumica de Oxgeno, DBO, se define como la cantidad de
oxgeno utilizado por microrganismos hetertrofos, para transformar la materia
orgnica metabolizable de la muestra a examinar, en anhdrido carbnico, agua y
productos finales. Se realiza en condiciones aerbicas, con presencia suficiente
de oxgeno libre, desde el comienzo al final de la prueba, midindose la
acumulacin del oxgeno utilizado. El resultado se expresa en miligramos de
oxgeno utilizado por litro de agua examinada (ATLAS, 2002).
Las condiciones de medida, fueron establecidas en 1912 por la UK Royal
Commission, en su octavo informe titulado Standards and Tests for Sewage and
Sewage Effuents Discharging into Rivers and Streams. En este informe se
recomend un periodo de incubacin de cinco das, tiempo medio de los ros
ingleses en llegar al mar, a la temperatura de 65 F, mxima temperatura de los
ros ingleses en el mes ms clido, que equivale a 18,3 C, redondeado a 20 C.
(GIL 2001)
Los microrganismos en las condiciones de la medida de la Demanda
Bioqumica de Oxgeno, DBO, en presencia de oxgeno disuelto metabolizan las
materias orgnicas biodegradables de las muestras a examinar, de procedencia
urbana o industrial. Las reacciones bioqumicas de esta actividad metablica se
resumen en reacciones de sntesis de nuevos organismos, reacciones de
produccin de energa, para desarrollo de su actividad y reacciones de
degradacin de los propios microrganismos, consumiendo estas tres reacciones
oxgeno, hasta que el sustrato disponible se agota, comenzando entonces la fase
de metabolismo endgeno, caracterizado por un consumo mnimo de oxgeno.
(GIL 2001).




La DBO de un agua residual, vara en funcin del tipo de agua residual,
para lo cual en el clculo de DBO se necesita escoger correctamente los factores
de diluciones (GERARD 1999)
Cuadro 4. Porcentajes de dilucin para la incubacin en botellas en la medida de
la DBO.
Uso de porcentaje de mezclas Medicin directa con pipeta en recipientes
de 300 mL
% de la mezcla Margen de DBO mL Margen de DBO
0.01 20.000-70.000 0.02 30.000-105.000
0.02 10.000-35.000 0.05 12.000-42.000
0.05 4.000-14.000 0.10 6.000-21.000
0.1 2.000-7.000 0.20 3.000-10.500
0.2 1.000-3.500 0.50 1.200-4.200
0.5 400-1.400 1.0 600-2.100
1.0 200-700 2.0 300-1.050
2.0 100-350 50 120-420
5.0 40-140 10.0 60-210
10.0 20-70 20.0 30-105
20.0 10-35 50.0 12-42
50.0 4-14 100 6-21
100 0-7 300 0-7
FUENTE: JOHANA NEIRA, Demanda Bioqumica de Oxigeno
Para el clculo de la DBO, una muestra de agua residual se diluye con un
blanco (agua saturada de oxigeno disuelto), esta agua sembrada o inoculada se
deposita en un recipiente sellado al vaco, midindose la concentracin de OD en
el da 0 y nuevamente en el da 5. La diferencia de OD es la DBO
5
. En el ensayo
estndar se emplea una botella de 300 mL y se lleva a cabo la incubacin en un
ambiente libre de luz (oscuro), a 20 C durante 5 das, (APHA AWWA WPCF.
1992). La DBO se ve influenciada por el factor de dilucin, por la cual (GERARD
1999) establecieron la siguiente formula:

]




Donde:
OD
1
= Oxigeno Disuelto en el da 1
OD
5
= Oxigeno Disuelto en el da 5
B
1
= Oxigeno Disuelto en el da 1 en el blanco
B
5
= Oxigeno Disuelto en el da 5 en el blanco
p = Factor de dilucin
f = relacin de OD entre la muestra y el blanco en el da 1

4.4. Biomasa microbiana
Biomasa microbiana, significa literalmente masa de materia viva de los
microrganismos y pueden expresarse en unidades de peso, numero o
concentracin. Por desgracia las mediciones directas de la biomasa microbiana,
como las que se realizas por filtracin, o determinacin del peso seco o mediante
la centrifugacin y medicin del volumen celular, que se practican en cultivos
puros, casi nunca son aplicables a muestras ambientales. Estas tcnicas suelen
medir partculas minerales, detrticas y biomasa no microbiana, conjuntamente
con los microrganismos y no permiten discriminar entre la biomasa del
microrganismo y otros compuestos orgnicos e inorgnicos. La determinacin de
biomasa microbiana suele ser imprecisa por este motivo. (ATLAS etal. 1998).
4.4.1. Recuento microrganismos hetertrofos en placa difusa (Pour Plate)
El mtodo de placa difusa, es muy prctico durante todo el proceso de
ejecucin, es recomendado cuando las diluciones del agua de muestra son bajas,
en el caso de aguas fuertemente contaminadas. A continuacin se muestran las
recomendaciones brindadas por (APHA - AWWA - WPCF 1992).




Muestras: Inciese el estudio lo antes posible para reducir al mnimo las
alteraciones de la poblacin bacteriana. El tiempo mximo recomendado que
debe transcurrir entre la recogida de la muestra y su estudio es de 8 horas
(mximo tiempo de intervalo, 6 horas; mximo tiempo de procesamiento, 2
horas). Si el anlisis no puede iniciarse en las primeras 8 horas, mantngase
la muestra a una temperatura inferior a 4 C, pero sin congelarla. No ha de
permitirse que el intervalo mximo entre la toma de la muestra y el anlisis
supere las 24 horas.
Preparacin de la muestra: Antes de proceder a su estudio, mrquese cada
placa con el nmero de la muestra, la dilucin, la fecha y cualquier otra
informacin necesaria. En el caso de los mtodos de placa fluida o difusa,
utilcense placas de Petri de vidrio (65 cm
2
) o desechables de plstico (57
cm
2
). Mzclense cuidadosamente todas las muestras o diluciones mediante
unos veinticinco movimientos completos de arriba abajo (y de adelante
atrs). Tambin se puede utilizar un agitador mecnico durante 15 segundos
para agitar las muestras o las diluciones.
Incubacin: El mtodo de la placa difusa se describe en las disposiciones
revisadas de la EPA de Estados Unidos. Para adaptarse a estas
disposiciones, incbese a 35 C durante 48 horas. El tiempo de incubacin
es relativo, esta mas en funcin al control de calidad del agua. Puede variar
desde 1, hasta 7 das en una cmara de 28 o 30 C; los informes de los
resultados deben recoger el tiempo y la temperatura utilizados.
Recuento y registro: Inmediatamente despus de la incubacin, cuntense




