Sunteți pe pagina 1din 4

LP.16 Identificarea stafilococilor coagulazo-negativi. Hemocultura n diagnosticul infeciilor.

Obiective:
1. Definirea i clasificarea bacteriemiei.
2. Discutarea speciilor bacteriene izolate frecvent din hemocultur.
3. Discutarea particularitilor hemoculturii
4. Hemocultura: definiie indicaii momentul numrul i volumul prelevrilor incubarea i urmrirea
hemoculturilor interpretarea rezultatelor.
!. Descrierea etapelor de identificare a stafilococilor coa"ulaz#ne"ativi.
1. acteriemia $ prezena efemer a bacteriilor %n s&n"e urmare a unui pasa' ( descrcri unice fr
"ravitate particular.
o tranzitorie ) translocare de la nivelul mucoaselor normal colonizate
# dup intervenii terapeutice ( e*ploratorii invazive la nivelul mucoaselor
o intermitent ) descrcare de la nivelul unor focare infecioase
o continu ) torentul circulator scald focarul infecios +endocardit,
2. -pecii bacteriene izolate frecvent i cu semnificaie clinic din hemocultur:
Staphylococcus aureus
.acili "ram#ne"ativi fermentativi
(Escherichia coli, Klebsiella spp., Enterobacter spp.)
-treptococi / i 0#hemolitici
1neumococi
2nterococi
Haemophilus influenzae tip b
Pseudomonas aeruginosa
.acterii anaerobe
3. Particularit!ile "emoculturii:
# numrul mic de bacterii prezente %n s&n"e +efectul bactericid al s&n"elui,3 ce volum de s&n"e trebuie
s recoltm4
# descrcrile bacteriene %n s&n"e sunt intermitente 3 c&te probe trebuie s recoltm4 c&nd i cum 4
#. $efiniia "emoculturii % ns!m&narea 'i incubarea ntr-un mediu de cultur! adecvat a unei
(robe de s&nge) n sco(ul izol!rii 'i identific!rii bacteriilor (e care le conine.
Indicaiile "emoculturii:
# bacteriemii cu mai multe posibile etiolo"ii
# sepsis
# endocardit infecioas
# sindrom su"estiv pentru o infecie sistemic cu bacterii strict pato"ene: salmonele tifoidice
Leptospira, rucella
# sindrom febril de ori"ine neprecizat
# stri febrile dup cateterism venos prelun"it dializ peritoneal etc.
*e"nica "emoculturii:
# (relevarea "emoculturii:
o medii de cultur!:
medii lichide cu valoare nutritiv mare adecvate pentru creterea unei "ame lar"i de bacterii
pentru anaerobi: flacoane cu atmosfer anaerob
medii difazice: pant de mediu solid 5 mediu lichid
medii pentru sistemele automate de urmrire a hemoculturilor
o volumul (relev!rilor
la adult # 26 ml per prob
nou#nscui su"ari i copii mici ) 1#3 ml +concentraia bacteriilor %n s&n"e este mai mare dec&t la
adult,
o num!rul (relev!rilor
%n bacteriemii continue ) 2 prelevri
%n bacteriemii intermitente ) 3 prelevri %n 24 ore %n caz de ur"en la interval de 36#76 minute
o momentul (relev!rii
%naintea instituirii antibioticoterapiei
c&t mai aproape de debutul bolii
%n momentul apariiei frisoanelor sau %n cursul evoluiei ascendente a curbei febrile
%n bacteriemii continue +endocardita infecioas, ) oric&nd %n cursul zilei
o te"nica (relev!rii
cele 2#3 prelevri trebuie fcute din vene diferite i de fiecare dat %n cel puin 2 flacoane diferite
decontaminarea zonei de puncie 3 3 etape: 1, ap i spun 2, alcool iodat 3, eter ) importana
uscrii te"umentului.
pre"tirea flacoanelor cu medii de cultur ) medii pre%nclzite la 389: ; dezinfecia membranei de
cauciuc
recoltm p&n la indicatorul de pe flacon ( realizm o diluie a s&n"elui %n mediul de cultur de apro*.
1(16 pentru a reduce efectul bactericid al s&n"elui
a"itarea bl&nd a flaconului
transportul c&t mai rapid la laborator
# incubarea "emoculturilor 'i urm!rirea lor
o un flacon va fi incubat aerob iar cellalt anaerob
o urmrire timp de 8 zile cu e*aminare macroscopic microscopic i prin subcultivare
o endocardite infecioase pacieni tratai cu antibiotice suspectarea unor microor"anisme pretenioase
nutritiv ) urmrire timp de 14#21 de zile
o e+amenul macrosco(ic - de 2 ori pe zi %n primele 3 zile apoi zilnic cu aprecierea semnelor creterii:
prezena coloniilor sau a unui depozit pe stratul de hematii
tulburarea mediului
hemoliza
coa"ularea mediului
prezena bulelor de "az
colonii pe stratul de "eloz al mediilor difazice
o e+amenul microsco(ic - frotiuri <ram efectuate din flacoane.
o subcultivarea
hemocultur cu cretere evident ) subcultivare pe medii adecvate bacteriei observate la e*amenul
microscopic %n atmosfer adecvat %n funcie de flaconul %n care a aprut creterea.
se pot efectua teste de identificare pe cultur primar i antibio"ram pe cultur primar ce va trebui
confirmat prin antibio"rama standardizat a subculturii.
o identificarea bacteriei izolate
o testarea sensibilit!ii la antibiotice
# inter(retarea rezultatelor , argumentarea semnifica!iei clinice a bacteriei izolate"
o argumentele bacteriologului:
izolarea aceleiai bacterii %n mai multe flacoane ale unui set de hemocultur sau %n hemoculturi
repetate din sedii venoase diferite semnificaie clinic!
izolarea unor bacterii diferite din flacoanele hemoculturilor de la acelai pacient contaminare
izolarea a = 2 specii bacteriene din aceeai hemocultur de cel puin 2 ori %n 24 ore bacteriemie
(olimicrobian!
o argumentele clinicianului
v&rsta i statusul imun al pacientului
particularitile focarului septic primar
!. 2tapele de identificare a stafilococilor coa"ulaz#ne"ativi.
:oci "ram pozitivi
>estul catalazei

+5, +#,
<enul Staphylococcus <enul Streptococcus
>estul coa"ulazei
+5, +#,
S. aureus -tafilococi coa"ulaz ne"ativi

>estarea sensibilitii la ?ovobiocin
- +@17mm, .+A17mm,
S.epidermidis S .saprophyticus
Bn sal se "sesc:
1. 2 seturi de hemoculturi: din ambele flacoane ale unui set am izolat S. epidermidis ( al doilea set $
hemocultur ne"ativ
2. set de transfer
3. frotiuri din hemocultura pozitiv +stafilococi,
4. subcultura pe a"ar#s&n"e din hemocultura pozitiv
!. subcultura pe a"ar#nutritiv
7. frotiuri din cultur +stafilococi,
8. H
2
C
2
lame de microscop pentru testul catalazei +pozitiv, beioare pipet
D. testul coa"ulazei#ne"ativ +5 martor pozitiv i martor ne"ativ,
E. testul de sensibilitate la novobiocin ) pozitiv: S. epidermidis +i martor ne"ativ,
16. antibio"rama difuzimetric pentru tulpina de testat i pentru S. aureus F>::: penicilin o*acilin
vancomicin eritromicin "entamicin.
11. ri"le tabel cu diametrele zonelor de inhibiie