Biotecnología Algal PDF

LIBRO DE RESMENES
BIOTECNOLOGA ALGAL
NUEVAS PERSPECTIVAS PARA LATINOAMRICA
1ER. CONGRESO LATINOAMERICANO
SOBRE BIOTECNOLOGA ALGAL
25-29 OCTUBRE 2004
BUENOS AIRES ARGENTINA
1er. CONGRESO LATINOAMERICANO SOBRE
BIOTECNOLOGA ALGAL
BIOTECNOLOGA ALGAL
25-29 OCTUBRE 2004
LIBRO DE RESMENES
EDITADO POR:
GLORIA ZULPA, MARA CRISTINA ZACCARO,
VISITACIN CONFORTI, MNICA M. STORNI,
NORA MAIDANA Y ANA MARA STELLA
Autor 1: Dra. Gloria Zulpa
Autor 2: Dra. Mara Cristina Zaccaro
Autor 3: Dra. Visitacin Conforti
Autor 4: Dra. Mnica M. Storni
Autor 5: Dra. Nora Maidana
Autor 6: Dra. Ana Mara Stella
Ttulo: Biotecnologa Algal. Nuevas perspectivas para
Latinoamrica. 1er Congreso Latinoamericano sobre
Biotecnologa Algal.
1 Edicin. Octubre 2004 Buenos Aires
193 pp.; 15 x 22 cm.
ISBN: 987-1130-32-5
Diseo de tapa: Roger Lucas
Diseo interior y diagramacin: Roger Lucas
rogerlucasdg@datafull.com
Coordinacin: Walter Di Bono
Proyecto Editorial, 2004.
Ayacucho 786 (Florida) CP: 1602 ADD. Pcia de Buenos Aires.
Tel.: 4786-4456.
Hecho el depsito que dispone la ley 11.723.
Impreso en Argentina.
Ninguna parte de esta publicacin, includo el diseo de la cu-
bierta, puede reproducirse, almacenarse o transmitirse en forma
alguna, ni tampoco por medio alguno, sea este elctrico, qumi-
co, mecnico, ptico de grabacin o fotocopia, sin la previa
autorizacin escrita por parte de la editorial.
NDICE
TEMAS......................................................................................................................pg. 17
CURSOS - COURSES ..............................................................................................pg. 19
CONFERENCIA DE APERTURA - OPENING LECTURE ...........................pg. 25
1. Old and New Strategies to Realise Algologists Ultimate Goal: 10% Solar Energy
Conversion Efficiency
Mario R. Tredici..........................................................................................................pg. 27
CONFERENCIAS - LECTURES............................................................................pg. 31
2. Produccin Industrial y Semi-industrial de Microalgas, Desarrollo
y Perspectivas en Amrica Latina
Francisco Ayala............................................................................................................pg. 33
3. Biofixation of Co
2
and Greenhouse Gas Abatement with Microalgae
John Benemann, Angela Manancourt, Paola Maria Pedroni...................................pg. 37
4. Spirulina for Health and Development
CharpyL., LangladeM. J. ..........................................................................................pg. 43
5. Outdoor Mass Cultivation of Isochrysis Sp. In Annular Columns
Graziella Chini Zittelli, Sabrina Somigli, Liliana Rodolfi and Mario R. Tredici .....pg. 45
6. The use of Exopolysaccharide-producing Cyanobacteria
for The Removal of Heavy Metals From Polluted Waters
DePhilippisR. ...........................................................................................................pg. 49
7. Toxinas Paralizantes de Moluscos: Aplicaciones Clnicas
Nstor Lagos, Marcelo Lagos, CarlosGarca, Rogelio Garrido.......................................pg. 53
8. Polisacridos Sulfatados de Algas Rojas Estructura y Actividad Antiviral
Matulewicz M.C. ........................................................................................................pg. 55
9. Fotobiorreactores
Acin Fernndez F.G.; Garca Camacho F.;
Fernndez Sevilla J.M. y Molina Grima E. ................................................................pg. 57
10. Fico-remediacin: Una tecnologa eficiente y verstil
para la remocin de nutrientes y metales pesados
Eugenia J. Olgun........................................................................................................pg. 59
11. Produo de Biodiesel a partir de Microalgas
JorgeAlberto Vieira Costa..............................................................................................pg. 61
12. Biotecnologa de Cyanobacteria
Gloria Zulpa.................................................................................................................pg. 65
13. Algae and Health: Spirulina (Arthrospira) As A Case In Point
Amha Belay, Ph. D. .....................................................................................................pg. 69
14. Microalgae Growing Under Extreme Environmental Conditions
Shigetoh Miyachi .......................................................................................................pg. 75
RESMENES - ABSTRACTS ................................................................................pg. 77
Tema 1. Algas y Ciencias Forenses .............................................................................pg. 79
Tema 2. Algas utilizadas en Nutricin y Salud Humana ..........................................pg. 81
Tema 3. Avances y Problemas de la Biotecnologia de algas .......................................pg. 87
Tema 4. Biodiversidad y Ecologa .............................................................................pg. 92
Tema 5. Biorremediacion ........................................................................................pg. 109
Tema 7. Cultivos de Algas Marinas y sus aplicaciones .............................................pg. 116
Tema 8. Desarrollos Comerciales .............................................................................pg. 118
Tema 9. Ecotoxicologa y Contaminacin Acutica ................................................pg. 119
Tema 10. Fisiologa de los Cultivos Algales .............................................................pg. 137
Tema 11. Botobiorreactores .......................................................................................pg. 144
Tema 12. Gentica e Ingeniera Gentica ................................................................pg. 147
Tema 13. Molculas Bioactivas .................................................................................pg. 153
Tema 14. Qumica de Microalgas .............................................................................pg. 160
Tema 15. Uso de las Algas en Agricultura ................................................................pg. 166
Tema 16. Utilizacin de Algas en Acuicultura .........................................................pg. 168
PROGRAMAS DEL CONGRESO - CONGRESS PROGRAMME ..............pg. 173
LISTA DE AUTORES ............................................................................................pg. 181
LISTA DE PARTICIPANTES .................................................................................pg. 189
Comit Organizador
Presidenta: Dra. Gloria Zulpa
Vicepresidenta: Dra. Mara Cristina Zaccaro
Secretaria: Dra. Visitacin Conforti
Tesorera: Dra. Mnica M. Storni
Protesorera: Dra. Nora Maidana
Colaboradores
Prof. Isabel Albarracn de Espindola
Dr. Juan Carlos Bossio
Srta. Ana Capano
Dra. Angela Jurez
Srta. Karina Lobasso
Ing. Agr. Martha Palma
Dra. Mara del Carmen Ros de Molina
Lic. Iara Rocchetta
Lic. Laura Ruiz
Dra. Ana Mara Stella
Dr. Guillermo Vlez
Comit Cientfico
Sammy Boussiba (Israel)
Michael A. Borowitzka (Australia)
Luc Ector (Luxemburgo)
F. Fernndez del Campo (Espaa)
Marta Ferrario (Argentina)
Nora Gomez (Argentina)
Diana Gonzlez (Argentina)
J. U. Grobbelaar (Sud Africa)
Nstor Lagos (Chile)
Patricia Leonardi (Argentina)
Emilio Molina Grima (Espaa)
Luuc R. Mur (Holanda)
Roxana Olvera Ramrez (Mxico)
Graciela Salerno (Argentina)
Humberto de Jess Silva (Argentina)
B. Tracanna de Albornoz (Argentina)
Mario Tredici (Italia)
AUSPICIANTES
Departamento de Biodiversidad y Biologa Experimental FCEN-UBA
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales FCEN-UBA
Universidad de Buenos Aires UBA
Universidad Nacional de la Patagonia San Juan Bosco (Trelew)
Sociedad Internacional de Ficologa Aplicada ISAP
Honorable Cmara de Senadores de la Nacin
Honorable Cmara de Diputados de la Nacin
Secretara de Ciencia, Tecnologa e Innovacin Productiva, Ministerio de Educacin, Ciencia
y Tcnologa
Secretara de Cultura del Gobierno de la Ciudad Autnoma de Buenos Aires
Asociacin Argentina de Dermatologa
Asociacin Argentina de Ficologa
Sociedad Argentina de Botnica
RedBio
PATROCINADORES
Sociedad Internacional de Ficologa Aplicada ISAP
Honorable Senado de la Nacin
Sntesis Qumica SAIC
Biodynamics
Repsol YPF
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales UBA
Interchemistry SA
Chemit Argentina SRL
GE-Amersham Argentina
Jenck S.A.
A Delia Rabinovich de Halperin
1914-1994
Sea estelibro un homenajeal ejemplo demujer einvestigadora y una de
laspionerasen la percepcin del valor potencial delasalgas, tanto mari-
nascomo continentalespara su aplicacin con finesprcticosen: alimen-
tacin humana y animal, mejoramiento desuelos, obtencin desustancias
bioactivas, biorremediacin, fertilizacin.
Profunda conocedora delasCyanophyta deArgentina, Delia quedar en
nuestra memoria como una visionaria para su poca, con su dulcesonri-
sa, carcter afable, y disposicin a guiar en el camino del saber.
AGRADECIMIENTOS
La Comisin Organizadora agradecea lasInstitucionesy Empresasque
han apoyado con su auspicio y/o han brindado su generoso aporteeconmico,
sin el cual no hubiera sido posiblela realizacin deeste1er. CONGRESO
LATINOAMERICANO SOBRE BIOTECNOLOGA ALGAL. Estos
organismoshan puesto demanifiesto su compromiso solidario con la ciencia
y la tecnologa, alentando losemprendimientosquetienen como meta la
bsqueda permanentedela excelencia.
Un sincero reconocimiento a la generosidad de los Conferencistas y
Profesoresquedictan loscursos.
Un especial agradecimiento al Dr. Mario Tredici, Presidente de la
Sociedad Internacional deFicologa Aplicada (ISAP) por impulsarnos
a organizar esta Reunin en una de sus visitas previas a nuestros
laboratorios en la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de la
Universidad deBuenos Aires.
EsteCongreso tieneun subttulo Nuevasperspectivaspara Latinoamrica.
Creemosqueesta frasesencilla encierra el objetivo fundamental deeste
encuentro el cual estamossegurosqueser ampliamentecumplido gracias
a la presencia detodoslosparticipantes.
COMISIN ORGANIZADORA CLABA 2004
TEMAS
1. Algas y Ciencias Forenses
2. Algas utilizadas en nutricin y salud humana
3. Avances y problemas de la biotecnologa de algas
4. Biodiversidad y Ecologa
5. Biorremediacin
6. Colecciones de cultivos
7. Cultivos de algas marinas y sus aplicaciones
8. Desarrollos comerciales
9. Ecotoxicologa y contaminacin acutica
10. Fisiologa de los cultivos algales
11. Fotobiorreactores
12. Gentica e Ingeniera gentica
13. Molculas bioactivas
14. Qumica de microalgas
15. Uso de las algas en agricultura
16. Utilizacin de algas en acuicultura
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Congreso Latinoamericano sobre Biotecnologa Algal. Argentina 2004
I SBN N 987-1130-32-5
CURSOS
COURSES
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I-Ficorremediacin.
Dra. Eugenia Olgun, Jefa del Departamento de Biotecnologa Ambien-
tal, Instituto de Ecologa, A. C. Xalapa, Veracruz (Mjico).
Aula Burkart del Departamento de Biodiversidad y Biologa Experi-
mental de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Bue-
nos Aires. Ciudad Universitaria, Nez, Intendente Giraldes 2620, Ciudad
de Buenos Aires, 4to. Piso.
Programa
1. Aspectos Generales
2. Recuperacin de nutrientes
2.1 Problemas de eutrofizacin
2.2 Uso de lagunas de oxidacin de alta tasa
2.3 Diversos procesos para cosechar la biomasa
2.4 Uso de clulas inmovilizadas
2.5 Uso de cepas con atributos especiales
2.6 Desarrollo de sistemas integrales de reciclaje de nutrientes
3. Remocin de compuestos txicos y xenobiticos
3.1 Uso de clulas libres
3.2 Uso de clulas inmovilizadas
4. Transformacin y degradacin de xenobiticos
5. Conclusiones
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II- Cianobacterias txicas: metodologa actual para el anlisis de
cianotoxinas y de diagnstico molecular de estirpes toxinognicas.
Francisca F. del Campo y Youness Ouahid. Departamento de Biologa de
la Facultad de Ciencias, Universidad Autnoma de Madrid, Espaa.
Sede del Congreso.
Programa
Primera parte
1. Cianobacterias txicas como contaminantes importantes de aguas. As-
pectos generales de cianobacteria txicas. Gneros habituales. Tipos de
cianotoxinas: hepatotoxinas y neurotoxinas. Efectos y mecanismos de accin.
2. Metodologa para el anlisis de cianotoxinas. Mtodo inmunoqumico
(ELISA). Mtodos qumicos y fsicos: cromatografa lquida de alta resolu-
cin (HPLC) y espectromera de masas (MS). Ventajas e inconvenientes de
las diferentes tcnicas de MS.
Segunda parte
1. Identificacin de cianobacterias txicas por mtodos moleculares. Sis-
temas enzimticos y genes implicados en la sntesis de cianotoxinas. Diag-
nsti co de ci anobacteri as potenci al mente toxi nogni cas medi ante l a
identificacin de genes implicados en la sntesis de cianotoxinas.
2. Amplificacin de diferentes secuencias gnicas mediante la reaccin en
cadena de la polimerasa (PCR). Amplificacin de secuencias consenso y espec-
ficas de genes responsables de la sntesis de pptidotoxinas. PCR simple y ml-
tiple (MULTIPLEX). Aplicacin de la metodologa a muestras de campo.
1. Contaminantes
2. Donde, cuando
3. Mtodos tratamiento aguas
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III-Produccin industrial y semi-industrial de microalgas.
Ing. Francisco Ayala de Solarium Biotechnology S.A. y Inyde S.A., Chile
(Consultor Internacional).
Sede del Congreso.
Programa
Microalgas cultivadas masivamente:
- Antecedentes sobre Biotecnologa de microorganismos fotoautotrficos.
- Especies producidas masivamente y su respectivo medio ambiente.
- Cultivo intensivo de diversas especies marinas, de aguas salobres y dulces.
Produccin industrial de microalgas:
- Definiciones.
- Los productores y las plantas de produccin.
- Estado del arte en esta escala y las perspectivas futuras.
- El desarrollo de una actividad industrial innovadora para pases de desarrollo.
Aspectos tecnolgicos:
- Diseo de unidades productivas.
- Factores limitantes del crecimiento durante el cultivo masivo.
- Buscando soluciones a los problemas de cultivo.
- Optimizacin productiva.
Estudio de caso: Produccin semi-industrial de Spirulina:
- Un recorrido por las experiencias en el Tercer Mundo.
- Objetivos y potencial de esta escala productiva.
- Tecnologa, inversiones y costos de produccin.
- Plantas modulares como alternativa de desarrollo.
CONFERENCIA DE APERTURA
OPENING LECTURE
Tredici M. R., Italia
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1. OLD AND NEW STRATEGIES TO REALISE ALGOLOGISTS
ULTIMATE GOAL: 10% SOLAR
ENERGY CONVERSION EFFICIENCY
Mario R. Tredici
Dipartimento di Biotecnologie Agrarie - Universit degli Studi di Firenze
P. le delle Cascine 27, 50144 Firenze, Italy
Commerci al cul t i vat i on of phot oaut ot rophs (mi croal gae and
cyanobacteria) is far behind that of chemoheterotrophs (fungi, bacteria,
heterotrophi c mi croal gae). The mai n reason i s that, i n the case of
phototrophs, the energy source, light, can not be stored in the culture
medium, but it must be continuously supplied through the walls of the
photobioreactor (PBR) in such a way that photosynthetically active photons
reach each single cell in appropriate amounts at the appropriate time. If we
want algal biotechnology to succeed we have to learn to deliver sunlight in
an effective way to achieve high photosynthetic efficiency and productivity.
In theory the conversion of light energy to chemical energy through
photosynthesis may attain an efficiency of 33%. This figure is based on the
calorific content of fixed CO
2
(477 kJ mol
-1
), on a quantum value of 176 kJ
mol
-1
for red light at 680 nm (the absorption peak of chlorophyll a in PSII
and the mi ni mum photon energy content necessary to accompli sh a
photosynthetic act) and a minimal quantum requirement of 8 photons to
fix one molecule of CO
2
. This theoretical efficiency decreases to 27.5%
when the entire spectrum of PAR (radiation from 400 to 700 nm with an
average energy cont ent of 217 kJ mol
-1
) i s consi dered. Si nce t he
photosynthetically active component (PAR) of sunlight accounts for only
45% of the total, this sets the theoretical efficiency of photosynthetic
conversion of solar energy to about 12%. The ultimate goal of plant
physiologists, plant growers and applied algologists is attaining a conversion
of 10% of solar energy. How far are we to realise this dream?
I n the laboratory (wi th low li ght i ntensi ti es and under controlled
conditions) algal cultures are not too far from the theoretical value. At low
light intensities provided by high PAR lamps, efficiencies of 20-25% have
been often observed.
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Outdoors, under full sunlight, photosynthetic efficiencies vary from one
tenth to one fifth of those that could be expected from cultures kept at low
intensities with artificial light. The reasons for this and the possible strategies
to close the gap will be discussed.
Solar conversion efficiency by cultivated plants ranges between 0.3 and
1.5%. In short duration experiments, sugar cane and other C4 plants have
been reported to attain 3.5%, and up to 4.5%, efficiencies. For example
pearl millet (Pennisetum typhoides) grown in a closed canopy at Katherine
(West Australia) has attained a productivity of 54 g (dry wt) m
-2
d
-1
and a
phot osynt het i c effi ci ency of about 4.5%. Si mi l ar effi ci enci es and
productivities have been rarely reported for outdoor microalgae cultures
(Benemann, 1989; Grobbelaar, 1982; 2000).
High areal productivities of photobioreactors outdoors have not been
observed frequently. In Florence, through the use of light dilution (and
light lamination), the outdoor productivity of Arthrospira platensishas been
increased from 15 g m
-2
d
-1
in open ponds to 27-28 g m
-2
d
-1
in two different
horizontal tubular reactors (Torzillo et al., 1993, Tredici & Chini Zittelli,
1998) and finally to 35 g m
-2
d
-1
in flexible tubes arranged in sinusoidal
rows (Carlozzi, 2000). The latter figure corresponds to an efficiency of
about 3.7%. Chlorella sorokiniana grown in a conical helical PBR has reached
an areal productivity of 33.2 g m
-2
d
-1
and efficiencies up to 4.3% (Morita
et al., 2002).
Plants are highly adaptive to sunlight. While photosynthesis of single
leaves saturates more or less readily as sunlight intensity increases (with
large differences between shade and sun leaves), the relationship between
light intensity and photosynthesis for the entire tree is almost linear up to
the full intensity of sunlight (Adey & Loveland, 1991). Plants have developed
a very complex array of responses to light of excessive intensity, such as
rapid movement of chloroplasts within the cells, changes of the leaf angle,
and canopy architectures that distribute the impinging photosynthetic
photon flux as uniformly as possible over the foliage and minimise the
fraction of leaves that are exposed to levels above saturation (Nobel et al.,
1993; Powles, 1984).
Similarly to leaves, microalgal cells saturate at low light intensities. As
irradiance increases, photons are collected by the algal pigments much faster
than electron carriers and enzymes can make use of them. In dilute algal
cultures, in which self-shading is not significant, most of the photons are
wasted (not absorbed) and, with light intensity above saturation, the ab-
sorbed phot ons are used i neffi ci ent l y and may cause cel l i nj ury
(photoinhibition). To attain maximum productivity, microalgal cultures
must be kept dense so that all the light falling on the culture is absorbed.
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The decrease in productivity of dense algal cultures as irradiance increases
above 10-20% of full sunlight is not as pronounced as in dilute cultures,
but still the photosynthetic efficiency decreases to a fraction of that observed
at low light intensities (Benemann, 1989). The cause of this inefficiency is
the light saturation effect, still present in dense cultures and well described
by the Bush equation (Burlew, 1953).
Diversely from plants, algal cells in culture lack any kind of co-ordination.
Living in a community (the culture) relieves, but does not solve the problem
of light saturation. Leaves are under the control of the whole plant. They
can move, but only around a fixed position, and this allows for morphological,
physiological and functional differentiations (e.g., leaf angles and chlorophyll
contents vary according to the position), which lead to higher efficiency of
sunl i ght conversi on. Al gal cel l s i n cul ture can not assume di fferent
characteristics and functions since they are all exposed, randomly, to the
same light-dark cycle. They do not co-operate, but compete for sunlight
(Benemann, 1989). They have no other possibility than adapting to the
average irradiance in the culture, i.e., strong light limitation (Molina Gri-
ma, 1999). When these shade-adapted, highly-pigmented cells reach the
illuminated surface of the culture, they become strongly photosaturated
and even photoinhibited. Two negative consequences derive from this
situation: 1) the algal cells at or near the surface absorb more photons than
they can utilise, wasting most of them; 2) the cells in the deeper layers are
strongly light limited or in darkness.
Four main solutions have been proposed to overcome the light saturation
effect: 1) the use of high turbulence to move the cells into and out the
illuminated zone of the culture (it has been shown that the higher the
frequency of light-dark cycles, the more efficiently strong light may be
used for photosynthesis) (Barbosa, 2004); 2) light dilution (proposed in
the early 1950s) (Burlew, 1953); 3) ultra high cell density cultures (UHDC)
associated with high turbulence and short light paths; 4) reduction of the
size of the antenna pigments (genetic/physiological approach) (Benemann,
1989).
We started to exploit light dilution in the 1990s attaining an increase of
the photosynthetic efficiency in outdoor cultures of Arthrospira platensisof
about 17% (Tredici & Chini Zittelli, 1998). More recently our group
investigated the growth and productivity of the marine microalga Tetraselmis
suecica in small vertical tubes placed so as to achieve significant light dilution
and simulate full scale arrangement to be able to calculate the overall areal
productivity (Tredici, 2004). Overall areal productivities from 30 to 47 g
m
-2
d
-1
have been attained. On a partially overcast day (14 MJ m
-2
d
-1
) of
September 2004, the solar energy conversion efficiency reached 7.7% (17%
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of PAR). Careful examination of the growth data has confirmed their
rel i abi l i t y, but t hei r sust ai nabi l i t y i s yet t o be demonst rat ed. The
experiments have shown the potential of light dilution, which can be attained
with simple designs and is an inherent feature of vertical reactors (Tredici
& Chini Zittelli, 1997; Garcia Camacho et al., 1999).
Another possibility exists to reduce the negative effects of high irradiances
in outdoor mass cultures and achieve high conversion of sunlight: UHDC
(ultra high cell density cultures). UHDC have been thoroughly investigated
by professor Amos Richmond and his collaborators. The results of his
investigations are outstanding: UHDC in short light path reactors (1-2 cm
thi ckness) can attai n areal producti vi ti es over 50 g m
-2
d
-1
, are not
photoinhibited and do not show decline of photosynthetic efficiency up to
2,000 mmol photons m
-2
s
-1
(Richmond, 2003).
Many types of PBR have been devised (flat or tubular, horizontal, inclined,
vertical or spiral, manifold or serpentine, air or pump mixed, made of glass
or plastic, rigid or flexible, with internal illumination devices) (Tredici,
1999; Tredici, 2003; Molina Grima, 2004). Few of them have been designed
with the main object to use solar light with high efficiency. Obviously,
high efficiency of light conversion requires that all other factors be optimal
in an algal culture. We should never forget that a sufficient nutrient level,
optimum temperature and pH, efficient oxygen degassing, effective con-
trol of contamination and elimination of autoinhibitory substances are major
determinants of productivity in phototrophic cultures (Richmond, 2003).
Together with light supply, all these factors must be carefully considered
and appropriate solutions must be provided to design an efficient PBR.
Besides S/V ratio and orientation, the criteria for PBR design should include
effi ci ent mi xi ng and degassi ng devi ces, systems for cleani ng and for
temperature regulation, transparency and durability of the material, ease
of operation and scale-up and low cost (Tredici, 1999).
Finally, to evaluate and improve PBRs design it is important to establish
correct and common evaluation parameters. Terms as growth rate and output
rate are sometimes confused, volumetric productivity is used as the sole
parameter of evaluation, areal (ground) productivity is improperly compared
with illuminated surface area productivity, and overall productivity, a
meaningful parameter (Tredici, 2004), is rarely given.
If wewish to grow algaeefficiently in sunlight, wemust havesomeway of
reducingtheintensity without wastinglight (Harold W. Milner, 1955).
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CONFERENCIAS
LECTURES
2. PRODUCCIN INDUSTRIAL Y SEMI-INDUSTRIAL
DE MICROALGAS, DESARROLLO
Y PERSPECTIVAS EN AMRICA LATINA
Francisco Ayala
Consultor Internacional en Biotecnologa de Microorganismos Fotoautotrficos. Chile
Desde que el hombre tal como le conocemos apareci sobre el planeta,
ha ido acumulando conocimientos que le han permitido comprender su
medio ambiente, vivir en l y transformarlo de acuerdo con sus necesida-
des. Esa acumulacin de conocimientos que se ha denominado ciencia ha
ido evolucionando con el correr del tiempo, en la forma de generar el cono-
cimiento, el cual se fundamenta en la experimentacin y comprobacin de
hechos mensurables, sin embargo, tambin la forma de generar conoci-
miento est en franca evolucin y es muy probable que dentro de poco
tiempo estemos frente a novedosas formas de canalizar el conocimiento.
Durante la dcada de los 60 en el siglo XX, surgi una nueva palabra que
ha tratado de relacionar los adelantos cientficos de la citologa o biologa
celular con la industria, esto es la Biotecnologa. Pese a que en la actualidad
son varias las definiciones de biotecnologa y grupos de investigadores tra-
tan de aduearse del concepto, este quizs podra ser resumido como la
utilizacin de microorganismos, de biomolculas obtenidas de ellos, de
protenas, enzimas, pigmentos, etc. de origen vegetal, animal o sintticos, a
fin de producir bienes, todos ellos integrados coherentemente con el cono-
cimiento de ciencias como biologa, bioqumica, ingeniera qumica, de
alimentos, metalrgica, microbiologa y medicina entre otras.
A fines de la dcada de los 70 comenzamos a hablar de biotecnologa de
microalgas, ya que estos microorganismos son capaces de desarrollar la foto-
sntesis y con ella, reacciones bioqumicas cuya resultante son biomolculas
(protenas, cidos grasos, polisacridos, pigmentos, vitaminas, mtalo-pro-
tenas, etc.) susceptibles de ser utilizadas en la industria qumica, farma-
cutica, alimentaria o bioqumica. Durante los aos 90 se acua el concepto
de biotecnologa de microorganismos fotoautotrficos, ya que en este con-
junto se unen microalgas y cianobacterias.
Pese a que el concepto de biotecnologa lo hemos estado usando desde
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hace muy poco tiempo, su aplicacin es tambin ancestral y ejemplos de
esto son la fabricacin de quesos y las fermentaciones alcohlicas (produc-
cin de vino y cerveza), conocidas desde hace miles de aos por diferentes
culturas en todo el mundo. As como esto, es probable que los pioneros en
desarrollar la biotecnologa de microorganismos fotoautotrficos, fueran los
antiguos habitantes del valle de Mxico y los miembros de la tribu Kanembou
del Chad, quienes en lugares tan lejanos y distantes desarrollaron tres acti-
vidades claves: la separacin de Spirulina desde el agua, por medio de filtra-
cin, la preservacin del producto empleando secado solar y el balanceo de
la su dieta agregando a sus cereales, las protenas, vitaminas y minerales que
aportaba la Spirulina. En los ltimos 40 aos se ha realizado muchos pro-
gresos en cuanto a tcnicas de cultivos, cosecha y secado, que nos ha llevado
a optimizar lo que ancestralmente se haca en Mxico y frica.
La producci n i ndust ri al y semi i ndust ri al de mi croorgani smos
fotosintetizadotes, comienza en los aos 50 del siglo XX cuando en Japn
se decide industrializar el cultivo de Chlorella, procesarla y utilizarla como
alimento saludable (health-food). La bsqueda de clima ms favorable llev
a algunas empresas taiwanesas a interesarse por la produccin industrial ya
que el mercado japons era de un extraordinario potencial, cuando en Oc-
cidente se conoca muy poco sobre el tema.
La experiencia latinoamericana parte a comienzos de los aos 70, cuando en
Mxico la empresa para-estatal Sosa Texcoco, pierde una guerra contra las
algas verde-azuladas que contaminaban sus salmueras alcalinas en un gigantes-
co evaporador solar, cuyo objetivo final era producir ceniza de soda (NaOH) y
deciden aplicar el viejo axioma que dice si no puedes con el enemigo, nete
a l Gracias a investigaciones desarrolladas por el Instituto Francs del Pe-
trleo (IFP), la empresa mexicana tom conciencia de que aqul microorganis-
mo podra transformarse en una de las fuentes del protena para el mundo y
decidieron desarrollar serias investigaciones tendientes a caracterizar la biomasa
que se generaba en su evaporador solar llamado El caracol. All proliferaba
Spirulina maxima, la que luego de varios aos de investigacin, comenz a ser
producida industrialmente, transformndose esta planta de Mxico, en la ms
importante productora de microorganismos fotoautotrficos.
Tambin en la dcada de los 70, la agencia germana de cooperacin tc-
nica (GTZ), desarrollaba cerca de Trujillo en Per un interesante proyecto
piloto semi-industrial para producir Scenedesmus accutus con objetivos
nutricionales, como parte de un programa en el cual, adems de Per, se
trabajaba paralelamente en India, Tailandia, Egipto y Alemania Federal. En
Tailandia e India los resultados de dichos proyectos tuvieron proyecciones
industriales y en la actualidad en ambos pases existen plantas industriales
de produccin de microalgas y cianobacterias. En Egipto y Per, los pro-
35 1
er
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yectos quedaron hasta el nivel en que lo dejaron los socios alemanes, quie-
nes se retiraron a comienzos de los aos 80.
En otros pases latinoamericanos se han desarrollado investigaciones ten-
dientes a la produccin masiva de microalgas y cianobacterias y todo indica
que una de las ms estudiadas es la Spirulina y no me atrevera a mencionar
algn pas de este continente donde no se haya realizado algn trabajo con
Spirulina. Sin embargo, las experiencias industriales y semi-industriales se
han desarrollado en Argentina, Brasil, Costa Rica, Chile, Ecuador y Mxico.
Se han publicado ms de 2000 artculos tcnicos sobre Spirulina, ms de
20 libros, muchas tesis de pre y post grado, muchos estudios nutricionales
han demostrado que esta cianobacteria, es una de las mejores fuentes natu-
rales de protenas de alta calidad y fcil digestibilidad y adems contiene
un conjunto importante de sustancias tiles para la nutricin humana,
entre las ms importantes: clorofila, carotenoides, enzimas, antioxidantes,
complejos vitamnicos, minerales, cidos grasos y sus protenas tienen to-
dos los aminocidos esenciales que necesita el organismo. Lo anterior es un
aliciente para invitar a inversionistas a discutir sobre el tema y potenciar
una actividad hasta ahora muy poco conocida.
Tambin ha sido importante, la investigacin desarrollada en torno a la
Dunaliella salina y el Haematococcuspluvialis. La primera es una microalga
verde capaz de vivir en aguas que contienen cinco veces ms sal que el agua
de mar, que sometida a la alta radiacin solar del desierto y en respuesta a
ese stress, sintetiza gran cantidad de beta-caroteno (Pro-vitamina A) y la
segunda es una microalga de agua dulce que sometida a ciertas condiciones
de stress en su medio ambiente sintetiza el pigmento rojo astaxantina, que
es utilizado por la industria salmonera para pigmentar la carne de los peces,
cuando este pigmento se incorpora en su dieta.
As como los mencionados existen otros microorganismos fotoautotrficos
que son capaces de sintetizar biomolculas de inters para la industria, como
polisacridos, cidos grasos, aminocidos, enzimas y pigmentos y todos
pueden ser produci dos en est as maravi l l osas mi cro-fbri cas (l os
microorganismos), que la naturaleza nos pone a disposicin, para que los
conozcamos, logremos que se reproduzcan en forma intensiva, establezca-
mos procesos y equipos para concentrarlos y extraer de ellos los productos
que nos sean necesarios.
Hay mucho camino por recorrery ya hemos dado algunos pasos. El
continuar avanzando no solo depende de quienes trabajan actualmente en
el tema, mayoritariamente investigadores-empresarios privados, depende
tambin de una accin conjunta que involucre a las universidades locales, a
los gobiernos, as como inversionistas con visin de futuro y que sientan un
compromiso real con el desarrollo de nuestros pases.
3. BIOFIXATION OF CO
2
AND GREENHOUSE GAS ABATEMENT
WITH MICROALGAE
John Benemann
1
, Angela Manancourt
2
, Paola Maria Pedroni
3
1
Manager, International Network on Biofiaxation of CO
2
and Greenhouse Gas Abatement,
3434 Tice Creek Drive, No. 1, Walnut Creek, California, 94595 USA
(jbenemann@aol.com)
2
IEA Greenhouse Gas R&D Programme, Cheltenham, Great Britain
3
EniTecnologie S.p.A., San Donato Milanese, Milan, Italy
Introduction.
Microalgae cultures have been studied for production of commodities -
foods, feeds, fuels, and fertilizers for several decades, starting with an
international R&D collaboration that aimed at producing food for an
exponentially growing world population (Burlew, 1953). At the time the
only practical use of microalgae was in wastewater treatment, using large,
unmixed, oxidation ponds. Even at that early stage, two distinct concepts
for algal mass cultures emerged:
1. Closed photobioreactors, such as long transparent plastic bags or
narrower tubes, containing the liquid culture and fed CO
2
(described in
Burlew, 1953), for production of human foods; and
2. Open mixed ponds for wastewater treatment and co-production of
feeds (Oswald et al., 1953).
These alternative microalgae production processes, open ponds and closed
photobioreactors, have been the focus of both research and applications in
microalgae mass culture for the past five decades. The technical difficulties
of closed photobioreactors, from overheating to high costs, discouraged
their initial development, but this research revived in the 1970s and over
the past two decades has been the main focus in this field. Several large (>
0.5 ha) plants for production of high value products were built, with one,
using horizontal tubes, still operating in Germany.
The use of circular, mechanically mixed, open ponds for microalgae,
specifically Chlorella, production was developed in Japan during the 1950s
by Tamiya and associates, and these designs are still used today in Japan
37 1
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38 1
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and Taiwan for Chlorella production. Open ponds of a raceway designs
were first developed by Oswald and colleagues in California to grow algae
on municipal wastewaters, with the algae producing the dissolved O
2
required by bacteria to oxidize the wastes. During the 1960s a raceway
pond design was developed in Germany that used paddle wheel mixing,
and this was introduced in the U.S., initially for wastewater treatment
(Benemann et al., 1980). However, applications of such mixed raceway
ponds in wastewater treatment have been limited, and typically algal biomass
is not harvested from such systems. The paddle wheel mixed raceway pond
design is of relatively low cost and can be scaled-up from a few square
meters to several hectares. It is now widely used for the production of
microalgae for nutritional products, in particular Spirulina, with a world
producti on of thi s speci es at about 2,000-3,000 metri c tons, wi th
production costs of $5,000 to $10,000/metric ton, dry basis.
Production of large volume commodities, such as feeds or fuels, at one-
tenth these costs or less, remains a goal for the future, despite research
programs with open ponds in the U.S. (Sheehan et al., 1998) and closed
photobioreactors in Japan (Usi and Ikenushi, 1996). This presentation
hi ghli ghts the R&D needed to achi eve the goal of hi gh producti vi ty
microalgae processes cost competitive with higher plant agriculture, as
envisioned by the pioneers in this field, and the applications of such
technologies to renewable fuels production and greenhouse gas abatement.
Low-Cost Microalgae Production R&D Needs.
The goal of producing microalgae biomass at costs that are competitive
with agricultural crops requires major advances in microalgae production
technology, from the fundamentals of solar energy conversion efficiency by
photosynthesis to the engineering of large-scale pond systems. Other key
issues are how to cultivate selected and improved strains of algae in open
ponds, how to harvest these microscopic organisms, how to provide the
required nutrients, in particular CO
2
, and how to process the wet biomass
harvested from the ponds to yield the desired products. Each of these
topi cs presents maj or R&D challenges that must be resolved before
microalgae production can make a significant contribution to human welfare
and environment. As the focus here is on large-scale, low-cost commodities,
only open ponds, and specifically the paddle wheel mixed reactors, are
considered. Closed photobioreactors are used to speed the build-up of the
inoculum for such systems. Here the research challenges in this field are
briefly addressed.
39 1
er
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Productivity. Maximizing the metric tons of organic dry weight (and
energy content/ton) produced per hectare of pond area per year (mt/ha/yr)
is the most important goal for R&D in this field. Among the many factors
limiting productivity, light saturation and photoinhibition are perhaps the
major ones. A key strategy to overcome these limitations is to reduce the
number of light harvesting pigments per reaction center in photosynthesis
(Polle et al., 2001; 2004). This could be achieved using modern tools of
biotechnology and molecular genetics, and would, if successful, increase
microalgae culture productivities several-fold. The ultimate productivity
potential of microalgae mass cultures will need to be established through
long-term R&D, but should be over 200 mt/ha/yr in favorable locations,
with half this achievable in the near-term.
Algal Strains and Mass Cultures. Achieving high productivities will require
the mass culture of selected and genetically improved microalgal strains in
open ponds. In the current commercial production of microalgae, Spirulina
and Dunaliella are mass cultured by employing selective media while
Chlorella, and Haematococcusrequire large amounts of inoculum production
and frequent culture re-starts. The former suffers from relatively low
productivities, the latter from high costs of inoculum production. For large-
scale, low-cost algal mass cultures, the inoculum approach will need to be
used, but made much more efficient. An inoculum production system
using a progression of closed photobioreactors will be required, and methods
found to minimize zooplankton grazing, amoeba and fungal infections,
and invasions by other algae, to name a few.
Biomass Composition, Harvesting and Processing. Concentration of dilute
suspensions of microscopic algae has been a major R&D challenge. Settling
by spontaneous bioflocculation is a low-cost process, the issue is how to
induce such bioflocculation behavior in algal cells. Processing the harvested
biomass, at a few percent solids, is a further challenge. Drying is generally
prohibitive, sun drying can degrade the biomass, fermentations need to
cope with the tough cell walls of many algal species and the algal biomass
must have a sui tabl e composi ti on. For exampl e, a hi gh content of
fermentable carbohydrates is required for fermentations. And can be
achieved by limiting the nitrogen supply. These issues still require consi-
derable R&D.
Engineering Designs. The design and operation of large systems (> 1
ha), in particular of low-cost unlined ponds, remains to be demonstrated,
as is the efficient distribution, transfer and utilization of CO2, possibly
40 1
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from power plants. The capital and operating costs of such processes must
be reduced to allow large-scale (>100 ha) production of algal biomass at
under $500/ton.
Biofixation of CO
2
and Greenhouse Gas Abatement with Microalgae
The recent focus on global warming brought renewed attention to
microalgae, this time for their potential in greenhouse gas abatement.
Superficially a major attraction of microalgae mass cultures is that they use,
actually require, CO
2
from a concentrated source, as they cannot use
atmospheric CO
2
. The use of power plant flue gases for microalgae mass
cultures for production of renewable fuels, thus avoiding greenhouse gas
emissions from coal-fired power plants, was proposed some five decades
ago and a conceptual process elaborated early-on (Oswald and Golueke,
1960). However, neither the source of the CO
2
nor the process of biofixation
would result in greenhouse gas abatement. Rather it is the conversion of
the algal biomass to a renewable fuel, which then substitutes for a fossil
fuel, which reduces greenhouse gas emissions.
Greenhouse gas abatement can also come from the energy (e.g. fossil
fuel) savings of using microalgae wastewater treatment ponds, compared to
conventional wastewater treatment systems. Finally, greenhouse gas can be
abated by avoiding methane or nitrous oxide emissions from wastes and by
substituting energy intensive products, such as fertilizers, with microalgae-
based products. Indeed, all these attributes - renewable energy production,
energy conservati on, mi ti gati on of secondary greenhouse gases, and
production of organic fertilizers - are combined in microalgal wastewater
treatment processes. Thus, wastewater treatment, municipal, industrial
and agricultural, is the most immediate and practical approach to renewable
fuels production and greenhouse gas abatement with microalgae. In such
processes, the ability of microalgae to recover nutrients is perhaps their
most valuable attribute, as it allows for reuse of plant fertilizers.
However, wastewaters and related applications would not be sufficient
to achieve a large impact on the immense problem of greenhouse gas
emissions and abatement. An often used figure of merit is the abatement
of 1 Gt (gigaton) of CO
2
, or equivalent (e.g. other greenhouse gases).
Although waste treatment could plausibly contribute substantially to such
a goal, additional applications would be required, which means systems
where renewable fuels production is the main, even only, process objective.
Such processes have been studied for many years, for examples microalgal
H
2
(Hal l enbeck and Benemann, 2002) and oi l / bi odi esel producti on
41 1
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(Sheehan et al., 1998). However, these remain topics for long-term R&D.
We estimate, very roughly, that achieving the goal of 1 Gt of CO
2
avoided
will require about 6 million hectares of algal production ponds worldwide,
depending on the fossil fuel replaced and many other factors.
Developing low cost production processes for microalgae, in particular
for potential applications to renewable fuels production and greenhouse
gas abatement, will require long-term R&D. This suggested the need for
information exchange, coordination and integration of the work carried
out in this field by organizations and laboratories around the world. To
server such a role, and on the proposal by the U.S. Department of Energy
and EniTecnologie (Pedroni et al., 2001), the IEA Greenhouse Gas R&D
Programme established in June of 2002 the International Network on
Biofixation of CO
2
and Greenhouse Gas Abatement. The Network had
nine members in the most recent concluded year, contributing to the
support of meetings (six held thus far), technical advisers, management
support and development of reports (including the Technology Roadmap,
Benemann, 2003). Ten research projects are being carried out or planned
by member organizations and advisers, covering areas such as maximizing
productivity, municipal and agricultural wastewater treatment, power plant
flue gas utilization and biofertilizer production. Information on the Network
can be obtained from the website (www.ieagreen.org.uk)
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43 1
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4. SPIRULINA FOR HEALTH AND DEVELOPMENT
1
Charpy L,
1
Langlade MJ
[1] IRD-UR099, Marseille France.
Is the production of micro nutriments by cyanobacteria and in particu-
lar by Spirulina a valid solution for human health and for the development
of the South countries?We present here the conclusions of the symposium
Cyanobacteria for Health, Science and Development held in Embiez
Island the 3-6 may 2004.
Spirulina, from its composition (in micro nutriments, pigments, vitamins,
i ron, and essenti al fatty aci ds), i ts components bi odi sponi bi l i ty, i ts
acceptability and its non toxicity, is suitable for human food. In fact it had
been used for a long time.
Its culture, particularly adapted to the climatic conditions of the South
countries, is realizable at several scales. The farming systems can be adapted
to local resources (seawater, types of fertilizers, degree of technicality and
human factor).
These advantages encouraged several NGO to create successfully many
units of cultures in various continents and to promote Spirulina.
Its use in a strategy of fight against malnutrition is of the responsibility
of governments and nutritionists.
The examples of success of industrial crops carried out in emergent
countries (India, Chile and China) prove the feasibility and the profitability
of such companies. The levels of technicality are within the range of South
countries. The world demand for Spirulina appears in full expansion.
Therefore, we think that industrial Spirulina cultures have to be launched
in South country.
5. OUTDOOR MASS CULTIVATION OF ISOCHRYSIS
SP. IN ANNULAR COLUMNS
Graziella Chini Zittelli
1
, Sabrina Somigli
2
, Liliana Rodolfi
2
and Mario R. Tredici
2
1
Istituto per lo Studio degli Ecosistemi - CNR, p.le delle Cascine 28, 50144 Firenze, Italy;
2
Dipartimento di Biotecnologie Agrarie - Universit degli Studi di Firenze, p.le delle
Cascine 24, 50144 Firenze, Italy.
The Prymnesiophyte Isochrysisis a marine microalga commonly cultivated
in the hatcheries as feed for larval or juvenile stages of bivalves, crustacea
and fish. Mass production of Isochrysis requires the adoption of closed
photobioreactors, since open ponds do not ensure a long-term reliable
cultivation (1). In the hatcheries, the cultivation of Isochrysisis currently
carried out in polyethylene bags or transparent fiberglass cylinders (2),
prevalently under artificial illumination. At the experimental level, in the
laboratory or in pilot plants, more efficient, high surface-to-volume ratio
photobioreactors (flat plate and tubular reactors) have been successfully
used under natural light (3, 4, 5).
In this study, the outdoor cultivation of Isochrysissp. (strain CS177) in
vertical annular columns during summer was investigated and full-scale
productivity was evaluated. Vertical annular columns (Figure 1) have been
recently used by our group to cultivate Nannochloropsissp. (6) and two
bi oacti ve Nostoc strai ns (7) under arti fi ci al , natural and combi ned
illumination.
The annular columns consist of two 2-m-high Plexiglas cylinders of
different diameter placed one inside the other so as to form a regular annular
culture chamber, 4.5 cm thick and 120 L in volume. Each system occupies
a ground surface area of 0.2 m
2
. The external illuminated surface area and
the surface-to-volume ratio of the reactor are 3.1 m
2
and 27 m
-1
, respectively.
Compressed air is injected at the bottom of the annular chamber through
a perforated tube for mixing and gas-exchange. A sparger placed in an
unareated zone provides CO
2
for pH regulation. To operate the annular
column under artificial or combined illumination, fluorescent tubes are
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46 1
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placed i nsi de the i nner cyli nder. When the reactor i s used outdoors
temperature control is achieved by circulating tap water through a stainless
steel tube immersed into the culture.
Air-bubbling in sparged photobioreactors can cause shear-stress. Excessive
shear can lead to impaired cell growth, cell damage and eventually cell
death, especially with fragile microorganisms (7). An evaluation of shear
stress caused by air-bubbling in Isochrysissp. cultures was made using small
scale laboratory bubbled tubes. The influence of superficial gas-velocity
and nozzl e di ameter on growth, producti vi ty and cel l i ntegri ty was
evaluated. Isochrysis sp.cultures were more productive at the highest su-
perficial gas velocity tested (0.0104 m s-1), cell damage was not observed.
Small nozzles (0.5 mm in diameter), which produce smaller air bubbles,
were found to be more detrimental to Isochrysis than bigger nozzles (1 and
6 mm in diameter).
Outdoor cultures of Isochrysis sp. in the annular columns were run
during summer 2004. For a correct evaluation of the system in terms of
overall areal productivity (OAP) (8), full-scale experiments were carried
out. As shown in figure 1, four 120 L annular columns were arranged in
an east-west oriented row, with the single units placed at a distance of 0.74
m centre to centre. The two experimental reactors, placed beween two
dummy columns, were operated uninterruptedly from July to September
at a dilution rate of 40%.
Culture producti vi ty, bi ochemi cal composi ti on of the bi omass and
evolution of the bacterial community associated with Isochrysis sp. mass
cultures were evaluated. In August, with a mean solar radiation of 23 MJ
m-2 d-1, the mean volumetric productivity obtained during a quasi steady-
state period of three weeks was 0.31 g (d.wt) L-1 d-1. No correlation
between solar irradiance and productivity was observed. Except for bacte-
ria, which were present in the range of 2 - 7 x 107 CFU mL-1 and sporadic
protozoa, no contamination was observed.