todas las colonias de las placas seleccionadas. Si hay que retrasar el
recuento, gurdense las placas a 5-10 C durante no ms de 24 horas,
aunque evitando que esta prctica se convierta en habitual. Regstrense en
el informe los resultados de los controles estriles de cada uno de los lotes
de muestras. Si se hace recuento manual, utilcese un instrumento de
recuento adecuado, como el contador de colonias Quebec. Cuando no se
disponga de este tipo de instrumentos, utilcese cualquier otro contador,
siempre que proporcione aumento e iluminacin equivalentes.
Al preparar las placas, introdzcanse volmenes de muestra que
proporcionen 30-300 colonias/placa. El objetivo consiste en disponer de al
menos una dilucin que proporcione recuentos de colonias comprendidas
entre estos limites, salvo en los casos que comentaremos ms adelante. Por
lo general, no deben sembrarse ms de 2,0 mL de muestra; por tanto,
cuando el nmero total de colonias que se desarrollan con 2,0 mL sea
inferior a 30, no se observar la regla antes expuesta y se registrarn los
resultados obtenidos. Salvo en este caso, slo se considerarn en los
recuentos las placas que muestren de 30 a 300 colonias. Regstrese el
recuento bacteriano por mililitro, multiplicando el nmero medio de colonias
por placa por el recproco de la dilucin utilizada. Presntese el informe en
UFC por mililitro.
En caso de que ninguna placa tenga de 30 a 300 colonias y una o ms
tengan ms de 300 colonias, utilcense aqullas con el nmero ms cercano
a 300. Regstrese el recuento, multiplicando el nmero medio por placa por el
recproco de la dilucin utilizada, y presntese en UFC por mililitro




calculadas.
Si ninguna de las placas de una muestra tiene colonias, comunquese un
recuento inferior a una (< 1) vez el recproco de la dilucin ms baja. Por
ejemplo, si no se desarrollan colonias en la dilucin 1:100, comunquese un
recuento menor a 100(<100) UFC/ml.
La formula que se utiliza para el recuento es:

(18)
Donde:
# M.O. /mL = Numero de microrganismos por mililitro de muestra
#CF = Numero de colonias formadas en la placa.
F = Fraccin de la placa.
FD = Factor de dilucin


4.4.2. Solidos Totales en Suspensin (103 105 C)
Para la determinacin de Solidos Totales en Suspensin, se filtra una
muestra bien mezclada por un papel filtro, y el residuo retenido en el mismo se
seca a un peso constante a 103- 105 C. El aumento de peso del filtro representa
los slidos totales en suspensin. Si este material obtura el filtro y prolonga la
operacin de filtrado, la diferencia entre el total de slidos y el total de slidos
disueltos puede proporcionar un clculo aproximado de los slidos totales en




suspensin. (APHA AWWA WPCF. 1992).

4.4.3. Solidos Suspendidos Voltiles (SSV).
Los slidos voltiles en suspensin corresponden a los lodos biolgicos,
constituidos por una poblacin heterognea de microrganismos. La determinacin
experimental de los SSV se lleva a cabo midiendo la prdida de peso de los
slidos totales en suspensin despus de incineracin en una estufa de
laboratorio a 600C. (RAMALHO 1994).
El residuo obtenido con el mtodo explicado para solidos totales en
suspensin se incinera, a peso constante, a una temperatura de 550 50 C. Los
slidos remanentes representan los slidos totales fijos disueltos o en
suspensin, mientras que la prdida de peso por ignicin representa los slidos
voltiles. La determinacin es til para el control de las operaciones en plantas
de tratamiento de aguas residuales, porque ofrece un clculo aproximado de la
cantidad de materia orgnica presente en la fraccin slida del agua residual,
lodos activados y residuos industriales. (AWWA 1992.).
El procedimiento consiste en incinerar el residuo producido por el mtodo
explicado para solidos totales disueltos, a peso constante, en un horno de mufla
a temperatura de 550 50 C. Se deber elevar el horno a esta temperatura
antes de introducir la muestra. Por lo general, la incineracin slo precisa de 15 a
20 minutos. Enfrese el filtro con el crisol al aire hasta que se haya disminuido el
calor y transfiranse a un desecador para proceder a su enfriamiento final en una




atmsfera seca, cuidando de no sobrecargar el desecador. Psense el filtro con
el crisol tan pronto como se hayan enfriado para equilibrar la temperatura.
4.5. Relacin entre recuento en placa y biomasa microbiana
Existen diversos mtodos para determinar la biomasa microbiana, estn
los mtodos por espectrofotometra, por contenido de protenas, o de algunas
otras sustancias, recuentos, centrifugacin entre otros; en teora, estos mtodos
son indicadores cuantificados de una misma variable (biomasa microbiana), por
lo tanto tendran que ser directamente proporcionales. Un estudio realizado por la
Universidad de Corea, muestra algunas relaciones de estas tcnicas con
respecto a solidos suspendidos totales.
FUENTE: BUMHAN etal.1998 Comparison of Microbial biomass Estimation Techniques for
the initial Rate Kinetic Studies

Figura 3. La correlacin de cada medida biomasa versus los solidos
suspendidos totales con nivel de confianza de 95 %.





La figura 3 muestra la relacin entre algunos mtodos para determinar
biomasa microbiana con los solidos suspendidos totales; ahora veremos otro
trabajo realizado (DONG JU KIM etal 2012) que muestra la relacin que existe
entre la entre el recuento de microrganismos y la biomasa microbiana calculada
por medio de la densidad ptica a 600 nm, en una determinada muestra.

FUENTE: DONG JU KIM 2012. Relation of microbial biomass to counting units for
Pseudomonas aeruginosa

Figura 4. Relacin entre el recuento en placa y la biomasa
microbiana representada por la densidad ptica.

La relacin mostrada anteriormente es para un cultivo puro, la figura 5 nos
muestra las relaciones entre los solidos suspendidos voltiles con un cultivo de
E932, otro cultivo de S. natans, y por ultimo un cultivo de lodos activados. Si bien
es cierto este ultimo no tiene un coeficiente de correlacin muy elevado, se puede
utilizar como indicador de la biomasa microbiana, ya que es sensible a los
aumentos y disminuciones de dicha biomasa como lo muestra el grafico.




FUENTE: CONTRERAS 2001. Un mtodo alternativo para la determinacin de biomasa en
cultivos puros y sistemas de barros activados

Figura 5. Relacin entre la biomasa microbiana y SSV. Los puntos
rojos representan al cultivo S.natans, los puntos negros representan
al cultivo E932, y los puntos azules representan al de barros
activados.

Cuadro 5. Relacin de las concentraciones de biomasa en
(numero/mL) y (mg/L) en distintas etapas del tratamiento



FASES DEL TRATAMIENTO
Recuento
(numero/mL)
Biomasa
(numero/g)
Biomasa
(mg/L)
Aguas residuales sedimentadas 6.80.*10
8
3.2 *10
12
212.500
Liquido del lodo activado mezclado 6.60 *10
9
1.4 *10
12
4714.286
Limos de los filtros 6.20 *10
10
1.3 *10
12
47692.308
Efluentes secundarios 5.20 *10
7
4.3 *10
12
12.093
Efluentes terciarios 3.40 *10
7
3.4 *10
12
10.000
FUENTE: ATLAS (Ecologa microbiana y microbiologa ambiental)








4.6. Ajuste de datos a un sistema de ecuaciones diferenciales no lineales

En el diseo de procesos, es de vital importancia la sistematizacin de los
mismos, y es frecuente realizarlo a travs de modelos matemticos. (GERAD
1999). Las ecuaciones diferenciales ordinarias, suelen utilizarse en problemas de
ingeniera, ya que estos son sencillos de solucionar, en comparacin con los
sistemas de ecuaciones diferenciales no lineales acoplados. Si bien es cierto
estos ltimos, son mas consistentes a la hora de modelar el proceso, son poco
utilizados debido a la complejidad de solucin e interpretacin. Cabe mencionar
que no existe regresiones ordinarias para este tipo de sistemas, generalmente se
utilizan ajustes grficos, existen algoritmos estadsticos recursivos, (Filtro de
Kalman Extendido), para dar soluciones mas consistentes y exactas de estos
problemas (CARRASCO 2002).
Solucin de un sistema de ecuaciones diferenciales no lineales por el mtodo
Runge Kutta de 4 orden
Algoritmo de solucin:

)








V. MATERIALES Y METODOS

5.1. Ubicacin
La investigacin se realizar en el laboratorio de microbiologa de la
Universidad Nacional Agraria de la Selva, en el rea de biotecnologa.

