TECHNIQUES D’ANALYSES BIOLOGIQUES

TRAVAUX PRATIQUES
Dosage des protéines totales “ méthode du biuret “

1 . Préparation de la gamme d’étalonnage d’albumine.

A partir d’une solution mère d’albumine bovine de concentration massique r = 10 g/L,

préparer les solutions filles suivantes :

F1 F2 F3 F4
Solution mère (mL) 2,5 5,0 7,5 10,0
Solution de chlorure de 7,5 5,0 2,5 0
sodium (mL)
2. Dilution du sérum.

Préparer 10 mL de sérum dilué au 1/10 dans la solution de chlorure de sodium.

3. Dosage colorimétrique.

Tubes 0 1 2 3 4 E1 E2
Solution F1 (mL) 1
Solution F2 (mL) 1
Solution F3 (mL) 1
Solution F4 (mL) 1
Sérum dilué au 1/10 (mL) 1 1
Solution de NaCl (mL) 1
Réactif de GORNALL (mL) 5 5 5 5 5 5 5
Agiter. Attendre 30 minutes à l’obscurité. Mesurer l’absorbance A à 540 nm.

4. Résultats.

Remplir les tableaux de résultats.

Tracer sur papier millimétré la courbe A = f(r mg.mL-1 des solutions F(1à5)).

Calculer la concentration massique en protéines du sérum (g.L-1).

 FEUILLE DE RESULTATS

Dosage des protéines totales du sérum.

Solutions F1 F2 F3 F4
Concentration massique
en protéines r (mg.L-1)

Tubes 1 2 3 4 E1 E2
A lue à 540 nm

Calcul de la concentration massique en protéines du sérum (g.L -1) : (pourcentage d’erreur admis : 3 %)

Enseignants: Bedrane.A & Lahfa.F