As recently proposed (8) a complete and correct evaluation of vertical
reactors can be done in terms of OAP. To calculate this parameter an adequate
number of units must be arranged so as to simulate a full-scale plant. The
simulation presented in this study allowed to calculate an OAP of 32.1 g
m-2 d-1 for Isochrysis sp. cultures in annular reactors, hypothesising a
full-scale plant made of parallel east-west oriented rows of columns spaced
of 1.5 m to avoid shading between the rows.
Different arrangements can be realised with vertical annular columns
and optimisation will be crucial to achieve maximal areal yields in the full
scale plant. In order to improve efficiency of land use a large number of
47 1
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units must be accomodated on a given ground area. It is expected a decrease
of volumetric productivity due to mutual shading, but an increase of OAP.
However, any prediction and estimation might be inaccurate without careful
experimentation. Small scale experiments on this subject are in progress
and the preliminary results will be presented and discussed.
This study indicates that the annular reactor can be used for outdoor
cultivation of Isochrysisduring the summer without observing any instability
of the culture. Besides reliability and ease of operation, the main advantage
of the system is its flexible arrangement that allows to optimise microalgal
production in different geographical and climatic conditions.
Figure1. Annular columnsarranged in an east-west oriented
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6. THE USE OF EXOPOLYSACCHARIDE-PRODUCING
CYANOBACTERIA FOR THE REMOVAL OF HEAVY METALS FROM
POLLUTED WATERS
De Philippis R.
Department of Agricultural Biotechnology, University of Florence, Florence - ITALY.
The increasing concern towards the contamination of water bodies by
heavy metals has stimulated, in recent years, a large number of researches on
the possible ways to remove these toxic substances from the environment.
Among the techniques that have been proposed, the use of microorganisms
as an alternative to the conventional physicochemical methods encounters an
increasing interest, owing to a number of potential advantages of this method
(Volesky 2001). In particular, the use of microorganisms for metal bioremoval
gives the possibility to utilize naturally abundant renewable biomaterials
and makes possible the treatment of waters containing very low amounts of
metals, in the order of few micromoles per litre, even in multimetal systems,
with fast kinetics of metal biosorption (Wilde & Benemann 1993, Inthorn
2001). Microorganisms remove metals from polluted waters by means of
either active and passive mechanisms, i.e. (i) metabolically mediated processes,
(ii) passive adsorption on cell envelopes and (iii) chelation of heavy metals by
charged exocellular compounds, either bound to cell surface or released during
the growth (Volesky 2001). In particular, it has been shown that the most
important mechanism is the passive sorption of metal ions on the cell surface
and the efficiency in the metal bioremoval has been related to the presence of
a high number of negatively charged groups on the cell envelope (Kratochvil
& Volesky 1998). In this connection, it is worth mentioning that many
cyanobacteria are characterized by the presence of outermost polysaccharidic
investments surrounding the cells (such as sheaths, capsules and slimes) and
are often capable to release exocellular polysaccharides (RPS) into the culture
medium (De Philippis & Vincenzini 1998, De Philippis et al. 2001). Since
most of the cyanobacterial polysaccharides so far described are characterized
by an anionic nature (De Philippis & Vincenzini 1998, De Philippis et al.
2001), due to the presence of negatively charged constituents, the use of
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exopolysaccharide-producing cyanobacteria as metal biosorbents seems to be
quite promising.
In this presentation, a four year research aimed to the assessment of the
metal removal capability of two capsulated, RPS-producing cyanobacteria,
Cyanospira capsulata and Nostoc PCC7936, chosen among several
exopolysaccharide-producing strains preliminarly tested for their capability
to remove copper from aqueous solutions (De Philippis et al. 2001), will be
summarized. In a first stage (De Philippis et al. 2003), the experiments were
carried out with the sole cyanobacterial biomass, after the removal of the
RPS-containing culture medium, suspended in distilled water and placed
into small dialysis tubings dipped for 24 hours into copper solutions at pH
5. The maximum copper removal (q
max
) of the two strains was determined at
Cu(I I )

concentrati ons rangi ng from 2 to 10 mg L
-1
and at bi omass
concentrations ranging from 5 to 800 mg protein L
-1
. Under these conditions,
C. capsulata biomass showed the best efficiency in metal removal, being
characterized by a q
max
value of 96 2 mg Cu(II) removed per g of protein in
comparison with the value of 79 3 showed by Nostoc PCC7936 biomass.
The values of copper removed per unit of biomass were plotted according to
the Langmuir sorption isotherm, obtaining the theoretical q
max
values of 125.4
and 93.1 mg Cu(II) removed per g of protein, for C. capsulata and Nostoc
PCC7936, respectively. In the presence of Ca
2+
or Mg
2+
, the copper removal
capability of both cyanobacterial biomasses was reduced to values corresponding
to the 60 70% of their q
max
in pure Cu solutions.
In a second stage (De Philippis et al. J. Biotechnol., submitted), the
experiments were carried out with the whole cyanobacterial cultures placed
i nto dyal i si s tubi ngs and di pped i nto copper sol uti ons at vari ous
concentrations. In these experiments, qmax values of 115.0 5.1 and 85.0
3.2 mg Cu (g protein)-1 were found for C. capsulata and Nostoc PCC7936,
respectively, while the theoretical values of qmax calculated according to the
Langmuir model were 144.2 9.1 and 104.7 7.2 mg Cu (g protein)-1,
respectively. The Cu(II) removal capability of pure solutions of the RPSs
produced by the two cyanobacteria was also determined, and a linear
correlation between the amount of copper removed and the concentration of
RPS was only found for the polymer released by Nostoc PCC7936. The RPS
produced by C. capsulata showed a linear correlation only up to values of
about 1 g (RPS) L-1, while, above this value, the slope of the regression line
continuously decreased, probably owing to the hindrance given to the free
diffusion of metal ions by the increased viscosity of the solution. In the linear
part of the plots, qmax values of 20.2 0.8 and 11.0 1.5 mg Cu (g RPS)-
1 were calculated for the RPSs produced by C. capsulata and Nostoc
PCC7936, respectively. The two cyanobacteria were also tested with regard
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to their capability to remove Zn(II) and Ni(II) ions. C capsulata showed a
qmax of 41.5 and 55.4 mg of metal removed per g of protein, for Zn and Ni
respectively, while Nostoc PCC7936 showed values of 32.6 and 37.3 mg of
metal removed per g of protein. The simultaneous presence of Cu, Zn and
Ni strongly affected the qmax values found with the single metals, the new
values decreasing to 61.7 and 77.7% for Cu, 48.8 and 49.9% for Ni, and to
29.9 and 28.7% for Zn, with C. capsulata and Nostoc PCC7936, respectively.
Finally, the metal removal capability of Cyanospira capsulata was also tested
with two different industrial waste waters (manuscript under preparation):
waste water A, containing six metals (namely Ba, Cr, Mn, Fe, Ni and Al, with
the quantitative prevalence of iron) at a global concentration of 64 mg L
-1
,
and waste water B, containing ten metals (namely Ba, Cr, Mn, Fe, Ni, Al,
Cu, Pb, Zn, Hg, with the quantitative prevalence of Fe, Al, Cu, Zn, Mn and
Pb) at a global concentration of 124.5 mg L
-1
.

The cyanobacterial biomass,
suspended into the waste water A at pH 5, removed in one hour about 60%
of the initial amount of each metal, with the exception of Ba, that was remo-
ved only for the 40% of its initial concentration. Two following cycles of
treatment, carried out with fresh cyanobacterial biomass added to the same
water sample, removed up to 85% and 97% of the initial global amount of
metals, respectively. The metal removal obtained in only one cycle carried
out with an amount of biomass corresponding to the sum of the amounts of
fresh biomass utilized in two or three cycles was significantly lower, probably
owing to the increased interactions among the binding sites of the capsulated
trichomes of C. capsulata due to the increase in the biomass concentration.
Among the metals present in the waste water, iron was removed by C. capsulata
biomass with the highest value of specific metal uptake (q = 20.4 mg of Fe
removed per g of biomass dry wt). In a second set of experiments, carried out
with the industrial waste water B, the cyanobacterial biomass removed, after
the first cycle, about 85% of the initial amount of metals. The highest value
of specific metal uptake was again shown by iron, being 24.8 mg Fe (g biomass
dry wt)
-1
the q value experimentally found.
From the results obtained in the above described experiments, it is possible
to conclude that the two cyanobacteria, and in particular C. capsulata, possess
very good metal removal properties, if compared with those of other microbial
biomasses, suggesting the possibility to use either the capsulated trichomes
or the whole cultures of this cyanobacterium for the bioremoval of heavy
metals from water solutions. Moreover, the results obtained with complex
matrices such as the two different industrial waste waters tested, point out
the great potential of the use of Cyanospira capsulata for the bioremoval of
heavy metals from polluted water bodies, stimulating further investigations
with industrial waste waters characterized by different compositions.
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References.
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7. TOXINAS PARALIZANTES DE MOLUSCOS:
APLICACIONES CLNICAS
Nstor Lagos,
1
Marcelo Lagos,
1
Carlos Garca,
1
Rogelio Garrido
2
1
Lab. Bioqumica de Membrana, Dept. de Fisiologa y Biofsica, Facultad de Medicina,
Universidad de Chile, Casilla 70005, Correo 7, Santiago, Chile. Fax (56-2) 777-6916.
2
Departamento de Ciruga, Seccin Coloproctologa, Hospital Clnico Universidad de Chile.
El envenenamiento con toxinas paralizantes de moluscos presenta como
sntoma primordial una parlisis aguda la cual puede llegar a producir
paro respiratorio y muerte. El veneno paralizante se encuentra formado
por una mezcla de fitotoxinas que comparte una estructura comn forma-
da por un ncleo tetrahidropurnico. Su alta toxicidad se debe a su unin
reversi ble al Canal de Sodi o voltaj e dependi ente presente en clulas
excitables, de esta manera bloquea la neurotransmisin. La aplicacin lo-
cal en pequeas cantidades produce parlisis del msculo estriado en una
forma Dosis dependiente.
En este trabajo, se muestra que la infiltracin local de estas toxinas en
humanos con diferentes patologas asociadas a espasmos musculares y
distona focales produce la cura de algunas patologas y en otras mejora la
calidad de vida de los pacientes. Se demuestra la eficacia y seguridad del
uso de estas toxinas en diferentes tratamientos clnicos. Los datos que se
presentarn aqu se focalizarn en patologas tales como: Fisura anal aguda
y crnica, Bleferoespasmo, espasmos faciales, y otras aplicaciones asociadas
a tratamientos coloproctolgicos. En este estudio se demuestra adems que
utilizando la inmovilizacin de los tejidos como principio teraputico pri-
mordial, estos demuestran una gran capacidad de curarse. El tratamiento
con estas fitotoxinas demuestra su potencial aplicacin en todas las patolo-
gas en que se observe hi peract i vi dad y hi pert oni ci dad muscul ar
(FONDECYT 1020090 and OPCW Grants).
8. POLISACRIDOS SULFATADOS DE ALGAS ROJAS
ESTRUCTURA Y ACTIVIDAD ANTIVIRAL
Matulewicz M.C.
Departamento de Qumica Orgnica, CIHIDECAR-CONICET, Facultad de Ciencias
Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Pabelln 2, Ciudad Universitaria, 1428
Buenos Aires, Argentina. Email:cristina@qo.fcen.uba.ar
Las algas rojas biosintetizan principalmente galactanos y menos fre-
cuentemente xilomananos sulfatados. Dentro del grupo de los galactanos
se encuentran los agaranos y los carragenanos.
Los agaranos poseen una estructura bsica dada por una secuencia
alternante de unidades de b-D-galactopiranosa enlazadas por la posicin 3
y de a-L-galactopiranosa (o su 3,6-anhidro derivado) enlazadas por la posi-
cin 4. Tanto las unidades a como las b pueden estar sulfatadas en distintas
posiciones. En los carragenanos las unidades con configuracin a pertene-
cen a la serie D y, en comparacin con los agaranos, los carragenanos poseen
mayor contenido de sulfato.
En los xilomananos, las unidades de D-manosa estn enlazadas a-(13)
y presentan grados variables de sustitucin con sulfato y con ramificaciones
simples de D-xilosa enlazadas a la cadena central.
Nuestro trabajo de investigacin comprende, entre otros, los siguien-
tes temas de inters:
a) Determinar la composicin y la estructura de polisacridos de dife-
rentes algas rojas del Mar Argentino, correlacionando dichos resultados es-
tructurales con aspectos biolgicos de los organismos, como por ejemplo su
ciclo de vida.
b) Establecer la relaci n entre la composi ci n y estructura de los
polisacridos con su actividad biolgica.
c) Realizar modificaciones qumicas de polisacridos e investigar su in-
fluencia sobre dicha actividad.
Dentro de este contexto se caracterizaron los carragenanos de plantas
cistocrpicas y teraspricas de Gigartina skottsbergii, los carragenanos de
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plantas cistocrpicas de Callophyllis variegata, los agaranos de Georgiella
confluensy Nothogenia fastigiata y los xilomananos de Nothogenia fastigiata.
Los polisacridos sulfatados presentan una gran variedad de propieda-
des biolgicas tales como actividad antiviral, anticoagulante y antitumoral,
y efectos variables sobre el sistema inmune.
Se ensay la actividad antiviral in vitro, frente a los virus herpes simplex
tipos 1 y 2 (HSV-1 y HSV-2), de los
polisacridos estudiados as como del carragenano kappa comercial y del
carragenano kappa comerci al sul fatado empl eando ci do sul fri co-
diciclohexilcarbodiimida.
En base a nuestros resultados y a los obtenidos por otros grupos de
investigacin se puede establecer que la actividad antiviral depende de la
combinacin adecuada de la flexibilidad de la cadena de polisacrido, del
peso molecular, de la influencia de los sitios hidrofbicos y del contenido y
distribucin de los grupos sulfato.
En el mecanismo de unin de los virus herpes simplex a la clula
husped ocurre un reconocimiento entre la glicoprotena viral gC y el
heparn sulfato de la superficie celular. La formacin del complejo virus-
clula involucra tanto interacciones de tipo inico, entre los grupos amino
de los aminocidos bsicos de la glicoprotena gC y los grupos sulfato del
heparn sulfato, como interacciones de tipo hidrofbico.
Los carragenanos lambda y los xilomananos sulfatados de Nothogenia
fastigiata presentan una elevada actividad antiviral debido a que poseen
dominios de unin bsicos anlogos a los del heparn sulfato de la superfi-
cie celular. En consecuencia, compiten por el sitio de unin a la glicoprotena
viral gC, impidiendo la interaccin virus-clula.
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9. FOTOBIORREACTORES
Acin Fernndez F.G.; Garca Camacho F.;
Fernndez Sevilla J.M. y Molina Grima E.
Departamento Ingeniera Qumica, Universidad de Almera, 04071 Almera, ESPAA.
Email: emolina@ual.es
Se describen los principales sistemas empleados para la produccin
masi va de mi croal gas (abi ert os y cerrados), profundi zando en l os
fotobiorreactores cerrados. Se hace un anlisis de los criterios a considerar
en el diseo de un fotobiorreactor con el objetivo de obtener elevadas pro-
ductividades de biomasa y eficiencias fotosintticas. Los principales aspec-
tos que se consideran incluyen: relacin superficie volumen del reactor,
orientacin e inclinacin del reactor, sistema de mezclado y de eliminacin
del oxgeno fotosinttico generado, sistemas para la prevencin del creci-
miento en las paredes del reactor y para la regulacin de la temperatura y el
tipo de materiales a emplear.
Los principios de la fluidodinmica, de la transferencia de materia gas-
lquido y los que gobiernan la disponibilidad de luz en el interior del
fotobiorreactor se combinan y se propone un mtodo para el diseo de
fotobiorreactores tubulares. El mtodo se aplica al diseo de reactores ver-
ticales (columnas de burbujeo de 70 L) y reactores horizontales (200L de
capacidad). Finalmente se propone un mtodo de escalado de los mismos
que tiene como criterio principal el mantener la frecuencia de los ciclos luz
oscuridad recibida por las clulas en ambas escalas de operacin y se descri-
be la operacin de un reactor industrial de 4 m
3
de capacidad que se ha
escalado de acuerdo con este criterio.
10. FICO-REMEDIACIN: UNA TECNOLOGA EFICIENTE Y
VERSTIL PARA LA REMOCIN
DE NUTRIENTES Y METALES PESADOS
Eugenia J. Olgun
Unidad de Biotecnologa Ambiental. Instituto de Ecologa. Km. 2.5 Antigua Carretera a
Coatepec. Congregacin El Haya. Xalapa, Veracruz. 91070 Mxico.
eugenia@ecologia.edu.mx
La contaminacin de los ecosistemas terrestres y acuticos es cada da
ms aguda, especialmente en aquellos pases en donde no se logra hacer
cumplir la normatividad ambiental. Dentro de este contexto, se requieren
t ecnol ogas al t ernat i vas que permi t an el t rat ami ent o de efl uent es
agroindustriales e industriales de una manera eficiente pero a un costo menor
que las tecnologas convencionales. La fico-remediacin es una tecnologa
alternativa, eficiente y verstil con gran potencial en zonas tropicales y sub-
tropicales. Se define como el uso de las macroalgas o microalgas para la
remocin o biotransformacin de contaminantes, incluyendo nutrientes y
compuestos xenobiticos contenidos en aguas residuales y CO
2
contenido
en aire residual. Su versatilidad reside en aplicaciones muy diversas: remo-
cin de nutrientes, remocin de xenobiticos (ya sea de manera directa o
mediante el uso de bioadsorbentes de base algal), tratamiento de aguas
residuales de minera, captura de CO
2
, transformacin y degradacin de
xenobiticos, as como el uso de biosensores de base algal para la deteccin
de compuestos txicos. Se han descrito diversos factores claves que influyen
sobre la eficiencia en la remocin de nutrientes, tales como la productivi-
dad, los costos de la cosecha de la biomasa, el uso de cepas con atributos
especiales y el desarrollo de sistemas integrales de reciclaje de nutrientes.
En relacin a la productividad, se puede mencionar que a mayor producti-
vidad, mayor remocin de nutrientes, ya que la velocidad de crecimiento
regula de manera directa el consumo de nutrientes por las clulas y de
manera indirecta, la volatilizacin de nitrgeno amoniacal y la precipita-
cin de orto-fosfatos. Estos dos mecanismos son el resultado de un aumen-
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to en el pH debido a una alta actividad fotosinttica que aumenta a medida
que aumenta la velocidad de crecimiento. De hecho, uno de los factores
an no resueltos adecuadamente es que usualmente se utilizan lagunas de
oxidacin de alta tasa en las cuales la relacin superficie volumen es muy
alta y ocurre una volatilizacin de nitrgeno amoniacal alta y no deseable,
al transferir un contaminante disuelto en agua a un contaminante disperso
en la atmsfera. Una forma de resolver este problema, es el uso de foto-
reactores tubulares que tienen una relacin superficie/volumen mucho menor
y que permiten el atrapar el nitrgeno amoniacal que se volatiliza. Por otro
lado, existen diversas formas de abaratar los costos de cosecha de la biomasa,
entre las que destacan el uso de matrices de inmovilizacin, el uso de
microalgas multicelulares y el uso de cepas con alta capacidad de auto-
floculacin. Otros atributos especiales deseables en las cepas a utilizar, son
su capacidad para crecer a temperaturas relativamente bajas o relativamente
altas, dependiendo del problema a resolver. Finalmente, el uso de sistemas
integrales de produccin (SIP), permite combinar varios factores ptimos y
lograr mejores resultados.
Nuestro grupo de investigacin ha desarrollado un Sistema Integral de-
nominado Bioespirulinema el cual permite el reciclaje de aguas residuales
porcinas con recuperacin de energa (biogs), protena (lemnaceas), Spirulina
como producto de alto valor agregado y alta demanda en el mercado de la
acuacultura y agua de reciclaje. Se han realizado evaluaciones del sistema en
condiciones sub-tropicales y tropicales. En este ltimo caso, se han logrado
productividades promedio de Spirulina en verano hasta de 51.52 ton ha
-
1
ao
-1
con un contenido de protena de 45 % y una remocin de nitrgeno
amoniacal de 91 a 96% en diferentes estaciones del ao. Este SIP aprove-
cha varias ventajas del gnero Spirulina, entre las que destacan: a) su capa-
cidad de flocular, lo que facilita la cosecha; b) su alto contenido de protena;
c) su alto contenido de cidos grasos poli-insaturados que fortalecen el sis-
tema inmune de peces. Tambin se han logrado altas remociones de nitr-
geno amoniacal ya latas productividades de Spirulina al tratar efluentes
anaerobios porcinos en reactores tubulares.
Por otro lado, la fico-remediacin tiene un alto potencial para la remo-
cin de metales pesados. Sin embargo, para que este tipo de proceso sea
exitoso, se debe seguir una estrategia de diseo y operacin, que responde
al problema especfico a resolver. Dicha estrategia ser revisada durante la
exposicin. Asimismo, se presentar el uso de Spirulina como bioadsorbente
de metales pesados, especialmente de biomasa enriquecida en polisacridos.
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11. PRODUO DE BIODIESEL A PARTIR DE MICROALGAS
Jorge Alberto Vieira Costa
Laboratrio de Engenharia Bioqumica, Fundao Universidade Federal do Rio Grande
(FURG), Rio Grande, RS, Brasil. e-mail: dqmjorge@furg.br
Este milnio ser das grandes transformaes, em que o petrleo ser
substitudo por novas fontes de energia capazes de suprir as necessidades
atuais, mas que apresentem um impacto ambiental menor.
O crescente interesse mundial no estudo dos processos de biotransformao
se justificam ao passo que a energia total utilizada no planeta Terra pela
populao humana de 3 x 10
20
joules/ano, o que equivale a menos de uma
hora de sol na superfcie do globo. A energia fixada pela fotossntese, prin-
cipalmente sob a forma de ligao carbono-carbono dos vegetais de 3
x10
21
joules/ano (dos quais 60% esto fixados na biomassa terrestre e 40%
na biomassa marinha), o que representa 0,1% da energia solar recebida e
dez vezes a energia total consumida no planeta.
Aliado s pessimistas previses de esgotamento dos combustveis fsseis
est uma srie de problemas associada ao seu uso como fonte de energia,
tanto do ponto de vista ambiental, desde o processamento at sua utilizao,
quanto do ponto de vista financeiro e poltico, obrigando pases onde o
petrleo est ausente a se submeter dependncia energtica dos pases
produtores. O Brasil, por exemplo, depende da importao de 6 milhes
de metros cbicos de leo diesel por ano.
Motivados no s pelo fim do petrleo, mas tambm pela possvel soluo
dos problemas inerentes sua produo e consumo, bem como s questes
polticas e financeiras, o estudo de novas fontes de energia tem surgido com
o objetivo de minimizar estes problemas e proporcionar uma gradual transio
entre as formas tradicionais e as novas formas de energia, adequando as
necessidades com as potencialidades de cada regio do mundo.
O uso de combustveis alternativos na Europa recebe incentivo produo,
com redues tributrias e alteraes na legislao ligada ao meio ambiente.
At 2005, 2% dos combustveis consumidos na Europa tero de ser renovveis
e, com mudana para 5% em 2010. Alm disto, o teor de enxofre ser
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reduzido, dos atuais 350 ppm, para 50 ppm, j em 2005; motivo pelo qual
a demanda por pesquisa e desenvolvimento de biocombustveis, em espe-
cial Biodiesel, cada vez maior naquele continente.
O biodiesel um combustvel alternativo, composto de steres, normal-
mente oriundos da transesterificao de leos vegetais por um lcool; e que
pode ser adicionado ao diesel mineral. Este biocombustvel utilizado em
pases da Europa, onde j industrializado desde a dcada de 90, nos Esta-
dos Unidos e na Austrlia, entre outros. Na Amrica Latina a Argentina j
tem autorizado seu uso desde 2001 (Decreto 1.396, de novembro de 2001,
que cria o Plan de Competitividad para el Combustible Biodiesel e o
Brasil lanou, em 2002 o PROBIODIESEL, dentro do Programa Brasileiro
de Biocombustveis.
As matrias-primas a partir das quais atualmente extrado o leo para
produo do Biodiesel consistem, principalmente, em sementes oleaginosas
como soja, mamona, amendoim, colza e algodo. No entanto, o cultivo de
vegetais depende de fatores que podem limitar e at impossibilitar a produo
de biocombustveis, como a necessidade de grandes reas disponveis, solo
apropriado, gua doce de boa qualidade, sazonalidade, entre outros. Esse
t i po de cul t i vo no repe os recursos nat urai s, podendo ocorrer
desmineralizao, salinizao, desertificao e eroso dos solos, bem como
esgotamento das fontes de gua. Podem, tambm, requerer o uso de
agrotxicos, causando um impacto ambiental ainda maior.
Uma das culturas que tem recebido interesse crescente por parte de gran-
des empresas e pesquisadores o cultivo de microalgas, excelente fonte
produtora de compostos orgnicos como cidos graxos. A grande vantagem
de cultivar microalgas que esta pode duplicar sua biomassa em 1 a 5 dias,
dependendo do gnero e espcie, utilizando reas bem menores que as de
culturas tradicionais, como o soja. Ainda, destaca-se o fato do cultivo de
microalgas utilizar somente 33% da gua usada no cultivo do soja, para
obter 4 vezes mais cidos graxos; podendo usar guas imprprias para o
plantio deste vegetal.
A obteno do Biodiesel a partir de microalgas pode ser realizada em
qualquer lugar, incluindo regies desertificadas, e com uma infra-estrutura
bem menor. Soma-se a isto a possibilidade de utilizao de terras no propcias
para a agricultura, como as que possuem gua saloba, em especial algumas
regies do agreste nordestino.
Os cultivos de microalgas, alm de utilizar menores reas, independem
da qualidade do solo, podendo ser desenvolvidos em solos estreis (at mesmo
no deserto), imprprios para a agricultura; ou em solos frteis, sem causar
qualquer tipo de dano. Podem utilizar guas salinas e alcalinas, imprprias
para a agricultura, e, at mesmo, guas residuais.
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Outras vantagens da utilizao de microalgas na produo de Biodiesel
so que as unidades de crescimento de microalgas so genricas; os processos
com microalgas so de fcil aumento de escala, de laboratrio para piloto e
desta escala para a industrial; as plantas industriais de microalgas so
facilmente controladas, ao passo que o cultivo de vegetais para obteno de
cidos graxos depende de sobremaneira das condies climticas, mesmo
com os modernos sistemas de irrigao.
Alm destas vantagens, uma das caractersticas das microalgas possurem
altas produtividades. Enquanto que as sementes oleaginosas dificilmente
iro ultrapassar os 5.000 Kg/ha/ano, dados em grande escala mostram
produtividades para as microalgas a partir de um mnimo de 50.000 Kg/
ha/ano, chegando normalmente a 100.000 Kg/ha/ano.
A viabilidade econmica do biodiesel uma questo de tempo, mesmo
negligenciando os aspectos estratgicos de ordem social e ambiental e,
sobretudo, o incentivo conferido por alguns pases ao diesel mineral, com
um preo poltico subsidiado.
No entanto, para atender a demanda necessria para acrescentar 5% de
Biodiesel (B5) ao leo diesel mineral, seria necessrio aumentar de 50 a
100% a produo de leos vegetais. Tal objetivo difcil de ser alcanado
somente com leos vegetais, uma vez que representa um aumento propor-
cional nas terras cultivveis com oleaginosas, visto que as produtividades
agrcolas atuais j alcanaram valores difceis de serem melhoradas. Como a
concentrao de cidos graxos e a produtividade das microalgas so bem
maiores (100.000 kg/ha/ano) que a dos vegetais, este esforo para aumento
da produo de leos no seria to grande. As terras necessrias para a
produo correspondente utilizando microalgas seriam, em torno de 100 a
200 vezes menor.
As etapas envolvidas na obteno do biodiesel de microalgas em lar-
ga escala so: seleo de cepas produtora; aumento de escala do culti-
vo da microalga; pr-tratamentos da biomassa algal; extrao dos cidos
graxos; trans-esteri fi cao; puri fi cao do bi odi esel ; ps-tratamentos
da bi omassa algal.
12. BIOTECNOLOGA DE CYANOBACTERIA
Gloria Zulpa
Departamento de Biodiversidad y Biologa Experimental. Facultad de Ciencias Exactas y
Naturales. Universidad de Buenos Aires. Argentina. E-mail cyanob@bg.fcen.uba.ar
Desde 1940 en Alemania surge el inters por el estudio de las microalgas
especialmente de diatomeas como fuente de energa y en 1950 de otros
grupos como fuente de lpidos y protenas. Posteriormente surge la impor-
tancia del alga verde Dunaliella como fuente de B-caroteno. En 1960 la
Unin Sovitica, Australia, Israel y USA continan estudiando el aprove-
chamiento de las algas.
Sin bien han sido utilizadas por la humanidad desde antes de Cristo
desde la dcada del setenta se ha ido desarrollando una nueva tecnologa
aplicada a los seres vivos: la biotecnologa. A grandes rasgos la biotecnologa
consiste en hacer que los organismos trabajen en nuestro beneficio median-
te un conjunto de tcnicas que, combinadas con nuestro conocimiento de
la biologa de los seres vivos, orienta la vida de stos hacia procesos de inte-
rs econmico-social. La biotecnologa de las algas se ha enfocado princi-
palmente hacia las microscpicas. Las de mayor porte son utilizadas desde
hace mucho tiempo pero su biotecnologa ha avanzado menos.
Desde 1968 bajo la direccin de la Dra. Delia Rabinovich de Halperin
(I nvesti gador Pri nci pal de la Carrera del I nvesti gador Ci entfi co del
CONICET) me inici en el estudio biotecnolgico del manejo y aprove-
chamiento de las algas azules (Cyanobacteria) as como de su biologa. El
grupo al cual pertenezco, con las Doctoras Mara Cristina Zaccaro y Mnica
M. Storni, fue el primero en brindar aportes nuevos y nicos en el pas.
Para tal fin se ha realizado aislamiento, seleccin y comprobacin de algu-
nas propi edades fi si olgi cas de las ci anobacteri as, en especi al de las
fijadoras de nitrgeno atmosfrico, provenientes de distinto hbitats de
nuestro pas, con miras a su aplicacin. A tal fin, la primera tarea realiza-
da fue la obtencin de cultivos axnicos o bacteriolgicamente puros a fin
de evitar conclusiones errneas que podran deberse a la presencia de otros
organismos. Esto dio como resultado la obtencin de una coleccin de
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cultivos unialgales y axnicos de distintas regiones de nuestro pas ac-
tualmente depositada en la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de
la Universidad de Buenos Aires.
Las diferentes lneas de investigacin que se llevan a cabo proporcionan
datos tiles y su implementacin permitir el desarrollo de nuevas tecnolo-
gas para obtener:
- Biofertilizantes
- Mejoradores de suelo
- Alimento de bajo costo con alto contenido proteico
- Inductores e inhibidores vegetales de importancia econmica.
- Fungicidas, fungistticos, bactericidas.
- Agentes de purificacin de aguas.
La lnea de biofertilizacin se inicia con el aislamiento de las Cianobacterias
de arrozales de Argentina en la Provincia de Entre Ros y no solo se prueban
sus propiedades fisiolgicas caractersticas, como fijacin de N
2
, sino tam-
bin el efecto que ejercen sobre las plantas con las que comparten el hbitat,
por ejemplo, el arroz. Tambin fueron tratadas otras plantas de importancia
econmica tales como: mijo, maz, y trigo.
Respecto de las cianobacterias como mejoradoras de suelo, estudiamos
su incidencia en la naturaleza en suelos ridos y semiridos de las Provincias
de Chaco y Formosa. Tambin se analiz la agregacin de las partculas de
suelos salino-sdicos, de diferentes zonas de nuestro pas, adicionando la
biomasa as como tambin exopolisacridos y vainas (envolturas). Se estu-
di tambin la actividad de enzimas de los suelos tratados con biomasa y
con exopolisacridos cianobacterianos. Esta lnea merece gran atencin de-
bido al grado de desertizacin que sufren los suelos de nuestro pas.
Como alimento de bajo costo con alto contenido proteico, hemos estu-
diado diversas especies del gnero Spirulina y otros potencialmente utiliza-
bles. Hemos comprobado, tambin, el efecto benfico de la ingestin de
Spirulina sobre el nivel de colesterol, la glucemia, y otros parmetros
hematolgicos de ratones, as como tambin el efecto sobre su pelaje. Tam-
bin se hicieron ensayos con bacterias lcticas para poder evaluar su valor
prebitico.
Las Cianobacterias producen sustancias inductoras e inhibidoras del cre-
cimiento: hemos visto efecto benfico en cultivos de arroz, maz, espinaca,
etc.; as como frente a distintos micro-organismos. Tambin detectamos
sustancias bactericidas, bacteriostticas, fungistticas y fungicidas, presen-
tes en la biomasa o liberadas al medio de cultivo que tienen efecto frente a
patgenos humanos y a fitopatgenos.
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Con miras a participar en el proceso de purificacin de cuerpos de aguas
cont ami nadas de di st i nt o ori gen (efl uent es mi neros, i ndust ri as,
biodigestores, etc) desarrollamos en nuestro laboratorio tcnicas utilizando
cianobacterias para bioconcentrar metales tales como plomo, cobre, zinc,
cromo, cadmio. Comprobamos que estos microorganismos pueden reducir
la presencia de metales pesados en el medio ambiente y son de gran impor-
tancia en la prevencin primaria. Su biomasa podra utilizarse en el diseo
de filtros biolgicos para la purificacin de agua.
13. ALGAE AND HEALTH: SPIRULINA (ARTHROSPIRA) AS A
CASE IN POINT
Amha Belay, Ph. D.
Earthrise Nutritionals, Inc.P.O. Box 270, Calipatria, CA 92233, USA.
E mail: abelay@earthrise.com
Introduction
Algae have been used for food and natural therapies for centuries. The
connection between food and health has also been established for a long
time as described by the famous quote from Socrates: Let food be your
medicine. Among the algae, the seaweeds are the most commonly used as
food.They are also sources of chemicals that are used in functional foods,
nutraceuticals, cosmeceuticals and pharmaceuticals. There are several studies
that show that various components of seaweeds, in particular the sulfated
polysacchari des, have anti coagulant, anti bi oti c, anti vi ral, anti cancer,
antioxidant and anti-inflammatory effects. Some microalgae have also been
the subject of investigation as sources of bioactive substances and have beenn
found to have health effects similar to those of seaweeds. This presentation
focuses on Spirulina (Arthrospira), a cyanobacterium that has been the subject
of recent investigation due to its widespread commercialization for food,
feed and therapeutic applications. Spirulina (Arthrospira) is a microscopic
and filamentous cyanobacterium (blue-green alga) that has a long history
of use as food. It is found abundantly as an almost unialgal population in
some alkaline lakes like the crater lakes along the Great African Rift Valley.
Spirulina is also produced commercially in controlled outdoor ponds.
Potential Health Benefits of Spirulina
1. Immunomodulatory Effects
The i mmunomodul at ory act i vi t i es of Spirulina have been
demonstrated in various in vitro and in vivo animal and human studies.
Collectively these studies show that Spirulina modulates cell-mediated
69 1
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70 1
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immunity by increasing the number and activity of macrophages, T-cells
and Natural Killer Cells. Two more recent studies deserve mention here.
Using human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) a group from
the University of California, Davis demonstrated that Spirulina stimulated
the secretion of Interluken (IL-1)-1, IL-4 and interferon (IFN)- to nearly
2.0, 3.3 and 13.6 times basal levels, respectively, thus favoring a Th1 type
of response. The authors concluded that Spirulina may provide strong
protection against intracellular pathogens and parasites and may also be
effective in fighting extra-cellular parasites. Their findings were supported
by a recent study involving 40 year-old male volunteers who took a 40%
Spirulina hot water extract daily for two weeks. INF- and NK-cell activities
were enhanced significantly in the group that took the Spirulina extract
and persi sted si x months after the admi ni strati on of the extract was
discontinued. The effect of Spirulina or its extracts on allergic reactions
caused by several factors has been the subject of research recently. Collectively
these studies showed that Spirulina inhibited anaphylactic shock induced
by various compounds and that it significantly inhibited histamine release
from mast cells. In a study involving the administration of Spirulina in 127
human subjects, Ishii et al. have shown that Spirulina increased total s-IgA
in the saliva. A very recent study by the same group also showed that
phycocyanin from Spirulina enhanced secretary IgA antibody response and
suppressed allergic IgE antibody response in mice immunized with antigen-
entrapped biodegradable microparticles. Taken together these studies on
anti-allergic effects demonstrate the potential importance of Spirulina in
mucosal immunity.
2. Antioxidant, Anti-inflammatory and Anti-aging Effects
The antioxidant and anti-inflammatory activities of Spirulina have been
demonstrated in numerous in vitro and animal models. The main component
responsible for the antioxidant and anti-inflammatory effects seems to be
the phycobilin pigment, c-phycocyanin. Most of our knowledge on the
antioxidant and anti-inflammatory effects of Spirulina and phycocyanin
comes from the work of Romay et al. who have written an excellent review
on the subject. Using in vitro studies this group and others have shown the
radical scavenging effects of Spirulina. Phycocyanin has been shown to be a
potent scavenger of hydroxyl, alkoxyl and peroxyl radicals and to react with
peroxynitrte and hypchlorous acid at rates comparable to dimethyl sulfoxide
and trolox, specific scavengers of some of these radicals. Phycocyanin was
also shown to inhibit liver microsomal lipid peroxidation. Moreover it is
shown to inhibit lipid peroxidation induced by carbon tetrachloride. As
reviewed by Romay et al., this group and others have also shown the
71 1
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antioxidant and anti-inflammatory effects of Spirulina and phycocyanin in
several ani mal models of i nflammati on. I n all these studi es the anti -
inflammatory effect has been attributed to the radical scavenging activity
of phycocyani n. Thus phycocyani n from Spirulina and i n some cases
Spirulina has been found to: a) reduced the ear edema and paw edema
induced by arachidonic acid and carageenan, respectively in mice, b) inhibit
acetic acid-induced colitis in rats as a model of inflammatory bowel disease
(IBD) where phycocyanin at 200 mg/kg, p.o. showed a comparable degree
of inhibition of colitis as 5-aminosalicylic acid at 200 mg/kg., c) inhibit
zymosan-induced arthritis in mice at a rate comparable to triamcinolone, a
reference drug used in the study, d) inhibit carbon tetrachloride and R-
(+)-pulegone-induced hepatotoxicity in rats, e) inhibit kainic acid-induced
behavi oral and gl i al act i vi t y i n t he rat hi ppocampus suggest i ng a
corresponding protective effect on neurons and a possible therapeutic
potenti al agai nst neurodegenerati ve condi ti ons l i ke Al zhei mers and
Parkinsons diseases, f ) reversed age-related decreases in cerebellar beta-
adrenergic receptor function as in other diets (e.g. apple) supplemented
with foods high in oxygen radical absorbance capacity (ORAC). In a very
recent study, oxalate-induced kidney injury was suppressed by phycocyanin
from Spirulina suggesting inhibition of calcium oxalate (kidney stone)
formation.
In all the above models, the anti-inflammatory activities of Spirulina and
phycocyanin were ascribed to their scavenging of reactive oxygen species
(ROS), selective cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibition and suppression of
inflammatory cytokines like TNF- and TNF-. It is interesting to note
that the IC
50
for inhibition of COX-2 by phycocyanin was much lower
than those obtained for celecoxib and rofecoxib, the well know selective
COX-2 inhibitors.
3. Anti-cancer effects and Antiviral Effects
In the only human study on the anticancer effect of Spirulina, Mathew
et al. studied the effect of Spirulina supplementation on leukoplakia (a
precancerous lesion) in pan tobacco chewers in India. In a study involving
44 subjects in the intervention group and 43 in the placebo group they
showed that supplementation with Spirulina (1 g/day for 1 year) resulted
in complete regression of lesions in 45% of the intervention group compared
to only 7% in the placebo group. A similar result was found in experimen-
tal models of hamster and human squamous carcinoma. A polysaccharide
extract of Spirulina inhibited the proliferation of ascetic hepatoma cells
injected into mice, and an active component (calcium spirulan) of the
polysaccharide extract exhibited inhibition of tumor invasion and metastasis
72 1
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in an experimental model of lung tumor colonization in mice . Phycocyanin
also inhibited the growth of human leukemia K562 cells in a dose dependent
manner. Recently Saeki et al. reported that co-administration of Spirulina
hot water extract with a cell wall component obtained from Tuberclebacillus
(BCG-CWS) resulted in a much higher tumor regression in tumor-bearing
mice than with BCG-CWS alone showing an adjuvant effect.
A water extract of Spirulina and its polysaccharide component, calcium
spirulan have been shown to inhibit the replication of a host of enveloped
viruses including, Herpessimplex type I (HSV-1), human cytomegalovirus
(HVMV), measles virus, mumps virus, influenza A virus, and HIV-1 virus
at rates that were higher than those observed for dextran sulfate, a known
potent anti HIV-1 agent. Allophycocyanin from Spirulina also showed an
anti-enterovirus 71 activity.
5. Cardiovascular and Related Effects
Several animal and a few human studies show that Spirulina lowers blood
cholesterol level significantly. Three human studies involving 15 to 30
subjects have shown that Spirulina (2 to 4 g/day for 4-12 weeks) reduced
LDL-cholesterol significantly. Several animal studies involving feeding of
mice with a high glucose or high fructose diets have also shown similar
results. Moreover fatty liver toxicities induced by such high glucose diets
were also suppressed. The effect of Spirulina and its extracts on endothelial
function has also been studied in various in vitro and ex-vivo models. In
particular, the anti-thrombic effects of calcium spirulan and its effects on
promotion of vasodilation and inhibition of vasoconstriction, and hence
blood pressure regulati on i s worth menti oni ng. Sodi um spi rulan also
inhibited the proliferation of damaged endothelial cells Obesity and dia-
betes, which are risk factors for cardiovascular disease, have also been shown
to be improved by Spirulina supplementation of the diet in human clinical
studies.
6. Other Effects
Probi oti c effects, effects agai nst toxi ci ti es from heavy metal s and
radiation protection effects have been ascribed to Spirulina in a limited
number of studies.
73 1
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Conclusion
There are thousands of species of algae and yet only very few have been
exploited for food and/or therapeutic use. Yet, a survey of the literature of
just one of these algae, Spirulina (Arthrospira) shows the great potential of
t hese al gae i n nut ri t i onal and t herapeut i c appl i cat i ons for heal t h
maintenance and management.
Despite the few human clinical studies done so far on the health benefits
of Spirulina, the evidence for its potential health benefits is overwhelming
parti cul arl y i n the areas of anti -oxi dant/ anti -i nfl ammatory,
immunomodulation and antiviral/anti-cancer effects. Traditional therapies
always relied on the use of natural products and have been the source of
information for the discovery of many drugs that we have today. Increased
cost of health care in the developed world and the high cost and unavailability
of drugs in developing countries have become the driving force in the shift
toward interest in wellness, self care and alternative and complimentary me-
dicine, and a greater recognition between nutrition and health. One such
drive, for example, is the widely recommended intake of fruits and vegetables
and diets low in saturated fats and cholesterol. Algae like Spirulina offer many
of the antioxidant phytonutrients found in fruits and vegetables and their
supplementation in the daily diet may fill the gap in the deficiency of fruit
and vegetable intake that is currently observed in many parts of the world.
One problem in the utilization of algae for food and therapeutic application
is the issue of safety. Not many of the algae that have been studied for their
health benefits have proven records of safety. In this regard, Spirulina
(Arthrospira) has undergone decades of toxicity testing including some
sponsored by the United Nations, in addition to centuries of safe use and
two decades of commercialization. Spirulina grown by two companies in
the United States has recently been affirmed GRAS (Generally Recognized
as Safe) for use in foods such as bars, nutritional drink mixes and snacks,
and as a condiment in salads and pasta.
This paper summarizes what is known about the potential health benefits
of Spirulina. A more detailed review of the literature on the potential health
benefits of Spirulina is given in a recent review (Belay, 2002) that is the
source of most of the material in this presentation. A careful evaluation of
the results of the studies summarized above should provide a guide to future
research and a basis for current and future nutritional and therapeutic use
of Spirulina. This review also points to the immense potential of the
thousands of species of algae that abound our oceans and inland waters.
Further research i n thi s area shoul d be rewardi ng both soci al l y and
professionally.
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Reference
Belay, A. 2002. The potential application of Spirulina (Arthrospira) as a
nutritional and therapeutic supplement in health management. JANA
5: 27-48.
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14. MICROALGAE GROWING UNDER EXTREME
ENVIRONMENTAL CONDITIONS
Shigetoh Miyachi
Adviser, Marine Biotechnology InstituteProfessor Emeritus, University of TokyoHome:
4-29-17 Minaminagasaki, Toshima-ku,
Tokyo 171-0052 Japan. E-mail: shigetoh.miyachi@mbio.jp
RESMENES
ABSTRACTS
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1-1. LAS DIATOMEAS Y LAS CIENCIAS FORENSES EN
ARGENTINA: DIAGNSTICO DE MUERTE POR SUMERSIN
1
Maidana, Nora I.,
2
Trezza, Fernando,
2
Rennella, Armando.
[1] DBBE, FCEN-UBA, Argentina; [2] Cuerpo Mdico Forense, Poder Judicial de la
Nacin, Argentina.
El diagnstico de muerte por sumersin mediante el anlisis de las
diatomeas es un procedimiento de rutina en varios pases, sin embargo no
ha sido utilizado en forma sistemtica hasta el momento en Argentina.
El test de diatomeas se realiza en tejidos provenientes de cadveres
presuntamente fallecidos por sumersin y se basa en la verificacin de la
presencia de frstulos de diatomeas, su identificacin taxonmica y su com-
paracin con la flora encontrada en las muestras del agua donde fueron
hallados los cuerpos.
En l as pri meras etapas de l a sumersi n, durante l os movi mi entos
inspiratorios de la fase de agona, las diatomeas que viven en ese cuerpo de
agua, son inhaladas al mismo tiempo que el lquido de sumersin. Penetran a
travs de rupturas en las paredes alveolares del pulmn en la circulacin gene-
ral y, de all, a los diversos rganos y tejidos, donde pueden ser recuperadas
aunque el cuerpo se encuentre en avanzado estado de descomposicin y no
puedan aplicarse las otras tcnicas de investigacin forense (Thomas et al.,
1962; Tabbara & Drobert, 1962; Ludes & Coste, 1996). Es por ello que se
requiere un buen conocimiento de la biologa, ecologa y clasificacin de las
diatomeas, lo que hace necesaria la participacin de un especialista.
Se presentan algunos ejemplos de la interaccin regular entre el Labora-
torio de Diatomeas Continentales (DBBE-FCEN, UBA) y distintos Cuer-
pos Mdicos Forenses, iniciada a partir de 1997.
TEMA 1. ALGAS Y CIENCIAS FORENSES
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1-2.USO DE EXTRACTO DE CIANOBACTERIA PARA LA
CONSERVACIN DE HELICOBACTER PYLORI
1
Stege PW, Vega AE, Cortias TI, Silva, HJ.