5.2. Equipos y materiales

5.2.1. Equipos
Estufa (PRECISIN THELCO)
Contador de colonias (TRITRIPLAQUE MIM)
Ox - metro (HANNA 9146)
PH metro (EXTECHS INSTRUMENTS)
Termmetro (EXTECHS INSTRUMENTS)
Balanza analtica (HWKASSEL G200)
Mufla

5.2.2. Materiales
Placa
Plumn indeleble
Papel filtro
Tubos
Llaves de paso
Bombas
Matraces
Medio de cultivo Plate-Count
Cronometro





5.3. Metodologa

5.3.1. Construccin del equipo que simule el sistema de lodos activados
Se construyeron 3 equipos, los cuales siguieron el esquema de la figura 1,
con una cmara de aireacin y otra de decantacin, ambas de vidrio, la cmara
de aireacin tiene un volumen de aproximadamente 15 Litros, cuenta tambin
con 2 agujeros de pulgada de dimetro en la parte trasera y superior, una
agujero para la alimentacin de agua fresca sin tratar, y la otra para la
recirculacin de lodos, tambin la cmara de aireacin cuenta con una abertura
que se encuentra en la parte superior delantera, a una altura desde su base de
17 cm y a cm por debajo de los 2 agujeros mencionados anteriormente, la
cmara de decantacin, tiene un volumen de aproximadamente 4 Litros, el cual
esta conectado por su parte trasera a la cmara de aireacin por medio de una
abertura de 3.5 cm de profundidad; esta cmara cuenta con 2 agujeros en la
parte frontal de media pulgada, una es para el agua tratada y el otro agujero es
para la recirculacin de lodos, en la parte inferior este cuenta con una pendiente
de 36 grados empezando desde la mitad de la parte posterior del decantador
hasta la base. Estos reactores fueron alimentados a travs de tuberas de
pulgada de PVC por un tanque de almacenamiento de agua fresca de 150 Litros.
Parea la aireacin se utilizo una bomba de refrigeradora, con ayuda de unas
cuantas bombas de pecera, las cuales suministraban aire a travs de mangueras
con pequeos orificios que simulaban un difusor de aire.
Se tomaron algunos datos de los parmetros de pH y Temperatura en periodos
irregulares de tiempo






Figura 6. Diseo del bioreactor que simule un sistema de lodos activado




Se corri desde el tanque de alimentacin agua, hasta los bioreactores
por medio de las tuberas; se comprob que no existan fugas de agua y aire,
o algn otro desperfecto que altere el funcionamiento del bioreactor.
El caudal se determino por medio de un racionamiento, sabiendo que
el tanque de almacenamiento es de una capacidad de 146 Litros, que son 3
los bioreactores a alimentar, durante 5 das a la semana, obteniendo un
caudal aproximado de 6.8 mL/min, valor que se encuentra dentro del rango
de los caudales que utilizo (VARILA y DIAZ etal. 1999).
5.3.1.1. Elaboracin del plan para la toma de datos
Se elaboro un plan de trabajo para realizar las mediciones tanto de
DBO como de biomasa microbiana, para el cual se diseo una hoja de
trabajo para la etapa de aclimatacin y para la etapa de evaluacin donde se
determino los parmetros biocinticos.
Etapa de aclimatacin
En la etapa de aclimatacin solo se tomo los caudales y la biomasa
microbiana lo cual tuvo un tiempo de duracin de 3 semanas, se elaboraron 2
hojas, una para la toma de caudales (ANEXO 1) y otra para la determinacin
de biomasa microbiana (ANEXO 2).

Etapa de evaluacin para la estimacin de los parmetros
biocinticos.
En esta etapa se evalu la variacin de la biomasa (ANEXO 3) como
de la carga orgnica (ANEXO 4), para lo cual posteriormente dichos cambios
se ajustaron al modelo que se presenta mas adelante.





5.3.2. Determinacin del modelo matemtico a utilizar
Para la determinacin del modelo matemtico a utilizar se considero el
flujograma convencional (figura 1) de lodos activados, para realizar los
balances de masa microbiana y de carga orgnica de acuerdo a la ecuacin
(15), donde las tasas de crecimiento microbiano y consumo de sustrato o
carga orgnica, se consideraron las ecuaciones (13) y (14) respectivamente.
Tanto la biomasa microbiana como la carga orgnica, pasan a travs del
flujograma de la figura (1), por lo tanto ser necesario hacer un balance de
biomasa microbiana y carga orgnica por separado, sujetndonos a los
enunciados de la ecuacin (15).

a) Balance de masa para la biomasa microbiana
Solo se emplea el volumen de la cuba de aireacin, donde se
analizaran las entradas, la produccin y las salidas de biomasa.
Entradas de biomasa en la cuba de aireacin
Las entradas de biomasa en la cuba de aireacin solo son por la
alimentacin de agua fresca y de la recirculacin de lodos.

Donde:




Q
0
= Caudal de alimentacin del agua fresca.
X
0
= Concentracin de biomasa en el agua fresca.
Q
r
= Caudal de recirculacin.
X
r
= Concentracin de biomasa de recirculacin.
Produccin de biomasa en la cuba de aireacin
La produccin de biomasa es dada por el crecimiento de los
microrganismos, donde la ecuacin (13), nos muestra la cintica de
crecimiento
Salidas de biomasa de la cuba de aireacin
Las salidas de biomasa en la cuba de aireacin simplemente se da por
la corriente de flujo, cabe mencionar que para este balance se considera un
reactor de mezcla completa (CSTR), el que considera que la concentracin
de biomasa de salida es igual a la concentracin de biomasa presente en el
reactor.

Donde:
X = Concentracin de biomasa del reactor.
b) Balance de masa para la carga orgnica




Solo se emplea el volumen de la cuba de aireacin, donde se
analizaran las entradas, la produccin y las salidas de carga orgnica.

Entradas de carga orgnica en la cuba de aireacin
Las entradas de carga orgnica en la cuba de aireacin solo son por la
alimentacin de agua fresca, se considera que la carga orgnica de
recirculacin es muy baja, ya que esta recirculacin es de lodos
sedimentados, que paso por un proceso de degradacin.

Degradacin de carga orgnica en la cuba de aireacin
La degradacin de carga orgnica es dada por el consumo de los
microrganismos, donde la ecuacin (14), nos muestra la cintica de
consumo.
Salidas de carga orgnica de la cuba de aireacin
Las salidas de carga orgnica en la cuba de aireacin simplemente se
da por la corriente de flujo, cabe mencionar que para este balance se
considera un reactor de mezcla completa (CSTR), el que considera que la
concentracin de biomasa de salida es igual a la concentracin de biomasa
presente en el reactor.