[1] Area Microbiologa. Fac. de Qumica, Bioqumica y Farmacia. UNSL. San Luis Argentina.
La limitada viabilidad de las cepas de Helicobacter pylori durante los
subcultivos, impide el establecimiento de colecciones de cepas e incluye el
riesgo de limitar investigaciones microbiolgicas importantes. Se ha de-
mostrado que la liofilizacin daa las cepas de H. pylori y que el subcultivo
en medio lquido es un procedimiento que insume tiempo y puede fcil-
mente sufrir contaminacin. En medio slido H. pylori puede soportar des-
de 4 a 20 subcultivos dependiendo de las cepas. A fin de evitar esto, se han
propuesto diversos medios para la conservacin de este microorganismo a
bajas temperaturas basadas la mayora en experiencias de laboratorio y no
en estudios de investigacin sistemtica. Estudios previos realizados en
nuestro laboratorio demostraron que el uso de extracto de cianobacterias en
los medios de cultivo slidos y lquidos permite el reemplazo de sangre y
suero fetal bovino respectivamente. El objetivo fue determinar los ndices
de recuperaci n (I R) de cepas de H. pylori empl eando extracto de
cianobacteria Nostoc sp adicionado de glicerol al 20% (EC-20%) en com-
paracin con el medio de conservacin de referencia tripticase soy caldo
adicionado de glicerol al 20% (TSC-20%), citado en bibliografa. Se ensa-
yaron temperaturas de conservacin de 4C, -20C y -80C para las cepas
de H. pylori, de referencia NCTC 11638 y dos cepas locales HP788 y
HP829 usando TSC-20% y EC-20%. Se utiliz como inculo una suspen-
sin de 10
8
ufc/ml para su conservacin durante 60 das. Para determinar
los ndices de recuperacin se realiz recuento a los 15, 30 y 60 das en agar
Mueller-Hinton adicionado de sangre equina al 7%, incubado a 37C en
atmsfera de microaerofilia durante 48 h. Los IR se expresaron como por-
centajes. La conservacin a 4C permiti la recuperacin hasta los 30 das
con valores IR entre 10
-4
y 10
-6
dependiendo de la cepa siendo aproximada-
mente el doble para EC-20% respecto al TSC-20%. Hasta los 60 das a
20C la recuperacin obtenida en EC-20% fue entre 10 y 20 veces mayor
con respecto al medio de referencia con valores de IR 41.33 vs 2 para
HP788. En TSC20% se recuperaron 2 de las 3 cepas en estudio. A 80C
se observ un marcado incremento de la recuperacin con el empleo de
EC-20% (p<0.05) en todas las cepas y perodos de conservacin emplea-
dos. Los IR oscilaron entre 100% y 24,4% para EC-20% y entre 10 y
4,8% en TSC-20%. Nuestros resultados demuestran que el EC permite
una mejor conservacin de H. pylori reemplazando al medio de referencia
usado.
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2-1. EFECTO DE LA INGESTA DE SPIRULINA PLATENSIS EN
RATONES EXPUESTOS A ESTRS AMBIENTAL
Zaccaro, M., Storni, M., Steyerthal N.,Lpez Agero, L.,Stella
A.,Lobasso,K, Zulpa,G .
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Argentina.
Intendente Giraldes 2620 pabelln II 4P C1428EHA Ciudad de Buenos Aires Argentina.
Email: cyanob@bg.fcen.uba.ar
Spirulina platensis posee un elevado contenido proteico (65%), adems
de vitaminas, minerales y otros nutrientes. El objetivo de este trabajo en
realizacin es determinar el efecto de la ingesta de S. platensisen el metabo-
lismo de ratones CF1 expuestos a radiacin ultravioleta y plomo. Ratones
de 6 meses, depilados en flanco derecho e izquierdo (1 cm2), recibieron los
siguientes tratamientos:
G1 dieta normal (alimento balanceado comercial).
G2 dieta normal + irradiacin UVC con/ sin topicacin con 6 furfuril
adenina (F)
G3 dieta normal + irradicacin UVC
G4 dieta normal + 1,5 mg diarios de ingesta de S. platensis.
G5 dieta normal + irradiacin UVC+ 1,5 mg diarios de ingesta de S.
platensis
G6 intoxicados con 0,3 mg Pb/kg de peso, dieta normal +1,5 mg diarios
de ingesta de S. platensis
G7 intoxicados con 0,3 mg Pb/kg de peso, dieta normal
A los 0, 7, 14, 21 y 28 das se evalu el comportamiento, el peso corpo-
ral y se recogi sangre y materia fecal.
A los 28 das se sacrifican los animales y se extraen: hgado, rin,
corazn, orejas y piel depilada. Los parmetros hematolgicos hemoglobi-
na y hematocrito (186,0+7,07 g/L y 0,58+0,01 L/L) en ratones expuestos
a radi aci n UVC di smi nuyen si gni fi cati vamente: 161,6+3,21 g/ L y
0,53+0,02 L/L, respectivamente. Los ratones irradiados y con ingesta de S.
platensis alcanzaron un valor de hemoglobina de 171,7 + 10,46 g/L que es
significativamente mayor que en los slo irradiados aunque sin llegar a valo-
res del control. Adems hubo una recuperacin significativa del hematocrito
(0,57+0,02 L/L). La ingesta de Spirulina protege contra el fotodao de los
parmetros hematolgicos estudiados.
TEMA 2. ALGAS UTILIZADAS EN NUTRICIN Y SALUD HUMANA
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2-2.CULTIVO DA MICROALGA SPIRULINA PLATENSIS EM
DIFERENTES CONDIES AMBIENTAIS
Andrade M.R., Arruda A.S., Golbeck L., Pinto M.H.,
Burkert, J.F.M., Costa J.A.V.
Laboratrio de Engenharia Bioqumica, Departamento de Qumica, Fundao Universidade
Federal do Rio Grande (FURG), Rio Grande RS Brasil.
A Spirulina platensis um microrganismo fotossinttico cuja biomassa
tem sido explorada como fonte de compostos com alto valor nutricional e
comercial, como protenas, vitaminas, pigmentos naturais e cidos graxos
essenciais. Cultivos de Spirulina em grande escala so geralmente realizados
em fotobiorreatores abertos, expostos s condies ambientais naturais, onde
o principal problema a baixa produtividade, geralmente bastante inferior
quela obtida em condies timas para o crescimento. A concentrao de
nutrientes e o tipo de fotobiorreator podem influenciar na produtividade
de biomassa. Alm disso, o meio de cultivo o segundo componente dos
custos de produo da Spirulina, de modo que sua reduo pode compen-
sar as baixas produtividades obtidas. Fotobiorreatores fechados utilizando a
luz solar poderiam ser uma alternativa para incrementar a produtividade da
biomassa. O objetivo deste trabalho foi determinar a influncia das condies
ambientais, do tipo de fotobiorreator e da diluio do meio de cultivo sobre
os parmetros de crescimento da microalga Spirulina platensisem cultivo
autotrfi co. Os ensai os foram reali zados em dupli catas, segundo um
planejamento experimental fatorial completo 2
3
, onde as variveis de estudo
foram o ti po de fotobi orreator (fechados de 2L e abertos de 6L), a
concentrao do meio de cultivo Zarrouk (10 e 20% em gua) e as condies
de cultivo (em estufa de hidroponia sob condies ambientais naturais e
em estufa termostatizada a 30C, 2500Lux e fotoperodo de 12hclaro/12h
escuro). Os cultivos iniciaram com 0,15g.L
-1
de biomassa e duraram 40
dias. A concentrao de biomassa foi avaliada diariamente pela densidade
tica das culturas a 670nm. As temperaturas mximas e mnimas do ar na
est ufa de hi droponi a foram regi st radas di ari ament e. Cul t i vos em
fotobiorreatores fechados sob condies no controladas alcanaram o pe-
rodo de morte cel ul ar em apenas 15 di as, provavel mente devi do
dificuldade de troca de calor com o ambiente, porm atingiram as maiores
produtividades e velocidades especficas de crescimento, alcanando mxi-
mos de 0,090g.L
-1
.di a
-1
e 0,0264di a
-1
, respect i vament e. A mxi ma
concentrao celular foi obtida em fotobiorreator fechado sob condies
controladas e meio Zarrouk 20%, alcanando 2,29g.L
-1
. Durante os culti-
vos as temperaturas variaram entre 9,4 e 46C.
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2-3.CULTIVO MIXOTRFICO DA MICROALGA SPIRULINA
PLATENSIS UTILIZANDO MELAO COMO SUBSTRATO
ORGNICO
Andrade M.R.,
1
Radmann E.M.,
1
Cerqueira V.S.,
1
Arruda A.S.,
1
Bertolin, T.E.,
2
Costa J.A.V.
1
[1] Laboratrio de Engenharia Bioqumica, Departamento de Qumica, Fundao
Universidade Federal do Rio Grande (FURG), Rio Grande, RS, Brasil [2] Laboratrio de
Fermentaes, Centro de Pesquisa em Alimentao, Universidade de Passo Fundo (UPF),
Passo Fundo, RS, Brasil.
A microalga Spirulina utilizada como biomassa alimentcia e fonte de
compostos biologicamente ativos, entre eles protenas, pigmentos, cidos
graxos poliinsaturados e vitaminas, podendo ser empregada no combate
desnutrio. Embora seja um microrganismo autotrfico, a Spirulina ca-
paz de consumi r substratos orgni cos si mul taneamente, em cul ti vos
mixotrficos. O Brasil o maior produtor mundial de cana de acar, a
partir da qual gerado o melao como subproduto na indstria aucareira,
contendo em sua composio mais de 50% de acares, o que lhe confere
potencial para aplicao como fonte orgnica de carbono para o cultivo de
microalgas. Assim, este trabalho avaliou o crescimento da Spirulina platensis
cepa LEB-52 em cultivo mixotrfico utilizando melao como substrato
orgnico. Os cultivos foram realizados a 30
0
C em fotobiorreatores fechados
de 2L, com iluminncia de 2500Lux e fotoperodo de 12h claro/12h escuro,
durante 40 dias. A agitao foi feita por injeo de ar atravs de bombas de
diafragma. A concentrao inicial de biomassa foi 0,15g.L
-1
em meio Zarrouk
diludo a 20% em gua destilada, complementado com 0,00; 0,25; 0,50;
0,75 ou 1,00g.L
-1
de melao, em duplicatas. A concentrao celular da
microalga foi avaliada diariamente atravs da medida da densidade tica
das culturas a 670nm. As mximas concentraes celulares foram obtidas
em 0,5g.L
-1
de melao e chegaram a 2,92g.L
-1
, enquanto culturas autotrficas
(0,00g.L
-1
de melao) alcanaram 1,47g.L
-1
. A mxima produtividade foi
0,153g.L
-1
.dia
-1
, em 1,00g.L
-1
de melao, e 0,046g.L
-1
.dia
-1
em culturas
autotrficas. A mxima velocidade especfica de crescimento foi 0,109dia
-1
em 0,50g.L
-1
de melao e 0,127dia
-1
em cultivos autotrficos.

Os resulta-
dos evidenciaram a possibilidade do uso de um subproduto industrial de
baixo custo como forma de incrementar a concentrao e a produtividade
de biomassa nos cultivos da microalga Spirulina platensis.
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2-4. ANLISIS DE SECUENCIAS RIBOSOMALES Y POTENCIAL
BIOTECNOLGICO COMO FUENTE DE FICOCIANINA DE
UNA CEPA CHILENA DE SPIRULINA Y DE DOS CEPAS DEL
GNERO ARTHROSPIRA (CYANOPHYCEAE)
Patricia Gmez, Alejandra Barriga y Mariela Gonzlez.
Departamento de Botnica. Facultad de Ciencias Naturales y Oceanogrficas. Universidad
de Concepcin. Concepcin. CHILE. Casilla 160-C.
La taxonoma de los gneros de ci anobacteri as Spirulina Turpi n y
Arthrospira Stizenberger es controversial. Muchas cepas usadas comercial-
mente estn an clasificadas como Spirulina aunque pertenecen, en reali-
dad, al gnero Arthrospira. La ficocianina (PC) es un pigmento de color azul
brillante, soluble en agua y es uno de los principales constituyentes celula-
res de Spirulina y Arthrospira. La PC es un producto muy apreciado como
col orante de al i mentos y cosmti cos; adems, por sus propi edades
antioxidantes y antiinflamatorias, tiene valor teraputico. En este trabajo se
utiliz la secuencia del espaciador ribosomal interno transcrito (ITS), ubi-
cado entre los genes de ARNr de 16S y 23S, para caracterizar molecularmente
a una cepa chilena del gnero Spirulina (CONC-050) y a dos cepas del
gnero Arthrospira (CONC-040 y M2). Adems, se evalu el potencial
biotecnolgico como fuente de PC y la capacidad antioxidante de los ex-
tractos crudos de estas cepas. El espaciador ITS fue amplificado por PCR y
secuenciado automticamente. La regin ITS de la cepa de Spirulina mos-
tr estar interrumpido slo por el gen de ARNt
Ile
, mientras que el espaciador
de las dos cepas de Arthrospira est interrumpido por los genes ARNt
Ile
y
ARNt
Ala
. Anlisis filogentico incluyendo secuencias de otras cepas dispo-
nibles en las bases de datos de genes, mostr que la regin ITS de la cepa
chilena de Spirulina es casi idntica a la de cepa FACHB351, previamente
secuenciada; una de las cepas de Arthrospira (CONC-040) se agrup con
otras cepas de distintos orgenes geogrficos, mientras que la otra cepa de
Arthrospira (M2) fue la ms divergente y no mostr relacin con ninguna
cepa del gnero secuenciada hasta ahora. Respecto al contenido de PC ste
fue estimado por espectrofotometra en extractos acuosos de cultivos de 18
das. La capacidad antioxidante fue evaluada por el test de la desoxirribosa
acoplado al test del cido tiobarbitrico. La cepa de Spirulina mostr un
contenido de PC significativamente mayor (28.5 mg ml
-1
cultivo), mien-
tras que la capacidad antioxidante de extractos conteniendo la misma can-
ti dad de PC fue si gni fi cati vamente mayor en la cepa CONC-040 de
Arthrospira (50.8% proteccin).
Financiamiento: Proyecto DIUC N 201.031.093-1.0
85 1
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2-5. ACTIVIDAD ANTICOAGULANTE DE FUCOIDANOS DE
ADENOCYSTIS UTRICULARIS.
N.M.A. Ponce,
1,2
M.L. Flores,
1
M. J. Carlucci,
3
C.A. Pujol,
3
E.B. Damonte
3
y C.A. Stortz
2
1
Farmacognosia-RIPRONAMED, FCN, UNPSJB, Km 4, 9000, Comodoro Rivadavia,
Chubut, Argentina;
2
Qumica Orgnica-CIHIDECAR y
3
Virologa, Depto. Qca. Biolgica,
FCEyN, UBA, Ciudad Universitaria, Pab 2, 1428, Buenos Aires, Argentina.
E-mail: fargnosi@unpata.edu.ar
Las paredes celulares de las feofitas estn constituidas por polisacridos
de distinta naturaleza. En la matriz amorfa se encuentran los alginatos y los
fucoidanos. Estos ltimos comprenden una familia de heteropolisacridos
polidispersos, formados por importantes proporciones de L-fucosa y sulfato,
y menores de xilosa, galactosa, manosa y cido glucurnico. A los fucoidanos
se l es han at ri bui do al gunas act i vi dades bi ol gi cas, t al es como
antiinflamatoria, antitumoral y antiviral. Adems, han demostrado impor-
tante actividad anticoagulante, la cual, estara asociada a la composicin y
peso molecular de dichos polmeros.
En este trabajo se presentan los resultados obtenidos al evaluar la activi-
dad anticoagulante de fracciones de fucoidanos de Adenocystis utricularis
obtenidas por precipitacin con un detergente catinico, mediante los en-
sayos de TT (Tiempo de trombina) y APTT (Tiempo de tromboplastina
parcialmente activada).
Las fracciones de fucoidanos de A. utricularisde alto peso molecular, bajas
proporciones de cidos urnicos y constituidas mayoritariamente por fucosa
y sulfato mostraron una importante actividad anticoagulante en concentra-
ciones de 200 g/ml (con tiempos de coagulacin >180 s), mientras que en
aquellas fracciones de bajo peso molecular y con altos porcentajes de cidos
urnicos y menores proporciones de fucosa y sulfato, la actividad anticoagulante
fue baja, con tiempos de coagulacin de 46 a 57 s en el ensayo de APTT, y de
37 s en el ensayo de TT. Cuando se ensayaron las fracciones en concentracio-
nes de 2 g/ml, los tiempos de APTT (entre 33 y 44,4 s) y TT (entre 22 y
23,9 s) fueron similares o ligeramente superiores a los del control sin com-
puesto, evidenciando un nulo o debil efecto anticoagulante.
La escasa actividad anticoagulante de los fucoidanos de A. utricularis, en
concentraciones de hasta 20 g/ml, resulta de gran inters teniendo en
cuenta que aquellas fracciones que presentaron altas cantidades de fucosa y
sulfato, y alto peso molecular han demostrado importante actividad antiviral
frente a los virus Herpes Simplex tipo 1 y 2. De esta manera, el escaso
poder anticoagulante de estos fucoidanos de A utricularisresultara en un
efecto positivo al proyectarlos como potenciales compuestos a ser utilizados
en terapias antivirales.
86 1
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2-6. SELECCIN DE LAS VARIABLES CRITICAS DE CULTIVO
MEDIANTE DISEOS EXPERIMENTALES PARA EL
CRECIMIENTO DE SCHIZOCHYTRIUM SP (CHROMISTA)
PRODUCTORA DE CIDO DOCOSAHEXAENOICO.
Rosa S.M.,
1,2
Vlez C.G.
1
y Galvagno M.A.
2,3
[1] Dpto. de Biodiversidad y Biologa Experimental, Facultad de Ciencias Exactas y
Naturales, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina; [2] IIB-INTECH-
CONICET [3] Dpto. de Ingeniera Qumica, Facultad de Ingeniera, Universidad de
Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina. E mail: silvinarosa@bg.fcen.uba.ar
El cido docosahexaenoico (DHA) pertenece a la familia omega 3 de
cidos grasos poliinsaturados (PUFAs) de cadena larga, cuyos efectos ben-
ficos sobre la saludad humana han sido reconocidos por numerosas investi-
gaciones. Estos PUFAs se acumulan intracelularmente en varias especies de
traustoquitridiales, cobrando as importancia su produccin biotecnolgica.
En este estudio se seleccionaron por el mtodo estadstico de Diseos
Experimentales las variables independientes de cultivo ms importantes
para la produccin de biomasa (materia seca en gr/l) de la cepa comercial
Schizochytrium limacinumSR21 (IFO, Japn), cuyo contenido en DHA
puede representar hasta un 20% de su peso seco. Los cultivos en lote se
llevaron a cabo en frascos erlenmeyer de 100 ml con 20 ml de medio semi-
sinttico (conteniendo glucosa [Glc], macerado de maz [CSL] y agua de
mar [SW] sinttica) a, distintas concentraciones, a 28 1 C y 160 rpm
durante 5 das. Luego de experimentos exploratorios se realizaron Diseos
de Seleccin de Plackett-Burman de dos niveles codificados (+1 y 1) y un
punto central (nivel 0). Con los resultados, se construy una ecuacin
lineal que incluy los coeficientes de cada una de las variables independien-
tes estudiadas y se determin adems el grado de significacin estadstica
(p<0.05) de cada una de ellas. Los resultados indicaron que la ecuacin
polinmica de regresin de primer orden para la biomasa (g/l) fue: 9.22 +
1.13 Gl c[ %] (*) 1.50 pH 0.04 SW[ %] + 0.07 CSL [ %] (*). (*
Estadsticamente significativo)
A continuacin se utiliz un diseo de seleccin del tipo Factorial
Fraccional para estudiar posibles interacciones entre dos variables indepen-
dientes. Los resultados obtenidos demostraron una interaccin positiva (m
= 0.08) entre Glc y CSL, altamente significativa (p = 5 . 10
-4
).
87 1
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3-1. MICROPROPAGACION MEDIANTE EXPLANTES DE
GRACILARIA CHILENSIS BIRD, MCLACHLAN & OLIVEIRA
Gloria Collantes,
1*
Carlos Melo
1
& Arturo Candia
2
1
Facultad de Ciencias del Mar, Universidad de Valparaso, Casilla 5080 Reaca, Via del
Mar, Chile;
2
Divisin Investigacin Acucola, Instituto de Fomento Pesquero, Casilla 665,
Puerto Montt, Chile
El cultivo de Gracilaria como actividad comercial se realiza en Chile
desde 1980 para satisfacer la demanda de exportacin y de industrias de
ficocoloides locales. En los ltimos aos, el precio de exportacin de
Gracilaria y sus derivados ha sido aproximadamente US$ 40 millones.
El mtodo de cultivo tradicional utiliza la macropropagacin vegetativa,
otro mtodo ha utilizado esporas y la micropropagacin vegetativa ha pro-
bado la capacidad regenerativa de Gracilaria en condiciones de cultivo de
laboratorio.
En este contexto en este trabajo se estudia la regeneracin de cuatro
morfotipos de Gracilaria chilensisde la costa de Chile (36- 41S). Explantes
vegetativos fueron obtenidos de porciones apicales y medias de las plantas y
cultivados en cinco tratamientos: agua de mar filtrada y estril (FAS), me-
dio Provasoli (PES), PES + cido indol actico (PIAA), PES + Kinetin (PK)
y PK + I AA (PKI AA). Explantes de gametofitos femeninos maduros y
tetrasporofitos fueron obtenidos de porciones medias de las plantas y culti-
vados en FAS y PES. Las condiciones de cultivo fueron 15C, iluminacin
30 mol fotones m
-2
s
-1
y fotoperiodo 12:12 (luz:oscuridad).
Diferenciacin de yemas y/o formacin de callos fueron las respuestas
morfogenticas al efecto mecnico de corte de los explantes en todos los
tratamientos de cultivo usados. El uso de explantes vegetativos de porcio-
nes medias fue ventajoso en el sentido de que ambas secciones de corte,
apical y basal, son apropiadas para el cultivo de tejido. Respuestas similares
fueron obtenidas de explantes apicales decapitados. Regeneracin de plan-
tas completas fue obtenida de los explantes de yemas y callos extrados y
cultivados separadamente.
Proyecto Fondecyt 0294-89
TEMA 3. AVANCES Y PROBLEMAS DE LA BIOTECNOLOGIA DE ALGAS
88 1
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3-2. ALGUNOS ASPECTOS DE LA OPTIMIZACIN DE LA
PRODUCCIN DE EPA MEDIANTE PHAEODACTYLUM
TRICORNUTUM (BOHLIN)
1
Rost EJ,
2
Rico A,
2
Perales S,
1
Carstens MR,
2
Prez L,
2
Peralta R.
[1] Depto. de Industrias/ Fac. de Ingeniera, Univ. Nac. Patagonia S. J. Bosco/ C. Rivadavia,
Chubut, Argentina; [2] Depto. de Biologa General/ Fac. de C. Naturales, Univ. Nac.
Patagonia S. J. Bosco/ C. Rivadavia, Chubut., Argentina.
Se ha explorado en escala de laboratorio la dependencia de la produccin
de ci dos grasos pol i i nsat urados (PUFAs), en part i cul ar del ci do
eicosapentaenoico (EPA, 20:5w3), de las condiciones de cultivo de una
cepa disponible de Phaeodactylum tricornutum (Bohlin). En esta especie de
microalga marina la produccin de EPA es mayoritaria entre los cidos del
mismo tipo.
La microalga ha sido cultivada durante 10 das en recipientes de 2000
cm
3
en un medio a base de agua de mar (medio Laing). Luego de cosecha-
da, la biomasa fue centrifugada y deshidratada. Se procedi luego a la
derivatizacin de los cidos grasos contenidos en la biomasa, mediante
transesterificacin directa por el mtodo de Lepage y Roy, para finalmente
determi nar cuanti tati vamente el conteni do de steres metl i cos por
cromatografa en fase gaseosa.
El diseo estadstico experimental empleado ha constado de tres varia-
bles: intensidad de radiacin lumnica, perodo de iluminacin (continua o
peridica 16:8) y relacin nitrgenofsforo (N/P) en el medio de cultivo.
A los efectos de la presentacin de resultados efectuada aqu, se ha explora-
do intensivamente la ltima variable, fijando la iluminacin en 14 Joule m
-
2
s
-1
y periodo 16:8, con valores en el rango de 4 N/P 36.
La informacin obtenida permite concluir que el aumento de la relacin
N/P ms all de 8 desfavorece progresivamente la concentracin de cidos
grasos en la biomasa en particular, dado el nfasis del presente estudio, de
EPA. No obstante, el anlisis estadstico de valores de produccin en trmi-
nos de masa por unidad de volumen de cultivo cambia esta perspectiva,
dejando entrever dentro de la incertidumbre originada por la dispersin de
resultados encontrada, la existencia de una situacin de mxima produc-
cin de EPA. Dicho ptimo corresponde a una relacin N/P = 23 con un
valor de 7,3 mg/l obtenido mediante regresin polinomial de segundo gra-
do por mnimos cuadrados, con valores empricos que oscilan entre 5,2 y
7,8 mg/l. Esta caracterstica resulta interesante, desde el punto de vista
tcnico, por las implicancias econmicas que se desprenden a los objetos de
su produccin en escala industrial.
89 1
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3-3. ESTUDO DE FRACIONAMENTO COM SULFATO DE AMNIO
NA PURIFICAO DE FICOCIANINA DE SPIRULINA PLATENSIS
1
Silva, L.A.,
2
Kuhn, K.R.,
3
Burkert, C.A.V.,
4
Costa, J.A.V.,
5
Kalil, S.J.
*
[1,2,3,5] Laboratrio de Microbiologia e Laboratrio de Engenharia de Bioprocessos,
Departamento de Qumica/Fundao Universidade Federal do Rio Grande-FURG, Rio
Grande, RS, Brasil; [4] Laboratrio de Engenharia Bioqumica, Departamento de Qumica/
Fundao Universidade Federal do Rio Grande-FURG, Rio Grande, RS, Brasil
A cianobactria Spirulina platensis uma fonte excelente de produtos de
alto valor agregado, como a ficocianina. Corantes naturais esto ganhando
importncia sobre os corantes sintticos, principalmente para a utilizao
em produtos alimentcios. Estudos recentes mostram que a ficocianina atua
na inibio da enzima cicloxigenase, a qual responsvel pela produo de
prostaglandinas, que esto presentes em altos nveis nos tecidos tumorais.
Devi do sua li mi tada di stri bui o e di fi culdade de puri fi cao estes
pigmentos so caros e obt-los na sua forma pura uma possibilidade atraente.
Dentre as tcnicas desenvolvidas para separao e purificao de bioprodutos
o fracionamento com sulfato de amnio tem a vantagem de ser aplicado em
larga escala e requerer equipamentos simples. O presente trabalho teve como
objetivo estudar o fracionamento com sulfato de amnio em diferentes faixas
de saturao. A biomassa de Spirulina platensis foi produzida em tanques
abertos, em condies ambientes, utilizando meio Zarrouk 20%. A etapa
de extrao envolveu a agitao, em incubador rotatrio, da biomassa seca
com gua destilada como solvente, a seguir a amostra foi centrifugada e o
sobrenadante coletado para leituras espectrofotomtricas a 280, 615 e 652
nm. No fracionamento realizou-se 5 ensaios com as seguintes faixas de
saturao: no primeiro ensaio, elas variaram de 0 a 25% e de 25% a 60%;
no segundo, de 0 a 25%, de 25% a 35% e de 35% a 60%; no terceiro, de
0 a 20% e de 20% a 60%; no quarto, de 0 a 35% e de 35% a 60%; e no
quinto, variaram de 0 a 40% e de 40% a 60%. Verificou-se que aplicando
uma primeira etapa de 0 a 35% de saturao, seguido de 35-60% de
saturao obteve-se um incremento de 85,7% na pureza de ficocianina,
em relao ao extrato original.
Agradecimentos: FAPERGS, CNPq e CAPES.
90 1
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3-4. ADSORO DA FICOCIANINA DE SPIRULINA PLATENSIS
UTILIZANDO RESINA DE TROCA INICA
Silveira, S.T., Quines, L.K.M., Burkert, C.A.V., Costa, J.A.V., Kalil, S. J*
Departamento de Qumica, Fundao Universidade Federal do Rio Grande (FURG), Rio
Grande, RS, Brasil.
CP 474, CEP 96201-900, Fax: +55 (53) 233 8745
A ficocianina um dos pigmentos responsvel pela captao de luz nas
cianobactrias, presente na Spirulina platensisem at 20% da frao protica.
A ficocianina tem sido utilizada principalmente como corante natural em
alimentos. Alm disso, estudos tm reportado sua ao antioxidante e
antitumoral. As tcnicas de purificao, muitas vezes, envolvem mltiplas
etapas tornando o processo oneroso e de difcil aumento de escala. Por isso,
para obter um produto purificado, crucial avaliar os parmetros envolvidos
em cada uma das etapas, de modo a estabelecer as melhores condies para
a purificao. O presente trabalho teve por objetivo verificar o efeito do pH
e da temperatura na fase de equilbrio do sistema ficocianina-resina de troca
inica Q-Sepharose FF e posteriormente obter a isoterma que melhor descreve
o processo de adsoro. Spirulina platensisfoi cultivada em fotobiorreatores
abertos externos, e ao trmino do cultivo a biomassa foi recuperada por
filtrao, seca e moda. A extrao da ficocianina foi realizada utilizando
gua como solvente em agitador rotatrio a 25C, por 4 h. Os experimen-
tos para a determinao do melhor pH e temperatura na adsoro da
ficocianina e a isoterma de adsoro foram conduzidos em batelada, em
reatores contendo solues de ficocianina com diferentes concentraes
iniciais e resina Q-Sepharose FF, a 25C, por 200 min. Amostras foram
coletadas, imediatamente filtradas, e a concentrao de ficocianina deter-
minada espectrofotometricamente. A isoterma para a adsoro da ficocianina
a pH 7,5 e 25C obteve um bom ajuste ao modelo de Langmuir com Q
m
de
27,2 Q
m
mg de ficocianina/mL de resina e K
d
de 0,027 mg de ficocianina/
mL de soluo.
Palavras-chave: Ficocianina, isoterma de adsoro, purificao, Spirulina
platensis
Apoio: CAPES, CNPq.
91 1
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3-5. OBTENCIN DE CULTIVOS AXNICOS A PARTIR DE
MUESTRAS SILVESTRES DE Phormidium animalis
1,4
Vzquez-Martnez M.G.,
2
Rodriguez M.H.,
3
Hernndez-Hernndez F.,
4
Ibarra J.E.
[1] Centro de Investigacin de Paludismo/INSP, Tapachula, Chis., Mxico; [2] Centro de
Investigaciones sobre Enfermedades Infecciosas/INSP, Cuernavaca, Mor., Mxico; [3]
Depto. de Patologa Experimental/ CINVESTAV, Mxico, D.F., Mxico; [4] Depto. de
Biotecnologa y Bioqumica/CINVESTAV; Irapuato, Gto., Mxico.
Email:mgvazque@ira.cinvestav.mx
Phormidium animalises un alga verde-azul de tipo filamentoso que en
estudios previos se le encontr abundantemente en hbitats larvales de uno
de los principales vectores de paludismo en Mxico, el mosquito Anopheles
albimanus. Adems, en pruebas de alimentacin se comprob que P. animalis
fue consumida y digerida por larvas de mosquitos. Por lo anterior, P. animalis
es un excelente candidato para ser transformado con genes mosquitocidas
de bacterias y usarlo para el control biolgico de mosquitos. Sin embargo,
las cepas silvestres son extremadamente difciles de manipular genticamente
y los problemas inician desde el establecimiento de cultivos axnicos, de
ah la importancia de generar estos cultivos para llevar a cabo las manipula-
ciones requeridas para transformar a la cianobacteria.
En este trabajo se desarroll una estrategia eficiente, basada en una
combinacin de procedimientos, para obtener cultivos axnicos de mues-
tras colectadas en campo de la cianobacteria P. animalis. Las muestras fue-
ron cul ti vadas en medi o ASN-10 y l a separaci n de l os pri nci pal es
contaminantes de los filamentos fue llevada a cabo por medio de una serie
de lavados por centrifugacin y resuspensiones en medio lquido. Poste-
riormente se fragmentaron los filamentos por medio de la aplicacin de un
sonicador de pistilo. Los filamentos fragmentados fueron lavados por me-
dio de filtracin al vaco a travs de filtros millipore de 8 mm de poro. Los
fragmentos lavados fueron cultivados y expuestos a 4 diferentes antibiticos,
adicionados cada 24 hs a manera de cascada a medio lquido ASN-10.
Los cultivos axnicos fueron finalmente obtenidos despus de diluciones
seriadas y de la incubacin individual de los filamentos tratados. La axenidad
de los cultivos se comprob por examen al microscopio y por inoculacin
en medio Luria-Bertani. Todos los cultivos fueron mantenidos en un cuarto
de crecimiento con exposicin a luz fluorescente y a una temperatura de
282C y bajo un fotoperiodo de 12 hs luz- 12 hs obscuridad.
92 1
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4-1. ESTUDIO POBLACIONAL DE MACROCYSTIS PYRIFERA (L.)
C. AGARDH EN TIERRA DEL FUEGO,
CHILE A TRAVES DE ENTORNO SIG.
Mansilla A.,
1
J. Plana,
2
M. Palacios
1
& N. Navarro.
1
1
Dpto. de Ciencias y Rec. Naturales, Facultad de Ciencias, Universidad de Magallanes,
Punta Arenas, Chile. Casilla 113-D, andres.mansilla@umag.cl.;
2
Programa de Magster,
Facultad de Ciencias, Universidad de Magallanes, Punta Arenas, Chile.
jplana@aoniken.fc.umag.cl
Este estudio se basa en la realizacin de muestreos estacionales en una
poblacin natural de Macrocystis pyrifera de aproximadamente 3.2 Ha en
Baha Chilota, en aguas costeras de Tierra del Fuego (Chile). Para llevar a
cabo la caracterizacin de esta poblacin se cuantificaron los siguientes
parmetros biolgicos: biomasa hmeda (kg m
-2
), longitud de las algas (m),
nmero de estipes por planta y estado reproductivo en funcin de la pre-
sencia o no de esporofilas frtiles. Esta informacin fue posteriormente in-
troducida en un entorno de Sistemas de I nformacin Geogrfica SI G,
mediante el programa informtico Arc View 3.2, permitiendo el manejo
conjunto de datos obtenidos de distintas fuentes con la integracin de foto-
grafa satelital (canal infrarrojo) y carta nutica digitalizada georreferenciadas,
las mediciones obtenidas en terreno mediante GPS para verificacin de los
datos anteri ores y los atri butos de la poblaci n como bases de datos
alfanumricas asociadas a la cartografa y localizacin espacial de los muestreos
estacionales. Para los estudios poblacionales de M. pyrifera, la utilizacin de
estos sistemas facilita la visualizacin, monitoreo y anlisis de la distribu-
cin de las poblaciones a escala temporal y espacial, en contraste con los
mtodos utilizados convencionalmente.
Los principales resultados obtenidos revelan la existencia de estados
reproductivos del alga durante todo el ao, con un mnimo en invierno
(15.38 %) y un mximo en otoo (69.23%). La biomasa presenta una
tendencia progresiva a aumentar desde invierno (86,9 8,7 kg m
-2
) hasta
presentar un mximo en otoo (112,5 16 kg m
-2
) (p<0.05). Tanto la
longitud media estacional de las plantas, como la densidad de plantas y el
nmero de estipes por m
2
varan poco, no presentando diferencias estads-
ticas estacionales (p>0.05).
TEMA 4. BIODIVERSIDAD Y ECOLOGA
93 1
er
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4-2. DIVERSIDAD FITOPLANCTNICA EN LOS CUENCOS
PRINCIPAL Y NORTE DE LA LAGUNA DON TOMS
(SANTA ROSA, L.P.)
Alvarez, S.B.*; Bazn G.I.*; Biasotti A.E.* y Bernardos J.N.*
Fac. de Cs. Exact. y Naturales. UNLPam. Uruguay 151. 6300.
Santa Rosa. La Pampa. Argentina
sbalvarez@exactas.unlpam.edu.ar
En el presente trabajo se analiza la composicin, diversidad y riqueza
especfica de las especies fitoplanctnicas de la Laguna Don Toms, depre-
sin natural que pertenece a la regin fisiogrfica oriental de la provincia de
La Pampa, durante un ciclo anual (2002-2003). Posee una superficie aproxi-
mada de 80 ha, con una profundidad de 2,5 3 m. Se consideran dos
reas de muestreo, el Cuenco Principal y el Cuenco Norte. No se hallaron
diferencias en los valores de temperatura de ambos cuerpos de agua (p >
0.1) y el rango de variacin entre invierno y verano fue entre 11C y 26C.
Con respecto al pH se hallaron diferencias significativas (p<0.01) con valo-
res medios de 7.7 y 9.3 para el Cuenco Principal y el Cuenco Norte, y la
riqueza especfica anual es de 146 y 110 especies para ambos cuencos res-
pectivamente. Considerando la diversidad de rdenes y utilizando el ndice
de Shannon, se encuentra que la diversidad del Cuenco Norte (0.65) es
superior a la del Cuenco Principal (0.38; p< 0.01). Al evaluar la diversidad
mensual, se encontr que el Cuenco Norte posee los mayores valores excep-
to en el perodo estival. El Cuenco Principal present una floracin de
Planthotrix agardii entre marzo y abril de 2003 la cual produjo una elevada
mortandad de peces.
94 1
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4-3. DIATOMEAS COSTERAS DE MONTE HERMOSO
(BUENOS AIRES, ARGENTINA)
Conte-Grand, Cecilia y Parodi, Elisa R.
Lab. Ecologa Acutica. Universidad Nacional del Sur e I.A.D.O. 8000. Baha Blanca.
ARGENTINA. eparodi@criba.edu.ar.
La comunidad fitoplanctnica de la costa sur de la provincia de Buenos
Aires ha sido escasamente estudiada. El objetivo de este trabajo fue analizar
la estructura y composicin especfica de la flora diatomolgica de Monte
Hermoso (385933 S y 611555), como grupo ms significativo del
fitoplancton costero y establecer la frecuencia relativa de las especies en el
perodo anual: octubre 2002-octubre 2003. Para ello, se filtraron por una
red de malla de 30 m, mensualmente y por triplicado, 150 l de agua de
mar, hasta alcanzar un volumen de 200 cm
3
, el que fue fijado con formol al
5%. Para la identificacin sistemtica, los ejemplares fueron tratados con
mtodos oxidativos de la materia orgnica. Mientras que, para determinar
la frecuencia relativa de cada especie en las muestras sin tratar, se realizaron
recuentos de frstulos en 24 ml previamente homogeneizados mediante
agitacin suave. Los mismos se realizaron en transectas continuas sobre el
cubreobjeto, contndose hasta 300 clulas. A las especies se las agrup se-
gn su frecuencia de aparicin en las muestras (%). Se reconocieron 68 taxa
pertenecientes a la clase Bacillariophyceae, correspondientes a 47 gneros;
26 del orden Centrales y 21 del orden Pennales. 30 especies fueron citadas
por primera vez para este rea. Los gneros mejor representados en cuanto
al nmero de especi es fueron: Odontella, Thalassiosira, Coscinodiscus,
Chaetoceros, Biddulphia, Rhizosolenia y Pinnularia. Las especies con frecuen-
cias relativas de 80-100 %, fueron: Actinoptychus vulgaris, Asterionellopsis
glacialis, Coscinodiscus lineatus, Cyclotella sp1, Endictya sp, Fragilaria sp,
Gonioceros armatus, Paralia sulcata, Rhaphoneis amphiceros, Thalassionema
nitzschioides, Thalassiosira eccentrica y Thalassiosira sp. Las especies que ca-
racterizaron al fitoplancton fueron en mayora las que se presentaron for-
mando colonias, principalmente las de Asterionellopsisglacialisy Gonioceros
armatus. Fue destacable la presencia de especies de diatomeas de aguas con-
tinentales, como Aulacoseira granulata, Epitemia adnata var. adnata, Pleurosira
laevis, Surirella sp. en los meses de octubre y noviembre del 2002. La
presencia de especies de diatomeas bentnicas en las muestras de plancton
fue debida a la resuspensin de sedimentos causada por la accin conjunta
del viento y el oleaje. PGI 24/B077.SGCyT.UNS
95 1
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4-4. CARACTERIZACIN MOLECULAR DE ESPECIES DE LAS
FRACCIONES MS PEQUEAS DEL FITOPLANCTON
DEL MAR ARGENTINO
1
Cumino AC,
2
Negri R,
2
Silva R,
1
Salerno GL.
[1] Centro de Investigaciones Biolgicas, FIBA, [2] INIDEP, Mar del Plata, Argentina.
Las ltimas estimaciones de la produccin primaria neta planetaria han
mostrado que aproximadamente el 50% de sta, corresponde a los ocanos
a travs de la actividad fotosinttica de las microalgas que constituyen el
fitoplancton. A partir del descubrimiento de los componentes de la frac-
cin picoplanctnica (< 2 m) a fines de los aos 70 se comenz a evaluar
el aporte de las fracciones ms pequeas a la biomasa y produccin prima-
ria, alcanzando en algunas reas valores de hasta el 90 %. Con la aplicacin
de las tcnicas moleculares, se ha descubierto una importante diversidad en
esta fraccin. En el presente se cuenta con muy escasa informacin sobre la
diversidad de los componentes del nano y picoplancton del Mar Argenti-
no. El presente trabajo se enmarca en un proyecto mayor relativo al estudio
de la dinmica del plancton marino en el rea costera bonaerense (Estacin
EPEA 3828S-5741W). El objetivo de este estudio es comenzar con la
caracterizacin molecular de la biodiversidad picofitoplanctnica, en una
primera etapa a partir de especies aisladas en cultivo y continuando con
muestras ambientales. En este trabajo se presentan los primeros resultados
de la caracterizacin molecular de especies en cultivos unialgales. Las mues-
tras de agua se colectaron a 5 m de profundidad utilizando botellas de tipo
Niskin. En el laboratorio se enriquecieron las muestras con medios de cul-
tivos F/2 (sin silicatos) y fueron conservadas a temperatura controlada con
un ciclo de 12/12 h luz/oscuridad. Los cultivos unialgales se obtuvieron
por el mtodo de dilucin o aislamiento de individuos con micropipetas.
Las clulas fueron conservadas a 80 C. Se caracterizaron especies eucariotas
y procariotas fitoplanctnicas, mediante amplificacin de ADNr por meto-
dologa basada en la PCR usando oligonucletidos universales para cada
grupo. Los fragmentos de ADN ampl i fi cados fueron separados por
electroforesis en geles de agarosa (1 %) y aquellos de tamao esperado fue-
ron purificados y clonados en el vector pGEM-T Easy para su posterior
secuenciacin. Las secuencias nucleotdicas obtenidas fueron analizadas por
medio del programa BLASTr y luego con el BLASTn. De este modo, se
identificaron Hemiselmis rufescens, Rhodomonas abbreviatta, Imantonia ro-
tunda y Synechococcussp. Actualmente se est determinando la variabilidad
de la comunidad picoplanctnica mediante DGGE (denaturing gradient
gel electrophoresis) y construyendo genotecas del ADN ambiental de
muestras tomadas a lo largo de un ao.
96 1
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4-5. MICROFITOBENTOS DE LA COMUNIDAD EL
CANGREJAL DEL ESTUARIO DE BAHA BLANCA. II.
BACILLARIOPHYCEAE.
Da Rodda, C, Parodi, E.R
Ecologa Acutica, Universidad Nacional del Sur e I.A.D.O. 8000 Baha Blanca.
En las planicies de marea limo-arcillosas del estuario de Baha Blanca
(Buenos Aires) existe El cangrejal, una asociacin de Sarcocornia perennis
y Chasmagnathusgranulata. En su interfase sedimento-agua se forman ma-
tas microbianas constituidas principalmente por cianofceas y diatomeas.
El objetivo de este trabajo fue analizar la diversidad especfica de las diatomeas
bentnicas presentes en esas matas. Para ello, en invierno-primavera del
2002, se tomaron muestras superficiales de sedimento (1 cm de profundi-
dad) con esptula y se las coloc en cajas de Petri. Para la identificacin
sistemtica, se oxid la materia orgnica de las muestras con solucin de
permanganato de potasio saturado y cido clorhdrico concentrado en pro-
porcin 1:1. Se observaron los ejemplares al microscopio ptico y electrni-
co de barrido, utilizndose las tcnicas convencionales. Se hallaron 53 taxa
de la clase Bacillarophyceae, 7 del orden Centrales y 46 de Pennales, de las
cuales resultaron nuevas citas para esta zona: Minidiscussp., Prosckinia sp.,
Navicula tripunctata, N. veneta, N. radiosa, N. confervaceae, Amphora aff.
pediculus, Cymbella cymbiformis, Nitzchia aff. filiformis, N. scalpelliformis, N.
clausii, N. aremonica, N. aff.paleaeformis, N. lorenziana, Rhopalodia gibberula,
R. musculus, R. constricta, R. brevissonii, R. acuminata, Epithemia adnata, E.
sorex y E. turgida var. westermannii.
PGI 24/B077.SGCyT.UNS
97 1
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4-6. RHIZOPHIDIUM GLOBOSUM (CHYTRIDIALES)
PARASITANDO A CLOSTERIUM ACICULARE (CHLOROPHYTA)
EN EL EMBALSE PASO DE LAS PIEDRAS
(BUENOS AIRES, ARGENTINA)
Fernndez, Carolina
1,2
y Parodi, Elisa R.
1
1. Lab. Ecologa Acutica. Universidad Nacional del Sur e I.A.D.O. 8000. Baha Blanca.
ARGENTINA eparodi@criba.edu.ar. 2. Becaria CIC
El parasitismo selectivo que desarrollan algunos hongos acuticos, espe-
cialmente los Chytridiales, sobre algas fitoplanctnicas es un importante
factor en el control de la dinmica de las poblaciones algales, de las sucesio-
nes y de las cadenas trficas en lagos y embalses. Este es el primer estudio
sobre la presencia de Phycomycetes en el Embalse Paso de las Piedras. Los
muestreos se realizaron con red de plancton de 30 m de apertura de malla
y se mantuvieron vivas en cmara de cultivo bajo condiciones de tempera-
tura (211C) y fotoperodo (12:12) controladas. Closterium aciculareWest,
una de las Chlorophyta ms abundantes en el embalse se encontr parasitada
por Rhizophydium globosum (Chytridiales, Phlyctidiaceae). Estos ejemplares
presentaron, como sntoma ms visible, deterioro del cloroplasto en grado
variable, dependiendo del estado de desarrollo de la infeccin y en muchos
casos se observaron infecciones mltiples. Los esporangios epibiticos de R.
globosum son esfricos, ssiles, inoperculados, de 11-16 m de dimetro,
con paredes lisas e incoloras y presentan glbulos de apariencia lipdica. La
liberacin de las numerosas zoosporas uniflageladas ocurre por una abertu-
ra superior. Al fijarse sobre C. aciculare, las zoosporas adquirieren una forma
subesfrica de 2-3 m de dimetro. En su interior presentan un glbulo
refringente. Posteriormente, se forma un extenso rizoide en la zona de pe-
netracin. Si bien R. globosum estuvo presente en casi todos los muestreos
fue ms abundante a fines del otoo y principios del invierno
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4-7. EPICLADIA HETEROTRICHA (CHAETOPHORACEAE,
CHLOROPHYTA): EPI - ENDOFITA DE HYMENENA LACINIATA
(RHODOPHYTA) EN LAS COSTAS ARGENTINAS
Gauna, M. Cecilia y Parodi, Elisa R.
ARGENTINA. eparodi@criba.edu.ar.
Frondes esporofticas de Hymenena lanciniata (Hooker et Harvey) Kylin
colectados en la zona litoral y sublitoral de Punta Crdoba (4552S,
6506O) y Santa Isabel (43 18S, 6506O) presentaron, superficial-
mente, una mancha di spersa y verdosa debi do a la presenci a de talos
monostromticos de Epicladia heterotricha (Yarish) Nielsen. Este trabajo
constituye la primera cita de E. heterotricha epi - endfita de H. lanciniata
para las costas argentinas y en l se analiza su ciclo de vida en cultivo. A
partir de fragmentos del talo de H. lanciniata con E. heterotricha se aisl esta
ltima especie y se mantuvo en cultivo en agua de mar filtrada, esterilizada
y enriquecida segn Provasoli (1968), los que fueron mantenidos a 21
1C con un fotoperodo de 12:12 hs. En el desarrollo del talo se destac un
rea central pseudo-parenquimatosa de clulas irregulares y ovales, rodeada
de filamentos de disposicin radial, ramificados irregularmente, compues-
tos de clulas cilndricas. Las clulas presentaron un cloroplasto parietal,
con 2 (1) pirenoides. Los esporangios se formaron en la zona central, a
partir de las clulas ovales y contuvieron hasta 16 zosporas biflageladas.
stas infectaron los frondes esporofticos de H. lanciniata. Luego de la
germinacin, se gener un nuevo talo monostromtico del cual se desarro-
llaron largos filamentos de clulas alargadas que se ubicaron contorneando
los mrgenes de las clulas del hospedador. Los filamentos endfitos en H.
lanciniata fueron rami fi cados i rregularmente y ocuparon los espaci os
intercelulares. En estadios de infeccin ms avanzados, se observ necrosis
del tejido del hospedador, asociada a una contaminacin bacteriana secun-
daria, ocasionando la perforacin del talo.
99 1
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4-8.DIVERSIDAD DE LA COMUNIDAD DE DIATOMEAS
EPFITAS SOBRE CLADOPHORA SURERA (CHLOROPHYTA) DEL
ARROYO NAPOST GRANDE (BUENOS AIRES, ARGENTINA)
Guinder, Valeria A. y Parodi, Elisa R.
ARGENTINA eparodi@criba.edu.ar.
En ambientes acuticos donde el sustrato est ampliamente cubierto por
hidrfitas, el epifiton cobra un papel importante en la composicin de la
biota. Este es el caso del Arroyo Napost Grande, donde Cladophora surera
alcanza una biomasa considerable. Esta macroalga aumenta enormemente
la superficie disponible para el asentamiento de epfitos, siendo las diatomeas
sus colonizadoras ms numerosas y diversas. Este constituye el primer estu-
dio de la diversidad de la comunidad diatomolgica epfita sobre C. surera
en el tramo del mencionado arroyo que atraviesa la ciudad de Baha Blanca.
La identificacin de las diatomeas se bas exclusivamente en caracteres
morfolgicos, de las valvas silceas. Se trabaj con microscopa ptica con
contraste de fases y con microscopa electrnica de barrido,. Se identifica-
ron 70 especies de la Clase Bacillariophyceae pertenecientes a 20 gneros.
Slo una especie, Cyclotella meneghiniana Ktzing represent al Orden
Centrales, el resto correspondi al Orden Pennales. Las especies dominan-
tes fueron Cocconeis placentula var. lineata (Ehrenberg) Van Heurk,
Gomphonema olivaceum(Lyngbye) Ktzing, Diatoma vulgarisBory, Cocconeis
placentula var. euglypta (Ehrenberg) Cleve, Nitzschia palea (Ktzing) W.
Smith y Navicula tripunctata (O. F. Mller) Bory, Gomphonema olivaceum
var. calcarea (Cleve) Cleve y Fragilaria ulna (Nitzsch.) Lange-Bertalot. Los
gneros que presentaron mayor nmero de especies fueron: Navicula (15),
Nitzschia (11), Cymbella (6), Fragilaria (6), Achnanthes(5) y Gomphonema
(5).
100 1
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4-9.CONTRIBUCIN DE LAS DIFERENTES COMUNIDADES A
LA BIOMASA ALGAL EN LA LAGUNA LACOMBE
1,3
Cano, M.G.
1,3
Casco, M.A.,
2,3
Claps,M.C.,
1,4
Mac. Donagh, M.E.,
2
Solari, L.C
[1] D.C. Ficologa Facultad. de Ciencias Naturales y Museo, UNLP, La Plata; [2] Instituto
de Limnologa R.A. Ringuelet., Fcio. Varela; [3] (CONICET); [4] (CIC)
Los estudios acerca de la biomasa en las lagunas pampsicas se han reali-
zado generalmente considerando en forma independiente a las diferentes
comunidades. En el presente trabajo se analizaron en forma simultnea el
plancton, perifiton (epifiton) y benton de la Laguna Lacombe con el objeto
de comparar la contribucin relativa a la biomasa algal de cada una de ellas.
Se muestre mensualmente durante un ciclo anual. Las muestras de plancton
y benton se tomaron en cuatro sitios: dos en zonas de aguas abiertas (sitios
profundos y someros) y dos en el juncal (uno expuesto a los vientos predo-
minantes y otro en el centro del mismo). El epifiton se muestre en los dos
sitios del juncal. Las muestras de plancton se tomaron con bomba a cinco
profundidades excepto en la zona litoral somera, el sedimento se extrajo
con corer y los epfitos se obtuvieron cortando segmentos de junco (mni-
mo cinco profundidades) y raspando en el laboratorio las algas epfitas. En
todos los casos se realiz el extracto de pigmentos fotosintticos utilizando
acetona, se midi con espectrofotmetro y se calcul la concentracin de
clorofila a segn el mtodo de Lorenzen. Los resultados se refirieron en
primera instancia a volumen de agua, superficie de sedimento y superficie
de macrfita. Luego con el objeto de realizar las comparaciones se calcula-
ron los correspondientes valores referidos a 1 m
2
de superficie de laguna: a)
el fitoplancton integrando la columna de agua segn el nivel alcanzado en
cada fecha; b) el perifiton integrando segn la altura del junco sumergido
en cada fecha y multiplicando por la superficie promedio colonizable y la
densidad de juncos; c) el benton por m
2
de superficie. La biomasa por m
2
de superficie de laguna result similar entre todas las comunidades. El
fitoplancton vari entre 31,8 mg cl. a/m
2
cerca de la orilla y 87,4 mg cl. a/
m
2
en la zona central del juncal, reparada de los vientos. La biomasa de
perifiton sobre junco dependi de la densidad de tallos y de la exposicin
del viento, con valores entre 5,8 mg cl. a/m
2
y 23,6 mg cl. a/m
2
. En el
sedimento se registraron entre 74,8 mg cl. a/m
2
en el centro del juncal y
124,4 mg cl. a/m
2
en aguas libres y someras donde, adems, se observ la
mayor variabilidad. Se discuten las diferentes formas de expresar la biomasa
para realizar comparaciones entre comunidades y se destaca la necesidad de
presentar los resultados referidos a la superficie del cuerpo de agua cuando
se trata de estudios integrales del sistema.
101 1
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4-10.CERAMIALES EPIFITOS EN CULTIVOS DE GRACILARIA
CHILENSIS (RHODOPHYTA)
Leonardi, P.I.,
1
Miravalles, A.B.
1
& Correa, J.A.
2
1
Laboratorio de Ficologa y Micologa, Universidad Nacional del Sur, 8000 Baha Blanca,
Argentina. leonardi@uns.edu.ar;
2
Facultad de Ciencias Biolgicas, Pontificia Universidad
Catlica de Chile. Casilla 114-D, Santiago, Chile.
El epifitismo es uno de los mayores problemas biolgicos en cultivos de
Gracilaria. Este estudio fue realizado en G. chilensisen el norte de Chile
durante el perodo comprendido entre abril de 2002 y junio de 2003. Se
identificaron especies de epfitos pertenecientes a las divisiones Chlorophyta,
Rhodophyta, Heterocontophyta y Cyanophyta. Las especies halladas fue-
ron clasificadas de acuerdo a la fuerza de adhesin, su grado de invasin y al
dao causado en el husped. Los epfitos de mayor agresividad estuvieron
representados por especies del orden Ceramiales como Ceramiumrubrum,
C. secundatum, Polysiphonia harveyi y P. flaccidissima. En todos los casos, los
rizoides penetraron en el husped por ruptura de la cutcula y la pared,
ingresando intercelularmente en la corteza y alcanzando el tejido medular.
Las clulas de Gracilaria cercanas al rizoide presentaron distinto grado de
desorganizacin. Las clulas en contacto con el rizoide aparecieron severa-
mente comprimidas, pudiendo reconocerse nicamente grnulos de almi-
dn flordeo. Las clulas prximas al rizoide presentaron el plasmalema y el
estrato de pared interna con perfiles ondulados y los cloroplastos desorga-
nizados. En el caso de Polysiphonia harveyi tambin fueron observadas reas
digeridas en la pared del husped y ocasionalmente en el citoplasma de las
clulas corticales.
Los estudios realizados mostraron que G. chilensisest expuesta no solo a
una gran diversidad de especies de epfitos, sino tambin a diversas formas
de infeccin. El Tipo V mostr variabilidad estacional, ejerciendo en invier-
no significativa presin sobre el husped.
102 1
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4-11. LAS POBLACIONES MACROALGALES DE INTERES
ECONOMICO DE TIERRA DEL FUEGO Y SU PROBLEMTICA
Mendoza M.L.
Centro Austral de Investigaciones Cientficas (CADIC-CONICET), CC. 92, V 9410 BFD
Ushuaia, TDF. Email: mlmendoza@arnet.com.ar
En la utilizacin integrada de los recursos marinos fueguinos las po-
blaciones macroalgales es un tem de relevante importancia econmica. La
proteccin de las poblaciones es una accin que se debe anticipar a su uti-
lizacin. En el uso de estas poblaciones macroalgales hay riesgos y esfuerzos
diferentes de acuerdo con los tiempos de recuperacin de las plantas, de la
biomasa perdida por una cosecha, el tipo y momento de reproduccin.
Tambin los componentes qumicos, vitamnicos y oligoelementos de las
especies son distintos. Por consiguiente el manejo del recurso debe estar
basado en un serio estudio regional de la potencialidad biolgica de las
plantas. En las costas de Tierra del Fuego se destaca la presencia de los
bosques de Macrocystispyrifera, las praderas de Lessonia vadosa, L. fuscescens
y Durvillaea antarctica, macroalgas pardas utilizadas principalmente como
materia prima en la produccin del cido algnico. Tambin las poblaciones
de las macroalgas rojas Sarcotralia ciliata, Mazzaella laminarioides, Iridaea
dichotoma y Gigartina skosttbergii son empleadas como materia prima en la
obtencin de distintos carragenanos. Adems las poblaciones de las espe-
cies de los gneros Porphyra, Ulva, Monostroma, Enteromorpha y Codium
son utilizadas en alimentacin humana o en la preparacin de dietas balan-
ceadas para ani males o ferti li zantes, mi entras que las poblaci ones de
Lithothamnion heterocladumson utilizadas para corregir el pH de suelos
cidos por su alto contenido en carbonato de calcio. La Provincia de Tierra
del Fuego carece de una legislacin propia que regule el manejo de las
poblaciones macroalgales. Es decir, de normas en que el tiempo y monto
de extraccin de las poblaciones este en equilibrio con el potencial biolgi-
co recuperativo y regenerativo de las plantas. Tambin se carece de estudios
ci entfi cos tcni cos necesari os de la casi totali dad de las poblaci ones
macroalgales fueguinas, lugar geogrfico donde las condiciones ambienta-
les son diferentes a otros lugares donde estas especies se presentan, princi-
palmente las variaciones de las horas de luz diaria invernales y estivales.
103 1
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4-12. VARIACIN DEL CRECIMIENTO Y DE LAS
FLUCTUACIONES DE LA BIOMASA DE LAS PLANTAS DE
MACROCYSTIS PYRIFERA (PHAEOPHYTA)
EN TIERRA DEL FUEGO
Mendoza M.L, Nizovoy A., Ramos L.
Centro Austral de Investigaciones Cientficas (CADIC-CONICET), CC. 92, V 9410 BFD
Ushuaia, TDF. Email: mlmendoza@arnet.com.ar
Estos ensayos se realizan con el fin de conocer, en las distintas estacio-
nes del ao, el tiempo que demoran las plantas cortadas de Macrocystispyrifera
en recuperar la talla normal y la biomasa perdida, de las distintas partes de
la planta y, adems, de precisar en que meses se presentan las hojas frtiles.
Parmetros biolgicos desconocidos en los ejemplares fueguinas, ya que la
recuperacin de las plantas se basa en la potenciabilidad biolgica de los
ejemplares sincronizada con las condiciones ambientales. Se estudia las plan-
tas de un bosque ubicado en el Canal Beagle, Rocas Oscuras (54 51 S,
66 16 O). Al comienzo de cada estacin del ao se corta la mitad del
bosque. De ambas porciones se extraen un nmero elevado de plantas si-
guiendo una transecta paralela al largo de la parte media del bosque. De las
plantas extradas se toma la longitud total, la del dosel flotante, la biomasa
(peso hmedo) de la porcin cosechable y recuperativa regenerativa y, ade-
ms, se registra la presencia de hojas frtiles por planta. Los parmetros
fisicoqumicos del agua de mar se toman con un analizador multiparamtrico
y horas luz diaria de la pgina web del SHN. Se obtiene que las plantas
crecen un promedio de 6,70 m en verano, 2,40 m en otoo, 5,97 m en
invierno y 7,03 m en primavera. La recuperacin de biomasa promedio del
dosel flotante es de 26 kg/planta en verano, 3,45 kg/planta en otoo, 21,25
kg/planta en invierno, 17,33 kg/planta en primavera, y de la porcin basal
regenerativa 25,25 kg/planta en el verano, 11,05 kg/planta en otoo, 18,50
kg/planta en invierno, 18,67 kg/planta en primavera. Adems se registra,
que las plantas presentan hojas frtiles en todas las estaciones. Los resulta-
dos obtenidos ponen de manifiesto, que las plantas cortadas presentan un
alto poder recuperativo de la talla normal y de la biomasa en los meses
verano, invierno, primavera y bajo en los meses de otoo. Es decir, que la
potencialidad biolgica recuperativa y regenerativa de las plantas cortadas
de Macrocystispyrifera en los meses de verano, invierno y primavera asegu-
ran la sustentabilidad y perpetuidad del recurso, a la vez que proporcionan
un aporte regular rentable de materia prima, no as en los meses de otoo.
104 1
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4-13.FITOPLANCTON Y CARACTERSTICAS AMBIENTALES DEL
TAJAMAR DE LA CIUDAD DE ALTA GRACIA, PATRIMONIO
MUNDIAL DE LA HUMANIDAD.
1
Murialdo, Raquel;
2
Fernndez Belmonte, Cecilia;
3
Mangeaud, Arnaldo
[1]Cen. Inv. Entomolgicas /U.N.C./Crdoba; [2] FICES/UNSL/ Villa Mercedes. [3]Cen.
Inv. Entomolgicas/U.N.C./ Crdoba
El Tajamar es uno de los embalses ms antiguos de Argentina, construi-
do por los Jesuitas en el ao 1659 en la ciudad de Alta Gracia, provincia de
Crdoba, est ubicado en el centro de esa ciudad, hacia el norte del casco
original de la Estancia Jesutica. Fue declarado Patrimonio de la Humani-
dad por la UNESCO en el ao 2000.
El objetivo del trabajo fue realizar la caracterizacin fitoplanctnica y
determinar las caractersticas fsico-qumicas y de nutrientes, a fin de esta-
blecer el punto de partida para un plan de gestin.
Los trabajos de campos se realizaron en cinco sitios de muestreo, durante
el ao 2001. La abundancia y diversidad del fitoplancton, durante el vera-
no y el otoo, se relacionaron con floraciones de Cyanophyceae que tuvo
como especie dominante a Microcystis aeruginosa (Ktz.) Ng., siendo
Gomphosphaeria spp. y Oscillatoria limosa Ag. ex Gom. las acompaantes.
As, la riqueza especfica del fitoplancton revel condiciones eutrficas y
mesosaprobias en este perodo. El mayor nmero de taxa se registr en
invierno y primavera y estuvieron representados por Chlorophyceae con
Micrasteriasspp., Kirchneriella obesa, K. lunaris, Cosmarium spp., Staurastrum
spp. y por Bacillariophyceae con Melosira variansAg., Synedra ulna (Nitzsch)
Ehr., Cymbella spp., Rhopalodia spp., Nitzschia sigmoidea (Ehr.) W. Smith
entre las ms importantes.
El anlisis de diversidad expresado como ndice de Shanon-Weaver arro-
j valores que son menores a uno (1) durante el verano. En tanto alcanzan
valores entre uno (1) y tres (3) en todas las estaciones del ao y en los sitios
de muestreo 1, el sitio 2 en otoo, invierno y primavera y los sitios 3, 4 y
5 en invierno y primavera. Esto permite establecer condiciones de modera-
da contaminacin. El anlisis de componentes principales (PCA) efectuado
con el fin de agrupar las estaciones del ao sobre la base de la abundancia
de especies permiti determinar las relaciones entre esas estaciones y el
valor discriminatorio de las especies.
Por otra parte se pudo establecer que de la relacin nitrgeno total: fsfo-
ro total el nutriente limitante es el fsforo durante el verano y otoo. Las
restantes variables no tienen diferencias significativas entre estaciones y
tipifican al embalse como de aguas de tipo carbonatadas con escasa salinidad.
105 1
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4-14. CYLINDROSPERMOPSIS RACIBORSKII (WOLOSZ.)
SEENAYYA & SUBBA RAJU EN UN LAGO DE LLANURA
ALUVIAL, COLOMBIA.
Plata-Daz, Yasmn;
1
Ricardo Echenique
2
& R. A, Gaviln-Daz
3
1
Escuela de Ciencias Unipaz.- Barrancabermeja, Colombia.
*
Becaria de la RLB (02-P9);
2
Fac. Cs. Nat. y Museo (UNLP) - CIC (Prov. Bs. As.) Argentina;
3
Grupo de estudios de la
Biodiversidad UIS- Bucaramanga, Colombia
Durante los aos 1998 y 1999, se llev a cabo un estudio limnolgico
en la Cinaga de Chucur. Como parte de este estudio se incluy la evalua-
cin de la estructura y dinmica del fitoplancton y su relacin con las prin-
cipales variables ambientales.
De los trabajos realizados, es importante destacar que pudo detectarse
una al t a bi omasa fi t opl anct ni ca product o de l a domi nanci a de
Cylindrospermopsisraciborskii a lo largo de gran parte del perodo de estu-
dio. Esta especie es mundialmente reportada como potencialmente pro-
ductora de toxinas.
Cylindrospermopsisraciborskii es un organismo filamentoso, heterocistneo,
perteneciente al Orden Nostocales. Inicialmente fue citada como especie
de distribucin estricta para ambientes tropicales (Brasil, Cuba) y de ma-
nera facultativa en regiones clidas de zonas templadas. Sin embargo, en
aos recientes ha sido mencionada ampliamente como un taxn invasivo en
muchos lagos y reservorios de diferentes latitudes.
En el presente trabajo se da a conocer la presencia de Cylindrospermopsis
raciborskii, por primera vez para Colombia, ampliando tanto su distribu-
cin como el tipo de ambientes en los cuales se desarrolla. Asimismo, se
efecta un anlisis del comportamiento del mencionado taxn, proporcio-
nando informacin importante sobre las condiciones que favorecieron su
dominancia a lo largo de siete meses de estudio en un lago de llanura aluvial,
Cinaga de Chucur.
106 1
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4-15. PRIMEROS REGISTROS DE TRAUSTOCHYTRIDIALES
(CHROMISTA) PARA LA ARGENTINA
Rosa SM,
1,2
Galvagno MA
2,3
y Vlez CG
1
[1] Dpto. de Biodiversidad y Biologa Experimental, Facultad de Ciencias Exactas y
Naturales, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina; [2] Instituto de
Investigaciones Biotecnolgicas, Universidad Nacional de San Martn, pcia. Buenos Aires,
Argentina; [3] Dpto. de Industrias Qumicas, Facultad de Ingeniera,
Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina.
Las traustoquitridiales son microorganismos heterotrficos marinos o
estuariales, cosmopolitas, cuya importancia biotecnolgica reside en que
representan una importante fuente industrial de cidos grasos poliinsaturados
omega 3 (especialmente cido docosahexaenoico [DHA]). En el marco de
una investigacin dirigida a estudiar la flora de trautoquitridiales de la Ar-
gentina y evaluar la produccin de cidos grasos de los taxones aislados, se
registraron las primeras citas de estos organismos para la regin. Se trata de
Ulkenia radiata Gaertner y Traustochytrium antarcticumBahnweg et Sparrow.
Los aislamientos y las determinaciones se realizaron utilizando la tcnica
tradicional de los sebos de polen (polen baits) y modificaciones a dicha
tcnica, las cuales se detallan. Se presenta la descripcin completa de los
taxones, poniendo especial nfasis en la caracterizacin y documentacin
fotogrfica del proceso de zoosporulacin, rasgo de fundamental importan-
cia para la determinacin de estos organismos
107 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
4-16. MORFOLOGA DE ODONTELLA ATLANTICA (FRENG.)
NOV. COMB. (BACILLARIOPHYTA).
1
Sar, E.A.,
2
Sunesen I,
3
Lavigne A.S.
[1, 2, 3] Departmento Cientfico Ficologa / Facultad de Ciencias Naturales y Museo, La Plata.
Biddulphia rhombusvar. atlantica fue erigida por Frenguelli en 1930 ba-
sndose en la diferencia de disposicin y densidad de las estras sobre la
superficie valvar y sobre la cintura con respecto a la variedad tipo, Biddulphia
rhombus(Ehremberg) Smith var. rhombus. El autor no design un holotipo
pero present una breve diagnosis y dos ilustraciones de modo que el an-
lisis de las muestras de Miramar mencionadas en el protologo, que consti-
tuyen sintipos, permiti identificar inequvocamente varios especmenes de
este taxn en la serie correspondiente a la muestra 197 preparado 2. Dicho
preparado fue designado en este trabajo como lectotipo deBiddulphia rhombus
var. atlantica. Los especmenes encontrados fueron examinados con micros-
copio ptico y dado que no se conserva en la Coleccin Frenguelli la mues-
tra a partir de la cual el preparado fue realizado, no fue posible analizar la
morfologa fina del material tipo del taxn. Este anlisis se llev entonces a
cabo sobre el material colectado por nosotros en aguas costeras de la Provin-
cia de Buenos Aires en San Clemente del Tuy, Santa Teresita, La Lucila del
Mar, Mar de Aj, Nueva Atlantis, Pinamar y Villa Gesell. Las muestras
fueron tomadas en la capa superficial de la columna de agua (entre 0 y 5 m)
con red de 30 mm de apertura de malla y fijadas con formaldehdo al 4 %.
El tratamiento para oxidacin de materia orgnica fue hecho de acuerdo
con los mtodos convencionales y el material fue montado para su observa-
cin con microscopio ptico con contraste de fase (Wild M 20 y Nikon
Microphot-FX) y microscopio electrnico de barrido (Jeol JSMT 100).
El material tipo de Biddulphia rhombusvar. atlantica fue comparado ade-
ms, con el material tipo de ZygocerosrhombusEhrenberg, que es el basinimo
de Odontella rhombus (Ehrenberg) Ktzi ng y de Biddulphia rhombus
(Ehrenberg) Smith y por lo tanto de su variedad nominal. Como resultado
de esta comparacin pudimos determinar que mientras en el primer taxn
las estras estn ordenadas a partir de una lnea al lado de la cul se ubican
los tubos externos bien desarrollados de los procesos labiados uno en la
proximidad de cada elevacin, en el segundo las estras se presentan orde-
nadas a partir de un punto y no se encuentra la salida externa del proceso
labiado en la proximidad de cada elevacin. Estas diferencias junto con
otras de ndole morfomtrica, justifican la transferencia de la variedad de
Frenguelli a la categora de especie bajo el nombre de Odontella atlantica
(Frenguelli) Sar nov. comb and nov. status.
108 1
er
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4-17. VARIACIONES ESPACIALES Y TEMPORALES DEL
FITOPLANCTON DEL EMBALSE LA ANGOSTURA
(TUCUMN- ARGENTINA)
Tracanna, B.
(1,2,3)
y Seeligmann, C.
(1,2)
(1)
ILINOA de la F.C.N. e I.M.L., U.N.T.,
(2)
F.M.L.,
(3)
CONICET. Miguel Lillo 205,
Tucumn, Argentina
La Angostura, uti li zado para ri ego, pesca y turi smo, es un si stema
monomctico-clido de tipo lentico artificial, ubicado en la zona montaosa
de Tucumn (1980 m s.n.m.). A partir de diciembre de 2000 y durante un
ao, se efectu un estudio limnolgico en el embalse, que surgi como tema
prioritario regional para optimizar el manejo del recurso. En este trabajo se
presentan los resultados cuali-cuantitativos del fitoplancton cuyas variaciones
espaciales y temporales permitirn conocer las posibles relaciones con otras
comunidades: zooplancton, peces y aves. Las muestras de agua para anlisis
qumicos y del fitoplancton fueron colectadas bimensualmente a diferentes
profundidades de la zona limntica. Se observ, en la columna de agua, una
dominancia de las Chlorophyta respecto a la riqueza especfica. De las 61
especies identificadas, slo Gomphosphaeria aponina, Closterium acicularey
Sphaerocystisshroeterii estuvieron presentes en el 100 % de las muestras y 14
especies se encontraron con una frecuencia superior al 50 %. Se observaron
diferencias entre los dos perodos estratificados, con un menor nmero de
especies y densidad algal y mayores registros de diversidad especfica para el
primero. Los factores reguladores del crecimiento del fitoplancton de mayor
importancia fueron la temperatura y la mezcla vertical de la columna de agua,
la que se produce principalmente en pocas de fuertes vientos. Este periodo,
comparado con el de la estratificacin trmica, mostr una menor densidad
algal, la que aument progresivamente a fines de la primavera y registros de
mayor diversidad especfica en el mes de abril/01, con un mximo de 3 en el
fondo. G. aponina se present siempre como dominante y como subdominates
Crucigenia quadrata, Monoraphidium arcuatum, Diatoma vulgarey Ceratium
hirundinella var. robusta, cuyos valores mximos respectivamente fueron: 2931,
95, 58, 54, y 28 ind l
-1
. La concentracin de oxgeno disuelto se correlacion
significativamente con las densidades de C. acicularey Staurastrumsp, el pH
con Trachelomonassculpta y la temperatura con Staurastrumsp. Asimismo, la
transparencia cuyos valores oscilaron entre 0,76-1,41 m, se correlacion con
las densidades de C. quadrata y S. schroeterii Las elevadas concentraciones de
cianobacterias en determinados momentos del verano, con baja transparen-
cia, rangos aceptables de DBO
5
y oxgeno disuelto, registros de clorofila a <
18 m l
1
, de nitratos y ortofosfatos < 0,5 mg l
-1
, permiten caracterizarlo
como mesotrfico.
109 1
er
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5-1. OPTIMIZACIN DEL PROCESO DE COMPOSTAJE:
INOCULACIN DE CIANOBACTERIAS Y
DIVERSIDAD DE LA COMUNIDAD MICROBIANA
Palma R.M
1
, Tortarolo M.F.
1
, Zulpa, G.
2
, Zaccaro, M.C.
2
, Capano, A.V.
2
, Sinnott, E.
2
, Storni, M.M.
2
1
Fac. de Agronoma, Av. San Martn 4453, 1417 Buenos Aires. palma@mail.agro.uba.ar
2
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires. Intendente
Giraldes 2620 pabelln II 4P C1428EHA Ciudad de Buenos Aires Argentina
El compostaje es un tratamiento de residuos slidos que permite des-
componer biolgicamente en condiciones aerbicas controladas restos or-
gnicos para transformarlos en dixido de carbono, agua, minerales y materia
orgnica estabilizada. Durante este proceso, se produce una reduccin de
peso y volumen de los residuos tratados. En esta lnea de estudio y tenien-
do en cuenta como objetivos no slo la reduccin de volumen de residuos,
sino que sto se logre en perodos de tiempos menores, se est realizando el
proceso de compostaje en forma experimental. El material inicial consta de
restos de poda, corte de pastos de parques y jardines y estircol, en diferen-
tes proporciones. El proceso se lleva a cabo al aire libre bajo condiciones
aerbicas. El material fue ubicado en contenedores en cuya base se coloca-
ron bateas para recoger los efluentes que se agregaron nuevamente a dicho
recipiente. Los tratamientos fueron: a) residuos verdes, b) residuos verdes y
estircol en relacin 1:1 y , c) residuos verdes y estircol en relacin 3:1.
Dichos materiales se inocularon con biomasa y productos extracelulares
cianobacterianos con la finalidad de comprobar mejoras en la eficiencia del
proceso y en la calidad del producto final. Paralelamente se realizaron con-
troles sin inocular. Durante este proceso se tiene en cuenta el tamao de los
materiales, la aireacin, temperatura, humedad, contenido de sales, rela-
cin C/N, pH y la evolucin de parmetros microbiolgicos y enzimticos.
Los resultados preliminares indican que los tratamientos cuyo material ini-
cial fue residuo verde y estircol en igual proporcin e inoculados conjunta-
mente con cianobacterias y productos extracelulares alcanzaron ms rpido
l a et apa de madurezcomparando con l os cont rol es si n i nocul ar.
TEMA 5. BIORREMEDIACION
110 1
er
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5-2. BIOFIXATION OF FOSSIL CO
2
BY MICROALGAE MASS
CULTURES: OUTDOOR COMPARATIVE TESTS OF BIOMASS
PRODUCTIVITY USING FLUE GAS CO
2
FROM A NATURAL GAS
COMBINED CYCLE POWER PLANT
Federico Capuano,
1
Gioia Lamenti,
1
Luciano Ritorto,
1
Giuseppe Scolla,
1
Mario Valdiserri
1
and Paola Maria Pedroni
2
1,2
EniTecnologie S.p.A., Environmental Technology Research Center;
1
Via E. Ramarini, 32
- 00016 Monterotondo, Rome, Italy;
2
Via F. Maritano, 26 - 20097 San Donato Milanese,
Milan, Italy
Biofixation of CO
2
by microalgae mass cultures represents an advanced,
environmentally friendly biological process that enables the direct utilization
of fossil CO
2
streams produced from concentrated sources, such as power
plants. The conversion of the algal biomass to renewable biofuels (methane,
ethanol, biodiesel and hydrogen) and fossil fuel-sparing products (fertilizers,
bi opol ymers and l ubri cants) woul d contri bute to the mi ti gati on of
greenhouse (GHG) emissions from fossil fuel combustion.
The major technological and economic barriers for large-scale applications
of microalgae biofixation processes to GHG abatement are the low productivity
of algal mass cultures, the high capital cost of the cultivation ponds and the
operating costs, in particular of algal harvesting. To overcome the current
barriers, long-term applied R&D into algal photosynthesis and physiology,
their large-scale cultivation, harvesting and processing is required.
EniTecnologie, the R&D arm of the Italian oil & gas company Eni, is
carrying out an in-house R&D project focused on demonstrating and
improving on the achievable biomass productivities of microalgae mass
cultures under outdoor conditions. The ultimate application of this project
is to fix flue gas CO
2
from a natural gas combined cycle (NGCC) power
plant and produce renewable methane fuel to replace a fraction of the fossil
methane of input.
Initial experiments at the EniTecnologie R&D Centre in Monterotondo,
central Italy, compared the productivity of a marine microalga, Tetraselmis
suecica, mass cultured in an outdoor experimental system consisting of a
scale-down design simulating a large-scale microalgae production systems
comprising both open ponds and closed photobioreactors. Results from
the first season of experimental activities will be presented, comparing
productivities in these two reactor types.
This R&D activity is being coordinated with other projects on mass culture
of microalgae for biofixation of CO
2
through the International Network on
Biofixation of CO
2
and GHG Abatement with Microalgae, an initiative that
operates under the auspices of the IEA GHG R&D Programme.
111 1
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5-3.USE OF IMMOBILIZED SCENEDESMUS INCRASSATULUS
(CHLOROPHYCEAE) FOR THE REMOVAL OF Cr(VI) IN
SIMULATED EFFLUENTS
1
Martnez-Jernimo F,
1
Prez-Garduo K, Caizarez-Villanueva RO
2
[1] Lab. de Hidrobiologia Experimental,Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, IPN.
Mxico, D. F.; [2] Departamento de Biotecnologa y Bioingeniera, CINVESTAV-IPN.
Heavy metals produce aquatic pollution and are hard to remove from
wast ewat ers, because t hey form st abl e chel at es, and t hey can al so
bioaccummulate in aquatic organisms. As they are toxic to aquatic organisms,
it is necessary to take away from effluents before they are discarded to natu-
ral water bodies. Traditional methods such as ionic exchange and chemical
preci pi t at i on are i neffect i ve and/ or expensi ve when heavy met al
concentrations are small; in this situation, the use of microalgae could be a
good option.
In preset study we assessed the effectiveness of the alginate-immobilized
chlorophycean Scenedesmusincrassatulus, for the removal of Cr(VI), as an
alternative method for the treatment of industrial wastewaters containing
this toxic. We measure algal growth, chlorophyll-a content, orthophosphate
and ni t rat e consumpt i on, Cr(VI ) removal and we det ermi ne t he
morphological changes in the alga.
When S. incrassatuluswas grown in suspended cultures, chlorophyll-a
content was reduced close to zero in all the Cr concentrations lower than 1
mg mL
-1
; similar results were observed for cellular density. The determined
8-day Median Effective Concentration (EC
50
) was 562.62 mg Cr(VI) L
-1
.
In a second stage, S. incrassatuluswas immobilized in alginate and exposed
to three lethal concentrations (0.5, 1 and 2 mg mL
-1
); it was observed that
the alginate matrix protected the alga against the toxic effects of Cr. In this
condition, nutrients consumption was ca. 70% in 8 days. Chromium was
mainly removed during exponential phase of growth, recording at the day
3 elimination up to 80%.
Among the morphological changes produced in the alga due to its toxic
effect of Cr(VI), we observed that most of individuals were round-shaped
cells and cultures had a low frequency of coenobium aggregations.
According to results, we can suggest the use of S. incrassatulusfor the
biological remove of Cr(VI) from industrial wastewaters.
112 1
er
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5-4. IRRADIACIN ULTRASNICA PARA CONTROL DE
FLORACIONES ALGALES (ULTRASONIC IRRADIATION FOR
ALGAE BLOOM CONTROL)
[1] Melina Devercelli, [2] Marcelo Krohling, [3] Luis Kieffer
[1] INALI (CONICET-UNL), Jos Maci 1933, (3016) Santo Tom (Santa Fe); [2]
Fundacin VINTEC, Gemes 3450, (3000) Santa Fe; [3] INTEC (CONICET-UNL),
FICH (UNL) Gemes 3450, (3000) Santa Fe
La eutroficacin de los ambientes acuticos produce cambios en la com-
posicin y estructura del fitoplancton, que generalmente derivan en un
mayor desarrollo de cianobacterias. Estas algas representan un problema,
ya que algunas especies forman afloramientos y liberan metabolitos txicos.
El objetivo de este trabajo fue estudiar la posibilidad de utilizar la irradia-
cin ultrasnica como una tcnica para su eliminacin de los sistemas acu-
ticos. Para ello se evalu en laboratorio el efecto sobre una comunidad
fitoplanctnica, compuesta principalmente por cianobacterias. Las mues-
tras fueron extradas de la laguna del Parque Belgrano (Santa Fe). Se utiliz
un reactor batch (250 ml) con ultrasonido de 9W de potencia y 20 KHz,
durante distintos tiempos (entre 1 y 60 minutos, 3 rplicas) realizando los
recuentos con microscopio invertido y las determinaciones de clorofila a
con espectrofotmetro. Tres especies de cianobacterias representaron el 97%
del fitoplancton: Microcystis aeruginosa, Anabaena spiroidesy Raphidiopsis
mediterranea. A los 5 minutos de aplicado el ultrasonido se produjo una
disminucin significativa (p<0,01) en sus densidades (86%, 75% y 77%,
respectivamente) y los restantes grupos taxonmicos presentes desaparecie-
ron (Chrysophyceae, Eugl enophyceae, Chl orophyceae, except o
Bacillariophyceae que persisti durante toda la experiencia, posiblemente
debido a la proteccin de sus frstulos silceos. A este tiempo no se encon-
traron tricomas, y solo persistieron algunas colonias de Microcystisque fue-
ron reducindose en tamao y cantidad de clulas a medida que aumentaba
el tiempo de exposicin. A los 10 minutos, el fitoplancton estuvo compues-
to solo por Microcystisy clulas aisladas de Anabaena, y a los 60 minutos la
reduccin fue del 98% y 99%, respectivamente. La concentracin de clo-
rofila a disminuy en un 45.1%, al cabo de 60 minutos. Los cambios en
la densidad del fitoplancton, permiten concluir que la irradiacin ultras-
nica puede ser utilizada para disminuir de manera significativa los niveles
de cianobacterias.
113 1
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5-5. THE AQUATIC FERN AZOLLA PROPERTY AS BIOFILTER
FOR OLIVE MILL WASTEWATER PURIFICATION
Ena A, Pushparaj B, Carnevale S, Sacchi A, Carlozzi P.
CNR, Istituto per lo Studio degli Ecosistemi, Sezione di Firenze Polo Scientifico, Via
Madonna del Piano, 50019 Sesto F.no Firenze, Italy.
The use of Azolla biomass as biofertiliser or as feed supplements for aquatic
and terrestrial animals have been known for a long time; its use as biofilter
is a more recently practise. The aim of this study was to test the capability
of Azolla (vegetable matrix) as a biofilter to reduce polyphenols and organic
matter contents in the olive mill wastewater (OMW
w
). Experiments were
carried out under laboratory conditions using either fresh or dry Azolla
biomass. In order to build the biofilters, fresh or dry Azolla biomass was
packed into Imhoff s cones; before packing dry biomass was rewetted. We
produced the fern Azolla outdoors in a synthetic Hoglands medium, 2.5
times concentrated, under the climatic conditions of Florence (experimen-
tal area of the Ecosystem Study Institute, Department of Florence).
Azolla production technology is easy and cheap and during summer
months we achi eved the average yi eld of 10 g (dw) m
-2
d
-1
. OMW
w
treatments were carried out using five packed biofilters in series. At the
output of each biofilter, before transferring OMW
w
in the following cone,
a sample of OMW
w
was taken and analysed to determine both polyphenols
and organic matter contents; this last was expressed as chemical oxygen
demand (COD). On coming out of the 5
th
packed biofilter, polyphenols
were reduced from 7,650 mg l
-1
to 3,610 mg l
-1
and COD from 115,200
mg l
-1
to 52,400 mg l
-1
. The removal capability of each Azolla-packed
biofilter, from the 1
st
to the 5
th
was constant and an average COD removal
of 11.600 mg l
-1
was achieved.
The OMW
w
to Azolla-fresh-weight ratio of 5:1 was optimal for both
polyphenols and COD removal. We did not find any significance difference
on efficiency between the uses of dry or fresh Azolla biomass.
Due to the presence on the N
2
-fixing Anabaena azollaein Azollas leaflets
mucilaginous cavities, the fern could grow in a culture medium without
nitrogen content, reducing the production cost.
114 1
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5-6. UTILIZACION DE BIOMASA DE NOSTOC MINUTUM EN
LA CAPTACION DE CADMIO Y ARSENICO
Ferrari, S.G.
1
; Guzmn, G.C.
1
; Silva, P.G.
1
; Silva, H.J.
1
, Sansone, M.G.
2
y Gonzlez, D.M.
2
1.-Laboratorio de Alimentos-Area Microbiologa. 2.-Toxicologa y Qumica Legal. Facultad de Qumica,
Bioqumica y Farmacia. Universidad Nacional de San Luis. Chacabuco y Pedernera. 5700. San Luis. Argentina.
La contaminacin de aguas superficiales o subterrneas con metales pesados es
un serio problema que surge como consecuencia de la descarga indiscriminada de
efluentes industriales y/o domsticos en los ecosistemas acuticos. Cadmio puede
provenir de pilas con ctodos de Ni-Cd, lodos fertilizantes, galvanoplastia y
electroplateado. La contaminacin con arsnico es producida por plaguicidas y
herbicidas, metalurgia, industrias de colorantes, del vidrio, electrnica, curtidos,
peletera. Adems se encuentra naturalmente en altas concentraciones en aguas
subterrneas utilizadas por poblaciones del sur de la provincia de San Luis.
En el presente trabajo se estudia la capacidad de adsorcin de Cd por biomasa
de Nostoc minutum(Nm), cianobacteria fijadora de N
2
aislada en la provincia de
San Luis. Se compara la variacin de esta capacidad de bioadsorcin con la
aplicacin de diversos pretratamientos, frente a iones Ca
+2
y Mg
+2
en concen-
traciones similares a las encontradas en aguas duras, y con inmovilizacin de la
biomasa en perlas de alginato de calcio. Adems se inician estudios similares
para la adsorcin de As con biomasa de Nm pulverizada.
Nm es cultivado en medio BW
3
. Biomasa seca es sometida a los pretratamientos
siguientes: 1) NaOH 0,1 N (Nm-NaOH), 2) Autoclave, 20 minutos (Nm-
121C), y 3) Calentada a 80 C, 1 hora (Nm-80C). Se prepararon perlas de
alginato con biomasa tratada o no con NaOH (perlas Nm-NaOH y perlas Nm).
La capacidad de adsorcin se ensay frente a soluciones de 10, 20 y 50 ppm de
Cd(NO
3
)
2
; tambin en presencia de Ca
+2
y Mg
+2
(100 y 50 mg/l respectivamen-
te). La capacidad de adsorcin para As como Na
2
HAsO
4
se ensay en soluciones
20 ppm con biomasa seca y pulverizada de Nm cultivado en medio BW
3
.
Para la solucin de 20 ppm de Cd se lograron los % de captacin si-
guientes: 81,08% Nm-NaOH; 80,11% Nm-121C; 67,89% Nm-80C;
71,19% Nm. Resultados similares se hallaron con la solucin de 10 ppm.
La captacin disminuye en presencia de Ca a 72% Nm-NaOH y con Mg a
65,65% . Para 50 ppm de Cd los % de captacin son: 34% Nm ; 52%
perlas Nm; 47,44% Nm-NaOH y 57% perlas Nm-NaOH.
Para la solucin de 20 ppm de As la captacin fue de 0% por lo que se
continuarn los estudios con diferentes pretratamientos de la biomasa
con el objeto de ver si es posible mejorar estos resultados.
La capacidad de bioadsorcin de Cd por Nostoc minutumse incrementa
cuando su biomasa es tratada con NaOH. La biomasa inmovilizada mejor
la captacin de Cd a altas concentraciones
115 1
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5-7. OTIMIZAO DA BIOCONVERSO DE NITROGNIO POR
APHANOTECE MICROSCOPICA NGELI A PARTIR GUA DE
MACERAO DO ARROZ
Maria Isabel Queiroz, Leila Queiroz Zepka,
Eduardo Jacob Lopes, Rosana Goldbeck
Fundao Universidade Federal do Rio Grande FURG; Programa de Ps graduao em
Engenharia e Cincia de Alimentos; Rua Eng. Alfredo Huch, 475, CEP 96201-900, Rio
Grande-RS, Brasil
O objetivo do trabalho foi avaliar a bioconverso de nitrognio em
biomassa pela cianobactria Aphanothecemicroscopica Ngeli em funo dos
parmetros: razo C/N, tempo de deteno celular e temperatura. Foram
conduzidos 8 experimentos com rplica a partir de um planejamento expe-
rimental completo 2
3
, variando os fatores: temperatura (25 e 35C), razo
C/N (50 e 110) e tempo de deteno celular (15 e 24h), iniciando-se cada
experimento com uma concentrao celular de 100mgL
-1
em reator piloto
descontnuo de 4,5L. A concentrao de bi omassa foi determi nada
gravimetricamente atravs da reteno em filtro Millipore 0,45 mm e a
remoo de nitrognio determinada a partir das concentraes iniciais e
finais, pelo mtodo de micro Kjedhal. Os resultados demonstram que a
produo de biomassa independe das condies avaliadas, entretanto as
maiores remoes de nitrognio ocorreram em razes C/N de 50, tempera-
tura de 35 C e tempo de deteno celular de 15 h.
116 1
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7-1. PROBLEMAS RELACIONADOS A LA ACUACULTURA DE ALGAS
Krisler Alveal V.
Departamento de Oceanografa,Facultad de Ciencias Naturales y
Oceanogrficas,Universidad de Concepcin,Casilla 160-C, ConcepcinChile.Email:
kalveal@udec.cl
Las investigaciones acadmicas han aportado las primeras bases para
encarar problemas relacionados con la produccin masiva de especies eco-
nmicamente importantes. El uso de gametos y esporas para cultivar espe-
cies comerciales, necesit de experiencias cientficas previas sobre historias
vitales y ensayos para obtener y fijar elementos de reproduccin a sustratos
artificiales. Para ellos fue necesario adecuar sistemas de incubacin y apor-
tar condiciones apropiadas de: luz, temperatura, salinidad, pH, nutrientes,
con el objeto de obtener biomasas algales masivas, muchas de ellas para
utilizarlas en alimentacin. La capacidad de renovarse vegetativamente es
una caracterstica que fue aprovechada para desarrollar especies de los gne-
ros Gracilaria, Gracilariopsis, Eucheuma, Kappaphycusy Caulerpa entre otras.
En Chile de 2022 especies de importancia econmica solamente Gracilaria
chilensisha sido objeto de cultivos masivos, pero existe informacin bsica
para cultivar: Sarcothalia crispata, Chondracanthus chamissoi, Gigartina
skottsbergii, Macrocystispyrifera. Los beneficios econmicos y sociales han
sido significativos, sin embargo existen problemas de orden biolgico,
ecolgico, empresarial y econmicos, que impiden un desarrollo extensivo a
otras especies de inters comercial. Por otra parte, muchos proyectos y estu-
dios terminaron slo en la publicacin de resultados sin proyeccin a utili-
zacin masiva real. Este aspecto tambin se proyect en la formacin de
profesionales, lo cual debe ser objeto de anlisis detenido, si se espera que
las actividades relacionadas con la acuacultura y la biotecnologa marina en
general, tengan impacto en el desarrollo de nuestros pases.
TEMA 7. CULTIVOS DE ALGAS MARINAS Y SUS APLICACIONES
117 1
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7-2. MANIPULACIN Y MANEJO DE ELEMENTOS DE
REPRODUCCIN PARA EL CULTIVO DE RHODOPHYTA.
Krisler Alveal V.