Donde:
S = Concentracin de carga orgnica del reactor.

5.3.3. Determinacin de la carga orgnica
La carga orgnica puede ser representada por la DBO (RAMALHO
1999), para lo cual utilizaremos botellas pintadas con esmalte negro, con un
volumen de 500 mL, el factor de dilucin a utilizar fue aquel que en su rango
de DBO este dentro 750 (ppm) (VARILA y DIAZ etal. 2008) entonces
utilizamos un factor de dilucin de 0.5% que es el factor que se debe utilizar
para DBO entre 400 1400, (Johana Neira).,
Para el calculo de la DBO se utilizo la formula (17), donde se necesita
conocer el oxigeno disuelto (OD) de la muestra y el blanco, en el primer y
quinto da. Para poder determinar el OD se utilizo un oxmetro, descrito entre
los materiales de trabajo.
Como se menciono anteriormente, existen 2 etapas de trabajo una de
aclimatacin y otra de evaluacin para la determinacin de los parmetros
biocinticos. La carga orgnica representada por la DBO solo se evaluara en
la segunda etapa, donde se lleno una hoja (ANEXO 5) para la posterior
determinacin de la DBO.



5.3.4. Determinacin de la biomasa microbiana




La representacin de la biomasa microbiana fue dada por los solidos
suspendidos voltiles SSV, (RAMALHO 1994). Estos SSV, se calcularon
indirectamente a travs de recuento de microrganismos por placa difusa
(Pour Plate), para lo cual primero se realizo un ajuste entre los SSV, de los
lodos versus el recuento en placa de microrganismos de los lodos.
Recuento de microrganismos (Mtodo Pour Plate)
Para el recuento en placa se utilizo el mtodo descrito en la literatura,
con la diferencia entre el recuento en la etapa de aclimatacin y evaluacin,
con la etapa de la determinacin de la relacin entre el recuento en placa
difusa y los SSV

Recuento de microrganismos en la etapa de aclimatacin y
evaluacin
En este periodo se hizo el recuento como se menciono en la literatura
(AWWA APHA), con la diferencia que para la toma de muestra no se hizo
diluciones en tubos de ensayo, si no que se utilizo una micropipeta que tiene
un rango desde 0.1 hasta 100 microlitros, para el agua fresca y lodos en el
licor de mezcla se utilizo una dilucin de 10
-6
y para los lodos de
recirculacin, una dilucin de 10
-7
, estos se sembraron directamente a un
medio de cultivo genrico (Plate Count), El medio de cultivo se preparo
siguiendo la proporcionalidad para un Litro, que menciona el envase del
medio de cultivo. Una vez realizado la siembra y la incubacin, se realizo el
conteo mediante el equipo contador de colonias descrito anteriormente, para




posteriormente llenar los datos (ANEXO 6) y calcular el nmero de
microrganismos, para lo cual se utilizo la formula (18).
Solidos Suspendidos Voltiles de una muestra
Para la determinacin de solidos suspendidos voltiles se seguir lo
establecido por la (AWWA APHA), teniendo un volumen de muestra de 50
mL para todos los anlisis, para lo cual se lleno de datos la hoja elaborada de
acuerdo al ANEXO 7. Cabe mencionar que estos SSV solo se calcularon en
la etapa de calibracin para la determinacin de la relacin entre el recuento
y los SSV. La formula para determinar los SSV es la siguiente:

Donde:
SSV = Solidos Suspendidos Voltiles (mg/L)
SST = Solidos Suspendidos Totales (mg/L)
SSNV = Solidos Suspendidos No Voltiles o Fijos (mg/L)
Para la determinacin de solidos suspendidos totales se seguir la formula
establecida por (AWWA APHA):

Donde:
P
D
= Peso del papel filtro despus del filtrado y despus de la estufa (mg)
P
A
= Peso del papel filtro antes del filtrado y antes de la estufa (mg)




V = Volumen de muestra (mL)
Para la determinacin de los solidos suspendidos no voltiles o fijos se
seguir la formula establecido por la (AWWA APHA).

Donde:
C
D
= Peso del papel filtro despus de la mufla (cenizas) (mg).
5.3.5. Determinacin de la relacin entre recuento en placa (Pour
Plate) y los Solidos Suspendidos Voltiles (SSV)
A diferencia de la etapa anterior, aqu se realizo diluciones seriadas
como muestra la figura 7, y luego se procedi como en la etapa anterior


Figura 7. Diluciones seriadas de la muestra (lodo del reactor) para la siembra




Determinacin de la relacin entre SSV y recuento en placa (mtodo
Pour Plate)
Como se observo en la literatura, la relacin entre los distintos tipos de
mediciones de biomasa microbiana posee relaciones directamente
proporcionales, para lo cual asumimos en esta relacin de estos 2 mtodos
para medir biomasa microbiana (SSV y recuento en placa), tambin como
directamente proporcionales, para lo que se utilizo la ecuacin de la recta
para el ajuste de estos datos.

Donde:
SSV= Solidos Suspendidos Voltiles del reactor (mg/L)
UFC = Unidades Formadoras de Colonias del reactor (Numero/mL)
a,b = Constantes de la ecuacin que se determinaron experimentalmente
Los datos que se ajustaron a la ecuacin (30) se llenaron en la hoja del
ANEXO 8.
5.3.6. Ajuste de los datos obtenidos a la ecuacin modelada.
El ajuste que se realizo, fue un ajuste grafico, ya que el sistema de
ecuaciones diferenciales no lineales obtenido, como producto de la modelacin que
veremos mas adelante, no puede obtenerse ajuste por mtodos ordinarios
(CARRASCO 2002). Se desarrollo una hoja programada del tipo Runge Kutta de 4
orden, descrito en la ecuacin (a), para lo cual se uso el software Matlab 2011.




Para realizar dicho ajuste solo se trabajo con el promedio de los 3
reactores tanto como para biomasa microbiana como para DBO.








VI. RESULTADOS

6.1. Construccin del Equipo que simule un sistema de lodos activados a
escala de laboratorio


Figura 8. Construccin de los 3 reactores instalados





Figura 9. Tanque de alimentacin para los 3 reactores instalados



Figura 10. Mangueras suministradoras de aire por medio de bombas, a
travs de los orificios, en la cuba de aireacin para el mezclado y la
suministracin de Oxigeno Disuelto OD (mg/L)





Figura 11. Pendiente inclinada en la cuba de decantacin, para evitar la
acumulacin de lodos en las esquinas y facilitar su salida.



Figura 12. Instalacin del equipo que simule el sistema de lodos activados
a escala de laboratorio






Cuadro D. Parmetros pH y Temperatura obtenidos en el reactor 1
en la etapa de evaluacin
Fecha
T C pH
Reactor Entrada Reactor
18/03/2014 22.3 * 7.88
25/03/2014 19.7 5.73 8.13
31/03/2014 24.6 6.41 7.27
01/04/2014 26.1 * *
PROMEDIO 23.18 6.07 7.76

Cuadro E. Parmetros pH y Temperatura obtenidos en el reactor 2
en la etapa de evaluacin
Fecha
T C pH
Reactor Entrada Reactor
18/03/2014 22.1 * 7.17
25/03/2014 22.7 5.73 7.26
31/03/2014 19.6 6.41 8.2
01/04/2014 20.4 * *
PROMEDIO 21.20 6.07 7.54

Cuadro F. Parmetros pH y Temperatura obtenidos en el reactor 3
en la etapa de evaluacin
Fecha
T C pH
Reactor Entrada Reactor
18/03/2014 25.1 * 8.11
25/03/2014 24.5 5.73 7.52
31/03/2014 20.1 6.41 7.49
01/04/2014 21.2 * *
PROMEDIO 22.73 6.07 7.71







6.2. Determinacin del modelo matemtico a utilizar para la estimacin de
los parmetros biocinticos.

Determinacin del modelo matemtico para el balance de biomasa
microbiana
Considerando el enunciado de la ecuacin (15) y las ecuaciones (20), (13) y (22)
obtenemos como balance total de biomasa microbiana para la cuba de aireacin el
siguiente modelo:

Determinacin del modelo matemtico para el balance de carga orgnica
Considerando el enunciado de la ecuacin (15) y las ecuaciones (24), (14) y (26)
obtenemos como balance total de carga orgnica para la cuba de aireacin el
siguiente modelo:

6.3. Determinacin de la carga orgnica en el periodo de evaluacin
Carga Orgnica (DBO) en la entrada a los reactores






Figura 8. DBO (ppm) en la entrada del reactor 1 en la etapa de
evaluacin


Figura 9. DBO (ppm) en la entrada del reactor 2 en la etapa de
evaluacin

0
200
400
600
800
1,000
1,200
1,400
0 50 100 150 200 250 300
D
B
O

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 1
Promedio = 1067.95 (ppm)
0
200
400
600
800
1,000
1,200
1,400
1,600
0 50 100 150 200 250 300
D
B
O
(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 2
Promedio = 1027.88 (ppm)





Figura 10. DBO (ppm) en la entrada del reactor 3 en la etapa de
evaluacin


Promedio de los 3 reactores 1046.45 (ppm)



Ver ANEXO C. (Cuadros 44, 46, 48).



Carga Orgnica en los Reactores
0
200
400
600
800
1,000
1,200
0 50 100 150 200 250 300
D
B
O

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 3
Promedio = 862.34 (ppm)





Figura 11. DBO (ppm) en el reactor 1 en la etapa de evaluacin


Figura 12. DBO (ppm) en el reactor 2 en la etapa de evaluacin
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
1000
0 50 100 150 200 250 300
D
B
O

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 1
Promedio = 250.66 (ppm)
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
1000
1100
1200
0 50 100 150 200 250 300
D
B
O

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 2
Promedio = 282.51 (ppm)





Figura 13. DBO (ppm) en el reactor 3 en la etapa de evaluacin




Promedio de los 3 reactores 267.96 (ppm)



Ver ANEXO C. (Cuadros 45, 47, 49).




6.4. Determinacin de la Biomasa microbiana en el periodo de evaluacin y
aclimatacin

6.4.1. Determinacin de Biomasa microbiana en el periodo de aclimatacin
Biomasa microbiana en la entrada
0
100
200
300
400
500
600
700
800
0 50 100 150 200 250 300
D
B
O

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 3
Promedio = 270.70 (ppm)





Figura 14. SSV (ppm) en la entrada del reactor 1 en la etapa de
aclimatacin


Figura 15. SSV (ppm) en la entrada del reactor 2 en la etapa de
aclimatacin
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
0 100 200 300 400 500
S
S
V

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 1
Promedio = 691.15 (mg/L)
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
0 100 200 300 400 500
D
B
O

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 2
Promedio = 849.72 (mg/L)





Figura 16. SSV (ppm) en la entrada del reactor 3 en la etapa de
aclimatacin

Promedio de los 3 reactores 715.75 (ppm)


Ver ANEXO C. (Cuadros 20, 22, 24)



Biomasa microbiana en el reactor
0
200
400
600
800
1000
1200
0 100 200 300 400 500
S
S
V

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 3
Promedio = 606.37 (mg/L)





Figura 17. SSV (ppm) en el reactor 1 en la etapa de aclimatacin



Figura 18. SSV (ppm) en el reactor 2 en la etapa de aclimatacin
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
0 100 200 300 400 500
S
S
V

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 1
Promedio = 2235.86 (ppm)
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
0 100 200 300 400 500
S
S
V

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 2
Promedio = 1586.17 (ppm)





Figura 19. SSV (ppm) en el reactor 3 en la etapa de aclimatacin



Promedio de los 3 reactores 1872.09 (ppm)


Ver ANEXO C. (Cuadros 20, 22, 24)



Biomasa microbiana de recirculacin
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
0 100 200 300 400 500
S
S
V

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 3
Promedio = 1794.25 (ppm)





Figura 20. SSV (ppm) de recirculacin del reactor 1 en la etapa de
aclimatacin


Figura 21. SSV (ppm) de recirculacin del reactor 2 en la etapa de
aclimatacin
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
0
2
4
4
8
7
2
9
6
1
6
8
1
9
2
2
1
6
2
4
0
2
6
4
3
3
6
3
6
0
3
8
4
4
0
8
4
3
2
S
S
V

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 1
Promedio = 8799.61 (ppm)
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
0
2
4
4
8
7
2
9
6
1
6
8
1
9
2
2
1
6
2
4
0
2
6
4
3
3
6
3
6
0
3
8
4
4
0
8
4
3
2
S
S
V

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 2
Promedio = 7860.80 (ppm)





Figura 22. SSV (ppm) de recirculacin del reactor 3 en la etapa de
aclimatacin


Promedio de los 3 reactores 7732.36 (ppm)


Ver ANEXO C. (Cuadros 20, 22, 24)






6.4.2. Determinacin de Biomasa microbiana en el periodo de evaluacin
Biomasa microbiana en la entrada
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
0
2
4
4
8
7
2
9
6
1
6
8
1
9
2
2
1
6
2
4
0
2
6
4
3
3
6
3
6
0
3
8
4
4
0
8
4
3
2
S
S
V

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 3
Promedio = 6536.65 (ppm)





Figura 23. SSV (ppm) de entrada en los 3 reactores en la etapa de
evaluacin


Promedio de los 3 reactores 556.46 (ppm)


Ver ANEXO C. (Cuadros 21, 23, 25)

Biomasa microbiana en los reactores
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
0 50 100 150 200 250 300
S
S
V

(
m
g
/
L
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 1, 2 y 3
Entrada - Evaluacion





Figura 23. SSV (ppm) en el reactor 1 en la etapa de evaluacin



Figura 24. SSV (ppm) en el reactor 2 en la etapa de evaluacin
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
0 50 100 150 200 250 300
S
S
V

(
m
g
/
L
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 1
Promedio = 1519.96 (ppm)
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
4000
0 50 100 150 200 250 300
S
S
V

(
m
g
/
L
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 2
Promedio = 1674.80 (ppm)





Figura 25. SSV (ppm) en el reactor 3 en la etapa de evaluacin

Ver ANEXO C. (Cuadros 21, 23, 25)


Promedio de los 3 reactores 1758.64 (ppm)