Departamento de Oceanografa. Facultad de Ciencias Naturales y
Oceanogrficas,Universidad de Concepcin Casilla 160-C, ConcepcinChile. Email:
kalveal@udec.cl
El agot ami ent o de praderas comerci al es mot i v l a bsqueda de
metodologas de desarrollo algal, primero con Gracilaria chilensisy ms
recientemente con Chondracanthuschamissoi. La metodologa utilizada con-
sisti en inducir la liberacin de esporas, captndolas sobre cuerdas de
polipropileno, redes de perln, cintas de plstico y cultivadas en agua de
mar filtrada a 0,45 m en tanques de 350 litros a 13 2C, fotoperiodo
12:12, iluminacin 7581 m fotn m
2
s
1
, pH 88,2, aireacin y adi-
cin de nutrientes comerciales (salitre, urea, superfosfato triple, NH
4
NO
3
).
Se cultiv Chondracanthus chamissoi sobre red de perln, hasta tallas de
9,210 cm con longitudes mximas de 1214 cm obteniendo frondas no
reproductivas y biomasas de 1.300 g por m
2
en 10 meses. Se tuvo fijaciones
iniciales de 188 78 esporas por cm
2
en red de perln. Los resultados ms
destacados se logr captando esporas de Gracilaria chilensissobre cuerdas
de polipropileno y cultivndolas primero en tanques y luego en el mar,
obteniendo en una extensin de 5 m de cuerda, ms de 6 kg de alga con
tallas superiores a los 70 cm de largo en ambientes estuarinos en 10 meses.
Los ensayos pilotos abarcaron una superficie de 4.000 m
2
118 1
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8-1. UNA EXPERIENCIA EN EL CULTIVO COMERCIAL DE
ARTHROSPIRA PLATENSIS (SPIRULINA)
1
Medina MA,
2
Dur LN,
3
Saporiti SP,
2
Lara MA
[1] Consejo de Investigaciones, Univ. Nac. de Rosario; [2] Facultad de Ciencias Agrarias,
Univ. Nac. de Rosario, [3] Campo Esmeralda
En la ciudad de San Jorge, provincia de Santa Fe (Argentina), la empresa
Campo Esmeralda comenz en diciembre de 2002 el cultivo de la cianobacteria
Arthrospira Platensis(Spirulina) con objetivos comerciales. Los primeros dos
estanques de produccin miden de 10.80 m de largo por 4.80 m de ancho,
con una profundidad 0.20 m. Fueron construidos sobre una capa de arena de
0.03 m que reposa sobre una losa de hormign de 0.10 m. Para elevar la
temperatura del medio de cultivo en invierno se dispusieron cubiertas tipo
invernadero a dos aguas, de polietileno LDT de 150 m de espesor, con una
altura mxima de 1.15 m en la parte central. La superficie total de cultivo es
en este momento de 155 m
2
, dispuestos en tres estanques
Durante la produccin estival se observ una formacin indeseada de barros
en los estanques, compuestos por sales precipitadas y materia orgnica. Los
barros comenzaron a disminuir cuando se realiz un control estricto sobre la
composicin qumica y la reposicin del medio de cultivo. Otro inconveniente
apareci al comienzo de la estacin fra, durante las operaciones de filtrado,
cuando en una serie de cosechas los filtros se vaciaban con muy poca retencin
de masa. La observacin al microscopio no mostr una causa probable. Una
apreciacin emprica demostr que, realizar la cosecha al medioda produce
buenos resultados aumentando el volumen de masa algal cosechada.
Cabe sealar que durante el mes de noviembre de 2003, los estanques
dejaron de producir uno tras otro. Este tipo de episodio haba sucedido a lo
largo del ao aunque menos marcadamente, y no se repiti despus. No se
ha encontrado ninguna explicacin, ya que se estaban debidamente contro-
ladas las variables de nutrientes, temperatura, pH, agitacin, etc.
El acondicionamiento trmico de los estanques permite obtener rendi-
mientos de 5 gr de masa seca por metro cuadrado y por da, durante el
invierno, al mantener el medio de cultivo con temperaturas superiores a los
12 C. La masa algal se procesa inicialmente en el establecimiento, hasta
obtener masa seca y molida. Luego es enviada a laboratorios donde se con-
vierte en comprimidos para su comercializacin.
TEMA 8. DESARROLLOS COMERCIALES
119 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-1. CYANOTOXINAS EN EL RO DE LA PLATA
Daro Andrinolo,
1y2
Paulo Pereira,
3
Leda Giannuzi,
1y2
Claudia Aura,
4
Silvia
Massera,
1
Nstor Lagos,
5
CarlosGarca,
5
Noem Zaritzky
2
y Ricardo Echenique
5
1
.- Lab. Toxicologa y Qumica Legal (Fac. Cs. Exactas, UNLP);
2
.- CIDCA-CONICET, La
Plata;
3
.- Lab. de Microbiologia e Ecotoxicologa, Inst. Nac. de Sade Dr. Ricardo Jorge,
Lisboa. Portugal;
4
.- Depto. de Patologa, Hospital. Gral. San Martn, La Plata;
5
.-

Lab. de
Bioqumica de Membrana, Depto. de Fisiologa y Biofsica. Fac. de Medicina, Univ. de
Chile;
6
.- Div. Cientif. Ficol. (Fac. Cs. Nat. y Museo, UNLP) - CIC (Prov. Bs. As.).
Las Cyanobacteria son organismos procariotas fotosintetizadores. Desde
hace dcadas, se conocen episodios de muerte de animales despus de be-
ber agua conteniendo cianobacterias productoras de toxinas.
En Argentina estn presentes la mayora de las especies toxgenas descritas en el
mundo y se han mencionado floraciones de cianobacterias asociadas con muerte de
peces en lagunas e intoxicaciones de animales domsticos a los que se suman las
frecuentes observaciones de muerte de ganado, peces (por ejemplo la peridica
muerte de sbalos en el Ro de la Plata) posiblemente asociados a desarrollos masi-
vos de especies toxgenas informada por parte de productores e investigadores.
En este trabajo se presenta la deteccin de una floracin de Microcystis
aeruginosa en el mbito del Puerto La Plata en el verano 2003-2004. Los
bioensayos indicaron la presencia de hepatotoxinas. El anlisis histopatolgico
de los hgados de los ratones utilizados en el ensayo demuestra una ruptura
de la arquitectura lobular, disociacin y prdida celular. Analizadas mues-
tras de agua y de moluscos, mediante Cromatografa Lquida de Alta Reso-
lucin (HPLC), se determina la presencia de microcystina YR y LR en
forma mayoritaria y, en menor proporcin, otras 5 microcystinas no identi-
ficadas. La concentracin total de microcystinas detectada (0.9 g/mg de
peso seco) en las muestras de clulas colectadas en los florecimientos posiciona
a estas cepas en el rango superior de toxicidades descritas en la literatura.
Aplicando loscriteriosconsensuadospor la Organizacin Mundial de Salud (OMS),
el riesgo relativo de tener problemas de salud en Argentina a causa de la presencia
de stas toxinas en el agua potable es muy alto, ya que la mayora de los sistemas de
tratamiento de agua potable, en el pas, no cumplen con las condiciones que la
OMS postula bsicos. La situacin se agrava si consideramos que la cloracin del
agua provoca la lisis celular y la liberacin de las toxinas al agua potable.
TEMA 9. ECOTOXICOLOGA Y CONTAMINACIN ACUTICA
120 1
er
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9-2. ESTUDIO PRELIMINAR DEL CONTENIDO DE METALES Y
MINERALES EN ALGAS DEL ESTRECHO DE MAGALLANES
1
Astorga M. S.,
1
Calisto N. C.,
1
Navarro N.,
2
Guerrero S.
[1] Depto. Cs. Y Rec. Naturales. Facultad de Ciencias Universidad de Magallanes, Punta
Arenas, Chile; [2] Environmental Research Institute, University of Connecticut. USA.
Las macroalgas bioacumulan elevadas concentraciones de metales y mi-
nerales disueltos en el agua de mar, stos pueden ser transferidos a otros
niveles trficos, incluido el hombre, que las utiliza directamente como ali-
mento e indirectamente para la obtencin de aditivos para alimentacin de
peces, aves y otros animales, que luego son consumidos por el hombre, o
son empleadas para la obtencin de ficocoloides ampliamente utilizados en
la industria farmacutica y cosmtica (Encina et al., 1995; Gutirrez et al.,
2003).
La variacin de la concentracin de metales y minerales en las algas uti-
lizadas para alimentacin, puede tener implicaciones positivas o negativas
en trminos de nutricin, muchos metales son esenciales en el metabolismos
humano y su carencia puede provocar efectos crnicos y agudos en el orga-
nismo, por otro lado, la mayora de los metales, sean esenciales o no, son
potencialmente txicos para los organismos cuando las concentraciones
naturales son excedidas (Vasconcelos & Leal, 2001; Demirz et al., 2003)
En el sector de San Juan (5337S; 7059W), ubicado en el Estrecho de
Magallanes se colectaron entre octubre de 2000 y marzo de 2001 muestras
de Adenocystis utricularis, Mazzaella laminaroides, Porphyra columbina y
Enteromorpha sp. Se midieron las concentraciones de metales y minerales
(As, Ag, Cd, Cr, Se, Cu, Sn, Sb, Pb, Al, Ca, Fe, Mg, Mn, Ni, V, Zn, Hg)
empleando ICPMS e ICP-OES en el Laboratorio de Investigaciones Me-
dio Ambientales de la Universidad de Connecticut en Estados Unidos.
Los estudios preliminares muestran que Mg, Ca, Fe y el Al son los ele-
mentos que se encuentran en mayor proporcin en las algas estudiadas,
pero nunca en valores considerados txicos, siendo Porphyra columbina el
alga que contiene menor cantidad de stos.
Metales como Hg, Ag, Sb, Pb fueron detectados en muy bajas concen-
traciones y en numerosos anlisis no fueron detectados.
El bajo contenido de metales txicos encontrado en las algas colectadas
en el Estrecho de Magallanes las hace interesantes para su empleo en pro-
ductos que directa o indirectamente son consumidos por el hombre, en
relacin a las mismas especies encontradas en otras partes del mundo.
121 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-3.MICROCISTINAS PRESENTES EN EL RO DE LA PLATA
ADMINISTRADAS EN DOSIS LETAL PRODUCEN DISRUPCIN
DE LA ARQUITECTURA HEPTICA SIN SIGNOS DE
HEMORRAGIA INTRAHEPTICA.
Claudia Aura,
1
Silvia Massera,
2
Leda Giannuzzi,
2y3
Ricardo Echenique,
4
Martn Caete
2
y Daro Andrinolo
2y3
1
.- Depto. de Patologa, Hospital Gral. San Martn, La Plata;
2
.-

Lab. Toxicologa y
Qumica Legal (Fac. Cs. Exactas, UNLP);
3
.- CIDCA-CONICET, La Plata;
4
.- Div. Cientif.
Ficol. (Fac. Cs. Nat. y Museo, UNLP) - CIC (Prov. Bs. As.).
Las toxinas de cianobacterias (cianotoxinas) son compuestos qumica-
mente diversos que se agrupan segn su modo de accin en hepatotoxinas,
neurotoxinas y dermatotoxinas. Varios gneros de cianobacterias poseen
especies toxgenas y el nmero de reportes de nuevos taxa toxgenos as
como de nuevas toxinas aumenta da a da en la literatura.
Recientemente se ha detectado la presencia de hepatotoxinas del grupo
de las microcystinas en el Ri de la Plata. Estas toxinas son Hepta pptidos
monocclicos, aisladas por vez primera del gnero Microcystis, inhiben
especficamente las Protenas Fosfatasa 1 y 2A produciendo intoxicaciones
que pueden ser agudas o crnicas.
La Hepatitis Txica Aguda asociada con los fenmenos de floraciones de
cianobacterias es ahora reconocida como una Toxicosis Cianobacteriana a
raz de la intoxicacin de 126 personas y la muerte de 50 personas que
estaban siendo hemodializadas en la ciudad brasilera de Caruar, en 1996.
Evento adjudicado a la contaminacin del agua potable con microcistinas
ya que encontraron estas toxinas en hgado de 39 pacientes.
Estas toxinas son promotoras de tumores y de hecho existe una fuerte
correlacin entre cncer primario de hgado y la presencia de cianobacterias
los reservorios de agua que utiliza la poblacin producto una intoxicacin
crnica.
En este trabajo se analizaron mediante diferentes tcnicas histopatolgicas,
hgados de ratones a los que se les administraron dosis letales de microcystinas
ai sladas de floreci mi entos naturales del Ro de la Plata, observndose
disrupcin masiva de la arquitectura lobular y sinusoidal del hgado, dila-
tacin de los vasos hepticos, prdida de hepatocitos y displasia.
A diferencia de lo conocido hasta la fecha sobre la generacin de hemo-
rragia intraheptica por la ruptura de los vasos hepticos producido por la
intoxicacin aguda con microcystinas, nuestros resultados muestran que no
hay cl ul as sanguneas en el espaci o ext ravascul ar y si una severa
vasocongestin.
122 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-4. EVALUACIN DE TOXICIDAD AGUDA DE UNA CEPA DE
MICROCYSTIS AERUGINOSA HALLADA EN LA LOCALIDAD DE
PILA (PROV. DE BS. AS.)
Echenique, Ricardo;
1
Daro Andrinolo;
2y3
Leda Giannuzzi
2y3
y Martn
Caete
2
1
.- Div. Cientf. Ficol., Fac. Cs. Nat. y Museo (UNLP) - CIC (Prov. Bs. As.);
2
.- Fac. Cs.
Exactas (UNLP) y
3
.- CIDCA-CONICET, La Plata.
Si bien mundialmente es conocida la presencia de toxinas producidas
por Cyanobacteria, en Argentina solo recientemente se ha podido determi-
nar la presencia cepas productoras de toxinas.
En junio de 2004 fue localizado en una banquina de la localidad de Pila,
Provincia de Buenos Aires un desarrollo masivo, muy significativo, de algas
planctnicas. Previendo que dicha floracin fuese consecuencia de alguna
Cyanobacteria, por solicitud de la Municipalidad, se llev a cabo la toma
de muestras a fin de determinar el taxn responsable del fenmeno y esti-
mar su peligrosidad y probables riesgos hacia la comunidad.
Los estudios llevados a cabo incluyeron el anlisis microscpico, cualita-
tivo y cuantitativo del fitoplancton, evaluacin de parmetros fsico-qumi-
cos y de toxicidad.
Los anlisis microscpicos determinaron que la floracin era producida
por una cepa de Microcystisaeruginosa. La densidad celular, del mencionado
taxn, varo entre 9.45x10
6
y 124x10
6
clulas por mililitro: El pH fluctu
entre 9,7 y 10.7 y la conductividad elctrica entre 1210 y 1220 S cm
-1
.
La evaluacin de toxicidad, llevada a cabo mediante ensayo ratn result
positiva. Como consecuencia de lo observado se elev una serie de sugeren-
cias a las autoridades municipales a fin de restringir el acceso de pobladores
a la zona afectada y para tratar de reducir e incluso eliminar los focos de
contaminacin que potencian la formacin de floraciones de M. aeruginosa.
Sobre material liofilizado, se realizaron estudios analticos mediante
Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (HPLC). De los mismos se de-
termin la presencia de 95 g de microcystina/gr. De ese total, el 90%
correspondi a microcystina L
123 1
er
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9-5. BIOINDICADORES DE CALIDAD DE AGUA EN LA CUENCA
DEL ARROYO AGUA DEL PEON, RIO CEBALLOS (CORDOBA,
ARGENTINA)
Fabbio, F.; Pierotto, M; Prosperi, C.
Laboratorio de Hidrobiologa, Fac. CEFyN - Univ. Nac. de Crdoba (Argentina) Velez
Sarsfield 299 - (5000) Crdoba - Argentina - cprospe@yahoo.com.ar
Las sustancias contaminantes producen cambios en las variables fsicas y
qumicas del agua. Al ser los productores primarios dependientes de la ca-
lidad del agua, se pueden usar en evaluacin de impacto ambiental como
buenos bioindicadores. Las microalgas son de esencial importancia en las
redes trficas Las Sierras Chicas de Crdoba, que, debido a su geografa
montaosa, presentan numerosos cursos que brindan agua para consumo
humano y actividades recreativas. En el presente trabajo se estudi el
fitoplancton en un arroyo torrencial serrano, con el fin de poder realizar un
primer diagnostico de la calidad de sus aguas. Para ello se eligi el Arroyo
Aguas del Pen, ubicado en la localidad de Ro Ceballos.
Los registros de datos fsico-qumicos y recolecciones de muestras de agua
subsuperficial en recipientes de un litro para el anlisis de fitoplancton se
realizaron con una frecuencia mensual, entre Mayo de 2002 y 2003, esta-
blecindose ocho estaciones de muestreo sobre el cauce principal y afluen-
tes secundarios ms importantes. Con los gneros identificados, se realizaron
anlisis cualitativos y cuantitativos, tanto para la variacin temporal como
para la variacin espacial, y se calcularon: la riqueza, basada en el nmero
de gneros registrados y el ndice de Diversidad de Shannon-Winner.
La Clase Bacillariophyceae fue la mas abundante, con la mayor parte de
las familias en el Orden Pennales. Las Diatomeas en general estuvieron
presentes durante todo el ao, mientras las Clorofceas fueron mas abun-
dantes en primavera y verano. Los parmetros fsico-qumicos del agua (pH,
temperatura, oxgeno disuelto) mostraron que la variacion estacional de la
temperatura tuvo una mayor influencia en la variacin del fitoplancton. En
funcin de todas las variables estudiadas, en especial los indicadores biol-
gicos, y de acuerdo a los estndares internacionales de calidad de agua, se
puede conclur que el agua del Arroyo El Peon varia de limpia a modera-
damente limpia.
124 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-6. BIOENSAYOS REALIZADOS IN SITU CON MICROALGAS
PARA EVALUAR LA CALIDAD DEL AGUA DE SISTEMAS
LTICOS PAMPEANOS
1
Gmez N.,
1
Bauer D.E.,
2
Ruiz L.,
2
Conforti V.
1 Insituto de Limnologa Dr. R. A Ringuelet (CONICET-UNLP), C.C. 712 (1900) La
Plata, Argentina; 2 Dpto. Biodiversidad y Biologa Experimental, FCEN, UBA, Pab. II,
(1428) Buenos Aires , Argentina.
Conocer los alcances de los efectos de la contaminacin sobre la biota es un
desafo y constituye el objetivo de una serie de investigaciones que se realizan
en ros y arroyos de la llanura pampeana. En tal sentido hemos implementado
una alternativa de evaluacin que consisti en la realizacin de bioensayos in
situ para apreciar alteraciones morfolgicas en monocultivos de Lepocinclis
acusy Scenedesmusacutusexpuestos a distintos tipos de contaminacin. Para
ellos se seleccion el A Don Carlos, afluente del Ro de la Plata y localizado
en cercanas de la ciudad de La Plata. Para esta experiencia se seleccionaron
dos sitios de muestreo, uno de ellos expuesto a los efectos de la actividad
hortcola (E1) y el otro a los vertidos domiciliarios y efluentes de la industria
textil y metalrgica (E2). Las cepas empleadas fueron obtenidas de ambien-
tes naturales y cultivadas en laboratorio. Los inculos estuvieron conforma-
dos por 10
2
cl. ml
1
en el caso de E. acusy de 10
4
cl

ml
1
para S. acutus.
Estos fueron dispuestos junto con medio de cultivo en bolsas confeccionadas
ad hoccon membrana de dilisis, las que permitieron el intercambio con el
medio reteniendo las microalgas en su interior. Cuatro bolsas fueron dis-
puestas en cada sitio de muestreo, conservndose en laboratorio los controles.
Despus de tres das de colocadas en el arroyo (25/11 al 28/11/03) fueron
retiradas y su contenido analizado bajo microscopio ptico. Durante la expe-
riencia se midi oxgeno disuelto, temperatura, pH, conductividad, nutrientes
(fosfato, amonio, nitritos y nitratos), DBO
5
, DQO, metales pesados ionizados
y no ionizados (Cr, Cu, Cd, Zn, y Pb). La calidad del agua se deterior hacia
la E2 y los valores de los metales pesados superaron los niveles guas para la
proteccin de la vida acutica en la E1 para el Cr y Cu y en la E2 para Cr, Cu,
Zn y Pb. Las principales modificaciones morfolgicas de los organismos uti-
lizados consistieron en el aumento del volumen celular en ambas especies, el
incremento del nmero de granos de paramilon en L. acusy del tamao de
los pirenoides en S. acutus, sumadas a una marcada decoloracin de los
pigmentos plastidiales en ambos taxones, caractersticas que fueron ms acen-
tuadas en la E2. Los resultados obtenidos demostraron que los bioensayos in
situ y las especies empleadas resultan una herramienta de monitoreo valiosa
para evaluar la interaccin de los microorganismos con distintos grados de
estrs a los que estn sometidos en los sistemas lticos en estudio.
125 1
er
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9-7. EFECTO TXICO DEL PETRLEO CRUDO SOBRE
DUNALIELLA TERTIOLECTA
1
Guerra-Martnez, SL,
1
Martnez-Jernimo F,
3
Ros-Leal E,
2
Olvera-Ramrez R
[1] Lab. Hidrobiologa Experimental, Depto. Zoologa, Escuela Nacional de Ciencias
Biolgicas, IPN, MEXICO; [1] Lab. Fisiologa Vegetal, Depto. Botnica, Escuela Nacional
de Ciencias Biolgicas, Instituto Politcnico Nacional, MXICO; [3] Depto. Biotecnologa
y Bioingeniera, Centro de Estudios Avanzados e Investigacin, IPN, Mxico.
Se evalu la toxicidad del petrleo crudo tipo SEN del Estado de Tabasco,
Mxico; sobre Dunaliella tertiolecta. Los tratamientos se incubaron en con-
diciones de luz continua y temperatura constante. Se compararon diferen-
tes mtodos de exposicin para evaluar su toxicidad: La primera evaluacin
toxicolgica se bas en la Fraccin Soluble en Agua (FSA). La segunda, en la
adsorcin del petrleo crudo sobre caoln. En la tercera se evalu la disper-
sin del petrleo en el medio de cultivo mediante sonicacin. El anlisis de
hidrocarburos se realiz por Head-space y microextraccin en fase slida
(HS-SPME). Como respuestas se evalu la densidad celular, la concentra-
cin de clorofila a, y el contenido de protenas y carotenos, en exposiciones
de 7 das. Es importante sealar que la toxicidad del petrleo crudo esta en
relacin con su viscosidad y que la muestra original tuvo una viscosidad de
3.57 cP. La FSA del petrleo est constituida principalmente por Tolueno y
Xileno, (91.85% y 8.14% respectivamente) y hubo prdida de hidrocar-
buros voltiles entre 40 y 50% durante toda la prueba. Se determinaron
diferencias significativas en las respuestas evaluadas para las tres formas de
exposicin (P= 0.05). Los valores de Concentracin Efectiva Media (CE
50
)
fueron de 14.4 g/L para la FSA, 0.18 g/L para el petrleo adsorbido en
caoln, y de 0.14 g/L para la muestra dispersa por sonicacin. La densidad
celular aument entre 10 y 20% para las menores concentraciones de pe-
trleo (0.05-0.07 g/L), sin embargo el contenido de clorofila a correspon-
diente estuvo por debajo del control, adems de que se present la formacin
de qui stes y cl ul as si n pi gmentaci n. El conteni do de carotenos se
increment casi el doble en las menores concentraciones de petrleo y dis-
minuy para las mas altas. Independientemente de la forma de contacto de
la microalga con el petrleo, hubo efectos inhibitorios sobre su crecimiento
y contenido de clorofila a. De los tres mtodos, la exposicin total de petr-
leo crudo mediante su adsorcin en una arcilla inerte como el caoln, parece
ser la ms adecuada para la evaluacin toxicolgica de mezclas complejas y
de baja hidrosolubilidad como el petrleo crudo.
126 1
er
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9-8. ENSAYOS DE REMOCIN DE ALGAS NOCIVAS EN
PLANTAS PILOTO EN EL DIQUE PASO DE LAS PIEDRAS
(BUENOS AIRES, ARGENTINA).
JosM. Guerrero;
1,2
Silvia E. Sala;
2
Claudia Intartaglia
2
& LuisO. Lombardi
1
1
Divisin Laboratorio, Autoridad del Agua de la Provincia de Buenos Aires;
2
Divisin
Cientfica Ficologa, Fac. Cs. Nat. y Museo, UNLP
El Embalse Paso de las Piedras abastece de agua potable a las ciudades de
Baha Blanca (270,000 hab.) y Punta Alta (56,000 hab.). Debido a los
recurrentes perjuicios ocasionados por el desarrollo de densas poblaciones
de algas planctnicas, y ante la necesidad de optimizar los procesos de
potabilizacin en uso, se realizaron ensayos a escala piloto para evaluar la
eficiencia de remocin algal de distintos procesos de tratamiento alternati-
vos: flotacin, decantacin dinmica y microtamizado. En los tres casos el
proceso incluy una segunda etapa de filtracin a travs de filtros de arena
convencionales. Las eficiencias de remocin algal de cada tipo de trata-
miento se evaluaron en base a la disminucin de la biomasa (como clorofila
a) y de la abundancia de las especies ms importantes en el agua de salida
en cada etapa del proceso con respecto a aquellas medidas en el agua de
entrada o agua cruda. Se utilizaron principalmente como variables la dosis
y combinacin de coagulantes utilizados y la composicin y granulometra
de los mantos filtrantes.
Las eficiencias de remocin de biomasa algal en la primera etapa de cada
tratamiento fueron, en promedio, mayores en la flotacin (70-90 %) que
en la decantacin (50-80 %) y que en el microtamizado (40-80 %), siendo
este ltimo el que present los resultados ms variables. Sin embargo, an
cuando en los tres tipos de tratamiento las mximas eficiencias finales fue-
ron similares (90-97 %), los dos primeros requirieron, comparativamente,
dosis ms altas de coagulantes. La eficiencia de eliminacin de las especies
nocivas fue muy alta (90-100 %) en el caso de organismos de gran tamao,
tanto de los unicelulares como de los coloniales constituidos por clulas
con cubiertas rgidas. Especies ms frgiles, como las colonias susceptibles
de fragmentarse en unidades ms pequeas, y las formas filamentosas tuvie-
ron eficiencias de remocin ms irregulares (10-90 %).
Los mejores resultados se obtuvieron utilizando como coagulantes un
polielectrolito catinico en combinacin con dosis medias a altas de sulfato
de aluminio. Dosis muy altas de coagulantes producen eficiencias de remo-
cin mayores pero acortan notoriamente las carreras de filtracin. Los man-
tos filtrantes mixtos (de arena y antracita) produjeron las mayores eficiencias
finales, una mayor duracin de la carrera de filtracin y una mejor distribu-
cin de depsitos especficos en el filtro.
127 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-9. EVALUACIN DE LA TOXICIDAD DEL
HEXACLOROBENCENO EN CULTIVOS DE CHLORELLA
1,2
Jurez AB y
2
Ros de Molina MC
[1] Dpto. Biodiversidad y Biologa Experimental, [2] Dpto. Qumica Biolgica. Fac.
Ciencias Exactas y Naturales, UBA.
Un importante problema actual es la contaminacin de los cuerpos de
agua por compuestos orgnicos extremadamente txicos y altamente per-
sistentes, como los hidrocarburos aromticos polihalogenados (HAPs). En-
tre estos compuestos, el hexaclorobenceno (HCB), es uno de los 12 COPs
(Contaminantes Orgnicos Persistentes) catalogados en el Convenio de
Estocolmo, vigente desde el 17/05/04. Este convenio fue firmado por 50
pases que se comprometieron a eliminar su produccin y reducir su emi-
sin al ambiente. Sin embargo, dada su alta persistencia, an existen nive-
l es det ect abl es de l os mi smos, que i mpact an sobre l as mi croal gas
fitoplanctnicas y dems comunidades acuticas.
En el presente trabajo se estudi el efecto del HCB sobre cultivos de una
microalga verde fitoplanctnica (Chlorella kessleri), analizando parmetros
de crecimiento y marcadores metablicos, luego de distintos tiempos de
exposicin. Este xenobitico, produjo una cada en la tasa de crecimiento a
los tres das de exposicin y una posterior activacin de la misma y de la
produccin de pigmentos (clorofilas a y b y carotenos).
Como parmetro de peroxidacin lipdica, se determin el contenido de
malndialdehido (MDA), encontrando que se produjo un aumento sig-
nificativo por exposicin al txico durante seis das, con una posterior ten-
dencia a la disminucin. El aumento de los niveles de MDA fue paralelo al
aumento en los niveles de produccin de carotenos, lo cual indicara que
estos ltimos estaran involucrados en la respuesta antioxidante de C. kessleri.
Como bi omarcador de dao met abl i co, se mi di l a act i vi dad
Uroporfi ri ngeno decarboxi l asa (UroD, qui nta enzi ma del cami no
metablico del hemo y de las clorofilas), encontrando que se produjo una
disminucin del 75 % de la misma, respecto del control, como consecuen-
cia del tratamiento con HCB.
Los resultados obtenidos indicaran que la actividad UroD es un buen
marcador de dao metablico causado por este tipo de xenobitico. Sugie-
ren tambin, la participacin de los carotenos en la respuesta antioxidante
frente al estrs oxidativo desencadenado por el HCB.
128 1
er
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9-10. LIMITACIN DE NUTRIENTES EN ANKISTRODESMUS
FALCATUS EXPUESTA A LAS AGUAS DE 9 EMBALSES DE LA
CUENCA DEL RO LERMA, MXICO
1
Eugenia Lpez-Lpez,
1
J. Elas Sedeo-Daz,
2
Liliana Favari Perozzi.
[1] Laboratorio de Ictiologa y Limnologa/Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, IPN,
Mxico, [2] Seccin Externa de Farmacologa/ Centro de Investigacin y de Estudios
Avanzados del IPN, Mxico.
Mxico cuenta con numerosas cuencas hidrolgicas que irrigan el terri-
torio nacional. La cuenca Lerma-Santiago es una de las ms importantes, ya
que drena la meseta central del pas, en la cual se asienta casi el 20% de la
poblacin nacional y cuenta con importantes centros urbanos e industria-
les, as como una zona agrcola muy productiva. Dadas las demandas del
agua para los diferentes usos, se han construido numerosos embalses que
almacenan el recurso durante la poca de lluvias y lo dejan disponible para
el resto del ao. Cada embalse tiene caractersticas propias tales como su
morfometra, su altitud y ubicacin dentro de la cuenca, as como el rea de
captacin que los rodea, influyendo estos factores en la productividad de
cada uno. El objetivo del presente fue valorar la limitacin de nutrientes
durante la poca de estiaje en nueve embalses de esta cuenca a travs de
bioensayos con Ankistrodesmusfalcatusutilizando muestras de agua de cada
embalse y la adicin de nutrientes (N y P), con un control sin adicin de
stos; el fotoperodo fue de 12/12 horas de iluminacin/oscuridad y una
duracin de 168 hrs. La cintica de crecimiento se sigui cada 24 horas y
las lecturas de absorbancia se convirtieron a biomasa en peso seco. Se cons-
truyeron las grficas de crecimiento logstico y se determinaron los parmetros
de la ecuacin. Los resultados sealan que del universo de embalses estu-
diado, dos de stos presentan limitacin por fsforo, y el resto est limitado
por nitrgeno. Las diferencias en cuanto a limitacin estn relacionadas
con los factores antes sealados, carga de nutrientes por los tributarios,
acarreo alctono a travs de lixiviados del rea de captacin, entre los cuales
se manifiestan las descargas difusas de las zonas agrcolas, as como la in-
fluencia de descargas de aguas residuales directas. La retroalimenctacin de
este estudio con el elenco fitoplanctnico de cada embalse permite prever la
probabilidad de que se presenten proliferaciones masivas de fitoplancton
indeseable y los efectos de eutrofizacin que los acompaan.
129 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-11. EMPLEO DE MICROALGAS EN LA EVALUACIN DEL
IMPACTO PRODUCIDO POR UN DERRAME DE PETRLEO
EN LA COSTA ARGENTINA DEL RO DE LA PLATA.
1
Licursi M.,
1
Bauer D. E.,
1
Hualde P. R.,
1
Gmez N.
[1] Instituto de Limnologa Dr. Ral A. Ringuelet CONICET - UNLP.
Los derrames de petrleo conllevan un alto riesgo ecolgico por sus conse-
cuencias a corto y largo plazo. El presente trabajo muestra los resultados
obtenidos en la evaluacin del impacto de un derrame de petrleo sobre las
microalgas que integran el fitoplancton y los biofilms que recubren sustratos
naturales, en una zona costera del Ro de la Plata. La zona afectada est
emplazada dentro del sector de agua dulce de la unidad morfolgica cono-
cida como Franja Costera Sur. Durante los tres aos subsiguientes al derra-
me se realizaron cinco campaas de muestreo con la finalidad de apreciar
los cambios en la biota analizada. Para este propsito se extrajeron muestras
de fitoplancton y se removi el biofilm desarrollado sobre Scirpuscalifornicus
(Mey.) Steud en ocho sitios de muestreo a lo largo de 20 km de la costa.
Asimismo se realizaron bioensayos con Selenastrum capricornutum Printz
utilizando el agua de dos de los sitios ms afectados por el derrame de
petroleo. Para el anlisis de la informacin obtenida se emplearon tcnicas
multivariadas y se estim el porcentaje de similitud entre el sitio de refe-
rencia y los sitios afectados. Los resultados obtenidos en los anlisis de com-
ponentes principales, generados a partir de la densidad, diversidad especfica
y estado del hbitat, permitieron obtener una sntesis de la evolucin tem-
poral del fitoplancton y los biofilms. As se advirti que la misma fue dife-
rente para ambos; si bien la calidad del agua fue un factor decisivo en la
recuperacin de la estructura comunitaria, se observ que en el caso de los
biofilms sta fue ms lenta debido a que adems se vieron afectados por el
deterioro de los soportes naturales. En ambos casos la velocidad de recupe-
racin estuvo estrechamente relacionada con la impregnacin del sedimen-
to con hidrocarburos y el tiempo de residencia del agua. Como consecuencia
de esto se advirti slo en algunos sitios de muestreo la tendencia a adquirir
las caractersticas de la estacin de referencia.
130 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-12. EFECTOS DEL COBRE, CADMIO Y ZINC SOBRE EL
CRECIMIENTO Y LA MORFOLOGA DE CUATRO CEPAS DE
ALGAS VERDES AISLADAS DE UN RO CONTAMINADO DE LA
PCIA. DE BUENOS AIRES (ARGENTINA).
Magdaleno, A.; Wenzel, M.T.; Vlez, C.G. y Tell, H.G.
Depto. de Biodiversidad y Biologa Experimental. Facultad de Cs. Exactas y Naturales,
UBA. Buenos Aires.
Se aislaron cuatro cepas de algas verdes (Orden Chlorococcales) del ro
Matanza-Riachuelo (Pcia. de Buenos Aires) y se cultivaron en medio mineral
BBM. Los cultivos se purificaron hasta obtenerlos axnicos y se identificaron
las cepas como Scenedesmusacuminatus, Ankistrodesmusfusiformis, Chlorella
ellipsoidea y Monorraphidium contortum. Se realizaron bioensayos de toxici-
dad con los metales cobre, cadmio y zinc, utilizando inculos de 100.000 a
500.000 clulas.ml
-1
; los frascos se mantuvieron en agitacin continua du-
rante 7 das, a una intensidad de luz de 18 E.m
-2
.s
-1
. Al finalizar los ensayos
se realizaron los recuentos celulares y se observaron las variaciones morfolgicas.
Con los resultados de densidad celular se calcularon las CE
50
mediante el
anlisis Probit. Se analiz, adems, la dinmica de estas cepas en su ambiente
natural por medio de la recoleccin mensual de muestras de fitoplancton
para anlisis cuantitativos, entre noviembre de 1996 y noviembre de 1997,
en dos estaciones de muestreo (Ruta 3 y Autopista Ricchieri). Se realizaron
determinaciones fsicas y qumicas del agua (concentraciones de nutrientes,
DBO, DQO, y metales cobre, cadmio y zinc).
Las CE
50
del cobre, cadmio y cinc para C. ellipsoidea fueron de 0,489; 0,429,
y 0,250 mg.l
-1
, respectivamente; para A. fusiformisfueron de 0,072; 0,141 y
0,199 mg.l
-1
; para S. acuminatusfueron de 0,170; 0,398 y 0,395 mg.l
-1
, y para
M. contortum, 0,164; 0,191 y 0,381 mg.l
-1
, respectivamente. En varias oportu-
nidades se registraron valores txicos de alguno de los metales en el agua del ro
y alta densidad poblacional de las especies, probablemente debido a agentes
orgnicos naturales complejantes (se obtuvieron valores elevados de DBO y
DQO). En algunos meses, las densidades poblacionales fueron bajas, debido a
la presencia de concentraciones txicas de varios metales pesados actuando si-
multneamente, debido a sus posibles efectos sinergsticos.
Se observaron cambios morfolgicos en S. acuminatusa 0,300 mg.l
-1
de co-
bre (clulas plasmolizadas con daos en los cloroplastos); 0,500 mg.l
-1
de cadmio
(clulas redondeadas con los extremos romos), y 0,500 mg.l
-1
de zinc (cenobios
hijos de gran tamao en el interior de la clula madre). En C. ellipsoidea mu-
chas clulas permanecieron unidas a travs de sus paredes celulares engrosadas
a 0,250 mg.l
-1
de cobre y 0,500 mg.l
-1
de zinc. No se observaron cambios
morfolgicos en A. fusiformis y M. contortumal microscopio ptico.
131 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-13. CALIDAD DE AGUA EN ALGUNOS EMBALSES DEL
CENTRO DE ARGENTINA
Prosperi, C.;
1
Rodriguez, C.;
2
Mancini, M.;
2
Pierotto, M.;
1
Daga, C.;
1
Gonella, M.;
1
Rincon, C.
1
(1) Lab. Hidrobiologa, Fac. CEFyN - Univ. Nac. de Crdoba. Velez Sarsfield 299 - (5000)
Crdoba - Argentina - cprospe@yahoo.com.ar
(2) Ct. Ecologa, Fac Agronoma y Veterinaria - Univ. Nac. de Rio Cuarto
El principal objetivo de este trabajo fue la evaluacin de la calidad de
agua y el estado trfico de algunos embalses de la Provincia, entre ellos:
San Roque, La Quebrada, La Via y Rio Tercero; se establecieron entre
cinco y ocho estaciones de muestreo, en las que se hicieron mediciones de
pH, temperatura, oxgeno disuelto, nitrgeno y fsforo totales. Adems de
esto se realizaron muestreos de bacterias coliformes y de fitoplancton a una
profundidad subsuperficial, durante dos a cinco aos en cada uno de estos
lugares.
En general, casi todas las mediciones relacionadas con la qumica del
agua oscilaron dentro de los lmites admisibles por las normativas ambien-
tales provinciales. Las bacterias coliformes se mantuvieron en niveles bajos
en casi todas las evaluaciones, con excepciones temporales durante los me-
ses clidos en San Roque. La diversidad de algas planctnicas fue muy va-
riable segn la poca del ao, con los mayores niveles de clorofila a en los
meses de primavera y verano. Esto se explicara por la variacin en el
fotoperodo, debida a la estacionalidad, ya que la temperatura del agua no
present cambios que afectaran el desarrollo del fitoplancton. En perodos
de menor concentracin de nutrientes la especie dominante en todos los
embalses fue Ceratium hirundinella (Dinophyceae), mientras que a mayo-
res concentraciones de nutrientes se encontr Microcystisaeruginosa y espe-
cies del gnero Anabaena, tales como A. variabilis, A. flos-aquaey A. spiroides
(Cyanophyceae). Durante el estudio fueron frecuentes las floraciones con
olor caracterstico y la liberacin de toxinas, mayoritariamente microcistinas.
Las Bacillariofceas, por su parte, estuvioeron presentes casi todo ao, mien-
tras que las Clorofceas solamente en los lugares y momentos con menor
concentracin de nutrientes. De acuerdo a los bioindicadores utilizados, y
a la concentraci n de clorofi la, los embalses vari aron anualmente de
mesotrficos a eutrficos, con una marcada tendencia a la hipertrofia en el
caso del San Roque.
132 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-14.ESTUDIOS DE ESTRES PROVOCADO POR UN METAL
PESADO EN CELULAS DE EUGLENA GRACILIS CRECIDAS EN
CONDICIONES AUTOTROFICAS Y HETEROTROFICAS.
RocchettaIara,
1
Marcia Mazzuca,
3
Ruiz Laura, Vilma Balzaretti,
3
Visitacin Conforti,
1
Mara del Carmen Ros de Molina.
2
1
Departamento de Biodiversidad y Biologa Experimental,
2
Departamento de Qumica
Biolgica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Pab. II,
Ciudad Universitaria, 1428, Buenos Aires, Argentina.
3
Departamento de Qumica, F.C.N.,
San Juan Bosco, Universidad de Patagonia, Comodoro Rivadavia, Chubut, Argentina.
La particular caracterstica de Euglena gracilis, de crecer tanto de forma
autotrfica como heterotrfica, hace que sea posible estudiar con este nico
organismo el efecto de un contaminante bajo ambas condiciones. En diver-
sas condiciones de estrs, usando como contaminante diferentes concentra-
ciones de cromo hexavalente, esta especie ha mostrado cambios tanto
metablicos como morfolgicos. Para el desarrollo de este trabajo se utiliz
una cepa proveniente de un ro altamente contaminado de la provincia de
Buenos Aires, Ro Matanza, Argentina, (cepa MAT) y su mutante no
fotosinttica, blanqueada mediante la utilizacin de estreptomicina (cepa
BMATEsL). A travs del anlisis por absorcin atmica se comprob la
incorporacin del metal a la clula en funcin de la concentracin utiliza-
da. El crecimiento celular de ambas cepas disminuy notoriamente junto
con el contenido total de lpidos, y el contenido de clorofila en aquellas
clulas fotosintticas. Ambas cepas mostraron un aumento del contenido
de protenas y de azcares totales en funcin de la concentracin de cromo
utilizada. Se observaron altos niveles de TBARS inducidos por la concen-
tracin ms alta del metal, siendo ms importantes en las fotosintticas, lo
cual estara indicando la existencia de eventos de peroxidacin lipdica.
Para un anlisis lipdico ms profundo, se determin la composicin de ci-
dos grasos en ambas cepas utilizando tcnicas de cromatografa gaseosa, con lo
cual se pudo evidenciar una composicin muy diferente en los cultivos contro-
les de ambas cepas. Las clulas fotosintticas presentaron una mayor propor-
cin de cidos grasos poliinsaturados (PUFAs), especialmente de tipo w3 como
el cido linolnico y el cido eicosapentaenoico (EPA). En las heterotrficas
mostraron una mayor proporcin de cidos grasos saturados (SAFAs) en com-
paracin con los PUFAs, a pesar de ser el cido araquidnico (PUFA tipo w6) el
de mayor porcentaje. El tratamiento con la concentracin ms alta de cromo
provoc, en la cepa blanqueada, un incremento en el contenido de los PUFAs
de tipo w6 (principalmente el cido araquidnico) junto con la diminucin del
contenido de SAFAs (principalmente el cido mirstico). Las clulas fotosintticas
presentaron un aumento en el contenido de PUFAs con la concentracin media
de cromo, mientras que con la ms alta se produjo una disminucin tanto de
133 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
PUFAs como de SAFAs. Estos ltimos resultados, ms los mayores valores obte-
nidos de TBARS, estaran demostrando que la presencia de cloroplastos podra
producir una mayor sensibilidad de las clulas crecidas en condiciones autotrficas,
ya que claramente el dao lipdico fue mayor.
9-15. IDENTIFICACIN DE DIFERENTES MECANISMOS
DETOXIFICANTES DE ESTRS OXIDATIVO EN TRES CEPAS
DE CHLAMYDOMONAS REINHARDTII
Sabatini, S.E., Sztrum, A.A.,
1
Rodrguez, M.C.
[1] Departamento de Biodiversidad y Biologa Experimental y CIHIDECAR (CONICET-
Depto de Qumica Orgnica), Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de
Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina.
La exposicin de cultivos algales a concentraciones subletales de cobre
provoca estrs oxidativo. El objetivo del presente trabajo fue determinar la
variacin de la composicin de pigmentos, la presencia de metabolitos
antioxidantes y/o quelantes de metales inducidos por la exposicin al cobre
en la cepa salvaj e 4 A
+
y las mutantes plei otrpi cas cur1 y cur9 de
Chlamydomonas reinhardtii Dangeard.
Las cepas utilizadas fueron previamente seleccionadas por bioensayos de
dilucin en placa. La incubacin en medio lquido se prolong durante 72
horas, partiendo de un inculo inicial de 7 x 10
6
clulas en cada una de las
tres rplicas en medio control TAP (con acetato como fuente de carbono) y
en los tratamientos TAP con el agregado de 4 x 10
-5
M de CuCl
2
.2H
2
O.
Los cultivos se incubaron bajo condiciones de agitacin e iluminacin con-
tinua no saturante. La cuantificacin de la concentracin del catin libre
Cu
2+
se estim mediante el programa MINEQL
+
.
La mayor susceptibilidad al efecto del metal en la cepa salvaje se manifes-
t por un incremento de ca. 3 veces del contenido de fenoles y la disminu-
cin entre 1 y 1.5 veces de la relacin clorofila a / clorofila b con respecto a
las cepas mutantes cobre resistentes, indicando una mayor alteracin en los
fotosistemas. Por otro lado, en la mutante cur1 se registr un elevado conte-
nido de carotenos (entre 1.5 y 2 veces ms respecto de las otras cepas) que
actuaran como mecanismo antioxidante. Los cultivos expuestos al metal
exhibieron niveles ms elevados de cido dehidroascrbico (DHAA), lle-
gando en algunos casos hasta superar 20 veces los valores de los controles
respectivos, indicando un probable incremento de la actividad de la enzima
detoxificante ascorbato peroxidasa (APX). Las observaciones preliminares al
microscopio electrnico de transmisin mostraron vacuolas con contenido
electrnicamente denso en las clulas tratadas, presumiblemente debido a
la presencia de fitoquelatinas.
134 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
9-16. INFLUENCIA DEL USO DEL SUELO EN LA CALIDAD DEL
AGUA Y LAS ASOCIACIONES DE ALGAS EN EMBALSES DE LA
MESA CENTRAL DE MXICO
1
Jacinto Elas Sedeo-Daz,
2
Eugenia Lpez-Lpez,
2
Liliana Favari Perozzi.
[1] Laboratorio de Ictiologa y Limnologa/Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, IPN,
Mxico, [2] Seccin Externa de Farmacologa/ Centro de Investigacin y de Estudios
Avanzados del IPN, Mxico.
La cuenca del Ro Lerma es el sistema hidrolgico ms importante de la
mesa Central de Mxico, alberga el 18.5% de la poblacin total del pas en una
superficie de aproximadamente 2% del territorio nacional. La cuenca est do-
minada por usos del suelo que comprenden la agricultura, la industria, forestal,
asentamientos urbanos y rurales, as como tambin, vegetacin natural. El re-
curso hdrico se administra a travs de numerosos embalses para cubrir las
demandas del mismo. En este trabajo se analiza el impacto de las actividades
antropognicas sobre la calidad del agua y la composicin de las asociaciones de
micro algas en 10 embalses de la cuenca del ro Lerma. Se evaluaron dos pocas
del ao (estiaje y lluvias), se tomaron muestras de agua y de fitoplancton en la
zona epilimntica de cada embalse y la calidad del agua se estim a travs del
ndice de calidad del agua (ICA) de Dinius (1987). Se determin el elenco
fitoplanctnico y se cuantific su densidad. Los embalses que reciben influen-
cia de las zonas con vegetacin natural, forestal y/o agrcola presentaron califica-
ciones de ICA que oscilan entre 67 y 77 (los ms altos). La composicin de
fitoplancton de estos embalses est dominada por cloroficeas (Pediastrumsp,
Scenedesmussp) y bacilarioficeas (Navicula sp, Nitzschia sp). Los embalses con
ICA entre 60 y 70 que estn sujetos a la influencia de la agricultura, urbano y
en menor grado industrial, estn dominados por cianobacterias (Microcystis
aeruginosa, Anabaena variabilis), bacilarioficeas (Melosira granulata y Synedra
ulna) y dinoficeas (Ceratiumhirundinella). Finalmente, los embalses con ICA
con valores entre 59 a 65 estn dominados principalmente por cianobacterias
(Microcystisaeruginosa), con proliferaciones prolongadas, en stos, el uso del
suelo adyacente tiene influencia urbana y agrcola. Sin embargo, uno de ellos
recibe aguas provenientes de un corredor industrial. Los resultados indican que
el uso de suelo industrial y urbano ejercen un impacto sobre el ICA, al cual se
asocian grupos de fitoplancton indeseables. El uso de suelo agrcola, urbano e
industrial, conlleva el acarreo de lixiviados de fertilizantes, plaguicidas y descar-
gas municipales, influye en la presencia de grupos de fitoplancton indicadores
de eutrofa. Los embalses que tienen influencia de vegetacin natural y forestal
principalmente estn asociados a ICA con calificaciones altas y grupos de
fitoplancton indicadores de oligotrofia. Por lo cual, el uso de suelo influye sobre
el estado trfico de los embalses.
135 1
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9-17. DISEO DE UNA RED DE MONITOREO DE LA CALIDAD
DEL AGUA Y EL ESTADO ECOLGICO DE LAS CUENCAS DE
LOS ROS GUADALQUIVIR, GUADALETE Y BARBATE (ESPAA).
1
Toja Santillana, J.,
2
Casco, M.A.,
2
Sala, S.E.,
1
Martn Farfn, G.,
1
Reyes
Brbara, I.,
1
Ogalla Garca, V.,
1
Fernndez-Mensaque, P.C.
[1] Departamento de Biologa Vegetal y Ecologa. Facultad de Biologa, US, Sevilla. ; [2]
Divisin Cientfica Ficologa. Facultad de Ciencias Naturales y Museo, UNLP, La Plata.
La aprobacin de la Directiva 60/2000 de la Unin Europea, supone un
cambio radical en el seguimiento de la calidad de las aguas. La incorpora-
cin de indicadores biticos y abiticos para ecorregionalizar las masas de
agua permitir determinar en cada una de las regiones los sistemas con
buena calidad ecolgica. Estos servirn de referencia para establecer las
medidas a abordar con el propsito de recuperar aquellos sitios que estn
alterados. Si bien la Directiva es precisa en cuanto a los objetivos a alcanzar,
es amplia en cuanto a las comunidades a analizar y no especifica la metodo-
loga a seguir.
Con el objeto de conocer el estado ecolgico y la calidad del agua y de
disear una red de monitoreo para el seguimiento de su evolucin en el
tiempo, se establecieron a priori las distintas ecoregiones de las cuencas en
base a las caractersticas climticas,geolgicas e hidrolgicas y a los usos del
suelo. Dentro de cada una de ellas se eligieron sitios de muestreo ubicados
en zonas de cabecera,, zonas sin pertubacin aparente y zonas afectadas por
algn tipo de perturbacin (140 tramos en total). En la medida de lo posi-
ble se utilizaron los puntos en los que la Confederain Hidrogrfica del
Guadalquivir toma peridicamente muestras para anlisis fsicoqumicos.
La calidad del agua se evaluar en base a ndices biticos utilizando las
diatomeas epilticas y el estado ecolgico se determinar a partir de las algas
bentnicas y perifticas presentes en muestras de cada comunidad (inclu-
yendo cuando sea necesario, el empleo de sustratos artificiales) y en mues-
tras integradas multihbitat. La evaluacin del habitat se realizar mediante
el uso de planillas de campo (adaptadas de los protocolos de USEPA) que
recogen informacin cuantificada sobre la estructura general del tramo y
su nivel de conservacin.
La informacin algal obtenida ser en trminos de composicin especfi-
ca, abundacia y biomasa (por recuentos, concentracin de clorofila y PSLC).
Adems de sus resultados aplicados, este proyecto generar un inventa-
rio de las algas de la regin, una coleccin y un banco de datos que no slo
servirn de herramienta de trabajo para los profesionales que hagan el futu-
ro seguimiento de las estaciones de control sino que ampliar el conoci-
miento de la ficoflora ibrica.
136 1
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I SBN N 987-1130-32-5
9-18.PRESENCIA DE MicrocystisY MICROCISTINAS EN EL
EMBALSE LOS MOLINOS, CRDOBA.
Raquel Bazn, Mara Valeria Am, Andrs Rodrguez, Daniel A.
Wunderlin y Fanny Busso
1
Instituto Superior de Recursos Hdricos Universidad Nacional de Crdoba.
1
Empresa Aguas Cordobesas SA. Email:rbazan@efn.uncor.edu
Uno de los tantos aspectos negativos de la eutroficacin es la aparicin de
floraciones de cianobacterias, cuyas toxinas producen efectos sobre la salud hu-
mana, los animales domsticos, el ganado y sobre los ecosistemas acuticos en
general. Cuando los bloomsde algas se desarrollan en cuerpos de agua utilizados
como fuentes de agua para consumo y con fines recreativos, ellos representan
un peligro inminente para la salud. Adems de su toxicidad potencial, dichos
bloomsproducen un deterioro general de la calidad del agua, afectando el valor
de la misma por reduccin de la transparencia, formacin de espumas, olores
desagradables producidos por la descomposicin de esa biomasa y la liberacin
de productos voltiles como geosmina y metilisoborneol, disminucin del ox-
geno disuelto, etc. Adems, dichos bloomspueden provocar la obturacin de
filtros en las plantas potabilizadoras y generar malos olores y sabores en el agua
tratada para consumo humano. El embalse Los Molinos es la segunda fuente
de abastecimiento de agua para consumo de la ciudad de Crdoba, y ha presen-
tado durante el ltimo ao un predominio de cianobacterias.
El pri nci pal obj eti vo de este trabaj o fue eval uar l a presenci a de
cianobacterias, y sus correspondientes toxinas, junto con un estudio sobre
la evolucin del proceso de eutroficacin del embalse.
Para concretar este objetivo, se realizaron campaas mensuales de muestreo a
partir del ao 2001. De entre las muestas colectadas hasta el presente se analiza-
ron 14 muestras de cianobacterias, correspondientes a floraciones observadas en
los meses de enero a julio de 2004. En estas muestras se identificaron dos varieda-
des de microcistinas: MC-LR y MC-RR. El anlisis se realiz sobre los extractos
de cianobacterias utilizando HPLC. Se observ la presencia de microcistinas en el
100% de los bloomsestudiados. Del anlisis de resultados se evidencia que MC-
RR fue la toxina que apareci con menor frecuencia, pero en mayores concentra-
ciones que MC-LR, especialmente en las muestras recogidas durante el verano.
La concentracin de MC total encontrada vari entre 7 y 736 mg/g de cianobacteria
liofilizada. Estos valores son similares a los reportados en lagos y embalses de otros
pases como Canad y Japn, y del mismo orden que los reportados por Am
(2003) para el embalse San Roque (Crdoba, Argentina).
Los resultados son importantes ya que no existen antecedentes sobre pre-
sencia de microcistinas en el embalse Los Molinos, el cual es la fuente de
abastecimiento para la zona sur-este de la ciudad de Crdoba.
137 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
10-1. UTILIZACION DE FERTILIZANTES AGRCOLAS EN EL
CULTIVO DE GAMETOFITOS DE GIGARTINA SKOTTSBERGII
(RHODOPHYTA, GIGARTINALES)
BAJO CONDICIONES DE ORATORIO.
Mansilla A.
1
, M. Palacios
1
& J. Plana
2
2
Dpto. de Ciencias y Rec. Naturales, Facultad de Ciencias, Universidad de Magallanes,
Punta Arenas, Chile. Casilla 113-D, andres.mansilla@umag.cl.
3
Programa de Magster, Facultad de Ciencias, Universidad de Magallanes, Punta Arenas,
Chile. jplana@aoniken.fc.umag.cl
La presente investigacin tiene por objetivo evaluar el efecto de fertili-
zantes de tipo agrcola en el crecimiento de las fases iniciales de Gigartina
skottsbergii. Para los experimentos fueron utilizaron cinco tratamientos (Con-
trol, Provasoli, Bayfolan, Superfosfato triple y Urea) con tres replicas cada
uno. Las condiciones de cultivo fueron: intensidad luminosa de 40 Wcm
-
2
, fotoperodo 12:12 y temperatura promedio de 8 2 C, y recambio de
medio semanal. Los cultivos fueron monitoreados cada siete das utilizando
un sistema integrado de microscopia y un software analizador de imgenes,
obtenindose mediciones de dimetros de discos. Tanto el tratamiento Con-
trol como el que contena Urea como medio de cultivo mostraron efectos
inhibitorios en el crecimiento, provocando a los 60 y 53 das de cultivo
respectivamente la mortalidad de la totalidad de los germling. Los trata-
miento que utilizaron Bayfolan o Provasoli como medio de cultivo, resulta-
ron exitosos en trminos de crecimiento obtenindose al cabo 82 das de
cultivo dimetros promedios de 381,9 55 y 377,9 49,9 respectivamen-
te, en comparacin con el crecimiento obtenido con los tratamientos con
Superfosfato (88,4 16,3) Control (77,6 9,9) y Urea (70,1 10,9).
TEMA 10. FISIOLOGA DE LOS CULTIVOS ALGALES
138 1
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I SBN N 987-1130-32-5
10-2. CRECIMIENTO AUTO- Y MIXOTRFICO Y
CAROTENOGNESIS NO-INDUCIDA DE CUATRO CEPAS
CHILENAS DE HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS FLOTOW
(CHLOROPHYCEAE)
BAJO CONDICIONES CONTROLADAS DE LABORATORIO.
Gonzlez MA, Cifuentes AS, Gmez PI.
Departamento de Botnica/ Universidad de Concepcin, Concepcin, Chile.
La microalga unicelular verde Haematococcuspluvialisse cultiva masiva-
mente como fuente de astaxantina, un cetocarotenoide de alto valor comer-
cial utilizado como pigmento en la industria acucola y avcola y como
antioxidante en el rea de los alimentos saludables. El objetivo de este estu-
dio fue estimar el crecimiento y la carotenognesis de 4 cepas de H. pluvialis
recolectadas de diferentes microhabitats en dos regiones geogrficas de Chile.
Para ello, las cuatro cepas se hicieron crecer durante 2 semanas bajo condi-
ciones auto- (en medio Bristol) y mixotrficas (en medio Bristol con adi-
cin de acetato de sodio: 2mM y 10mM) a dos densidades de flujo fotnico
(DFF): 20 y 85 mol m
-2
s
-1
. Los carotenoides totales producidos por el
envejecimiento de los cultivos se estimaron en fase tarda de crecimiento
(da 45). Las cepas que exhibieron las tasas mximas de crecimiento ms
altas fueron CONC-021 y CONC-022; la primera en condicin auto- y
mixotrfica (1,04 div da
-1
a alta DFF y 1,25 div da
-1
a alta DFF y con 2
mM de acetato, respectivamente) y la segunda, en condicin autotrfica
(1,20 div da
-1
a alta DFF). Bajo condicin autotrfica, las tasas de creci-
miento en fase exponencial fueron superiores con la mayor luz en todas las
cepas, a excepcin de CONC-023 cuya tasa fue la misma con ambas DFF
(0,73 div da
-1
). La condicin mixotrfica mejor levemente la tasa de
crecimiento de la cepa CONC-021, con ambas concentraciones de acetato
y luz. La cepa CONC-022, por el contrario, creci mejor bajo condicin
autotrfica y las cepas CONC-020 y CONC-023 presentaron tasas de cre-
cimiento similares en todas las condiciones de cultivo (fluctuaron entre
0,62 0,85 div da
-1
y 0,73-0,9 div da
-1
, respectivamente). El peso seco
algal no siempre se vio correlacionado con una mayor densidad celular, sino
que ms bien mostr relacin con la proporcin y/o tamao de clulas
mviles, esporangios y cistos. As, la cepa que gener los mayores pesos
secos al final del perodo experimental (da 14) en todas las condiciones
ensayadas fue CONC-023 (214 a 385 mg l
-1
), y los ms altos, bajo condi-
cin mixotrfica, a ambas DFF. Tambin fue la cepa que gener las concen-
traciones ms altas de carotenos totales en condicin autotrfica (3,3 a 5,6
mg l
-1
) y mixo-trfica (2mM acetato) (10,1 a 10,8 mg l
-1
), independiente-
mente de la luz. (Proyecto DIUC N 202. 111. 30-1.3)
139 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
10-3. PRODUCCIN EN CONTINUO DE CLULAS
VEGETATIVAS DE Haematococcus pluvialis
EN REACTORES INTERNOS
M.C. Garca-Malea Lpez, J.M. Fernndez Sevilla, F.G. Acin Fernndez
y E. Molina Grima
Departamento Ingeniera Qumica, Universidad de Almera, 04071 Almera, ESPAA
Email:emolina@ual.es
La produccin en continuo de clulas vegetativas de la microalga
dulceacucola Haematococcuspluvialisha sido estudiada en fotobiorreactores
internos tipo columna de burbujeo, como paso previo a su escalado en
fotobiorreactores externos. Se ha estudiado como vara tanto la productivi-
dad de biomasa, como el consumo de nitratos, la composicin bioqumica
de la biomasa y las caractersticas morfolgicas de las clulas, en funcin
tanto de la velocidad de dilucin impuesta, entre 0.01 y 0.06 1/h, como de
la irradiancia mxima en la superficie del cultivo, entre 1000 y 2500 E/
m
2
s. Los resultados obtenidos ponen de manifiesto la no existencia de
fotoinhibicin en el rango de condiciones ensayas, alcanzndose la mxima
productividad de biomasa, 0.45 g/Ldia, a la mxima irradiancia de 2500
E/m
2
s, y velocidad de dilucin ptima de 0.04 1/h. El consumo de nitra-
tos aumenta con la velocidad de dilucin e irradiancia hasta valores de 3.5
mmol/Ldia, no observndose en ningn caso limitacin del crecimiento
por nitratos. Respecto a la composicin bioqumica, el contenido en clorofilas
y carotenoides aumenta al aumentar la velocidad de dilucin y/o disminuir
la irradiancia externa, mostrando un comportamiento tpico de cultivos
fotolimitados. El contenido en carotenoides mximo fue de 0.8 %p.s., no
producindose en ningn caso acumulacin masiva de carotenoides. La com-
posicin elemental del cultivo muestra un aumento en el contenido en
nitrgeno y carbono de la biomasa con la velocidad de dilucin, siendo
muy notable el incremento en el contenido en nitrgeno desde el 5.5 al
10.0 %p.s. La caracterizacin morfolgica muestra como en todos los esta-
dos estacionarios la poblacin celular fue igual de homognea, aunque la
morfologa se modifica en gran medida, incrementndose el tamao celular
en un 30%, desde 21 a 27 m, al reducir la velocidad de dilucin de 0.06
a 0.01 1/h. En cualquier caso, los resultados ponen de manifiesto como el
comportamiento del cultivo es funcin de la irradiancia promedio dentro
del reactor, tanto en la velocidad de crecimiento como en la composicin
bioqumica y morfologa celular. El anlisis de esta influencia permite obte-
ner el modelo de crecimiento del microorganismo. Este modelo es utiliza-
do para, mediante simulacin, determinar las condiciones ptimas de
operacin que sern ensayadas en reactores externos.
140 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
10-4. CAROTENOGNESIS INDUCIDA EN DOS CEPAS
CHILENAS DE HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS
(CHLOROPHYCEAE)
CULTIVADAS EN CONDICIONES DE LABORATORIO.
Cifuentes AS, Gonzlez MA, Gmez PI.
Departamento de Botnica/ Universidad de Concepcin, Concepcin, Chile.
Se determin la capacidad carotenognica de dos cepas chilenas de H. pluvialis
(CONC-022 y CONC-023, VIII Regin, Chile) luego de ser sometidas a dife-
rentes tipos de estrs en condiciones de laboratorio. Las cepas se hicieron crecer
durante 10 das en 33 matraces 200 ml de medio Bristol, enriquecido con
micronutrientes y a diferentes concentraciones de NaNO
3
: 0, 0,3 y 2,9 mM. Los
cultivos crecidos en esta ltima condicin (Bristol normal) (27 matraces) fueron
dispuestos en series de 3 rplicas e inducidos a la carotenognesis mediante la
adicin de 15, 30 y 60 mM de acetato de sodio, con y sin Fe
++
(450 M), alta
irradiacin (350 mol m
-2
s
-1
) y adicin de H
2
O
2
1mM, dejando una serie intac-
ta como control. A los das 0, 14 y 33, se determin el contenido de carotenos
totales por espectrofotometra, la biomasa (como nmero de clulas por volumen
y como peso seco de un volumen filtrado) y el estado celular de los cultivos (%
cistos, clulas mviles y esporangios). El monitoreo de los carotenoides en el
tiempo permiti estimar tanto la tasa de carotenognesis como el tiempo de
duplicacin de los carotenoides y la variacin que experiment la composicin
celular en el tiempo. Los resultados mostraron grandes diferencias entre ambas
cepas, siendo CONC-023 ms carotenognica que CONC-022, a cualquier con-
dicin ensayada, al final del periodo de induccin. La mejor condicin para esta
cepa se obtuvo con 15mM de acetato de sodio y fue de 38 mg l
-1
de carotenoides
totales, acumulados principalmente en cistos (86%) y equivalente a un 4% del
peso seco algal. El tiempo de duplicacin de los carotenos se estim en 5,1 das y
ninguna de las curvas de carotenognesis mostr una fase estacionaria de este
proceso a los 45 das de cultivo. La cepa CONC-022, por el contrario, acumul
un mayor contenido de carotenoides que CONC-023 en la etapa de crecimiento
previa a la induccin, en el estado de clula mvil y en la condicin 2,9 mM
NaNO
3
, siendo ste 4 veces mayor al de CONC-023, al inicio del perodo de
induccin (0,5 mg l
-1
versus 2,2 mg l
-1
). La mejor condicin para la carotenognesis
de esta cepa se obtuvo en el cultivo control (2,9 mM NaNO
3
) sin mediacin de
un factor inductivo, con un tiempo de duplicacin de los carotenoides de 16 das,
y con un contenido de estos pigmentos equivalente al 0,8% del peso seco, cons-
tituido en un 50% por cistos. En esta cepa, a diferencia de CONC-023, ningn
factor inductor produjo un aumento consistente de los carotenoides totales, ma-
yor al producido por el envejecimiento natural. (Financiamiento: Proyecto DIUC
N 202.111.30-1.3)
141 1
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10-5. ESTUDIO SOBRE LA INTERRELACIN ENTRE EL
METABOLISMO DE POLIGLUCANOS Y DE LA SACAROSA EN
SYNECHOCYSTIS SP. PCC 6803
Conde ME, Giarrocco LE, Salerno GL.
Centro de Investigaciones Biolgicas, FIBA, Mar del Plata, Argentina.
Las cianobacterias son procariotes fotoautotrficos que cumplen un pa-
pel fundament al en el ci cl o del carbono en l a nat ural eza. Est os
microorganismos sintetizan poliglucanos como material de reserva carbonado.
La especie cianobacteriana unicelular de agua dulce Synechocystissp. PCC
6803 es moderadamente halotolerante. En presenci a de sal acumula
glucosilglicerol (GG) y en menor proporcin sacarosa. El glucgeno es sin-
tetizado por la glucgeno sintasa (GS) a partir de ADP-Glc [sintetizado por
la ADP-Glc-pirofosforilasa (ADPG-PPasa)]. La relacin entre la sntesis de
GG y el glucgeno ha sido confirmada recientemente en una mutante de
Synechocystisnula en la actividad ADPG-PPasa, incapaz de acumular glucgeno
y GG. Por otra parte, ha sido demostrado por nuestro grupo que la sntesis
de sacarosa tiene lugar por la accin concomitante de la sacarosa-fosfato
sintasa (SPS) y la sacarosa-fosfato fosfatasa (SPP), a partir de fructosa-6P y
UDP-Glc o ADP-Glc. El objetivo del presente trabajo es estudiar en una
cianobacteria modelo (Synechocystissp. PCC 6803) la vinculacin entre el
metabolismo del carbono y la salinidad. A partir del conocimiento de la
secuencia del genoma, se identificaron por homologa con secuencias cono-
cidas, dos marcos de lectura abiertos (MLA sll1393 y sll0945), potenciales
genes codificantes de enzimas del metabolismo de polisacridos. En una
primera etapa, se caracteriz el sll1393 como una secuencia codificante de
una GS, con mayor homologa a las almidn sintasas vegetales, denomi-
nndose glgA. Se demostr que tanto este gen como el MLA sll0945 son
genes que se transcriben. El paso siguiente ha sido la caracterizacin del
sll0945, despus de su amplificacin a partir de ADN total por la metodo-
l oga basada en l a PCR y de est udi os bi oqumi cos de l a prot ena
recombinante resultante en E. coli. Se demostr que codifica una GS simi-
lar a la GS de E. coli, y se lo denomin glgB. Estos resultados se comple-
mentaron con el anlisis de la expresin de glgA y glgB y de los genes
codificantes de las enzimas SPS y ADPG-Ppasa en una mutante nula en
GlgA, y de los genes asociados con el metabolismo del glucgeno en una
mutante nula en SPS. Se concluye que ambas GS aportan a la sntesis del
glucgeno y que el metabolismo de sacarosa est estrechamente relacionado
con la acumulacin de dicho polisacrido y con factores ambientales, como
la salinidad.
Apoyado por CONICET, ANPCyT, UNMdP y FIBA.
142 1
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10-6.GROWTH, NUTRIENT UPTAKE AND BIOMASS
COMPOSITION IN SPIRULINA (ARTHROSPIRA) CULTURES IS
HIGHLY DEPENDENT ON PH OF THE MEDIUM
Beln R. Cosso, F. Xavier Niell & Carlos Jimnez
Departamento de Ecologa, Facultad de Ciencias,
Universidad de Mlaga, 29071 Mlaga, Espaa
Spirulina is a strict alkaliphyle, which grows optimally at pH 9.5-10.5.
In a previous work, we have reported that maximal yield in Spirulina cultures
outdoors was found at pH values around 10.0, and that a significant decli-
ne occurred at pH above 10.4. In this work we compared the response of
Spirulina in laboratory cultures at two pH values, e.g. 9.5 and 10.0. It was
found that growth decreased by 33% at pH 10.0 when compared with pH
9.5. Moreover, nitrate and phosphate consumption were 25% and 50%,
respectively, higher at pH 10.0.
The study of the di fferent forms of cell phosphorus (e.g. soluble,
particulate, organic, inorganic, reactive, non-reactive) showed that pH did
not significantly influence the presence of the different fractions. Spirulina
accumulated soluble inorganic orthophosphate (P-PO
4
3-
) that represented
between 20 and 30% of the cell phosphorus in both cases, while the largest
fraction of phosphorus was accumulated in the form of soluble non-reactive
compounds (e.g. polyphosphate, aminoacids, soluble proteins, ATP, etc.),
that accounted for 50-70% of total cel l phosphorus. Thus, sol ubl e
phosphorus (reactive + non-reactive) was found to represent 85-95% of
cell phosphorus. Parti culate phosphorus, whi ch mai nly forms part of
phospholipids and structural proteins in cell membranes, in Spirulina
represented only 5-15% of total cell phosphorus.
As conclusions, growth of Spirulina was significantly reduced at pH 10.0,
with a patent increase in nitrate and phosphate consumption. In addition,
soluble phosphorus represented the largest fraction of internal phosphorus
in Spirulina, independently of the pH of the culture medium.
143 1
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10-7.ESTUDIO DE LA FUNCIN DEL METABOLISMO DE
SACAROSA EN ANABAENA SP. FRENTE A INCREMENTOS EN
LA SALINIDAD DEL MEDIO.
Marcozzi C, Cumino AC, Vargas WA, Dri SD, Salerno GL.
Centro de Investigaciones Biolgicas, FIBA, Mar del Plata, Argentina. Email:
fiba@fiba.org.ar
Las cianobacterias (algas verde-azuladas) son organismos procariticos
autotrficos ampliamente distribuidos en la tierra que realizan fotosntesis
oxignica. Estos microorganismos presentan diferentes mecanismos de adap-
tacin frente a condiciones ambientales adversas. Asi, en respuesta a incre-
mentos en la salinidad del medio, las cianobacterias pueden acumular
diferentes solutos que cumplen funciones de osmoproteccin y les confie-
ren distintos grados de tolerancia. stos son denominados osmolitos com-
patibles por ser compuestos orgnicos hidroflicos sin carga y de bajo peso
molecular que no interfieren con el metabolismo celular. Se ha descripto
que especies del gnero Anabaena, cianobacterias filamentosas de agua dul-
ce, presentan baja tolerancia a la salinidad, y acumulan sacarosa (Sac) en
respuesta al estrs salino. Recientemente, nuestro grupo de trabajo demos-
tr en Anabaena sp. PCC 7119 y 7120, y en algunas especies de Nostoc que
la sntesis de Sac se lleva a cabo a travs de la accin secuencial de las enzimas
sacarosa-fosfato sintasa (SPS-A y SPS-B) y sacarosa-fosfato fosfatasa (SPP), y
que su degradacin puede ser catalizada por las enzimas sacarosa sintasa
(SuS-A) o por las invertasas alcalino-neutras (Inv-A e Inv-B). Cuando inves-
tigamos el efecto que produce el NaCl sobre la regulacin de las enzimas
del metabolismo de Sac en la cepa modelo PCC 7120, encontramos que
tanto las actividades de sntesis como las de degradacin aumentaron luego
de la adicin de la sal. Este efecto tambin se observ en los niveles de
polipptidos y de ARN mensajeros de SPSs, SuS e Inv determinados me-
diante inmunodeteccin ( Western blots) y RT-PCR, respectivamente. El
aumento en la transcripcin de los genes codificantes de dichas protenas
(spsA, spsB, susA, invA e invB) se confirm mediante la generacin y anlisis
de cepas mutantes que contienen fusiones transcripcionales de la protena
fluorescente verde con fragmentos de las regiones promotoras de los distin-
tos genes, obtenidas por conjugacin. Los resultados obtenidos sugieren
que la Sac jugara un papel ms complejo que el de ser slo una molcula
osmoprotectora y que tendra tambin una funcin importante en la regu-
lacin de la utilizacin y redistribucin del carbono durante la adaptacin
al estrs salino.
Apoyado por CONICET, ANPCyT, FIBA y UNMdP
144 1
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11-1. PRODUCCIN DE LUTENA A PARTIR DE MICROALGAS
A ESCALA DE REACTOR INDUSTRIAL
J.F. Snchez;
2
J. Garca;
2
J.M. Fernndez;
1
F.G. Acin;
1
J.J. Magn;
2
J. Prez
2
y E. Molina Grima
1
1
Departamento Ingeniera Qumica, Universidad de Almera, 04071 Almera, ESPAA
2
Estacin Experimental Las Palmerillas-CAJAMAR, 04710 Almera, Espaa
Email:[authoremail@something.com]
Se ha diseado, construido y evaluado un fotobiorreactor de 4000 L para la
produccin de microalgas. Para la evaluacin del reactor se ha utilizado una
nueva especie de microalga aislada en la provincia de Almera (Espaa),
Scenedesmusalmeriensis, cuya identidad ha sido revelada por secuenciacin del
rDNA 18S e ITS en la coleccin de cultivo de algas de la Universidad de
Gttingen (Alemania). La nueva microalga presenta un contenido en lutena
elevado en comparacin con las fuentes conocidas de este compuesto. La lutena
es un pigmento carotenoide de aplicacin en la prevencin y tratamiento de la
degeneracin de la macula ocular.
El reactor diseado es del tipo airlift con lazo externo. El receptor solar
tiene una longitud de 400 m y consta de 20 tubos de 20 m de longitud y
0.10 m de dimetro dispuestos en dos niveles en forma de doble lazo. El
desgasificador consiste en una columna vertical de 0.25 m de dimetro y 3.5
m de altura, en cuyo interior se dispone un cambiador de calor tipo serpen-
tn, as como burbujeador de aire. El reactor se ha instalado en el interior de
un invernadero, utilizndose como fluido de calefaccin/refrigeracin el agua
de una balsa de 100 m
3
.
Los resultados obtenidos durante el cultivo discontinuo mostraron una
elevada velocidad de crecimiento, 0.07 1/h, y productividad, 0.8 g/Ld, de
la microalga utilizada, as como tolerancia a amplias variaciones de tempe-
ratura, 20-35C, y altas irradiancias, 1500 E/m
2
s. La excesiva acumula-
cin de oxgeno, con valores de 400%Sat., provoc una disminucin de la
productividad hasta 0.27 g/Ld. La introduccin de aire en el desgasificador
para mejorar la transferencia de materia, as como el aumento del caudal de
agua de refrigeracin permitieron un mejor control de las condiciones del
cultivo, alcanzndose productividades de 0.35 g/Ld en Diciembre con va-
lores de irradiancia media diaria de slo 160 E/m
2
s. El anlisis de la com-
TEMA 11. FOTOBIORREACTORES
145 1
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posicin bioqumica de la biomasa obtenida en continuo corrobora el alto
contenido en lutena, con un 0.33 %p.s.
El rendimiento del proceso est siendo actualmente evaluado a lo largo
de un ciclo anual. Los resultados obtenidos ponen de manifiesto el aumen-
to de la productividad de biomasa y lutena con la velocidad de dilucin,
alcanzndose productividades de biomasa 1.4 g/Ld y contenidos en lutena
del 0.45%p.s. Se pretende evaluar la viabilidad tecnolgica y econmica
del proceso para su aplicacin en el sector nutraceutico y/o farmacolgico.
11-2. FOTORREACTOR PLANAR AIR-LIFT PARA EL CULTIVO
DE CIANOBACTERIAS CON APLICACIONES
BIOTECNOLGICAS
Ferrari, S.G., Silva, P.G., Alcaraz, L.E. y Silva, H.J.
Area Microbiologa. Fac. de Qumica, Bioqumica y Farmacia. UNSL. Argentina.
Las aplicaciones biotecnolgicas de cianobacterias comprenden a una amplia
variedad de campos incluyendo medicina, farmacia, agricultura, nutricin e inge-
niera ambiental. Para talesusosloscultivosde lascianobacteriasdeben ser realiza-
dosen fotorreactorescerradosque permitan un adecuado control de variables. Se ha
diseado un fotorreactor planar con agitacin del cultivo mediante una combina-
cin de aireacin por efecto air-lift y flujo hidrosttico. El crecimiento fotosinttico
puede ser controlado en parmetros externos tales como: iluminacin, agitacin,
pH, temperatura y operado en cultivos batch, contnuo y semicontnuo.
El sistema de cultivo permite vincular las condiciones de agitacin con la
cantidad de luz incidente y sus efectos sobre la productividad celular, composi-
cin de la biomasa y caractersticas de autosedimentacin celular. El fotorreactor
est compuesto de una cmara cuboidal iluminada de 3,9 L, con una elevada
relacin rea/volumen y conectada por un tubo a la zona oscura compuesta
por dos columnas, cada una con un volumen de 1,2 L, donde se ubican los
sistemas de control. El fotorreactor y las columnas fueron construdas de acrlico
y todo el sistema fue esterilizado por vapor fluente mediante tyndalizacin. La
agitacin de los cultivos en el fotorreactor se logr utilizando el efecto air-lift,
desplazando el cultivo hacia la columna de burbujeo y posterior retorno por
descarga gravitacional al alcanzarse el equilibrio. Mediante la adecuada utiliza-
cin de distintos flujos de aire fue posible obtener distintas fracciones ilumina-
da/oscura en los cultivos. La caracterizacin hidrodinmica fue efectuada en
trminos de los caudales air-lift y flujo hidrosttico.
El flujo de aire fue variado entre 2,37-4,76 L/min logrndose una variacin en la
fraccin oscura entre el 35 y 47% con una frecuencia de exposicin a la luz de 37
a 15 vecespor hora respectivamente. Ademsse evalu el coeficiente de transferen-
146 1
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cia de masa (K
L
a) para oxgeno. El K
L
a calculado mediante lasmedidasde oxgeno
disuelto variaron entre 0,0179 a 0,0097 s
-1
para flujosde aire comprendidosentre
3,39-5,04 L/min respectivamente. Se efectu el cultivo de una cianobacteria
filamentosa heterocstica en condicionesde fijacin de nitrgeno atmosfrico ope-
rado en forma semicontnua por un perodo de 105 diascon una velocidad espec-
fica de crecimiento de 0,07 h
-1
y una concentracin de biomasa de 2,1 g/L utilizando
un flujo air lift de 5,7 L/min y una fraccin oscura de 32 %. El fotorreactor disea-
do permiti un adecuado control de las variables vinculadas al crecimiento
fotosinttico, con regulacin de la cantidad de luz incidente en funcin de las
condicionesde agitacin del sistema por efecto air lift y flujo tipo spray.
11-3. COMPARACIN DE LA PRODUCTIVIDAD EN CULTIVOS
CON Y SIN INVERNADERO DE ARTHROSPIRA MAXIMA EN EL
DESIERTO DE ATACAMA. CHILE.
1
Guido Manetti M.,
2
Anbal Ayala R.
[1] [2] Solarium Biotechnology S.A. Planta La Huayca, Ruta A665 Km 27,5, Provincia de
Iquique. 1 Regin Chile.Unidad: Laboratorio de Control de Cultivos.
La microalga verde-azulada Arthrospira maxima, se cultiva en Chile, en
escala tecnificada desde 1989. Uno de los lugares donde se ha producido
intensivamente es la Pampa del Tamarugal, en la Primera Regin (Norte de
Chile), en condiciones climticas desrticas, usando aguas subterrneas de
calidad potable y aprovechando las condiciones de un ecosistema libre de
contaminacin.
Se ha estudiado ampliamente la influencia de las condiciones climticas
en los cultivos de Arthrospira maxima. En la planta de produccin de la
empresa Solarium Biotechnology S.A. se desarroll un estudio especfico
sobre la productividad de los cultivos durante la estacin fra (Junio a Agos-
to), comparndose el comportamiento de cultivos de Arthrospira maxima
en raceway, al aire libre y bajo invernadero, ambos en igualdad de condicio-
nes respecto al sistema de agitacin mediante ruedas de paletas, utilizando
medio de cultivo estndar modificado (MEM). De igual manera, el proce-
samiento de la biomasa fue idntico para ambos sistemas, tanto en la cose-
cha por filtracin y secado de la biomasa por atomizacin.
Se midi las variaciones de pH, temperatura, luz incidente y concentra-
cin de biomasa en el cultivo, permitiendo comparar la productividad de
ambos sistemas durante todo el periodo de estudio.
147 1
er
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12-1. PHOSPHORYLATION OF MAP KINASE-LIKE PROTEINS
MEDIATE THE RESPONSE OF THE HALOTOLERANT ALGA
DUNALIELLA VIRIDIS TO HYPERTONIC SHOCK
Carlos Jimnez,
1
, Tomas Berl,
2
Christopher J. Rivard,
2
Charles L.
Edelstein
2
and Juan M. Capasso
2
1
Department of Ecology, Faculty of Science, University of Mlaga, Mlaga 29071, Spain;
2
Department of Medicine, Division of Nephrology, University of Colorado, School of
Medicine, 4200 East 9th Avenue, Denver, CO 80262, USA.
The microalga Dunaliella viridishas the ability to adapt to a variety of
environmental stresses including osmotic and thermal shocks, UV irradiation
and nitrogen starvation. Lacking a rigid cell wall, Dunaliella provides an
excellent model to study stress signaling in eukaryotic unicellular organisms.
When exposed to hyperosmotic stress, UV irradiation or high temperature,
a 57 KDa protein is recognized by antibodies specific to mammalian p38,
to its yeast homologue HOG1, and to the phospho-p38 MAP kinase motif.
This 57 KDa protein appears to be both up-regulated and phosphorylated.
Three other proteins (50, 45, 43 KDa) were transiently phosphorylated
under stress conditions as detected with an antibody specific to mammalian
phospho c-Jun N-terminal kinase (JNK) motif. Treatment with specific
inhibitors of p38 MAP kinase (SB203580) and JNK (SP600125) activities
markedly impaired the adaptation of Dunaliella to osmotic stress. From an
evolutionary standpoint, these data strongly suggest that MAP kinase
signaling pathways, other than ERK, were already operating in the common
ancestor of Plant and Animal Kingdoms, probably as early as 1,400 million
years ago.
TEMA 12. GENTICA E INGENIERA GENTICA
148 1
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12-2. TRANSFORMACIN GENTICA DE Phormidium animalis
POR MEDIO DE BIOBALISTICA Y CON VECTORES DE
CLONACIN PARA PLANTAS SUPERIORES.
1,5
Vzquez-Martnez M.G.,
2
Rodriguez M.H.,
3
Hernndez-Hernndez
F.,
4
Cabrera-Ponce J.L.,
5
Ibarra J.E.
[1] Centro de Investigacin de Paludismo/INSP, Tapachula, Chis., Mxico; [2] Centro de
Investigaciones sobre Enfermedades Infecciosas/INSP, Cuernavaca, Mor., Mxico; [3]
Depto. de Patologa Experimental/ CINVESTAV, Mxico, D.F., Mxico; [4] Depto. de
Ingeniera Gentica de Plantas/CINVESTAV; Irapuato, Gto., Mxico; [5] Depto. de
Biotecnologa y Bioqumica/CINVESTAV; Irapuato, Gto., Mxico.
Email:mgvazque@ira.cinvestav.mx
Este trabajo reporta la transformacin exitosa de una cepa silvestre de
Phormidium animalislograda por medio de bombardeo de micropartculas,
usando vectores de clonacin normalmente empleados para la transforma-
cin de plantas superiores. Debido a la carencia de informacin previa a
este respecto, fue necesario seleccionar los parmetros de bombardeo, la
eleccin de los vectores de transformacin adecuados, adems de elegir el
tipo y la concentracin de antibiticos para la seleccin, as como el tamao
de partcula ms apropiado para el bombardeo. Los cultivos axnicos de la
cianobacteria cultivados sobre filtros Millipore y mantenidos en medio ASN-
10 fueron bombardeados con partcul as de tungsteno M-5 y M-10
recubiertas con el DNA de cuatro diferentes vectores de clonacin: pBarGus,
pWRG1515, pCAMBIA1301 y pB1426. Todos los vectores llevan el gen
gusA (b-glucoronidasa) como reportero, y genes de resistencia a antibiticos
como marcadores de seleccin. Despus de cuatro meses de seleccin en
antibitico se observ un notable crecimiento de las cepas bombardeadas
slo con los vectores pWRG1515 y pCAMBIA1301.
La eficiencia de transformacin y la proporcin de recombinantes esta-
bles fue mayor con el vector pCAMBIA1301 y no se observ diferencia
significativa entre el uso de partculas de tungsteno M-5 y M-10. Se obtu-
vieron 29 clones estables en medio selectivo. La transformacin de P. animalis
fue comprobada con un anlisis de PCR mostrando la amplificacin del
gen gusA (b-glucoronidasa) en el DNA de las cepas bombardeadas y por
medio de anlisis tipo Southern blot indicando hibridacin con el gen
hptII (resistencia a higromicina). El uso del bombardeo de partculas y de
vectores de clonacin de plantas para transformar a la cepa silvestre de P.
animalis, no ha sido reportado anteriormente. Los procedimientos desa-
rrollados durante este trabajo abren un rango amplio de posibilidades para
su uso en estudios genticos bsicos, y con enfoques biotecnolgicos de este
importante y diverso grupo de algas verde-azules.
149 1
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12-3.EVALUATION OF cDNA LIBRARIES OF THE EUGLENOID
EUGLENA GRACILIS.
1
dos Santos Ferreira V;
2
Rocchetta I;
1
Labovsky V;
2
Ruiz L,
2
Conforti V,
1
Levin MJ.
1
Lab. de Biol. Molec. de la Enf. de Chagas. INGEBI-CONICET, Bs. As, Lab. Biol. Comp.
de Prot. FCEyN, Bs. As.
Di recti onal cDNA l i brari es were constructed from mRNA of the
commercial strain E. gracilis UTEX753 (U). One thousand Expression
SequenceTags(ESTs) of an average size of 500bp. were generated. To identify
the potential biological functions of the analyzed ESTs, we translated the
correspondent cDNA into all open reading frames and compared them
with the nonredundant protein database using BLASTX. We came up with
a 12 % of similarities with ESTs and a 47 % with unknown identity. We
found out that 612 ESTs showed similarity to known proteins and that
388 showed no similarity. From the 612 genes with known similarity, 111
showed si mi lari ty to poorly classi fi ed ESTs, wi thi n them A. thaliana
represented more than the 40%. From the total ESTs, 910 were non
redundant and only 90 were redundant sequences.
Microarrays were constructed for the study of gene expression changes
i n E. gracilis grown i n the presence of di fferent stress envi ronmental
conditions. Four hybridization conditions with RNAs labelled with Cy5/
Cy3 were assayed: i)U/wild type strain (MAT), ii)U/MAT grown with
streptomycin supplementation, iii)U/ MAT grown in the dark, and iv) U/
MAT grown in the presence of chromium. We focus our results within two
groups (coming from the BLASTs results) Plantae (including unicellular
algae) and Kinetoplastida. Using ArrayVision software (Imaging Research
Inc.) we found out 60 and 30 spots of known identity within those groups
respectively showing changes in their expressions ratios after each of the
stress conditions.
The sequencing and expression data obtained on this work are the first
molecular data generated from the nuclear genome of E. gracilis and the
starting point for future comparative studies among Euglenozoa.
150 1
er
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12-4. DIVERSIDAD GENTICA EN CEPAS MUTANTES DE
HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS USANDO MARCADORES RAPD
(PCR)
1
Medina-Jaritz Nora,
1
Urueta H,
2
Vargas-Mendoza C.F,
1
Montes-Villafan S.,
2
Martnez-Jernimo F,
2
Olvera-Ramrez R.
[1] D. Botnica, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, Instituto Politcnico Nacional,
MEXICO; [2] D. Zoologa / Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, IPN, Mxico
Haematococcus pluvialis es una de las principales fuentes naturales de
astaxantina, este carotenoide es muy apreciado en la acuacultura como pig-
mento para el salmn y la trucha, tambin es empleado en las industrias
cosmtica y farmacutica. Esta microalga acumula altas concentraciones de
este carotenoide cuando se cultiva en condiciones de estrs que limitan el
crecimiento, existen numerosos estudios al respecto y sobre su empleo en
aplicaciones biotecnolgicas.
El objetivo de este trabajo fue evaluar la diversidad gentica existente
entre siete cepas mutantes de H. pluvialis, obtenidas por la aplicacin de
diferentes dosis de nitrosoguanidina a una cepa silvestre. La nitrosoguanidina
es un mutgeno empleado frecuentemente con la levadura Phaffia rodozyma,
para obtener clulas sobreproductoras de astaxantina.
Las cepas empleadas resultaron del tratamiento con diferentes dosis de
nitrosoguanidina (10, 20 y 40 mg/ml). El DNA total de clulas de cada cepa
se extrajo por medio del DNAeasy Plant Kit (Quiagen) y se amplific con
nueve iniciadores, con un tamao homogneo de 10 pb, elegidos al azar.
Los productos amplificados se corrieron en geles de agarosa 2% y se
documentaron para su anlisis. Se analizaron un total de 129 loci, por
medio de los cuales se calcul la identidad gentica (Nei, 1978)
Los resultados arrojan diferencias genticas importantes con respecto a la
cepa testigo (0 mg/ml) en las cepas sometidas a tratamiento con ms de 10
mg/ml (una a 20 mg/ml y otra a 40 mg/ml), que arrojaron un valor de
0.41 de distancia gentica de Nei; mientras que las sometidas a un trata-
miento de 10 mg/ml (cuatro cepas) mostraron valores menores de distan-
cia gentica con respecto a la cepa testigo: 0.32 y un valor de identidad
gentica de Nei de 0.72.
Con los resultados anteriores se demuestra que el mutgeno qumico
empleado s tuvo efecto y que las cepas obtenidas s difieren genticamente.
151 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
12-5. PRODUCCIN DE ASTAXANTINA POR CEPAS
MUTANTES DE HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS
1
Montes-Villafan S,
2
Martnez-Jernimo F,
3
Ros-Leal E,
3
Caizares-
Villanueva RO,
1
Olvera-Ramrez R.
[1] Depto. Botnica, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, Instituto Politcnico
Nacional, MXICO; [2] Depto. Zoologa, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, IPN,
MEXICO; [3] Depto. Biotecnologa y Bioingeniera, Centro de Estudios Avanzados e
Investigacin, IPN, Mxico.
La microalga Haematococcus pluvialis es usada como una fuente del
cetocarotenoide astaxantina pigmento utilizado en diferentes aplicaciones
en la acuacultura, as como en las industrias farmacutica y cosmtica. Esta
clorofcea acumula el pigmento bajo diferentes condiciones de estrs, prin-
cipalmente nutricional, siendo importante la seleccin de cepas, como la
manipulacin gentica para incrementar su capacidad de acumulacin del
pigmento. En este estudio se utiliz un mutgeno qumico para obtener
cepas sobreproductoras de astaxantina. El cultivo de H. pluvialisse realiz
en el medio mineral BG-11 a una temperatura de 28
o
C, fotoperiodo de
12/ 12 y ai reaci n cont i nua. Como agent e mut geno se empl e
nitrosoguanidina, que fue aplicada en concentraciones de 10, 20, 30 y 40
mg/ml; despus de 10 das de cultivo se recuperaron las clulas en estado
vegetativo. Las clulas recuperadas se cultivaron en presencia de beta-ionona
(un inhibidor de la carotenognesis) y se seleccionaron las clulas vegetativas
que haban acumulado astaxantina, en total se obtuvieron siete cepas, con
las que se realizaron cinticas de crecimiento y se establecieron experimen-
tos de induccin de astaxantina empleando el medio mineral BG-11 dilui-
do diez veces (estrs nutricional). Las extracciones del pigmento se realizaron
con dimetilsulfxido y la concentracin se cuantific mediante HPLC.