Biomasa microbiana en la recirculacin

0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
0 50 100 150 200 250 300
S
S
V

(
m
g
/
L
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 3
Promedio = 2081.15 (ppm)





Figura 26. SSV (ppm) de recirculacin del reactor 1 en la etapa de
evaluacin

Figura 27. SSV (ppm) de recirculacin del reactor 2 en la etapa de
evaluacin
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
10000
0
2
4
4
8
7
2
9
6
1
6
8
1
9
2
2
1
6
2
4
0
2
6
4
S
S
V

(
m
g
/
L
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 1
Promedio = 6909.73 (ppm)
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
0
2
4
4
8
7
2
9
6
1
6
8
1
9
2
2
1
6
2
4
0
2
6
4
S
S
V

(
m
g
/
L
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 2
Promedio = 9773.45 (ppm)





Figura 28. SSV (ppm) de recirculacin del reactor 3 en la etapa de
evaluacin



Promedio de los 3 reactores 8153.51 (ppm)



Ver ANEXO C. (Cuadros 21, 23, 25)


6.5. Determinacin de la relacin entre el recuento en placa por el mtodo
Pour Plate, y los Solidos Suspendidos Voltiles.
6.6.

0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
0
2
4
4
8
7
2
9
6
1
6
8
1
9
2
2
1
6
2
4
0
2
6
4
S
S
V

(
p
p
m
)

Tiempo (Horas)
REACTOR 3
Promedio = 7776.73 (ppm)




Cuadro G. Datos obtenidos para la determinacin de la relacin
entre SSV (mg/L) y el recuento en placa (UFC/mL)
FUENTE: Elaboracin Propia
Recuento (UFC/mL) SSV (mg/L)
9.20E+08 1056.77
1.60E+09 805.38
3.58E+09 983.51
6.87E+09 3290.68
7.40E+09 3996.78


Figura 29. Relacin entre los SSV (mg/L) y el recuento de
microrganismos (Numero/mL)

6.7. Ajuste de los datos experimentales para la determinacin de los
parmetros biocinticos
y = 4.74041E-07x + 95.3795
R = 87.8744
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
4000
4500
0.00E+00 2.00E+09 4.00E+09 6.00E+09 8.00E+09
S
S
V

(
m
g
/
L
)

UFC (Numero/mL)
Relacion entre SSv y UFC




Cuadro H. Resultado de los parmetros biocinticos
Parmetro
biocinticos
Valor Unidad
max 3.84 da
-1
K
S
587 mg/L
Y
XS
1.476 mgSSV/mgDBO
K
d
0.98 da
-1



Figura 30. Biomasa modelada (simulacin) con la biomasa
experimental





Figura 31. Carga orgnica modelada (simulacin) con la carga
orgnica experimental


Figura 32. Biomasa modelada (comparacin) con la biomasa
experimental (R
2
= 0.9638)





Figura 33. Carga orgnica modelada (comparacin) con la carga
orgnica experimental (R
2
= 0.8945)

Cuadro I. Parmetros de diseo y caractersticas del equipo, para la
determinacin de los parmetros biocinticos.
Parmetro Valor Unidad
Volumen del decantador 4.16 Litros
Volumen del aireador
13.80
Litros
Caudal de Entrada*
0.42
Litros/hora
Caudal de recirculacin*
0.06
Litros/hora
Biomasa de entrada*
556.46
mg/L
Sustrato de entrada*
1046.45
mg/L
Biomasa en el reactor*
1758.64
mg/L
Sustrato en el reactor*
267.96
mg/L
Biomasa de recirculacin*
8153.51
mg/L
Tiempo de retencin hidrulica 1.379 d
-1
Relacin A/M 0.432 mgDBO/mgSSV/da
* Valores obtenidos en promedio de los 3 reactores










VII. DISCUSION
El volumen de la cmara de aireacin del trabajo es de 20.5x21x31cm
(13.8) Litros, que difiere con los volmenes utilizados en los trabajos de TORRES
etal. 1999, (9.8 Litros) y VARILA y DIAZ 2008, (8 Litros). El volumen del decantador
secundario del trabajo es de (4.16) Litros, que difiere con los volmenes utilizados
en los trabajos de TORRES etal. 1999, (7.8 Litros) y VARILA y DIAZ2008, (5.9
Litros) La regulacin de los caudales en el trabajo se realizaron de forma manual,
por el mtodo volumtrico, a diferencia de (VARILA y DIAZ 2008), que realizo su
estudio con una bomba peristltica, el cual garantizaba un caudal constante. Para la
aireacin, se utilizo una bomba de refrigeradora de potencia desconocida, a
diferencia de (VARILA y DIAZ 2008), que utilizo difusores con una potencia de
35W/m
3
. Los parmetros de operacin (pH y T C) se encuentran dentro de los
rangos obtenidos en el trabajo de (VARILA y DIAZ 2008), sin embargo la
temperatura se encuentra fuera del rango propuesto por (GIL 2001), 22.73 C,
frente a 30 45 C.

El modelo de cintica microbiana utilizado fue el de Monod, el cual asume
a la DBO como nico representante de la materia orgnica. El agua residual de
camal posee nitratos, fosfatos, compuestos minerales entre otros, (GARZON etal.
2014) para el cual es recomendable la ecuacin de la IAWPRC (GERARD 1999).





El agua residual de la actividad porcina posee nitratos, fosfatos,
compuestos minerales entre otros, (GARZON etal. 2014) lo que hace necesario un
anlisis de otros elementos para una mejor representacin de la carga orgnica,
cabe mencionar que la DBO solo como indicador de materia orgnica si resulta
factible (RAMALHO 1994), Para el trabajo se utilizaron botellas de 500 mL, que
difiere del volumen descrito por la APHA AWWA WPCF (300mL). La DBO
promedio de entrada fue de 1046.45 ppm, a diferencia de la DBO obtenida por
algunos autores (GARZON etal. 2014) 5751 ppm o por (VARILA y DIAZ 2008) 750
ppm. Esto se puede deber a los mtodos utilizados, a los factores de dilucin, a las
ecuaciones para el clculo, o a los equipos utilizados.
En la etapa de aclimatacin, para poder correr el equipo en el tratamiento
de aguas, se necesita que la biomasa microbiana alcance en SSV 3500 ppm
(RAMALHO 1994), a diferencia del trabajo realizado, que se obtuvo en promedio
para los 3 reactores 1872.09 ppm, para 3 semanas de aclimatacin, cabe recalcar
que el trabajo tuvo como objetivo observar la cintica de consumo para determinar
los parmetros biocinticos. Tambin los SSV de entrada fueron de 715.75 ppm a
diferencia de otros autores (GARZON etal. 2014) 2030 ppm o (VARILA y DIAZ.
2008) 1600 ppm, esta diferencia se puede deber a la forma en que se determinaron
los SSV, indirectamente a travs del recuento de microrganismos por medio de la
ecuacin (34), y la forma en que se realizo el recuento, (sin hacer diluciones), y los
conteos obtenidos, eran todos mayores de 300 UFC/ placa, para lo cual segn
(APHA AWWA WPCF 1992),.no debe sobrepasar el limite mencionado, lo que
pudo causar un sesgo al momento del conteo tanto en la etapa de aclimatacin,
como la de evaluacin. Segn (ATLAS etal. 2001) para el liquido del licor de mezcla
el recuento de microrganismos hetertrofos es de 6,6.10
9
UFC/mL le corresponde




4714.286 ppm de biomasa, y segn la ecuacin obtenida (34), para 6,6.10
9
UFC/mL
le corresponde 3193.71 ppm de biomasa como SSV. Segn (GARZON etal. 2014)
para agua residual fresca (entrada) el recuento de microrganismos es de 9,2.10
8

UFC/mL le corresponde 2030 ppm de biomasa, y segn la ecuacin obtenida (34),
para 9,2.10
8
UFC/mL le corresponde 507.24 ppm de biomasa como SSV. Este
sesgo por defecto en la ecuacin obtenida, puede ser debido a la diferencia de
mtodos utilizados al momento de calcular las UFC/mL de las muestras.
Los parmetros biocinticos obtenidos en la prctica realizada no se
encuentran dentro de los rangos propuestos por (GIL 2001), excepto el valor de
max, este valor es cercano al mnimo en el rango, esto se puede deber a la
relativamente baja temperatura obtenida durante el proceso. El valor de Y
XS
, es
distinto al obtenido por (FINAMORE etal. 1999), (1.476 mgSSV/mgDBO frente a
0.39 mgSSV/mgDBO), tambin esta por encima del establecido por (GIL 2001),
(1.476 mgSSV/mgDBO frente al rango de 0,38-0,75 mgSSV/mgDBO), esto se debe
a que los valores de SSV siempre se encuentran por encima de la DBO, haciendo
que los mg de la carga orgnica, produzcan mayor cantidad de mg de biomasa en
teora, este sesgo se puede deber a algunos disconformes en las medidas de
biomasa microbiana y carga orgnica.
El valor de K
d
, es distinto al obtenido por (FINAMORE etal. 1999), (0.98 d
-
1
frente a 0.034 d
-1
), tambin esta por encima del establecido por (GIL 2001), (0.98
d
-1
frente al rango de 0,01-0,14 d
-1
), Este valor alto de la tasa de muerte endgena
de los microrganismos, se puede deber a la sobresaturacin de biomasa microbiana
en las recirculaciones de biomasa y la baja relacin A/M obtenida (0.432
mgDBO/mgSSV/da, frente al rango para el sistema convencional propuesto por
GERARD 1999, 0.8 2 mgDBO/mgSSV/da) , ya que estos no se realizaron en




forma continua, si no que se verti cada periodo de tiempo todo el lodo decantado
acumulado, saturando de biomasa microbiana la cuba de aireacin, disminuyendo la
cantidad de alimento (carga orgnica) por microrganismo (biomasa microbiana),
causando muerte por inanicin, aumentando el valor de la tasa de muerte.
El valor de K
S
, es distinto al obtenido por (FINAMORE etal. 1999), (587
mg/L frente a 35 mg/L), tambin esta por encima del establecido por (GIL 2001),
(587 mg/L frente al rango de 12 120 mg/L), Este valor alto de la constante de
semisaturacin, refleja la alta cantidad de carga orgnica o sustrato, que necesita el
microrganismo para alcanzar la tasa mxima de crecimiento, esto se puede deber a
la baja relacin A/M obtenida (0.432 mgDBO/mgSSV/da, frente al rango para el
sistema convencional propuesto por GERARD 1999, 0.8 2 mgDBO/mgSSV/da)
este hace que sea necesario mayor cantidad de carga orgnica o sustrato por
microrganismo, para alcanzar la mxima tasa de crecimiento, reflejado en el alto
valor de K
S
, obtenido.








VIII. CONCLUSION

1. Se construyo en equipo que simule un sistema de lodos activados a escala
de laboratorio, con una cuba de aireacin de 20.5x21x31cm (13,8) Litros, una
cmara de decantacin con dimensiones de rea trapezoidal lateral de
20.5x11.25x11 cm, con un ancho de 21cm, obteniendo como volumen total 4,16
Litro, con una regulacin manual del caudal entrada y una bomba de refrigeradora
de potencia desconocida.
2. Se determino el modelo matemtico descrito en las ecuaciones 31 y 32.
3. Se determino la carga orgnica en la etapa de evaluacin, teniendo como
promedio en la entrada 1046.45 ppm, y en el reactor 267.96 ppm.
4. Se determino la biomasa microbiana tanto en la etapa de aclimatacin, como
la de evaluacin, obteniendo en la etapa de aclimatacin en promedio 715.75 ppm,
1872.09 ppm, 7732.36 ppm para la entrada al reactor, en la cuba de aireacin y en
la recirculacin respectivamente. En la etapa de evaluacin se obtuvo en promedio
556.46, 1758.64 ppm, 8153.51 ppm para la entrada al reactor, en la cuba de
aireacin y en la recirculacin respectivamente.
5. Se determino la relacin entre el recuento en placa de microrganismos por el
mtodo Pour Plate, con los solidos suspendidos voltiles, descrita en la ecuacin
34.




6. Se determinaron los parmetros biocinticos del agua residual del camal
municipal Tingo Mara, mediante un equipo que simulo un sistema de lodos
activados a escala de laboratorio, obteniendo como valores 3.84 da
-1
,
587mg/L,1.476 mgSSV/mgDBO y K
d
0.96 da
-1
para los parmetros max, K
S
, Y
XS
y
K
d
, respectivamente








IX. RECOMENDACIONES.

1. Utilizar una bomba peristltica para la regulacin del caudal de entrada,
garantizando as un flujo constante para no alterar la cantidad de carga orgnica y
biomasa microbiana en el sistema y evitar cambios bruscos que pueden alterar los
parmetros biocinticos obtenidos, tambin se recomienda utilizar difusores de aire
de potencia conocida, para garantizar una mezcla homognea y una adecuada
suministracin de oxigeno disuelto. Realizar un control continuo de los parmetros
pH y T C, y la relacin A/M
2. Utilizar un modelo mas riguroso para la evaluacin de cada componente del
agua residual
3. Utilizar distintas diluciones y distintas metodologas para el reporte de DBO,
tambin se recomienda un anlisis ms riguroso de componentes en el contenido
de materia orgnica del agua residual, para obtener una mejor representacin de la
materia orgnica.
4. En el recuento en placa de microrganismos, utilizar varias diluciones desde el
rango de 10
-5
hasta 10
-9
para obtener un recuento dentro del rango de 30 a 300
UFC/mL, para reportar los resultados. Tambin utilizar otros mtodos, para la
representacin de biomasa microbiana
5. Utilizar diferentes mtodos de recuento en placa de microrganismos para
comparar con la cantidad de SSV, y observar las diferencias




6. Utilizar un algoritmo estable para el ajuste de datos al modelo establecido,
hacer un control mas riguroso de los parmetros de operacin del reactor (pH, y T
C)








X. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA

APHA, AWWA, WPCF. 1992. Mtodos Normalizados Para El Anlisis De Aguas
Potables y Residuales. Espaa Ediciones Daz de Santos, S.A. 562 573,
1486 1492, 745 753 p

GERARD KYELI. 1999 Ingeniera Ambiental; Fundamentos Entornos Tecnologas y
Sistemas de Gestin, Antonio Garca Brage, Madrid, Impresos y Revistas
(IMPRESA), 721-726 p, Volumen 2