Se determin que dos de las cepas tratadas con 10 mg/ml y las tratadas
con 20 y 40 mg/ml de nitrosoguanidina presentan una velocidad de creci-
miento significativamente mayor a la cepa silvestre (P>0.05). En cuanto a
la produccin de astaxantina, se cuantificaron concentraciones de casi el
triple en las cepas tratadas con 10 mg/ml de nitrosoguanidina y para las
cepas tratadas con 20 y 40 mg/ml los valores fueron de casi el doble, con
respecto a la cepa silvestre. Empleando las cepas mutadas obtenidas en este
trabajo, es posible realizar cultivos a mayor escala en los que se demuestre
una mayor produccin de astaxantina en un menor tiempo de crecimiento.
152 1
er
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12-6. INVOLVEMENT OF CAROTENOGENESIS-RELATED GENES
dxs AND psy IN NITROGEN STARVED Dunaliella salina CULTURES
Snchez-Estudillo L,
1
Freile-Pelegrin Y,
1
Rivera-Madrid R,
2
Robledo-
Ramrez D.,
1
Narvez-Zapata J.,
3*
1
Cinvestav, Unidad Mrida, Km. 6 Antigua carretera a Progreso Apdo. Postal 73,
Cordemex, 97310, Mrida, Yuc., Mxico,
2
Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn
A.C. Calle 43 No. 130. Col. Chuburn de Hidalgo. C.P. 97200 Mrida, Yucatn. Mxico,
3
Departamento de Microbiologa Ambiental y Biotecnologa, Universidad Autnoma de
Campeche, Av. Agustn Melgar C.P.24030, Campeche, Camp., Mxico.
The effect of nitrogen limitation on transcriptional regulation of genes
involved in the pigmentation was studied in the unicellular chlorophyte
alga Dunaliella salina. The culture was grown in artificial Johnson medium
with and without nitrogen (KNO
3
) with 20% NaCl. Cells of D. salina
were maintained along 20 days at 30C under constant illumination at
300-350 ?molm
-2
s
-1
. Under free nitrogen conditions, cells showed a
reduced growth and a variable pigment accumulation. Whereas growth
was reduced, relative pigment accumulation was increased. The transcription
of two key genes encoding enzymes involved in the production of pigment
isoprenoids and general isoprenoids were differentially regulated. One of
the genes analyzed was the dxs, which encoding for 1-deoxyxylulose-5-
phosphate synthase (DXPS) that catalyzes to first regulatory step in the
formation of isopentenyl diphosphate (IPP), the precursor of the most of
isoprenoids produced in the plastid of plants and algae. Dxswas drastically
reduced in the cells growth on free nitrogen conditions in contrast with
cells growth on full nitrogen conditions. In general, dxstranscription reached
its higher level in day 15 during the late-logarithmic phase of growth and
during the major accumulation of isoprenoid pigments. Other gene studied
was the psygene, which encoding for phytoene synthase (PSY) enzyme that
catalyzes the first specific step in the carotenogenic route. Psy was very
active both in cells growth on full nitrogen conditions as in cells growth on
free nitrogen conditions. Psytranscription only presents a peak in the cells
with nitrogen limitation, when these reached the late-logarithmic phase
(15 day) but before that the cells presented its higher level of relative pigment
accumulation. These results indicate that under free nitrogen conditions,
the accumulation of carotenoids in D. salina is more dependent of the psy
trasncri ps i nvolved exclusi vely i n the carotenogeni c route that i n dxs
transcripts involved in the formation of total isoprenoids and in the right
development of plastids.
153 1
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13-1. ACTIVIDAD ELICITORA EN PLANTAS DE TABACO Y DE
TOMATE DE FRACCIONES DE CIDO ALGNICO DE LESSONIA
DEL LITORAL CHILENO.
Chanda, N.P., Dennet, G., Laporte, D., Matsuhiro, B. y Moenne, A.
Facultad de Qumica y Biologa, Universidad de Santiago de Chile, casilla 40, correo 33,
Santiago, Chile.E-mail: nancy.chandia@correo.usach.cl
Lminas de Lessonia vadosa colectadas en Puerto del Hambre (5335 S)
cerca de Punta Arenas, en invierno se sometieron a extraccin alcalina, obte-
niendo con un 53,2 % de rendimiento alginato de sodio, el cual fue caracte-
rizado por hidrlisis total y espectroscopa de IR-TF y RMN-
1
H indicando
que l a muestra est pri nci pal mente compuesta de resi duos de ci do
manurnico, mientras que el cido algnico extrado de lminas de Lessonia
trabeculata colectada en San Lorenzo (30 15 S) en las cercanas de Coquimbo,
en otoo est compuesta mayoritariamente de residuos de cido gulurnico.
Las muestras de cido algnico se sometieron a hidrlisis cida y se obtuvieron
fracciones enriquecidas en cido poli-D-manurnico y cido poli-L-gulurnico.
La actividad elicitora de ambas fracciones fue ensayada en plantas de
tomate y de tabaco evaluando la actividad de enzimas relacionadas con la
defensa y detoxificacin como la fenilalanina amonaco liasa (PAL), glutatin-
S-transferasa (GST), guayacol peroxidasa (GPOX) y las involucradas en el
ciclo Halliwel-Asada (AP, DHAR, GR).
La activacin de PAL y GST en plantas de tabaco muestra que el cido
polimanurnico es capaz de inducir un aumento de 1,4 veces en ambas
enzimas con respecto al control, mientras que la fraccin enriquecida en
ci do pol i gul urni co no present a efect o al guno sobre l as enzi mas
involucradas en el sistema de defensa. Este comportamiento tambin se
detect en la actividad de las enzimas antioxidantes estudiadas. Adems,
plantas de tabaco tratadas durante un mes con la fraccin enriquecida en
cido poli-manurnico mostraron un aumento de alrededor de un 40 %
con respecto a los controles sobre el crecimiento y biomasa.
Por otra parte, en ensayosrealizadosen plantasde tomate se observ slo con la
fraccin de cido poli-D-manurnico un aumento en la actividad de lasprincipales
enzimasinvolucradasen el sistema de defensa, como PAL y lipooxigenasas(LOX).
Se agradece el financiamiento al proyecto FONDECYT 1010594.
TEMA 13. MOLCULAS BIOACTIVAS
154 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
13-2.SUSTANCIAS BIOACTIVAS EN ENTEROMORPHA
COMPRESSA L., UN ALGA VERDE CON VALOR NUTRICIONAL
Mara L. Flores
1*
Cecilia Crovetto
2
y Osvaldo L. Crdoba
2*
1
Farmacognosia-
*
RIPRONAMED y
2
Qumica Biolgica II, Facultad de Ciencias Naturales,
Universidad Nacional de la Patagonia San Juan Bosco, Km 4, 9000, Comodoro Rivadavia,
Chubut, Argentina. E-mail: fargnosi@unpata.edu.ar, osvmar@uolsinectis.com.ar
Enteromorpha compressa L. es un alga verde, con i mportante valor
nutricional dado el alto contenido de protenas solubles. Nuestros estudios
preliminares demostraron una importante variabilidad qumica (quinonas,
esteroides, saponinas, fenoles, hidratos de carbono) adems de protenas, lo
que nos llev a investigar la potencial importancia farmacutica de la espe-
cie. Los extractos resultantes de una extraccin preparativa con solventes de
polaridad creciente fueron analizados en su composicin qumica mediante
reacciones usuales, y mediante ensayos de bioactividad primaria: test de
ci totoxi ci dad de Artemia salina, acti vi dad anti bacteri ana, acti vi dad
antifngicay actividad antioxidante. Aquellas fracciones que evidenciaron
importante proporcin de quinonas y productos derivados, fueron purifi-
cadas por TLC y posterior HPLC-RP. Los principales productos separados
se caracterizaron mediante Espectrofotometra UV-Vis.
Se determinaron antraquinonas y derivados dimricos como principales cons-
tituyentes en los extractos de benceno, CCl
4
, acetato de etilo y alcohol a tempe-
ratura ambiente y en caliente. Los esteroides tambin resultaron abundantes,
pero slo con ter etlico se logr una adecuada separacin. Con agua a tempe-
ratura ambiente y en caliente se alcanzaron mayores rendimientos de extrac-
cin (>15 %), estando enrriquecidos de hidratos de carbono (xilosa, ramnosa,
cido glucurnico), protenas y saponinas, observandose dmeros quinnicos
semejante a los sennsidos D y B. La presencia de las sustancias mencionadas
fue corroborada mediante HPLC-RP logrndose separar adecuadamente aloe
emodina y los sennsidos, caracterizados posteriormente por espectrofotometra.
Por TLC se determin la presencia de las antraquinonas aloe emodina y rena en
las fracciones de benceno, CCl
4
y acetato de etilo. La fraccin de eter etlico
mostr citotoxicidad importante (LC
50
21,2 mg/ml), las restantes presentaron
menor toxicidad (LC
50
> 200 mg/ml). No se observ actividad antibacteriana y
antifngica relevante. La actividad antioxidante prevaleci en las fracciones con
constituyentes fenlicos. Estos resultados demuestran que E. compressa
biosintetiza sustancias de potencial aplicacin en la industria farmacutica
(quinonas y esteroides); por otra parte, si bien el valor nutricional descripto
sera importante, la presencia de stas sustancias es un factor de cuidado, dado
la toxicidad y/o efectos colaterales que puede provocar su ingesta, fundamen-
talmente por los efectos laxantes o purgantes de las quinonas.
155 1
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I SBN N 987-1130-32-5
13-3.REVISIN DE COMPUESTOS QUMICOS PRESENTES EN
EL GNERO ALGAL CODIUM STACKHOUSE (CHLOROPHYTA,
SIPHONALES) Y SU ACTIVIDAD BIOLGICA.
1
Goecke FS,
2
Gonzlez MA.
[1] Departamento de Botnica, Universidad de Concepcin, Concepcin; [2] Departamento
de Botnica, Universidad de Concepcin, Concepcin, Chile.
El ambiente marino sustenta una variedad de recursos biolgicos que
constituyen una fuente potencial de compuestos qumicos de utilidad
biomdica y de estructuras qumicas nuevas con actividad biolgica. Las
algas como integrante de estos recursos, y en especial algunos taxa han sido
utilizados por culturas milenarias por sus poderes curativos y nutricionales.
El gnero Codiumes uno de stos. Extractos lipdicos obtenidos de algunas
especies del gnero a nivel mundial, han demostrado tener una actividad
antibacteriana, antiviral, antifngica y antitumoral. Sin embargo, la princi-
pal actividad est relacionada con los anticoagulantes. Diversos esteroles,
cidos grasos y terpenos han resultado responsables de estas actividades.
Las molculas ms activas en el gnero Codiumson los polisacridos con
diverso grado de sulfatacin y composicin (ricos en arabinosa o galactosa)
que se encuentran en la fase amorfa de la pared celular. Estos compuestos
son responsables de la propiedad anticoagulante de los extractos, los que
han resultado tener una actividad comparativamente superior a la heparina
(origen animal). Aparte, se han aislado de estas algas diversas lectinas, com-
puestos con aplicacin en inmunologa y biologa molecular.
Codiumes uno de los gneros ms comunes en la franja intermareal me-
dia, presente durante todo el ao a lo largo de Chile continental y en islas
ocenicas, en especial en Juan Fernndez. En el pas se registran 12 espe-
cies, de las cuales 3 son endmicas. Slo existe informacin sobre actividad
biolgica y biomdica en la especie cosmopolita C. fragile. Esta revisin
constituye la primera fase del estudio que se pretende realizar sobre la es-
tructura qumica y actividad biolgica de compuestos extrados de 4 espe-
cies de Codiumen Chile: C. fragile(Suringar) Hariot, C. dimorphum
Svedelius, C. cerebriformeSetchell y C. fernandezianumSetchell. La prime-
ra especie es conocida por ser invasora en diversas partes del mundo y cau-
sar estragos en zonas de cultivo de otras algas e invertebrados, y las tres
restantes por ser endmicas de Chile. No tenemos conocimiento de estu-
dios de este tipo publicados en estas especies en el pas. Es de nuestro
inters observar si el grado de endemismo se refleja en los compuestos qu-
micos presentes en tales algas y en su actividad biolgica.
156 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
13-4. ESTRUCTURA Y ACTIVIDAD ANTIVIRAL
DE GALACTANOS SULFATADOS DE CALLOPHYLLIS VARIEGATA
1
Rodriguez MC,
2
Cerezo AS,
3
Pujol CA,

3
Damonte, EB,
2
Matulewicz MC
[1] Departamento de Biodiversidad y Biologa Experimental; [2] Departamento de
Qumica Orgnica, CIHIDECAR-CONICET, [3] Departamemto de Qumica Biolgica,
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Pabelln 2, Ciudad
Universitaria, 1428 Buenos Aires, Argentina.
Plantas cistocrpicas de Callophyllisvariegata, recogida en Puerto Desea-
do (Provincia de Santa Cruz), se extrajeron con agua a temperatura am-
biente y el polisacrido crudo se fraccion por redisolucin en agua y
precipitacin en soluciones de concentracin creciente de cloruro de potasio.
Se obtuvieron as tres fracciones: F1 y F2, las cuales precipitaron en el
rango 1,20-1,25 M KCl y 1,80-2,00 M KCl, respectivamente, y F3, mayo-
ritaria, soluble en KCl 2,00 M. Las fracciones se analizaron (contenido de
hidratos de carbono, sulfato, sulfato primario, protena y cido piruvico;
composicin en monosacridos; relacin D:L-galactosa) y se determin su
poder rotatorio y su peso molecular. El estudio estructural se realiz por
metilacin, desulfatacin-metilacin, espectroscopa IR y RMN de
13
C.
Dicho estudio indic una estructura bsica constituida por una secuencia
alternante de unidades de b-D-galactosa 2-sulfato o b-D-galactosa 2,4-
disulfato enlazadas por la posicin 3 y 3,6-anhidro-a-D-galactosa (2-sulfato)
o a-D-galactosa 2,3-disulfato enlazadas por la posicin 4. El anlisis por
metilacin realizado en condiciones desagregantes, permiti confirmar ade-
ms la presencia de unidades trisulfatadas. La estructura de carragenano
lambda ciclado [4)-a-3,6-anhidro-D-Galp-2-sulfato-(13)-b-D-Galp-2-
sulfato-(1] ya ha sido detectada en un polisacrido extrado de Callophyllis
hombroniana.
Adems, se ensay la actividad antiviral de las tres fracciones frente a los
virus herpes simplex tipos 1 y 2, y dengue 2 mediante la tcnica de reduc-
cin del nmero de placas virales y se calcul la concentracin inhibitoria
50% (CI
50
). Todas resultaron ser muy activas con valores de CI
50
entre 0,10
y 2,19 mg/mL Por otra parte, las correspondientes fracciones desulfatadas
mostraron una actividad antiviral considerablemente menor. Ninguna de
las fracciones present citotoxicidad sobre las clulas Vero utilizadas en los
distintos ensayos [concentracin citotxica 50%.(CC
50
) >1000 mg/mL].
Por consiguiente, los ndices de selectividad (CC
50
/CI
50
) elevados indican
que estos polisacridos podran ser de utilidad en terapias antivirales.
157 1
er
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13-5. EVALUACIN DE SUSTANCIAS ANTIFNGICAS
EXTRADAS DE CIANOBACTERIAS NATIVAS DE MXICO.
1
Vicente-Garcia V.,
2
Amora-Lazcano E.,
1
Centeno-Ramos C.,
1
Olvera-Ramrez R.
[1] Depto. Botnica, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, Instituto Politcnico
Nacional, MEXICO [2] Depto. Microbiologa , Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas,
IPN. Mxico.
Varias especies de cianobacterias formadoras de blooms (florecimientos
al gal es) en ambi ent es acut i cos, producen pot ent es t oxi nas como
neurotoxinas, hepatotoxinas y diversas sustancias citotxicas (Whitton,
2000), recientemente gran cantidad y variedad de metabolitos han sido
encontrados en este grupo, con diversos rangos de actividad biolgica y
estructuras qumicas entre las que se encuentran compuestos con actividad
antifngica (Smith et al,1999).
En este trabajo se emplearon dos cepas de cianobacterias pertenecientes
a los gneros Pseudoanabaena sp y Microcystissp, aisladas del lago situado en
Valle de Bravo, Mxico; en donde se presentan blooms en algunas pocas
del ao. Las cepas se cultivaron en el medio mineral BG-11; a partir de
biomasa de 15 y 30 das de cultivo, se hicieron extractos con y sin sonicador
usando metanol como solvente.
Se realizaron pruebas con los extractos obtenidos contra cepas de hongos
celulolticos: Alternaria sp, Chaetomiumsp, Aspergillussp y Penicilliumsp
(aislados del Archivo Histrico de la Ciudad de Mxico) y fitopatgenas
como Fusariumsp. cultivadas en medio PDA slido (cultivo de esporas) y
en PDA lquido (cultivo de micelio). La actividad antifngica fue probada
mediante los mtodos de placa excavada y de difusin de discos en placa.
Nuestra experiencia realizada con difusin de discos en placas (cultivos
de micelio), revelan que los extractos sonicados o no de Pseudoanabaena sp
a diferentes tiempos de cultivo y los extractos sonicados de Microcystis sp
muestran actividad antifngica contra Alternaria sp. En la experiencia rea-
lizada en placa excavada (cultivo de esporas) los extractos metanlicos obte-
nidos de biomasa de 15 das de cultivo y sonicada de las cepas de Microcystis
sp, y Pseudoanabaena sp i nhi bi eron la germi naci n de las esporas de
Aspergillussp y Penicilliumsp, para todas las concentraciones empleadas.
Con base en los resultados obtenidos en este trabajo se puede concluir
que los extractos obtenidos de las cianobacterias empleadas tienen un claro
efecto antifngico contra los hongos celulolticos por lo que podra ser una
alternativa para el control biolgico de este tipo de hongos que causan de-
terioro o biodegradacin en una gran cantidad de materias primas y pro-
ductos manufacturados.
158 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
13-6.DETECCIN DE LA CAPACIDAD BIOESTIMULANTE DE
EXTRACTOS DE CHLORELLA VULGARIS EN LA GERMINACIN
DE SEMILLAS DE AVENA SATIVA
Gigena, M.;
1
Albarracn, I.;
1, 2
Salomone, J.;
1
Romero,T.
3
1- Facultad de Ciencias Naturales UNPSJB Roca 115 1er. Piso - Trelew. Chubut.
Argentinae-mail: fames@ar.inter.net
2- Estacin de Fotobiologa. Playa Unin. CONICET. 3- Centro de Investigaciones
Pesqueras Ministerio de la Industria Pesquera, 5ta Avenida. Barlovento, Santa Fe, Playa, C.
Habana, Cuba.
Ante el efecto positivo de extractos de microalgas sobre la germinacin
de otras especies como arveja, maz, y distintas variedades de trigo, se
postula un mismo efecto de Chlorella vulgaris, sobre la germinacin de
avena Avena sativa, variedad Contracta Neilreich, especie de ciclo corto
que en Patagonia se cultiva para la produccin de forraje. El presente
trabajo tiene como finalidad estandarizar tcnicas que permitan extraer
compuestos activos para ser aplicados como bioestimulantes en especies
cultivadas en el VIRCh (Valle Inferior del Ro Chubut), Chubut. Argen-
tina, a partir de la biomasa de Chlorella vulgaris cultivada en efluentes de
la industria pesquera. De esta manera se tiende a resolver una problem-
tica ambiental, involucrando el tratamiento de efluentes, reusando el agua,
y ut i l i zando bi omasa seca al gal en l a agri cul t ura como al t ernat i va
innovadora.
La bi omasa de C. vulgaris fue someti da a sucesi vos l avados para
el i mi nar restos del efl uente. Posteri ormente se centri fug y sec en
estufa. Con esta pasta seca y solvente se prepar el extracto a di sti n-
tas concentraci ones.
El ensayo consisti en cinco tratamientos (T1: 0,090 g; T2: 0,180 g ;
T3:0,270 g ; T4: 0.360 g ; T5 0.450 g; T6: 0.600 g ) y dos testigos, uno
seco y otro hmedo. El primero se sembr en forma natural, mientras que
en el segundo, las semillas humedecidas en agua destilada, y las tratadas
con los extractos permanecieron durante 24 horas antes de ser sembradas
en un sustrato inerte (arena estril).
Las pruebas de germi naci n se efectuaron durante 10 das, baj o
condi ci ones control adas de l uz (14:10) y temperatura de 282 C.
Se mi di : % de pl nt ul as emergi das, l ongi t ud de part e area y
radcula de las semi llas emergi das, peso de bi omasa seca de tallo y de
raz si n semi l l a.
Se concluye que Chlorella vulgarisposee inhibidores y estimulantes de la
germinacin y crecimiento vegetal. En T1 al final del ensayo, se observ
mayor longitud de tallo (14.66 cm), y a los tres das un mayor porcentaje
de emergencia de plntulas estimada en un 16 % lo que estara indicando
159 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
estimulacin. T2 muestra mayor rendimiento en peso fresco de raz
(0.01 g), mientras que la mayor longitud de raz (11.21 cm) se observa en
T4. En T6 solo el 28 % de las semillas sembradas emergieron, resultado
que estara indicando un proceso de inhibicin. No se evidencian diferen-
cias significativas para las variables medidas en los T3 y T5. Lo mismo se
observa en los testigos
Se sugiere el uso del extracto con Chlorella vulgaris, entre las concen-
traciones 0,090 y 0,270 g para mejorar las condiciones germinativas de
Avena sativa.
Se prev continuar con los ensayos, a efectos de optimizar la tcnica de
extraccin y extender su aplicacin a otras especies vegetales de inters en
los productores del Valle Inferior del Ro Chubut.
160 1
er
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14-1. AISLAMIENTO Y CULTIVO DE BOTRYOCOCCUS BRAUNII, Y
CARACTERIZACIN DE LOS HIDROCARBUROS PRODUCIDOS
1
Alejandro Acosta Crdenas,
1
Claudia P. Snchez, S.
2
Yamanaka,
2
Nobukazu Kashima,
3
Lucia Atehorta G,
4
John Jairo Ramrez.
1
Laboratorio de Bioprocesos, Facultad de Ingenieria, Universidad de Antioquia, Medelln,
2
Ajinomoto Research Laboratories, Japn;
3
Laboratorio de Biotecnologa Vegetal, Facultad
de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Antioquia, Medelln;
4
Laboratorio de
Limnologa, Instituto de Biologa, Universidad de Antioquia, Medelln.
Botryococcusbraunii es una microalga cosmopolita, que crece en ambientes
de agua dulce produciendo una cantidad inusual de hidrocarburos, de los
cuales se han obtenido gasolinas de alto octanaje por rompimiento cataltico
(cracking). Mediante la caracterizacin de los aceites producidos por la
microalga se han podido establecer tres razas en esta especie: Raza A, B y L,
las cuales se diferencian por el nmero de tomos de carbono en sus aceites,
que comprenden desde C
25
a

C
40
(alcadienos, triterpenos y tetraterpenos res-
pectivamente). La raza B acumula el mayor porcentaje de hidrocarburos (30
al 86 % del peso seco). Tambi n produce pi gmentos como lutei na y
cantaxantina (0,24 % en peso seco), exopolisacridos (250g/m
3
) y su pared
celular la compone un biopolmero (caucho) (9 a 12 % del peso seco) de
resistencia a la degradacin qumica no oxidativa. Adems, de ser una reductora
biolgica del gas carbnico presente en la atmsfera terrestre, reduce sales de
nitratos y fosfatos en aguas residuales domsticas con tratamiento secundario
(hasta 4,0 y 0,03 mg/l de nitrgeno y fsforo respectivamente).
B. braunii fue colectada y aislada de la Laguna del Parque Norte (Medelln -
Colombia), se cultivo en medio CHU 13 modificado empleando NaHCO
3
como fuente de carbono, en erlenmeyer de 500mL; logrando una cintica de
crecimiento de 15 das, una velocidad especifica de crecimiento de 0,097 das
-
1
, y una concentracin de 0,62 g/L de biomasa. Los aceites producidos se extra-
jeron con hexano (30% del peso seco) y analizados por FTIR y GC-MS,
identificando una cadena lineal (89% del total de hidrocarburos)entre 32 y 36
tomos de carbono, los cuales son caractersticos de la Raza B. Por lo tanto la
cepa aislada de B. braunii es una fuente potencial renovable de hidrocarburos
que se pueden utilizar como combustibles y otros qumicos como polisacridos
y pigmentos. Adems podra reducir altas concentraciones de nitratos y fosfatos
al ser cultivada en aguas residuales de tratamiento secundario.
TEMA 14. QUMICA DE MICROALGAS
161 1
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14-2.FIXAO DE CO
2
NO CRESCIMENTO DA MICROALGA
SPIRULINA EM DIFERENTES CONDIES DE CULTIVO
Calheiros M. N., Cerqueira V. S., Radmann E. M., Santos G. C., Costa J. A. V.
*
Laboratrio de Engenharia Bioqumica, Fundao Universidade Federal do Rio Grande
(FURG), Rio Grande, RS, Brasil.
As microalgas tm sido motivo de grande interesse em pesquisas, devido
ao relevante potencial em recursos a serem aproveitados. Alm disso, se
destacam por apresentar al ta produti vi dade e rpi da vel oci dade de
crescimento, podendo duplicar sua biomassa em curto perodo de tempo.
Podem apresentar as substncias celulares em composies e em concentraes
variveis, refletindo a natureza do organismo e a influncia das condies de
cultivo empregadas. Portanto, surge a possibilidade de obter uma mesma
espci e com di st i nt as composi es bi oqumi cas, produzi das pel a
manipulao de alguns fatores. Com isso, este trabalho teve como objetivo
estudar o crescimento da microalga Spirulina variando-se as condies fsi-
co-qumicas e nutricionais de cultivo, iluminncia, fontes de carbono,
nitrognio e temperatura. Para isso, realizou-se um delineamento exploratrio
fracionrio 2
4-1
para cada cepa de microalga, onde os fatores iluminncia,
fonte de carbono, nitrognio e temperatura, variaram nos nveis 1250 Lux
e 2500Lux, CO
2
e NaHCO
2
, 0,5 e 1g/L e 30C e 35C, respectivamente.
Os experimentos foram realizados em fotobiorreatores fechados de modo
descontnuo e as cepas utilizadas foram Spirulina platensisLEB-52, Spirulina
platensisparacas e Spirulina sp. As maiores concentraes finais de biomassa
foram obtidas quando a fonte de C utilizada foi NaHCO
3
, temperatura de
35C, iluminncia de 2500 Lux e 1,0g/L de NO
3
, sendo estas concentraes
de 1,61g/L, 2,25g/L, 1,85g/L, para as microalgas Spirulina platensisLEB-
52, Spirulina platensis paracas e Spirulina sp, respectivamente. Com a
iluminncia de 1250 Lux foram obtidas as menores concentraes de
biomassa para as trs microalgas. Quando as microalgas foram submetidas
i njeo de CO
2
como fonte de carbono, as cepas apresentaram um
comportamento semelhante entre si mesmo com a variao da iluminncia
e da concentrao de NO
3
no meio. A concentrao final de biomassa
maior ou semelhante entre os cultivos com e sem injeo de CO
2
, exceto
quando as mi croal gas foram submet i das aos nvei s superi ores do
planejamento exploratri o 2
4-1
. Com i sso, conclui -se que a mi croalga
Spirulina pode ser cultivada utilizando-se CO
2
como fonte de C quando a
iluminncia fornecida de 2500Lux e 1,0g g/L de NO
3
162 1
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14-3. DETECO DE ATIVIDADE ANTIOXIDANTE EM
EXTRATOS DA CIANOBACTRIA ANABAENA PCC 7119
ATRAVS DE DOIS MTODOS DIFERENTES
1
Josiane R. Domingues;
2
Ktia G. Lima Arajo;
1
Armando U. O. Sabaa Srur;
4
Antnio Jorge R. Silva.
[1] Departamento de Nutrio Bsica e Experimental/UFRJ, Rio de Janeiro;
2] Departamento de Bromatologia/UFF, Niteri;
[3]Ncleo de Pesquisa em Produtos Naturais/UFRJ, Rio de Janeiro.
A oxidao lipdica em alimentos pode ser prevenida pela adio de
antioxidantes, dos quais os sintticos, BHA (butil hidroxianisol), BHT (butil
hidroxitolueno) e TBHQ (terc-butil hidroquinona) so os mais utilizados.
O emprego destes compostos, tem sido alvo de questionamentos quanto a
sua inocuidade, motivando a busca de antioxidantes naturais que possam
substitu-los. As cianobactrias so expostas na fotossntese a condies que
levam formao de radicais livres e outras espcies oxidativas, sendo os
elementos do aparelho fotossinttico vulnerveis a danos fotodinmicos. A
ausncia de danos oxidativos nestes organismos sugere que tenham meca-
nismos de proteo contra oxidao. O objetivo deste trabalho foi avaliar a
atividade antioxidante de extratos de Anabaena PCC 7119 atravs de dois
mtodos, visando a descoberta de novos antioxidantes para alimentos.
Anabaena PCC 7119 foi cultivada em meio BG-11, com irradincia de
200 mMoles de ftons/m. seg sob temperatura de 30 1C por 10 dias,
recuperada atravs de filtrao e liofilizada. A biomassa liofizada sofreu
extraes seqncais com hexano, diclorometano e metanol, dando origem
a trs extratos. Cada extrato foi submetido a filtrao em coluna de carvo
ativo para eliminao de interferentes. A atividade antioxidante foi avaliada
utilizando o material na forma bruta e purificada. O potencial antioxidante
foi verificado atravs da capacidade de reduzir o radical DPPH (1,1- difenil-
2-picril-hidrazil) e, atravs de teste em leo de soja, onde o leo acrescido
de diferentes extratos foi submetido a oxidao trmica e posteriormente foi
medido o ndice de perxidos. As anlises com o DPPH demonstraram
atividade antioxidante nos extratos hexnico e diclorometnico purificados
e metanlico bruto e purificado. Os testes em leo de soja evidenciaram
atividade antioxidante dos extratos hexnico, diclorometnico e metanlico,
na forma purificada. Os resultados permitiram observar que os extratos de
Anabaena PCC 7119 apresentam atividade antioxidante e que as substncias
que conferem tal atividade so de natureza qumica diferenciada uma vez
que foi possvel detectar atividade nos diferentes extratos e atravs dos dois
mtodos, mostrando o potencial da biotecnologia de cianobactria na
produo de novos antioxidantes para uso em alimentos.
163 1
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14-4. AVALIAO DA ESTABILIDADE DE COR DE PIGMENTOS
DE NOSTOC PCC9205 FRENTE A FATORES ENVOLVIDOS NO
PROCESSAMENTO DE ALIMENTOS
1
Lima Arajo KG,
1
MatosSouza JC,
1
Silveira GK,
2
Deliza R, S Ferreira
2
JC.
[1] Departamento de Bromatologia/Universidade Federal Fluminense, Niteri, Brasil; [2]
Embrapa Agroindstria de Alimentos, Rio de Janeiro, Brasil.
A indstria de alimentos depara-se com a necessidade de substituio
dos corantes artificiais utilizados em virtude da toxicologia destes aditivos.
Atualmente, aplicam-se pigmentos vegetais e animais, mas h necessidade
de aumentar a di sponi bi l i dade destes pi gmentos, bem como a sua
estabilidade. Algumas cepas da cianobactria Nostoc sp. tm despertado
interesse pela sua capacidade de produzir ficoeritrina e ficocianina, assumindo
colorao prpura, dependendo das condies de cultivo. O extrato aquoso
da biomassa apresenta colorao uva, revelando um grande potencial para
aplicao em alimentos. O presente trabalho teve como objetivos: (1) extrair
ficobiliprotenas de Nostoc PCC 9205 e (2) estudar a estabilidade dos
pigmentos frente a fatores de importncia no processamento de alimentos.
Nostoc PCC9205 foi cultivado em meio BG11. Foi feita a extrao aquosa
dos pigmentos e foi estudada a estabilidade de cor do extrato frente a
variaes de pH (4,0, 5,5 e 7,0 ), temperatura (40, 60 e 80C) e tempo de
aquecimento (5, 15 e 25 minutos). O desenho experimental foi multifatorial
(central composite design) obtido atravs do software Statistica 5.5. A
avaliao da estabilidade de cor foi efetuada atravs da medida dos parmetros
de cor no sistema Hunter, que foram L*,que descreve o grau de claro e
escuro da amostra, a*(grau de verde (-) e vermelho (+)), b* (grau de azul (-
) e amarelo (+). O pH e a temperatura foram os fatores mais significativos
para a variao do L*, a* e b*. O ndice a* permaneceu positivo nos valores
de pH de 7,0 e 4,0 e em temperaturas entre 65 e 40C, segundo o modelo
estabelecido pelo software utilizado, indicando a manuteno da compo-
nente vermelha da cor das solues. Os valores de b* permaneceram nega-
tivos nas temperaturas entre 40 e 65C, segundo o modelo, indicando
manuteno da componente azul da cor das solues, e a cor azul tendeu a
ser mais pronunciada nos valores de pH de 7,0 e 4,0. Todos os ndices
medidos foram menos estveis no pH 5,5. Os resultados obtidos indicam
que as ficobiliprotenas de Nostoc PCC9205 apresentam potencial para
aplicao em alimentos pouco cidos e cidos, que sofrero tratamento tr-
mico brando durante o processamento. Entretanto, outros experimentos
so necessrios visando estudar a influncia de diversos componentes pre-
sentes nos alimentos sobre a estabilidade de cor das ficobiliprotenas de
Nostoc PCC9205.
164 1
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14-5. GALACTOSIGLICEROL Y OTROS OLIGOSACRIDOS
RELACIONADOS DE LA PARED CELULAR DE COELASTRUM
SPHAERICUM
1
Rodrguez, M.C. AB,
2
Bazan Ducatti, D.R.,
2
Noseda, M.,
3
Cerezo, A.S.
[1] Departamento de Biodiversidad y Biologa Experimental, FCEN, UBA, Buenos Aires,
Argentina [2] Depto. de Bioqumica, Universidade Federal do Parana, Curitiba, Brasil, (3)
Depto. de Qumica Orgnica y CIHIDECAR (CONICET), FCEN, UBA, Buenos Aires,
Argentina
Las algas pueden producir diversos ismeros de glicosilgliceroles que ac-
tan como marcadores especficos de superficie durante la ontogenia celu-
lar, cuya especificidad radica no slo la identidad y secuencia de los residuos
de monosacridos componentes, sino en su geometra de enlace. La detec-
cin de estos compuestos y de diversos oligosacridos en ambientes natura-
les se ha utilizado para denotar la presencia de determinadas especies de
inters econmico o sanitario, como dinoflagelados responsables de mareas
rojas.
Para la identificacin de los componentes superficiales de las paredes
celulares de la microalga verde Coelastrum sphaericumse realiz una extrac-
cin con agua a 80C, obtenindose el producto crudo W80, compuesto
por hidratos de carbono (33%), protenas (58%) y trazas de cidos urnicos.
Dicho tratamiento provoc una marcada desorganizacin de la capa exter-
na columnar. El anlisis de los monosacridos componentes indic la pre-
sencia de manosa (38.1%), galactosa (23%) y glicerol (38.9%). En el
espectro de RMN
13
C aparecen, entre otras, las seales de carbonos
anomricos de b-D.galactopiranosa y b-D-manopiranosa, las seales de los
extremos reductores de dichas hexosas y de los carbonos de anillo, picos de
grupos acetilo y carbonilos y picos correspondientes a los carbonos del gli-
cerol, con sustitucin en C-1. El fraccionamiento de W80 por cromatografa
en BioGelP2, dio tres subfracciones (W80.1-3). La de menor peso molecular
(W80.3), eluy conjuntamente con el estndar de floridsido y estaba com-
puesta por galactosa (52.5%), glicerol (34.6%) y manosa (12.9%). El es-
pectro de RMN mostr las nueve seales correspondientes a los nueve
carbonos del floridsido, conjuntamente con pequeas absorciones de
metilos de grupos acetilo. W80.2, compuesta por manosa y glicerol, mues-
tra en el espectro de RMN las seales de carbonos anomricos de manosa,
conjuntamente con las seales correspondientes a glicerol sustituido en C-
1. El anlisis estructural de los galactosilgicerol y manosilglicerol purifica-
dos se complet por metilacin.
165 1
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14-6.EVALUACIN DE LA PRODUCCIN DE PARAMILON EN
LA CEPA DE EUGLENA GRACILIS WMSmL Y EUGLENA
GRACILIS UTEX 753
Ruiz, L. B., Rocchetta, I., Rios de Molina, M. C., Conforti, V.
Laboratorio de Biologa Comparada de Protistas, Dpto. Biodiversidad y Biologa
Experimental, FCEN, UBA, Ciudad Universitaria, Pab. II, 1428, Buenos Aires. Argentina.
e-mail: lruiz@bg.fcen.uba.ar
Los euglenofitos almacenan como carbohidrato de reserva una sustancia
denominada paramilon (?-1,3- glucano). Este tiene una estructura com-
pleja fibrilar rodeada por una membrana simple, que en las clulas se lo
observa como grnulos altamente cristalinos. El objetivo de este trabajo
consisti en evaluar comparativamente la produccin de paramilon en dos
cepas mutantes no fotosintticas Euglena gracilisBMATEsL y Euglena gracilis
BZ753EsL. Se compararon los resultados obtenidos con los producidos
por sus formas autotrficas (Euglena gracilisMAT y Euglena gracilis Z,
UTEX), y con datos bibliogrficos referidos a otras cepas. Los ensayos se
realizaron utilizando distintos medios de cultivo. Un medio orgnico (EGM,
pH 7) y dos inorgnicos con acetato de sodio como fuente de carbono
(Buetow, pH 7 y Cramer & Myers, pH 4). Las mediciones se realizaron a
las 24 y 96 hs de cultivo. Para la extraccin de paramilon se utiliz una
solucin 1% (p/v) de SDS y 5% (p/v) de EDTANa
2.
Los granos de paramilon
aislados fueron filtrados a travs de una membrana millipore APFC y lleva-
dos a peso seco. Los resultados se expresaron en ?g de paramilon/10
5
clu-
las. Se verific el grado de purificacin realizando el anlisis de protenas
totales. Se evalu tambin el contenido de azucares totales a fin de estimar
el porcentaje correspondiente al paramilon con respecto a ese total.
El grado de purificacin alcanzado de paramilon fue de aproximadamen-
te un 99%, resultando mayor en los cultivos crecidos en EGM. La cantidad
obtenida correspondi a un 40-50% del contenido total de los azcares de
las clulas. La mayor produccin se midi en la cepa Euglena gracilis
WMATSmL (192 ?g paramilon/10
5
)

a las 24 hs (etapa lag del cultivo) cre-
cida en medio EGM, mientras que esta fue significativamente menor en
los cultivos desarrollados en medio Cramer & Myers. La composicin del
medio result ser un factor importante en la produccin de esta sustancia.
Las dos cepas blanqueadas mostraron mayor produccin que sus formas
autotrficas, y tambin que las reportadas en otros trabajos.
166 1
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15-1. UTILIZACIN DE COMPOST DE ALGAS MARINAS: SU
INFLUENCIA EN LAS PROPIEDADES FSICAS Y QUMICAS DE
SUELOS RIDOS Y EN EL CRECIMIENTO DE PLANTAS DE
TOMATE (LYCOPERSICUM ESCULENTUM).
1
Eyras MC y
1
Rostagno CM.
[1] Centro Nacional Patagnico CONICET, Puerto Madryn.
Sobre las playas de Puerto Madryn se deposita una considerable biomasa
de algas marinas bentnicas, la que se recolecta durante los meses de verano
para evitar inconvenientes en el uso recreativo costero. El compostaje es un
proceso ambientalmente sano para el tratamiento de las arribazones y con
potencialidad para producir una enmienda orgnica de buena calidad. El
objetivo del trabajo fue determinar el efecto de la adicin de compost sobre
las propiedades fsicas y qumicas de un suelo de los alrededores de Puerto
Madryn, y sobre el crecimiento de plantas de tomate en estado vegetativo. El
compost fue obtenido en pilas estticas con aireacin pasiva y volteos. Los
ensayos se realizaron en invernculo emplendose un suelo de textura areno
franca, con un bajo contenido de materia orgnica (1,9%). Se realizaron 4
tratamientos: 0% (suelo 100%), 25% (25% compost y 75% suelo), 50%
(50% compost y 50% suelo) y 100% de compost. El mayor contenido en
N, P, y K fue aportado por el alga parda Undaria pinnatifida. La densidad
aparente (porosidad total) y la formacin de agregados en el suelo disminu-
yeron a medida que aument la dosis de compost. La escasa agregacin se
adjudic a la corta duracin del ensayo (33 das) y al bajo contenido de arcilla
del suelo empleado. El agregado de compost aument la capacidad de reten-
cin de agua del suelo. Los parmetros vegetativos (biomasa hmeda y seca,
nmero de hoj as y rea foli ar) de las plantas de tomate aumentaron
significativamente con la dosis de compost. El aumento progresivo de la
concentracin de sales con la adicin de compost no produjo un efecto osmtico
inhibitorio, lo que sugerira la presencia de compuestos osmoprotectores que
aumentan la tolerancia a este tipo de estrs en las plantas de tomate. El
compost de algas usado como enmienda orgnica de suelos con bajos conte-
nidos de materia orgnica, mejora sus propiedades fsicas y qumicas y con-
serva algunas de las propiedades fitoactivas que han sido determinadas en los
extractos comerciales de algas marinas bentnicas.
TEMA 15. USO DE LAS ALGAS EN AGRICULTURA
167 1
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15-2. MTODOS DE CONSERVACIN DE TOLYPOTHRIX
TENUIS EN LA PRODUCCIN DE UN BIOFERTILIZANTE.
Silva, P.G.*; Ferrari, S.G.; Alcarz, L.E. y Silva, H.J.*.
Laboratorio de Alimentos*, rea Microbiologa. UNSL. Chacabuco y Pedernera. 5700-San
Luis. ARGENTINA. Email:pgsilva@unsl.edu.ar
La conservacin de biomasa viable de microalgas y cianobacterias es un aspecto
de gran importancia en diversas aplicaciones biotecnolgicas, particularmente en
acuicultura y produccin de biofertilizantes. En el caso de un biofertilizante seco
y pulverizado, los aspectos relacionados con el mantenimiento de la viabilidad
celular son relevantes tanto en el desarrollo de inculos como en la conservacin
de la biomasa a escala piloto hasta su utilizacin. Estos aspectos han sido estudia-
dos en bacterias y microalgas, siendo muy limitada la informacin disponible en
cianobacterias fijadoras de nitrgeno. En el presente estudio se evalan los efectos
de diferentes tcnicas de preservacin sobre la viabilidad de Tolypothrix tenuis.
Los mtodos ensayados incluyeron la inmovilizacin en perlas de alginato con
o sin previo tratamiento con lactosa o sacarosa al 10%, el uso de fro a 20 C
con glicerol o metanol 1,5 M, liofilizacin con sacarosa o leche (L
L
) al 20% y
desecacin a 30 C en oscuridad (D) con o sin previa exposicin de iones Ca
+2
y Mg
+2
10 mM. La supervivencia celular se estim como porcentaje de recupera-
cin a los 3 y 15 meses de almacenamiento comparando los resultados obtenidos
con subcultivos peridicos en condiciones controladas de luz y temperatura. La
evaluacin de las metodologas descriptas fue adems realizada sobre biomasa seca
finamente pulverizada en trminos del ndice de viabilidad retenida a los 10 das
de crecimiento (IVR
10
), recientemente publicado, en el cual valores iguales a 1
indican incrementos del 100% de la biomasa original y valores iguales a 1
corresponden a muerte celular total. A los 3 meses de almacenamiento se obtuvie-
ron los mayores porcentajes de recuperacin utilizando L
L
y D (84 y 80 %
respectivamente). Con el resto de los mtodos los porcentajes fueron inferiores al
50% de sobrevida. A los 15 meses la mejor tcnica de preservacin correspondi
a L
L
(85 %). Adems, la variacin del IVR
10
fue de 0,96 a 0,08 y 0,98 a 1 para
biomasa desecada con y sin exposicin previa a Ca
+2
y Mg
+2
, en el perodo
comprendido entre los 3 y 15 meses.
Los resultados obtenidos indican que la biomasa de T. tenuisliofilizada
con previa adicin de leche al 20% puede sustituir adecuadamente la forma
tradi ci onal de di sponi bi li dad de i nculos a medi ana escala medi ante
subcultivos peridicos. La inmovilizacin en perlas de alginato y el uso de fro
a 20C no se adecuaran a esta escala de trabajo, a pesar de la sugerencia de
su utilizacin de otros autores para la acuicultura. En el caso especfico de un
biofertilizante cianobacteriano en polvo, la capacidad natural de T. tenuisa la
anhidrobiosis increment notablemente con la adicin de los iones Ca y Mg.
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16-1.CONTROL OF BACTERIAL GROWTH BY MICROALGAE AND
MICROALGAL EXTRACTS FOR AQUACULTURAL PURPOSES
L. Rodolfi,
1
N. Biondi,
1
T. Bacchetti De Gregoris,
1
G. Chini Zittelli,
2
S.
Somigli,
1
M.R. Tredici
1
1
Dipartimento di Biotecnologie Agrarie, University of Florence - P.le delle Cascine 24,
50144 Firenze, Italy.
2
Istituto per lo Studio degli Ecosistemi, CNR Via Madonna del
Piano, 50119 Sesto Fiorentino (FI), Italy.
The interactions between bacteria and phytoplankton are mutual and
can be either positive or negative. In a positive way, bacteria can favour
microalgal growth through the production of vitamins and growth factors,
while organic substances derived from phytoplankton are utilised by bac-
teria as substrate for growth. On the other hand, many bacteria show algicidal
activity or inhibit microalgal growth by excretion of extracellular products
or direct contact. The antibacterial activity of microalgae has been also
described. An emerging field of application of these microbial interactions
is the use of bioactive microalgae and bacteria as probiotics in aquaculture.
The bacterial population associated with algal cells in outdoor mass
cultures of three marine microalgae and the activity of 26 microalgal strains
against some common pathogenic bacteria of marine fishes and molluscs
will be described.
The outdoor mass cultivation of Tetraselmissuecica, Isochrysissp. CS177
and Nannochloropsissp., was performed in annular columns of 115 L culture
volume during the summer time. The cultures were kept both in batch
and in semi-continuous with a daily harvest of 40% of the culture volume.
The total cultivable bacteria were determined by plating dilutions of the
cultures in Petri dishes using the algae growth medium (artificial seawater
enriched with F medium nutrients) added with 0.2% glucose, 0.2 yeast
extract and 0.5% peptone. The plates were incubated at 25 C and the
CFU were counted after 2-3 and 6-7 days. The CFU number was one
order of magnitude higher in Isochrysisthan in Tetraselmisand Nannochloropsis
cultures and did not change significantly during the whole growth period.
In Tetraselmiscultures a reduction of the number of bacterial species was
observed during the cultivation period.
For the screening of the antibacterial activity, 26 strains of microalgae
comprising 12 different freshwater and marine genera commonly used in
TEMA 16. UTILIZACIN DE ALGAS EN ACUICULTURA
169 1
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aquaculture were grown in 0.6 1 L glass tubes bubbled with air:CO
2
(98,2)
under artificial illumination. The biomass was centrifuged, lyophilised and
extracted overnight with pure methanol. The extract was filtered, evaporated
and resuspended i n a known volume of solvent. Ali quots of extract
(corresponding to 5 and 20 mg of biomass) were dispensed in 1 cm filter
paper disk and placed in a Petri dish with Marine Agar (Difco 2216, USA) or
Nutrient Agar (Merck, Germany) inoculated with the test organism. Each
algal extract was tested against Aeromonas hydrophila, Listonella anguillarum,
Photobacteriumdamselae, Vibrio mytili, Yersinia ruckeri. The inhibition zone
was measured after 2-7 days of incubation at 25 or 30 C depending on the
bacterial strain. Five of the microalgal strains tested were active against L.
anguillarum. The other bacteria were not sensitive to the microalgal extracts.