RAMALHO. 1983 Tratamiento de Aguas residuales, Domingo Jimnez Beltrn,
Facultad de Ciencia e Ingeniera Universidad de Laval Canad, Editorial
Reverte, 203 409 p

RONALD ATLAS, RICHARD BARTHA. 2001, Ecologa microbiana y microbiologa
Ambiental, Isabel Capella, Madrid, Editorial REVERTE, 217 -264 p

LUIS CARRASCO VENEGAS 2002. Mtodos Numricos Aplicados a La ingeniera,
Ricardo Figueroa Garca, Ediciones RFG, 440- 453 p





SUNASS 2013. Estadsticas de EPPS de aguas residuales [En Lnea]
(http://www.sunass.gob.pe/websunass/index.php/component/content/article?
layout=edit&id=307 28 de Mayo 2014)

FINAMORE 1999. Congreso Universidad Central de Venezuela [En Lnea].
(http://www.researchgate.net/publication/229009641_I-190
CONSTANTES_CINTICAS_EN_UN_SISTEMA_DE_LODOS_ACTIVADOS_
A_ESCALA_LABORATORIO 5 Julio 2014)

GIL 2001. Modelizacin de procesos de Lodos Activados. [En Lnea]
(http://books.google.com.pe/books?id=qOu2R_xo2voC&printsec=frontcover
&hl=es&source=gbs_ge_summary_r&cad=0#v=onepage&q&f=false 7 Marzo
2014)

BOSCO 2008. Tratamiento de efluentes lcteos, en lodos activados [En Lnea]
(http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718-
07642008000400003 22 de setiembre 2014)

BLANCO 2011. Lodos activados a escala laboratorio para el tratamiento de
efluentes de una industria papelera [En Lnea].
(www.bvsde.paho.org/bvsaidis/aresidua/peru/ventar017.pdf 8 de agosto
2014)

LOPEZ 2009. Tratamiento de aguas porcinas en lodos activados a escala de
laboratorio [En Lnea].




(www.tesis.uchile.cl/bitstream/handle/2250/103317/lopez_c.pdf?sequence=3
13 Agosto 2014).

TORRES 2011. Alternativas de tratamiento biolgico aerobio para el agua residual
domstica del municipio de Cali, Colombia [En Lnea].
(http://www.raco.cat/index.php/afinidad/article/view/268129 2 abril 2014).

VARILA Y DIAZ2008. Tratamiento de aguas residuales mediante lodos activados a
escala laboratorio [En Lnea].
(www.uelbosque.edu.co/sites/.../tratamiento_aguas_residuales7-2.pdf 6 de
Marzo 2014).
GARZON 2014. Caracterizacin de aguas residuales porcinas y su tratamiento por
diferentes procesos en Mxico [En Lnea].
(file:///C:/Users/User/Downloads/48000-130846-1-PB.pdf 9 de Abril 2014)

DONG JU KIM 2012. Relation of microbial biomass to counting units for
Pseudomonas aeruginosa [En Linea].
(http://www.academicjournals.org/article/article1380721635_Kim%20et%20a
l.pdf 3 de setiembre 2014)

BUMHAN 1998. Comparison of Microbial biomass Estimation Techniques for the
initial Rate Kinetic Studies [En Linea]. (http://www.eeer.org/upload/eer-3-1-
47-6.pdf 12 de setiembre 2014)
CONTRERAS 2001. Un mtodo alternativo para la determinacin de biomasa en
cultivos puros y sistemas de barros activados [En Lnea].




ANEXOS






I. INTRODUCCIN .............................................................................................. 1
II. JUSTIFICACIN .............................................................................................. 3
III. OBJETIVOS ..................................................................................................... 4
3.1. Objetivos Generales................................................................................... 4
3.2. Objetivos especficos ................................................................................. 4
IV. REVISION DE LITERATURA. .......................................................................... 5
4.1. Construccin de equipos que simulen un sistema de lodos activados a
escala de laboratorio. ........................................................................................... 5
4.1.1. Antecedentes de estimacin de parmetros biocinticos a escala de
laboratorio. ........................................................................................................... 5
4.1.2. Sistemas convencionales de lodos activados a escala de laboratorio ... 7
4.2. Elaboracin de modelos matemticos para la estimacin de parmetros
biocinticos ........................................................................................................ 10
4.2.1. Parmetros biocinticos de crecimiento de microrganismos ................ 10
4.2.2. Balance de Materia. .............................................................................. 13
4.2.3. Reactor de Mezcla completa. ............................................................... 14
4.3. Determinacin de la carga Orgnica en aguas residuales ....................... 15
4.3.1 Demanda Bioqumica de Oxigeno ........................................................ 15
4.4. Biomasa microbiana................................................................................. 18
4.4.1. Recuento microrganismos hetertrofos en placa difusa (Pour Plate) ... 18
4.4.2. Solidos Totales en Suspensin (103 105 C) .................................... 21




4.4.3. Solidos Suspendidos Voltiles (SSV). .................................................. 22
4.5. Relacin entre recuento en placa y biomasa microbiana ......................... 23
4.6. Ajuste de datos a un sistema de ecuaciones diferenciales no lineales .... 26
V. MATERIALES Y METODOS .......................................................................... 27
5.1. Ubicacin ................................................................................................. 27
5.2. Equipos y materiales ................................................................................ 27
5.2.1. Equipos ................................................................................................ 27
5.2.2. Materiales ............................................................................................. 27
5.3. Metodologa ............................................................................................. 28
5.3.1. Construccin del equipo que simule el sistema de lodos activados ..... 28
5.3.2. Determinacin del modelo matemtico a utilizar .................................. 31
5.3.3. Determinacin de la carga orgnica ..................................................... 34
5.3.4. Determinacin de la biomasa microbiana ............................................. 34
5.3.5. Determinacin de la relacin entre recuento en placa (Pour Plate) y
los Solidos Suspendidos Voltiles (SSV)........................................................... 37
5.3.6. Ajuste de los datos obtenidos a la ecuacin modelada. ....................... 38
VI. RESULTADOS ............................................................................................... 40
6.1. Construccin del Equipo que simule un sistema de lodos activados a escala
de laboratorio ..................................................................................................... 40
6.2. Determinacin del modelo matemtico a utilizar para la estimacin de los
parmetros biocinticos. .................................................................................... 44
6.3. Determinacin de la carga orgnica en el periodo de evaluacin ............ 44




6.4. Determinacin de la Biomasa microbiana en el periodo de evaluacin y
aclimatacin ....................................................................................................... 48
6.4.1. Determinacin de Biomasa microbiana en el periodo de aclimatacin . 48
6.4.2. Determinacin de Biomasa microbiana en el periodo de evaluacin ... 54
6.5. Determinacin de la relacin entre el recuento en placa por el mtodo Pour
Plate, y los Solidos Suspendidos Voltiles. .................................................... 59
6.6. 59
6.7. Ajuste de los datos experimentales para la determinacin de los parmetros
biocinticos ........................................................................................................ 60
VII. DISCUSION .................................................................................................... 64
VIII. CONCLUSION ................................................................................................ 68
IX. RECOMENDACIONES. .................................................................................. 70
X. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA .................................................................... 72
ANEXOS ............................................................................................................... 75