16-2. ANLISIS DEL COMPORTAMIENTO DE LA PARED
CELULAR DE LOS CISTOS DE HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS
(CHLOROPHYTA) DURANTE SU GERMINACIN Y SU
IMPLICANCIA EN LA EXTRACCIN DE ASTAXANTINA
Damiani, M.C.;
1
Leonardi, P.I.;
1
Cceres, E.J.
1
& Pieroni, O.I.
2
1
Laboratorio de Ficologa y Micologa, Departamento de Biologa, Bioqumica y Farmacia.
Universidad Nacional del Sur.
2
Instituto de Qumica Orgnica, Departamento de Qumica.
Universidad Nacional del Sur, Baha Blanca, Argentina.
El alga verde HaematococcuspluvialisFlotow posee la capacidad de sintetizar
y acumular astaxantina durante la formacin de los cistos, razn por la cual se la
cultiva masivamente con fines comerciales. La pared celular de estos cistos re-
sulta en muchos casos un impedimento para la extraccin de este pigmento
debido a su extraordinaria resistencia a procesos fsicos y qumicos. Por tal mo-
tivo se estudi en detalle la estructura fina y la composicin qumica de la pared
de cistos maduros, con el fin de aportar datos que permitan disear tcnicas
ms previsibles para su ruptura y optimizar la extraccin del pigmento.
La pared celular estuvo formada por tres capas claramente diferenciadas
estructural y qumi camente: una externa tri lami nar y compuesta por
esporopolenina, y dos fibrilares, media e interna, de aspecto homogneo y
PATAg negativas.
Durante la germinacin, el aumento de tamao de los cistos produjo la
ruptura de las capas externa y media, y la extensin y posterior ruptura de
la capa interna, con la consecuente liberacin de 8 a 16 zosporas con
pared delicada. Para la extraccin de astaxantina se propone la induccin de
la germinacin como un proceso natural de ruptura de los cistos y la poste-
rior ruptura mecnica de las zosporas liberadas.
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16-3. INDOOR CULTIVATION OF THE EDIBLE GREEN
SEAWEED Monostroma sp. (CHLOROPHYTA): INDUCTION OF
ZOOIDS RELEASE, RECRUITMENT AND GROWTH
1
Pellizzari, FM,
1
Oliveira, EC,
2
Yokoya, NS &
3
Absher TM.
[1] Universidade de So Paulo, Inst. Biocincias, Dept. Botnica. C. Postal 11461. 05422-
970 - So Paulo, SP. Brasil.; [2] Instituto de Botnica, Seo de Ficologia. C. Postal 4005.
01061-970 So Paulo, SP. Brasil.; [3] Centro de Estudos do Mar Universidade Federal do
Paran. Av. Beira Mar s/no. Pontal do Sul PR. Brasil.
The interest and needs to search new alternatives of income for coastal
communities are growing nowadays due to a decrease in fisheries yield,
impoverishment and loss in quality of life. In spite of consumption of
seaweeds in Brazil is constrained by lack of tradition and information on its
edibility, we believe that the production of edible algae can be a good
income choice for coastal dwellers of Paran state, southern Brazil. Among
the local seaweed with a potential for exploitation, we focused on Monostroma
sp. that is traditionally cultivated in Japan for its good taste and high
nutritional value. Here we provides basic information about biotechnological
aspects of artificial seeding and growth of Monostroma sp. cultivated in
indoor tanks. Zooids release was tested seasonally under different treatments.
The best treatment to induce zooid release in laboratory was obtained with
a combi nati on of mi l d desi ccati on, under darkness, fol l owed by a
temperature shock. Indoor recruitment of zooids on polypropylene nets
was obtained by inducing thalli (biomass: 50 g DW) to seed in a tank with
nets placed on the bottom. During winter, induction could be promoted
by drying fronds overnight in the dark, placing the nets in the next morning
on a tank with seawater (30 psu) warmed till 23C. During summer,
drained fronds were kept in the freezer for 20 min, before being transferred
to the tank with seawater. After zooid release, the thalli were removed and
aeration interrupted for 48 hours before nets transplantation to the sea.
Monostroma sp. cultivated for a winter period of 60 days in indoor tanks
showed growth rates of 6.24 and 5.3 %.day
-1
with and without aeration,
respectively. Although nets can be recruited directly in the sea, we believe
that indoor seeding has advantages on recruitment optimization during
bad physical and meteorological conditions. Moreover, this method provides
a better control of the production, as well as quality control of the selected
mother plants, which could produce descendents with higher trade potential.
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16-4. LA INCORPORACIN DE MINERALES Y
OLIGOELEMENTOS PUEDE MODIFICAR EL PERFIL
BIOQUMICO DE LA DIATOMEA PHAEODACTYLUM
TRICORNUTUM?
Ronsn-Pauln,
1,2,3
J. A; Otero,
1
A; Domnguez,
1
A; Ferreira,
1
M,
Medina-Reyna,
2
C. E; ; Fbregas
1
, J
1
USC Universidade de Santiago de Compostela, Dep. Microbiologa, Facultad Farmacia,
15706 Santiago de Compostela, Espaa.
2
UMAR, Universidad del Mar, Laboratorio
Alimento Vivo, Ciudad Universitaria, Campus Puerto Angel, C.P. 70906, A.P. No.47.
Oaxaca, Mxico.
3
CCMAR - Centro de Cincias do Mar. Universidade do Algarve-F.C.M.A.
Campus de Gambelas 8000-117 Faro Portugal ronsonj@hotmail.com, ronsonj@usc.es,
ronsonje@ualg.pt
Las microalgas son la base de la cadena alimenticia en el ocano, por lo
que en acuicultura son empleadas como alimento en el desarrollo larval de
peces, crustceos, moluscos y microcrustceos. El crecimiento y la supervi-
vencia larval estn altamente influenciados por la composicin bioqumica
de las microalgas; hecho que ha sido corroborado por diversos autores, los
cuales se centran en la composicin proximal de carbohidratos, protenas y
lpidos. Sin embargo los minerales y oligoelementos son tambin impor-
tantes en el desarrollo larval (tanto para su morfologa como fisiologa),
existiendo muy pocos estudios que hacen mencin acerca de ellos. En el
presente trabajo se estudio la capacidad de la diatomea Phaeodactylum
tricornutumpara bioacumular Mg, Ca, Se, Si, S, Zn, Fe y Cu y su influencia
en el perfil bioqumico de la microalga.Como resultado pudimos observar
que l a densi dad cel ul ar, l a producti vi dad, el perfi l bi oqumi co y l a
bioacumulacin de estos elementos, dependen de la concentracin de cada
uno de estos en el cultivo. Sobre esta base la diatomea Phaeodactylum
tricornutum podra ser uti li zada para la transferenci a de mi nerales y
oligoelementos a lo largo de la cadena alimenticia, lo cual nos proveera de
una importante herramienta. A traves de ella se podra incorporar en con-
centraciones adecuadas en el alimento vivo y/o inerte elementos implica-
dos en i mportantes procesos como l a supervi venci a, metamorfosi s,
crecimiento y pigmentacin.
Key words: biochemical profile, macro and micronutrients, Phaeodactylum
tricornutum
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16-5.DESARROLLO DE BIOPELCULAS MIXTAS DIATOMEAS-
BACTERIAS OPTIMIZADORAS DE CULTIVOS DE MOLUSCOS
Fernando R. Silva,
1
Claudia Infante
1
y Carlos E. Riquelme.
1
[1] Facultad de Recursos del Mar, Universidad de Antofagasta, Chile.
La etapa de fijacin y asentamiento larval de moluscos requiere de
substratos impregnados de microorganismos. Generalmente esto se desa-
rrolla inespecficamente y con desconocimiento de los microorganismos
presentes en las biopelculas. De esta forma los resultados de asentamiento
larval son muy variables. Las seales inductoras del asentamiento aun no
estn claramente conocidas. Sin embargo proveer a las larvas de substratos
adecuados es esencial para esta etapa del ciclo de vida. En el presente estu-
dio se evalu in vitro el efecto en la fijacin y metamorfosis de larvas del
Ostin de Chile, Argopecten purpuratus; de biopelculas microbianas vivas
y sus exudados bioatrapados en una matriz inerte (Phytagel
TM
). Primero se
evalu el efecto de la colonizacin microbiana en poliestireno de las cepas
bacteri anas Halomonas sp (NC1) y Alteromonas sp (Ni 1); bi opelcula
microalgal de la cepa Amphora sp (Amp) y biopelculas mixtas bacteria-
microalga. Posteriormente se aplicaron en la matriz inerte los siguientes
tratamientos con sus respectivos controles: (1) productos extracelulares (PE)
de cada biopelcula microbiana. (2) extractos orgnicos a partir de los PE.
(3) dilisis de los PE (1200 Da y 12000 Da). Finalmente se realiz una
caracterizacin preliminar de la capacidad estimuladora de las biopelculas
seleccionadas (Amp, NC1 y Amp+NC1) para lo cual se realizaron los si-
guientes tratamientos (1) PE tratados con Proteasa, (2) PE tratados con
Peptidasa (3) PE tratados con calor (80C). Los resultados fueron compara-
dos por medio de un ANOVA (a= 0.05). Los resultados nos revelaron me-
jores valores en el porcentaje de larvas fijadas y metamorfoseadas donde se
utiliz NC1, Amp y NC1 + Amp en relacin a sus respectivos controles
(P<0.05), a excepcin de los dializados a 12000 Da y de los extractos org-
nicos (Fase no polar) (P>0.05). La caracterizacin preliminar de la sustan-
cia estimuladora nos indica que la estimulacin es producida por una
sustancia de naturaleza proteica y/o peptdica, termoestable, polar y de un
peso molecular entre 1200 Dalton y 12000 Dalton. Lo anterior sugiere
que es factible desarrollar biopelculas mixtas bacteria-diatomea y que los
productos extracelulares de estas biopelculas podran ser utilizadas para el
mejoramiento de la produccin de semillas del Ostin de Chile.
Financiamiento: FONDEF D02I1098
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I CONGRESO LATINOAMERICANO
SOBRE BIOTECNOLOGA ALGAL
I CONGRESSO LATINOAMERICANO
EM BIOTECNOLOGA ALGAL
NOVAS PERSPECTIVAS PARA A AMRICA LATINA
I LATINAMERICAN CONFERENCE
ON ALGAL BIOTECHNOLOGY
NEW HORIZONS FOR LATIN AMERICA
25-29 OCTUBRE 2004 | 25-29 OCTOBER 2004
PROGRAMA DEL CONGRESO
CONGRESS PROGRAMME
CURSO PRECONGRESO
SBADO 23 DE OCTUBRE
CURSO
Ficorremediacin, dictado por la Dra. Eugenia Olgun, Jefa del Departamento de
Biotecnologa Ambiental, Instituto de Ecologa, A. C. Xalapa, Veracruz (Mjico).
LUGAR
Aula Burkart del Departamento de Biodiversidad y Biologa Experimental de la
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires. Pabelln II, 4to.
Piso.
Ciudad Universitaria, Nez, Intendente Giraldes 2620, Ciudad de Bs. Aires.
HORARIO
09.30 h Acreditacin al Curso pre-Congreso
10.00-13.00 h Inicio.1ra. Parte del Curso
13.00 a 14.00 h Almuerzo
14.00 a 17.00 h 2da. Parte del Curso.
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LUNES 25 DE OCTUBRE
MONDAY 25th OCTOBER
08.30 10.00 h Acreditacin al Congreso y Cursos: Cianobacterias txicas: metodo-
loga actual para el anlisis de cianotoxinas y de diagnstico molecular de estirpes
toxinognicas y Produccin industrial y semi-industrial de microalgas. Ubicacin de
posters correspondientes a los Temas 1-4, 6-8, 10 y 11 en los paneles asignados.
10.00 10.10 h Palabras de Bienvenida a cargo de la Dra. Mara Cristina Zaccaro.
CONFERENCIAS/ LECTURES
10.10 10.50 h Conferencia de Apertura/Opening lecture. Old and new strategies
to realise algologists ultimate goal: 10% solar energy conversion efficiency. Dr. Mario
Tredici. (Italia)
10.50 11.30 h Biotecnologa de Cyanobacteria. Dra. Gloria Zulpa (Argentina)
11.30 12.00 h INTERVALO/COFFEE BREAK
PRESENTACIONES ORALES/ORAL PRESENTATIONS
12.00 12.20 h Biofixation of fossil CO2 by microalgae mass cultures: outdoor
comparative tests of biomass productivity using flue gas CO2 from a natural gas combined
cycle power plant.
Federico Capuano, Gioia Lamenti, Luciano Ritorto, Giuseppe Scolla, Mario Valdiserri
and Paola Maria Pedroni.
12.20 12.40 h Las poblaciones macroalgales de inters econmico de Tierra del
Fuego y su problemtica. Mendoza M. L.
12.40 13.00 h Las diatomeas y las ciencias forenses en argentina: diagnstico de
muerte por sumersin. Maidana, Nora I., Trezza, Fernando, Rennella, Armando.
13.00 14.30 h ALMUERZO/ LUNCH
14.30 15.10 h El futuro del cultivo de microalgas: proteccin del medio ambien-
te. Dr. John R. Benneman (USA).
15.10 15.50 h Produo de Biodisel a partir de microalgas. Dr. Jorge V. Costa
(Brasil).
15.50 16.20 h INTERVALO/ COFFEE BREAK
17.00 19.00 h. COCTEL DE BIENVENIDA/WELCOME COCKTAIL
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MARTES 26 DE OCTUBRE
TUESDAY 26 th OCTOBER
08.00 08.15 h Acreditacin en el CURSO
08.15 09.45 h 1ra Parte del Curso Cianobacterias txicas: metodologa actual para
el anlisis de cianotoxinas y de diagnstico molecular de estirpes toxinognicas, Prof.
Francisca F. del Campo y Youness Ouahid. Departamento de Biologa de la Facultad de
Ciencias, Universidad Autnoma de Madrid. (Espaa).
10.00 10.40 h Spirulina for health and development . Dr. Lic Charpy (Francia).
10.40 11.20 h Algae and Health: Spirulina (Arthrospira) as a case in point. Dr.
Amha Belay (USA) .
11.50 12.30 h Fotobiorreactores. Dr. Emilio Molina Grima (Espaa).
12.30 12.50 h Una experiencia en el cultivo comercial de Arthrospira platensis
(Spirulina) Medina MA, Dur LN, Saporiti SP, Lara MA.
12.50 13.10 h Anlisis de secuencias ribosomales y potencial biotecnolgico como
fuente de ficocianina de una cepa chilena de Spirulina y de dos cepas del gnero Arthrospira
(Cyanophyceae). Patricia Gmez, Alejandra Barriga y Mariela Gonzlez.
13.10 14.30 ALMUERZO/ LUNCH
14.30 15.10 h Produccin industrial y semi industrial de microalgas: desarrollo y
perspectivas en Amrica Latina. Ing. Francisco Ayala (Chile).
15.10 15.30 h Outdoor mass cultivation of Isochrysis aff. galbana (T-ISO) in
annular columns. Dra. Graziella Chini Zittelli (Italia).
15.30 15.50 h Comparacin de la productividad en cultivos con y sin invernadero de
Arthrospira maxima en el desierto de Atacama, Chile. Guido Manetti M., Anbal Ayala R.
15.50 16.10 h Crecimiento auto- y mixotrfico y carotenognesis no-inducida de
cuatro cepas chilenas de Haematococcus pluvialisflotow (Chlorophyceae) bajo condiciones
controladas de laboratorio. Gonzlez MA, Cifuentes AS, Gmez PI.
16.40 17.00 h Micropropagacin mediante explantes de Gracilaria chilensisbird,
Mc Lachlan & Oliveira. Gloria Collantes , Carlos Melo & Arturo Candia.
17.00 17.20 h Utilizacin de fertilizantes agrcolas en el cultivo de gametofitos de
Gigartina skottsbergii (Rhodophyta, Gigartinales) bajo condiciones de laboratorio.
Mansilla A., M. Palacios & J. Plana.
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17.20 17.40 h Manipulacin y manejo de elementos de reproduccin para el
cultivo de Rhodophyta. Krisler Alveal V.
17.40 19.00 h SESIN DE POSTERS / POSTERS SESSION. Se podr consultar
a los autores de los posters correspondientes a los Temas 1-4, 6- 8, 10 y 11, quienes se
ubicarn frente a los mismos. Los autores debern retirar sus posters al finalizar la sesin.
MIRCOLES 27 DE OCTUBRE
WENSDAY 27 th OCTOBER
09.00 18.00 h EXCURSIN
JUEVES 28 DE OCTUBRE
THURSDAY 28 th OCTOBER
8.00 9.45 h 2da. Parte del Curso Cianobacterias txicas: metodologa actual para el
anlisis de cianotoxinas y de diagnstico molecular de estirpes toxinognicas, Prof. Fran-
cisca F. del Campo y Youness Ouahid. Departamento de Biologa de la Facultad de Cien-
cias, Universidad Autnoma de Madrid. (Espaa).
ACTIVIDADES DEL CONGRESO/ CONGRESS PROGRAM
9.45 h 10.00 h Ubicacin de los posters correspondientes a los Temas 5, 9 y 12 - 16
en los paneles asignados.
10.00 10.40 h The use of exopolysaccharide-producing cyanobacteria for the
removal of heavy metals from poluted water. Dr. Roberto De Phillippis (Italia).
10.40 11.20 h Ficorremediacin: una tecnologa eficiente y verstil para la remo-
cin de nutrientes y metales pesados. Dra. Eugenia Olgun (Mjico).
11.50 12.10 h Utilizacin de compost de algas marinas: su influencia en las propie-
dades fsicas y qumicas de suelos ridos y en el crecimiento de plantas de tomate (Lycopersicum
esculentum).
Eyras MC y Rostagno CM.
12.10 12.30 h Diseo de una red de monitoreo de la calidad del agua y el estado
ecolgico de las cuencas de los ros Guadalquivir, Guadalete y Barbate (Espaa).
Toja Santillana, J., Casco, M.A., Sala, S. E., Martn Farfn, G., Reyes Brbara, I., Ogalla
Garca, V., Fernndez-Mensaque, P. C.
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12.30 12.50 h Potencial de crecimiento algal y lipoperoxidacin en Ankistrodesmus
falcatusexpuesta a las aguas de 9 embalses de la Cuenca del Ro Lerma, Mxico.
Eugenia Lpez-Lpez, J. Elas Sedeo-Daz, Liliana Favari Perozzi.
12.50 14.30 ALMUERZO/ LUNCH
14.30 15.10 h Aplicaciones clnicas de toxinas paralizantes. Dr. Nstor Lagos
(Chile).
15.10 15.30 h Cyanotoxinas en el Ro de la Plata.
Daro Andrinolo, Paulo Pereira, Leda Giannuzi, Claudia Aura, Silvia Massera, Nstor
Lagos, Carlos Garca, Noem Zaritzky y Ricardo Echenique.
15.30 15.50 h Presencia de Microcystisy microcistinas en el embalse Los Molinos,
Crdoba.
Raquel Bazn, Mara Valeria Am, Andrs Rodrguez, Daniel A. Wunderlin y Fanny
Busso.
15.50 16.10 h Bioensayos realizados in situ con microalgas para evaluar la calidad
del agua de sistemas lticos pampeanos.
Gmez N., Bauer D. E., Ruiz L., Conforti V.
16.40 17.00 h. Transformacin gentica de Phormidium animalispor medio de
biobalstica y con vectores de clonacin para plantas superiores.
Vzquez-Martnez M. G., Rodrguez M. H., Hernndez-Hernndez F., Cabrera-Ponce
J. L., Ibarra J. E.
17.00 17.20 h Phosphorylation of map kinase-like proteins mediate the response of
the halotolerant alga Dunaliella viridisto hypertonic shock.
Carlos Jimnez, Tomas Berl, Christopher J. Rivard, Charles L. Edelstein and Juan M.
Capasso.
17.20 18.30 h SESIN DE POSTERS / POSTERS SESSION. Se podr consultar a
los autores de los posters correspondientes a los Temas 5, 9 y 12 - 16, quienes se ubicarn
frente a los mismos. Los autores podrn dejar en exhibicin sus posters hasta el da viernes 29.
21.00 h CENA DE GALA / GALA DINNER
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VIERNES 29 DE OCTUBRE
FRIDAY 29 th OCTOBER
10.00 10.40 h Microalgae growing under extreme environmental conditions. Dr.
Shigetoh Miyachi (Japn)..
10.40 11.20 h Polisacridos sulfatados de algas rojas- estructura y actividad antiviral.
Dra. Mara Cristina Matulewicz (Argentina).
11.20 11.50 h INTERVALO/COFFEE BREAK.
11.50 12.10 h Actividad elicitora en plantas de tabaco y de tomate de fracciones de
cido algnico de Lessonia del litoral chileno.
Chanda, N. P., Dennet, G., Laporte, D., Matsuhiro, B. y Moenne, A.
12.10 12.40 h Sustancias bioactivas en Enteromorpha compressa L., un alga verde con
valor nutricional. Mara L. Flores, Cecilia Crovetto y Osvaldo L. Crdoba.
12.40 13.00 h Control of bacterial growth by microalgae and microalgal extracts for
aquacultural purposes
L. Rodolfi, N. Biondi, T. Bacchetti De Gregoris, G. Chini Zittelli, S. Somigli, M.R.
Tredici.
13.00 13.10 h CONCLUSIONES DEL CONGRESO. Palabras de despedida a
cargo de la Dra. V. Conforti. Los autores de los Posters correspondientes a los Temas 5, 9 y
12 - 16 podrn retirarlos de los paneles.
13.10 14.30 h ALMUERZO/ LUNCH
CURSO POSTCONGRESO
14.30 14.45 Acreditacin al Curso. Auditorio Sede Congreso.
14.45 16.15 1ra. Parte del Curso Produccin industrial y semi-industrial de
microalgas a cargo del Ing. Francisco Ayala de Solarium Biotechnology SA e Inyde SA,
Chile.
16.15 16.45 h. INTERVALO/COFFE BREAK
16.45 18.15 h 2da. Parte del Curso Produccin industrial y semi-industrial de
microalgas
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LISTA DE AUTORES
Absher,T.M.....................................................................................................................16-3
Acien Fernndez, F.G ....................................................................................... 9,10-3,11-1
Acosta Cardenas, A.........................................................................................................14-1
Adrinolo, D.......................................................................................................9-1, 9-3, 9-4
Albarracn, I....................................................................................................................13-6
Alcarz, L.E.......................................................................................................... 11-2 ,15-2
lvarez, S.B........................................................................................................................4-2
Am, M.V........................................................................................................................9-18
Amora-Lazcano, E...........................................................................................................13-5
Andrade, M.R...........................................................................................................2-2, 2-3
Arruda, A.S. ..............................................................................................................2-2, 2-3
Astorga, M.S.......................................................................................................................9-2
Atehorta G L.................................................................................................................14-1
Aura, C......................................................................................................................9-1, 9-3
Ayala, A............................................................................................................................11-3
Ayala, F...........................................................................................................................2.III.
Bacchetti De Gregoris, T.................................................................................................16-1
Balzaretti, V......................................................................................................................9-14
Barriga, A...........................................................................................................................2-4
Bauer, D.E.................................................................................................................9-6, 9-11
Bazn, G............................................................................................................................4-2
Bazn, R..........................................................................................................................9-18
Bazan-Ducatti, D.R. ......................................................................................................14-5
Belay, A. ..............................................................................................................................13
Bennemann, J. .....................................................................................................................3
Bernardos, J. N. ................................................................................................................4-2
Berl, T. ............................................................................................................................12-1
Bertolin, T.E. ....................................................................................................................2-3
Biasotti, A.E. .....................................................................................................................4-2
Biondi, N. ......................................................................................................................16-1
Burkert, J.F.M. ..................................................................................................2-2, 3-3, 3-4
Busso, F. ..........................................................................................................................9-18
Cabrera Ponce, J.L. .........................................................................................................12-2
Cceres, E.J. ....................................................................................................................16-2
Calheiros, M.N. .............................................................................................................14-2
Calisto, N.C. .....................................................................................................................9-2
Candia, A. .........................................................................................................................3-1
Caete, M. ...............................................................................................................9-3, 9-4
Caizares-Villanueva, R.O. ...................................................................................5-3, 12-5
Cano, M. G. .....................................................................................................................4-9
Capano, A. V. ...................................................................................................................5-1
Capasso, J.M. .................................................................................................................12-1
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Capuano, F. ......................................................................................................................5-2
Carlozzi, P. ........................................................................................................................5-5
Carlucci, M.J. ...................................................................................................................2-5
Carnevalle, S. ....................................................................................................................5-5
Carstens, M.R. .................................................................................................................3-2
Casco, M.A. ...........................................................................................................4-9, 4-17
Castro, Centeno-Ramos, C. ..........................................................................................13-5
Cerezo, A.S. ..........................................................................................................13-4, 14-5
Cerqueira, V.S. .......................................................................................................2-3, 14-2
Chanda Parra, N.P. ........................................................................................................13-1
Charpy, L. ............................................................................................................................4
Chini Zitelli, G. ........................................................................................................ 5,16-1
Cifuentes, A.S. .....................................................................................................10-2, 10-4
Claps, M.C. ......................................................................................................................4-9
Collantes, G. .....................................................................................................................3-1
Conde, M.E. ..................................................................................................................10-5
Conforti, V. .......................................................................................9-6, 9-14, 12-3, 14-6
Conte-Grand, C. ..............................................................................................................4-3
Crdoba, O.L. ...............................................................................................................13-2
Correa, J.A. ......................................................................................................................4-10
Cortias, T.I. .....................................................................................................................1-2
Cossio, B.R. ....................................................................................................................10-6
Costa, J.A.V. .............................................................................11,2-2, 2-3, 3-3, 3-4, 14-2
Crovetto, C. ...................................................................................................................13-2
Cumino, A.C. ........................................................................................................4-4, 10-7
Da Rodda, C. ...................................................................................................................4-5
Daga, C. ..........................................................................................................................9-13
Damiani, M.C. ...............................................................................................................16-2
Damonte, E.B. .......................................................................................................2-5, 13-4
De Philippis, R. ...................................................................................................................6
Deliza, R. ........................................................................................................................14-4
Dennet, G. .....................................................................................................................13-1
Devercelli, M. ...................................................................................................................5-4
Domingues, J.R. .............................................................................................................14-3
Domnguez, A. ..............................................................................................................16-4
dos Santos Ferreira,V. .....................................................................................................12-3
Dri, S.D. .........................................................................................................................10-7
Dure, L.N. ........................................................................................................................8-1
Echenique, R. .................................................................................................4-14, 9-1, 9-3
Edelstein,.C.L. ................................................................................................................12-1
Eyras,M.C. .....................................................................................................15-1
Fabbio, F. ..........................................................................................................................9-5
Fbregas, J. .....................................................................................................................16-4
Favari-Perozzi, L. ..................................................................................................9-10, 9-16
Fernndez, C. ...................................................................................................................4-6
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Fernndez Belmonte, C. ................................................................................................4-13
Fernndez del Campo, F. ...................................................................................................II
Fernndez Mensaque, P.C. ............................................................................................9-17
Fernndez Sevilla, J.M. ....................................................................................9,10-3, 11-1
Ferrari, S. .....................................................................................................5-6, 11-2, 15-2
Ferreira, M. ....................................................................................................................16-4
Flores, M.L. ............................................................................................................2-5, 13-2
Freile-Pellegrin, Y. ..........................................................................................................12-6
Galvagno, M.A. .....................................................................................................2-6, 4-15
Garcia, C. ......................................................................................................................7,9-1
Garca, J. .........................................................................................................................11-1
Garca Camacho, F. ..............................................................................................................9
Garca-Malea Lpez, M.C. ............................................................................................10-3
Garduno,K. ......................................................................................................................5-3
Garrido, R. ...........................................................................................................................7
Gauna, M.C. ....................................................................................................................4-7
Gaviln-Daz, R.A. ........................................................................................................4-14
Giannuzzi, L. ...................................................................................................9-1, 9-3, 9-4
Giarrocco, L.E. ...............................................................................................................10-5
Gigena, M. ....................................................................................................................13-6
Goecke Saavedra, F. ........................................................................................................13-3
Golbeck, L. .......................................................................................................................2-2
Goldbeck, R. ....................................................................................................................5-7
Gmez, N. ..............................................................................................................9-6, 9-11
Gmez, P. .....................................................................................................2-4, 10-2, 10-4
Gonella, M. ....................................................................................................................9-13
Gonzlez, D.M. ................................................................................................................5-6
Gonzlez, M. ......................................................................................2-4, 10-2, 10-4, 13-3
Guerra-Martnez, S.L. ......................................................................................................9-7
Guerrero, J.M. ..................................................................................................................9-8
Guerrero, S. ......................................................................................................................9-2
Guinder, V.A. ...................................................................................................................4-8
Guzmn, G.C. .................................................................................................................5-6
Hernandez-Hernndez, F. .....................................................................................3-5, 12-2
Hualde, P.R. ......................................................................................................................9-11
Ibarra, J.E. ..............................................................................................................3-5, 12-2
Infante, C. ......................................................................................................................16-5
Intartaglia, C. ...................................................................................................................9-8
Jimnez, C. ...........................................................................................................10-6, 12-1
Jurez, . ...........................................................................................................................9-9
Kalil, S.J. ................................................................................................................... 3-3, 3-4
Kashima, N. ...................................................................................................................14-1
Kieffer, L. ..........................................................................................................................5-4
Krisler, A. ..................................................................................................................7-1, 7-2
Krohling, M. .................................................................................................................. ..5-4
184 1
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I SBN N 987-1130-32-5
Kuhn, K.R. .......................................................................................................................3-3
Labovsky, V. ...................................................................................................................12-3
Lagos, M. .............................................................................................................................7
Lagos, N. ..................................................................................................................... .7, 9-1
Lamenti, G. ......................................................................................................................5-2
Langlade, M.J. ......................................................................................................................4
Laporte, D. .....................................................................................................................13-1
Lara, M.A. ........................................................................................................................8-1
Lavigne, A.S. ................................................................................................................. .4-16
Leonardi, P.I. ........................................................................................................4-10, 16-2
Levin, M.J. .....................................................................................................................12-3
Licursi, M. ......................................................................................................................9-11
Lima Araujo, K.G. ..............................................................................................14-3, 14-4
Lobasso, K.F. .....................................................................................................................2-1
Lombardi, L.O. ................................................................................................................9-8
Lpez de Kahatchikian, L. ...............................................................................................2-1
Lpes, E.J. ........................................................................................................................5-7
Lpez Parra, N.; Lpez-Lpez, E. .......................................................................9-10, 9-16
Mac.Donagh, M.E. ..........................................................................................................4-9
Magan, J.J. ......................................................................................................................11-1
Magdaleno, A. ...............................................................................................................9-12
Maidana, N. .....................................................................................................................1-1
Manancour, A. .....................................................................................................................3
Mancini, M. ...................................................................................................................9-13
Manetti Miranda, G. .....................................................................................................11-3
Mangeaud, A. ..................................................................................................................4-13
Mansilla, A. ............................................................................................................4-1, 10-1
Martin Farfan G. .............................................................................................................9-17
Marcozzi, C. ..................................................................................................................10-7
Martnez-Jernimo, F. ..........................................................................5-3, 9-7, 12-4, 12-5
Massera, S. ................................................................................................................9-1, 9-3
Matos Souza, J.C. ...........................................................................................................14-4
Matsuhiro, B. .................................................................................................................13-1
Matulewicz, M.C. ......................................................................................................8,13-4
Mazzuca, M. ..................................................................................................................9-14
Medina, M.A. ...................................................................................................................8-1
Medina-Jaritz, N. ...........................................................................................................12-4
Medina-Reyna, C.E. ......................................................................................................16-4
Melo, C. ............................................................................................................................3-1
Mendoza, M.L. ................................................................................................................4-11
Miravalles, A.B. .....................................................................................................4-10, 4-12
Miyachi, S. ..........................................................................................................................14
Moenne, A. ....................................................................................................................13-1
Molina Grima, E. .............................................................................................9,10-3, 11-1
Montes-Villafan, S. .............................................................................................12-4, 12-5
185 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
Murialdo, R. ..................................................................................................................4-13
Narvez Zapata, J. ..........................................................................................................12-6
Navarro, N. ...............................................................................................................4-1, 9-2
Negri, R. ...........................................................................................................................4-4
Niell, F.X. ........................................................................................................................10-6
Nizovoy, A. ......................................................................................................................4-12
Noseda, M. .....................................................................................................................14-5
Ogalla Garcia, V. ..............................................................................................................9-17
Olgun, E. .......................................................................................................................I,10
Oliveira, E.C. .................................................................................................................16-3
Olvera-Ramirez, R. .............................................................................9-7, 12-4, 12-5, 13-5
Otero, J. ..........................................................................................................................16-4
Ouahid, Y. ...........................................................................................................................II
Palacios, M. .............................................................................................................4-1, 10-1
Palma, R.M. ......................................................................................................................5-1
Parodi, E.R. ........................................................................................4-3, 4-5,4-6, 4-7, 4-8
Pedroni, P.M. ...............................................................................................................3, 5-2
Pellizzari, F. .....................................................................................................................16-3
Perales, S. ..........................................................................................................................3-2
Peralta, R. ..........................................................................................................................3-2
Pereira, P. ...........................................................................................................................9-1
Prez, J. ...........................................................................................................................11-1
Prez, R. ............................................................................................................................3-2
Pieroni, O.I. ....................................................................................................................16-2
Pierotto, M. ..............................................................................................................9-5, 9-13
Pinto, M.H. ......................................................................................................................2-2
Plana, J. ...................................................................................................................4-1, 10-1
Plata-Daz, Y. ..................................................................................................................4-14
Ponce, N.M.A. ..................................................................................................................2-5
Prosperi, C. ..............................................................................................................9-5, 9-13
Pujol, C.A. ..............................................................................................................2-5, 13-4
Pushparaj, B. ....................................................................................................................5-5
Queiroz, M.I. ...................................................................................................................5-7
Queiroz Zepka, L. ............................................................................................................5-7
Quines, L.K.M. ................................................................................................................3-4
Radmann, E.M. .....................................................................................................2-3, 14-2
Ramrez, J.J. ....................................................................................................................14-1
Ramos, L. .......................................................................................................................4-12
Rennella, A. ......................................................................................................................1-1
Reyes Brbara, I. ..............................................................................................................9-17
Rico, A. .............................................................................................................................3-2
Rincn,C. .......................................................................................................................9-13
Ros de Molina, M.C. ...................................................................................9-9, 9-14, 14-6
Ros-Leal, E. ...........................................................................................................9-7, 12-5
Riquelme, C.E. ..............................................................................................................16-5
186 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
Ritorto, L. .........................................................................................................................5-2
Rivard, C.J. .................................................................................................................. ..12-1
Rivera-Madrid, R. ..........................................................................................................12-6
Robledo Ramrez, D. .....................................................................................................12-6
Rocchetta, I. ...............................................................................................9-14, 12-3, 14-6
Rodolfi, L. ..................................................................................................................5, 16-1
Rodriguez, A. ..................................................................................................................9-18
Rodriguez, C. ..................................................................................................................9-13
Rodrguez, M.C. ........................................................................................9-15, 13-4, 14-5
Rodrguez, M.H. ...................................................................................................3-5, 12-2
Romero, T. .....................................................................................................................13-6
Ronsn Pauln, J.. ........................................................................................................16-4
Rosa, S.M. ...............................................................................................................2-6, 4-15
Rost, E.J. ...........................................................................................................................3-2
Rostagno, C.M. ..............................................................................................................15-1
Ruiz, L.B. ...........................................................................................9-6, 9-14, 12-3, 14-6
Sa Ferreira, J.C. ...............................................................................................................14-4
Sabaa Srur, A.U.O. ........................................................................................................14-3
Sabatini, S. .................................................................................................................. ...9-15
Sacchi, A. ..........................................................................................................................5-5
Sala, S.E. ..................................................................................................................9-8, 9-17
Salerno, G. ....................................................................................................4-4, 10-5, 10-7
Salomone, J. ....................................................................................................................13-6
Snchez, C.P. ..................................................................................................................14-1
Snchez, J.F. ....................................................................................................................11-1
Snchez Estudillo, L. .....................................................................................................12-6
Sansone, M.G. ..................................................................................................................5-6
Santos, G.C. ...................................................................................................................14-2
Saporiti, S.P. ......................................................................................................................8-1
Sar, E.A. ..........................................................................................................................4-16
Scolla, G. ..........................................................................................................................5-2
Sedeo Daz, J.E. ..................................................................................................9-10, 9-16
Seeligmann, C. .................................................................................................................4-17
Silva, A.J.R. .....................................................................................................................14-3
Silva, H.J. ..............................................................................................1-2, 5-6, 11-2, 15-2
Silva, L.A. .........................................................................................................................3-3
Silva, P.G. .....................................................................................................5-6, 11-2, 15-2
Silva, R.F. ........................................................................................................................16-5
Silva, R. .............................................................................................................................4-4
Silveira, G.K. ..................................................................................................................14-4
Silveira, S.T. ......................................................................................................................3-4
Sinnott, E. ................................................................................................................... .....5-1
Somigli, S. .................................................................................................................. 5, 16-1
Solari, L.C. ....................................................................................................................V, 4-9
Stege, P.W. ........................................................................................................................1-2
187 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
Stella, A.M. .......................................................................................................................2-1
Steyerthal, N.L. ................................................................................................................2-1
Storni, M.M. ............................................................................................................2-1, 5-1
Stortz, C.A. .......................................................................................................................2-5
Sunesen, I. ................................................................................................................... ..4-16
Sztrum, A. .................................................................................................................... ..9-15
Tell, H.G. .......................................................................................................................9-12
Toja Santillana, J. ............................................................................................................9-17
Tortarolo, M.F. ..................................................................................................................5-1
Tracanna, B.C. ..................................................................................................................4-17
Tredici, M. .............................................................................................................1, 5, 16-1
Trezza, F. ...........................................................................................................................1-1
Urueta, H. .....................................................................................................................12-4
Valdiserri, M. ....................................................................................................................5-2
Vargas,W.A. ....................................................................................................................10-7
Vargas-Mendoza, C.F. ...................................................................................................12-4
Vzquez Martnez, M.G. ......................................................................................3-5, 12-2
Vega, A.E. ........................................................................................................................1-2
Velez, C.G. ....................................................................................................2-6, 4-15, 9-12
Vicente-Garcia, V. ..........................................................................................................13-5
Wenzel, M.T. ..................................................................................................................9-12
Wunderlin, D.A. .............................................................................................................9-18
Yamanaka, S. ..................................................................................................................14-1
Yokoya, N.S. ...................................................................................................................16-3
Zaccaro, M.C. ...........................................................................................................2-1, 5-1
Zaritzky, N. .......................................................................................................................9-1
Zulpa, G. ...........................................................................................................12, 2-1, 5-1
LISTA DE PARTICIPANTES
lvarez, Susana Beatriz sbalvarez@exactas.unlpam.edu.ar
Astorga,Mara Soledad msoledad.astorga@uamag.cl
Ayala, Francisco fayalaj@entelchile.net
Bazn, Raquel del Valle rbazan@efn.uncor.edu
Bennemann, John jbenemann@aol.com
Belay, Ahma abelay@earthrise.com
Bleta, Soledad sbleta@museo.fcnym.unip.edu.ar
Caneo, Mariela Nuria mariela_caneo@yahoo.com.ar
Cano, Mara Gabriela ficocano@yahoo.com.ar
Capano, Ana Vernica anacapano@yahoo.com.ar
Capuano, Federico fcapuano@enitecnologie.eni.it
Casco, Ma. Adela casco@museo.fcnym.unlp.edu.ar
Castro algasdetierradelfuego@hotmail.com
Cifuentes, Ana Silvia asilvia@terra.cl
Collantes Sa, Gloria gloria.collantes@uv.cl
Conde, Manuel Eloy condemanuel@hotmail.com
Conforti, Visitacin conforti@bg.fcen.uba.ar
Costa, Jorge A. jorgealbertovc@aol.com
Chanda Parra, Nancy Paola nancy.chandia@usach.cl
Charpy, Loc lcharpy@com.univ-mrs.fr
Chini Zittelli graziella.chinizittelli@ise.cnr.it
Damiani,Mara Cecilia cdamiani@criba.edu.ar
Da Rodda, Constanza cotidarodda@yahoo.com.ar
Devercelli, Melina yomimel@yahoo.com.ar
De Philippis, Roberto roberto.dephilippis@unifi.it
dos Santos Ferreira,Vernica vsantos@dna.uba.ar
Dri, Susana Denise sddri23@yahoo.com.ar
Echenique, Ricardo rechen@fcnym.unlp.edu.ar
Eyras, Mara Cecilia eyras@cenpat.edu.ar
Favari, Liliana lfavari@mail.cenvestav.mx
Fernndez, Carolina caroftes@yahoo.com.ar
Fernndez Belmonte,Cecilia ferbelma@fices.unsl.edu.ar
Fernndez del Campo,Francisca francisca.delcampo@uam.es
189 1
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I SBN N 987-1130-32-5
190 1
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I SBN N 987-1130-32-5
Ferrari, Susana sferrari@unsi.edu.ar
Ferrario,Martha E. meferra@museo.fcnym.unlp.edu.ar
Flores, Mara Lujn osvmar@unpata.edu.ar
Gauna,Mara cecilia cgauna@criba.edu.ar
Goecke Saavedra, Franz gesefam@yahoo.com
Gmez, Nora nora@ilpla.edu.ar
Gmez Vergara, Patricia I. pgomez@udec.cl
Gonzlez Sierra, Mariela A. mgonzale@udec.cl
Guerrero, Jos Mara guerrero@museo.fcnym.unlp.edu.ar
Hualde, Paula Romina phualde@ilpla.edu.ar
Jimnez, Carlos carlosj@uma.es
Jimnez, Sebastin sebasalejimenez@hotmail.com
Jurez, ngela abjuarez@bg.fcen.uba.ar
Lagos, Nstor nlagos@conductor.med.uchile.cl
Langlade, Marie Jose langlade@com.uni-mrs.fr
Leonardi,Patricia Ins leonardi@uns.edu.ar
Licursi, Magdalena malena@ilpla.edu.ar
Lichtenstein, Gabriel biologa@arnet.com.ar
Lobasso, Karina Fabiana klobaso@yahoo.com.ar
Lpez Parra, Nelly ceriquelme@yahoo.com
Lpez de Kahatchikian,Lucia lucyk@infovia.com.ar
Lpez, Andrea alopez@inidep.edu.ar
Magdaleno, Anah amagda@yahoo.com.ar
Maidana, Nora nim@bg.fcen.uba.ar
Manetti Miranda, Guido g_manetti@hotmail.com
Martnez, Ana Mara amartinez@uns.edu.ar
Matulewicz, Mara Cristina cristina@qo.fcen.uba.ar
Mazzantini, Graciela gradan1140@hotmail.com
Medina, Mabel Azucena mmedina@fceia.unr.edu.ar
Mencacci, Nicols nmencaccifbmc.fcen.uba.ar
Mendoza, Mara laura mlmendoza@arnet.com.ar
Miyachi, Shigetoh shigetoh.miyachi@mbio.jp
Molina Grima, Emilio emolina@ual..es
Murialdo, Raquel Carmen raquelm@arnet.com.ar
Narvez Zapata, Jos Alberto janarvae@mail.uacam.mx
191 1
er
I SBN N 987-1130-32-5
Negri, Rubn negri@inidep.edu.ar
Nudelman, Lelia G. lelia@sion.com
Olgun, Eugenia eugenia@ecologia.edu.mx
Olvera, Roxana rolvera_2000@yahoo.com.mx
Palacios, Mauricio mpalacio@aoniken.fc.umag.cl
Palma, Rosa Martha palma@agro.uba.ar
Parodi, Elisa eparodi@criba.edu.ar
Parra Caldern, Michel michpac@hotmail.com
Pellizzari, Franciane francianep@yahoo.com
Pontiggia, Osvaldo Alejandro ovapontiggia@hotmail.com
Pozzi, Emiliano Csar eccpozzi@yahoo.com.ar
Prosperi, Carlos Hugo cprosperi@yahoo.com.ar
Rabanal Atalaya, Melissa rabanal20@yahoo.com
Ramayn, Mara Jos mewy_e@yahoo.com.ar
Ribeca, Amrico bogadospirulina@hotmail.com
Ros de Molina, Ma. Carmen mcrios@qb.fcen.uba.ar
Riquelme Salamanca, Carlos criquelme@uantof.cl
Rocchetta, Iara rocchetta@bg.fcen.uba.ar
Rodolfi, Liliana liliana.rodolfi@unifi.it
Rodriguez, Andrs Alberto andresti@yahoo.com
Rodrguez, Mara Cecilia labcer@qo.fcen.uba.ar
Rojas Amzquita, Diana dicoco77@yahoo.es
Ronsn Pauln, Jos ngel ronsonj@hotmail.com
Rosa, Sivina Mariana silvinarosa@bg.fcen.uba.ar
Rost, Enrique J. erost@unpata.edu.ar
Ruiz, Diana druiz@matematicas.udea.edu.com
Ruiz, Laura Beatriz lruiz@bg.fcen.uba.ar
Sabatini, Sebastin sabatini@bg.fcen.uba.ar
Sala, Silvia E. sesala@fcnym.unlp.edu.ar
Salerno, Graciela gsalerno@fiba.org.ar
Sar, Eugenia A. easar@museo.fcnym.unlp.edu.ar
Schwecke, Torsten torsten.schwecke@cyanobiotech.com
Sierra, Mara Victoria mvsierra@ilpla.edu.ar
Silva Aciares, Fernando probiot@uantof.cl
Silva, Humberto J. hsilva@unsl.edu.ar
192 1
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I SBN N 987-1130-32-5
Silva, Patricia G. pgsilva@unsl.edu.ar
Stella, Ana Mara stella@qb.fcen.uba.ar
Steyerthal, Noem Luca noemil@qb.fcen.uba.ar
Storni,Mnica Magdalena cyanob@bg.fcen.uba.ar
Sunesen, Ins isunesen@museo.fcnym.unlp.edu.ar
Szeinbaum, Nadia nadia@lareserva.com
Sztrum, Abelardo
Tracanna, Beatriz Concepcin tracanna@csnat.unt.edu.ar
Tredici, Mario mario.tredici@unifi.it
Trespalacios Rangel, Alba A. alba.trespalacios@javeriana.edu.co
Tortarolo,Mara Fernanda mftortar@agro.uba.ar
Vzquez Martnez,M.Guadal. mgvazque@ira.cinvestav.mx
Vlez, Guillermo velez@bg.fcen.uba.ar
Williman, Martn martin@bl.fcen.uba.ar
Zaccaro, Mara Cristina cyanob@bg.fcen.uba.ar
Zulpa, Gloria cyanob@bg.fcen.uba.ar
193 1
er
I SBN N 987-1130-32-5

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